Bioquimica II 2011

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE MEDICINA
RED NACIONAL UNIVERSITARIA
Facultad de Ciencias de
la Salud
Carrera de Medicina
CUARTO SEMESTRE
SYLLABUS DE LA
ASIGNATURA
BIOQUIMICA II
Elaborado por los Doctores:

Dra. Rosario Clouzet
Gestin Acadmica 2011
UDABOL
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CARRERA DE MEDICINA
UNIVERSIDAD DE AQUINO BOLIVIA

Acreditada como PLENA mediante R. M. 288/01
VISION DE LA UNIVERSIDAD
Ser la Universidad lder en calidad educativa.
MISION DE LA UNIVERSIDAD
Desarrollar la Educacin Superior Universitaria con calidad y
Competitividad al servicio de la sociedad.
Estimada(a) estudiante:
El syllabus que ponemos en tus manos es el fruto del trabajo intelectual de tus
docentes, quienes han puesto sus mejores empeos en la planificacin de los
procesos de enseanza para brindarte una educacin de la ms alta calidad. Este
documento te servir de gua para que organices mejor tus procesos de aprendizaje y
los hagas mucho ms productivos. Esperamos que sepas apreciarlo y cuidarlo.
Aprobado por:
Fecha: marzo 2011
SELLO Y FIRMA
JEFATURA DE CARRERA
SYLLABUS
Asignatura:
Cdigo:
Requisito:
Carga Horaria:
Horas Tericas:
Horas Prcticas:
Crditos:
BIOQUIMICA II
MED 401
MED 301
80 horas / Semestre
I. OBJETIVOS GENERALES DE LA ASIGNATURA.
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Describir las caractersticas y las estructuras de compuestos

biolgicamente activos, como carbohidratos su ingestin y conversin en
fuente de energa inmediata.
Identificar compuestos como los relacionados a los Lpidos, Colesterol y el

esqueleto carbonatado que da origen a muchos compuestos, como la
vitamina D3, los cidos Biliares, hormonas corticales y sexuales.
Vincular la teora y la prctica, con una actitud activa ante el aprendizaje,

mediante el desarrollo del mtodo de estudio basado en la observacin de
la prctica de laboratorio.
II. PROGRAMA ANALITICO DE LA ASIGNATURA.

UNIDAD I
TEMA 1.1.1. Introduccin de la materia
1.2. Importancia de la Bioqumica en Medicina
1.3. Inters central de la ciencia de la salud
1.4. Aplicacin Medica de la Bioqumica
TEMA 2.Vitaminas Hidrosolubles
2.1. Estructura qumica y funcin de las vitaminas hidrosolubles
2.1. Tipos de vitaminas hidrosolubles
2.3. Digestin y absorcin de las vitaminas
2.4. Funcin de las vitaminas en la nutricin
2.5. Alteracin de las vitaminas
TEMA 3.Vitaminas Liposolubles
3.1. Estructura qumica y funcin de las vitaminas hidrosolubles
3.2. Tipos de vitaminas hidrosolubles
3.3. Digestin y absorcin de las vitaminas
3.4. Funcin de las vitaminas en la nutricin
3.5. Alteracin de las vitaminas
TEMA 4.Generalidades del Metabolismo
4.1. Funciones del metabolismo
4.2. Tipos de metabolismo
4.3. Metabolismo de las micromoleculas
4.4. Metabolismo de las macromolculas
4.5. Digestin de las protenas
4.6. Absorcin de los aminocidos
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TEMA 5.Aminocidos y Protenas

5.1. Formacin de los aminocidos
5.2. Estructura de las protenas
5.3. Requerimiento diario de estos nutrientes
5.4. Principales patologas ligadas a su deficiencia
UNIDAD II
TEMA 6.Generalidades de las Hormonas
6.1. Accin general de las hormonas
6.2. Accin especifica de las hormonas
6.3. Acciones qumicas en el organismo
6.4. Efectos en la salud
TEMA 7.Hormonas de la Hipfisis
7.1. Hormonas de la Adenohipofisis
7.2. Hormonas de la Pars Intermedia
7.3. Hormonas de la Neurohipofisis
7.4. Funcin en el Organismo
TEMA 8.Accin Hormonal Especfica en cada rgano
8.1. Hormonas de la Paratiroides
8.2. Hormonas de la Tiroides
8.3. Hormonas del Pncreas
8.4. Hormonas de la Suprarrenales
8.5. Hormonas Sexuales
8.6. Funcin de cada una de ellas
TEMA 9
Estructura y Funcin de los cidos Nucleicos
9.1. Estructura del ADN
9.2. Estructura del ARN
9.3. Funcin de cada uno
9.4. Aporte en la gentica moderna
TEMA 10.Bases Qumica y Gentica en las Enfermedades
10.1. Consideraciones de la enfrmeles desde el punto de vista qumico
10.2. Bases moleculares de las enfermedades
10.3. Tratamiento de enfermedades genticas
10.4. Efecto de la gentica en las enfermedades del futuro
TEMA 11.La Clnica y el Laboratorio
11.1. Aplicaciones medicas del laboratorios
11.2. Interpretacin clnica del laboratorio
11.3. Exmenes de rutina en medicina
11.4. Exmenes especficos
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11.5. Importancia del laboratorio en le tratamiento

11.6. Control y Evaluacin de enfermedades mediante el laboratorio
III. ACTIVIDADES PROPUESTAS PARA LAS BRIGADAS UDABOL

i.
Tipo de asignatura para el trabajo social.
Asignatura de Apoyo, tipo B.
ii.
Resumen de los resultados del diagnstico realizado para la deteccin de

los problemas a resolver en la comunidad.
De acuerdo a situaciones identificadas en diferentes poblaciones aledaas a la ciudad
de Santa Cruz de la Sierra y a la demanda social de la problemtica sobre salud
pblica y preocupacin de la poblacin por falta de recursos e informacin y apoyo
sobre sus necesidades bsicas es que se plantea el siguiente proyecto tanto de
servicio a la comunidad como de apoyo y orientacin a la misma. Por cuanto el
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proyecto Determinacin del Coagulograma en los pobladores de las regiones de El

Torno y Jorochito los cuales tratarn de dar orientaciones integrales a mediano plazo
para mejorar la calidad de los pacientes identificados y posterior comunicacin a otros
emblemas de salud para la prestacin y atencin correspondiente. El proyecto adems
tiene contemplado la Tipificacin de Grupos sanguneos y Factor Rh en las
poblaciones establecidas, con el fin de brindar un apoyo ms a los comunitarios.
iii.
Nombre del proyecto al que tributa la asignatura.
Determinacin del Coagulograma en los pobladores de las regiones de El Torno y

Jorochito. Tipificacin de Grupos sanguneos y Factor Rh en las poblaciones
mencionadas.
iv.
Contribucin de la asignatura al proyecto.
De acuerdo al contenido programtico de la asignatura y su vinculacin con el

proyecto la contribucin consistir en coadyuvar a otras asignaturas inmersas en el
proyecto.
v.
Actividades a realizar durante el semestre para la implementacin del

proyecto.
Trabajo a realizar por los

estudiantes
Organizacin de actividades
del proyecto
Localidad, aula o
laboratorio
Aula
Inspeccin y contactos con

autoridades de Salud de la
comunidad a seleccionar
Localidad Piloto
Incidencia social
Concientizacin
sobre la necesidad
de conocer medidas
que ayuden en la
mejor calidad de
vida de las personas
enfermas.
Fecha.
Despus del
primer
parcial
Despus del
segundo
parcial
IV. EVALUACIN DE LA ASIGNATURA.
PROCESUAL O FORMATIVA.
A lo largo del semestre se realizarn 2 tipos de actividades formativas:

