Colilert mtodo para coliformes totales y Escherichia coli.

Actualizado enero 2007

Colilert es un comercialmente disponible enzima-sustrato lquido de caldo de cultivo

medio (IDEXX Laboratories, Inc., Westbrook, Maine) que permite la deteccin
simultnea de coliformes totales y Escherichia coli (E. coli).Se encuentra disponible en
el nmero ms probable (NMP) o el formato de presencia / ausencia (PA). El mtodo
NMP se ve facilitada por el uso de una bandeja de incubacin especialmente diseadas
desechable llamado el Quanti-Tray . El mtodo de PA se puede hacer utilizando
cualquier botella estril de tamao apropiado. Ambos mtodos se pueden hacer en el
campo o en el laboratorio.
TEORA:
Dos sustratos de enzimas se incluyen en Colilert-un cromgeno que reacciona con la
enzima que se encuentra en coliformes totales (galactosidasa), y un fluorgeno que
reacciona con una enzima que se encuentra en E. coli(glucuronidasa). Despus de 24
horas de incubacin a 35 C, un total de reaccin-coliforme positiva se convierte en el
medio amarillo;
una E. coli-positivo hace
que el medio de
reaccin a una
fluorescencia bajo la luz
ultravioleta de onda
larga (366 nm).
USO:
El mtodo Colilert est
aprobado para su uso
con agua potable. Se
puede utilizar para
controlar todos los tipos
de agua, incluida el
agua que es alta en los
sedimentos en
suspensin, sino que
tambin se puede
utilizar para controlar
los sedimentos. El
formato PA es adecuado
para su uso en estudios
de agua potable o aguas subterrneas, cuando slo un resultado presencia o ausencia
se necesita. No se requiere equipo especial para utilizar el formato PA. El formato de
NMP se puede utilizar con todas las aguas, sin embargo, requiere el uso de una
mquina especial que sella la bandeja de incubacin. Quanti-Tray proporciona
recuentos de 1 a 200 NMP/100 mL. Quanti-Tray/2000 provee el conteo de 1 a 2400
NMP/100 mL.Ambas pruebas pueden proporcionar una gama ms amplia mediante la
dilucin de la muestra de 1:10 o 1:100 con agua destilada o desionizada estril.

Ver Colilert Quanti-Tray instrucciones de agua ( Apndice D ) y sedimentos ( Anexo

D1 ).
Ver Colilert presencia / ausencia de direccin ( Apndice E ).
MEDIOS DE COMUNICACIN:
El sustrato Colilert: Colilert, Cat WP020 (20 pruebas) o Cat WP200 (200 tests), O
Colilert-18, Cat WP020-18 (20 pruebas) o Cat WP200-18 (200 pruebas)

Bandejas de incubacin (el gato WQT100 (Quanti-Tray) o Cat WQT-2K (Quanti-Tray/2000)

El sellador Quanti-Tray (Cat WQTS2X-115) es comprado por el fabricante (IDEXX, 800/321-0207).

Estndar de recogida de muestra de las botellas puede ser utilizado. Debido a que el
sustrato Colilert ya est tamponada, al preparar diluciones, utilizar agua destilada o
desionizada estril.
REFERENCIAS:
American Public Health Association, American Water Works Association y la Water
Pollution Control Federation, 2004, Mtodos estndar para el anlisis de aguas y aguas
residuales (21 ed.): Washington, DC American Public Health Association, Seccin
9223.
Otras referencias estn disponibles
en http://www.idexx.com/water/colilert/moreinfo.jsp .
NWIS cdigos de parmetros:
50569 coliformes totales, definidas sustrato tecnologa, ms probable nmero por 100
ml
50468 E. coli, definido-sustrato tecnologa, ms probable nmero por 100 ml
99595 coliformes totales, definido-sustrato tecnologa, la presencia o ausencia en 100
ml
99596, E. coli, definido-sustrato tecnologa, la presencia o ausencia en 100 ml

