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MESOPOROSA
Juliana Jorge
Juliana Jorge
JORGE, J.
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Ludwig Mies van der Rohe
Dissertao de Mestrado
JORGE, J.
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AGRADECIMENTOS
Pode parecer praxe ou, at mesmo, uma frase feita, como costumam me dizer,
mas impossvel colocar em to poucas linhas os nomes de todas as pessoas que
participaram, mesmo que indiretamente, deste trabalho. Mas, tentarei da melhor forma
possvel:
ao Prof. Dr. Marco Antonio Utrera Martines, acima de tudo pela sua confiana
em mim e pela inestimvel contribuio ao meu crescimento pessoal e profissional, ao
longo de todos esses anos de orientao;
a todos os colegas do LP6, em especial aos membros do grupo de pesquisa em
que fao parte, Qumica de Superfcie e Molculas Bioativas;
ao Prof. Dr. Marc Verelst, pelo convite de estgio, por todo o suporte e
acompanhamento que me prestou durante meu estgio no CEMES e durante minha
estadia em Toulouse;
a todas as pessoas do laboratrio NanoMatriaux pela assistncia e apoio,
especialmente Sverine Lechevallier, Semiyou Osseni, Prof. Dr. Robert Mauricot e
Dra. Jeannette Dexpert-Ghys;
David Neumayer, Nicolas Ratel-Ramond e Laure No, pelas medidas de SEM,
BET, SAXS e TEM, respectivamente;
a todas as pessoas que fazem parte do CEMES, em Toulouse, por fazer deste
lugar um ambiente agradvel para a convivncia e propcio ao trabalho e estudos;
ao Prof. Dr. Gustavo Rocha de Castro, pela sempre disposta colaborao;
ao LNLS e LME-LNLS, em Campinas, pela caracterizao das amostras por
SAXS e SEM-FEG;
aos secretrios da Ps-Graduao em Qumica, Sr. Celestino e Sr. Ademar;
aos novos amigos que vieram com esse Mestrado, pela amizade e convivncia
prazerosa;
Mara M. Esselin, pela presena especial, por ser o brao direito e, s vezes,
tambm o esquerdo (poderia dizer at mais);
aos velhos amigos da poca de Graduao, ainda que estejamos longe somos
aquela mesma famlia que conviveu alegremente por 5 maravilhosos anos (saudades de
todos);
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RESUMO
Biomarcadores, ou marcadores biolgicos, so molculas que podem ser
medidas experimentalmente e indicam a ocorrncia de um determinado processo em um
organismo. So instrumentos que possibilitam identificar a substncia txica ou uma
condio adversa antes que sejam evidenciados danos sade. Materiais mesoporosos,
so denominados assim devido ao seu tamanho de poros, que se encontra entre 2 e 50
nm. A slica mesoporosa apresenta caractersticas que a torna uma boa matriz
hospedeira de molculas e biomolculas, e que fazem dela um material promissor para
inmeras aplicaes seja em catlise, adsoro de metais pesados para descontaminao
ambiental, liberao controlada de medicamentos, materiais para regenerao ssea e de
tecidos, e no desenvolvimento de biomarcadores, entre outras inmeras aplicaes. Para
a construo de um biomarcador baseado em slica mesoporosa, preciso ligar um
composto luminescente dentro dos poros desse material, assim, no mbito dos
compostos luminescentes existentes, os mais promissores so os complexos de ons
lantandeos, que apresentam linhas pontuais de emisso e absoro da luminescncia,
entre outras propriedades. Os objetivos desse trabalho contribuir para o
desenvolvimento de novas sondas luminescentes para aplicaes biolgicas, por meio
de sntese de matrizes slidas de partculas de slica mesoporosa e o aperfeioamento de
suas propriedades luminescentes para que sejam aplicadas em biomarcadores. Para as
micropartculas, so notados deslocamentos nas bandas de excitao e de emisso da
luminescncia quando se modifica a superfcie destas; micropartculas luminescentes
podem ser sintetizadas sem perda da propriedade ptica do on, importante aspecto para
aplicao como biomarcadores. As nanopartculas aparentam pouca aglomerao; a
superfcie porosa diminui com a dopagem com Eu3+; as nanopartculas obtidas
apresentam bom potencial para aplicao como biomarcadores.
Palavras-chave:
slica
mesoporosa;
fotoluminescncia; lantandeos.
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micropartculas;
nanopartculas;
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ABSTRACT
Biomarkers are molecules that may be measure experimentally and indicate the
event of process determined in organism. Are instruments to identify the toxic substance
or adverse condition before healths damages. Mesopores, this technical term is applied
to porous with diameter size between micro and macro scale, range from 2 to 50 nm.
Mesoporous silica is an excellent matrix host for molecules and biomolecules, that
make this material very promising for several applications in industry scale, chemical
engineering, environmental, medicine and biology; for example, catalysis; adsorption of
heavy metals (environmental decontamination); drug delivery; materials for bone
regeneration and tissue; self-diagnostic kits; and developing of biomarkers. In order to
build a biomarker using mesoporous silica, a luminescent complex attached inside its
porous is needed, in that way as interesting alternative for the biomarkers in use today;
the lanthanide ions complex could be hosted. They are interesting luminescent centers
due to their photostability and to several peculiar emission characteristics, such as
narrow lines; large Stokes shifts; long decay times. The goals of this work is to
contribute for the development of news luminescent probes for biological applications,
by means of synthesis of solid matrix of mesoporous silica and of improvement the
luminescent properties for utilization as biomarkers. For microparticles, are noted shifts
on excitation and emission bands when the surface are modified; luminescent
microparticles may be synthesized without lost of optical properties of the ion, a
important aspect for utilization as biomarkers. The nanoparticles shows few
agglomeration; the porous surface decrease with Eu3+ doped; and also display good
potential for utilization as biomarkers.
Keywords: mesoporous silica; microparticles; nanoparticles; photoluminescence;
lanthanide.
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NDICE
Prlogo ..............................................................................................................................
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Introduo .....................................
01
Estado da arte...............................................................................................................
02
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Os Biomarcadores .......................................................................................................
15
17
Terras-raras ..................................................................................................................
21
A Funcionalizao .......................................................................................................
25
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29
Objetivos ...........................................................................................................................
34
Captulo 1.......................................
35
O Trbio ....................................................................................................................
36
Metodologia .................................................................................................................
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Concluses ...................................................................................................................
53
Captulo 2 ..........................................................................................................................
54
O Eurpio ....................................................................................................................
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Metodologia .................................................................................................................
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Concluses .................................................................................................................
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LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Interaes entre as espcies inorgnicas e os grupos cabeas do
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3+
funcionalizada com APTES, e funcionalizada com GPTMS, impregnadas com Tb cido L-glutmico..............................................................................................................
Figura 21. Espectros de emisso, exc = 377 nm das slicas lavada, calcinada,
49
funcionalizada com APTES, e funcionalizada com GPTMS, impregnadas com Tb 3+cido L-glutmico..............................................................................................................
Figura 22. Curvas de decaimento de transio para a luminescncia do on Tb3+
51
(transio 5D4 7F5) nas matrizes de slica calcinada e lavada. Os espectros foram
adquiridos pela emisso a 543 nm e excitao a 377 nm..................................................
