MANUAL DE GENTICA

DE ROEDORES DE LABORATORIO
Principios bsicos y aplicaciones

Fernando J. Benavides y Jean-Louis Gunet

Fernando J. Benavides
The University of Texas M. D. Anderson Cancer Center, Science Park-Research Division, Park Road 1C,
P.O. Box 389, Smithville, Texas 78957, Estados Unidos.
Tel: (512) 237-9343
Fax: (512) 237-2444
E-Mail: fbenavides@sprd1.mdacc.tmc.edu
Jean-Louis Gunet
Unit de Gntique des Mammifres, Institut Pasteur, 25 rue du Docteur Roux
F-75724 Pars, Cedex 15, Francia.
Tel: 33 (0)1 45 68 85 55
Fax: 33 (0)1 45 68 86 34
E-Mail: guenet@pasteur.fr

Presentacin

Es un placer para mi presentar en nombre de la Universidad de Alcal, Laboratory Animals

Ltd. y la Sociedad Espaola para las Ciencias del Animal de Laboratorio (SECAL) el primer
libro en Espaol sobre la gentica de los roedores de laboratorio.
Cuando hace unos meses se nos plante la posibilidad de publicar un libro sobre gentica
de roedores, nos dimos cuenta de la carencia en todo el planeta de publicaciones en Espaol que pudieran servir tanto de consulta como de texto. Por ello nos pusimos a trabajar
y a coordinar los recursos de las tres instituciones para llevar a buen fin la obra que ahora
tienen en sus manos.
Escrita por los veterinarios Fernando Benavides y Jean Louis Gunet cubre aspectos de la
gentica clsica y molecular, haciendo especial hincapi en el ratn y la rata.
El tratamiento actualizado de los temas recogidos en el texto, desde los ms bsicos hasta
los ms novedosos, permite asegurar que se trata, tanto de una herramienta til como libro de texto para la formacin de estudiantes y personal tcnico, como un libro de consulta para los profesionales relacionados con la gentica de animales de laboratorio.
El Dr. Jean Louis Gunet es jefe de la Unit de Gntique des Mammifres del Instituto
Pasteur de Pars (Francia). Reconocida autoridad mundial en la gentica del ratn, tiene en
su haber ms de 300 publicaciones relacionadas con dicha materia. Fernando Benavides,
discpulo aventajado suyo, realiz con l su tesis doctoral en gentica. Se encuentra
actualmente trabajando en el rea de la gentica del ratn en The University of Texas, M.D.
Anderson Cancer Center de los Estados Unidos de Amrica del Norte.
En mi calidad de coordinador de la publicacin y de miembro de las tres instituciones
implicadas, quiero expresar mi agradecimiento a la Universidad de Alcal, a Laboratory
Animals Ltd. y a la SECAL por haber hecho posible la edicin de esta obra.
Jos Mara ORELLANA MURIANA
Universidad de Alcal
Laboratory Animals Ltd.
SECAL

ndice General
PRLOGO . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

13

CAPTULO I
EL GENOMA DE LOS MAMFEROS
1.1 EL GENOMA: ESTRUCTURA Y ORGANIZACIN . . . . . . . . .
1.1.1 Los cidos nucleicos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.1.1.1 Estructura del ADN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.1.1.2 La replicacin del ADN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.1.1.3 La organizacin del ADN en cromosomas . . . . . .
1.1.1.4 El cdigo gentico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.1.1.5 Estructura del ARN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.1.2 El ADN genmico es heterogneo: secuencias codificantes
versus no codificantes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.1.2.1 Secuencias codificantes: Qu es un gen? . . . . . . . .
1.1.2.2 Secuencias no codificantes . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.1.3 La talla del genoma: estimando el nmero total de genes .

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1.2 EXPRESIN DE LA INFORMACIN GENTICA: CMO FUNCIONAN

LOS GENES? . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.2.1 La transcripcin y la traduccin del ADN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.2.2 La regulacin de la actividad de los genes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.2.2.1 Regulacin a nivel del ADN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.2.2.2 Regulacin a nivel de la transcripcin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.2.2.3 Regulacin postranscripcional . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.2.2.4 Los genes de globinas: modelo de regulacin de genes en mamferos

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1.3 EL ANLISIS DEL ADN AL NIVEL MOLECULAR . . . . . . . . . . .