Las primeras sern de aula, que consistirn en clases tericas, exposiciones, repasos
cortos, trabajos grupales. De laboratorio como las actividades prcticas concernientes
a la asignatura as como el adiestramiento para las Brigadas a realizar.
Las segundas sern actividades de aula abierta que consistirn en la participacin
del alumnado en las actividades de trabajo social en los proyectos Determinacin del
Coagulograma en los pobladores de las regiones de El Torno y Jorochito y
Tipificacin de Grupos sanguneos y Factor Rh en las poblaciones mencionadas.
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Vinculando los contenidos de la asignatura de forma indirecta al proyecto mediante los

hallazgos de alteraciones patolgicas en los comunitarios y el conocimiento del grupos
sanguneo.
El trabajo, la participacin y el seguimiento realizado a estos dos tipos de actividades
se tomarn como evaluacin procesual calificndola entre 0 y 50 puntos
independientemente de la cantidad de actividades realizadas por cada alumno.
La nota procesual o formativa equivale al 50% de la nota de la asignatura.
DE RESULTADOS DE LOS PROCESOS DE APRENDIZAJE O SUMATIVA

(examen parcial o final)
Se realizarn 2 evaluaciones parciales con contenido terico y prctico sobre 50
puntos cada una. El examen final consistir en un examen escrito con un valor del
50% de la nota y la presentacin de los informes y documentos de los proyectos con el
restante 50%.
V. BIBLIOGRAFA
1997
BLANCO Antonio, Qumica Biolgica, Editorial El Ateneo, 6 Edicin, Argentina,
BALCELLS Alfonso, La Clnica y el Laboratorio, Editorial Masson, 17 Edicin,

Mxico, 1997
CARDELLA Lidia, Bioqumica Mdica, Editorial Ciencias Mdicas, Cuba, 1999
GAW Allan, Bioqumica Clnica, Edit. Harcourt S.A., 2 Edicin, Espaa, 1999
LEHNINGER Albert, Bioqumica, Editorial Omega, 2 Edicin, Espaa, 1995
MATHEWS Christopher, Bioqumica, Editorial Mc Graw Hill, 2 Edicin,
Espaa, 1999
MURRAY Robert, Bioqumica de Harper, Editorial Manual Moderno, 15
Edicin, Mxico, 2001
RAMOS Jos Antonio, Bioqumica Bucodental, 1 Edicin, Editorial Sntesis.
S.A., Espaa, 1996
STRYER Lubert, Bioqumica, Editorial Revert, 5 Edicin, Espaa, 2003
VII. PLAN CALENDARIO.
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SEMANA ACTIVIDADES ACADMICAS
OBSERVACIONES
1ra.
Tema I
11/Ago 16/Ago
2da.
Tema I
18/Ago 23/Ago
3ra.
Tema II
25/Ago 30/Ago
4ta.
Tema III
1/Sep 6/Sep
5ta.
Tema III
8/Sep 13/Sep
6ta.
Primera Evaluacin Parcial
Tema IV
15 Sep 20/Sep
7ma.
Primera Evaluacin Parcial
Tema V
22Sep 27/Sep
8va.
Tema V
29/Sep 4/Oct
9na.
Tema V
6/Oct 11/Oct
10ma.
Tema VI
13/Oct 18/Oct
11ra.
Tema VI
20/Oct 25/Oct
Exmenes Extemporneos
12da.
Segunda Evaluacin Parcial
Tema VII
27/Oct 1/Nov
13ra.
Segunda Evaluacin Parcial
Tema VIII
3/Nov 8/Nov
14ta.
Tema VIII
10/Nov 15/Nov
15ta.
Tema IX
17/Nov 22/Nov
16ta.
Tema X
24/Nov 29/Nov
17ma.
Tema XI
1/Nov 6/Dic
18va
Evaluacin final
8/Dic 13/Dic
19va
Evaluacin final
15/Dic 20/Dic
20ma
Exmenes de segunda instancia
22 y 23 Dic
PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD

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GUA DE INVESTIGACIN PRCTICA - GIP # 1

TEMA 1
TITULO: OBSERVACIN DE CLULAS SANGUNEAS
FECHA DE ENTREGA: 2 semana
FUNDAMENTO
La sangre es considerado un tejido vital para la vida con mltiples funciones que van desde
la oxigenacin de las dems clulas de nuestro cuerpo hasta el mantener integro nuestro
organismo evitando que nosotros perdamos nuestras clulas indispensables para la vida, as
como el evitar la proliferacin microorganismos nocivos para nuestra salud como son los
parsitos, bacterias, virus y otros. Al microscopio se vern con un dominio predominante los
glbulos rojos, hemates o eritrocitos, no tienen ncleo y son ms delgados por el centro que
por los bordes. Los glbulos blancos o leucocitos se identifican fcilmente por la presencia
de ncleo, teido de color intenso. Hay varias clases de leucocitos: Linfocitos de tamao
aproximado al de los glbulos rojos, tienen un solo ncleo que ocupa casi todo el glbulo.
Monocitos, son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente, ncleo grande,
redondo, son los ms mviles y su funcin principal es la fagocitosis. Polimorfonucleares
ncleo fragmentado, pueden ser eosinfilos, con abundantes granulaciones teidas de color
naranja, neutrfilos y basfilos. Y por ltimo las plaquetas, pequeos fragmentos celulares
con membrana poco definida.
OBJETIVOS
Mediante el uso del microscopio observar y describir la presencia de clulas por tincin de
Giemsa como parte del tejido sanguneo
MATERIALES
- Microscopio
- Portaobjetos
- Mechero de alcohol
- Lanceta estril
- Cubeta de tincin
- Frasco lavador
- Alcohol Metilico
- Colorante Giemsa
PROCEDIMIENTO
- Con la lanceta estril realizar una puncin en un pulgar.
- Depositar una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos.
- Colocar un portaobjetos como indica el dibujo y deslizarlo sobre toda la superficie del
porta de manera que se pueda obtener una fina pelcula de sangre.
- Colocar el frotis de sangre sobre la cubeta de tincin y aadir unas gotas de alcohol
metlico y dejar que el alcohol se evapore para fijar la preparacin.
- Cubrir por 15 minutos con colorante Giemsa diluido 1:10 toda la muestra de sangre
previamente fijada
- Lavar suavemente dejando escurrir el agua sobre la preparacin
- Dejar secar aireando el porta o bien al calor muy lento de la llama del mechero.
- Observar al microscopio con aceite de inmersin con objetivo x 100
- Dibuje las clulas que usted observe al microscopio
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CONCLUSIONES:
EVALUACIN:
CUESTIONARIO
1. Describa las caractersticas morfolgicas y funcionales de los leucocitos
2. Cul es la funcin que cumplen los eritrocitos y plaquetas en nuestro organismo
3. Qu caractersticas debe cumplir un microorganismo para ser considerado clula
4. Por qu los Eritrocitos y las plaquetas son considerados clulas?
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GUA DE INVESTIGACIN PRCTICA - GIP # 2

TEMA 2
TITULO: FENOTIPAJE SANGUINEO
FECHA DE ENTREGA: 3 semana
FUNDAMENTACIN
La determinacin de grupos sanguneos del sistema ABO y Rh (Antgeno D) se efecta
enfrentado los hemates problemas con antisueros de especificidad conocida Anti-A, Anti-B,
Anti-AB y Anti-D. La presencia o ausencia de aglutinacin o hemlisis de los hemates
ensayados frente a cada uno de los Antisueros, es indicativa de la presencia o no de los
correspondientes Antgenos Eritrocitarios. Los mismos se manifiestan de acuerdo a las leyes
de la herencia mendeliana.
OBJETIVOS
Realizar la Fenotipificacin de grupo sanguneo mediante el empleo de hemoclasificadores
MATERIALES
Placas de vidrio para determinacin de grupo sanguneo

Lancetas
Mezcladores
Pipeta Pasteur
Guantes de ltex.
Hemoclasificadores Anti-A, Anti-B y Anti-D
PROCEDIMIENTO
1. Masajear previamente el dedo anular a fin de que se observe mejor irrigacin sangunea
2. Realizar asepsia del pulpejo del dedo usando torundas con alcohol yodado
3. Utilizando una lanceta realizar un pinchazo en la regin media entre el borde lateral y el
pulpejo del dedo anular

4. Presionar varias veces hasta obtener 3 gotas de sangre, las cuales se depositaran sobre
una placa de vidrio en diferentes lugares

5. Inmediatamente colocar una gota de reactivos hemoclasificadores Anti-A, Anti-B y Anti-D,
a las diferentes gotas de sangre

