ANLISIS CUALITATIVO DE SALES BILIARES

Krisly Snchez 4-771-654 lvaro Rueda 4-772-1613 Bolvar Chen 4-773-587

Facultad De Medicina, Escuela De Medicina
BIOQUMICA
OBJETIVOS
Aplicar algunos ensayos para la deteccin de pigmento y sales biliares
Reconocer las propiedades emulsificantes de las sales biliares.
Determinar la importancia de la bilis en la digestin.
MARCO TERICO:
La bilis en un lquido amarillento, dorado debido a la presencia de la bilirrubina, esta secrecin es
producida por el hepatocito, tiene una densidad aproximada de 1,01; un pH comprendido entre 5 a 78, y un contenido de solidos que vara del 2-3% segn se trate de bilis hepatica o bilis concentrada de
la vescula biliar. El color de la bilis recin producida se torna verdoso al encontrase en la vescula,
debido a la oxidacin de la bilirrubina en biliverdina. Al almacenarse la bilis, todos los pigmentos
presentes en ella oscurecen a mediada que van sido oxidados, pasando del amarillo verde al azul y
finalmente al color caf.
Los principales componentes de la bilis son: Lecitina PC, como el fosfolpido ms abundante; colesterol
libre; iones sodio, potasio, calcio y cloro; cidos biliares conjugados en forma de sales biliares; todo en
presencia de pequeas cantidades de bilirrubina y albumina y algunas enzimas entre otras a la
fosfatasa alcalina.
La lecitina es el fosfolpido principal de la bilis, posee dos cidos grasos de cadena largo con carcter
hidrofbico; adems de la fosforilcolina, hidroflico; no posee gran capacidad de solubilizacin pero si
es posible que se renan varias molculas que oponen sus grupos hidrofbicos e hidroflicos y dada la
capacidad de estos de hidratarse se logra la consistencia de un gel, por la formacin de un cristal
lquido.
El colesterol compuesto con la estructura del ciclopentano pehidrofenantreno, es hidrofbico en la
mayor parte de su molcula, a excepcin del carbono 3 que posee un OH y por ende en esa regin
esta molcula es hidroflica. Los cidos biliares derivados del colesterol por modificaciones en la cadena
lateral: disminuye su longitud, carboxilacion de esta y saturacin del ncleo esteroide, los que para su
utilizacin en la bilis son transformados por el hgado, al conjugarse con taurina y glicina y dan lugar a
las sales biliares, los cidos tauroclico y gliclico, que se encuentran en relacin de 3:1 entre ellos y
tienen una funcin antiptica, pues poseen una parte de la molcula hidroflica y otra hidrofbica,
condicin que les permite ser hidrosolubles y con capacidad emulsificante. Durante la emulsificacin
disminuye la tensin superficial de los lpidos, se fragmentan, fsicamente en pequeas partculas,
aumentan considerablemente su superficie expuesta y de esta manera se facilita su accin enzimtica.
Las sales biliares luego de ser sintetizadas, son secretadas por el canalculo biliar, almacenada por la
vescula biliar, pasan al intestino para iniciar la digestin, transitan por el intestino y posteriormente son
transportadas de nuevo por la vena porta al hgado y ser secretados de nuevo por la bilis estableciendo
esto la circulacin enteroheptica que permite que las sales biliares sirvan de vehculo de algunos
cidos grasos facilitando su transporte. Las sales biliares constituyen tambin en balancear junto con
las lecitinas, el equilibro de mantener disuelto el colesterol libre y con ello evitar la litiasis. (Herreras,
Daz y Jimnez; 1996)
MATERIALES:
Descripcin
Bilis vesicular de cerdo o de
res

Cantidad / Capacidad
50 Ml

Papel filtro

Vidrio reloj

Tubos de ensayo

10

REACTIVOS:
Nombre

Frmula

Concentracin

Toxicidad

HNO3
concentrado

HNO3

concentrado

Toxicidad aguda

Solucin de
sacarosa al 5%

C6H11O6

5%

cido sulfrico
concentrado

H2SO4

concentrado

Propiedades fsicas y
qumicas

Aspecto:
Lquido
transparente e incoloro.
Olor: Caracterstico.
Punto de ebullicin: 121C
Punto de fusin: -47C
Densidad (20/4): 1,395
Solubilidad: Soluble en
agua.
No toxico
Estado
fsico:
Slido
Reacciona con
cristalino
oxidantes fuertes, Color: Translcido
originando peligro Olor: Ligero olor
de
Solubilidad:
incendio.
Agua Muy soluble
Etanol 96 Poco soluble
Etano
Absoluto
Prcticamente insoluble
Sub-aguda o
Punto de ebullicin (se
crnica
descompone): 340C
Punto de fusin: 10C
Solubilidad
en
agua:
miscible

Azufre en polvo

Es baja la
toxicidad pero la
exposicin al
humo es
peligrosa.

Apariencia: Slido de color

amarillo a marrn rojizo, con
olor
caracterstico
y
consistencia blanda.
Punto de Ebullicin (C):
444.6
Punto de Fusin (C): 113 122
pH: N.A.
Solubilidad: Insoluble en
agua. Ligeramente soluble
en alcohol y ter.
Soluble en disulfuro de
carbono, tetracloruro de
carbono y benceno.

PROCEDIMIENTOS:
1. PRUEBA DE GMELIN
Colocar una gota de bilis en un papel filtro.

Y colocar tambin una gota de HNO3 concentrado.

Observar los crculos concentrados de colores.

2. PRUEBA DE PETTENKOFER
2 mL de bilis + 5 gotas de solucin de sacarosa al 5%.

Agregar acido sulfrico concentrado hasta formar dos capas.

La aparicin de un anillo rojo, hay presencia de acidos biliares.

3. PRUEBA DE HAY
Espolvorear una pequea cantidad de azufre sobre la bilis diluida.

Si el azufre se precipita.

Hay presencia de cidos biliares.

4. PODER DE EMULSIFICACIN DE LA BILIS

Aadir una gota
de aceite de oliva
a 3 mL de agua.

Contenidos en
cada uno de los
tres tubos de
ensayo.

