CALIBRACIN DE LA RTICULA OCULAR

Rodrguez Brayan
Tercero Alimentos U
Facultad de Ciencia e Ingeniera en Alimentos (FCIAL)
Universidad Tcnica de Ambato (UTA)

RESUMEN
La calibracin de instrumentos de medida es de suma importancia llegando
a obtener un ndice de error mnimo, el microscopio es un instrumento que
adems de proporcionar una observacin de microorganismos ayuda en la
medicin de los mismos a travs de una calibracin. Esta consiste en la
alineacin de dos medidas en forma de escala que presentan el ocular
micromtrico y la retcula dependiendo de las divisiones en este caso 100
toma cada lnea un valor de 0,01 mm. En la presente prctica se calibro
para el lente de 10X cada lnea del ocular toma un valor de 10m, para el
lente de 40X el valor de cada lnea es de 2,5m y para el lente de 100X el
valor es de 1m. Para conseguir mediciones correctas, los resultados de las
mediciones tienen que ser confiables. Para esto los datos obtenidos deben
comparar con valores mensurados. Los problemas surgen cuando se hace la
estimacin de la confiabilidad de los resultados obtenidos. Por esta razn,
los resultados de la medicin o calibracin deben estar en un rango de
datos bibliogrficos, obtenida de acuerdo a un mtodo ya realizado.

INTRODUCCIN
Una vez familiarizado con la estructura y funcionamiento del microscopio
compuesto, hay que considerar aquellos accesorios que conducen a una
excelente prctica microscpica y que facilitan el trabajo, hacindolo ms
rpido y efectivo o ampliando las capacidades del instrumento. Dentro de
las posibilidades se puede medir y cuantificar. Consiste en la micrometra
(morfometra) aproximada de los especmenes observados al microscopio
(Douglas, 2001).
La calibracin est definida como un conjunto de operaciones que
proporcionan la relacin entre las indicaciones de un instrumento de
medicin y los correspondientes valores del mensurando. Si recordamos que
la medicin es definida como el conjunto de operaciones que tienen el
objetivo de determinar un valor de una cantidad, se puede concluir que la
calibracin es tu tipo especial de medicin. Para cuantificar longitudes,

cantidades (nmero de clulas, ncleos, partculas), se emplean oculares de

medicin con retculos (Cabrera, 2008).

MATERIALES Y MTODO
En la calibracin se coloca el ocular micromtrico en algn ocular normal,
luego en la platina se coloca la retcula y procedemos a observar con el
lente de menor aumento hasta observar la escala, estas dos escalas deben
alinearse en cero para esto manipular el movimiento de la platina, se
determina el valor de cada divisin tomando en cuenta la escala de la
retcula que cada divisin equivale a 0,01mm, esta medicin debe ser en
unidades de m ya que en estas unidades se miden a los microorganismos.
Finalmente realizar los mismos pasos para calibrar todos los lentes objetivos
del microscopio.

RESULTADOS
TABLA #1: OBSERVACION DE MEDIDA, FORMA E IDENTIFICACION DE
MICROORGANISMO POR SU TAMAO.
MEDID
A
1m
5m
2,5m

LENTE

FORMA

100X
40X
40X

Coco
Irregular
Espora

MICROORGANIS
MO
Bacteria
Levadura
Hongo

FUENTE: Lab. Microbiologa de Alimentos I

ELABORADO POR: Rodrguez, B. FCIAL. UTA. 2014

CLCULOS
Clculo calibracin del lente de 10X

10 0,1 mm

1x
x=10 m
Clculo calibracin del lente de 40X

20 0,05 mm
1x

x=2,5 m
Clculo calibracin del lente de 100X

10 0,01mm
1x

x=1 m

DISCUSIN
Segn
En la calibracin se obtuvo resultados confiables conforme al tamao del
microorganismo

observado

este

fue

equivalente

datos

conocidos

bibliogrficamente por lo que se conoca que microorganismo identificar por

su tamao. Se debe tener especial atencin en el redondeo de los
resultados de calibracin, para facilitar el uso sensato del instrumento de
medicin calibrado. En algunos casos, esto implica que los resultados deben
ser redondeados a lo ms, al dgito que corresponda a la resolucin del
instrumento (Salas, 2008).
En la calibracin del ocular micromtrico para cada objetivo el valor es
distinto por motivo de su aumento, en el lente de 10X se obtuvo una medida
de 10m para cada divisin de la escala para el lente de 40X fue 2,5m y
finalmente para el lente de 100X fue la medida de 1m, con estas medidas
permite identificar el tipo de microorganismo que se observa por su medida,
en la observacin realizada se pudo apreciar tres tipos de microorganismos
en placas diferentes, como primer caso fueron bacterias ya que por su
forma de coco tambin fue identificada por su tamao de 1m este dato
est en el rango de medida de una bacteria como dato adicional se utiliz el
lente de 100X este permite observaciones de microorganismos muy
pequeos como del grupo de bacterias, en la segunda placa observada se
calcul un valor de 5m en el lente de 40X identificando al microorganismo
como una levadura por su gran tamao y el poco aumento requerido para
observarla tambin presentaron una forma irregular con unas yemas a su

