Rev Esp Med Legal.

2009;35(1):19-27
ISSN: 0377-4732

PUBLICACIN OFICIAL

medicina legal

REVISTA ESPAOLA DE MEDICINA LEGAL

revista espaola de

DE LA

ASOCIACIN NACIONAL

DE

MDICOS FORENSES

REVISTA ESPAOLA DE

MEDICINA
LEGAL
35

Volumen
Nmero
Enero-Junio 2009

Fundada en 1974

EDITORIAL
Intervencin mdico-forense en sucesos con mltiples vctimas
mortales: la experiencia del accidente de aviacin de Barajas

ORIGINAL
Traumatismos raqudeos y lesiones no contiguas. Importancia
del cribado con resonancia magntica de columna completa en el
esguince cervical

ARTCULOS ESPECIALES
Actuacin mdico-forense en el accidente de Spanair en Barajas
el 20 de agosto de 2008
La identificacin gentica en grandes catstrofes: avances
cientficos y normativas en Espaa

CASOS MDICO-FORENSES
Aplicacin de las escalas AIS/ISS en medicina forense: a propsito
de un caso de precipitacin
Electrocucin y marca elctrica de Jellinek

NOTA EDITORIAL
El nuevo certificado mdico de defuncin
Volumen 35 Nmero 1, Enero-Junio 2009

www.elsevier.es/mlegal

MEDICINA LEGAL EN IMGENES

Heridas por arma blanca

MEDICINA FORENSE PRCTICA

Recogida de muestras para estudio entomolgico forense

www.elsevier.es/mlegal

ARTCULO ESPECIAL

La identificacin gentica en grandes catstrofes: avances

cientficos y normativos en Espaa
Gloria Vallejo y Antonio Alonso*
Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses, Servicio de Biologa, Madrid, Espaa
Recibido el 18 de abril de 2009, aceptado el 22 de abril de 2009.

PALABRAS CLAVE
ADN;
Grandes catstrofes;
Restos humanos;
Identificacin

Resumen
La gentica forense ha desempeado indiscutiblemente un papel fundamental en la identificacin de vctimas de las catstrofes sucedidas en esta ltima dcada. El reciente
desarrollo de guas y recomendaciones especficas ha sido un elemento fundamental para
garantizar la coordinacin y la eficacia de los equipos multidisciplinares (mdicos forenses, antroplogos, odontlogos, especialistas en dactiloscopia, genetistas...) que se
enfrentan a esta compleja tarea. En Espaa, con el nimo de superar los problemas de
coordinacin observados durante el proceso de identificacin de las vctimas del atentado terrorista del 11 de marzo de 2004, se cre una comisin interministerial para la
elaboracin de un protocolo nacional de actuacin conjunta de mdicos forenses, polica
cientfica e Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses (INTCF) en sucesos con
vctimas mltiples que finalmente fue aprobado el 16 de enero de 2009. En el presente
trabajo nos referiremos a los estndares cientficos aprobados en dicho protocolo nacional con respecto al procedimiento de identificacin gentica. Esos estndares estn
basados en las recomendaciones del Grupo Espaol y Portugus de la Sociedad Internacional de Gentica Forense (GEP-ISFG) consensuadas por un elevado nmero de laboratorios de gentica forense de Espaa, Portugal y Latinoamrica. Revisaremos tambin la
experiencia del INTCF en la aplicacin de estos estndares en la identificacin gentica
de vctimas en el reciente accidente areo del vuelo JK-5022 en Barajas (Madrid, 20 de
agosto de 2008), as como en el atentado terrorista del 11 de marzo de 2004 en Madrid y
en el accidente areo del Yakolev-42, el 26 de mayo de 2003, en Turqua.
2009 Asociacin Nacional de Mdicos Forenses. Publicado por Elsevier Espaa, S.L.
Todos los derechos reservados.

*Autor para correspondencia.

Correo electrnico: a.alonso@mju.es (A. Alonso).
0377-4732/$ - see front matter 2009 Asociacin Nacional de Mdicos Forenses. Publicado por Elsevier Espaa, S.L. Todos los derechos reservados.

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KEYWORDS
DNA;
Mass disaster;
Human remains;
Human identification

G. Vallejo et al
Genetic identification in mass disasters: scientific advances and guidelines in Spain
Abstract
Forensic genetics has played an indisputable role in the identification of victims of mass
disasters that have occurred in the last decade. The recent development of specific
guidelines and recommendations has been a key element in guaranteeing the coordination
and effectiveness of multidisciplinary teams (forensic examiners, anthropologists,
odontologists, fingerprint specialists, geneticists,..) who face this complex task. In Spain,
with the aim of overcoming the coordination problems encountered during the process of
identifying victims of the terrorist attack on March 11, 2004, a committee was set up in
order to prepare a national protocol for joint action by medical examiners, scientific
police and the National Institute of Toxicology and Forensic Sciences (NITFS) in events
with multiple victims, which was finally approved in January 16, 2009. In this paper we
look at the scientific standards adopted in this protocol as regards the procedure for
genetic identification. These standards are based on the recommendations of the Spanish
and Portuguese Working Group of the International Society for Forensic Genetics (SPWGISFG) agreed by a large number of forensic genetics laboratories from Spain, Portugal and
Latin America. We also review the experience of the NITFS in implementing these
standards in the genetic identification of the victims in the recent air crash of flight
JK-5022 at Barajas (Madrid, 20/08/08), as well as the terrorist attack of March 11, 2004
in Madrid and the Yakolev-42 air crash of May 26, 2003 in Turkey.
2009 Asociacin Nacional de Mdicos Forenses. Published by Elsevier Espaa, S.L.
All rights reserved.