Tubo # 1: 5 gotas
de bilis;

Agitar bien cada

tubo. Observar
Emulsion En Cada
Tubo

Tubo # 3: 5 gotas
de bilirrubina

Tubo # 2: 5 gotas
de solucin de
sales biliares

RESULTADOS:
Cuadro 1. Pruebas sobre la bilis
Prueba

Observacin
Presencia de crculos coloreados alrededor del vrtice del
papel filtro luego de aadirle cido ntrico, van en el siguiente
orden
Marrn oscuro

Gmelin

Naranja
Amarillo

Pettenkofer

Formacin de un anillo
rojo.

Hay
Al agregar el azufre en
polvo ste precipit.

Muestra

Observacin

Agua + aceite de oliva (4.2)

Agua + bilis (4.1)

Insoluble
Soluble

Aceite + bilis (4.3)

Emulsificacin

Poder de emulsificacin de la bilis

DISCUSIN:
En la prueba de Gmelin pudimos observar que la muestra de bilis diluida a la cual se le aadi HNO3
al papel filtro mojada con esta, la formacin de anillos concntricos, los cuales fueron desde el centro
hacia el exterior de los colores marrn, naranja y amarillo. La formacin de estos anillos nos permite
determinar la presencia de sales biliares en la muestra que se analiz. La presencia de pigmentos
biliares cerca de la unin de ambos lquidos propiciara la formacin de anillos, un anillo verde encima
y otros debajo, azul, violeta rojo y rojo amarillo. Si faltan los anillos verdes y violeta rojo, es probable la
presencia de lutena. Si el lquido contiene bilis concentrada, se observa una coloracin violeta.
Esta prueba a su vez es de gran importancia en el campo de la medicina ya que nos permite determinar
la presencia de sales biliares en lquidos como la orina, en donde la presencia de estas sales y
pigmentos biliares representa la presencia de alguna anormalidad en la reabsorcin de los mismos y
por lo tanto la mayor excrecin de estos compuestos.
La Prueba de Pettenkofer se utiliza para probar la presencia de sales biliares. En esta prueba pudimos
observar que se form un anillo rojo entre ambas capas (muestra a analizar arriba y abajo el cido
sulfrico aadido), la formacin de este anillo indica la presencia de sales biliares en la muestra de bilis
que se utiliz. Esto se debe a que la sal biliar reacciona con el hidroximetilenofurfural y forma una
solucin de color rojo. El hidroximetilenofurfural se forma del azcar que deshidrata con cido sulfrico.
El cido actico, y aquellas sustancias que se convierten en azcar mediante cido sulfrico, cumplen
la misma funcin que el azcar.

En la prueba del poder de emulsificante de la bilis, En el tubo 1 se pudo observar que al aadir bilis a
un volumen igual de agua, esta primera fue soluble en agua. Esto se debe a que la bilis es una
disolucin polar; puesto, que en su composicin se encuentran cidos biliares y sus conjugados, sales
biliares, que le transmiten cierta polaridad a la bilis; formando estos compuestos enlaces por puentes
de hidrgeno con el agua y de esta manera siendo solubles en ella.
En el tubo al cual se le aadi al agua un volumen equitativo de aceite de oliva. Se pudo observar que
estos formaron una mezcla insoluble, esto se debe a que el agua es un compuesto no polar mientras
que el aceite es un compuesto no polar.
En el tubo al cual se le aadi a un volumen de bilis, un volumen igual de aceite; se pudo observar la
formacin de pequeas gotas dispersas de aceites a esto se le llama emulsin. Una emulsin,
cientficamente es la dispersin o mezcla de dos lquidos inmiscibles, en la cual la fase interna, en este
caso el aceite, se mezcl en forma de gotitas con la fase externa, el agua.
La bilis, es una sustancia liberada por el hgado, y participa en la digestin. Tambin tiene una funcin
emulsionante como el detergente en el tubo 2. La bilis emulsiona los cidos graos o lpidos,
convirtindolos en gotitas permitiendo su absorcin. Entonces, si nuestro experimento fuera una parte
del proceso de digestin, el detergente sera la bilis, y emulsionara las grasas, en este caso,
ejemplarizadas por el aceite. (Herreras, Daz y Jimnez; 1996)
CONCLUSIONES:
La prueba de Gmelin permite identificar sales biliares las cuales al reaccionar con el cido ntrico
forman anillos concntricos de diversos colores sobre el papel filtro mojado con estas sales.
La prueba de Pettenkofer es similar a la prueba de Molish, el cido ntrico reacciona con el azcar
y forma hidroximetilenofurfural este producto reacciona con las sales biliares, esto se puede
observar mediante la formacin de un anillo rojo entre las dos subcapas del cido ntrico y el
lquido que posea sales biliares.
La bilis cuyos componentes principales son las sales biliares y cidos biliares, cumplen la funcin
de emulsionar grasas durante la digestin, debido a ello al agregar a cierto volumen de bilis un
igual volumen de aceite se observ la formacin de una emulsin, esto permite ejemplificar las
reacciones que media la bilis en la digestin.
Cualquier factor que implique una mala liberacin o reabsorcin de la bilis va a producir en el
cuerpo una mala digestin de lpidos y por lo tanto problemas metablicos asociados a este.
BIBLIOGRAFA:
Tratado De Hepatologa, J. M. Herreras Gutirrez, A. Daz. Belmont y M. Jimnez Senz, Tomo
Ll 1996, Pag 150-151.
(1) TRASTORNOS DEL TRACTO BILIAR, TRASTORNOS DE LA VESCULA BILIAR Y
PANCREATITIS POR CLCULOS BILIARES; escrito por los doctores Young Choi y William B.
Silverman de la Divisin de Gastroenterologa y Hepatologa de los Hospitales y Clnicas de la
Universidad de Iowa, Iowa City, recuperado el 26 de junio de 2014 en:
s3.gi.org/patients/gihealth/pdf/biliary_sp.pdf
CUESTIONARIO:
1. Qu otro ensayo o ensayos conocidos por usted es semejante a la prueba de
Pettenkofer? A qu se aplica.
Tiene cierta similitud con la prueba de Molish que se utiliza para identificar
carbohidratos
en
general, en esta se observ un anillo de color rojo indicando la presencia de sales biliares.
2. Investigar Cules son los efectos que ocasiona en los recin nacidos la acumulacin de
bilirrubina?
El kernicterus, o encefalopata bilirrubnica, es una enfermedad neurolgica rara en la que se conjugan
niveles muy elevados de bilirrubina en la sangre y acmulos de bilirrubina en los ncleos o ganglios
basales del cerebro, que suele aparecer en las primeras semanas de la vida.