6. Mezclar suavemente ambas gotas, muestra de sangre y reactivo hemoclasificador
7. Examinar si hay o no aglutinacin.
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8. Anotar los resultados que sern definitivos, si es que no existen dudas en la
interpretacin.
Rvo Anti-A
Rvo Anti-B
-+
-+
--+
+
Grupo
Sanguneo
O
A
B
Ab
Rvo. Anti-D
-+
Presencia Antigeno D
Negativo
Positivo
INTERPRETACIN DE RESULTADOS
- Reaccin Negativa. Ausencia de aglutinacin, la reaccin Antisueros/Hemates denotan
una suspensin homognea, luego de resuspendidos por agitacin suave.
- Reaccin Positiva. Presencia de aglutinacin, la reaccin Antisueros/Hemates denotan
agregacin grosera entre si una vez resuspendidos por agitacin suave, visibles a simple
vista.
RESULTADO
Paciente
N 1
N 2
N 3
N 4
Anti-A
Anti-B
Grupo Sanguneo
Anti-D
Rh D
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. Por qu es recomendada la determinacin de grupo sanguneo en tubo como
confirmatorio, en relacin a la placa?
2. Por qu generalmente slo se identifica el sistema ABO y el Rh?
3. Menciona 10 sistemas sanguneos diferentes a los identificados por rutina
4. Cundo y por qu es importante la identificacin de todos los grupos sanguneos
clnicamente significativos?
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GUIA DE INVESTIGACION PRACTICA - GIP # 3
TEMA 3
TITULO:
Tiempo de Coagulacin
FECHA DE ENTREGA: 4 semana de clases

FUNDAMENTACION TERICA
El fenmeno de la coagulacin enfrenta muchas teoras, la mas sencilla es la que
divide el fenmeno de la coagulacin en dos fases.
PRIMERA FASE
Protombina +
tromboplastina + Ion Calcio +Factor V =
TROMBINA
SEGUNDA FASE TROMBINA + Fibrinogenpo = FIBRINA o formacin del coagulo
En el fenmeno de la coagulacin intervienen numerosos factores los cuales para
su estudio se dividen e 2 grandes grupos.
1.- Los factores PLASMTICOS
2.- Los factores Plaquetarios
LOS FACTORES PLASMTICOS SON:
FACTOR I
FIBRINOGENO
FACTOR II
PROTROMBINA
FACTOR III
TROMBOPLASTINA
FACTOR IV
ION CALCIO
FACTORI V
PROACELERINA
FACTOR VII
PROCOMBERTINA
FACTOR VIII
ANTIHEMOFILICO A
FACTOR IX
ANTIHEMOFILICO B
FACTOR X
FACTOR DE STUART
FACTOR XI
ANTIHEMOFILICO C
FACTOR XII
FACTOR DE HAGENAM
FACTOR XIII
FACTOR ESTABILIZANTE DE LA FIBRINA
Entre los factores Plaquetarios tenemos
Factor I Acelerador de la conversin de la Protombina en trombina
Factor II Acelerador de la conversin del fibrinogeno en Fibrina
Factor III Trombo plstico
Factor IV Antiheparinico
En El laboratorio existen numerosas pruebas que permiten conocer si estos factores
de la coagulacin se encuentran en cantidades normales en la sangre,
permitindonos conocer las alteraciones que se presentan durante este fenmeno.
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II.- PRCTICA
TIEMPO DE COAGULACION
OBJETIVOS.- Determinar el tiempo de coagulacin de un organismo por el Mtodo
de Lee White
MATERIALED
3 Tubos de hemlisis rotulados 1 2 y T (testigo)
Ligadura Algodn Alcohol Yodado
1 Bao Maria a 37 C
Reloj Segundero Cronometro
Mtodos y procedimientos
Jeringa de extraccin Sangunea
1. Extraer 3 ml de Sangre y repartirla equitativamente a 1 ml en cada uno de los

tubos
2. Introducir los tubos al B.M a 37C
3. A los 3 Minutos de obtenida la sangre controlar la coagulacin en el tubo N 1
inclinando ligeramente el mismo
4. repetir lo mismo cada 30 segundos hasta que se coagule la sangre en el tubo
Realizar la misma tcnica con el tubo N 2
5. Una vez coagulada la sangre en el tubo N 2, proceder exactamente igual con el
tubo testigo.
6. Cuando coagula el tubo testigo recin se obtiene el tiempo de coagulacin
7. EL VALOR NORMAL ES DE 5 A 10 MINUTOS, AUNQUE ALGUNOS AUTORES
COMO HOUSAY DAN VALORES COMPRENDIDOS HASTA 15 MINUTOS.
RESULTADOS
El tiempo de coagulacin puede estar alterado por deficiencia de alguno de los
factores plasmticos de la coagulacin, por el uso de anticoagulantes y en los
estados de desfibrinacin o coagulopatias
As tenemos en la hemofilia clsica que constituye un ejemplo tpico en la que la
coagulacin puede tardar mas de una hora.
Debido a presencia de algn anticoagulante circulante
En las hipoprotrobinemias ocasionadas por la falta de vitamina K (Naptaquinonas),
en el recin nacido debido a una absorcin deficiente de Vitamina K por
obstrucciones hepticas, diarreas prolongadas. Por exceso de Antitrombina, en el
Shock anafilctico o despus de la administracin teraputica de Heparina ,
Dicumarol.
Conclusiones
Evaluacin
1. A que se llama coagulacin
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2. Cuales son los 13 factores de la

coagulacin
3. Que es la Heparina
4. que otros anticoagulantes
existen
5. Investigue sobre la Hemofilia
6. Con que objeto se mide el tiempo de

coagulacin
7. Que son las Proteinas
Plasmticas
8. Que es el
Fibrinogeno
9. Que tiene que ver la Vitamina K

10. Que funcin cumple el Ion
Calcio
..
..
Firma y sello del catedrtico
Firma del estudiante
BIBLIOGRAFA
1.- A BLANCO qumica biolgica 7 edicin. Editorial el Ateneo 2000
2.- M.A. JIMNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Qumica Orgnica. Edunsa Ediciones
y Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.
4.- D.K.GRANNER, R K, MURRAT, P,A, MAYES. V.W. RODDWELL. Bioqumica de Harper 16
Edicin, Editorial Manual Moderno Mxico 2001
5.- LEHNINGER Bioqumica, Editorial Omega Barcelona 2001
6.- MURRIA MAYES METER Bioqumica ilustrada Harper Editorial Manual Moderno 2002
Mxico
7.- ROBERTIS E.D.P. Y ROBERTIS E.M.F Biologa Molecular y celular Editorial el Ateneo
Buenos Aires 1995
8.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo
2002
9.-ANTONIO BLANCO Qumica Biolgica Edito 2001
10.-BLOOMFIELD , MOLLY Qumica de los organismos Vivos Edit America 1997;
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TEMA 4
TITULO:
TIEMPO DE SANGRA

El fenmeno de la coagulacin enfrenta muchas teoras, la mas sencilla es la que
divide el fenmeno de la coagulacin en dos fases.
PRIMERA FASE
Protombina +
tromboplastina + Ion Calcio +Factor V =
TROMBINA
SEGUNDA FASE TROMBINA + Fibrinogenpo = FIBRINA o formacin del coagulo
II.- PRCTICA
TIEMPO DE SANGRA
OBJETIVOS Determinar el tiempo de sangra, siguiendo la tcnica,
MATERIAL
Lancetas de puncin
Reloj segundero, Cronometro
Papel filtro
8. Realizar la asepsia del lbulo de la oreja con una torunda de algodn empapada
en alcohol, o alcohol yodado.
9. Realizar la puncin con la lanceta de manera de hacer un corte ni muy pequeo
ni muy grueso
10. Limpiar con un pedazo de papel filtro la primera gota,
11. a partir de este momento controlar cada 30 segundos presionando con el papel
la herida
12. Esperar a que cese la hemorragia
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Resultado
VALORES NORMALES
Alrededor de 3 a 4 minutos segn un mtodo sencillo o de 2 a 5 segn DUKE
El tiempo de Sangra esta alterado en los siguientes casos.
Deficiencia de Plaquetas
Alergias medicamentosas, por ejemplo alergia al yodo, quinina, belladona o por
picadura de insectos.
En las infecciones como el sarampin, escarlatina, tifus, tuberculosis
En la prpura trombocitopenica fulminante de los nios
Conclusiones
Evaluacin
1. Analice por que la importancia de tomar el tiempo de sangra
2. Que medidas tomara si el tiempo de sangra es superior a 6 minutos
3. Que es la prpura trombocitopenica
4. Que es la insuficiencia heptica
5. Investigue sobre alergias medicamentosas
..
..
BIBLIOGRAFA
Mxico
Buenos Aires 1995
2002
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CARRERA DE MEDICINA

