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Y FARMACIA,
UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA,
INFORME FINAL
ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE DIEZ ESPECIES NATIVAS COMO
POSIBLES PRESERVANTES DE ALIMENTOS Y FUENTE PARA EL
DESARROLLO DE NUTRICEUTICOS.
Proyecto FODECYT 28-2007.
AGRADECIMIENTOS
La realizacin de este trabajo ha sido posible gracias al apoyo financiero dentro del
Fondo Nacional de Ciencia y Tecnologa (FONACYT), otorgado por la Secretara
Nacional de Ciencia y Tecnologa (SENACYT) y el Consejo Nacional de Ciencia y
Tecnologa (CONCYT).
ii
RESUMEN
Los antioxidantes naturales presentes en los alimentos se consideran preservantes
que se encargan de retardar el deterioro, rancidez o decoloracin por la oxidacin. Su
funcin es la de unirse al agente oxidante, para que ste no este libre para reaccionar con
el resto de los compuestos presentes en los alimentos y por lo tanto evitar la oxidacin. La
presente investigacin fue llevada a cabo con el objetivo de generar informacin qumica
y biolgica de 10 especies nativas usadas como alimento, condimento o medicina para
determinar su posible potencial en la industria alimenticia y farmacutica.
Se recopil informacin cientfica sobre las 12 especies colectadas y evaluadas
(Brosimum alicastrum, Cnidoscolus chayamansa, Cucurbita argyrosperma, Erythrina
berteroana, Fernaldia pandurata, Gliricidia sepium, Litsea guatemalensis, Manilkara
sapota, Piper auritum, Solanum nigrescens, Spondias mombin y Tagetes lucida) y se
prepararon igual nmero de monografas que se incluyen en este informe final, las cuales
pueden ser consultadas para conocer la informacin disponible de cada especie. Se
estudiaron complementariamente otras 12 especies en apoyo a un Seminario de Tesis
Todas las especies colectadas se determinaron botnicamente y se depositaron
muestras en el Herbario CFEH del Laboratorio Farmaya. Se les realiz el anlisis de
control de calidad segn procedimientos estndar, determinndose sus parmetros bsicos
(% de humedad de la materia seca, cenizas totales, % de rendimiento y % de humedad del
extracto seco). Se realiz el tamizaje fitoqumico de los extractos secos de las especies
vegetales, demostrndose la presencia de flavonoides y antocianinas, aceites esenciales,
cumarinas y taninos de varias de las especies evaluadas; sin embargo, ninguna de las
especies analizadas demostr la presencia de antraquinonas.
La actividad antioxidante de las especies fue evaluada mediante cinco parmetros:
cuantificacin de fenoles totales por macro y micromtodo, TDAC por macro y micromtodo y determinacin del poder reductor del hierro. Se realiz un primer ensayo para
determinar actividad antioxidante mediante la emulsin del cido linolico. Se evalu por
TLC la actividad antioxidante por DPPH. Se evalu la aplicacin de la fluorometra al
anlisis de actividad antioxidante mediante el anlisis cuantitativo de quercetina.
Los resultados fueron analizados mediante SPSS, se realiz un anlisis univariado,
por la prueba de t-student a un nivel de confianza del 95% (Luego se emple
cajas de Tukey para una comparacin mltiple. Se realizaron correlaciones para comparar
metodologas y los anlisis descriptivos se realizaron mediante Microsoft Excel 2007.
Mediante las metodologas empleadas para determinar actividad antioxidante, las
especies T. lucida, L. guatemalensis, P. auritum, S. nigrescens, G. septium, Smilax
domingensis, Phlebodium pseudoaureum y Pimenta dioica son las que presentan los
mejores resultados. Las metologas micromtricas presentaron buena correlacin con las
macromtricas, sin embargo, requieren ser optimizadas para su uso rutinario. Se
evidenci que los grupos fitoqumicos caractersticos de las especies con alto rendimiento
de actividad antioxidante deben ser estudiados por su potencial utilizacin como
preservantes y nutricuticos.
iii
ABSTRACT
Natural antioxidants present in food could be considered preservatives which retard
deterioration, rancidness or fading due to oxidative processes. The function of
antioxidants is to attach to oxidative agents, so that this free radical in not able to react
with the rest of components present in food, in order to avoid oxidation. This research
was conducted with the main objective to generate chemical and biological information
on 10 native species used as food, condiment or medicine to determine it possible
potential in food and pharmaceutical industry.
Scientific information on 12 species (Brosimum alicastrum, Cnidoscolus
chayamansa, Cucurbita argyrosperma, Erythrina berteroana, Fernaldia pandurata,
Gliricidia sepium, Litsea guatemalensis, Manilkara sapota, Piper auritum, Solanum
nigrescens, Spondias mombin y Tagetes lucida) was collected, evaluated and
monographies were prepared including the information gathered and generated in the
Project. Another twelve species were studied in support to a Thesis Seminar.
All the collected species were botanically determined, and voucher samples were
deposited in Farmaya Laboratory Herbarium (Herbarium CFEH). The quality control
analysis was performed, determining basic parameters (% of water content in dry matter,
total ashes, yield and % of water content of dry extracts). The phytochemical screening of
dry extracts was performed according to procedures, showing the presence of flavonoids
and anthocyanins, essential oils, coumarins and tannins; nevertheless none of the species
showed antraquinones.