La Escherichia coli (pronunciado /eske'rikia 'koli/), tambin conocida por la abreviacin de su

nombre, E. coli, es quizs el organismo procariota ms estudiado por el ser humano. Se trata de
una enterobacteria que se encuentra generalmente en los intestinos animales, y por ende en
las aguas negras, pero se lo puede encontrar en todos lados, dado que es un organismo ubicuo.
Fue descrita por primera vez en 1885 por Theodore von Escherich, bacterilogo alemn, quien la
denomin Bacterium coli. Posteriormente la taxonoma le adjudic el nombre de Escherichia coli,
en honor a su descubridor.
Esta y otras bacterias son necesarias para el funcionamiento correcto del proceso digestivo,
adems de producir las vitaminas B y K. Es un bacilo que reacciona negativamente a latincin de

Gram (gramnegativo), es anaerobio facultativo, mvil por flagelos peritricos (que rodean su
cuerpo), no forma esporas, es capaz de fermentar la glucosa y la lactosa y su prueba de IMVIC es
++--.
Es una bacteria utilizada frecuentemente en experimentos de gentica y biologa molecular.
ndice
[ocultar]

1 Funcin normal
2 Escherichia coli O157:H7
3 Patogenia

3.1 Virulencia

3.2 Infecciones urinarias

4 Tratamiento
5 Clasificacin

5.1 Escherichia coli enteropatognica (ECEP)

5.2 Escherichia coli enterotoxignica (ECET)

5.3 Escherichia coli enteroinvasiva (ECEI)

5.4 Escherichia coli enterohemorrgica o verotoxignica (ECEH)

5.5 Escherichia coli enteroagregativa o enteroadherente (ECEA)

5.6 Escherichia coli de adherencia difusa (ECAD)

6 Brotes epidmicos

6.1 Brote epidmico en Alemania 2011

7 Vase tambin

8 Referencias
9 Enlaces externos

[editar]Funcin

normal

La Escherichia coli, en su hbitat natural, vive en los intestinos de la mayor parte de

los mamferos sanos. Es el principal organismo anaerobio facultativo del sistema digestivo. En
individuos sanos, es decir, si la bacteria no adquiereelementos genticos que codifican factores
virulentos, la bacteria acta como un comensal formando parte de la flora intestinal y ayudando as
a la absorcin de nutrientes. En humanos, la Escherichia coli coloniza el tracto gastrointestinal de
un neonato adhirindose a las mucosidades del intestino grueso en el plazo de 48 horas despus
de la primera comida.
[editar]Escherichia

coli O157:H7

Artculo principal: Escherichia coli O157:H7.

La Escherichia coli O157:H7 es una de las cientos de cepas de la Escherichia coli. Aunque la
mayora de las cepas son inocuas y viven en los intestinos de los seres humanos y animales
saludables, esta cepa produce una potentetoxina y puede ocasionar enfermedades graves como
el sndrome urmico hemoltico.
La Escherichia coli O157:H7 fue reconocida inicialmente como causa de enfermedad
en 1982 durante un brote de diarrea aguda con sangre en EE. UU. Se determin que el brote se
deba a hamburguesas contaminadas. Desde entonces, la mayora de las infecciones han
provenido de comer carne de vacuno picada insuficientemente cocinada. El escritor Robin
Cook escribi una novela sobre el tema titulada Toxina.
En 1996, cerca de Seattle se produjo un brote a causa de esta bacteria, que se encontr en
botellas de zumo de manzana de la marca Odwalla Inc.. Muchas personas, entre ellas bebs y
nios, murieron despus de tomar este zumo. La bacteria entr en las botellas porque las
manzanas que se exprimieron contenan excrementos de venados de la zona y no hubo ningn
tipo de pasteurizacin.
Se diferencia de las otras Escherichia coli en que no fermenta el sorbitol, no crece a 44 C y no
produce -glucoronidasa. La combinacin de letras y nmeros en el nombre de la bacteria se
refiere a los marcadores antignicosespecficos que se encuentran en su superficie y la distingue
de otros tipos de Escherichia coli:

El antgeno somtico O, proveniente del lipopolisacrido de la pared celular;

El antgeno flagelar H, compuesto por 75 polisacridos.

El grupo de riesgo comprende prcticamente a todas las personas, inmunocompetentes o no. Los
nios menores de 5 aos de edad con problemas de alimentacin, as como los ancianos son los
ms susceptibles de sufrir complicaciones graves.