TEMA 5
TITULO:
TIEMPO DE PROTROMBINA
FUNDAMENTACION TEORICA
Otro de los mtodos de Laboratorio para la investigacin de los factores de la
coagulacin es el tiempo de Pro trombina
La tromboplastina es una solucin de extracto de cerebro de conejo liofilizado e
incubado a una temperatura de 37 C; las casa comerciales preparan solucin de
TROMBOPLASTINA con cloruro de Calcio Cl2Ca incorporado.
II.- PRCTICA
TIEMPO DE PROTROMBINA
OBJETIVOS .- Determinar el tiempo de pro trombina
MATERIAL
Tromboplastina
sanguneo
Solucin de
Cloruro de Calcio Cl2Ca
40 Molar Plasma
Bao Maria a 37 C reloj segundero Cronometro jeringa extraccin
sangunea, torundas de algodn empapadas en alcohol.

13. Colocar 0,2 ml de tromboplastina con Cloruro de Calcio en un tubo de Hemlisis
14. depositar en el Bao Maria a 37 C durante 3 minutos
15. Realizar lo mismo con el plasma obtenido
16. Tomar 0,1 ml de plasma y depositarlo en el tubo que contiene la Tromboplastina
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17. Inmediatamente empezar a controlar la formacin de un coagulo y medir el

tiempo
Resultados
VALOR NORMAL.- El tiempo normal de protrombina es de 12 a 14 segundos.
Se alarga normalmente y en pequea proporcin en pacientes que presentan
sudoracin profusa por altas temperaturas del ambiente.
Patolgicamente por las siguientes causas:
Por deficiencia de vitamina K, en el recin nacido, por deficiente absorcin de la
misma Vitamina, enfermedades hepticas ; Por ausencia de FIBRINOGENO :por
deficiencia de los factores de la coagulacin V, VII, X
Por accin de ciertos inhibidores de la coagulacin
Conclusiones
Evaluacin
1. Que es el tiempo de PROTROMBINA
2. Como se prepara una solucin de Cl2Ca 40 Molar
3. Que reactivos comerciales conoces como TROMBOPLASTINA (investigue)
4. Con que fin se realiza esta prueba
5. Cuales son las pruebas de rutina que pide un medico
6. Que determinaciones toma como Medico con una Protrombina de 25 segundos
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TEMA 6
TITULO:
RECUENTO de LEUCOCITOS O GLOBULOS
BLANCOS
Ese define como recuento de glbulos blancos al numero de LEUCOCITOS que
existen por mm3 de sangre; en el adulto hombre y mujer el numero oscila entre
8,000 a 10,000 G.B x mm3. en el nio al nacer es de 10,000 a 15,000 GB x mm3.
Los Valores Normales de los Glbulos Blancos pueden sufrir variaciones numerosas
recibiendo un nombre particular en cada caso.
LEUCOCITOSIS
Es el aumento del numero de leucocitos en relacin a los valores normales.
Generalmente se dice que hay leucocitosis cuando se obtiene valores superiores a
a los 10,000 o 12,000 GB x mm3.
Las leucocitosis pueden deberse a muchos factores, adems de los patolgicos; se
produce Leucocitosis despus de ejercicios violentos, Posterior al parto, en los
ataques de Epilepsia, despus de la inyecciones de adrenalina, en reacciones
emocionales de ansiedad, dolor, y anoxia, normalmente hay una ligera leucocitosis
durante el embarazo.
En sujetos normales hay una variacin del numero de GB durante el da, siendo
bajos en la maana y aumentando progresivamente durante el transcurso del da
alrededor de 2000 x mm3.
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Entre las causas patolgicas que producen leucocitosis podemos citar todos los
procesos infecciosos agudos ocasionados por microorganismo piogenos y no
piogenos, en las leucemias, la fiebre reumtica, la septicemia, varicela, sarampin,
endocarditis bacteriana sub. aguda, APENDICITIS, PERITONITIS, otitis, amigdalitis,
colecistitis.
LEUCOPENIA.- Se denomina a la disminucin del numero de Glbulos Blancos con
respecto a los valores normales y con cifras inferiores a 5.000 GB x mm3 se
considera LEUCOPENIA.
Las causa de LEUCOPENIA es caracterstica de ciertas infecciones, fiebre tifoidea,
fiebre ondulante, muchas enfermedades por virus y riketsias, rubola, hepatitis,
infecciones por protozoarios como el KALA-AZAR.
Otras causas de leucopenia en la cirrosis heptica, anemia perniciosa, leucemia
aleucemica, anemia aplasica, exposicin prolongada a rayos x, accin de Frmacos
de las leucemias Cncer. Otros frmacos que producen leucopenia como efecto
secundario Cloranfenicol, fenilbutazona, antitiroideos y anticonvulsivos
Este recuento de Glbulos blancos se realiza con la pipeta de TOMA llamada as por
aproximadamente a las dos terceras partes de su altura lleva un ensanchamiento o
bulbo que sirve para favorece la mezcla de la sangre con el liquido de dilucin. El
extremo largo de la pipeta se halla dividida en 10 partes iguales presentando a la
mitad de la graduacin 0,5 y la graduacin 1, donde empieza la dilatacin, por
encima del bulbo la numeracin 11.
Se aspira sangre hasta la marca 0,5, luego se aspira liquido de dilucin hasta la
marca 11, se agita la pipeta durante 2 minutos obtenindose una dilucin de 1 /20.
El liquido de dilucin que se utiliza es el liquido de TURK una solucin de cido
actico al 3% disuelto en agua destilada, la que tiene pequeas cantidades de azul
de metileno, nicamente para darle color al reactivo. El liquido de Turk tiene la
propiedad de destruir a los Glbulos Rojos, para poder observar as a los glbulos
blancos
II.- PRCTICA
RECUENTO DE GLBULOS BLANCOS
OBJETIVOS
Realizar un conteo de Glbulos Blancos en Laboratorio, para determinar
Leucocitosis, leucopenia,
MATERIAL
Pipeta de TOMA ; Solucin de Turk, Cmara de Neubahuer, Manguera de
aspiracin, Sangre recin extrada, Microscopio, Jeringas, Torundas, Alcohol,
Tincin de observacin de frotis sanguneo.
18. Realizar la extraccin sangunea en un tubo de ensayo (sangre con
anticoagulante)
19. Cargar la pipeta de TOMA ( aspirando con la manguerita hasta la marca 0,5)
20. Cargar el diluyente o solucin de Turk.
21. Agitar o dar vueltas la pipeta de toma
22. Eliminar las 2 primeras gotas de la pipeta de toma y cargar la cmara de
neuwawer
23. Proceder al conteo dentro de la misma con el lente de 10
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Resultados
Para los clculos se toma en cuenta la dilucin, el volumen, y el numero de
cuadrados en el que se ha efectuado el conteo aplicando la siguiente formula B x
10 x 20 / 4 = 50 B= N de clulas blancas. 10 = Volumen 20= Dilucin 4 N de
cuadros. En la practica para obtener el resultado por mm3 de sangre se multiplica el
numero de clulas contadas por 50.
Conclusiones
Evaluacin
1. Que es una Leucocitosis
2. Que es una Leucopenia
3. Que es el liquido de Turk
4. A que se llama Leucocitos
5. Explique y haga un dibujo de como es la cmara de Neuwawer
6. Haga un esquema y dibuje la Pipeta de Toma
7. Que accin tiene el cido actico en la sangre
8. Para que nos sirve conocer esta tcnica
9. Que otros mtodos existen actualmente para el recuentro de Leucocitos
10. Cual es la dilucin de la sangre dentro de la pipeta de Toma
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TEMA 7
TITULO:
GLUCOSURIA

