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UNIVERSIDAD DE ORIENTE

NUCLEO BOLIVAR
ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
Dr. Francisco Virgilio Battistini Casalta.
DEPARTAMENTO DE BIOANALISIS.

Profesora:

Presentado por:

Alizar Abou Fakmr

Br. Karelia Silva R.

CI: 17.879.702

Ciudad bolvar, enero del 2011.

RADIOINMUNOANALISIS (RIA)

DEFINICIN DE TRMINOS
Radiacin: es la emisin y propagacin de energa a travs del espacio o
de una barrera de algn material en forma de onda.
Istopos: es el nucleido inestable. Es decir los neutrones y protones no
estn dentro de los limites de cabalidad. Sufren transformaciones hasta
llegar a ser estables.
Nucleido: el ncleo de cada elemento posee numero determinado de
neutrones y protones y variando algunos de ellos se obtienen distintas
especies anatmicas.
Radioactividad: es la propiedad de ciertos nucleidos de emitir radiacin
por la transformacin espontnea de su ncleo.
Partcula alfa: es una partcula fuertemente ionizante, emitida desde un
ncleo durante el decaimiento radioactivo.
Emisin beta: es un electrn expulsado de un ncleo durante la
transformacin radioactiva.
Rayo gamma: es una radiacin electromagntica muy penetrante del
origen nuclear.

Fue el primer inmunoanlisis, puesto en marcha por Yallow y


Berson en 1956.
Radioinmunoanlisis es un mtodo sensible y especifico para
determinar reacciones Ag Ac, en el cual un reactante marcado
radiactivamente se utiliza directa o indirectamente para la medicin
cuantitativa del reactante no marcado, estableciendo una fijacin de Ac
especfico u otro sistema receptor.
El sistema radioinmunolgico descrito puede esquematizarse como
una reaccin reversible combinada:

El proceso obedece a la ley de accin de masas la distribucin del


trazador dentro del antgeno total es indiscriminable por medio del
anticuerpo de modo que, cuanto mayor sea la cantidad del antgeno no
marcado, menor ser la cantidad de trazador que se une al anticuerpo.
Bajo este principio se puede determinar la concentracin del
antgeno en muestras complejas de fluidos biolgicos con suficiente
sensibilidad y especificidad si se cumplen los siguientes requisitos:
1. el trazador es altamente radioactivo y por lo tanto puede
colocarse en concentraciones infinitesimales, pero cuantificables.
2. el anticuerpo es altamente especfico, posee muy alta finalidad y
se halla en muy baja concentracin.

En el RIA, la marcacin es por un istopo radiactivo, de manera que en


este caso medimos radiacin asociada al complejo.
La sustancia que quiere medirse (Ag) compite con una cantidad fija
de la misma sustancia marcada radiactivamente (Ag*), por su unin a un
anticuerpo (Ac) especfico, que se encuentra en cantidad limitada. Tras un
perodo de incubacin se separa la fraccin unida al anticuerpo (Ag-Ac,
Ag*-Ac) de la fraccin libre (Ag, Ag*), y se procede al recuento de la
radiactividad.

SUSTANCIAS MARCADORAS
Los istopos mas empleados son el carbono 14 ( 14C), EL TRITIO
(3H) y el yodo 125 (125I) y el cromo 51 (51cr).
EL 14C y el 3H se emplea fundamentalmente cuando se pueden introducir
al sintetizar la molcula (esteroides, frmacos y pptidos pequeos)
mientras que el

123

I se utiliza para las molculas grandes, como las

protenas, en las que se una a los residuos de tirosina.