Es caracterstica en el Kernicterus la afectacin del estado general del neonato con apata, vmitos,
edema por acumulacin de lquido en el tejido celular subcutneo (la presin del dedo deja una huella),
dificultades para alimentarlo, globos oculares fijos, alteraciones del tono muscular (en ocasiones arquea
el cuerpo que se apoya tan slo sobre la nuca y los talones), lentitud de los movimientos voluntarios
(bradiquinensia), movimientos atetsicos (trastorno neuromuscular caracterizado por movimientos de
torsin lentos e involuntarios de las extremidades) y disminucin o ausencia de los reflejos primarios.
A menudo, el Kernicterus se acompaa de convulsiones, respiracin entrecortada e incluso crisis de
apnea o ausencia de respiracin.
Sin el tratamiento precoz y adecuado, la mayora de los recin nacidos afectados por la enfermedad
fallecen en la primera semana y los pocos que sobreviven presentan graves secuelas psquicas y
neurolgicas, como son parlisis cerebral, atetosis, retraso mental y sordera.
ANEXOS:
DISOLVENTES DE CLCULOS BILIARES
El tratamiento farmacolgico de la litiasis biliar se basa en reducir la relacin colesterol/sales biliares
hasta el punto de que la bilis no est saturada de colesterol. En esas condiciones el clculo de colesterol
se va disolviendo lentamente hasta que el tamao permite su expulsin.
Esto implica los siguientes condicionantes:
El tratamiento es efectivo nicamente en clculos de colesterol (un 80% de los casos). No lo es
en clculos de pigmentos biliares. La eficacia disminuye mucho si el clculo est calcificado.
La vescula debe ser funcional y las vas biliares no deben estar obstruidas.
El tiempo de disolucin es proporcional al tamao del clculo.
La forma tradicional de tratamiento es la administracin de cidos biliares. Son los medicamentos que
figuran en este apartado. La introduccin en teraputica de los inhibidores de la HMG-CoA
reductasa (lovastatina, simvastatina, etc., ver grupo B04A1A HIPOLEMIANTES) ha proporcionado otro
mecanismo para reducir la concentracin biliar de colesterol. La accin es aditiva con los cidos biliares
y se est experimentando con tratamientos combinados.
En cualquier caso la aplicacin de la litotricia y el perfeccionamiento de las tcnicas quirrgicas han
obligado a replantearse el papel de la terapia farmacolgica, que se emplea ahora ms selectivamente
de lo que se sola hace unos aos.
CIDOS BILIARES
Se utilizan dos medicamentos de este tipo: el cido quenodesoxiclico y el cido ursodesoxiclico. El
mecanismo de accin es diferente pero la eficacia es la misma, ambos disminuyen el dimetro de los
clculos a un ritmo de 1-2 mm por mes. Los efectos secundarios del quenodesoxiclico (diarrea
dependiente de dosis, elevacin de transaminasas, hipercolesterolemia) son superiores y en
consecuencia se prefiere hoy da usar la monoterapia con cido ursodesoxiclico (10-13 mg/kg/da) o
bien un tratamiento combinado de ambos cidos (5 mg/kg/da de cada uno).
El tratamiento debe mantenerse el tiempo necesario para conseguir la disolucin completa. Este tiempo
depende del tamao del clculo: si el dimetro es menor de 5 mm se disuelve en un ao el 80-90% de
las veces. Si el tamao es mayor se prefiere actualmente fragmentarlos mediante litotricia. Un clculo
nico de hasta 30 mm de dimetro se elimina en 13-18 meses en un 90% de los casos con la
combinacin de litotricia con cidos biliares. Si la masa total est inicialmente fragmentada en varias
piezas el resultado de esta terapia es menos satisfactorio.
Es conveniente mantener el tratamiento un cierto tiempo tras la eliminacin de los clculos, pero hay
que contar con un porcentaje de recurrencia alto al suspenderlo. Aproximadamente el 50% de los
pacientes vuelven a tener clculos a los cinco aos, pasado ese tiempo el riesgo de recada es muy
inferior. No existe tratamiento preventivo de las recurrencias, pero muchos casos son asintomticos.
La repeticin del tratamiento suele tener el mismo xito que el inicial.
OTROS TRATAMIENTOS
En los pacientes con clculos biliares, el grado de sobresaturacin de la bilis por el colesterol est
directamente relacionado con la proporcin de cido desoxiclico en la bilis. De acuerdo con esto, se
ha estudiado el empleo de metronidazol, un antiinfeccioso con marcados efectos frente a bacterias

anaerobias, ya que es capaz de reducir la cantidad de cido desoxiclico biliar, al suprimir el

metabolismo bacteriano del cido clico, disminuyendo con ello la litogencidad biliar.
La lactulosa y, posiblemente, el lactitol producen un efecto similar al metronidazol, aunque a travs de
un mecanismo diferente. Este tipo de laxantes provocan una acidificacin del colon, lo que reduce la
solubilidad del cido clico, adems de la propia actividad metablica de la flora bacteriana presente.
Por otro lado, estos laxantes tambin pueden acelerar el trnsito intestinal, reduciendo as el tiempo de
absorcin pasiva.
Algunas observaciones realizadas en pacientes acromeglicos tratados con octretido, especialmente
predispuestos a la formacin de clculos biliares, indican que estos pacientes presentan
significativamente ms bacterias anaerbicas Gram-positivas en su colon que el resto de las personas.
Estos pacientes tambin tienen una mayor capacidad enzimtica para convertir cido clico en
desoxiclico. De igual manera, presentan una mayor lentitud en el trnsito colnico, lo cual est
relacionado con un aumento del pH y de la solubilidad del cido desoxiclico. La cisaprida, que
incrementa la velocidad del trnsito intestinal, es capaz de revertir muchas de estas alteraciones.

