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Primero son los alcoholes corrientes que sirve para hidratar la muestra
Y las parafina
Luego de ello el corte se coloca en agua fra para evitar que se desparafine
antes de colocar el portaobjeto
Ya pasado eso se lleva a bao de flotacin a 37 grados para que se expanda la muestra
Sumergir los preparados histolgicos en xilol para eliminar los excesos de parafina. El xilol
es un alcohol txico pero existen reactivos (como el Hemo-D) que ejercen la misma funcin
aclarante de parafina sin la toxicidad del xilol.
Luego pasan por una serie de alcoholes en concentracin decreciente para rehidratar la
muestra (100, 95 y 70).
Se sumerge en hematoxilina por 10 minutos, luego se lava en agua para eliminar excesos y
se pasa rpidamente por alcohol cido.
Se lava nuevamente
Se pasa por otra serie de alcoholes, esta vez en orden creciente (70, 95 y 100) para
deshidratar la muestra y que se pueda realizar el montaje con un pegamento no soluble en agua.
INTRODUCCIN
El uso de tinciones de tejidos para facilitar su observacin microscpica se inici con la
hematoxilina-eosina en el siglo XIX. En el primer tercio del siglo XX se introduce la
histoenzimologa que utiliza tejidos sin fijar y de la que quedan nicamente restos, como los
estudios con DPNasa y ATPasa en enfermedades musculares. La primera inmunohistoqumica
se realiz con anticuerpos fluorescentes sobre tejidos frescos como los que se utilizan actualmente
en diversas enfermedades de piel y rin. Los mtodos inmunoenzimticos (peroxidasa, aviditabiotina) que permitan amplificar la seal del cromgeno favorecieron la utilizacin de tejidos
fijados en formol e incluidos en parafina. Actualmente se utilizan polmeros sintticos para
amplificar la seal
La Histologa Parte de la biologa que estudia la composicin, la estructura y las caractersticas de
los tejidos orgnicos de los seres vivos
La Histoqumica se refiere a la demostracin por reacciones qumicas de afinidad entre u
componente celular o tisular y el colorante. Aun los laboratorios ms sencillos pueden contar con
algunas de estas tcnicas. Mencionano solo algunas de las mas frecuentemente usadas: PAS para
demostrar carbohidratos, membranas bsales y mucinas; para colgeno la Tricromica de Masson;
para fibras reticulares ; para fibras elsticas; Tinciones a base de plata para demostrar hongos como
la de G0
rocott y la de Gomori ; Ziehl -Neelsen para bacilo tuberculoso; Perls para depsitos de h.ierro; von
Kossa para calcio; Fontana para melanocitos y grnulos argentafines y Rojo Congo para material
amiloide
HISTOQUMICA
Es el estudio de los componentes tisulares y celulares por medio de colorantes especiales,
reacciones bioqumicas y reacciones inmunolgicas.
Tecnicas de histoquimica
Es el estudio qumico de los tejidos, independientemente del mtodo de anlisis empleado,
con el auxilio de los microscopios pticos (MO) y electrnico (ME).
Esta tcnica permite la identificacin y localizacin de compuestos o radicales qumicos en
las clulas y tejidos.
3 CIDOS NUCLICOS.
DNA .-Se usa la reaccin de FEULGEN que consiste :
- Hidrlisis del DNA con cido clorhdrico para extraer las bases pricas y dejar en
libertad los grupos aldehdicos del azucar.
- El reactivo de SCHIFF (PAS) reacciona con el aldehdo y forma un precipitado
rojo.
RNA.-Tiene gran afinidad por los colorantes bsicos (basoflia) lo que hace que se
tia intensamente con el AZUL DE TOLUIDINA o de METILENO.
4. PROTENAS
Su identificacin se basa en mtodos de deteccin de aminocidos.
- Reaccin de aminobenceno.
- Reaccin de Sakaguchi que detecta la arginina de las protenas bsicas como las
histonas y protaminas.
Para Dx. de proteinosis pulmonar.
5.- POLISACARIDOS
La reaccin ms usada es la del PAS (cido peridico-Schiff). El cido oxida a los
azucares en posicin 1-2 y deja grupos aldehdos libres que reaccionan con el
reactivo de SchifF dando un compuesto de color magenta . De este modo se
demuestra la presencia de:
- Glucgeno en el hgado y msculo.
- Depsito intracelular de glucgeno en enfermedades congnitas.
- Glucosaminoglicano o mucopolisacrido que forman parte de los proteoglicanos.
- Glucoprotenas.
Los azucares cidos tambin reaccionan con el colorante AZUL DE ALCIAN.
6.- ENZIMAS
FOSFATASA CIDA
CONCLUSIN
Sin duda la principal finalidad de la citologa cervical es poder diagnosticar lesiones precancerosas
o cncer incipiente, para poder as actuar sobre el mismo, cuando la lesin es todava curable. La
realizacin sistemtica de citologas a toda la poblacin desde los aos 60 ha disminuido de forma
muy importante el nmero de casos de cncer de cuello uterino. Por eso resulta imprescindible
realizar cada ao una citologa. Tambin es til para diagnosticar infecciones, as como alteraciones
inflamatorias y/o hormonales
Hoy en da es muy importante el hecho de poder diagnosticar y tratar con especificidad cualquier
enfermedad para as poder ofrecer al paciente el mejor tratamiento. En el laboratorio de Anatoma
Patolgica se desarrollan para ello tcnicas de histoqumica e inmuno-histoqumica.
CITOLOGA
El trmino "CITOLOGA" se refiere al estudio integral de la clula en sus mltiples aspectos:
estructurales, biofsicos, bioqumicos, fisiolgicos, patolgicos, nutricionales, inmunolgicos,
genticos, etc. A medida que el uso de la citologa ha sido implementado en la prctica mdica
cotidiana, se ha desarrollado un captulo muy importante de sta " La citologa clnica o
citodiagnstico ginecolgico."
Debe destacarse que existe una diferencia fundamental entre la citologa y la histopatologa; como
su nombre lo indica la histopatologa se refiere a la estructura y forma de los tejidos. As como los
estudios histolgicos requieren una biopsia, los estudios citolgicos en cambio, utilizan clulas
originadas en los distintos rganos y que representan el estado del tejido del cual se estn
desprendiendo.
El estudio citolgico permite:
1 - Detectar la patologa inflamatoria, al observar las alteraciones celulares causadas por diversos
factores: fsicos, qumicos y biolgicos como bacterias, hongos, virus y protozoos.
2 - Detectar lesiones premalignas del cuello uterino, donde se ha demostrado su mayor utilidad.
FACULTAD
CIENCIA DE LA SALUD
ESCUELA
TECNOLOGIA MDICA
CURSO
AUTOMATISACION EN
LABORATORIO CLINICO
INTEGRANTES
PEREZ ESPADA RICARDO
AZABACHE CABALLERO
MILAGROS