Introduccin
La humanidad es cada vez ms vulnerable a ciertos desastres y catstrofes (en especial, desastres accidentales e intencionados), en gran medida por el tipo de vida que caracteriza a nuestra civilizacin, y son cada vez ms frecuentes
y con ms vctimas.
Las catstrofes presentan una serie de elementos comunes bsicos que las distingue como tal. Una catstrofe es un
suceso caracterizado por ser un acontecimiento inesperado, inhabitual, que se instaura de forma rpida, con carcter colectivo, de manera que afecta a un sector de la poblacin, produce importantes destrozos materiales y humanos
y para su resolucin es necesaria la intervencin de medios
de auxilio extraordinarios, por su nmero y por su naturaleza.
La investigacin de vctimas en catstrofes (IVC) es esencial por razones humanitarias y sociales, pero tiene tambin una trascendencia en el proceso judicial, tanto en el
mbito civil (certificado de defuncin, indemnizaciones,
otros derechos...) como en el penal (investigacin criminal
en catstrofes intencionadas, identificacin de terroristas
suicidas...).
La estrategia para la identificacin de las vctimas debe
seleccionarse de acuerdo con las caractersticas de la catstrofe; no debemos olvidar que cada desastre ser diferente de otro en sus caractersticas, dimensiones y consecuencias. El proceso de identificacin de los cadveres
requiere en todo caso de la actuacin de equipos multidisciplinares procedentes de diferentes reas cientficas, como
la antropologa, la radiologa, la odontologa, la dactiloscopia o la gentica forense, que basan la identificacin de las
vctimas en un anlisis comparativo entre los datos y las

muestras de las personas desaparecidas (ante mrtem) con

los datos y muestras obtenidos de los cadveres (post mrtem). La coordinacin de estos especialistas y la integracin de la informacin obtenida en cada una de estas disciplinas sern fundamentales para garantizar la efectividad y
la fiabilidad del proceso de identificacin; por tanto, es de
especial trascendencia el desarrollo de guas y protocolos
de accin conjunta.
La primera gua de identificacin de vctimas en catstrofes fue la Gua de identificacin de vctimas de catstrofes
de INTERPOL1, publicada por primera vez en 1984 y revisada
en 1997 y, con posterioridad, en marzo de 2009. Se trata de
una gua general que aborda los distintos aspectos de la IVC
(gestin de la catstrofe, recogida de muestras, mtodos
de identificacin, sistemas de reconciliacin...) e incluye
los formularios de IVC de registro de datos ante mrtem y
post mrtem utilizados en un gran nmero de catstrofes
de repercusin internacional, as como un nuevo formulario
para la evaluacin de los datos generales de la catstrofe.
En 2004, como consecuencia de la experiencia en la identificacin de vctimas del atentado del World Trade Center
el 11 de septiembre de 2001 en la ciudad de Nueva York, se
public la Gua de identificacin forense humana en grandes catstrofes del Instituto Nacional de Justicia de los Estados Unidos2, elaborada por expertos procedentes de diferentes reas de las ciencias forenses, muchos de ellos con
una amplia experiencia en catstrofes. Es una gua que fija
las responsabilidades del mdico forense a cargo del incidente, con especial referencia a la recogida de los restos
humanos y la identificacin de los cadveres, a las labores
desarrolladas por la antropologa forense, el anlisis de
ADN, el procesado de huellas dactilares, la odontologa forense y la radiologa forense.

La identificacin gentica en grandes catstrofes: avances cientficos y normativos en Espaa

21

Tabla 1 Caractersticas generales de las tres catstrofes

Catstrofes

Accidente areo Yakolev-42

(2003)

Atentado terrorista,
11 de marzo, Madrid (2004)

Accidente areo Barajas

(2008)

Fallecidos (n)
74
191
154*
Poblacin
Cerrada
Abierta
Cerrada
Caractersticas cadveres Nivel bajo de fragmentacin
Nivel alto de fragmentacin
Gran nmero de cadveres
calcinados y gran nmero
de grupos familiares
*Ciento cincuenta y tres fallecidos el da del siniestro y 1 fallecido 3 das despus.

Centrndonos en las guas cientfico-tcnicas para los

anlisis de ADN que estandarizan los procesos fundamentales de actuacin para los profesionales de la gentica forense, cabe destacar la reciente gua de identificacin de ADN
en grandes catstrofes publicada por el Instituto Nacional
de Justicia de los Estados Unidos (Lessons Learned From
9/11: DNA Identification in Mass Fatality Incidents3) y en
especial las recomendaciones de la Comisin de ADN de la
Sociedad Internacional de Gentica Forense4 respecto del
papel del genetista forense en la IVC. Estas recomendaciones hacen especial nfasis en la toma de muestras biolgicas (ante mrtem y post mrtem) objeto de anlisis de ADN,
procedimientos tcnicos para extraccin de ADN, marcadores STR (short tandem repeats) y otros mtodos de identificacin por ADN, as como la evaluacin estadstica y herramientas informticas para la comparacin automtica de
perfiles de ADN e integracin global en una base central de
datos de todos los datos identificativos procedentes de
otras reas cientficas.
Con respecto a nuestro pas, el primer antecedente normativo lo encontramos en el Real Decreto 2394/2004 de 30
de diciembre, donde se aprueba el Protocolo para la recuperacin, identificacin, traslado e inhumacin de los restos mortales de los miembros de las Fuerzas Armadas, Guardia Civil, y Cuerpo Nacional de Polica, fallecidos en
operaciones fuera de su territorio5. Fue elaborado como
consecuencia de los graves errores que se produjeron en la
identificacin de las vctimas en el accidente areo del
Yakolev-42 en Turqua, el 26 de marzo de 2003, y en el que
se establece como obligatoria la identificacin de los restos
mortales mediante tcnicas mdico-forenses, que incluirn
al menos tcnicas somatomtricas, dactiloscpicas, radiolgicas y anlisis de ADN.
El Ministerio de Justicia, sensible a los problemas de coordinacin en el proceso de identificacin de vctimas del
atentado terrorista del 11 de marzo de 2004 en Madrid
(11M), elabor, en colaboracin con el Ministerio de Interior el Protocolo nacional de actuacin mdico-forense y
de polica cientfica en sucesos con vctimas mltiples
(Real Decreto 32/2009)6. La finalidad del protocolo nacional
consiste en regular la asistencia tcnica a los jueces y tribunales para la identificacin de los cadveres y la determinacin de las causas y circunstancias de la muerte en este tipo
de situaciones. Adems, articula las fases de actuacin, las
fases preliminares al tratamiento de cadveres y restos humanos, la fase de tratamiento de cadveres y restos humanos y la fase de obtencin de datos ante mrtem en el rea