A su vez estos istopos producen radiaciones gamma y beta:
Rayos gamma: son los penetrantes, atraviesas la mayora de los
materiales yodo 125 (125I), cromo 51 (51cr).
Partculas beta: solo pueden ser frenadas por algunos materiales slidos
y lquidos (3H Y C14)
Partculas alfa: tienen muy poca penetracin, por lo tanto no atraviesan el
recipiente que contiene sustancia radioactiva

TIPOS DE ENSAYOS
Radioinmunoanlisis directo o RIA competitivo
Es el ensayo mas usado. En este caso el receptor especifico es un
anticuerpo el cual se une especficamente al ligando al ser medido. La
cantidad de anticuerpo utilizado es directamente proporcional a la
cantidad de radio ligando presente. Si hay ligando nativo presente, el
compite con las molculas de ligando marcado debido al numero limitado
de sitio de unin, por lo tanto a mayor concentracin de ligando nativo en
la muestra, menor cantidad de radio ligando se unir al receptor
Radioinmunoanlisis indirecto o RIA no competitivo
En este tipo de ensayo, el anticuerpo es usualmente el radio
marcado y no el ligando, se usa particularmente cuando el ligando es
difcil de marcar, como en el caso de antgenos asociados a virus. El
receptor acoplado a una matriz de fase slida se incuba con la muestra
conteniendo el ligando a ser estudiado, se procura que el ligando
presente se una completamente al receptor. Este receptor se adhiera a
cualquier ligando de unin presente en la muestra. Luego de la
incubacin con el receptor radioactivo, la fase es lavada

y toda la

radioactividad unida a la fase slida y esta es proporcional a la cantidad


de ligando que esta presente en la muestra.
Ria Sndwich o RIA doble o Prist
Este es un mtodo no competitivo en fase slida, con el anticuerpo
unido a ella (tcnica de captura o de dos sitios) el soporte slidos son
discos de papel slido activados con bromuro de ciangeno que unen
una anti-igE.

La fase slida se incuba con el suero problema, que contiene la


IgE. La IgE fijada a la muestra se manifiesta tras la disolucin en el medio
de anticuerpos anti IgE marcados radiactivamente. Y se procede a medir
la radioactividad con un contador de centelleo

VENTAJAS:
-

Sensible, Fcil y Rpido.

DESVENTAJAS:
La vida media del istopo es muy corta, por ejemplo el 125. Tiene 57 das
de vida media.
-Costosa y peligros
-Requiere un equipo especial que es el contador gama para medir la
radiacin.
-Este mtodo requiere siempre la elaboracin de una curva estndar para
la lectura

APLICACIN
Las pruebas que se pueden medir en este ensayo son:
-Hormonas
-Drogas
-Anticuerpos antinucleares
-Antgenos y anticuerpos de hepatitis
-Antgenos carcinoembrionicos
-Alfafetoprotenas
-Complejos inmunolgicos
-Inmunoglobulinas E

Los resultados se obtienen al medir la radioactividad de la hormona


marcada unida al anticuerpo y la de la hormona marcada libre mediante
un contador de centelleo. Al centrifugar, la hormona libre queda en
solucion y la hormona unida al anticuerpo forma agregados fcilmente
precipitables. Una vez medida la radiactividad se construye una curva con
los resultados obtenidos con cantidades conocidas de hormonas sin
marcar y marcada. A esta curva se llevan los valores obtenidos de los
sueros problemas y se obtiene la concentracin de la hormona no
marcada a investigar.

MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD PARA ESTE ENSAYO


La realizacin de estas tcnicas, conlleva la manipulacin de
muestras biolgicas y de un istopo radioactivo (I125), lo cual hace que el
personal ocupacional expuesto cumpla los siguientes principios bsicos
contenidos en el artculo 6 del Decreto Ley 56 del 25 de mayo de 1982.
- Durante el trabajo se debe mantener la mayor distancia posible de las
fuentes de radiacin.
- Manipular los istopos radioactivos lo ms rpido posible con el fin de
disminuir el tiempo de exposicin.
- El uso de la bata sanitaria es de obligatorio cumplimiento, pues en caso
de contaminacin, la bata sera el primer elemento a contaminarse.
- Es necesario el uso de guantes para manipular todo lo relacionado con
las muestras de los pacientes y los istopos radiactivos.
- Es necesario trabajar sobre bandejas metlicas y no directamente sobre
las mesetas para evitar posibles contaminaciones de las mismas.
- Se debe evitar toda posible contaminacin con istopos de los equipos
de conteo.
- No fumar, ni ingerir alimentos ni usar cosmticos en el puesto de trabajo