Figura 23. Curvas de decaimento de transio para a luminescncia do on Tb3+
(transio
D4
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Figura 25. Esquema do modelo de sistema reacional para sntese de slica mesoporosa
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Figura 42. Espectros de SAXS das amostras JJ3, JJ12 e JJ122. ................................................
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da amostra JJ3....................................................................................................................
Figura 50. Isoterma de adsoro/dessoro (BET) e distribuio do dimetro de poros
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da amostra JJ12..................................................................................................................
Figura 51. Isoterma de adsoro/dessoro (BET) e distribuio do dimetro de poros
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da amostra JJ5....................................................................................................................
Figura 52. Isoterma de adsoro/dessoro (BET) e distribuio do dimetro de poros
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da amostra JJ13..................................................................................................................
Figura 53. Espectros de Excitao, em = 612 nm, das amostras JJ12 e JJ122............................
83
Figura 54. Espectros de Emisso das amostras JJ12 (exc = 394 nm) e JJ122 (exc = 328,5 nm)...
84
Figura 55. Espectros de Excitao, em = 612 nm, das amostras JJ13 e JJ134............................
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Figura 56. Espectros de Emisso das amostras JJ13 (exc = 395 nm) e JJ143 (exc = 331 nm)....
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LISTA DE TABELAS
Tabela 1. Viso geral dos materiais baseados em slica e suas propriedades relevantes.
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Adaptado de [26]..................................................................................................................
Tabela 2. Valores dos tamanhos de poros das medidas de porosidade, picos de
48
50
medido...............................................................................................................................
Tabela 4. Nomenclatura e descrio das amostras...........................................................
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Tabela 6. Resumo dos principais resultados aps caracterizao por SEM, SAXS e
82
medidas de porosidade.......................................................................................................
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PRLOGO
Esta Dissertao est organizada da seguinte maneira, na Introduo, so
apresentados vrios tpicos onde discutido o estado da arte para os objetivos deste
trabalho, um apanhado geral sobre a matriz utilizada, a slica mesoporosa, uma
discusso sobre as questes de biocompatibilidade e toxicidade da slica, uma definio
bem abrangente do que so os biomarcadores, tambm contm uma apresentao sobre
os diferentes tipos de marcadores luminescentes utilizados atualmente, sobre os ons
terras-raras, a importncia e, o que a funcionalizao da slica, contm tambm uma
discusso sobre a importncia do tamanho da partcula em aplicaes biolgicas, e
finalmente, so apresentadas as tcnicas utilizadas para a caracterizao dos materiais
obtidos, finalizando a Introduo. Todos os tpicos apresentados e discutidos nesta
Introduo esto baseados em dados da literatura obtidos aps exaustiva reviso
bibliogrfica.
A metodologia est dividida em duas partes. A primeira parte se refere
obteno de micropartculas de slica mesoporosa; este trabalho foi realizado no
primeiro semestre deste Mestrado. A caracterizao destes materiais foi realizada pelas
tcnicas de microscopia eletrnica de varredura (SEM), espalhamento de raios X a
baixo ngulo (SAXS), medidas de porosidade e espectroscopia de excitao e de
emisso da luminescncia.
A segunda parte deste trabalho foi realizada durante perodo de estgio em
Toulouse, no Centre dElaboration de Matriaux et dEtudes Structurales (CEMES).
Duas metodologias foram escolhidas aps pr-caracterizao por apresentarem o
tamanho e a morfologia de partculas mais prximas do esperado, na ordem de
nanmetros. A caracterizao destes materiais foi realizada pelas tcnicas de SEM,
SAXS, medidas de porosidade, microscopia eletrnica de transmisso (TEM) e
espectroscopia de excitao e de emisso de luminescncia.
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INTRODUO
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Estado da arte
Para entender melhor a estrutura e funo dos sistemas biolgicos, os bilogos e
bioqumicos necessitam de mtodos que perturbem minimamente os sistemas vivos[1], o
que constitui um grande desafio a essa rea de pesquisa. O desenvolvimento de sondas
pticas emissivas e no invasivas essencial para o melhoramento da observao dos
processos de sinalizao e reconhecimento celular[2]. Aps a excitao da sonda
luminescente, os ftons emitidos e detectados pelas tcnicas de espectroscopia ou
microscopia fornecem informaes do ambiente em que esto, em funo do ambiente
qumico, da energia, do tempo de vida e da polarizao. Tais sondas pticas podem ser
baseadas em fluorforos orgnicos, pontos qunticos, protenas recombinantes ou
complexos de metais emissivos[1].
A maioria das sondas pticas baseada em fluorforos e tm sido desenvolvidas
para monitorar mudanas locais no pH, ou no pM (M = Ca, Mg ou Zn, em sua maior
parte), ou para analisar o ambiente fsico fornecendo informaes sobre fluidez,
polaridade ou geometria da clula. A maioria das sondas pticas pode ser considerada
como um ponto celular que localiza organelas particulares ou locais sub-celulares. A
luminescncia destes pontos fornece informaes estruturais e sobre a disposio da
clula. Estes parmetros so independentes da concentrao da sonda e evitam
problemas associados com medidas de intensidade de emisso. Isto inclui perturbaes
induzidas por mudanas na concentrao local da sonda, no pH, temperatura,
espalhamento de luz ou dimenso do fotobranqueamento ou supresso local[2].
Reconhecer organelas-alvo especficas ainda o principal desafio na biologia e
na medicina. Muitas mudanas caractersticas na composio celular dentro de uma
dada organela ainda no foram descobertas, porque no h sondas capazes de registrar
estas mudanas seletivamente[2].
Complexos metlicos luminescentes tm surgido como sondas alternativas aos
corantes orgnicos e protenas recombinantes fluorescentes, e entre eles, os complexos
de lantandeos luminescentes (Ln3+), para o qual um grande nmero e uma ampla escala
de sistemas sensveis tm sido definidos[2], dadas as suas caractersticas nicas que so
vantajosas em seu uso como sondas luminescentes tais como, linhas pontuais de
emisso e absoro, alto rendimento quntico, tempo de vida da fluorescncia e
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fotoestabilidade longos.
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A ordem no uma regra para todos estes tipos de materiais, que podem ter
sistemas randmicos de organizao de poros[12]. No campo dos materiais mesoporosos,
em particular, o equvoco ocorre s vezes por se confundir materiais mesoporosos com
materiais ordenados[12]. Em muitos casos um material pode possuir mais de um tipo de
porosidade. Que pode ser:
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Tamanho de poros;
Isto faz dos materiais mesoporosos ordenados de slica um campo de pesquisa muito
ativo[12].