Antioxidant activity of samples was evaluated by five parameters: quantification of
total phenols by macromethod, quantification of total phenols by micromethod, TDAC by
macromethod, TDAC by micromethod and determination of ferric reduction capacity. A
preliminary assay was launched to determine de antioxidant activity by linoleic acid
emulsion. Antioxidant activity by DPPH was evaluated by TLC. It was evaluated the
application of fluorometry to the analysis of antioxidant activity by quantitative
evaluation of quercetin.
Results were analyzed by SPSS using an univariate analysis, by t-student test and a
confidence level of 95% (=0.05). Then Tukey boxes were applied for multiple
comparisons. Correlation was performed to compare among methodologies and
descriptive analysis by Microsoft Excel 2007.
It is concluded that by using the methodologies implemented for evaluating the
antioxidant activity, five species from our study (T. lucida, L. guatemalensis, P. auritum,
S. nigrescens y G. septium) and three from the complementary Seminar (S. domingensis,
P. pseudoaureum y P. dioica) present the best results. The micrometric methodologies
used presented good correlation with macrometric methodologies; nevertheless they still
need to be optimized for routine utilization. It was evident that the phytochemical groups
characteristic of the species with higher yield of antioxidant activity must be studied for
potential utilization as preservatives and nutriceuticals.
iv
OTROS AGRADECIMIENTOS
La realizacin de este trabajo ha sido posible gracias al apoyo logstico y material
del Laboratorio de Productos Naturales Farmaya, S.A.
El Investigador Principal desea agradecer la colaboracin de las siguientes personas
que participaron en alguno de los aspectos de la investigacin:
Investigadores Asociados:
Lic. Karla Lange, MA. Sully Cruz y Dr. Rubn Velsquez
Auxiliares de Investigacin
Licda. Sandra Lima, Brs. Mara del Mar Velsquez, Emilio Gonzalez, Dina Crdova,
Roxana Dardn y Mara Cristina Menndez.
Investigadores Colaboradores:
MSc. Luis Gonzalo Sequeda, Pontificia Universidad Javeriana, Bogot, Colombia.
Foto de grupo (izq a der): Sandra Lima, Sully M. Cruz, Armando Cceres, Mara
Cristina Menndez, Roxana Dardn, Luis Gonzalo Sequeda, Mara del Mar Velsquez.
Faltan: Karla Lange, Rubn Velsquez, Emilio Gonzalez y Dina Crdova
vi
TABLA DE CONTENIDOS
Portada
Agradecimientos
Resumen
Asbstract
Biografa acadmica del investigador principal
Otros agradecimientos
Tabla de contenidos
Lista de ilustraciones (Figuras)
Lista de cuadros
Lista de grtficos
Lista de abreviaturas y dimensionales
i
ii
iii
iv
v
vi
vii
ix
x
xi
xii
PARTE I. INTRODUCCIN
I.1
Introduccin
I.2
Planteamiento del problema
I.2.1
Situacin del problema a nivel global
I.2.2
Antecedentes en Guatemala
I.2.3
Justificaciones del trabajo de investigacin
I.3
Objetivos e Hiptesis
I.3.1
Objetivo general
I.3.2
Objetivos especficos
I.3.3
Hiptesis
I.4
Metodologa
I.4.1
Descripcin del lugar donde se realiz la investigacin
I.4.2
Variables
I.4.3
Indicadores
I.4.4
Estrategia metodolgica
I.4.5
Mtodos
I.4.6
Tcnica estadstica
I.4.7
Instrumentos
1
3
3
3
4
5
5
5
5
6
6
6
6
7
7
13
15
16
18
19
19
21
25
25
26
26
27
27
27
28
vii
29
29
30
30
34
34
35
36
36
43
43
52
56
56
59
59
59
61
63
64
70
71
75
78
81
85
88
94
97
100
103
107
112
117
PARTE V
V.1
Informe financiero
122
viii
ix
Lista de Cuadros
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
Lista de Grficas
1
2
3
4
5
6
xi
Lista de abreviaturas
Abs
ABTS
ADN
AIOR
AO
BHA
BHT
CEMAT
CFEH
CI50
DE50
DPPH
EOR
ESCOP
FRAP
HPLC
HPTLC
IR
LDL
LIPRONAT
OMS
PEO
TDAC
TLC
USAC
USDA
UV
Absorbancia
Acido 2,2-azino-bis (3-etil-benzthiazolino-6-sulfnico)
Acido desoxiribonuclico
Antioxidant inhibition of oxigen radicals (Inhibicin por radicals oxgeno)
Antioxidante
Hidroxilanisol butilado
Dixidroxiltolueno butilado
Centro Mesoamericano de Estudios sobre Tecnologa Apropiada
CEMAT-Farmaya Ethnobotanical Herbarium
Concentracin inhibitoria media (50%)
Dosis efectiva media (50%)
1,1-difenil-2-picrilhidrazilo
Especies de oxgeno reactivas
European Cooperative of Phytotherapy (Cooperativa Europea Fitoterapia)
Ferric reducig ability of plasma (Habilidad reductora del hierro en plasma)
High performance liquid chromatography
High performance thin leyer chromatography
Infrarrojo
Lipoprotenas de baja densidad
Laboratorio de Investigacin de Productos Naturales
Organizacin Mundial de la Salud
Procedimiento estandarizado de operacin
Total antioxidant capacity (Capacidad antioxidante total)
Thin leyer chromatography (Cromatografa en capa fina)
Universidad de San Carlos de Guatemala
United States Department of Agriculture (Departamento de Agricultura)
Ultravioleta
Dimensionales
g
L
cm
g
kg
M
Meq
min
mg
mL
mm
mM
M
mmol
msnm
nm
ppm
rpm
seg
microgramos
microlitros
centmetros
gramos
kilogramos
molar
miliequivalentes
minutos
miligramos
mililtros
xii
milmetros
mini Molar
micro Molar
milimoles
metros sobre el nivel del mar
nanmetros
partes por milln
revoluciones por minuto
segundo
PARTE I.