CONCLUSIONES.
En la mayora de los hospitales las tcnicas de RIA estn
slidamente establecidas desde hace muchos aos. Recientemente en
las direcciones de los mismos se observa una tendencia a plantearse la
sustitucin del RIA por otras tcnicas de ms reciente introduccin. Estas
pretenden como mximo objetivo igualar la calidad del RIA. Ofrecen como
mayor aportacin real, facilidad y velocidad en la obtencin de resultados.
Su argumentacin la basan en la automatizacin de los equipos y en la
informacin incorporada a los mimos. En esta situacin los responsables
de las direcciones hospitalarias, de forma aislada o dirigidas por
decisiones superiores, parecen intentar el cambio del RIA por aquellas
tcnicas sin que se conozcan los criterios utilizados para justificarlo. Cabe
la posibilidad de que no dispongan de una informacin completa sobre las
ventajas e inconvenientes de cada una de ellas, de los distintos
procedimientos y de su ptima utilizacin. Una de las causas que
potencian la desviacin de determinaciones analticas hacia otras tcnicas
no RIA es la informacin errnea sobre la peligrosidad radiante y
contaminante del RIA. Sin embargo, esta potencial peligrosidad est
totalmente reglamentada y controlada, cosa que no sucede con los
residuos biolgicos y qumicos de otras tcnicas alternativas.
El RIA es una tcnica analtica de referencia cuya calidad, en
general, an no ha sido superada por ninguna otra. Se puede decir que
cualquier otra es comparada con los resultados obtenidos por el RIA.
Posteriormente aquellas solamente se introducen en el mercado cuando
sus parmetros de calidad se acercan a los determinados por RIA. El RIA
es una tcnica tradicional en la mayora de nuestros hospitales, con una
dotacin completa de recursos materiales y humanos. Actualmente, en
general, los costos del RIA son inferiores a los de otra tcnicas
alternativas en las que hay que considerar, adems del precio del reactivo

propiamente dicho, otros costos adicionales por materiales accesorios


(calibradores, controles, cubetas, buffers, otros reactivos, etc.
En quimioluminiscencia el hecho de no utilizar material radioactivo.
El costo para realizar este mtodo es ms econmico tericamente.
Debido que el mtodo de quimioluminiscencia es un mtodo automatizado
el tiempo de elaboracin de la prueba es mucho ms corto y mucho
menos tedioso. Disminuyendo as el riesgo de efectos operadores en las
determinaciones inmunolgicas, se pueden realizar muchas pruebas al
igual que con el RIA y algunas otras ms

BIBLIOGRAFIA

R. Gonzlez, R. Tarazona. Galiani, G. Espinosa

y J. Pea. Mtodos

Basados

lnea]

en

la

unin

Ag-Ac.

[En

Disponible:

http://www.uco.es/grupos/inmunologiamolecular/inmunologia/tema17/etexto17.htm [Enero 2010]

J. M. Gonzalez Buitrago. 1998. Inmunoanlisis con reactivos marcados.


Bioqumica Clnica. Edit. Mc. Gram-Hill Interamericana. Espaa. Cap. 5:
41-42. [Enero 2010]
Ensayos

inmunolgicos.

[En

lnea]

Disponible:

http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/Inmunologia.htm [Enero 2010]


[En lnea] Disponible:
http://www.scribd.com/doc/3288542/RADIOINMUNOENSAYOS.

[Enero

2010]
Jos Vicente Bras Aznar. Alergias clinicas. [En lnea] Disponible:
http://books.google.co.ve/books?
id=laxQd1ueAsgC&pg=PA104&lpg=PA104&dq=metodo+competitivo+de+
RIA+rist&source=bl&ots=p0VGljblwF&sig=1bQkiQBDVsXD1pM6lQZM5TeFLw&hl=es&ei=bmZETY7AHMatgQfb0qC9AQ&sa=X&oi=book_resul
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[Enero 2010]

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