Sua sntese est baseada no uso de micelas de surfactante que agem como
moldes para a policondensao da slica. De acordo com a natureza do surfactante e do
pH do meio de sntese, trs principais tipos de interaes esto envolvidas. Em meio
alcalino, Figura 1 (a), onde as espcies de silcio possuem cargas negativas (I -), as
interaes com surfactante catinico S+ so eletrostticas (S+I-). Em meio cido, a
interao entre a slica e o surfactante mediada por nions X -, descrita por S+X-I+
(Figura 1 (b)). H ainda, as interaes nas quais um mediador adicionado reao
(M+) para assegurar as interaes entre as espcies com cargas igualmente negativas (S M+I-), Figura 1 (c). De volta, em meio cido, a interao entre a slica e o surfactante
pode ser descrita por S-I+ (Figura 1 (d)), onde o surfactante S ou um surfactante
catinico (S+) ou um surfactante no-inico baseado em xido de polietileno S0 (H3O+)
com tomos de oxignio etoxi ligados a H3O+. Surfactantes no-inicos (S0), usados em
meio neutro, permitem ligaes de hidrognio e interaes de van der Walls (S 0I0),
Figura 1 (e) e (f). As diferentes estruturas que so formadas dependem da geometria
molecular do surfactante, modulada pela concentrao, temperatura e pH, e da presena
de co-surfactantes e outros produtos qumicos como sais ou molculas orgnicas[14,17].
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a partir
de TEOS
(tetraetoxissilano),
CTAB
(brometo
de
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mesofase obtida. Este processo envolve basicamente trs etapas (Figura 2a): A primeira
etapa, governada pelas interaes eletrostticas, a formao de pares de ons entre as
espcies inorgnicas policarregadas e polidentadas de um lado e surfactante de outro
lado. Os pares de ons organizam-se em uma mesofase, sendo que a maioria possui uma
estrutura cristal-lquido, por exemplo, hexagonal, lamelar, ou cbica. A estrutura da
mesofase depende da composio da mistura, do pH e da temperatura. A ltima etapa
a condensao das espcies inorgnicas que resulta em uma estrutura rgida. Na
presena de surfactantes neutros, as ligaes de hidrognio, no lugar das interaes
eletrostticas, tornam-se de importncia crucial para a formao da mesofase
orgnica/inorgnica[18].
Os tamanhos de poros (ou distncias intercamadas) dos materiais mesoporosos
so facilmente ajustveis no intervalo de aproximadamente 2 a 10 nm. O tamanho de
poros pode ser controlado por trs diferentes caminhos: (i) pela mudana no
comprimento da cadeia alquila da molcula de surfactante, (ii) pela adio de molculas
espaadoras como o 1,3,5-trimetilbenzeno que se dissolve numa regio hidrofbica das
micelas, deste modo, aumentam o seu tamanho, ou (iii) pelo envelhecimento do material
preparado a baixa temperatura (por exemplo 70oC) em seu sobrenadante a temperatura
maior (por exemplo 150oC) por diferentes perodos de tempo. Alm disso, o tamanho de
poros de silicatos pode ser ajustado pela silanizao ps-sntese. A calcinao desta fase
estvel (silicato + surfactante) proporciona materiais com rea de superfcie
extremamente alta, frequentemente excedendo 1000 m2.g-1. Alm disso, estes materiais
podem ser facilmente modificados pela incorporao de diferentes ctions, tornando-os
com propriedades cida ou redox[19].
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Figura 2. Formao de materiais mesoporosos por agentes direcionadores de estruturas: (a) mecanismo de molde por cristal-lquido
verdadeiro; (b) mecanismo de molde por cristal-lquido cooperativo. Modificada de [17].
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Figura 3. Estruturas dos materiais mesoporosos: a) MCM-41 (hexagonal 2D, grupo espacial p6mm), b)
MCM-48 (cbico, grupo espacial la3d) e c) MCM-50 (lamelar, grupo espacial p2)[17].
mesoporosa no
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Biocompatibilidade e atoxicidade
A slica, ou dixido de silcio (SiO2) est, sob muitas formas, abundantemente
presente em nosso ambiente natural. Os efeitos adversos sade, incluindo cncer de
pulmo, de ocorrncia natural devido exposio a slicas cristalinas, como o quartzo e
a cristobalita, foram exaustivamente documentadas em ambientes ocupacionais. A
maioria das slicas sintticas usadas em uma grande variedade de aplicaes amorfa.
Para a slica em geral, a propriedade mais significativamente relacionada ao potencial
toxicolgico a cristalinidade. Para as microsslicas cristalinas, o estresse oxidativo, e
ligado a este, os danos oxidativos ao DNA e s membranas, so provavelmente os
mecanismos mais importantes envolvidos nas atividades inflamatria, fibrognica e/ou
carcinognica, por exemplo. Estes mecanismos no se aplicam slica amorfa, que tem
sido pouco estudada. Alm do mais, os efeitos adversos sade da slica amorfa natural
so, geralmente, atribudos a certo grau de contaminao com a slica cristalina. A slica
amorfa sinttica no est envolvida nos processos de fibrose progressiva do pulmo,
entretanto, altas doses de slica amorfa podem resultar em respostas inflamatrias
pulmonares agudas[26].
A maioria das pesquisas relacionadas toxicidade concentra-se em sistemas de
cultura de clulas, ou seja, in vitro[27], e relacionadas via respiratria, no entanto, os
dados destes estudos poderiam ser enganadores e requerem verificao de experimentos
com animais, bem como avaliar a toxicidade em orgos como corao, rins, pncreas e
crebro, por exemplo. Sistemas in vivo so extremamente complicados e as interaes
das nanoestruturas com componentes biolgicos, tais como protenas e clulas,
poderiam levar biodistribuio nica, depurao, resposta imune e metabolismo [27].
O interesse no uso de nanopartculas de slica crescente no mundo todo,
especialmente para aplicaes biomdicas e biotecnolgicas, tais como as terapias
contra o cncer, transfeco de DNA, liberao controlada de frmacos e imobilizao
de enzimas. Em geral, as nanopartculas de slica so sintticas, as quais possuem
algumas vantagens sobre as partculas de slica naturais. As sintticas no contm, ou
contm poucas impurezas em relao s naturais, e as propriedades fsico-qumicas so
conhecidas e podem ser controladas durante a sntese, no caso das sintticas [26].
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Os Biomarcadores
Para se quantificar uma exposio qumica a agentes nocivos sade, seus
efeitos e a suscetibilidade desses efeitos em um indivduo exposto, bem como obter e
confirmar um diagnstico clnico, a efetividade de seu tratamento, avaliar prognsticos,
alm de buscar informaes e se estudar os processos celulares com mais preciso,
necessrio a utilizao de biomarcadores.
A deteco precoce a uma exposio perigosa, ou de uma doena, pode diminuir
significativamente a ocorrncia de efeitos adversos na sade[29].
Um
biomarcador
compreende
toda
substncia
ou
seu
produto
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Nanopartculas metlicas (Pontos Qunticos): nanocristais metlicos ou semicondutores constitudos por uma associao de elementos das Famlias II-B, III-A, IVA, V-A e VI-A da Tabela Peridica. Em razo de seu pequeno tamanho, geralmente
entre 1 e 10 nm, os pontos qunticos apresentam propriedades particulares e suscitam
grande interesse, mesmo aps 40 anos de sua descoberta. De fato, sob excitao
luminosa em luz ultravioleta, estes nanocristais emitem ftons no espectro visvel, com
um comprimento de onda que vai do vermelho at o azul medida que seu tamanho
diminui (Figura 4). Nos semi-condutores, a estrutura eletrnica representada por
bandas de energia. Os pontos qunticos apresentam um bom rendimento da
luminescncia e uma banda larga de absoro, o que rende sua fcil excitao. Os
pontos qunticos mais utilizados so base de cdmio (CdSe, CdS, CdTe), ou de zinco
(ZnSe, ZnS) que englobam todo o domnio visvel do espectro ptico. Mais
recentemente, um grande interesse tem se voltado aos pontos qunticos com
propriedades de emisso no infravermelho prximo, como CdTe/CdSe, InAs ou PbS,
que j so utilizados para bioimagem em animais. Mas os pontos qunticos apresentam
algumas inconvenincias como toxicidade, geralmente so muito caros, e muitas vezes
luminescncia descontnua.