de asistencia a familiares, desarrolla los equipos de profesionales que deben actuar y los formularios estandarizados
para toma de datos ante mrtem y post mrtem, y crea la
Comisin Tcnica Nacional para Sucesos con Vctimas Mltiples.
En el presente trabajo abordaremos los estndares cientficos aprobados en ese protocolo nacional con respecto al
procedimiento de identificacin gentica en las distintas
fases de la investigacin (toma de muestras, anlisis de
ADN, laboratorios de referencia, tratamiento en base de
datos...). Estos estndares estn basados en las Recomendaciones para la recogida y remisin de muestras con fines
de identificacin gentica en grandes catstrofes7 del
Grupo Espaol y Portugus de la Sociedad Internacional de
Gentica Forense (GEP-ISFG), consensuadas por un gran
nmero de laboratorios de gentica forense de Espaa,
Portugal y Latinoamrica. Revisaremos tambin la experiencia del Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses (INTCF) en la aplicacin de estos estndares en la
identificacin gentica de vctimas en el reciente accidente areo de Barajas de 2008, as como en el atentado terrorista del 11M de 2004 en Madrid y en el accidente areo del
Yakolev-42, el 26 de mayo de 2003, en Turqua. En la tabla
1 se recogen algunas caractersticas generales de estas tres
catstrofes.

La toma de muestras para anlisis de ADN

La experiencia acumulada en catstrofes recientes refuerza
la necesidad de que la toma de muestras se lleve a cabo
mediante procedimientos que aseguren la adecuada preservacin de las muestras y que garanticen su correcta identificacin y cadena de custodia. En relacin con ello, el Real
Decreto 32/2009 establece en el Anexo VII.1 las siguientes
recomendaciones generales:
La recogida de muestras con fines de identificacin gentica es una fase de especial trascendencia del complejo
proceso de la identificacin forense que debe realizarse por
personal especializado siguiendo una serie de recomendaciones que afectan a:
La identificacin y documentacin de las muestras.
El procedimiento de recogida y las precauciones que deben tomarse.
La cadena de custodia.

22
En la actualidad los estudios de ADN estn basados en el
anlisis comparativo entre perfiles genticos obtenidos de:
La toma de muestras post mrtem procedentes de los
cadveres y restos humanos.
La toma de muestras de referencia (ante mrtem y familiares) necesarias para su identificacin.

Muestras post mrtem

Una de las principales consideraciones iniciales en la investigacin de una gran catstrofe es determinar el alcance de
los anlisis de ADN. El Real Decreto 32/2009 establece de
forma clara en los artculos 15.1 y 18.2 la obligatoriedad de
tomar una muestra para anlisis de ADN, tanto de los cadveres como de los restos humanos. Esta norma garantiza,
por un lado, la posibilidad de realizar estudios de reasociacin entre restos humanos y cadveres y, por otro, realizar
estudios complementarios siempre que surjan dudas o discrepancias con otros mtodos de identificacin (dactiloscpicos, odontolgicos, etc).
Gracias a la toma de una muestra biolgica y a su adecuada preservacin por el equipo de mdicos forenses de Turqua
de cada uno de los cadveres de las vctimas del accidente
del Yakolev-42, fue posible realizar con posterioridad un anlisis gentico comparativo sistemtico con muestras de referencia de los familiares, que pusieron de manifiesto que los
30 cadveres identificados por el equipo espaol destacado
en Turqua estaban todos errneamente identificados.
La toma sistemtica de muestras de ADN a todos los cadveres y restos humanos fue tambin la norma seguida en
el reciente accidente areo del vuelo JK-5022 en Barajas
(Madrid, 20 de agosto de 2008), llevada a cabo de forma
coordinada por los tres laboratorios de ADN participantes
(Comisara General de Polica Cientfica, Servicio de Criminalstica de la Guardia Civil e INTCF) en colaboracin con
los mdicos forenses.
En el caso del atentado terrorista del 11M de 2004 en
Madrid, se tom la decisin de realizar una toma de muestras para anlisis de ADN slo a los cadveres autopsiados
que no estuvieran identificados dactilarmente. Esta decisin
impidi la realizacin en muchos casos de estudios genticos
de reasociacin con los ms de 158 restos humanos que fueron recogidos en los distintos escenarios de la catstrofe.
Otras recomendaciones fundamentales del Real Decreto
32/2009 para la toma de muestras post mrtem son las siguientes:
Establecer un cdigo de identificacin de muestra mediante sistema nico y sencillo, invariable durante todo
el proceso. Este sistema incluir la identificacin dada al
cadver en el levantamiento y en el IML. Si de un cadver
o resto humano fuese necesario recoger varias muestras,
a cada una de ellas se le asignar un nmero correlativo: nmero levantamiento/nmero IML/nmero muestra
ADN.
Fotografiar y documentar grficamente los cadveres y
restos humanos, antes de la recogida de la muestra.
Utilizar el formulario estandarizado para recogida de
muestras post mrtem (Anexo VII.2 del Real Decreto
32/2009) y cumplimentar la cadena de custodia.