alrededor teniendo en cuenta que este microorganismo se reproduce por

gemacin o biparticin por lo que se le observa con un tipo de erupciones
en su membrana, en la tercera y ltima placa se obtuvo la medida de 2,5m
en el lente de 40X identificando esporas adems se pudo observar que este
microorganismo presentaba hifas teniendo estos datos se puede decir que
lo observado definitivamente fueron hongos unicelulares.

CUESTIONARIO
Al alinear en cero una retcula de 0,01 mm y un objetivo
micromtrico de 200 divisiones la primera coincidencia ocurre en la
divisin 20 de la retcula con la 60 del micromtrico. Calcular el
tamao en m de cada divisin para este objetivo.

0,01 mm1

x 20
x=0,2 mm
Clculo en m

0,2 mm 60
x1

x=3,3 m
Cul es el tamao promedio de bacterias? Cite ejemplos de una
bacteria considerablemente ms grande y una ms pequea.
El tamao oscila entre 0,2 m de algunos cocos y 5-8 m de largo por 1,5
m de ancho de los bacilos. Una bacteria grande es Beggiatoa gigantea, con
un tamao similar al de muchas clulas eucarosticas (40 mm)
Una bacteria relativamente pequea es Haemophilus influenzae, que mide
0.25 x 1.2 mm
Cmo se puede determinar el tamao de un microorganismo sin
realizar un frotis al calor, debido a que este puede cambiar su
forma?
Con una preparacin en fresco esta es la ms sencilla, pero no permite
observaciones de largo tiempo porque el agua de la muestra se va
evaporando, se utiliza para la observacin in vivo de microorganismos, se
deposita una gota de muestra y se cubre con un cubreobjetos.

Las tcnicas de tincin necesariamente deben pasar por un frotis al calor

para fijar el colorante en la muestra.
Cmo se puede identificar una bacteria de una levadura al
observarlas al microscopio?
Por su forma y tamao estos miden de 1-10 m ancho por 2-3 m de
longitud son redondos o elipsoides que se reproducen por gemacin o fisin
binaria. La gemacin es la protusin externa del protoplasma materno
formando un saliente (yema o gema), que va creciendo poco a poco,
tambin una levadura puede tener capacidad de producir hifas como ocurre
con Candida albicans

CONCLUSIONES
El mtodo de calibracin fue confiable ya que se obtuvo datos claros con un
mnimo de error y se pudo identificar los tipos de microorganismos
presentes en las placas observadas. En cuanto al anlisis microbiano se
lograron identificar bacterias en forma de coco, levaduras en presencia de
divisin por gemacin y hongos en forma de esporas presentando hifas.

BIBLIOGRAFA
Cabrera, J. Salas, J. Guardado, J. & Jurez, M. Simposio de Metrologa. 2008,
Santiago de Quertaro, Mxico. Recuperado de:
http://www.laboratoriometrologico.com/wenv/file_data.php?id=626
Molina,

J.

(2012).

Generalidades

de

Bacterias.

Departamento

de

Microbiologa y Parasitologa. Recursos en Bacteriologa. Recuperado de:

http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/bacteriologia/generalidad
es.html
Lpez, T. (2006). Microbiologa General. Universidad Nacional del Norte.
Recuperado de: http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp6.pdf
Daz, P. (2006). Microbiologa General. Universidad de Wisconsin. USA.
Recuperado

de:

https://microral.wikispaces.com/5.+Micolog

%C3%ADa+general.
Schaechter M, Medoff G, Eisenstein B, & Guerra H. (1993). Microbiologa.
Mecanismos de las enfermedades infecciosas. Editorial Panamericana.

Segunda

Edicin.

Buenos

Aires.

Recuperado

de:

http://www.higiene.edu.uy/cefa/2008/MorfologiayEstructuraBacteriana.pdf
Mahon, C. & Manuselis G. (2000). Diagnstico Microbiano. Segunda Edicin.
Editorial Saunders Company. USA
Prescott, L.; Harley, J. & Klein, D. 1999. Microbiologa. Cuarta edicin.
McGraw-Hill Interamericana. Recuperado de:
https://www.ainia.es/html/sites/09/pdf/caracterizacion_patogenos.pdf