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Figura 5. Corantes orgnicos fluorescentes, cascade blue, SAB (azul brilhante), fluorescena,
Rodamina WT, e Cy3 amidita (da esquerda para a direita). Retirada de [32].
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Ln3+, como o caso do Eu3+ e Tb3+, pelo decaimento radiativo deste on que o
responsvel pela emisso [31].
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Terras-raras
As terras-raras so, de acordo com a classificao da IUPAC, um grupo
relativamente abundante de 17 elementos qumicos, dos quais 15 esto localizados no
grupo dos lantandeos (geralmente referidos como Ln3+, elementos com nmero
atmico entre Z = 57 e Z = 71, que vai do lantnio ao lutcio, na Tabela Peridica), e
que incluem o escndio (Z = 21) e o trio (Z = 39), elementos que ocorrem nos mesmos
minrios e apresentam propriedades fsico-qumicas semelhantes[34].
As propriedades pticas intrnsecas dos ons lantandeos trivalentes (Ln3+) so
fascinantes e tm origem em caractersticas especiais das configuraes eletrnicas [Xe]
4fn (n = 0 14). Estas configuraes geram uma rica variedade de nveis eletrnicos,
nmero que dado por [14!/n!(14 n)!], traduzindo-se em 3003 nveis para os ons
Eu3+ e Tb3+, por exemplo. Eles so caracterizados por trs nmeros qunticos, S, L e J,
que se encaixam no esquema de acoplamento spin-rbita de Russel-Saunders. As
energias destes nveis so bem definidas devido blindagem dos orbitais 4f pelo
preenchimento dos subnveis 5s25p6, e eles so sensveis aos ambientes qumicos nos
quais so inseridos. Como consequncia, as transies 4f-4f da camada interior que se
estende em ambas as escalas, do visvel e do infravermelho, so definidas e facilmente
reconhecveis (Figura 7). Alm do mais, como estas transies so formalmente e
igualmente proibidas, os tempos de vida dos estados excitados so longos, os quais
permitem o uso da deteco resolvida no tempo, uma vantagem definitiva para
bioensaios e microscopia de luminescncia[35].
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Figura 7. Espectros de luminescncia de alguns lantandeos, sob excitao no UV-visvel. Figura retirada
de [35].
A nica desvantagem das transies f-f so suas foras de oscilao fracas que
podem, no entanto, se tornar uma vantagem. Weissman demonstrou, em 1942, que a
excitao dos complexos lantandeos em estados ligantes resulta na luminescncia do
metal central. Parte da energia absorvida pelos receptores transferida para os estados
excitados dos Ln3+, e as bandas de emisso definidas originadas do on metlico so
detectadas aps uma rpida converso interna ao nvel emitente. O fenmeno expresso
por uma sensibilizao da luminescncia do metal central (tambm referida como
efeito antena) e bem complexo. Vrias vias de migrao de energia podem ser
envolvidas, por exemplo, troca ou super-troca, mecanismos de dipolo-dipolo, ou dipolomultipolo, que implicam a participao de vrios nveis ligantes, estados singletos,
tripletos, e/ou transferncia de carga intra-ligante. Uma via de migrao de energia
comumente observada, no entanto, passa atravs do estado tripleto de longa vida do
ligante. Alternativamente, outros estados podem diminuir a energia no on metlico
como estado de transferncia de carga intracomplexo ligante-metal, os estados 4f5d; ou
estado de transferncia metal-ligante de cromforos contendo ons de metais de
transio d, como Cr3+, Re+, Ru2+, Os2+, Co3+, Ir3+ ou Pt2+. Estes ons d so
essencialmente usados para sensibilizao da luminescncia no infravermelho prximo.
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Neste trabalho foram estudadas as propriedades luminescentes de duas terrasraras especficas, ons Trbio e Eurpio, quando impregnadas/dopadas em slica
mesoporosa, devido s suas propriedades luminescentes extremamente sensveis ao
meio, e que permitem sua utilizao como sondas pticas pontuais. Portanto, as
principais caractersticas de cada um destes elementos utilizados sero destacadas nos
Captulos 1 e 2, respectivamente.
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A Funcionalizao
Embora a aplicabilidade de partculas de slica mesoporosa como biomarcadores
seja muito promissora e possua inmeras vantagens, o uso direto destas partculas, ou
seja, o uso de partculas in natura muito difcil. Desse modo, necessrio modific-las
para que suas propriedades de superfcie atendam s condies biolgicas, como o meio
aquoso, temperatura, pH humano, e tambm para haver uma seletividade destas
partculas s clulas-alvo.
Existem dois mtodos de funcionalizao: o ps-sntese, muito utilizado e
conhecido como grafting, e a funcionalizao durante a sntese, durante o processo
sol-gel. No processo de funcionalizao pssntese, primeiro h a obteno da slica
mesoporosa pelo processo sol-gel com o auxlio de um agente direcionador de estrutura
e o agente de grupamento desejado ancorado posteriormente slica mesoporosa. No
processo de funcionalizao durante o processo sol-gel, o agente de grupamento
desejado incorporado slica durante o prprio processo de co-condensao[36]. Neste
trabalho, o mtodo de funcionalizao utilizado foi o de ps-sntese.
A funcionalizao ps-sntese de trialcoxissilanos um dos mtodos mais
populares para modificao de slica mesoporosa. Aminoproprilalcoxissilanos so
frequentemente empregados com este propsito, permitindo reaes subsequentes com
uma variedade de grupos funcionais, tais como isotiocianato ou cloreto de sulfonila. As
slicas mesoporosas amino-funcionalizadas tm sido investigadas em termos de suas
potenciais aplicaes em biomarcadores, liberao controlada, catlise e adsoro. A
identificao de parmetros que controlam a distribuio dos grupos amino ligados tem
sido tpico de publicaes relativamente recentes, que tm demonstrado que a
polaridade do solvente usado na reao de alcoxissilanos amino-substitudos com slica
mesoporosa tem uma influncia pronunciada na distribuio de grupos amino ancorados
superfcie[37].
O processo de ps-insero atravs de ligaes covalentes dos grupos silanis da
superfcie e molculas corantes tem sido considerado uma rota alternativa para a
preparao de materiais mesoporosos dopados com compostos luminescentes.