FUNDAMENTACION TERICA.
Normalmente no debe existir glucosa en la orina debido a que la glucosa que llega a
los tubulos renales a travs de la circulacin sufre un proceso de reabsorcin y pasa
nuevamente a la circulacin sin llegar a atravesar los glomrulos renales. La
reabsorcin que sufre la glucosa a nivel de las clulas renales se debe a que en el
interior de dichas clulas la glucosa sufre un proceso de Fosforilacion semejante al
que se lleva en el intestino. La glucosa se fosforiliza a un valor de 170 mg% de
glucosa en sangre, cuando en la sangre existen valores superiores a 170 mg% se
excede la capacidad de Fosforilacion, por lo que el excedente de glucosa que no se
fosfata atraviesa las clulas renales y es eliminada a travs de la orina.
El grupo funcional orgnico CHO que se encuentra en la glucosa tiene propiedades
reductoras. Aprovechando esta propiedad que tienen los carbohidratos es utilizamos
un reactivo que fcilmente se reduce de Sal cprica (AZUL) a Sal cuprosa (Roja)
por la accin reductora de este grupo funcional. El Reactivo recibe el nombre de
Licor de Fehling o Reactivo de Fehling. Consta de 2 soluciones una solucin A de
sulfato cuprico azul y otro frasco de solucin B o solucin alcalina que se mezclara
en el momento de su uso.
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II.- PRCTICA
OBJETIVOS
Determinar Glucosa en orina por el mtodo de Fehling, en pacientes que se
sospecha puedan eliminar Glucosa
MATERIAL
Orina, Reactivo de Fehling, Pipetas de 5 ml, goteros, tubos de ensayo, Bao Maria,
pinzas de Madera, Solucin de Glucosa pura como reactivo testigo.
1) Cargar un tubo de ensayo con 1 ml de orina
2) Aadir al mismo 1 ml de solucin A (Licor de Fehling)
3) Aadir al mismo 1 ml de solucin B (Licor de Fehling)
4) Agitar este tubo y llevar a Bao Maria
5) Esperar anotar los cambio que se observa
6) Realizar los mismos pasos con una solucin de Glucosa sirve como testigo
Resultados
Si el tubo de ensayo en el bao Mara, cambia de color azul a color rojo ladrillo , la
prueba se considera como positiva, esto se comprueba con el tubo testigo de
glucosa pura anidra que llevo el mismo tratamiento
Conclusiones
Evaluacin
1. Que es Glucosuria
2. Que es Glicemia
3. Explique en un ensayo corto cientfico por que se elimina Glucosa por Orina
4. Como puedo medir esta glucosa eliminada por orina
5. Que diagnostico piensa si Ud. ve una prueba positiva de Glucosuria
6. Cual es el fundamento del cambio de color de este reactivo
7. que composicin tiene el Licor de Fehling
8. Como puedo confirmar este diagnostico , con que otras pruebas de laboratorio
9. Existen parientes con diabetes en su familia, abuelos, tos hermanos, se hicieron esta
prueba?
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TEMA 8
TITULO:
DETERMINACIN DE LA GLICEMIA SANGUNEA
Fotocolorimetrico y por el GLUCOMETRO
Numerosas determinaciones
bioqumicas de la sangre, se encuentran basadas en
reacciones colorimtricas, para lo cual se utiliza aparatos especiales conocidos con el
nombre de foto colormetros o fotmetros colorimtricos.
Numerosas sustancias tienen la propiedad de poseer un color propio o bien de adquirirlo
por el agregado de un determinado reactivo.
Las reacciones colorimtricas se basan en la propiedad que tiene las substancias de
dejar pasar la luz a travs de una solucin coloreada.
En todas las determinaciones fotocolorimetricas se utiliza soluciones patrones o
soluciones testigo de concentracin conocida, con la que se efecta una serie de clculos o
curvas de calibracin que nos van a permitir la concentracin de la sustancia que estamos
determinando.
La transmisin de onda est comprendida entre 400 a 700 milimicrones, en una
coloracin que va de del azul al rojo.
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Todas las determinaciones calorimtricas siguen la Ley de Baer que es la relacin que
existe entre la concentracin de la sustancia y la transmisin de la onda.
Existen numerosas clases y marcas de foto colormetros y espectrofotmetros , siendo
imposible describir cada uno de ellos. Existen la ventaja que cada casa comercial junto con
el aparato elabora un manual de instrucciones sobre el manejo y el funcionamiento,
adems incluye las tcnicas adecuadas para cada aparato.
Las partes ms importantes de que consta un foto colormetro son:
1- Filtros de color, que pueden ir incluidos en el mismo aparato, hacindolos rotar por
medio de un tornillo especial o puede encontrarse en forma de placas individuales.
El color varia del azul , al verde, y al rojo, teniendo cada uno una numeracin
especial de acuerdo a su tonalidad
2- Calda de luz, que es donde se encuentra la lmpara fotocolorimetrica.
3- Caldas o cubetas que sirven para introducir os tubos fotocolorimetricos que contiene
la solucin a analizar, se encuentra situados por delante de la cmara de luz.
4- Tornillos macro y micro que sirven para llevar el aparato a Cero, o sea graduarlo
segn que las determinaciones sean macro o micromtricas.
5- Escala graduada. Consta de una aguja que mueve en toda la extensin de la misma
garcas a un tornillo que se encuentra situado por delante de la misma y que sirve
para recorrer l aguja y llevara a la graduacin correspondiente. En algunos
fotocolorimetros la escala graduada posee graduaciones que corresponden al
porcentaje de actividad y a la densidad ptica.
6- Interruptor que sirve para prender y apagar el aparato.
Los fotocolorimetros son aparatos sumamente delicados y costosos, debiendo tenerse
mucho cuidado en el manejo. Cuando no se lo usa debe tapar con una funda de plstico
o de una tela que no deje pelusa. Es necesario utilizar un estabilizador de la corriente a
fin de que las oscilaciones de la luz debido al alza o a la disminucin del voltaje quemen
la lmpara fotocolorimetrica , por otra parte cuando se produce estas alteraciones
durante la determinacin estas susceptibles de dar resultados errneos.
La lmpara del foto colormetro debe encontrarse prendida por lo menos unos cinco
minutos antes de la determinacin a fin de que el filtro que se va utilizar tome la
temperatura adecuada.
Se recomienda siempre tener la precaucin de llevar la aguja a cero antes de
apagar el aparato, lo mismo debe hacerse cuando se va a cambiar el filtro color.
II.- PRCTICA
DETERMINACIN DE GLICEMIA (METODO FOTOCOLRIMETRICO) Y POR EL
GLUCOMETRO
OBJETIVOS Determinar los valores normales de Glicemia. Glucosa en sangre por
los mtodos Fotocolorimetrico y por el Glucmetro
MATERIAL
Tubos de ensayo, Foto colorimetro, espectrofotometro, reactivos de Wiener,
Glucosa pura, Jeringa, Sangre venosa, Paciente en ayunas.
DETERMINACIN DE LA GLUCOSA METODO DE WIENER

Fundamento
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La glucosa reacciona especficamente con la ( toluidina, una amina aromtica primaria) ,