ENSAYO ENZIMTICO PARA LA DETERMINACIN DEL COLESTEROL SANGUNEO

Krisly Snchez 4-771-654 lvaro Rueda 4-772-1613
Bolvar Chen 4-773-587
Facultad De Medicina, Escuela De Medicina
BIOQUIMICA
OBJETIVOS:
Determinar en una muestra de suero la cantidad de colesterol.
Establecer la importancia de conocer los niveles de colesterol en sangre.
Explicar patologas que se asocien a niveles anormales de colesterol sanguneo.
MARCO TERICO:
El colesterol es una sustancia grasa (un lpido) presente en todas las clulas del organismo. El hgado
elabora todo el colesterol que el organismo necesita para formar las membranas celulares y producir
ciertas hormonas. Cuando comemos alimentos de origen animal, tal como carne, huevos y productos
lcteos, introducimos colesterol adicional en el organismo. Aunque a menudo atribuimos la elevacin
del colesterol en sangre al colesterol que contienen los alimentos que comemos, la causa principal de
este aumento es, en realidad, la grasa saturada. La materia grasa de los lcteos, la grasa de la carne
roja y los aceites tropicales tales como el aceite de coco son algunos alimentos ricos en grasa saturada.
Los niveles de colesterol en sangre, que indican la cantidad de lpidos o grasas presentes en la sangre,
se expresan en miligramos por decilitro (mg/dl). En general, se recomienda un nivel de colesterol inferior
a los 200 mg/dl. Entre los 200 mg/dl y los 239 mg/dl, el nivel de colesterol se considera elevado o
limtrofe y es aconsejable reducirlo. Un nivel de 240 mg/dl o ms de colesterol se considera elevado y
es necesario tomar medidas para reducirlo. Algunas maneras de reducir el nivel de colesterol son
cambiar la alimentacin, iniciar un programa de ejercicio fsico y tomar medicamentos reductores del
colesterol.
El colesterol total en sangre es la suma del colesterol transportado en las partculas de LDL, HDL y
otras lipoprotenas. Si se miden los niveles de colesterol a partir de una muestra de sangre no tomada
en ayunas, es decir, habiendo el paciente comido dentro de las 10 a 12 horas anteriores al anlisis,
slo ser posible calcular el colesterol total y el HDL. De esta manera, los mdicos pueden evaluar los
resultados del perfil lipoproteico completo y los otros factores de riesgo cardiovascular del paciente, y
usar un instrumento de evaluacin de riesgos para predecir mejor las probabilidades de padecer un
ataque al corazn dentro de 10 aos. (1).
La mayora de estos mtodos vienen ya listos para usar, en juegos de reactivos suplidos por casas
comerciales y cuya tcnica no es presentada en detalle. Estas tcnicas han desplazado, en la rutina,
a la clsica reaccin de Liebermann-Burchard, que es la ms usada dentro de las reacciones no
enzimticas para la cuantificacin de colesterol. Estos mtodos son afectados por muchos factores,
entre ellos la concentracin de cada uno de los reactivos, el solvente empleado al hacer la extraccin
de colesterol, la cantidad de agua en la mezcla final de reaccin y la temperatura. Por lo tanto las
condiciones de reaccin deben ser estrictamente controladas.
El objetivo de este estudio es evaluar un mtodo enzimtico para la cuantificacin de colesterol srico,
que sea barato y sencillo de utilizar en los laboratorios nacionales. Tal mtodo puede adoptarse como
procedimiento estndar para evaluar reactivos comerciales de fundamento semejante que ingresan al
mercado costarricense. Ello favorecer la estandarizacin de metodologas y la comparabilidad
interlaboratorio de los resultados de colesterol. (2)
MATERIALES:
Descripcin
Vasos qumicos

Cantidad
2

Capacidad
100 mL

Micro pipetas

15 L

Plancha

Guantes

1 par

REACTIVOS:
Descripcin
Kit para la
determinacin de
colesterol

Cantidad/concentracin Toxicidad
15 L/No txico

PROCEDIMIENTOS:
3 tubos de
ensayo: blanco,
patrn y muestra

tubo1 adicionar
3 mL del reactivo
y 30 L de agua.

calentar por 5
minutos a 37C

realizar lectura
epectrofotometro
calcule
resultados

tubo2 adicione 3
mL del reactivo y
30 L del patrn.

tubo3 adicione 3
mL del reactivo y
30 L de
muestra

RESULTADOS:
Absorbancia
muestral
0.350 nm

de

la Absorbancia del patrn

0.376 nm

Concentracin
patrn
200 mg/dL

del Colesterol
Resultante
186 mg/dL

0,350

[ ] =
200
= 186

0,376

Reacciones presente en la medicin del colesterol en sangre:

+ 2

4 + 2 2

22 2 + + 4

+ 42

Fig1. Se muestran los tubos con el patrn, la

muestra y el blanco

DISCUSION:
La determinacin de las cifras de colesterol se hizo mediante un anlisis de sangre directo; es decir,
tomando una muestra de sangre en vena de un compaero y analizndola posteriormente. Luego se
procedi a la separacin del suero y del plasma; para el cifrado de las fracciones de colesterol que
haya en la muestra. Se conoce que los mtodos empleados por el laboratorio para la cuantificacin
del colesterol sanguneo pueden ser enzimticos o qumicos. En este laboratorio se realiz un anlisis
enzimtico.
El mtodo enzimtico se basa en el empleo de la enzima colesterol esterasa que hidroliza los esteres
de colesterol y de esta manera se solubiliza produciendo molculas de colesterol libre. Siendo este
colesterol libre el sustrato de la enzima colesterol oxidasa que consume el colesterol libre o unido a
protenas distintas de la HDL. Adems de esta enzima se requiere la presencia de las enzimas
peroxidasa (POD) y N-etil-N-(2-hidroxi-3-sul-fopropil)-3-toluidina disdica (TOOS) dando lugar a un
producto coloreado (la mayora de los mtodos enzimticos incorporan todas las enzimas en un solo
reactivo, facilitndose su utilizacin y automatizacin en el laboratorio). Estas enzimas reaccionan con