1.3.1 Las herramientas utilizadas en biologa molecular . . . . . . . . .
1.3.1.1 Enzimas de restriccin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.3.1.2 Las tcnicas de hibridacin (Southern blot) . . . . . . .
1.3.1.3 Reaccin en cadena de la polimerasa de ADN . . . .
1.3.1.4 Tcnicas DGGE y SSCP: deteccin de mutaciones .
1.3.1.5 Los chips de ADN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.3.2 Clonado de ADN y construccin de bibliotecas genmicas
1.3.3 La secuenciacin del genoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.3.3.1 Las tcnicas de secuenciacin . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.3.3.2 Las estrategias de secuenciacin de genomas . . . . .

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MANUAL DE GENTICA DE ROEDORES DE LABORATORIO

1.4 ELEMENTOS DE CITOGENTICA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

1.4.1 El cariotipo normal en los roedores de laboratorio . . . . . . . . .
1.4.2 Las anomalas en el nmero de cromosomas (Heteroploidas)
1.4.2.1 Las heteroploidas euploides . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.4.2.2 Las heteroploidas aneuploides . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.4.3 Las anomalas en la estructura de los cromosomas . . . . . . . . .
1.4.3.1 Rearreglos estructurales resultantes de rotura nica . .
1.4.3.2 Rearreglos estructurales resultantes de dos roturas . . .
1.4.3.3 Rearreglos estructurales complejos . . . . . . . . . . . . . . . .

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BIBLIOGRAFA GENERAL . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

57

CAPTULO II
BIOLOGA Y MANEJO REPRODUCTIVO DEL RATN
2.1 BIOLOGA DEL RATN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.1.1 Hbitat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.1.2 Comportamiento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.1.3 Reproduccin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.1.3.1 Maduracin sexual y ciclo estral . . . . . . . . . . . . . . . .
2.1.3.2 Comportamiento sexual en las poblaciones salvajes
2.1.3.3 Apareamiento, preez y amamantamiento . . . . . . . .

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2.2 MANEJO REPRODUCTIVO DEL RATN EN EL ANIMALARIO

2.2.1 Generalidades . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.2.2 Sistemas de cra . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.2.3 Sistemas de reproduccin asistida . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.2.3.1 Inseminacin artificial (IA) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.2.3.2 Transplante de ovarios . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.2.3.3 Fertilizacin in vitro (FIV) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.2.3.4 Mtodo ICSI . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.2.4 Rederivacin de embriones y recin nacidos . . . . . . . . . . . . .

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2.3 CRIOPRESERVACIN DE EMBRIONES Y GAMETOS

2.3.1 Principios de criobiologa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.3.2 Congelacin de embriones . . . . . . . . . . . . . . . . . .
2.3.3 Congelacin de gametos y gnadas . . . . . . . . . . .
2.3.3.1 Congelacin de esperma . . . . . . . . . . . . .
2.3.3.2 Congelacin de oocitos y tejidos ovricos
2.3.4 Bancos de embriones y gametos congelados . . . .

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NDICE GENERAL

CAPTULO III
SISTEMTICA DE LOS RATONES UTILIZADOS
EN EL LABORATORIO
3.1 SISTEMTICA DEL RATN . . . . . . . . . . . . . . . . . .
3.1.1 Origen filogentico de los roedores . . . . . . . .
3.1.2 Sistemtica del gnero Mus . . . . . . . . . . . . . . .
3.1.3 El ratn como animal de laboratorio . . . . . . .
3.1.4 Origen de las lneas de ratones de laboratorio
3.1.5 Las lneas de ratones de origen salvaje . . . . . .

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3.2 SISTEMTICA DE LA RATA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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3.3 SISTEMTICA DEL HMSTER . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