Comparado com outros mtodos de sntese, as vantagens do processo de ps-insero
Dissertao de Mestrado
25
JORGE, J
Dissertao de Mestrado
26
JORGE, J
Dissertao de Mestrado
27
Natureza
Sol
Sol
P
P
P
P
P
P
P
P
P
P
Material
Slica coloidal
Slica Stber
Slica precipitada
Dissertao de Mestrado
Slica gel
Slica mesoporosa
Slica pirognica
Slica vtrea
Quartzo
Cristobalita
Zosils
Cathrasils
Diatomeus eatrh
Amorfa
parcialmente
cristalina
Cristalina
Cristalina
Cristalina
Cristalina
Amorfa
Amorfa
Amorfa
Amorfa
Amorfa
Amorfa
Amorfa
Cristalinidade
Regulvel
Mesoporosa
Regulvel
Densa
Densa
Densa
Porosa (diam. 0,4 1,2 nm)
Porosa (diam. 0,2 0,3 nm)
Densa
Porosidade regulvel
5 120 m
Porosidade regulvel
Densa
Porosidade
10 -1000 nm
1 -1000 nm
Tamanho da partcula
Tabela 1. Viso geral dos materiais baseados em slica e suas propriedades relevantes. Adaptado de [26].
JORGE, J
Interao de Complexos Luminescentes com Slica Mesoporosa
28
JORGE, J
Dissertao de Mestrado
29
JORGE, J
SEM/FEG
Dissertao de Mestrado
30
JORGE, J
Dissertao de Mestrado
31
JORGE, J
Espectroscopia de Luminescncia
Dissertao de Mestrado
32
JORGE, J
Dissertao de Mestrado
33
JORGE, J
OBJETIVOS
O objetivo geral desse trabalho contribuir para o desenvolvimento de novas
sondas luminescentes para aplicaes biolgicas.
Como objetivos especficos, sintetizar matrizes slidas de partculas de slica
mesoporosa variando parmetros e condies como, tempo de reao e quantidade de
precursor de silcio, e aperfeioar suas propriedades luminescentes para que estas sejam
utilizadas como biomarcadores.
Dissertao de Mestrado
34
JORGE, J
CAPTULO 1
Micropartculas de slica
mesoporosa
Dissertao de Mestrado
JORGE, J
O Trbio (Tb3+)
Como j discutido nos tpicos Os diferentes tipos de marcadores
luminescentes e Terras-raras, da Introduo, os lantandeos apresentam propriedades
intrnsecas e singulares de emisso que so muito interessantes para sua utilizao como
biomarcadores, tais como linhas pontuais de emisso, alto rendimento quntico, tempo
de vida da fluorescncia e fotoestabilidade longos, quando encontram-se coordenados
com ligantes. Em particular, exibem propriedades eficientes dos processos de converso
ascendente de energia.
Porm, quando em complexao com molculas de gua, suas propriedades de
absoro destes elementos no so interessantes porque as bandas de absoro dos
lantandeos no espectro visvel so de baixa eficincia. Em certos complexos orgnicos
de lantandeos, ao contrrio, uma intensa emisso dos ons Ln3+ pode ser obtida via
efeito antena. Esses complexos aliam ento as vantagens das molculas orgnicas
(bandas largas de absoro) s dos lantandeos (linhas finas de emisso no visvel com
uma durao de vida da emisso que pode ir at vrias dezenas de ms).
O on Tb3+ faz parte dos ons lantandeos e, por consequncia, apresenta as
vantagens e caractersticas singulares que fazem destes ons promissores para aplicaes
como sondas luminescentes. Como caractersticas prprias, o on Tb3+ apresenta
luminescncia em solues aquosas (em coordenao com as molculas de gua apenas)
e em complexos com ligantes (coordenando-se com molculas de ligante), exibe
mltiplas emisses (devido s suas vrias transies eletrnicas), e quando em
complexos com ligantes, as intensidades relativas e as caractersticas das bandas de
emisso so influenciadas pelo ligante[45].
Para ser usado em sistemas biomoleculares necessrio e desejvel que as
propriedades ligantes tenham algum grau de seletividade, e isso uma caracterstica que
o on Tb3+ apresenta a uma ampla variedade de sistemas biomoleculares, e que levou
nos ltimos anos a um considervel interesse no uso deste on como sonda luminescente
para investigao de estruturas biomoleculares[45].
Os nmeros de coordenao para o Tb3+ em gua, so 8 e 9.
Em sistemas biomoleculares, os seguintes pontos so de especial importncia [45]:
Dissertao de Mestrado
36
JORGE, J
Foras de Ligao: Espera-se que sejam muito menores que as dos ons
metais de transio, mas levemente maiores que as dos ons metais
alcalinos e alcalinos terrosos.
Dissertao de Mestrado
37
JORGE, J
F5 que ocorre em torno de 540 - 555 nm. As emisses 5D4 7F0,1 so sempre fracas, e
Dissertao de Mestrado
38
JORGE, J
Metodologia
Todos os reagentes foram comprados da Aldrich ou Fluka e usados como
recebidos.
Dissertao de Mestrado
39
JORGE, J
Dissertao de Mestrado
40
JORGE, J
Caracterizao
Os materiais obtidos passaram pelas seguintes tcnicas de caracterizao:
Microscopia Eletrnica de Varredura (SEM), para observar a morfologia e tamanho das
partculas, em um microscpio eletrnico JEOL SJM 6490, as medidas foram realizadas
no Laboratrio de Microscopia Eletrnica do Laboratrio Nacional de Luz Sncrotron
(LME/LNLS, em Campinas). Medidas de porosidade, para coletar informaes sobre a
rea de superfcie e dimetros de poros), em um Micromeritcs 2010 usando
procedimento de padro contnuo, com degasagem inicial das amostras a 150 C por 15
h, a 77 K. As reas de superfcie foram determinadas pelo mtodo de BrunnauerEmmett-Teller (BET) dentro de uma escala de presso de 0,05 0,2. As distribuies de
tamanho de poros foram calculadas apenas para tamanhos acima de 2,5 nm da curva de
dessoro, usando uma correlao polinomial entre a presso relativa e o dimetro de
poros deduzido do modelo de Broekhoff e Boer (BdB)
[50,51]
. Para facilitar as
Dissertao de Mestrado
41
JORGE, J
Resultados e Discusso
Os resultados experimentais so apresentados e discutidos inicialmente com a
microscopia eletrnica de varredura (SEM). A imagem de SEM, Figura 13, mostra
partculas de slica pura lavada de tamanho micromtrico com formato heterogneo,
variando de bastonetes a esferas, o que caracterstica de slica mesoporosa do tipo
MSU-X. Este tipo de material denominado Michigan State University, ou MSU-X (o
X refere-se natureza do surfactante, que pode ser: 1 para alquil-PEO, 2 para alquilarilPEO, 3 para copolmero em bloco polipropilenxido-PEO, e 4 para ster de sorbitan
etoxilado do tipo no-inico Tween), e preparado sob condies neutras ou
moderadamente cidas. O tamanho mdio das partculas foi estimado pelo programa
ImageJ[53], foram utilizadas 2 imagens e 185 partculas foram contadas, com esta
estimativa foi construdo um histograma para mostrar a distribuio do tamanho das
partculas, o tamanho mdio estimado foi de 3,3 m com um desvio-padro de 0,91 m
(Figura 14). A morfologia e estrutura final do material tipo MSU-X so altamente
dependentes dos parmetros do meio reacional, tais como interao local criada pelo
equilbrio lipoflico/hidroflico, o movimento Browniano que destri a rede, a cintica
de hidrlise e a polimerizao da slica. Sntese de slica mesoporosa do tipo MSU-X
baseada em ligaes de hidrognio ilustra perfeitamente a versatilidade desta
abordagem, desde que a estrutura final do material (dimetro de poro, tamanho de
partcula) possa ser prontamente modificada pelo ajuste dos vrios parmetros de
snteses, com o mesmo meio de reao [54].