en medio actico y por la accin del calor, originando una mezcla a partes iguales de
glicosilamina y base de Schiff. El color obtenido se lo determina filtro N 63 67
REACTIVOS
REACTIVOS CROMOGENICO
Solucion 990 mol/L de acetato o-tuluidina y 20 mol/L de tooca r bamidaen cido actico al
88% con catalizador. Estable a temperatura ambiente.
ESTNDAR
4 ml de solucin estabilizada de glucosa de una concentracin igual a 1 g/ L. Estable a
temperatura ambiente .
MUESTRA SANGUINEA
Puede usarse suero o plasma. Cuando se usa plasma, se aconseja utilizar como
anticoagulante EDTA y fluoruros.
TECNICA
En tres tubos fotocolorimetrica marcados B (blanco) , S ( Standard ) y D ( desconocido )
colocar :
Agua destilada
B
S
D
Standard
20 ml
Muestra
20 ml
Reactivo
2.5 ml
2.5 ml
2.5 ml
Llevar los tubos al bao de agua hirviente durante 4 y medio a 5 minutos. Retirar y
colocar en agua fra de 2 a 5 minutos. Leer en foto colormetro filtro rojo N 67, llevando al
aparato a cero con el blanco. El color es estable durante 45 minutos.
Resultados
CCULO
Se usa la siguiente frmula:
Glucosa g / L
=
F = 1.00 g / L
________
S
Conclusiones
xF
1. Evaluacin
2. Diferencia entre Glicemia y Glucosuria
3. Que es un espectrofotmetro, o un foto colormetro
4. Cual es el valor normal de Glucosa en un Paciente
5. Que hipoglucemia
6. Que es hiperglucemia
7. Cuando debo pedir un examen de Glicemia
8. Que es Polidipsia, Polifagia, Poliurea
9. En caso de no realizar la prueba fotocolorimetrica que otro mtodo puedo utilizar
10. Que es el Glucmetro
11. Que otros mtodos existen a parte del Fotocolorimetrico, el glucmetro. Actualmente
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TEMA 9
TITULO:
DETERMINACIN DE UREA
NH2-C=O-NH2
FECHA DE ENTREGA: 11 Semana de clases
La Urea NH2-C=O-NH2 es el principal producto del catabolismo proteico,
qumicamente es una carbamida que tiene un peso molecular de 60 gr/ml, es una
molcula pequea donde el nitrgeno representa aproximadamente el 50 % de su
peso total.
Se presenta como un polvo blanco, completamente soluble en el agua que atraviesa
fcilmente las membranas celulares y capilares. Desde el punto de vista
farmacolgico acta como diurtico suave.
La Urea consttuye el principal producto del catabolismo proteico, se enfoca el
inters en su metabolismo, en su absorcin, transporte, almacenamiento, y
excrecin de las proteinas y de los aminocidos
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Las proteinas son introducidas al organismo mediante la alimentacin sufren una

transformacin enzimatica a lo largo del tubo gastrointestinal hasta degradarse a
polipetdidos pequeos y aminocidos los cuales luego de atravesar las vellosidades
intestinales llegan al hgado donde van a sufrir una nueva transformacin.
En el hgado los aminocidos sufren dos procesos
1.- DESAMINACION.
2.- TRASAMINACION
En ambos casos se libera NH3 ( amoniaco) que va a constituir el compuesto
fundamental para la formacin de la Urea.
SNTESIS DE LA UREA.- En la sntesis de la Urea interviene 4 aminocidos que
son Argirina, citrulina, Ontina y el cido aspartico
Sintetizamos el ciclo de la urea conocido con el nombre de CICLO de Krebs
HENSELEID en los siguientes pasos.
1.- El NH3 se une con el CO2 y el ATP en presencia de la enzima sintetasa de fosfato
de carbamilo para forma el FOSFATO DE CARBAMILO.
2.- El fosfato de carbamilo reacciona con la Ornitina en presencia de la enzima
sintetaza de Ornitina para formar la Citrulina.
3.- La citrulina reacciona con el cido aspartico en presencia de la enzima
arginosuccinica para formar el cido argino succnico.
4.-el cido argino succnico es atacado por la enzima argino succinasa originando
argirina y cido fumarico.
5.-La argirina es atacada por la enzima arginasa, formando Urea y Ornitina la que
iniciara nuevamente el ciclo.
La formacin de urea constituye un proceso fisiolgico sumamente rpido y eficaz
que permite utilizar grandes cantidades de NH3, que es en un compuesto toxico ya
que diluciones hasta de 1 en 70.000 ocasiona la muerte de los mamferos.
La Urea como tal no es toxica, se encuentra contenida en diversos lquidos
Biolgicos siendo eliminada por medio de la orina con suma facilidad.
Los aminocidos a nivel del intestino son atacados por las bacterias intestinales
originando NH3, el que por medio del sistema porta llega al hgado donde va a ser
utilizado para sintetizar Urea, cuando existen alteraciones anatmicas y funcionales
del Hgado, el NH3 no penetra en el tejido heptico, por lo que retorna a la sangre,
como presenta una gran afinidad por el tejido Nervioso va a localizarse a nivel del
sistema cerebral ocasionando el cuadro patolgico, conocido con el nombre de
SHOCK HIPERUREMICO, COMA UREMICO que se caracteriza por onnibulaciones,
alteraciones mentales, producindose trastornos graves que pueden ocasionar la
muerte
La urea constituye la fraccin de nitrgeno no proteico mas importante en la
mayora de los lquidos biolgicos. En el hombre es el principal producto final del
metabolismo proteico.
Se produce en el Hgado y es excretado por la orina a travs de los riones.
Una elevacin de la concentracin serica de urea, se interpreta generalmente como
una posible difusin renal. Sin embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que
los valores sricos de urea se encuentra ntimamente relacionados con la dieta y el
metabolismo proteico, por lo que cualquier alteracin en estas variedades se
traducirn en un cambio de la concentracin de urea en suero.
Fundamentos del Mtodo:
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La ureasa descompone especficamente la urea produciendo dixido de carbono y

amoniaco. Este reacciona en medio alcalino con salicilato e hipoclorito para dar
indofenol color verde.
II.- PRCTICA
DETERMINACIN DE UREA SANGUINEA
OBJETIVOS Determinar fotocolorimetricamente la cantidad e Urea presente en el
organismo humano
MATERIAL
Espectrofotmetro
Tubos de ensayo
Micro pipetas y pipetas
Vasos precipitados
para
medir
los
Jeringas,
Guantes,
volmenes indicados.
Torundas
Bao Mara
.
Muestra
Suero, Plasma u Orina
Tcnicas para Suero o Plasma
a)En tres tubos B (Blanco), D (desconocido) y S (Estndar ) Colocar:
B
10 ul
Standard
Suero o Plasma
10 ul
Reactivo 1 +
Ureasa
1ml
1ml
1ml
Mezclar: Incubar 5 minutos a 37 C o 10 minutos a
temperatura Ambient luego agregar
Reactivo 2
1ml
1ml
1ml
Mezclar: Incubar 5 minutos a 37 oC o 10 minutos a
temperatura Ambiente. Leer en espectrofotmetro a
570 nm.
Valores de Referencia
Los valores normales esperados en son:
Suero o Plasma: 0,10 0,45 g / l
0,30 g% en suero 0,40 g%
30 mg % 40 mg% Limite mximo 50 mg%
Resultados
Desde el punto de vista clnico tiene importancia nicamente el aumento de la urea
sangunea, la que recibe el nombre de Hiperuremia ( hiper azotemia .) La
Hiperuremia se presenta en la insuficiencia renal orgnica.
Hiperuremia RENAL AGUDA Y CRNICA
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Hiper Uremia Aguda

Acompaada de anuria, oliguria, generalmente se alcanzan cifras muy elevadas de
urea, sin embargo la mayor parte de los casos son fcilmente reversibles, volvindose
fcilmente a los valores normales. Se presenta en los siguientes casos
1.- En la glomrulo nefritis aguda, en la cual la reaccin Xantoproteica es negativa,
debido que no hay retencin de compuestos aromticos.
2.- En la Necrosis maligna anurica que se presenta en ciertas alteraciones que
pueden ser ocasionadas por reacciones tras funcionales.
3.-En Necrosis de tejido renal, por intoxicacin con cloruro de mercurio u otro toxico.
4.- En obstruccin por calculo renal o inflamacin de la prstata
Hiperuremia CRNICA.- esta va acompaada de una eliminacin normal de la orina
o incluso una poliurea compensadora. Los valores altos de la urea son de tipo
irreversible, presentndose en todas las alteraciones crnicas del rin. Se presenta
en los siguientes casos
1.- En la Glomrulo nefritis crnica, la que se diferencia de la aguada por que la
reaccin Xantoproteica es positiva.
2.- En la esclerosis renal secundaria.
3.- En intervenciones quirrgicas.
4.-en Mielomas mltiple de rin.
HIPER UREMIA EXTRA RENAL.
Este tipo de uremia no va acompaada de una alteracin renal orgnica, aunque en
ciertos casos puede presentarse una alteracin renal funcional, se presenta en los
siguientes casos:
1.- Insuficiencia circulatoria, donde existe una deficiente irrigacin de la sangre del
rin
2.- Insuficiencia cardiaca congestiva que es una de las causas mas frecuentes de
hiper uremia extra renal.
3.-insuficiencia cardiaca perifrica
4.- Deshidratacin cloropenica, es decir por deficiencia de cloro ocasionada por
vmitos, diarreas, lavados gstricos, en este caso la Hiperuremia ce por la
administracin de cloro.
5.- en el coma diabtico
en los TEC Traumatismos encfalo craneanos
Conclusiones
Evaluacin
1. Que es la Urea , cuales son los valores normales de Urea
2. A partir de que aminocido se realiza el ciclo de la Urea
3. A que se denomina HIPEUREMIA
4. Que es hiper uremia extra renal
5. que significa las palabras anuria, poliurea, glucosuria
6. Explique el coma diabtico
7. Que valores considera normales de urea
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8. es lo mismo hablar de 30 mg% a 40 mg% que 0,30 g/ litro a 040 gr/lt