97

3.4 SISTEMTICA DEL COBAYO . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

99

3.5 SISTEMTICA DEL JERBO . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

100

3.6 OTROS ROEDORES UTILIZADOS COMO ANIMAL DE EXPERIMENTACIN

101

BIBLIOGRAFA GENERAL . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

103

CAPTULO IV
LAS LNEAS GENTICAMENTE ESTANDARIZADAS
Y LOS CONTROLES DE LA PUREZA GENTICA
4.1 LNEAS GENTICAMENTE ESTANDARIZADAS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.1.1 Introduccin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.1.2 Lneas consanguneas (inbred strains) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.1.2.1 Caractersticas de las lneas consanguneas . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.1.2.2 Las lneas consanguneas estndar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.1.2.3 Las lneas consanguneas salvajes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.1.2.4 La divergencia gentica y la existencia de sublneas . . . . . . . . . .
4.1.2.5 Mantenimiento de las lneas consanguneas . . . . . . . . . . . . . . . .
4.1.3 Hbridos F1 (hybrid F1 mice) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.1.4 Lneas congnicas y coisognicas (congenic strains) . . . . . . . . . . . . . . . .
Nomenclatura de las lneas coisognicas y congnicas . . . . . . . . . . . . . .
4.1.5 Lneas consanguneas recombinantes (recombinant inbred strains -RIS)
Nomenclatura de las lneas consanguneas recombinantes . . . . . . . . . . .
4.1.6 Lneas congnicas recombinantes (recombinant congenic strains -RCS)
Nomenclatura de las lneas congnicas recombinantes . . . . . . . . . . . . . .
4.1.7 Lneas consmicas (consomic strains) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.1.8 Lneas conplsticas (conplastic strains) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.1.9 Los roedores no consanguneos (outbred stocks) . . . . . . . . . . . . . . . . .
Nomenclatura de los roedores no consanguneos . . . . . . . . . . . . . . . . .

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124

MANUAL DE GENTICA DE ROEDORES DE LABORATORIO

4.2 LA CONTAMINACIN GENTICA Y LOS CONTROLES DE

4.2.1 Generalidades . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.2.2 Marcadores bioqumicos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.2.3 Marcadores Inmunolgicos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.2.4 Anlisis del color del pelaje . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.2.5 Injertos de piel . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.2.6 Caracteres morfolgicos (Osteometra) . . . . . . . . . . . . . . .
4.2.7 Caracteres reproductivos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.2.8 Marcadores de ADN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.2.8.1 Fingerprinting de ADN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4.2.8.2 Anlisis de microsatlites por PCR . . . . . . . . . . . . .
4.2.8.3 Otras tcnicas moleculares . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

CALIDAD
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BIBLIOGRAFA GENERAL . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

134

CAPTULO V
GENTICA DE LA HISTOCOMPATIBILIDAD
5.1 FUNDAMENTOS GENTICOS DE LA COMPATIBILIDAD TISULAR . . . . . .
5.1.1 Clasificacin de los transplantes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
5.1.2 Las leyes que gobiernan la aceptacin o el rechazo de los transplantes
5.1.3 Biologa de los transplantes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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5.2 LA IDENTIFICACIN DE LOS GENES DE HISTOCOMPATIBILIDAD . . . . . . . . .

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5.3 EL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD (CMH)

5.3.1 El CMH en el ratn: H2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
5.3.2 El polimorfismo del CMH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
5.3.3 Origen y evolucin del CMH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
5.3.4 El CMH en los roedores de laboratorio . . . . . . . . . . . . . . . .
5.3.5 El CMH y la eleccin de pareja reproductiva. . . . . . . . . . . . .
5.3.6 Asociacin entre haplotipos del CMH y enfermedad . . . . . .

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BIBLIOGRAFA GENERAL . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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CAPTULO VI
LOS MAPAS GENTICOS
6.1 INTRODUCCIN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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6.2 TIPOS DE MAPA DEL GENOMA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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NDICE GENERAL

6.2.1 Mapas de Ligamiento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

6.2.2. Mapas Cromosmicos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.2.2.1 Hibridacin In Situ. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.2.2.2 Hbridos de Clulas Somticas . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.2.2.3 Hbridos de Radiacin (HR) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.2.3 Mapas Fsicos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.2.4 Secuenciando Genomas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.2.5 Mapas de Transcripcin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.2.6 Integracin de Mapas (Mapas Consenso) . . . . . . . . . . . . . . . .
6.2.7 Programas de Mapeo a Gran Escala . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.2.8 Mapeos Comparativos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.2.9 Localizacin de rasgos cuantitativos (Quantitative Trait Loci)

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6.3 MARCADORES UTILIZADOS EN LA CONSTRUCCIN DE MAPAS

DE LIGAMIENTO . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.3.1 Marcadores Fenotpicos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.3.2 Marcadores Proteicos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.3.3 Marcadores de ADN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.3.3.1 RFLPs (Restriction Fragment Length Polymorphisms) . . .
6.3.3.2 Minisatlites . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.3.3.3 Microsatlites . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.3.3.4 RAPDs (Random Amplified Polymorfic DNA). . . . . . . . .
6.3.3.5 SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) . . . . . . . . . . . .