G. Vallejo et al
La recogida de muestras debe hacerse durante la autopsia o con posterioridad a ella por el mdico forense, con
la colaboracin de personal entrenado y con experiencia
en la toma de muestras para anlisis de ADN. Los miembros del equipo deben extremar las precauciones para
evitar o minimizar el riesgo de contaminacin, tanto exgena como cruzada, que puede producirse durante el
proceso. Para ello deben ir equipados con ropa protectora (guantes, mascarilla, batas o mono, etc.) y siempre
que sea posible deben utilizar material estril o bien disponer de los medios necesarios para realizar una limpieza
adecuada del material y de las superficies de trabajo.
Con respecto al tipo de muestras biolgicas post mrtem
ms adecuadas para anlisis de ADN, se recomienda la recogida de muestras menos afectadas evitando la contaminacin exgena y la posible contaminacin cruzada entre los
cadveres y en especial: msculo esqueltico, sangre, fragmentos de rganos y piel. Cuando los restos humanos estn
putrefactos, se recomienda la recogida de piezas dentales,
huesos o uas.
La toma de muestras de msculo y de fragmentos de rganos ha sido la ms utilizada por el INTCF en los casos del
11 de marzo y en el accidente de Barajas, siguiendo las recomendaciones para la identificacin y la custodia de las
muestras anteriormente sealadas. En el caso Yakolev-42,
en el que hubo que exhumar 21 cadveres al cabo de un ao
y medio de la tragedia, para confirmar los errores de identificacin y realizar la entrega correcta de los cadveres a
sus familiares, las muestras de eleccin fueron las piezas
dentales y, en su defecto, muestras de tejido seo compacto. En todos los casos se obtuvieron cantidades suficientes
de ADN humano para la obtencin de perfiles genticos de
ADN nuclear.

Muestras ante mrtem y de referencia de

familiares
Las muestras de referencia recomendadas para realizar
anlisis genticos comparativos con las muestras post mrtem son de 2 tipos:
Muestras ante mrtem del fallecido. Generalmente, objetos personales del mbito familiar (cepillos de dientes,
maquinillas de afeitar, peines, cepillos, ropa interior...) o
muestras procedentes del mbito hospitalario (biopsias,
citologas, sangre...).
Muestras biolgicas (saliva o sangre) de familiares directos del fallecido. Por orden de preferencia, seran:
1. Ascendientes o descendientes directos: padre y madre
biolgicos del fallecido o cnyuge e hijos del fallecido,
para estudios de paternidad con marcadores STR autosmicos.
2. Hermanos del fallecido: con estos familiares se reduce
bastante el poder de discriminacin mediante marcadores STR autosmicos. Si la vctima es un varn, es ms
recomendable la obtencin de muestras de hermanos varones para investigar la lnea paterna mediante marcadores de cromosoma Y, adems de la lnea materna mediante ADN mitocondrial.

La identificacin gentica en grandes catstrofes: avances cientficos y normativos en Espaa

3. Otros familiares que compartan con el fallecido la lnea
materna o paterna.
En todo caso, y al igual que con los restos humanos, la
identificacin de los familiares y de las muestras ante mortem debe realizarse mediante un sistema nico y sencillo,
que se mantendr invariable durante el proceso; se utilizarn los formularios oficiales aprobados en cada caso (Anexo
VII.4 y Anexo VII.5 del Real Decreto 32/2009, respectivamente). Adems, el equipo de recogida de muestras de referencia debe estar constituido por personas formadas y
entrenadas que debern evaluar a los familiares o las muestras ante mrtem ms adecuadas en cada caso.
De acuerdo al Artculo 28.3 del Real Decreto 32/2009, los
equipos de recogida de datos ante mrtem estarn constituidos por funcionarios de las Fuerzas y Cuerpos de Seguridad del Estado y policas autonmicas, personal mdico forense y del INTCF, y entre sus funciones se incluye la de
obtener muestras biolgicas de familiares directos y/o
muestras ante mrtem del fallecido para anlisis de ADN
(Artculo 29.e).
Sin lugar a dudas, y de acuerdo con la experiencia del
INTCF en las tres catstrofes que abordamos en el presente
trabajo, los familiares de eleccin son los ascendientes y
descendientes directos de las vctimas y especialmente el
padre y la madre biolgica, o el cnyuge e hijos del fallecido, que permitirn realizar estudios de paternidad con un
muy alto poder de discriminacin gentica. En el caso de
paternidades defectivas (con un solo progenitor), como veremos ms adelante, hay que extremar los criterios de interpretacin, as como los umbrales de identificacin, ya
que se pueden dar con cierta frecuencia compatibilidades
genticas fortuitas entre individuos no relacionados.
Con respecto a las muestras ante mrtem debemos resaltar la gran importancia de los cepillos de dientes como
muestra de referencia ante mrtem que ofreci muy buenos resultados en la obtencin de ADN libre de contaminaciones para la identificacin de una gran proporcin de las
vctimas (en especial de vctimas inmigrantes sin familiares
en Espaa) del atentado del 11M. La mayor limitacin de
este tipo de muestras es que no se trata de muestras indubitadas, si no atribuidas y, por tanto, no pueden utilizarse
para excluir.