Dissertao de Mestrado
42
JORGE, J
100
Slica
Lorenziana
80
60
40
1 m = 1000 nm
20
0
1
10 11 12 13 14
D (m)
Figura 14. Histograma do dimetro de partculas pelo nmero de partculas contadas.
Dissertao de Mestrado
43
JORGE, J
Figura 15. Isoterma de adsoro-dessoro da slica mesoporosa lavada, com distribuio do tamanho de
poros inserido.
Dissertao de Mestrado
44
JORGE, J
Figura 16. Isoterma de adsoro-dessoro da slica mesoporosa calcinada, com distribuio do tamanho
de poros inserido.
Figura 17. Isoterma de adsoro-dessoro da slica mesoporosa funcionalizada com APTES, com
distribuio do tamanho de poros inserido.
Dissertao de Mestrado
45
JORGE, J
Figura 18. Isoterma de adsoro-dessoro da slica mesoporosa funcionalizada com GPTMS, com
distribuio do tamanho de poros inserido.
Dissertao de Mestrado
46
JORGE, J
Figura 19. Espectros de SAXS da slica lavada, calcinada, funcionalizada com APTES e funcionalizada
com GPTMS.
Dissertao de Mestrado
47
JORGE, J
Tabela 2. Valores dos tamanhos de poros das medidas de porosidade, picos de difrao
(d1 1 0 0) de SAXS, e espessura estimada da parede.
Amostras de slica
mesoporosa
Lavada
Calcinada
Funcionalizada APTES
Funcionalizada GPTMS
Pico de Difrao
d1 (nm)
5,1
7,9
6,2
Espessura da
Parede (nm)
1,6
3,5
2,3
Figura 20. Espectros de excitao, em = 543 nm, da soluo de Tb3+-cido L-glutmico; das slicas
lavada, calcinada, funcionalizada com APTES, e funcionalizada com GPTMS, impregnadas com Tb3+cido L-glutmico.
Dissertao de Mestrado
48
JORGE, J
mais, a baixa linha de base indica que a absoro da rede Si-O poderia ser desprezada, a
perda das molculas bioativas evitado e uma transferncia de energia efetiva toma
lugar entre os ligantes orgnicos modificados e o quelato de on trbio. Os materiais
hbridos mesoporosos mostram uma emisso relativamente intensa devido estrutura da
rede molecular Si-O covalentemente ligada, entre o complexo e a slica mesoporosa[56].
Figura 21. Espectros de emisso, exc = 377 nm, da soluo de Tb3+-cido L-glutmico; das slicas
lavada, calcinada, funcionalizada com APTES, e funcionalizada com GPTMS, impregnadas com Tb3+cido L-glutmico.
Dissertao de Mestrado
49
JORGE, J
exc (nm)
em (nm)
1 (ms)
2 (ms)
APTES
250
270
369
377
250
270
369
377*
488
488
488
488
543
543
543
543*
0,49
0,47
0,36
0,35
0,60
0,59
0,36
0,31*
0,76
0,68
0,52
0,50*
GPTMS
250
270
377
250
270
377*
488
488
488
543
543
543*
0,43
0,42
0,36
0,54
0,53
0,34*
0,62
0,59
0,80
0,58*
Calcinada
250
270
373
377
250
270
373
377*
488
488
488
488
543
543
543
543*
0,34
0,34
0,31
0,31
0,36
0,36
0,33
0,32*
Lavada
250
270
373
377
250
270
373
377*
488
488
488
488
543
543
543
543*
0,33
0,33
0,33
0,32
0,33
0,32
0,33
0,33*
*O asterisco indica os lambdas de excitao e emisso utilizados para construo dos grficos
apresentados anteriormente.
Dissertao de Mestrado
50
JORGE, J
Figura 22. Curvas de decaimento de transio para a luminescncia do on Tb3+ (transio 5D4 7F5) nas
matrizes de slica calcinada e lavada. Os espectros foram adquiridos pela emisso a 543 nm e excitao a
377 nm.
Por outro lado, para as slicas modificadas, funcionalizada com APTES e com
GPTMS, (Figura 23) tm dois tempos de vida. Estes dois tempos de vida para as slicas
modificadas sugerem que o on lantandeo esteja ocupando dois diferentes stios, um
devido adsoro da slica pelo complexo, e o outro devido interao entre a
superfcie da slica e o complexo.
Dissertao de Mestrado
51
JORGE, J
Figura 23. Curvas de decaimento de transio para a luminescncia do on Tb3+ (transio 5D4 7F5) nas
matrizes de slica funcionalizada com APTES e funcionalizada com GPTMS. Os espectros foram
adquiridos pela emisso a 543 nm e excitao a 377 nm.
Dissertao de Mestrado
52
JORGE, J
Concluses
As medidas de porosidade e de SAXS mostraram que as matrizes slidas obtidas
pelo mtodo sol-gel (slica mesoporosa) possuem organizao de poros e tamanhos
definidos que as caracterizam como materiais mesoporosos, mesmo aps a modificao
da superfcie dos canais das slicas obtidas.
Quando se modifica a superfcie das micropartculas, deslocamentos nas bandas
de excitao so notados.
Os complexos luminescentes podem ser ligados s micropartculas de slica
mesoporosa sem perdas significantes das propriedades de luminescncia do on
lantandeo, o que confirmado pelos espectros de excitao e emisso, o que refora
sua importncia como uma alternativa promissora aos biomarcadores existentes.
Dissertao de Mestrado
53
JORGE, J
CAPTULO 2
Nanopartculas de slica
mesoporosa
Dissertao de Mestrado
JORGE, J
O Eurpio (Eu3+)
O on Eu3+, assim como o on Tb3+ apresentado no Captulo anterior, faz parte do
grupo dos lantandeos e exibe as caractersticas e vantagens prprias deste grupo, alm de ser
luminescente quando forma complexos com ligantes, como o on Tb3+. Tambm exibe
mltiplas emisses (devido s suas vrias transies eletrnicas), e assim como o on Tb3+,
quando em complexos com ligantes, as intensidades relativas e as caractersticas das bandas
de emisso so influenciadas pelo ligante. Sua propriedade luminescente o torna, tambm, um
timo candidato para o uso como sondas luminescentes em sistemas biomoleculares. Para ser
usado em sistemas biomoleculares necessrio e desejvel que suas propriedades ligantes
tenham algum grau de seletividade, e isso tambm satisfeito pelo on Eu 3+[45].
Os nmeros de coordenao para o Eu3+ em gua, so 8 e 9, os mesmos do on Tb3+.