I.1
INTRODUCCIN
I.2
Estos trabajos iniciales inspiraron a unir esfuerzos a los grupos que haban estado
trabajando en la temtica, para aunar esfuerzos y analizar doce especies no estudiadas
previamente y dos usadas como controles que ya dieron actividad positiva en el pasado y
que servirn para validar los procedimientos analticos y comprobar la actividad descrita.
I.2.3 Justificaciones del trabajo de investigacin
I.2.3.1 La investigacin de las propiedades antioxidantes de los productos naturales es
una temtica cada vez de mayor inters mundial por sus posibilidades de aplicacin en la
prevencin de enfermedades crnicas y en el mejoramiento de la calidad de vida.
I.2.3.2 La flora nativa del pas es muy diversa y su aplicacin por la poblacin data de
mucho tiempo, pero no se han estudiado las propiedades antioxidantes de los mismos para
poder aplicarlos en forma cientfica en la prevencin o curacin de enfermedades.
I.2.3.3 Tres laboratorios de la Facultad de CCQQ y Farmacia han implementado
procedimientos que permiten el anlisis bioqumico de la actividad antioxidantes, la
caracterizacin fitoqumica de los componentes de los vegetales y el anlisis por
bioensayos micromtricos de diversas actividades, lo que hace suponer que el aunar
esfuerzos redundar en un trabajo multidisciplinario y de calidad.
I.2.3.4 Existen nuevos procedimientos de anlisis de la actividad antioxidante que pueden
ser implementados en los laboratorios existentes para ampliar el espectro de actividades
evaluadas, modernizar el equipamiento y analizar una cantidad importante de productos
naturales con propiedades antioxidantes.
I.2.3.5 La demostracin de la actividad antioxidante de plantas alimenticias, culinarias o
medicinales nativas del pas podra crear nuevas fuentes para el desarrollo agrcola e
industrial en beneficio de diversos sectores en las cadenas productivas respectivas.
I.2.3.6 La capacitacin de equipos de investigacin en las temticas del proyecto
accesibilizar elementos para el desarrollo de ciencia y tecnologa relevante al pas y
favorecer la formacin de recursos humanos en procedimientos modernos.
I.3
OBJETIVOS E HIPOTESIS
Objetivos especficos
I.4
METODOLOGA
Indicadores
Estrategia metodolgica
Mtodos
Especie
Spondias mombin
Fernaldia pandurata
Cnidoscolus chayamansa
Erythrina berteroana
Gliricidia sepium
Litsea guatemalensis
Brosimum alicastrum
Piper auritum
Manilkara sapota
Cucurbita argyrosperma
Tagetes lucida
Solanum americanum
Nombre comn
Jocote de agosto
Loroco
Chaya
Pito
Madrecacao
Laurel
Ramn, ujushte
Santa Mara
Chicozapote
Pepitoria
Pericn
Hierba mora
rgano
fruto
inflorescencia
hojas
flor
flor
hoja
fruto
hoja
fruto
semilla
hoja
hojas
Principales usos
Alimento
Condimento/alimento
Alimento
Alimento/colorante
Alimento
Condimento/medicina
Alimento/medicina
Condimento/medicina
Alimento
Alimento
Medicina/condimento
Alimento/medicina
en papel filtro; a una mancha agregar 1 gota de KOH 0.5N. Observar en luz UV de 365
nm (fluorescencia azul o verde: positivo).
TLC: A 1 g de muestra adicionar 10 mL de metanol y calentar 30 min en bao de Mara;
filtrar y evaporar hasta 1 mL. Aplicar 20 L en una cromatoplaca de slica gel 60 F254.
Usar como estndar canela en metanol al 1% (umbeliferona, cido p-cumrico,
cumarina). Fase mvil: tolueno-acetato de etilo (93:7); tolueno-ter (1:1 saturado con
10% de cido actico, 50 mL de tolueno y 50 mL de ter se mezclan por 5 min con 50 mL
de cido actico al 10%, se filtra, se descarta la fase de abajo y se usa la mezcla de
tolueno-ter). Deteccin: Sin tratamiento qumico UV 254 nm fluorescencia. UV 365 nm
todas las cumarinas muestras una intensa fluorescencia azul o verde-azul. Solucin
etanlica de KOH al 5-10%. UV-365 nm fluorescencia azul o verde.
I.4.5.4.3 Investigacin de taninos (ensayos macro y semimicro): Extraer 10 g de material
vegetal pulverizado con 30 mL de etanol o metanol al 80%, filtrar y evaporar a sequedad.
Aadir 25 mL de agua caliente al residuo y agitar con varilla y dejar enfriar. Agregar 1
mL de solucin de NaCl al 10% y filtrar. Adicionar 3 mL del filtrado a 4 tubos de ensayo:
Tubo 1: testigo.
Tubo 2: agregar 4 a 5 gotas de solucin de gelatina al 1% (p/v).
Tubo 3: agregar 4 a 5 gotas de gelatina-sal (1% de gelatina y NaCl al 10%).
Tubo 4: agregar 3 a 4 gotas de solucin de FeCl3 al 10% (p/v). Observar la formacin de
precipitado y/o cambio de coloracin. Con FeCl3: grisceo-negro: catecol; negro-azulado:
pirogalol.
