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excitado singlet
excitado triplet
fundamental singlet
Transio singlet triplet menos provvel que a singlet singlet
tempo mdio de vida no estado excitado triplet maior (>10-4 s) do que no singlet (10-5
a 10-8 s)
Linhas de ressonncia
- radiao emitida mesma energia (mesmo ) que a radiao absorvida
Deslocamento de Stokes
- radiao emitida menor energia (maior ) que a radiao absorvida
- parte da energia da absoro dissipada por processo de relaxao no
radiativa (relaxao vibracional) que ocorre a taxa elevada
- se a converso interna pouco importante espectros de absoro e
fluorescncia imagens especulares aproximadas e se sobrepem pela
linha de fluorescncia de ressonncia
125
4.3.2.2 - Fosforescncia
- retorno da molcula de um nvel eletrnico excitado do tipo triplet para o estado
fundamental com emisso de radiao eletromagntica
- transio T1 S0 baixa probabilidade tempo mdio no estado excitado T1
relativamente grande (>10-4 s)
- compete, com pouco sucesso, com os processos de converso interna e externa
no de espcies fosforescentes muito pequeno
- fosforescncia temperaturas baixas, meio viscoso, molculas adsorvidas em
slidos caractersticas que dificultam os processos de converso interna e
externa
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sendo:
ou
kf
k f + kr
no de anis aromticos
grau de condensao dos anis
H
N
piridina
furano
tiofeno
pirrol
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isoquinolina
quinolina
indol
presena de substituintes no anel deslocamento das bandas de fluorescncia e
influncia sobre a eficincia de fluorescncia
(nm)
Benzeno
270-310
10
Fenolato
310-400
10
Tolueno
270-320
17
Anisol
285-345
20
Propilbenzeno
270-320
17
Anilina
310-405
20
Fluorbenzeno
270-320
10
Anilnio
Clorobenzeno
275-345
Ac. Benzico
310-390
Bromobenzeno
290-380
Benzonitrila
280-360
20
Nitrobenzeno
285-365
18
Substncia
Iodobenzeno
Fenol
Substncia
Ex 1)
= 0,2
=1
aumento da rigidez da estrutura pela ponte metilnica entre os dois anis aromticos
OH
Zn
N
2
no fluorescente
fluorescente
Ex. 3)
Espcies fluorescentes adsorvidas em slidos eficincia de fluorescncia
aumentada
Presena
de
tomos
pesados
posio da banda
ionizada
Ex : anilina e on anilnio
N+
_
_
estruturas de ressonncia da anilina
on anilnio
Sendo
F = K(P0 P)
(1)
P
= 10 -bc
P0
(2)
(Kdepende de )
F = KP0 (1 10-bc)
(3)
F = K' P0
Quando
(
- 2,3 bc )2
(- 2,3 bc ) 2 !
(-
2,3 bc )3
- .........
3 !
bc = A < 0,05
F = 2,3 K bc P0
130
P0 = constante
F=Kc
Representao grfica
16
Intensidade
14
12
10
8
6
4
2
0
0
10
12
14
16
18
Concentrao
excitadas
por fluorescncia
auto supresso
auto absoro
131
Caractersticas
Feixe duplo compensar flutuaes em P0
132
Feixe de referncia
Atenuador reduzir a intensidade a um nvel similar ao da radiao fluorescente
Comercialmente vrios modelos
grau de sofisticao
preo
Fluormetros
mais adequados para anlises quantitativas maior sensibilidade
simples e de fcil utilizao
custo baixo
Componentes
Fontes
maior intensidade que as da espectrometria de absoro no UV/VIS
Fluormetros
- Lmpada de vapor de Hg linhas de excitao 254 302 313 546 578
691 e 773 nm isoladas pelos filtros de absoro
- Compostos fluorescentes fluorescncia induzida por diferentes e pelo
menos um destes ser adequado
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Filtros e monocromadores
idnticos aos dos instrumentos para medida da absoro no UV/VIS
Clulas e Compartimentos para amostras
Clulas cilndricas ou retangulares
vidro ou slica fundida
Compartimento de clula
- design adequado de modo a reduzir a incidncia d radiao espalhada
Detetores
Sinal de luminescncia baixa intensidade detetor altamente sensvel
- Tubos fotomultiplicadores (operao sob resfriamento)
- Rede de diodos
Instrumentos tpicos
Perkin Elmer
mol/L
135
OH
OH
HO
N
HO
N
SO 3 Na
8-hidrxi-quinolina
alizarina garnet R
OH
O
flavanol
OH
C
H
benzona
136
on
(nm)
Reagente
Abs
S (
g/mL)
Interferentes
alizarina garnet R
470
500
0,007
F-
auto-supresso do
complexo acima
470
500
0,001
B4O7-
benzona
370
450
0,04
Be, Sb
Cd2+
2-(o-hidrxifenilbenzoxazola)
365
azul
NH3
Li+
8-hidrxiquinolina
370
580
0,2
Mg
Sn4+
flavanol
400
470
0,1
F-, PO43-, Zr
Zn2+
benzona
verde
10
B, Be, Sb e ons
corados
3+
Al
OBS:
ons de metal de transio
- formao de complexos que absorvem no UV/VIS relaxao no radiativa to
rpida (eficiente) no fluorescem
- muitos so paramagnticos favorece os cruzamentos intersistemas para estado
excitado triplet fluorescncia pouco provvel (aumenta a tendncia a
fosforescncia)
ons de metais no de transio no formam complexos que absorvam radiao na
regio UV/VIS, mas seus complexos com quelantes org6anicos adequados
fluorescentes