el agua oxigenada liberada luego de la accin de la enzima colesterol oxidasa, formando quinonimina
cuya cantidad es proporcional a la cantidad de esteres de colesterol que se analiz.
A fin de analizar la cantidad de HDL, se requiere un mecanismo de un detergente que solubiliza
especficamente las HDL. El HDL-colesterol es liberado para reaccionar con colesterol esterasa (CHE),
colesterol oxidasa y TOOS, dando un producto coloreado.El resultado nos dar la cifra de colesterol
total, HDL y LDL.
Previamente a la prueba no se necesita tener un cuidado especial en cuanto a dieta ni en cuanto a la
medicacin que tome habitualmente, no obstante, es conveniente no atiborrase de dulces o grasas los
das anteriores y avisar de la toma de medicacin contra el colesterol.
Luego de la accin de las diversas enzimas se procedi a determinar la absorbancia de la muestra y
patrn, y luego de realizar los clculos correspondientes el nivel de colesterol obtenido de la muestra
sangunea de 186 mg/dL, estando este debajo del rango limite normal de colesterol en sangre. Este
colesterol que circula por la sangre puede proceder de los alimentos. En este caso, se libera en la
digestin, atraviesa la pared intestinal y llega a la sangre. Sesos, huevos de gallina, hgado, mayonesa
comercial, pats o foiegras, son alimentos ricos en colesterol. Pero, tambin puede proceder de nuestro
hgado, un rgano muy importante para regular los niveles de colesterol en nuestro organismo ya que
sus clulas son capaces de sintetizarlo. En algunas enfermedades el hgado puede producir ms del
necesario y se rompe ese equilibrio que hay en las personas sanas, por tanto cuida lo que comes y
mima a tu hgado. (3)
Los valores de colesterol varan con la edad y el sexo pero en trminos generales se puede decir que
los valores normales son los siguientes:
Colesterol Total: Por debajo de 200 mg/dl
Colesterol HDL: Varones: Por encima de 35 mg/dl
Mujeres: Por encima de 40 mg/dl
Colesterol LDL: Por debajo de 170 mg/dl
En caso de enfermedad cardiovascular previa o de factores de riesgo asociados (diabetes, tabaco,
hipertensin arterial, obesidad) los valores se ven reducidos por el aumento de riesgo que conllevan.
Colesterol Total: Por debajo de 150-180 mg/dl
Colesterol HDL: Cuanto mayor sea la cifra mejor
Colesterol LDL: Por debajo de 100-120 mg/dl
Si ha padecido un infarto o tiene muchos factores de riesgo le aconsejarn mantener cifras de colesterol
total por debajo incluso de 100 mg/dl de colesterol total.
En los nios (2 a 18 aos) se consideran cifras normales las siguientes:
Colesterol total: Por debajo de 170 mg/dl
Colesterol HDL: Cuanto ms alta mejor
Colesterol LDL: Por debajo de 110-120 mg/dl (4)
Para muchas personas, los niveles de colesterol anormales se deben en parte a un estilo de vida
malsano, lo cual a menudo incluye el consumo de una alimentacin rica en grasa. Otros factores del
estilo de vida son:
Tener sobrepeso
Falta de ejercicio
Algunos problemas de salud tambin pueden provocar colesterol anormal, como:
Diabetes
Enfermedad renal
Sndrome ovrico poliqustico
Embarazo y afecciones que incrementen los niveles de hormonas femeninas
Glndula tiroides hipoactiva
Los medicamentos, como ciertos anticonceptivos, diurticos, betabloqueadores y algunos
medicamentos usados para tratar la depresin, tambin pueden elevar los niveles de colesterol. Varios

trastornos que se transmiten de padres a hijos llevan a que se presenten niveles anormales de
colesterol y triglicridos. Ellos abarcan:
Hiperlipidemia familiar combinada
Disbetalipoproteinemia familiar
Hipercolesterolemia familiar
Hipertrigliceridemia familiar (5)
En casos de un colesterol alto se aconsejar realizar una dieta adecuada los das anteriores retirando
el exceso de dulces y grasas y le retirar los medicamentos que puedan tener interacciones sobre el
metabolismo del colesterol, si es que toma alguno. El peso y la dieta no deben sufrir variaciones en las
semanas previas al anlisis de sangre. Si ha pasado alguna enfermedad previa lo suficientemente
importante, que pueden provocar descensos del colesterol, deber esperar 2-3 meses hasta que los
niveles de colesterol se normalicen. En dependencia de los resultados en la primera extraccin, sobre
todo si estn altos, puede ser necesaria otra extraccin a los 3 meses para comparar los resultados y
ganar en fiabilidad. (6)
La prueba de anlisis enzimtico del colesterol sanguneo tiene las siguientes limitantes:
No deben emplearse anticoagulantes que contengan citrato.
No exponer los reactivos a la luz.
Conservar los reactivos de acuerdo a las instrucciones.
En caso de muestras con concentraciones de triglicridos mayores a 1200 mg/dl, diluir las
mismas con solucin fisiolgica. (2)
CONCLUSIONES:
El anlisis enzimtico del colesterol sanguneo se basa en el empleo de enzimas como colesterol
esterasa, colesterol oxidasa, peroxidasa (POD) y N-etil-N-(2-hidroxi-3-sul-fopropil) -3-toluidina
disdica (TOOS); que se encargan mediante una serie de reacciones llevar el colesterol presente
en sangre hasta Quinonimina, donde su presencia se identifica por una coloracin roscea
tenue.
Los niveles de quinonimina son directamente proporcional a los niveles de colesterol, por lo cual
su cuantificacin refleja los niveles de colesterol en sangre. El mismo se hizo determinando el
nivel de absorbancia de la muestra y el patrn y luego de clculos matemticos se determin
que la cantidad de colesterol en sangre de la compaera de la cual se obtuvo la muestra fue de
184 mg/dL estando este dentro del rango normal.
El anlisis enzimtico del colesterol sanguneo se hace practico; ya que, la mayora de los kit de
anlisis de colesterol contienen todas las enzimas implicadas en el proceso, siendo esta ms
especifica que el mtodo de cuantificacin por la reaccin de Lieberman-Burchard, que ha
resultado obsoleto e inespecfico.
En el campo de la medicina el anlisis del colesterol sanguneo representa un buen indicador en
el diagnstico de determinadas patologas (por ejemplo: Hipercolesterolemia e
Hipertrigliceridemia familiar) que a su vez permiten dar un mejor tratamiento que mejore de esta
manera la calidad de vida del paciente.
BIBLIOGRAFA:
(1) (2013,
12)
Colesterol,
recuperado
el
24
de
junio
de
2014
en:
http://www.texasheartinstitute.org/HIC/Topics_Esp/HSmart/cholspan.cfm
(2) Evaluacin de un mtodo enzimtico colorimtrico para la cuantificacin de colesterol srico
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plasmahttp;
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el
26
de
junio
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2014
en:
www.wienerlab.com/wiener/catalogo/archivos/7699_hdl_colesterol_monofase_aa_plus_sp.pdf