9. Diferencie Hiperuremia aguda de crnica
10. que significa afinidad por el tejido Nervioso
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BIBLIOGRAFA
2.- M.A. JIMNEZ TEBAR Formula y Nomenclatura de Qumica Orgnica. Edunsa Ediciones y
Distribuciones Universitarias S.A. Barcelona 1993.
Mxico
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8.- SOLANGE BENTO FARRA Secretos y Misterios del ADN, editorial Sarvier San Pablo 2002

TEMA 10
TITULO:
DETERMINACIN DE COLESTEROL
SANGUINEO
El Colesterol es un lpido simple que deriva de los Esteroles, se encuentra
normalmente en la sangre en la proporcin de 150 a 250 mg %
Su presencia en el organismo tiene un doble origen, exgeno y endgeno.
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El origen exgeno se refiere al colesterol que es introducido mediante la

alimentacin, principalmente a base de grasas, huevos, jamones, mantequillas,
etc.
El origen endgeno se refiere al colesterol que es sintetizado en el organismo,
siendo el principal rgano sintetizador el hgado y siguindole en importancia la
piel, el bazo, los riones y las arterias.
La cantidad de colesterol que se sintetiza en el hgado oscila de 1.5 a 2
gramos y en
los tejidos extrahepaticos de 0.5gramos en las 24 horas o sea
que normalmente se sintetiza mayor cantidad de colesterol del que introduce
mediante la alimentacin
El colesterol tiene tendencia a depositarse en las paredes arteriales. Esta
propiedad y el hecho de que las paredes arteriales sinteticen colesterol, ha
cobrado gran importancia y ha sido objetivo de numerosos estudios ya que se
ha demostrado que puede ser una e las causas para originar la arteriosclerosis
o ateroesclerosis, que se caracteriza por el endurecimiento de las paredes
arteriales la que pierden su flexibilidad natural por lo que la sangre es enviada
con dificultad a todo el organismo y principalmente al cerebro.
El colesterol tiene gran importancia por ser el precursor de compuestos de
gran inters fisiolgico como ser: las hormonas corticales y sexuales , los cidos
y sales biliares y la vitamina D. es eliminado del organismo por medio de la
materia fecal al estado de coprosterol y por medio de los cidos y sales biliares.
Las Lipoprotenas plasmticas son partculas esfricas que contienen
cantidades variables de colesterol, triglicridos fosfolpidos y protenas. Estas
partculas solubilizan y trasportan el colesterol en el torrente sanguneo.
La proporcion relativa de proteina y lpido determina la densidad de estas
lipoprotenas.
La funcin principal de estas lipoprotenas de alta densidad en el metabolismo
lipidito es la capacidad y trasporte de colesterol desde los tejidos perifericos al
higado en un proceso conocido como trasporte reverso de colesterol.
( mecanismo cardioprotectivo).
El DHL colesterol bajo, esta asociado con un alto riesgo de enfermedades
cardiacas. Por este motivo la determinacin de HDL colesterol es una
herramienta util en la identificacin de individuos de alto riesgo.
Fundamento del Mtodo
Las lipoprotenas de alta densidad (HDL) se separan precipitando
selectivamente las lipoprotenas de baja y muy densidad (LDL y VLDL)
mediante el agregado de sulfato dextran de PM 50.000 en presencia de iones
Mg++.
En el sobrenadante separado por centrifugacin, quedan las HDL y se realiza la
determinacin del colesterol ligado a las mismas, empleando el sistema
enzimtico Colesterol oxidasa / Peroxidasa con colimetria segn Trinder (fenol/4Aminofenazona).
II.- PRCTICA
OBJETIVOS:
Determinar el colelesterol sanguneo bioqumicamente
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CARRERA DE MEDICINA
MATERIAL
Espectrofotmetro
Micro pipetas y pipetas