I.4.5.4.4 Investigacin de aceites voltiles por TLC:
Mtodo A: Extraer 1 g de material vegetal pulverizado con 10 mL de diclorometano
agitando por 15 min. Filtrar y evaporar en bao de Mara (60C) a sequedad. Disolver en
1 mL de tolueno y aplicar 20-50 L en cromatoplaca de silicagel 60 F254.
Mtodo B: Pesar 10-50 g de material vegetal y destilar con arrastre de vapor por 1 hora.
Recolectar el aceite en xileno. Diluir la solucin de aceite en xileno con tolueno 1:5 o si
es muy concentrada 1:10 y aplicar 5 L (1:10) en cromatoplaca de silicagel 60 F254.
Estndar: solucin de tolueno 1:30 de mentol, timol, anisaldehdo, anetol, 1,8-cineol (3
L). Fase mvil: tolueno-acetato de etilo (93:7).
Deteccin: anisaldehdo-H2SO4, vanillina- H2SO4. Zonas azules verdes, rojas y cafs en
visible.
I.4.5.5 Evaluacin de la actividad antioxidante:
I.4.5.5.1 Mtodo de TLC: Aplicar 10 L de muestra y 5 L del estndar antioxidante
cido glico y cido ascrbico (1 mg/ml) en una placa cromatogrfica de silica gel 60F254.
Colocar la placa en una cmara de vidrio saturada previamente con acetato de etilo:cido
actico:cido frmico:agua (100:11:11:26). Secar y asperjar con DPPH (1 mg/mL en
metanol). Resultados: Los extractos con actividad antioxidante presentan decoloracin del
DPPH en las bandas respectivas.
10
mas cercano a 1 para tomar como vlida la curva realizada, de lo contrario se deber
realizar nuevamente el ensayo, hasta obtener un valor de r2 adecuado.
I.4.5.5.4. Actividad reductora de Fe+3 a Fe+2: Fue utilizado el mtodo descrito en 1986 por
Oyaizu. A 2 ml de extracto (en concentraciones de 50 a 500 ug de extracto seco/ml) se le
adicionaron 2 ml de amortiguador de fosfatos (0.2 M pH 6.6) y 2 ml de ferrocianuro de
potasio al 1%. La mezcla fue incubada durante 20 min a 50C y se agregaron 2 ml de
cido tricloroactico. Se centrifug a 3000 rpm durante 10 min. Fue separado el sobrenadante y 2 ml fueron homogenizados con 0.5 ml de cloruro frrico al 0.1%. Las lecturas
Abs fueron determinadas a 700 nm. El mismo procedimiento fue llevado a cabo con los
estndares (cido glico y cido ascrbico) con la nica diferencia que el rango de
determinacin fue de 5 a 500 g/ml (Duh, Yen, Du & Yen, 1997).
I.4.5.5.5. Determinacin de la activad antioxidante en el sistema de emulsin del cido
linolico. Se determina la actividad antioxidante como el grado de inhibicin de la
peroxidacin del cido linolico. A una solucin de 10 ml de cido linolico (11.7 g/L en
99.8% de etanol) y 10 ml de amortiguador de fosfatos (200 mM, pH 7.0) le fue agregado
5 ml de muestra de las especies vegetales en estudio (100 g de extracto seco/ml). El total
del volumen fue ajustado a 25 ml con agua desmineralizada. Esta mezcla fue incubada a
40C. En diferentes das fue medido el grado de oxidacin. Para esto fueron agregados 10
ml de etanol al 75%, 0.2 ml de solucin acuosa de tiocinato de amonio al 30%, 0.2 ml de
muestra (mezcla en incubacin) y 0.2 ml de solucin de FeCl3 (20 mM en 3.5% HCl), fue
agitado en vrtex durante 3 min. Los valores de absorbancia de la mezcla fueron
determinados a 500 nm para obtener el contenido de peroxidacin. El estndar utilizado
fue BTH (Parras, Martnez-Tom, Jimnez & Murcia, 2006).
I.4.5.6 Determinacin de los compuestos fenlicos:
I.4.5.6.1 Mtodo macromtrico: Se prepar una curva patrn con 4 mL de cido glico
disuelto en agua en concentraciones de 0.625-6.25 g/L. Se agreg un blanco con 8.0
mL de agua, 0.8 mL de reactivo de Folin-Ciocalteu y 1.6 mL de Na2CO3 al 10%. Se
preparan dos tubos de muestra, al primer tubo se agreg 3.95 mL de agua, 0.4 mL de
reactivo de Folin-Ciocalteu, 0.8 mL de Na2CO3 al 10% y 50 L de muestra; al segundo
tubo se agreg 3.90 mL de agua, 0.4 mL de reactivo Folin-Ciocalteu, 0.8 mL de Na2CO3
al 10% y 100 L de muestra. Se mezclaron bien y se calentaron de 90-100C por 1 min.
Se realiza la lectura espectrofotomtrica de la absorbancia a 765 nm. Utilizando una curva
patrn se calcul la concentracin de compuestos fenlicos totales expresados como
equivalentes de cido glico/g de peso seco (Lima 2003).