(3) Alicia Chaves-Chavarra*, Marianela Vargas-Umaa*, Karl Schosinsky-Nevermann*, Manuel

Jimnez-Daz: www.scielo.sa.cr/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0253-29481997000100003
(4) (2013, 07) Niveles Altos De Colesterol En La Sangre, recuperado el 24 de junio de 2014 en:
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Familiar y Comunitaria. Hospital Central de Asturias. Oviedo. Espaa. Recuperado el 24 de julio
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CUESTIONARIO:
1. Cul es el nivel saludable de colesterol en sangre?
El nivel de colesterol alto en la sangre es un factor de riesgo importante para las enfermedades del
corazn. Al bajar el colesterol en la sangre mediante el aumento de la actividad fsica, la prdida de
peso, el dejar de fumar y una dieta adecuada, ese riesgo disminuye. Sin embargo, la cifra de colesterol
en la sangre es especfica para cada persona, y por esa razn, un perfil lipdico completo es una parte
importante de su historia mdica y una informacin importante de la que su mdico debe disponer. En
general, los niveles saludables son los siguientes:
LDL - menos de 130 miligramos por decilitro (mg/dL)
HDL - menos de 40 miligramos por decilitro (mg/dL) le pone en un riesgo mayor de enfermedad del
corazn.
Se considera deseable un nivel de colesterol total por debajo de 200 mg/dL.
En algunas personas que ya padecen enfermedad de la arteria coronaria (su sigla en ingls es CAD) y
que tienen un mayor nmero de factores de riesgo para enfermedad coronaria, el mdico puede
determinar que el nivel de colesterol LDL se debe mantener en menos de 130. Estudios recientes han
demostrado que quienes presentan un riesgo elevado de sufrir un ataque cardaco deben bajar el nivel
de colesterol LDL a menos de 100 y que en aquellas personas que presentan el riesgo ms elevado de
sufrir un ataque cardaco quizs sea ptimo que el nivel de colesterol LDL sea de 70 o menos. Consulte
siempre a su mdico para obtener un diagnstico.
2. En qu consiste la prueba de Liebermann- Burchard para el colesterol?
La prueba de Liebermann- Burchard consiste en:
Mezclar 1mL de anhidro actico y 1 mL de CHCl3, se enfran a 0C y se coloca una gota de
H2SO4. Una porcin de este reactivo se pone en contacto con la sustancia o su solucin
clorofrmica.
Prueba positiva: aparicin de coloracin.
El orden de aparicin de la coloracin tiene cierto valor diagnstico (0, 1, 5, 20, 60 minutos) de
color violeta que cambia a azul si hay dienos nucleares.
3. Qu tratamientos estn disponibles para rico en colesterol?
El tratamiento mdico puede incluir:
Modificacin de los factores de riesgo - los factores de riesgo que pueden ser cambiados incluyen la
carencia del ejercicio y de hbitos dietticos pobres.
Colesterol que baja medicaciones - las medicaciones bajaban los lpidos (grasas) en la sangre,
particularmente colesterol del lpido de la baja densidad (LDL). Statins es un grupo de medicaciones
antihyperlipidemic, e incluye el simvastatin (Zocor), el atorvastatin (Lipitor), y el pravastatin
(Pravachol), entre otros. Los sequestrants del cido de bilis - colesevelam, cholestyramine y colestipol

- y cido nicotnico (niacin) son dos otros tipos de medicaciones que se puedan utilizar para reducir
niveles del colesterol.
4. Qu son los triglicridos?
Los triglicridos son otra clase de grasa que se encuentra en la corriente sangunea. La mayor parte
del tejido graso del cuerpo est formado por triglicridos.
Niveles de triglicridos y la enfermedad del corazn (cardiopata):
La relacin entre los triglicridos y la enfermedad del corazn est bajo investigacin clnica. Sin
embargo, muchas personas con triglicridos altos tienen tambin otros factores de riesgo como niveles
altos de LDL o niveles bajos de HDL.
5. Cul es la causa del aumento de triglicridos?
Los niveles elevados de triglicridos se podran deber a una condicin mdica como la diabetes, el
hipotiroidismo, una enfermedad renal o una enfermedad heptica. Las causas de niveles elevados de
triglicridos relacionadas con la dieta podran incluir la obesidad y el consumo elevado de grasas,
alcohol y dulces concentrados.
6. Cul es el nivel de triglicridos saludables?
El nivel de triglicridos saludable es menos de 150 mg/dL.
ANEXOS:
HIPERCOLESTEROLEMIA
QUE ES LA HIPERCOLESTEROLEMIA?
La hipercolesterolemia es el aumento en sangre de colesterol por encima de unos valores considerados
como normales para la poblacin general. El valor a partir de los cuales se considera patolgico y que,
adems es un importante factor de riesgo para las enfermedades cardiovasculares es de 250 mg/dl.
El colesterol es un tipo de grasa que se encuentra en la sangre como resultado de la digestin de los
distintos alimentos que consumimos. Este tipo de grasa se transporta por la sangre unida a unas
protenas constituyendo las llamadas lipoprotenas. Esta unin a protenas hace que dentro del
colesterol total podamos distinguir dos tipos, uno conocido popularmente como colesterol malo que es
aquel colesterol que es transportado desde el hgado hasta los tejidos y es el que forma parte de las
placas de arterioesclerosis y cuyo aumento es el que se considera que tiene una mayor relacin con
enfermedades cardiovasculares. El otro tipo se conocen como colesterol bueno y que es el que se
transporta desde los tejidos perifricos hasta el hgado, este tipo no forma parte de las placas de
arterioesclerosis, y su presencia en niveles elevados se considera un factor protector de enfermedades
cardiovasculares.
Dentro de la sangre hay otro tipo de grasas cuyo papel como factor de riesgo de las enfermedades
cardiovasculares est poco clara pero cuyo aumento tambin se considera patolgico que son los
triglicridos. Se consideran anormales valores de triglicridos en la sangre por encima de 200 mg/dl.
En resumen el aumento en sangre de cualquier tipo de grasa de las anteriormente comentadas se
denomina hiperlipemia o hiperlipidemia, si lo que est aumentado es solo un tipo de grasa, recibe el
nombre de la grasa que aumente, hipercolesterolemia o Hipertrigliceridemia, y si estn aumentados los
dos recibe el nombre de hiperlipemia mixta.
POR QUE SE TIENE AUMENTADO EL COLESTEROL?
Dentro de las hipercolesterolemias distinguimos dos tipos: uno las primarias que son aquellas en las
que no se aprecia una causa evidente; y otras las secundarias donde la causa del aumento del
colesterol se debe a una enfermedad ya conocida.
De las primarias hay unas que son debidas a dficits genticos de protenas que actan en el
metabolismo del colesterol, y otras, que son las ms frecuentes (un 85% del total de las