Como discutido no Captulo anterior, em relao aos sistemas biomoleculares, os seguintes
pontos so de especial importncia: stio de seletividade, tamanho e geometria dos stios de
ligao (~1,07 - 1,12 , para Eu3+), foras de ligao, stios de distoro[45].
Estes pontos sugerem que o Eu3+ se ligaria a uma ampla variedade de sistemas de
interesse biolgico e que estas ligaes exibiriam um alto grau de seletividade. E mais, no se
espera que estas ligaes resultem em maiores perturbaes nas caractersticas estruturais
inerentes ao sistema hospedeiro [45].
A configurao eletrnica do Eu3+ (Z = 63) [Kr] 4d10 4f6 5s2 5p6 e os nveis de
energia da transio 4f6 so apresentados no diagrama da Figura 24 com a notao 2S+1LJ.
Dissertao de Mestrado
55
JORGE, J
56
JORGE, J
Dissertao de Mestrado
57
JORGE, J
Metodologia
Todos os reagentes foram utilizados como recebidos, das marcas PRS Panreac, RhnePoulenc, Ega-Chemie e Aldrich.
Descrio
JJ3
JJ5
JJ12
JJ13
JJ122
JJ131 e JJ134
JJ133-2
A reao foi mantida sob controle em um sistema reacional para sntese de slica
mesoporosa, como mostra o modelo e a foto, na Figura 25, abaixo:
Dissertao de Mestrado
58
JORGE, J
Figura 25. Esquema do modelo de sistema reacional para sntese de slica mesoporosa (esquerda), e foto do
sistema no laboratrio (direita).
Dissertao de Mestrado
59
JORGE, J
Descrio
Slica MCM-41, sntese de 20 h, via sol-gel, 5 ml de
TEOS.
Slica MCM-41, sntese de 20 h, via sol-gel, 1 ml de
TEOS.
Slica MCM-41, sntese de 20 h, via sol-gel, 90C
(reao), agitao mnima.
Slica MCM-41, sntese de 20 h, via sol-gel, 60C (reao).
Slica MCM-41, sntese de 20 h, via sol-gel, 80C
agitao mxima.
Slica MCM-41, sntese de 20 h, via sol-gel, agitao
mnima.
Slica MCM-41, sntese de 20 h, via sol-gel, 2 ml de
TEOS.
Slica MCM-41, sntese de 20 h, via sol-gel, 2 ml de
TEOS, base amnia.
Slica MCM-41, sntese de 20 h, via sol-gel, base amnia.
Slica MCM-41, sntese de 2 h, via sol-gel, reproduo de
[58]
(A).
Slica MCM-41, sntese de 24 h, via sol-gel, reproduo de
[58]
(G).
Sntese de JJ3 + dopagem com Eu(NO3)3 (5%).
Sntese de JJ5 + dopagem com Eu(NO3)3 (5%).
Sntese de JJ10 + dopagem com Eu(NO 3)3 (5%).
Slica MCM-41, sntese de 48 h, via sol-gel, 2 surfactantes,
reproduo de [59].
Slica MCM-41, sntese de 48 h, via sol-gel, 2 surfactantes,
reproduo de [59].
Slica MCM-41, sntese de 48 h, via sol-gel, 2 surfactantes,
reproduo de [59].
Slica MCM-41, sntese de 48 h, via sol-gel, 2 surfactantes,
reproduo de [59].
Slica MCM-41, sntese de 1 h, via sol-gel, agitao
mxima.
Slica MCM-41, sntese de 2 h, via sol-gel, agitao
mxima.
Slica MCM-41, sntese de 1 h, via sol-gel, 90C (reao).
Slica MCM-41, sntese de 2 h, via sol-gel, 90C (reao).
Slica MCM-41, sntese de 2h, via sol-gel, agitao
mxima.
Slica MCM-41, sntese de 15 min, via sol-gel, agitao
mxima.
Slica MCM-41, sntese de 30 min, via sol-gel, agitao
mxima.
Slica MCM-41, sntese de 6 h, via sol-gel, agitao
mxima.
Rendimento
1,0 g
0,2 g
1,0 g
1,0 g
1,0 g
1,1 g
0,2 g
0,4 g
1,2 g
0,2 g
0,18 g
0,7 g
1,5 g
0,3 g
0,7 g
0,8 g
0,52 g
0,67 g
1,0 g
1,0 g
0,805 g
0,862 g
1,0 g
1,0 g
1,0 g
0,977 g
*O asterisco indica que as snteses apresentadas neste trabalho foram destacadas em vermelho.
Dissertao de Mestrado
60
JORGE, J
Dissertao de Mestrado
61
JORGE, J
Dissertao de Mestrado
62
JORGE, J
O peso final do material recuperado aps secagem na estufa foi de 38 mg. Aps a
impregnao com a 1,10-fenantrolina a amostra foi denominada JJ122.
O mesmo protocolo de sntese utilizado para a impregnao de 1,10-fenantrolina na
slica JJ12 foi utilizado para a slica JJ13.
O peso final do material recuperado aps secagem na estufa foi de 43 mg. Aps a
impregnao com a 1,10-fenantrolina a amostra foi denominada JJ131.
Dissertao de Mestrado
63
JORGE, J
Caracterizao
Os materiais obtidos passaram pelas seguintes tcnicas de caracterizao: SEM, para
observar a morfologia e tamanho das nanopartculas; medidas de porosidade, para coletar
informaes sobre a rea superficial e dimetro de poros; SAXS, para analisar o arranjo e
organizao de poros; Microscopia Eletrnica de Transmisso (TEM), para observar a
morfologia, tamanho das nanopartculas e dos poros, e arranjo de poros; espectroscopia de
luminescncia, para estudar as propriedades de luminescncia dos materiais.
As imagens de SEM foram obtidas em um microscpio JEOL SEM FEG JSM 6330F e
um microscpio JEOL 6490; as amostras foram depositadas em porta amostra de alumnio
recoberto por carbono e platina.
As medidas de porosidade, obtidas atravs de isotermas de adsoro-dessoro de
Nitrognio foram medidas em um porosmetro Micromeritics ASAP2000, e as reas
superficiais foram determinadas pelo mtodo de BET. Os espectros de SAXS foram obtidos
usando um equipamento SEIFERT C3000, difratmetro com radiao Cu K.
As imagens de TEM foram obtidas usando um microscpio Philips Model CM20, as
amostras foram dispersas em etanol com o auxlio do ultrassom durante 5 minutos e
depositadas nas grades de microscopia com o auxlio de uma pipeta Pasteur.
A luminescncia dos materiais foi estudada com um espectrofotmetro Jobin-Yvon
Modelo Fluorolog FL3-22, equipado com uma fotomultiplicadora R928 Hammamatsu e uma
lmpada de excitao de Xe de 450 W, foram usados filtros 395 nm e 420 nm, e valor de
incremento 0,5. Os espectros no foram corrigidos e as condies de abertura da fenda de
excitao e emisso foram diferentes para cada amostra.