Anlisis de ADN
De acuerdo con el Artculo 34 del Real Decreto 32/2009, los
laboratorios para anlisis del ADN en la identificacin gentica de vctimas de catstrofes son: el INTCF, que actuar
adems como laboratorio de referencia; la Comisara General de Polica Cientfica del Cuerpo Nacional de Polica, del
Ministerio del Interior; el Servicio de Criminalstica de la
Guardia Civil, del Ministerio del Interior; los Laboratorios de
los Institutos de Medicina Legal, y los laboratorios de las
Policas Autonmicas (en el caso de que el suceso se produzca en comunidades autnomas que hayan recibido traspasos
en materia de seguridad). Esos laboratorios procedern a
un reparto equitativo de las muestras post mrtem, ante
mrtem y de familiares para anlisis de ADN, con el nimo
de garantizar la eficacia y la rapidez del proceso de identi-

23

ficacin, y actuarn de forma coordinada tanto en la obtencin de los perfiles genticos, como en el proceso de comparacin sistemtica de perfiles de ADN en bases de datos
automatizadas (Artculo 35.1).
Las principales dificultades a las que se puede enfrentar
el laboratorio de ADN y que condicionan la realizacin de
las identificaciones son:
El gran nmero de muestras biolgicas que gestionar y
perfiles de ADN que obtendr.
Las caractersticas de las muestras que se deben analizar:
su estado de conservacin o degradacin (obteniendo,
por ejemplo, en ocasiones perfiles de ADN parciales), el
bajo contenido en ADN o la contaminacin con otras
muestras, factores todos ellos que determinan el tipo de
anlisis que se debe realizar.
La disponibilidad de muestras de referencia para realizar
las comparaciones con las muestras de los cadveres post
mrtem, lo que condiciona la estrategia de la identificacin y su eficacia.
La gestin de la comparacin de los perfiles de ADN estructurados en diferentes ndices requerir de programas
informticos especficos de bsqueda en bases de datos
para comparar de forma automatizada el gran nmero de
perfiles genticos generados, as como realizar los clculos bioestadsticos necesarios en cada coincidencia o cruce.
El procedimiento de anlisis consiste bsicamente en la
obtencin del ADN (extraccin de ADN) de las muestras post
mrtem y de referencia, la cuantificacin especifica del
ADN humano y el anlisis de diversos polimorfismos de ADN
que presentan distintos tipos de herencia (mendeliana, paterna o materna, segn los casos) mediante tcnicas de amplificacin gnica o reaccin en cadena de la polimerasa
(PCR) para la obtencin de los perfiles genticos.
En los ltimos aos se han producido grandes avances
tanto en las tcnicas de extraccin de ADN, como en los
mtodos especficos de cuantificacin de ADN humano. En
concreto, el desarrollo de sistemas de extraccin de ADN
basados en bolas magnticas recubiertas de slice ha posibilitado el desarrollo de diversas plataformas robotizadas de
extraccin de ADN de alto rendimiento lo que ha reducido
considerablemente el tiempo del anlisis8. Por otro lado, la
implementacin en los laboratorios de gentica forense de
sistemas de PCR a tiempo real para la cuantificacin especfica de ADN humano, as como para la determinacin de
otros datos cualitativos (estado de degradacin del ADN,
presencia de inhibidores de la PCR, diagnstico de sexo,
etc.), ha mejorado enormemente la calidad de los perfiles
de ADN9,10.
La tecnologa preferida para la identificacin de vctimas
de grandes catstrofes es el estudio de un conjunto de marcadores STR autosmicos, que son regiones cortas de ADN
repetitivo nuclear que estn distribuidas en los 22 cromosomas autosmicos humanos y que presentan una alta variabilidad de tamao entre los individuos de la poblacin y se
heredan de forma mendeliana (es decir, se trasmiten de
forma independiente al 50% por cada uno de los progenitores). Son marcadores de eleccin en las grandes catstrofes
debido a: su alto grado de polimorfismo gentico, su peque-

24

G. Vallejo et al

Tabla 2 Caractersticas metodolgicas de los anlisis de ADN en las tres catstrofes

Catstrofes

Accidente areo Yakolev-42

(2003)

Atentado terrorista,
11 de marzo, Madrid (2004)

Fallecidos (n)
Anlisis genticos

Comparacin en bases
de datos

74
191
STR autosmicos,
STR autosmicos, ADNmt
STR cromosoma Y
AB GP Module
CODIS

Accidente areo Barajas

(2008)
154*
STR autosmicos,
STR cromosoma Y, ADNmt
CODIS

ADNmt: ADN mitocondrial; STR: short tandem repeats.

*Ciento cincuenta y tres fallecidos el da del siniestro y 1 fallecido 3 das despus