hipercolesterolemias), que son las conocidas como polignicas y que afectan a un 5% de la poblacin.
El trmino polignico quiere decir que a parte de un dficit gentico no est situado en un solo gen,
sino en varios. En estos casos actan otros factores, fundamentalmente ambientales y dietticos,
relacionados con la ingesta de alimentos ricos en colesterol.
QUE SINTOMAS PUEDO NOTAR Y CUALES SON LOS MAS PRECOCES?
La hipercolesterolemia es una enfermedad asintomtica hasta que aparece la enfermedad vascular
(infarto, angina, etc.), aunque a veces pueden aparecer los llamados xantomas que son el resultado de
la infiltracin de la piel y tendones por el colesterol, pueden ser cutneos o tendinoso y aparecen
clsicamente en las zonas interdigitales de las manos, glteos, rodillas y codos, si estos aparecen
alrededor de los prpados reciben el nombre de xantelasmas, estos ltimos no son patognomnicos
de la hipercolesterolemia ya que pueden aparecer tambin en personas con niveles normales de
colesterol. Estos dos tipos de alteraciones cutneas relacionadas con la hipercolesterolemia aparecen
con una mayor frecuencia en aquellas que son debidas a un defecto gentico ya conocido, ms que en
la de carcter polignico. Dada la importancia de este factor de riesgo, aprovechando cualquier contacto
con los servicios sanitarios en el que se realice una analtica conviene realizar una determinacin srica
de colesterol total y de triglicridos. Esta determinacin es recomendable realizarla una vez antes de
los 35 aos en varones y de los 45 aos en mujeres, y despus con una periodicidad cada 5 o 6 aos
hasta los 65.
QUE COMPLICACIONES TIENE LA HIPERCOLESTEROLEMIA?
La hipercolesterolemia es, junto a la hipertensin y al tabaquismo, uno de los principales factores de
riesgo de una de las principales causas de muerte en nuestro pas que es la Cardiopata Isqumica
(angina en infarto de miocardio), as como tambin de enfermedades cerebrovasculares y enfermedad
vascular perifrica. Esto est apoyado por diversos estudios en los que se ha visto una relacin
estrecha entre las cifras elevadas de colesterol total y la aparicin de cardiopata isqumica y mortalidad
cardiovascular, y que actitudes encaminadas a disminuir los niveles de colesterol hacen que tambin
disminuya la probabilidad de presentar esa patologa. Sin embargo el riesgo que confiere cualquier
nivel sanguneo de colesterol depende tambin de la coexistencia de otros factores de riesgo como
son, edad, sexo, hipertensin, diabetes, tabaquismo, etc. y que a la hora de realizar una labor
preventiva tambin tienen que ser tenidos en cuenta.
COMO SE TRATA LA HIPERCOLESTEROLEMIA?
El tratamiento de la hipercolesterolemia consta de dos partes, una que son las medidas higinicodietticas, y otra que es el tratamiento farmacolgico. Estas dos partes no son excluyentes sino que se
deben complementar para llevar las cifras de colesterol a la normalidad. No obstante el tratamiento
debe ser individualizado para cada persona, teniendo en cuenta la presencia o no de otros factores de
riesgo as como de patologas asociadas.
Medidas higinico-dietticas. Hay que intentar realizar una dieta equilibrada que es aquella que aporta
un nmero de caloras de acuerdo con el gasto energtico que permite alcanzar y mantener el peso
ideal. La dieta tiene que ser rica en aquellos alimentos que contengan hidratos de carbono como son,
fundamentalmente los productos vegetales, las pastas, los tubrculos, las legumbres, los cereales, etc.
La grasa total no tiene que superar el 30-35% del total de las caloras ingeridas, y de estas las grasas
saturadas, que son aquellas presentes en las grasas de origen animal, en mantequillas, margarinas,
embutidos, productos lcteos y aceites de coco y palma (son los constituyentes de los productos de
bollera, galletas, fritos, precocinados y conservas), no tiene que superar el 10% del total de las grasas,
y las que hay que utilizar son las grasas monoinsaturadas que son las derivadas de aceites vegetales,
en particular del aceite de oliva. La dieta tiene que tener un contenido bajo en colesterol, no superior a
300 mg/da. El colesterol se encuentra en las carnes rojas, en las vsceras (hgado, riones, sesos...),
yema de huevo (Y sus derivados, flanes, mahonesa), no siendo recomendable un consumo mayor de
2-3 veces a la semana. Las carnes de ave y conejo que contienen menos proporcin de grasas
saturadas y colesterol, y los pescados blancos o azules deben de ser utilizados para sustituir platos de