para
medir
los
volmenes indicados.
Bao Mara
Reactivos
Suero
Tubos de ensayo
Vasos precipitados
Jeringas,
Guante,
Torundas.
1. Poner en un tubo de ensayo 0,5 ml (500ul) de muestra,
2. agregar 50 ul de reactivo Precipitante. Homogeneizar agitando
(sin verter) durante 20 segundos y dejar 30 minutos en
refrigerador o 15 minutos en bao de agua a 10 oC no colocar en
congelador.
3. Centrifugar 15 mit. A 3000 r.p.m. Usar el sobrenadante liquido
como muestra y repartir en tre tubos de ensayo marcados de la
siguiente manera.
B
S
D
Sobrenadante
100 ul
Standard
20 ul
Reactivo
de
Trabajo
2 ml
2 ml
2ml
Mezclar e incubar 15 minutos a 37 oC retirar del bao y enfriar. Leer a 505 nm en
espectrofotomeyro o en colorimetro con filtro verde ( 490 530 nm), llevando a cero
con el blanco.
Valores de Referencia
Los valores normales esperados para HDL colesterol son los siguientes:
Hombres: 0,30 0,70 g/l
Mujeres: 0,30 0,85 g/l
Resultados
Conclusiones
Evaluacin
1. Que es el colesterol, dibuje su formula
2. como se determina el colesterol en sangre
3. Como se forma el colesterol endgeno
4. Que complicaciones trae el aumento del colesterol
5. Cual es el colesterol malo el LDL o el HDL (investigue)
6. Cual es el valor normal de Colesterol Total, LDL, HDL, y triglicridos
7. Que es el 7 dihidrocolesterol
8. De donde proviene la Vitamina D2
9. Que sustancia es activada por la influencia de los rayos infrarrojos
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10. Por que ingresamos al laboratorio, a verificar que...................?
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TEMA 11
TITULO:
determinacin de cido rico
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CARRERA DE MEDICINA
Fundamentacion terica
El cido rico proviene de la degradacin de las purinas, compuestos orgnicos que se hallan
formando una parte fundamental de los cidos nucleicos y desoxirribonucleicos. El cido rico
construye el principal producto del catabolismo de las purinas en El hombre y en los mamferos
superiores ,
En seres inferiores es atacado por la enzima uricaza siendo transformado en alantona que se
elimina por medio de la orina.
En el hombre la mayor parte del cido rico que se forma proviene de la degradacin de la
guanosina.
El cido rico tiene una reaccin francamente cida, es poco soluble en el agua, se
disuelve en una proporcin de 6.5 g/100 ml. En el plasma sanguneo debido al PH de la sangre
tiene la propiedad de combinarse con diversos cationes, formando sales monoalcalinas que
tiene una solubilidad mayor a la del cido puro, aproximadamente de 20 a 25 gr/.
El cido rico que se encuentra circulando en la sangre tiene un doble origen: endgeno y
exgeno.
El origen endgeno es que el que se produce debido a la degradacin de los aminocidos y
de las nucleoprotenas en el interior del organismo.
El origen exgeno se refiere al cido rico que penetra al organismo por medio e la
alimentacin, ya que existen cierto grupo de sustancias que se caracterizan por su gran
riqueza en cido rico, como por ejemplo: los casos , y los riones principalmente, los cuales
se los conoce con el nombre de genrico de ureinas .
El cido rico es eliminado del organismo a travs de la orina. Ya sea al estado de cido rico
puro o de sales conocidas con el nombre de uratos. Su solubilidad en la orina es relativamente
mediana, en las orinas muy cidas pero en las orinas alcalinas o neutras es muy grande,
aproximadamente de 100 a 110 gr%.
La acumulacin de este cido rico en nuestro organismo se conoce como la enfermedad de
los ricos o la llamada GOTA, que se caracteriza especialmente por producir unos dolores
agudos, como agujas que pinchan en el dedo gordo del pie, y que deja al paciente adolorido
profundamente e incapacitado de realizar ninguna labor, postrado en espera de bajar este
cido.
DETERMINACIN FOTOCOLORIMETRICA DEL CIO URICO.
METODO DL URICOSTAL
FUNDAMENTO
El suero se desproteiniza por la accin del cido tunstico. El lquido claro obtenido de la
desproteinizacin contiene cido rico, el que reacciona con el reactivo fosfo-litio-tungsteno
con el que forma un complejo de tungstato de cido rico, de color azul, cuya intensidad es
directamente proporcional a la cantidad de cido rico presente en el suero.
REACTIVOS
1. cido tunsgtico pre-formado.
2. Reactivo n 1- Contiene: 1.84 mol/litro de CO3Na2, este reactivo en la poca del invierno
se lo debe conservar en estufa a 37C, si presentara precipitaciones por efecto del fro, se
debe introducir el frasco a un recipiente que contenga agua a 37C hasta disolucin
completa.
3. Reactivo n 2- Se halla constituido por partes equimoleculares de cido fosfrico y cido
tungstico a los que se aade 294 mililitros de SO4 Li2.
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4. Muestra- Est representada por suero sanguneo, se aconseja separar el suero del cogulo
antes de las horas de obtenida la sangre.
El cido rico es un metabolito de las purinas, cidos nucleicos y nucleoprotenas.
Habitualmente la concentracin de acido urico en suero varia de un individuo a otro de
acuerdo a varios factores tales como: sexo, dieta, origen tnico, constitucin gentica,
embarazo.
Niveles anormales de cido rico en suero son ndice de desorden en el metabolismo
de las sustancias que lo originan o de defecto en su eliminacin.
Fundamentos del mtodo
El acido urico de la muestra desproteinazada con acido tusgstico preformado,
reacciona en medio alcalino de carbonato sodico con el reactivo fosfo-litio-tngstico,
produciendo un color azul, que es proporcionado a la concentracin de cido rico de
la muestra, y se mide colorimetricamente.
II.- PRCTICA
DETERMINACIN DE ACIDO URICO
OBJETIVOS
Determinar el cido rico normal del organismo
MATERIAL
Espectrofotmetro
Micro pipetas y pipetas para medir los volmenes indicados.
Bao Mara
Tubos de ensayo de centrifuga
Vasos precipitados
Jeringas, Guantes, Torundas.
Suero
Muestra
En tres tubos de ensayo debidamente marcados colocar.
Desproteinizado
2,5 ml
Agua destilada
2,5 ml
5 ml
Standard
50 ul
2ml
Reactivo 1
0,5 ml
1 ml
0,5 ml
Reactivo 2
0,5 ml
1 ml
0,5 ml
Mezclar por inmersin y colocar en ba de agua entre 22 y 28 C. Entre 30 y 45
minutos despus, leer en espectrofotmetro a 660 nm, llevando al equipo a cero con el
blanco.
Resultados
Valores de referencia
Suero:
Hombres :35 a 70 mg/ I
Mujeres 25 a 60 mg / l
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CARRERA DE MEDICINA
Conclusiones
Evaluacin
1. Que es el cido rico explique el origen endgeno y exgeno
2. Por que llaman al cido rico Gota
3. A que se llama degradacin de las purinas
4. Que es la guanosina
5. Que medicamentos existen para disminuir la Gota o acumulacin de cido rico
6. Cual el fundamento de hacer una medicin fotocolorimetrica
7. Que significa desproteinisar la sangre
8. Que color da el Desproteinizado de cido rico
9. Que significa la eliminacin de Uratos por orina
10. A que se viene al laboratorio de Bioqumica Clnica
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CARRERA DE MEDICINA
TEMA 12
TITULO:
DETERMINACIN DE LA CREATININA EN SANGRE

La Creatinina es un compuesto nitrogenado que se encuentra contenida en gran proporcin en
el msculo donde desempea un papel importante en el fenmeno de la contraccin muscular.
Es un compuesto nitrogenado que se obtiene a partir de la degradacin de las proteinas
interviniendo en su formacin 3 aminocidos. GLICINA, ARGIRINA, METIONINA.
El paso inicial consiste en que al reaccionar la glicina con la argirina origina el compuesto
conocido con el nombre de GLICOCIAMINA, la que al unirse a la metionina forma la
CREATINA.
La CREATINA no se elimina del organismo al estado de creatina pura si no como su anhdrido
conocido con el nombre de CREATININA.
Solo en el hombre adulto la orina contiene CREATININA. En La mujer adulta en la poca del
embarazo y de la lactancia y en el nio en ambos sexos, la orina contiene creatina y
CREATININA.
La cantidad de Creatinina que se encuentra circulando en la sangre es independiente del peso
del individuo y de la masa muscular.
En la actualidad juntamente con la UREA la Creatinina constituye uno de los principales
productos del catabolismo PROTEICO; su determinacin reviste gran importancia para
determinar la gravedad de la lesin RENAL.
La Creatinina se elimina muy fcilmente del organismo y su determinacin tanto como para el
diagnostico y el pronostico de ciertas enfermedades tiene gran importancia, encontrndose
principalmente relacionada con el aumento de la urea el acido URICO. Las alteraciones mas
importantes de la CREATININA se presentan en los siguientes casos:
1. Nefropatias cuando se alcanzan valores superiores a 5 mg% el pronostico es fatal a corto
plazo esto solo se presenta cuando las enfermedades renales se encuentran sumamente
avanzadas
2. En una nefritis aguda existe un aumento de la Creatinina pero es fcilmente reversible.
3. En las enfermedades cardiacas avanzadas
4. En obstrucciones reales, alteraciones de la prstata. O por presencia de clculos renales y
urteres tapados.
5. En el Gigantismo y la acromegalia
II.- PRCTICA DETERMINACIN DE CREATININA SANGUINEA
OBJETIVOS .Determinar la cantidad de creatinina presente en la sangre
MATERIAL:
1) Reactivo N 1 cido Pcrico
2) Reactiv N 2 Solucin Buffer de Glicina en NaOH
3) Solucin testigo de Creatinina 20 mg/Litro de Creatinina pura estable
4) Muestra sangunea SUEO FRESCO ( Sangre sin anticoagulante)
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METODO
La Creatinina reacciona con el picrato alcalino , previa desproteinizacion del suero con
el cido pcrico, se forma una coloracin estable que se la determina
fotocolorimetricamente con el filtro color verde N 53.
1. Colocar en un tubo de ensayo 1,5 ml de suero y 7,5 ml del reactivo N1, mezclar ,
reposar 10 minutos
2. Centrifugar a 3000 rpm 5 minutos
3. Prepara 3 tubos de ensayo (B) Blanco (S) STANDART (D)Desconocido
B
S
D
Sobrenadante
6 ml
Standart
1 ml
Agua
3,5 ml 2,5 ml
Reactivo N 1
3,5 ml 3,5 ml
Reactivo N 2
1 ml1 1 ml 1 ml
Mezclar los tubos por inversin dejar reposar entre 20 y 30 minutos luego proceder a su lectura
en el foto colormetro
Para los clculos se utiliza la siguiente formula
Creatinina mg /lt = D x f
Factor 20/Standart
RESULTADOS
VALORES NORMALES
Los valores normales en Suero son de 0,8 mg % a 1,4 mg%
ORINA 0,9 mg % a 1,5 mg %
Clearence de Creatinina 80 a 140 mg % 125 mg% termino medio
Algunos autores coinciden en que el termino medio de la Creatinina puede oscilar entre 1 y 2
mg%, encontrndose mas en el hombre que en la mujer debido a la masa muscular.
CONCLUSIONES
EVALUACIN
1. Que es La Creatinina
2. Como se forma la Creatinina
3. Que es la Creatina
4. En que enfermedades suele estar aumentada la Creatinina
5. En un caso de Insuficiencia Renal como estn los valores de Creatinina
6. Como se determina la cantidad de Creatinina en sangre
7. Que es el asido Pcrico
8. Que otros usos se le da al cido pcrico
9. Ultimas tcnicas de investigacin de la Creatinina
10. Esta dosificacin para que le sirve en el transcurso de su carrera
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