I.4.5.6.2 Mtodo micromtrico: Se prepara una curva patrn con 4 mL de cido glico
disuelto en agua en concentraciones entre 0.21 y 8.5 M. En una placa de 96 micropozos
se coloca el blanco de reaccin en el primer pozo con 25 L de agua, en los siguientes 7
pozos se coloca la curva patrn de cido glico, 25 L de cada estndar (0.21, 1.06, 2.13,
4.25, 6.38, 8.50 M), los siguientes pozos se coloca 25 L de los extractos, a todos los
pozos se agrega 50 L de reactivo de Folin y 200 L de Na2CO3 700 mM. Se mezcla bien
la placa y se incuba 30 min a temperatura ambiente. Se realiza la lectura en el
luminmetro de microplacas a 630 nm. Utilizando una curva patrn se calcula la
12
13
14
I.4.7
Instrumentos
I.4.7.1 Equipo:
Las instituciones participantes aportaron el siguiente equipo:
I.4.7.1.1 El LIPRONAT est equipado para realizar secado (horno de conveccin),
molienda, extraccin (percoladores, neocleavenger, Soxhlet), concentracin (rotavapores
Buchi, liofilizador Labconco, enfriadores, desecadores, hornos) y anlisis (potencimetro,
balanzas analticas y de humedad, asperjadores, espectrofotmetro UV-Vis y
computadora).
I.4.7.1.2 El Laboratorio de Bioensayos del Departamento de Citohistologa de la Escuela
de Qumica Biolgica est equipado para determinar actividad antioxidante por ensayos
micromtricos (microcolormetro fotmetro de microplacas, luminmetro, incubadora,
balanzas analticas y fluormetro).
I.4.7.1.3 El Departamento de Bioqumica de la Escuela de Qumica Biolgica, est
equipado para realizar extractos macerados (balanza con agitador magntico, equipo de
nitrgeno gaseoso, cmaras de refrigeracin), anlisis macromtricos para determinacin
de actividad antioxidante utilizando mtodos espectrofotomtricos UV/Vis.
I.4.7.1.4 El Laboratorio de Productos Naturales Farmaya aport el material de su Centro
de Informacin especializado, los contactos de su red de proveedores rurales, secadores
solares y de conveccin, herbario, incubadoras, rotavapores, autoclave, balanza de
humedad, mufla para cenizas y campana microbiolgica, adems de la materia vegetal
utilizada para obtener los extractos.
I.4.7.2 Materiales:
Para la mayora de procedimientos que se desarrollaron en el proyecto cada una de
las instituciones participantes tena la cristalera (vasos de precipitar, pipetas, matraces,
refrigerantes), los materiales (guantes, puntas plsticas descartables, microplacas) y los
reactivos (disolventes, estndares, medios de cultivo) necesarios que fueron repuestos o
complementados con el material adquirido con los fondos del proyecto.
15
radicales libres ms importantes, estn los derivados del oxgeno: el anin superxido, el
H2O2, el radical hidroxilo y el O singulete. Por sus propiedades oxidantes, los radicales
libres reaccionan rpidamente con casi cada tipo de molcula biolgica hallada en forma
libre o formando parte de las diferentes estructuras celulares de los seres vivientes, tales
como: glucdos, fosfolpidos, aminocidos, nuclotidos, cidos grasos, lipoprotenas y
membranas celulares.
Las fuentes ms comunes de generacin de radicales libres son: las radiaciones
(UV, X, IR), el metabolismo (ejercicio extenuante, bebidas alcohlicas, drogas,
adriamicina y pptidos -amiloides), las sustancias qumicas ambientales (ozono,
nitrgeno, productos de combustin, tabaco, hidrocarburos halogenados y metales
pesados) y las infecciones (bacterianas, vricas, parasitarias y priones). En la actualidad se
reconoce que alrededor de 60 patologas pueden estar relacionadas con el aumento de
radicales libres, particularmente aquellas de tipo crnico y degenerativo.
II.2 Especies de oxigeno reactivas (EOR) y prooxidantes
Las EOR estn implicadas en numerosos eventos fisiopatolgicos como
envejecimiento, cncer, aterosclerosis y diabetes. Los antioxidantes naturales de frutas y
vegetales proveen proteccin substancial que retrasa el proceso de dao oxidativo
causado por EOR (Kamath & Rajini 2006).
Los prooxidantes son sustancias endgenas o exgenas que tienen la capacidad de
oxidar algunas molculas blanco, ya sea directamente por abstraer electrones o
indirectamente produciendo intermediarios qumicos altamente reactivos. Los radicales
libres representan una clase de dichas entidades cuya reactividad deriva de la presencia de
electrones desapareados en su estructura atmica, pero que son capaces de existir
independientemente por un breve intervalo de tiempo. EOR es un trmino colectivo que
incluye todas las formas reactivas de oxgeno, tanto las especies radicales y no radicales
que participan en el inicio o en la propagacin de reacciones en cadenas.
El ozono es una forma txica del oxgeno que oxida a protenas, cidos nucleicos y
lpidos; el oxigeno individual es muy reactivo, aunque no contiene pares de electrones
desapareados por lo que no es un radical libre; se forma in vivo por activacin enzimtica,
mediante reacciones fisicoqumicas, como en las de transferencia de energa,
descomposicin trmica de endoperxidos y dioxetanos, o por la reaccin del ozono con
los fluidos corporales. El oxgeno individual induce efectos genotxicos, carcingenos y
mutagnicos por su accin en cidos grasos poliinsaturados (Cui, Luo, Xu & Murthy,
2004; Carvalho, 2004).