[editar]Patogenia
La Escherichia coli puede causar infecciones intestinales y extraintestinales generalmente graves,
tales como infecciones del aparato
excretor, cistitis, meningitis, peritonitis, mastitis, septicemia y neumona Gram-negativa.
[editar]Virulencia
La Escherichia coli est dividida por sus propiedades virulentas, pudiendo causar diarrea en
humanos y otros animales. Otras cepas causan diarreas hemorrgicas por virtud de su agresividad,
patogenicidad y toxicidad. En muchos pases ya hubo casos de muerte con esta bacteria.
Generalmente le pasa a nios entre 1 ao y 8 aos. Causado generalmente por la contaminacin
de alimentos, y posterior mala coccin de los mismos, es decir, a temperaturas internas y externas
menores de 70 C.
[editar]Infecciones

urinarias

Artculo principal: Infeccin urinaria.

Son ms comunes en mujeres por la corta longitud de la uretra (25 a 50 mm, o bien 1 a
2 pulgadas) en comparacin con los hombres (unos 15 cm, o unas 7 pulgadas). Entre los ancianos,
las infecciones urinarias tienden a ser de la misma proporcin entre hombres y mujeres. Debido a
que la bacteria invariablemente entra al tracto urinario por la uretra (una infeccin ascendente), los
malos hbitos sanitarios pueden predisponer a una infeccin, sin embargo, otros factores cobran
importancia, como el embarazo, hipertrofia benigna o maligna de prstata, y en muchos casos el
evento iniciante de la infeccin es desconocido. Aunque las infecciones ascendentes son las
causantes de infecciones del tracto urinario bajo y cistitis, no es necesariamente esta la causa de
infecciones superiores como la pielonefritis, que puede tener origen hematgeno.
[editar]Tratamiento
El uso de antibiticos es poco eficaz y casi no se prescribe. Para la diarrea se sugiere el consumo
de abundante lquido y evitar la deshidratacin. Cuando una persona presenta diarrea no debe ir a
trabajar o asistir a lugares pblicos para evitar el contagio masivo. Sin embargo en algunas
patologas como la pielonefritis hay que considerar el uso de alguna cefalosporina endovenosa.
[editar]Clasificacin

Micrografa electrnica, de baja temperatura, de un cmulo de bacterias E. coli ampliado 10.000 veces. Cada cilindro
redondeado es un individuo.

Se distinguen seis cepas segn su capacidad patgena, -tambin se les puede

llamar virotipos-: Escherichia coli enteropatognica (ECEP), enterotoxignica (ECET),
enteroinvasiva (ECEI), enterohemorrgica (ECEH), enteroagregativa (ECEA) y de adherencia
difusa (ECAD).
[editar]Escherichia coli enteropatognica (ECEP)
Esta cepa causa diarrea en humanos, conejos, perros y caballos, al igual que la enterotoxignica,
pero la etiologa y los mecanismos moleculares de colonizacin son diferentes. Carece
de fimbrias y no produce las toxinas ST y LT, pero utilizan la protena intimina, una adhesina, para
adherirse a las clulas intestinales. Este virotipo posee una serie de factores de virulencia que son
similares a los que se encuentran en Shigella, como la toxina shiga. La adherencia a la mucosa
intestinal causa una reordenacin de la actina en la clula hospedante, que induce una
deformacin significativa. Estas bacterias son moderadamente invasivas: penetran en las clulas
hospedadoras provocando una respuesta inflamatoria. La causa principal de diarrea en los
afectados por esta cepa son seguramente los cambios provocados en la estructura de las clulas
intestinales.
[editar]Escherichia coli enterotoxignica (ECET)
Se parece mucho a Vibrio cholerae, se adhiere a la mucosa del intestino delgado, no la invade, y
elabora toxinas que producen diarrea. No hay cambios histolgicos en las clulas de la mucosa y
muy poca inflamacin. Produce diarrea no sanguinolenta en nios y adultos, sobre todo en pases
en vas de desarrollo, aunque los desarrollados tambin se ven afectados. Emplea varias toxinas,
incluyendo la enterotoxina resistente al calor y la enterotoxina termolbil.
[editar]Escherichia coli enteroinvasiva (ECEI)
Es inmvil, no fermenta la lactosa. Invade el epitelio intestinal causando diarrea sanguinolenta en
nios y adultos. Libera el calcio en grandes cantidades impidiendo la solidificacin sea,
produciendo artritis y en algunos casosarterioesclerosis. Es una de las E. coli que causa ms dao
debido a la invasin que produce en el epitelio intestinal.
[editar]Escherichia coli enterohemorrgica o verotoxignica (ECEH)
Artculo principal: Escherichia coli enterohemorrgica.
Vase tambin: Toxina Shiga.