Dissertao de Mestrado
64
JORGE, J
Resultados e Discusso
A Figura 29 apresenta uma imagem de SEM da amostra JJ3; onde esto partculas
tpicas de slica mesoporosa do tipo MCM-41[60-62]. Pela imagem de SEM possvel perceber
muitas partculas agregadas que em alguns pontos formam grandes aglomerados. Foi possvel
estimar o tamanho de partculas usando o programa ImageJ[53], sendo que foram utilizadas
todas as 3 imagens obtidas e contadas um total de 242 partculas. O tamanho mdio estimado
(usando a medida do dimetro Feret) foi de 116 nm com desvio padro de 45 nm, os dados
encontram-se no histograma da Figura 30. Nas imagens de SEM-FEG da Figura 31, o que se
v so partculas por vezes aglomeradas com heterogeneidade no formato e no tamanho.
Dissertao de Mestrado
65
JORGE, J
14
JJ3
Lorenziana
12
10
8
6
4
2
0
100
150
200
250
D (nm)
Figura 30. Histograma do dimetro de partculas pelo nmero de partculas.
Dissertao de Mestrado
66
JORGE, J
Dissertao de Mestrado
67
JORGE, J
A Figura 35 apresenta uma imagem de SEM da amostra JJ5, onde esto partculas
tpicas de slica mesoporosa do tipo MCM-41[60-62]. Pela imagem de SEM possvel perceber
muitas partculas morfologicamente similares, formato circular, diferentemente do que ocorre
com JJ3. Foi possvel estimar o tamanho de partculas usando o programa ImageJ[53], foram
utilizadas todas as 2 imagens obtidas e foram contadas um total de 286 partculas, e o
tamanho mdio estimado (usando a medida do dimetro Feret) foi de 137 nm com desvio
padro de 33 nm, os dados encontram-se no histograma da Figura 36. Nas imagens de
SEM/FEG, Figura 37, o que se v so partculas por vezes aglomeradas, e com pouca
heterogeneidade no formato e no tamanho.
Dissertao de Mestrado
68
JORGE, J
JJ5
Lorenziana
10
0
50
100
150
200
250
300
D (nm)
Figura 36. Histograma do dimetro de partculas pelo numero de partculas.
Dissertao de Mestrado
69
JORGE, J
Dissertao de Mestrado
70
JORGE, J
Dissertao de Mestrado
71
JORGE, J
Dissertao de Mestrado
72
JORGE, J
Dissertao de Mestrado
73
JORGE, J
ocorre com a amostra JJ12. Quanto amostra de slica JJ131, percebe-se que apresenta apenas
um pico e de menor valor que o da JJ122, e no pode ser definida como um material com
arranjo de poros hexagonal, semelhante ao que ocorre na amostra JJ122.
Dissertao de Mestrado
74
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Para a amostra JJ133-2, Figura 48, no possvel afirmar que o recobrimento foi
obtido com sucesso, possvel perceber ainda que h partculas mesoporosas com arranjo
hexagonal sem a presena do on Eu+3 enquanto outras partculas possuem reas escuras que
podem ser atribudas ao on luminescente.
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Figura 49. Isoterma de adsoro/dessoro (BET) e distribuio do dimetro de poros da amostra JJ3.
Figura 50. Isoterma de adsoro/dessoro (BET) e distribuio do dimetro de poros da amostra JJ12.
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Figura 51. Isoterma de adsoro/dessoro (BET) e distribuio do dimetro de poros da amostra JJ5.
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Figura 52. Isoterma de adsoro/dessoro (BET) e distribuio do dimetro de poros da amostra JJ13.
Tabela 6. Resumo dos principais resultados aps caracterizao por SEM, SAXS e medidas
de porosidade.
Slica
JJ3
JJ12
JJ5
JJ13
TC
Agitao
90
90
80
80
mnima
mnima
mxima
mxima
Dmed
partculas
(nm)
117
137
209
Arranjo
As
(m2.g-1)
Dmed poros
(nm)
Vtotal poros
(cm3.g-1)
hexagonal
hexagonal
hexagonal
1018
730
901
750
5,5
5,2
4,3
7,0
1,4
0,95
0,97
1,3
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Figura 53. Espectros de Excitao, em = 612 nm, das amostras JJ12 e JJ122.
Nos espectros de emisso das amostras JJ12 e JJ122 (Figura 54), possvel observar
os picos de transio caractersticos do on Eu3+. O espectro de luminescncia deste on
significativamente influenciado pela rede cristalina utilizada como hospedeira por causa das
transies eletrnicas envolvendo apenas a redistribuio de eltrons dentro da subcamada 4f.
O pico de transio mais intenso centrado em 612 nm, correspondente a transio 5D0 7F2,
possui intensidade consideravelmente superior do pico centrado em 591 nm, transio 5D0
7F1. Os picos de transio com menor intensidade observados em 578, 653 e 703 nm
correspondem s transies 5D0 7F0, 5D0 7 F3 e 5D0 7 F4, respectivamente[56,57]. Para a
slica mesoporosa dopada com o on Eu3+ e posteriormente impregnada com 1,10fenantrolina, JJ122, o espectro desta amostra bem semelhante ao da JJ12.
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Figura 54. Espectros de Emisso das amostras JJ12 (exc = 394 nm) e JJ122 (exc = 328,5 nm).
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Figura 55. Espectros de Excitao, em = 612 nm, das amostras JJ13 e JJ134.
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Figura 56. Espectros de Emisso das amostras JJ13 (exc = 395 nm) e JJ143 (exc = 3331 nm).
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Concluses
As nanopartculas de slica mantm o padro mesoporoso, mesmo aps a dopagem
com o on Eu3+, mas apenas a amostra JJ5 no perde o arranjo hexagonal de poros aps
dopagem com o on lantandeo. As partculas quando analisadas por TEM aparentam pouca
aglomerao, o que no pde ser confirmado apenas pela anlise das imagens de SEM.
A impregnao com a 1,10-fenantrolina foi bem sucedida e est evidenciada pelos
resultados dos espectros de emisso e de excitao, os espectros apresentam tambm
comportamentos diferentes quando a slica est apenas dopada com o on Eu 3+ e quando est
dopada com lantandeo e impregnada com 1,10-fenantrolina, onde possvel perceber que
ocorre absoro do ligante. A manuteno da luminescncia do on quando dopado em slica
um dado extremamente importante para que venha a se obter um biomarcador.
O recobrimento com uma camada de silcio e APTMS foi bem realizada, o que
evidenciado pelas imagens de TEM.
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CONCLUSES GERAIS
Este trabalho, que est subdivido em duas partes experimentais, atingiu os objetivos
iniciais, ou seja, contribuir para o desenvolvimento de materiais que sejam promissores para
aplicaes biolgicas, como uma alternativa aos biomarcadores atuais.
Foi possvel assim, concluir que quando se modifica a superfcie das micropartculas,
deslocamentos nas bandas de excitao e emisso so notados, devido interao entre a
superfcie da matriz e o complexo luminescente, mas no h perdas das propriedades de
luminescncia do on lantandeo, o que confirmado pelos espectros de excitao e emisso,
o que refora sua importncia como uma alternativa promissora aos biomarcadores existentes.
Entre as nanopartculas, JJ5 apresentou resultados mais interessantes que JJ3, porm
as propriedades luminescentes do on eurpio foram mantidas aps a insero na slica, nos
duas diferentes snteses, o que mais uma vez, importante para a utilizao destas partculas
como biomarcadores.
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