El superxido es un radical aninico formado por la reduccin de oxgeno
molecular a travs de la aceptacin de un electrn. El hidroperxido, que es inestable a
pH fisiolgico, se disocia en superxido. In vivo, es producido por las cadenas
transportadoras de electrones en la mitocondria y microsomas, principalmente importante
en el tejido cerebral. El anin superxido no atraviesa las membranas celulares, por lo que
no es muy reactivo contra los constituyentes celulares. El H2O2 es relativamente inactivo,
pero si atraviesa fcilmente las membranas celulares (Cui et al., 2004). El radical
18
hidroxilo, tiene accin directa en regiones cercanas a su lugar de formacin, por su corta
vida media, pero es el miembro ms reactivo de la familia EOR, y puede daar
severamente a diferentes tipos de molculas, incluyen las protenas, cidos nucleicos y
lpidos (Carvalho, 2004). Los radicales perxidos se producen durante la peroxidacin de
lpidos, aunque esta puede ser til en algunos procesos biolgicos.
Hay otras formas de EOR que contienen nitrgeno o cloro, adems de oxgeno. El
NO2 y el NO son radicales libres con un nmero impar de electrones. El NO2 es un
oxidante fuerte, mientras que el NO acta como agente reductor dbil. Aunque se ha
discutido el papel del NO como agente vasodilatador y e hiperpolarizador de clulas
endoteliales (Cui et al., 2004).
II.3 Papel fisiolgico y patolgico de EOR
Evidencia sugiere que EOR participan en la defensa del organismo contra cuerpos
extraos y actan como moduladores de procesos biolgicos internos, incluyendo seales
de transduccin, transcripcin o muerte celular programada. La seal de transduccin se
puede describir como el proceso mediante los componentes celulares reciben informacin
de otros componentes y de afuera de la clula. La exposicin ambiental a radiacin inicia
sealizacin a travs del factor de necrosis tumoral alfa y otros factores que requeridos
para la activacin del receptor de quinasas (Cui et al., 2004).
Por su alta reactividad qumica, los niveles de EOR mayores a los requerimientos
celulares, pueden daar indiscriminadamente la integridad funcional y estructural, por
medio de modificacin celular del ADN, protenas y lpidos, o iniciando una cadena de
reacciones que pueden extender el dao oxidativo a estas molculas. Aunque las clulas
tienen una variedad de mecanismo de defensa y de sistemas reparadores ante EOR, no
siempre son suficientes. El estrs oxidativo puede relacionarse con el desequilibrio entre
la produccin de prooxidantes/radicales libres y la defensas antioxidantes. El estrs
oxidativo severo se ha implicado con enfermedades degenerativas, como aterosclerosis,
diabetes, isquemia, enfermedades inflamatorias, cncer, enfermedades neurolgicas,
hipertensin, enfermedades oculares, enfermedades pulmonares y enfermedades
hematolgicas (Cui et al., 2004).
II.4 Importancia de los antioxidantes y modo de accin:
El exceso de EOR es generalmente inactivado por molculas antioxidantes
endgenas y exgenas que tienen la habilidad que a concentraciones muy bajas pueden
retrasar o inhibir la oxidacin de un sustrato. Pueden actuar removiendo o disminuyendo
las concentraciones locales de uno o ms de los participantes de una reaccin, tales como
el oxgeno, EOR, iones metlicos, que catalizan la oxidacin, o al interferir con una
cadena de reacciones. Tambin pueden realzar las defensas antioxidantes del organismo.
Los antioxidantes intervienen en cualquiera de los siguientes pasos: Iniciacin,
propagacin o finalizacin de los procesos oxidativos (Cui et al, 2004; Carvalho, 2004).
Los antioxidantes se pueden clasificar de acuerdo a su naturaleza qumica y su
modo de accin:
19
Enzimas antioxidantes que actan sobre EOR, luego degradado a formas menos
dainas.
21
22
utilidad clnica es necesario evaluar la actividad antioxidante, hipolipidemica y antiateroesclertica. Con esas premisas se evalu el extracto acuoso por el mtodo de DPPH y por
el efecto inhibitorio de la oxidacin de LDL inducido por Cu2+ por modelos in vitro, as
como un efecto en los niveles de colesterol, sustancia reactivas del cido tiobarbitrico
(TBARS) y formacin de placas de conejos alimentados con una dieta de colesterol. Se
demostr una CI50 de depuracin de radicales de DPPH de 78.150.92 g/ml, prolongacin del tiempo de formacin de placas e inhibicin de TBARS, en experimentos tanto
in vitro como in vivo. En conejos alimentados con una dieta hipercolesterolmica, redujo
significativamente los niveles de colesterol y la formacin de placa ateroesclertica,
indicando que posee actividad antioxidante, hipolipidmica y antiateroesclertica, con
potencial en la prevencin de enfermedades cardiovasculares (Chumark et al., 2008).
Ultimamente se ha asociado el estrs oxidativo y el cambio en el metabolismo de
los lpidos en el desarrollo y severidad de la diabetes, as como la relacin que tienen
algunos metabolitos secundarios vegetales en las actividades antioxidantes que podran
mejorar el estrs oxidativo en la diabetes. Un estudio reciente evalu el efecto de un
extracto acuoso de las hojs de Annona squamosa L. en las enzimas antioxidantes y el
perfil de lpidos de ratas albinas Wistar como modelo de diabetes tipo 2 no dependiente
de insulina. La diabetes se indujo con estreptozotocina y los animales se trataron con 350
mg/kg de extracto y luego del experimento se practic una necropsia para su estudio
posterior. Los resultados sugieren claramente que el extracto poseen una actividad
antioxidante demostrada por aumento de la actividad de las enzimas depuradoras,
catalasa, superoxido dismutasa, glutatin reductasa, glutatin transferasa y disminucin
de los niveles de malonaldehido en los diferentes tejidos animales. La administracin del
extracto tambin mejor los perfiles de lpidos de los grupos tratados, indicando que los
niveles altos de triglicridos y de colesterol total asociados con la diabetes pueden
manejarse significativamente con el uso del extracto (Gupta et al., 2008).