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6.4 CRUZAS PARA ANLISIS DE LIGAMIENTO . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

6.4.1 Retrocruzas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.4.2 Intercruzas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.4.3 Lneas Consanguneas Recombinantes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.4.4 Lneas Congnicas Recombinantes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.4.5 Cruzas inter-especficas (la contribucin de los ratones salvajes) . . . . . . .
6.4.5.1 Los ratones salvajes como fuente de polimorfismo gentico . . . .
6.4.5.2 El valor de los ratones salvajes para el clonaje posicional de genes

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6.5 APLICACIONES DE LOS MAPAS GENTICOS . . . . . . . . . . . . . . .

6.5.1 Identificacin de Genotipos Especficos . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.5.2 Estudios de Evolucin del Genoma . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.5.3 Establecimiento de Homologas Cromosmicas entre Especies
6.5.4 Clonaje Posicional de Mutaciones . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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BIBLIOGRAFA GENERAL

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MANUAL DE GENTICA DE ROEDORES DE LABORATORIO

CAPTULO VII
LAS MUTACIONES
7.1. UN GENOMA CAMBIANTE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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7.2. LOS DIFERENTES TIPOS DE MUTACIONES . . . . . . . . .

7.2.1 Mutaciones tradicionales versus mutaciones dirigidas
7.2.2 Mutaciones puntuales y cromosmicas . . . . . . . . . . .
7.2.2.1 Sustituciones . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
7.2.2.2 Deleciones e inserciones . . . . . . . . . . . . . . .

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7.3. LAS MUTACIONES ESPONTNEAS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

7.3.1 Frecuencia de las mutaciones espontneas . . . . . . . . . . . . . .
7.3.2 Identificacin de las mutaciones en los animalarios . . . . . . . .
Determinacin de la base gentica de un fenotipo mutante
7.3.3 El vaco fenotpico (Phenotype Gap) . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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7.4. LOS AGENTES MUTGENOS . . . . . . . . . . . . . . .

7.4.1 Las radiaciones . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
7.4.2 Los agentes qumicos . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Mutagnesis por N-etil N-nitrosourea (ENU)

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7.5. MUTAGNESIS POR INSERCIN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

220

7.6. MUTAGNESIS POR RECOMBINACIN HOMLOGA . . . . . . . . . . . . . . . . .

221

7.7. MUTAGNESIS POR TRAMPA DE GENES (GENE-TRAP MUTAGENESIS) . . . .

222

7.8. LA INFLUENCIA DEL FONDO GENTICO SOBRE EL FENOTIPO MUTANTE

224

BIBLIOGRAFA GENERAL . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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CAPTULO VIII
LA TRANSGNESIS Y LA CLONACIN EN LOS
ROEDORES DE LABORATORIO
8.1 LA MANIPULACIN DE LOS EMBRIONES . . . . . . . . .
8.1.1 Perspectiva histrica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
8.1.2 Consideraciones generales . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
8.1.2.1 Obtencin de embriones y superovulacin
8.1.2.2 Transferencia de embriones . . . . . . . . . . . .
8.1.2.3 Induccin de pseudopreez . . . . . . . . . . . .

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11

NDICE GENERAL

8.2 TRANSGNICOS GENERADOS POR INYECCIN DE ADN

EN EL PRONCLEO . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
8.2.1 Tcnica clsica de microinyeccin de ADN . . . . . . . . . . . . .
8.2.1.1 La microinyeccin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
8.2.1.2 Desarrollo de lneas transgnicas . . . . . . . . . . . . . . .
8.2.1.3 Nomenclatura de los loci y las lneas transgnicas . .
8.2.2 Creacin de ratones transgnicos a partir de BACs y YACs

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8.3 OTRAS TCNICAS DE PRODUCCIN DE ANIMALES TRANSGNICOS . .

8.3.1 Infeccin por retrovirus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
8.3.2 Inyeccin intracitoplasmtica de espermatozoides y ADN . . . . . . . . . . . . . .

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8.4 LA MUTAGNESIS DIRIGIDA EN EL RATN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

8.4.1 Cultivo de clulas primordiales embrionarias -clulas ES- . . . . . . . . . . . . . . .
8.4.2 La recombinacin homloga . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
8.4.3 Creacin de ratones knock-out (KO) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Nomenclatura de los KO . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
8.4.4 El uso de recombinasas sitio-especficas para generar ratones KO condicionales
8.4.5 Influencia del fondo gentico en los animales genticamente modificados . . . .