o tamao (que los hace susceptibles de ser analizados con

muy alta sensibilidad mediante PCR, incluso en muestras
con bajo contenido y ADN degradado), la posibilidad de realizar un anlisis simultneo de un gran nmero de regiones
STR (multiplex-PCR) y la existencia de sistemas electroforticos de alta resolucin que permiten una determinacin
muy fiable de las variantes allicas. Los STR ms utilizados
son los que presentan una unidad de repeticin de 4 pares
de bases (tetranucletidos) y algunos que presentan una
unidad de repeticin de 5 pares de bases (pentanucletidos), por lo que se alcanza un tamao de 150 a 400 pares de
bases. Hoy da con los kits comerciales de multiplex-PCR se
estudian simultneamente 15 STR autosmicos ms la amelogenina (marcador del sexo); son sistemas altamente validados en los laboratorios de gentica forense de todo el
mundo. Para ciertos casos (p. ej., paternidades defectivas),
sin embargo, ser necesario tener validados otros marcadores STR autosmicos complementarios o alternativos para
aumentar el poder de discriminacin. En ocasiones, las
muestras obtenidas de las catstrofes estn afectadas de
forma severa por la degradacin, por tanto su ADN se encontrar muy daado, y slo se recuperan fragmentos de
pequeo tamao de ADN genmico, entonces ser preciso
recurrir a los marcadores mini-STR (< 150-200 pares de bases)11,12 o SNP (single nucleotide polymorphism), dependiendo del grado de degradacin (< 100 pares de bases). En
el caso de los SNP, y debido a su bajo poder de discriminacin (ya que se trata de marcadores biallicos en la mayora
de los casos), ser necesario estudiar un gran nmero de
marcadores, 50-60 SNP, para alcanzar el suficiente poder
de discriminacin requerido en el campo de la identificacin gentica humana.
Frecuentemente, en las grandes catstrofes se recurre al
anlisis de marcadores STR especficos de cromosoma Y
(STR-Y); son marcadores genticos que nicamente presentan los varones, que se transmiten por va paterna y que
adems no presentan recombinacin gentica; los polimorfismos se heredan en bloque o grupo de ligamiento en cada
transmisin padre-hijo, por tanto hablamos de haplotipos
de cromosoma Y. Su estudio se considera de especial utilidad cuando solo se dispone de muestras de referencia procedentes de familiares emparentados por lnea paterna o
como sistema de anlisis complementario en determinados
casos (p. ej., paternidades defectivas de hijos varones). En
la actualidad, existen tambin diversos kits comerciales de
multiplex-PCR validados para el anlisis simultneo en una

sola reaccin de 12-17 marcadores STR-Y a partir de muestras forenses. La limitacin de este anlisis reside en que,
dado que el cromosoma Y no est sujeto a recombinacin y
que su herencia es exclusivamente paterna, es menos variable entre los individuos (de hecho, todos los miembros de
una familia que compartan la lnea paterna tendrn el mismo haplotipo de cromosoma Y), por lo que, en general, se
utilizar de forma complementaria al estudio de otros marcadores.
El anlisis de los polimorfismos de secuencia de las regiones hipervariables (HV1 y HV2) del ADN mitocondrial (ADNmt)
mediante tcnicas de secuenciacin automtica es otra de
las herramientas complementarias utilizadas en la identificacin de vctimas en catstrofes. Debido a su herencia haplotpica exclusivamente materna, todos los miembros de una
familia que compartan la misma lnea materna tendrn el
mismo haplotipo de ADNmt y, por tanto, aquellos podrn utilizarse en anlisis genticos comparativos. Adems, el ADNmt
se encuentra en un alto nmero de copias por clula (aproximadamente 500 copias de ADNmt por cada copia de genoma
nuclear), lo que permite su aplicacin en muestras con escaso o nulo contenido en ADN nuclear. Como contrapartida, la
variabilidad gentica del ADNmt es mucho menor que la obtenida mediante el estudio de marcadores STR autosmicos
(recordemos que el ADNmt permite identificar linajes maternos ms que individuos). Su inconveniente, por tanto, es que
no tiene el suficiente poder de discriminacin como para
considerar la identificacin de un individuo como definitiva.
Por ello, lo normal es estudiarlo asociado a otros marcadores
genticos.
En el artculo de Budowle et al13 el lector puede encontrar una revisin sobre las ventajas y limitaciones de estos
tres grupos de marcadores genticos en la IVC.
En la tabla 2 se recogen los tipos de marcadores genticos utilizados en las tres catstrofes en las que ha participado el INTCF.

Anlisis comparativos en base de datos

y criterios de coincidencia
El anlisis gentico comparativo de los perfiles de ADN obtenidos de las muestras post mrtem y las muestras de referencia (ante mrtem y familiares) en grandes catstrofes requiere la utilizacin de herramientas bioinformticas que permitan
comparar de forma sistemtica un gran nmero de perfiles

La identificacin gentica en grandes catstrofes: avances cientficos y normativos en Espaa

genticos con distintos tipos de herencia (STR, SNP, STR-Y y
ADNmt) mediante distintos algoritmos de bsqueda.
En todos los casos se deben establecer al menos 3 ndices
de bsqueda:
ndice de perfiles genticos procedentes de cadveres y
restos humanos.
ndice de perfiles genticos procedentes de las muestras
de referencia ante mrtem.
ndice de perfiles genticos procedentes de las muestras
de referencia de familiares.
En el caso de marcadores autosmicos, ser necesario
desarrollar al menos 2 algoritmos de bsqueda:
Coincidencia total: se buscan perfiles idnticos o concordantes para todos los marcadores analizados, con el fin
de encontrar muestras que pudieran tener el mismo origen. (Ser el algoritmo utilizado para comparar los perfiles genticos del ndice de cadveres y restos entre s
durante los estudios de reasociacin entre cadveres y
restos, as como para comparar los perfiles de cadveres
y restos humanos con los perfiles del ndice de muestras
ante mrtem).
Coincidencia parcial por parentesco: se buscan perfiles
que compartan al menos un alelo para todos los marcadores analizados, como cabra esperar en una relacin padre o madre/hijo o hija, teniendo en cuenta la posibilidad de inconsistencias aisladas por posibles mutaciones.
Ser el algoritmo utilizado para comparar los perfiles genticos del ndice de cadveres y restos con los perfiles
genticos del ndice de familiares (padres o hijos).
Para los marcadores STR de cromosoma Y y ADNmt es
necesario el algoritmo de coincidencia total con la posibilidad de una o dos discrepancias por posibles fenmenos,
como las mutaciones o las heteroplasmias.
Uno de los primeros programas desarrollados especficamente para la comparacin sistemtica de perfiles genticos en grandes catstrofes fue el programa Mass Disaster
Kinship Analysis Program (MDKAP)14, diseado en primer lugar para ayudar en la identificacin de vctimas del accidente areo del vuelo 111 de Swissair, 2 de septiembre de
1998, y posteriormente modificado para su uso en las identificaciones de vctimas del atentado del 11 de septiembre
en el World Trade Center de Nueva York. En la actualidad,
existe una versin comercial (programa Bloodhound, de la
compaa Anonamouse) que permite la bsqueda por lotes
de perfiles STR y una valoracin estadstica de parentesco
integrada con posibilidad de seleccin de las frecuencias
allicas por el usuario. Adems, permite trabajar con
diagramas grficos de los rboles genealgicos.
A raz de la catstrofe del World Trade Center, la compaa Gene Codes Corporation tambin desarroll otro potente programa llamado M-FYSis (Mass Fatality Identification
System)15, que permite la gestin de perfiles STR, perfiles
SNP y datos de secuenciacin de ADNmt, y diversos algoritmos de comparacin, as como la integracin de diversos
clculos de parentesco. Adems, este programa permite la
integracin de otros datos biomtricos y la generacin automtica de informes.