La actividad antioxidante de tubrculos de Pueraria mirifica Airy Shaw et
Suvatabhandu de Tailandia y de P. lobata (Willd.) Ohwi de China fueron evaluadas por el
ensayo de DPPH, mostrando que el extracto tiene una actividad antioxidante menor que
-tocoferol, sin embargo las isoflavonas (puerarina y daidzeina) tienen una actividad
antioxidante mayor que -tocoferol, esta correlacin se da nicamente con puerarina, ya
que no se presenta la misma correlacin con daidzeina, daudzina y genistein
(Cherdshewasart & Sutjit, 2008)
En frutas y vegetales usados en Uganda se evalu si las comidas tradicionales
poseen suficiente actividad antioxidante como para prevenir el estrs oxidativo y por
consiguiente combatir enfermedades. Por el mtodo de FRAP se demostr una gran
variabilidad desde la ms alta, la semilla de Syzygium cuminii (L.) Skeels (72.313.5
mmol/100 g de peso fresco), hasta la mas baja, la fruta de Cucurbita mxima Lam.
(0.090.05 mmoles/100 g de peso fresco). Se evalu la TDAC por da de porciones en
tres dietas ugandesas, encontrndose que la mayor actividad se encontr en P. granatum,
Canarium schweinfurthii Engl., Psidium guajava L., Mangifera indica L. y Cyphomandra
betacea (Cav.) Sendth., con valores entre 8.91 y 3.00 mmol/porcin (Stangeland,
Remberg & Lye, 2009).
24
Dentro de los mtodos para analizar antioxidantes sintticos en los alimentos y los
mtodos ms empleados para cuantificare antioxidantes en aceite comestible y productos
relacionados estn TLC y HPLC-PDA (Sin et al., 2006). Serrano et al. (2006)
demostraron que los procedimientos fisiolgicos in vitro tienen mayor capacidad que los
procedimientos qumicos, concluyendo que los mtodos qumicos la determinacin de la
capacidad antioxidante puede ser menospreciada.
II.7.1 Determinacin de fenoles totales mediante el reactivo de Folin-Ciocalteu
El procedimiento de Folin-Ciocalteu es un ensayo a base de transferencia de
electrones e indica capacidad reductora, la cual ha sido normalmente utilizada para
estimar el contenido de fenoles en materiales biolgicos. El mtodo original de FolinCiocalteu fue desarrollado en 1927 y utilizado originalmente para anlisis de tirosina en
el cual ocurra una oxidacin de fenoles por molibdato producindoese un producto
coloreado entre 745-750 nm (Phipps et al., 2007).
Este es un mtodo simple, sensible y preciso y puede ser utilizado en la caracterizacin y estandarizacin de muestras botnicas. Sin embargo, la reaccin es lenta y
ocurre a pH cido por lo que este factor puede disminuir su especificidad. El ensayo no se
encuentr estandarizado y depende de las condiciones en que sea realizado. Puede sufrir
una gran cantidad de interferencias (particularmente por azcares, aminas aromticas,
dixidos de sulfuro, cido ascrbico, etc.) y debe realizarse la correccin para sustancias
interferentes. Algunas sustancias inorgnicas como la hidracina, cloruro de hidroxiamonio, sulfato de amonio, sulfato de hierro, sulfato de manganeso, nitrito de potasio,
metabisulfato de sodio, fosfato de sodio, sulfito de sodio y otros pueden reaccionar con el
reactivo de FC y provocar una aparente concentracin de fenoles (Phipps et al., 2007).
II.7.2 Determinacin de la TDAC mediante secuestro de radicales
Entre los mtodos que existen para determinar actividad antioxidante, se encuentran
aquellos que se basan en la habilidad de actuar como recolectores de radicales.
Normalmente emplean radicales estables en solucin siendo el ejemplo ms conocido el
DPPH. Una solucin del radical tiene coloracin azul y absorbe a la luz visible (517 nm)
y cuando es secuestrado por el antioxidante, la solucin sufre una decoloracin, de este
modo es posible evaluar la actividad antioxidante de una determinada sustancia
comparada cuantitativamente con patrones de antioxidantes comerciales y/o naturales
como BHA, BHT y -tocoferol. Los resultados de los ensayos depende las condiciones
de reaccin y el el caso de las plantas se ha documentado que pueden presentarse reaccin
intensa debida a los compuestos coloreados polifenlicos (Caballeros, 2001).
26
Una revisin reciente indica que si bien es una prueba confiable y ampliamente
difundida, se han demostrado incongruencias aun entre los mismos autores y
procedimientos, sugirindose protocolos mas estrictos que tomen en cuenta la
sensibilidad de los espectrofotmetros y la sensibilidad del DPPH a la luz, pH y
solubilidad del compuesto (Sharma & Bhat, 2009)
Un mtodo fcil y econmico es el cromatogrfico usando placas de TLC y como
revelador el DPPH el cual se observa decolorado en la zonas que muestren actividad
antioxidante (Vogel et al., 2005).
II.7.3 Poder reductor del hierro
Se ha reportado una correlacin directa entre la actividad antividad antioxidante y el
poder reductor de ciertos extractos vegetales. La presencia de reductantes (antioxidantes)
en los extractos provodan la reduccin de hierro (III) a hierro (II). La cantidad de hierro
(II) del complejo ferroso puede ser medida mediante la formacin de azul Perl de Prusia a
700 nm. Se ha reportado que las habilidades reductoras de las especies vegetales contra el
Fe3+ incrementan cuando se incrementa la concentracin de la especie. Generalmente las
especies reductoras contienen electrones donantes que les confieren la habilidad de
reduccin (Kosem, Han & Moongkarndi, 2007).