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8.5 LA CLONACIN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
8.5.1 Historia de la clonacin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
8.5.2 Mtodos de clonacin en el ratn . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
8.5.3 Relevancia de la clonacin para los roedores de laboratorio

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BIBLIOGRAFA GENERAL . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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CAPTULO IX
LOS ROEDORES DE LABORATORIO COMO MODELOS
DE ENFERMEDADES HUMANAS
9.1 EL RATN COMO MODELO EN MEDICINA EXPERIMENTAL . . . . . . . . . . .
9.1.1 Modelos provenientes de mutaciones espontneas o inducidas . . . . . . . . . .
9.1.2 Modelos generados por transgnesis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.1.2.1 Modelos producidos a travs de la eliminacin de un determinado
tipo celular . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.1.2.2 Modelos producidos a travs de una regulacin anormal del gen . .
9.1.2.3 Modelos producidos por la incorporacin de genes humanos . . . .
9.1.2.4 Modelos transgnicos producidos por la incorporacin de grandes
fragmentos de ADN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.1.3 Modelos generados in vitro por manipulacin de clulas ES . . . . . . . . . . . .
9.1.4 Modelos generados por transgnesis condicional (sistemas Cre/loxP y Flp/frt)

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12

MANUAL DE GENTICA DE ROEDORES DE LABORATORIO

9.2 MODELOS MURINOS PARA EL ESTUDIO DE ENFERMEDADES HUMANAS

9.2.1 Modelos murinos de enfermedades hereditarias simples (mendelianas) . . .
9.2.1.1 Enfermedades que involucran clulas derivadas de la cresta neural .
Enfermedad de Hirschsprung (HSCR) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Piebaldismo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Sndrome de Waardenburg (WS) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.2.1.2 Desrdenes en la visin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.2.1.3 Desrdenes en la audicin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.2.1.4 Enfermedades de los huesos y cartlagos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.2.1.5 Desrdenes neurolgicos y neuromusculares . . . . . . . . . . . . . . . . .
Enfermedad de Alzheimer (EA) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Desrdenes neuromusculares . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.2.1.6 Enfermedades de la piel y el pelo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.2.1.7 Enfermedades hematolgicas e inmunodeficiencias . . . . . . . . . . . . .
Anemias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Inmunodeficiencias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Fenmenos autoinmunes y linfoproliferativos . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.2.1.8 Enfermedades metablicas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Desrdenes en el metabolismo de la purina . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Fibrosis Qustica (FQ) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Arteriosclerosis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.2.2 Modelos murinos de enfermedades hereditarias complejas (multignicas) . . .
9.2.2.1 Cncer . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Cncer colorectal . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Sndrome de Li-Fraumeni . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.2.2.2 Obesidad y diabetes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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9.3 OTROS ROEDORES UTILIZADOS COMO MODELO EXPERIMENTAL . . . . . . .

9.3.1 La rata como modelo de diabetes dependiente de insulina (diabetes tipo I) . .
9.3.2 La rata como modelo de obesidad y diabetes tipo II . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.3.3 La rata como modelo de hipertensin y obesidad . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.3.4 La rata como modelo de Epilepsia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
9.3.5 El hmster como modelo experimental . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

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289
289
290
291
292

9.4 EL VALOR Y LAS LIMITACIONES DE LAS MUTACIONES COMO MODELO

DE ENFERMEDADES HUMANAS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

292

BIBLIOGRAFA GENERAL . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

294

ANEXO I. MANTENIMIENTO DE LAS MUTACIONES EN EL ANIMALARIO . . . .

