Prueba

bioqumica

Vogues
Poskauer

Rojo de metilo

PROPOSITO

Determinar la
capacidad de algunos
microorganismos para
producir un producto
final neutro, acetoina
a partir de la
fermentacin de
glucosa.

Determinar la
capacidad de un
microorganismo para
producir y mantener
estables los productos
finales acidos a partir
de la fermentacin de
la glucosa y para
vencer la capacidad
de buffer del sistema.

COMO SE
REALIZA
A 1ml de
cultivo se le
aaden 12
gotas (de
0.6ml) de anaftol al 5% en
etanol y 4
gotas (de
o.2ml) de KOH
al 40%, agitar
con la asa en
el tubo y dejar
reposar
durante 5 a 10
min.

Se transfieren
5ml del cultivo
y se le aaden
5 gotas de
solucin
indicadora rojo
de metilo.

Elaboro: Torres Salinas Isis Trinidad. 6D TLC

INTERPRETACION
*Positiva: color rosa
por la presencia de
acetoina, producto de
la fermentacin de
glucosa.
*Negativo: marrn
claro, no cambia el
medio.

*Positiva: color rojo

debido a la presencia
de cidos
provenientes de la
fermentacin de la
glucosa.
*Negativo: color
amarillo debido a que
no hay produccin de
acido

IMAGEN

Kliger

Citrato de
Simmons

Determinar la
capacidad de las
bacterias para atacar
un carbohidrato
(fermentacin de
glucosa y lactosa) de
forma anaerobia y
aerobia y como
consecuencia la
produccin de gas y
acido.

Determinar si la
bacteria utiliza citrato
como nica fuente de
carbono.

Suspender
54.8g del
polvo por litro
de agua
destilada,
mezclar y
calentar con
agitacin
fuerte, hervir 1
o 2 min, hasta
disolucin
total.
Se siembra por
picadura y
estra.

El medio
contiene
citrato sdico,
fosfato de
amonio y azul
de bromotimol
como
indicador.
Se siembra por
picadura y
estria.

Elaboro: Torres Salinas Isis Trinidad. 6D TLC

*Glu + y lactosa -:
reaccin alcalina-acida
*Glu + y lactosa +:
reaccin acida- acida
*Glu - y lactosa - :
reaccin alcalinaalcalina.
*SH + :
ennegrecimiento del
medio
*SH y gas - : no hay
cambio de color
*Gas +: aparicin de
burbujas o ruptura.

*Positivo: color azul de

Prusia, debido a que
las bacterias
metabolizan el citrato
liberan iones amonio
al medio y hace que
se alcalinice.
*Negativo: color
verde, el medio no
cambia.

Urea

LIA (Agar
hierro y lisina)

Determinar la
capacidad de la
bacteria para
desdoblar la urea por
la accin de la enzima
ureasa formando un
anhdrido carbnico
mas amoniaco.

Medir la capacidad
enzimtica de la
bacteria para
descarboxilar un
aminocido a travs
de enzimas
descarboxilasas
especficas o
desaminar.

Suspender
3.87g del
medio
deshidratado
por cada
100mp de
agua
destilada.
Disolver sin
calentar y
esterilizar por
filtracin. Se
siembra por
agitacin.

Tiene como
indicador al
purpura de
bromocresol,
se siembra por
picadura y
estra.

Elaboro: Torres Salinas Isis Trinidad. 6D TLC

*Positivo: color rojo

rosado, debido a que
la bacteria degrada la
urea por la enzima
ureasa y forma
amoniaco y carbonato
amonio.
*Negativo: el medio
queda igual
(anaranjado)

*Lisina + : pico y
fondo de tubo violeta,
debido a la
descarboxilacin de la
lisina.
*Lisina - : pico violeta
y fondo amarillo,
debido a la
desaminacion de la
lisina
*Ennegrecimiento del
medio: produccin de
cido sulfhdrico.

SIM
(Sulfhdrico,
indol y
movilidad)

Caldo Rojo
fenol y
sacarosa

Determinar si las
bacterias tienen la
capacidad de
moverse, si desdoblan
la molcula de
triptfano a travs de
la enzima triptofanasa
produciendo indol y
as como la produccin
de acido sulfhdrico.

Determinar la
capacidad de in
microorganismo de
fermentar un
carbohidrato
incorporado a un
medio, produciendo
un acido y/o gas en
una campana de
Durham.

Contiene sales
de Fe y sales
de S y
triptfano.
Contiene
menor
concentracin
de agar y se
siembra por
picadura.

Tiene como
indicador rojo
de fenol y
contiene el
carbohidrato
(la sacarosa).
Se siembra por
agitacin

Elaboro: Torres Salinas Isis Trinidad. 6D TLC

*Movilidad + : una
difusin al lado de la
picadura
*Movilidad - : solo se
observa la picadura en
el medio.
*Indol + : anillo rojo
en la superficie del
medio.
*Indol - : anillo
amarillo en la
superficie del medio.
*SH + : fondo o todo
el medio color negro
*SH - : fondo del tubo
sin cambio de color.

*Positivo: color
amarillo debido a la
produccin de acidos
a partir de la
fermentacin usando
la sacarosa.
*Negativo: el medio
permanece igual de
color rojo.

Determinar la
capacidad de un
Caldo rojo
microorganismo de
fenol y manitol fermentar un
carbohidrato
incorporado a un
medio de cultivo,
produciendo acido y/o
gas en una campana
de Durham.

MIO

Tiene como
indicador al
rojo de fenol y
contiene el
carbohidrato
(manitol).
Se siembra por
agitacin.

Suspender 31g
Permite identificar que del polvo en
bacterias de acuerdo a un litro de
agua
su motilidad, a la
destilada.
reaccin de indol y a
la descarboxilacin de Se siembra por
picadura.
la orinitina

Bibliografia:
Elaboro: Torres Salinas Isis Trinidad. 6D TLC

*Positivo: color
amarillo, debido a la
produccin de acidos
y fermentacin del
carbodihrato), puede
haber produccin de
gas.
*Negativo: color rojo,
aumento de pH
(produccin de
sustancias alcalinas
por utilizacin de
peptonas.

*Motilidad + : presencia de turbidez o crecimiento mas all de la

lnea de la siembra.
*Motilidad - : crecimiento solo en la lnea
de siembra
*Ornitina descarboxilasa + : color purpura y color amarillo.
*Indol + : color rojo al
agregar el reactivo
revelador y
permanece el color
incoloro- amarillento.

Depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/03b/pruebas_bioquimcas_1758.pdf
www.josecortes.com/microbiologia/pruebasbioquilmrvp.html
Biology.upim.edu/files/pruebas_bioquimcas.pdf

Elaboro: Torres Salinas Isis Trinidad. 6D TLC