La convencin internacional de nomenclatura de patgenos ha recomendado el uso de STEC

(Shiga Toxin Escherichia coli) para este grupo, debido a que estas bacterias producen una toxina
citotxica para clulas Vero de cultivo de similaridad estructural a la toxina producida por Shigella
dysenteriae. Las STEC producen verotoxinas que actan en el colon. Sus sntomas son: primero
colitis hemorrgica, luego sndrome urmico hemoltico (lo anterior ms afeccin del rin, posible
entrada en coma y muerte), y por ltimo, prpura trombocitopnica trombtica (lo de antes ms
afeccin del sistema nervioso central). Esta cepa no fermenta el sorbitol y posee un fago, donde se
encuentran codificadas las verotoxinas, tambin llamadas "Toxinas Shiga", no posee

una fimbria formadora de mechones, en vez de esto posee una fimbria polar larga que usa para
adherencia.
[editar]Escherichia coli enteroagregativa o enteroadherente (ECEA)
Slo encontrada en humanos. Son llamadas enteroagregativas porque tienen fimbrias con las que
aglutinan clulas en los cultivos de tejidos. Se unen a la mucosa intestinal causando diarrea
acuosa sin fiebre. No son invasivas. Producen hemolisina y una enterotoxina ST similar a la de las
enterotoxignicas. se le asocian dos toxinas:

toxina termoestable enteroagregante (EAST)

toxina codificada por plasmidos (PET)

[editar]Escherichia coli de adherencia difusa (ECAD)

Se adhiere a la totalidad de la superficie de las clulas epiteliales y habitualmente causa
enfermedad en nios inmunolgicamente no desarrollados o malnutridos. No se ha demostrado
que pueda causar diarrea en nios mayores de un ao de edad, ni en adultos y ancianos.
[editar]Brotes
[editar]Brote

epidmicos

epidmico en Alemania 2011

Artculo principal: Escherichia coli enterohemorrgica.

Artculo principal: Brote del sndrome urmico hemoltico de 2011.

En Alemania en el ao 2011 se ha informado de un gran brote epidmico producido por el serotipo

enterohemorrgico Escherichia coli O104:H4.1 2 Se trata de cerca de 3255 casos, segn la OMS,
con 33 fallecidos.3 Se encontraron indicios de que pudiera haber surgido en una explotacin
alemana de brotes de soja, pero ya se han descartado como foco de la intoxicacin. 4 Sin embargo
el gobierno alemn seal en principio a Espaa como origen de los productos vegetales
implicados en la intoxicacin alimentaria, dando dos fuentes de produccin en Mlaga y Almera.
Holanda es otro pas sealado. Tras el anlisis de las heces de los pacientes, se ha descartado el
origen espaol.5Pero se desconoce el origen de la bacteria en toda la cadena hasta el consumidor,
desde la produccin, el transporte y la distribucin, por lo que no se puede descartar la
manipulacin de productos en Alemania, que ha sido sealada como el pas de origen de la
intoxicacin ocurrida en viajeros que han tocado suelo Alemn. No se ha descrito jams, tampoco
en el pasado, ningn caso en Espaa de una infeccin por la bacteria implicada en el brote
alemn. En Espaa existe un posible caso de infeccin por el consumo de verduras frescas en
Alemania.6 7 8 La cepa de la bacteria E. coli aparecida en Alemania es resistente a ocho tipos
distintos de antibitico, segn un equipo de investigadores chinos, que lograron secuenciar el
genoma del organismo. Los investigadores del Instituto de Genmica de Pekn (BGI) han
descartado antibiticos como la penicilina, las sulfamidas, la cefalotina o la estreptomicinacomo
posible solucin a la enfermedad debido a los genes que la hacen resistente. 9