carne roja. Cuando se consuma carne roja es recomendable eliminar la grasa visible de la misma antes
de cocinarla.
No se debe prohibir el consumo de alcohol, sino que se puede permitir su ingesta moderada, 40 gr/da
en los hombres y 24 gr/da en las mujeres, que corresponde aproximadamente con dos copas de vino
al da. Es recomendable la reduccin moderada del consumo de sal, as como del consumo de leche
entera y derivados lcteos ya que esta es una de las mayores fuentes de grasas saturadas que son las
que debemos evitar. No es recomendable, por lo tanto, el consumo de leche entera, quesos grasos,
helados, nata, mantequilla y derivados. A la hora de cocinar tambin es recomendable usar hervidos,
asados, plancha y parrilla antes que las frituras.
El consumo total de caloras debe tender a normalizar el peso, para ayudar a las medidas dietticas se
recomienda la realizacin de un ejercicio fsico moderado, que se ha visto que puede aumentar el
colesterol bueno, durante por lo menos 30 minutos ms de 3 das a la semana.
Las recomendaciones dietticas se resumen en la tabla 1 (Modificado de MANEJO EN ATENCIN
PRIMARIA DE LAS DISLIPEMIAS. Recomendaciones de la SEMFYC 1997).
Tratamiento farmacolgico. Para el tratamiento farmacolgico de la hipercolesterolemia y de las
hiperlipemias en general se utilizan 3 tipos de frmacos:
Resinas secuestradoras de cidos biliares. Estos frmacos disminuyen el colesterol haciendo que el
hgado lo utilice para sintetizar los cidos biliares que son unas sustancias que se forman en el hgado
y se utilizan en la digestin de los alimentos.
Fibratos. Estos disminuyen sobre todo los triglicridos ya que hacen que disminuya la formacin de
las protenas que los transporta.
Estatinas. Estos son los frmacos ms modernos, con una mayor potencia para disminuir el colesterol
y con menos efectos secundarios. Hacen que aumente la degradacin del colesterol y que disminuya
su formacin actuando como inhibidores de las enzimas que actan en la formacin y degradacin del
colesterol, fundamentalmente del colesterol malo. Sobre estas sustancias es sobre las que se estn
realizando investigaciones con lo que estn apareciendo nuevas estatinas que controlan el colesterol
con menores dosis y por lo tanto con menos efectos secundarios.
PUEDE CURARSE LA HIPERCOLESTEROLEMIA?
NO. Lo que se hace es mantener las cifras de colesterol en sangre dentro de los valores que se
consideran normales con el tratamiento adecuado, haciendo que disminuya su efecto como factor de
riesgo para las enfermedades cardiovasculares.
COMO SE PUEDE PREVENIR LA HIPERCOLESTEROLEMIA?
Si se debe a una enfermedad gentica entonces no existe prevencin posible, s existe si es la
hipercolesterolemia polignica ya que podemos intentar controlar los factores medioambientales y
sobre todo los dietticos que influyen en ella.
La mejor forma de prevenirla es haciendo una dieta equilibrada rica en alimentos bajos en colesterol
como son vegetales, frutas, cereales, etc. y con un bajo contenido en aquellos alimentos que son ricos
en grasas saturadas y en colesterol. A esto se le debe sumar la realizacin de un ejercicio moderado,
como ya se indic en el apartado del tratamiento, para ayudar a mantener un peso adecuado. Estas
dos acciones ayudan tambin a prevenir o controlar otros factores de riesgo para las enfermedades
cardiovasculares que, con una cierta frecuencia, se asocian a la hipercolesterolemia, como son la
hipertensin, la diabetes o la obesidad.
CON QUE ENFERMEDADES SE ASOCIA LA HIPERCOLESTEROLEMIA?
El aumento de las cifras de colesterol en sangre tiene una relacin directa con la mortalidad por
enfermedad coronaria (angina de pecho e infarto de miocardio) y por enfermedad cerebrovascular.

Habitualmente se asocia con otras enfermedades que constituyen tambin importantes factores de
riesgo por s mismos y que son fundamentalmente la hipertensin arterial, la diabetes, el sedentarismo,
la obesidad, el tabaquismo, que es necesario controlar y tratar adecuadamente.
QUE DEBE DE HACERSE CUANDO SE TIENE HIPERCOLESTEROLMIA?
Es importante que las personas con hipercolesterolemia sigan unos controle mdicos peridicos, cuya
periodicidad depende no solo de los niveles de colesterol, sino tambin del riesgo cardiovascular de la
persona que viene definido por la presencia o ausencia de otros factores de riesgo ya comentados, o
de la existencia de enfermedad coronaria. Una vez que se ha realizado en diagnstico, si la persona
no tiene una enfermedad cardiovascular, hay que comenzar con el tratamiento higinico-diettico.
Si el riesgo es alto (ms de dos factores de riesgo o presencia concomitante de diabetes) se deben
hacer controles al mes durante los primeros tres meses, incluyendo analtica con determinacin de
lpidos y glucosa y toma de la tensin arterial. Posteriormente se realizarn controles a los tres meses,
y una vez conseguido el objetivo teraputico, es decir que los niveles de colesterol estn dentro de
lmites normales, se realizarn controles analticos cada seis meses. Si con el tratamiento higinicodiettico no se consiguieran los objetivos teraputicos habra que comenzar con tratamiento
farmacolgico y continuar con los controles ya comentados, con la excepcin de si el tratamiento
instaurado es con estatinas que habra que realizar un control analtico al mes de iniciarlo.
Si el riesgo es moderado o bajo (menos de dos factores de riesgo) se realizarn controles cada seis
meses al principio y luego de forma anual.
QUE NO DEBE DE HACERSE CUANDO SE TIENE HIPERCOLESTEROLEMIA?
En ningn momento se debe de abandonar el tratamiento, sobre todo el farmacolgico, sin que haya
sido bajo prescripcin mdica ya que nos encontramos frente a una enfermedad cuyo control es de una
gran importancia para la disminucin del riesgo de enfermedad coronaria.
QUE DEBE USTED DE SABER?
Hay otros factores de riesgo que es importante tener en cuenta ya que, aunque su modificacin no es
posible, si van a influir a la hora de abordar el tratamiento de la hipercolesterolemia son: el sexo (los
hombres tienen un mayor riesgo cardiovascular que las mujeres premenopausicas, a partir de la
menopausia el riesgo se iguala ya que desaparece el papel protector que ejercen las hormonas
sexuales femeninas); la edad (el riesgo aumenta con la edad, es mayor en el hombre a partir de los 45
aos, y en las mujeres a partir de los 55); los antecedentes familiares de enfermedad coronaria
(enfermedad coronaria o muerte sbita antes de los 55 aos en el padre o en otros familiares
masculinos de primer grado, o antes de los 65 aos en la madre o en otros familiares femeninos de
primer grado). (7)