299

ANEXO II. GLOSARIO Y NOMENCLATURA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

307

ANEXO III. DIRECCIONES DE INTERNET . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

309

Prlogo

La idea de escribir este libro naci un da de septiembre de 1995, ao en el que un joven veterinario argentino (FB) lleg a Pars decidido a descubrir la vieja Europa y a pasar algunos
meses trabajando en el laboratorio de otro veterinario ms maduro (JLG), jefe de la Unidad
de Gentica de Mamferos en el Institut Pasteur. Siendo ambos apasionados por la gentica y
compartiendo el deseo de poner sus conocimientos a disposicin de la comunidad hispanoparlante, la idea de escribir un manual de Gentica de Roedores de Laboratorio en espaol
surgi en forma natural.
Aos ms tarde, en la primavera Tejana de 1998, ya como colaboradores y amigos, decidimos poner manos a la obra. En aquel momento pensamos, ingenuamente, que reuniendo las
notas y apuntes acumulados a lo largo de los aos por el ms experimentado de nosotros, y
dejando al novato la tarea de ponerlos al da y adaptarlos, la redaccin del manuscrito no debera durar ms de un ao, a lo sumo un ao y medio. Rpidamente nos dimos cuenta de
que nuestra empresa era mucho ms importante de lo que pensbamos y que el proyecto
era un verdadero desafo. Aunque ninguno de los dos lo haya mencionado jams, es muy
probable que la idea de abandonar la escritura del libro se nos haya cruzado por la mente
ms de una vez. Pero una de las ventajas de escribir un libro de a dos es que la debilidad de
uno suele coincidir con el punto fuerte del otro. De esta manera, apoyndonos mutuamente,
es que hemos llevado a trmino nuestro proyecto y estamos inmensamente felices de ver
que nuestro libro, el primero en su gnero en idioma espaol, es hoy una realidad.
Somos conscientes de que la redaccin de esta obra nos ha tomado mucho tiempo, pero tenemos varias excusas. Una de las ms importantes es el hecho de que, en los ltimos cinco
aos, la gentica del ratn y la rata se han desarrollado en forma muy considerable, enviando
rfagas sucesivas de nueva informacin. Por lo tanto, nos pareca inconcebible no hablar de
los progresos ms recientes en la materia en un libro destinado a investigadores, veterinarios
y tcnicos que trabajan con roedores de laboratorio. Hoy en da los genomas del ratn y la
rata se encuentran secuenciados, pero podemos prever que harn falta an muchos aos
para analizar la enorme cantidad de informacin puesta a disposicin de la comunidad cientfica. Simultneamente, prevemos que la prxima etapa en esta carrera ser la que atae al anlisis de los caracteres genticos complejos (multignicos), las interacciones entre genes (genes
modificadores), los fenmenos epigenticos y la relacin gentica/ambiente. Ante este panorama, pensamos que este momento de calma era el tiempo ideal para salir con nuestro libro
a la calle. Una cosa segura es que al libro que estamos publicando hoy le ha quedado muy
poco de aquellos apuntes desordenados mencionados al principio.
En la redaccin de este libro nos hemos limitado a la descripcin de los conceptos y datos
esenciales, con el fin de conservar un volumen (y un precio) razonables. Para obtener infor-

14

MANUAL DE GENTICA DE ROEDORES DE LABORATORIO

macin ms detallada, el lector encontrar numerosas referencias de artculos, revisiones y libros pertinentes, y podr tambin consultar la enorme cantidad de sitios Web que hemos incluido. Si bien estamos orgullosos de nuestra obra, sabemos muy bien que el libro no es perfecto y que est lejos de ser un tratado completo sobre la materia. Siendo sta la primera
edicin del libro, estamos dispuestos a recibir sugerencias de nuestros colegas hispanoparlantes, las cuales podramos tener en cuenta para una prxima edicin. Ms all de lo expresado,
la redaccin de este libro ha tenido una consecuencia mayor: ha contribuido a reforzar considerablemente la amistad que une a los autores.
Los autores agradecen a la Sociedad Espaola para las Ciencias del Animal de Laboratorio
(SECAL) y a Laboratory Animals Ltd. por el inters en nuestro libro, al colega Claudio J. Conti
(The University of Texas, MD Anderson Cancer Center) por su apoyo desinteresado durante la
preparacin de esta obra y a los colegas Jorge Sztein (National Eye Institute, National Institutes
of Health), Charles Babinet y Xavier Montagutelli (Institut Pasteur), Gran Levan (Gteborg University) y Heinz Winking (Medizinische Hochschule Lbeck), por sus sugerencias y material fotogrfico. Fernando Benavides agradece a Jean-Louis Gunet por ser un maestro excepcional
(generoso, detallista y divertido). De la misma forma, agradece a su mentor en Argentina,
Christiane Dosne Pasqualini, y a sus compaeros Norberto Barassi, Antonio Morales y Juan
Portaluppi por haberle enseado (contagiado) su aficin por los pequeos roedores.