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El sistema bioinformtico utilizado para el anlisis gentico comparativo en base de datos en las catstrofes del
atentado del 11M en Madrid y del accidente areo de Barajas fue el sistema CODIS (Combined DNA Index System)16,
desarrollado por el FBI. El software que gestiona el sistema
CODIS se compone de diversos mdulos interconectados que
permiten el registro manual o la importacin electrnica de
perfiles STR (aislados o por lotes), asociados a especmenes
e ndices determinados y su comparacin sistemtica de
acuerdo con diferentes algoritmos en forma de uno contra
todos o todos contra todos. Permite, adems, la edicin de
las coincidencias observadas y la comunicacin externa con
otros laboratorios de la red CODIS. Una de las limitaciones
de la versin actual del sistema CODIS para su aplicacin en
catstrofes es que no integra el clculo estadstico de las
compatibilidades observadas y cierta lentitud en las bsquedas por lotes cuando se maneja un nmero alto de perfiles.
En cualquier caso, hemos de recordar aqu que el software CODIS es el sistema elegido en la actualidad en la base
nacional de datos de ADN, que depende orgnicamente de la
Secretara de Estado de Seguridad del Ministerio del Interior,
donde se integran de forma nica los ficheros de la Polica
Nacional, la Guardia Civil, las Policas Autonmicas con competencia (en la actualidad Ertzaintza y Mossos dEsquadra)
y los ficheros de los distintos departamentos del INTCF. Esa
base de datos de ADN fue recientemente regulada segn Ley
Orgnica 10/2007 (Ley Orgnica reguladora de la base de
datos policial sobre identificadores obtenidos a partir del
ADN)17, con dos objetivos fundamentales: el de la investigacin criminal y el de la identificacin de restos cadavricos
o de averiguacin de personas desaparecidas.
En el caso de la identificacin de las vctimas del accidente areo del Yakolev-42 en Turqua, se utiliz un mdulo
de comparacin gentica denominado GPC (Genetic Profile
Comparisons), desarrollado dentro del sistema LIMS de
Applied Biosystems. Este programa admite datos de STR autosmicos y permite hacer bsquedas de perfiles con los
algoritmos de coincidencia total y coincidencia parcial por
parentesco18.

Evaluacin bioestadstica: la significacin

de las coincidencias genticas
Como ya hemos visto, una caracterstica general de la investigacin en grandes catstrofes es el alto nmero de
comparaciones genticas ciegas que hay que realizar (miles
o millones) para correlacionar los perfiles genticos de las
vctimas con las muestras de referencia (ante mrtem o de
familiares). En estas circunstancias, es previsible obtener
una proporcin de coincidencias fortuitas entre muestras
no relacionadas genticamente.
La significacin estadstica de una coincidencia total para
13-15 marcadores STR entre un cadver y un resto humano
o entre un cadver y una muestra ante mrtem es generalmente suficiente para declarar una identificacin como probada ofreciendo resultados de LR (likehood ratio) por encima de 1010, es decir, que los resultados de la prueba
gentica (la concordancia observada entre ambas muestras)
son 1010 ms probables si consideramos que ambas muestras

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G. Vallejo et al

proceden de un mismo individuo con respecto a considerar

que se trata de muestras no relacionadas genticamente.
Por otro lado, la significacin estadstica de una compatibilidad gentica por parentesco (p. ej., compatibilidad de
al menos una variante allica en todos los marcadores analizados, que es lo que cabe esperar en una relacin padre/
hijo) entre un perfil gentico del ndice de cadveres y un
perfil gentico del ndice de familiares es mucho menor, y
se pueden dar compatibilidades falsas entre dos muestras
no relacionadas genticamente (incluso con valores de LR
del orden de 103 en algunos casos), cuya incidencia ser
proporcional al nmero de vctimas y, por tanto, al de comparaciones ciegas realizadas.
En el caso del Yakolev-42, en el que se realizaron 8.000
comparaciones entre 85 muestras post mrtem (pertenecientes a 74 cadveres) y 98 muestras de familiares (pertenecientes a 56 grupos familiares), se realiz un estudio de
la incidencia de coincidencias fortuitas al azar con un solo
familiar y se observ una incidencia de un 1% (80 compatibilidades fortuitas) si slo se analizaban 13 marcadores STR,
que se redujo a una sola compatibilidad falsa cuando se
consideraban 15 marcadores STR. Una incidencia similar de
compatibilidades falsas se observ en el caso del 11M, donde en un caso fue necesario realizar un anlisis complementario de STR autosmicos y de ADNmt para la identificacin
de un cadver que era compatible con dos muestras de grupos familiares distintos tras el anlisis de 15 STR autosmicos18.
Por tanto, en el caso de paternidades defectivas (con un
solo progenitor) es conveniente la realizacin de anlisis
complementarios para obtener valores de LR > 10.000. Este
fue el umbral utilizado por el INTCF en la identificacin de
las vctimas del Yakolev-42 cuando slo se dispona de un
progenitor, umbral alcanzado en todos los casos con el anlisis de STR autosmicos adicionales. En el caso del accidente de Barajas, se decidi, adems, realizar anlisis complementarios de STR del cromosoma Y (en paternidades
defectivas de hijos varones) y de ADNmt (en maternidades
defectivas) para aumentar la fiabilidad de las identificaciones.
Obviamente, cabe esperar una mayor incidencia de compatibilidades fortuitas cuando se consideran otro tipo de
relaciones de parentesco entre dos muestras (hermanos,
medio hermanos, tos, primos, etc.) que deben de abordarse mediante un anlisis integrado de marcadores autosmicos, de cromosoma Y y de ADNmt.

En relacin con ello, el Real Decreto 32/2009 establece la

necesidad de realizar una revisin conjunta de los resultados
de identificacin de las distintas disciplinas forenses a travs
del Centro de Integracin de Datos, formado por una Oficina
Forense y una Oficina de las Fuerzas y Cuerpos de Seguridad
del Estado y de las policas autonmicas, cada una como
aglutinante de las actividades propias de las instituciones
implicadas, donde convergern todos los resultados finales
propios de cada institucin y donde tambin se integrar el
personal del INTCF. Posiblemente la falta de un verdadero
centro multidisciplinar de integracin de datos coparticipado por todos los profesionales sea una de las principales carencias en la investigacin de grandes catstrofes en Espaa,
que habr que subsanar en futuras actuaciones.
El desarrollo de plataformas bioinformticas (tales como
el sistema Plass Data DVI System International, en desarrollo por INTERPOL)19 que permitan una integracin y gestin
informatizada de todos los datos de identificacin es en la
actualidad una demanda de los equipos multidisciplinares
que colaboran en la investigacin de las catstrofes y ser,
sin duda, una herramienta de gran ayuda que acelerar el
proceso de identificacin y su fiabilidad.
El Real Decreto 32/2009 establece tambin la creacin
de la Comisin Tcnica Nacional para Sucesos con Vctimas
Mltiples, que ser un rgano de vigilancia fundamental
para evaluar los resultados de las actuaciones en catstrofes y proponer las iniciativas tcnicas y organizativas que
sean necesarias en el futuro.
Por ltimo, hemos de hacer referencia a la reciente regulacin de la composicin y funciones de la Comisin Nacional para el uso Forense del ADN (Real Decreto 1977/2008 de
28 de noviembre)20, rgano regulador sobre aspectos cientfico-tcnicos, jurdicos y bioticos que garanticen el buen
funcionamiento de la base de datos nacional de perfiles de
ADN y que establecer en el futuro los criterios de acreditacin de los laboratorios, as como los distintos protocolos
tcnicos oficiales.

Perspectivas futuras

1. Un hecho decisivo para garantizar la correcta identificacin de las vctimas en una catstrofe, y aplicado nicamente en Espaa en el accidente de Barajas, fue la recogida de muestras para anlisis de ADN en todos los
cadveres y restos humanos, adaptndose a las recomendaciones internacionales y del Real Decreto 32/2009. Actuacin fundamental y requisito bsico para la eficacia del
proceso identificativo, independientemente de que los cadveres hayan sido identificados o no dactilarmente.
2. El procedimiento de recogida, preservacin y transporte
de las muestras se desarroll adecuadamente en las tres
catstrofes conforme a las recomendaciones internacionales y del Real Decreto 32/2009.

Hemos visto a lo largo de este trabajo la gran utilidad de las

modernas tcnicas de identificacin gentica en la identificacin de vctimas en grandes catstrofes; sin embargo, su
fiabilidad depender en gran medida del estado de las
muestras post mrtem y de la disponibilidad de muestras de
referencia adecuadas, y en cualquier caso ser fundamental, siempre que sea posible, hacer una valoracin integrada de los datos genticos con el resto de los otros datos
biomtricos (antropolgicos, odontolgicos, dactiloscpicos, etc.) para confirmar las identificaciones y reducir el
riesgo de errores.

Consideraciones finales sobre la experiencia

del INTCF en la identificacin gentica en las
grandes catstrofes
La revisin de los procedimientos aplicados para la identificacin gentica en las tres catstrofes comentadas en el
presente trabajo permite hacer las siguientes consideraciones:

La identificacin gentica en grandes catstrofes: avances cientficos y normativos en Espaa

3. L
 a identificacin de la muestra con numeracin nica y la
cadena de custodia fueron adecuadas en todas las catstrofes.
4. La recogida de datos de muestras post mrtem en un
formulario estandarizado nacional se utiliz por primera
vez en el accidente de Barajas, siguiendo las recomendaciones del Real Decreto 32/2009, actuacin que normaliza la documentacin de recogida de muestras y garantiza
esta fase del proceso siempre que se acompae del cumplimiento de la cadena de custodia.
5. Los anlisis de ADN, estudios comparativos en base de
datos y criterios de coincidencia utilizados, permitieron
asignar las identificaciones genticas en tiempo adecuado y con fiabilidad en todos los casos.

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