II.7.4 Actividad antioxidante en el sistema de emulsin del cido linolico
La peroxidacin lipdica provoca el desarrollo de rancidez y mal olor,
considerndose el primer mecanismo cualitativo de deterioro de alimentos lipdicos y
aceites. Las sustacias antioxidantes poseen la habilidad de proporcionar estabilidad a los
alimentos y calidad. Mediante el mtodo del tiocianato es determinado el porcentaje de
inhibicin de la peroxidacin lipdica con respecto al tiempo a una longitud de onda de
500 nm. Los extractos vegetales pueden exhibir actividad antioxidante efectiva a cierta
concentracin y poseer habilidad para detener la peroxidacin lipdica. Los compuestos
fenlicos y otros compuestos qumicos presentes en los extractos pueden suprimir la
peroxidacin lipdica a travs de diferentes mecanismos qumicos, incluyendo quelacin
de radicales libres, transferencia de electrones, adicin de radicales o recombinacin de
radicales (Mathew & Abraham 2006).
II.7.5 Otros mtodos para determinacin de actividad antioxidante
Otros mtodos que se pueden mencionar incluyen instrumentacin para medir
quimioluminiscencia (Hirayama et al., 1997), espectrofluorometra (Pellegrini et al.,
2003) y electroforesis capilar (Carvalho, 2004). Con fines de tamizaje en gran escala, se
ha propuesto el mtodo de AIOR que usa radicales peroxilo para desencadenar la
disminucin de la flourescencia inducida por uroporfirina; este mtodo tiene buena
linearidad y precisin (Ching, Hall, Croft, Beilby, Rossi & Ghisalberti, 2006)
Recientemente se ha descrito un mtodo fcil, rpido y barato que consiste en el uso
del bromuro de 3-(4,5-dimetilthiazol.2-il)-2,5-difeniltetrazolio (MTT), esta es una tcnica
micromtrica, que vira al violeta formazn por los extractos vegetales con actividad
antioxidante. Este mtodo se realiza en microplacas de 96 pozos, usando volmenes de 50
27
28
Nombre comn
Ramn
Chaya
Pepitoria
Pito
Loroco
Madre cacao
Laurel
Chichozapote
Santa Mara
Hierba mora
Jocote de agosto
Pericn
29
Droga vegetal
Fruto
Hoja
Semilla
Flor
Inflorescencia
Flor
Hoja
Fruto
Hoja
Hoja
Fruto
Hojas y flores
III.2
OBJETIVO 2.
Procedencia
Petn
Samayac, Suchitepquez
Salam, Baja Verapaz
Jutiapa Km 73
Guastatoya, El Progreso
Samayac, Suchitepquez
Tecpn, Chimaltenango
Finca San Jose, San Bernardino
Samayac, Suchitepquez
San Bartolome, Sacatepquez
Samayac, Suchitepquez
Cabrican, Quetzaltenango
Latitud
Longitud
1433'09" N
1506'19" N
9127'65" NO
9019'50" O
14o5230
1433'49" N
90o1105
9127'38" WO
1433'27" N
1433'15" N
14o3623
1433'10" N
9128'30" WO
9128'09" WO
90o4045
9127'962" WO
No. herbario
1019
1041
1046
1028
1023
233
965
1042
1012
1037
1040
119
30
Relacin fresco:seco
100:28.5
100:22.4
100:16.1
100:22.2
100:15.8
100:26.6
100:29.3
31
% humedad
8.4
4.7
NA
7.6
4.9
7.5
9.5
NA
7.1
7.8
NA
9.6
% cenizas
3.2
3.2
NA
9.1
10.2
7.4
3.1
NA
10.3
7.2
NA
7.1
Fernaldia pandurata
Gliricidia sepium
Brosimum alicastrum
Cnidoscolus chayamansa
Spondias mombin
Cucurbita argyrosperma
Litsea guatemalensis
32
Erythrina berteroana
Manilkara sapota
Solanum nigrescens
Tagetes lucida
Piper auritum
III.3 OBJETIVO 3.
Preparar extractos y determinar el rendimiento de 12 especies vegetales no
estudiadas que son utilizadas como alimenticias, condimentarias o medicinales.
III.3.1 Preparacin de extractos
El porcentaje de rendimiento es un parmetro utilizado para saber la cantidad de
metabolitos extraibles de cada planta. Se ve afectado por ciertos factores como la
naturaleza de los metabolitos, el disolvente utilizado y el proceso de extraccin. Diez de
los 12 extractos se prepararon por percolacin en etanol al 95% seguida de concentracin
con recuperacin del disolvente por rotavapor (Figura 5). Los rendimientos en la
extraccin y obtencin del extracto seco se muestran en el Cuadro 5.
Figura 5. Percolador de acero inoxidable, rotavapor para concentracin, desecadores al
vaco y liofilizador para los extractos acuosos
34
Peso de materia
seca (g)
200
200
50
200
200
150
200
NA
200
200
NA
200
Peso extracto
seco (g)
45.70
15.30
1.56
24.90
16.50
52.42
41.50
NA
28.80
37.20
NA
14.20
III.3.2 Resultados
En el Cuadro 5 puede observarse que el promedio de rendimiento de slidos
extrables de las plantas evaluadas es de 15.63%, donde la flor de G. sepium tiene el
porcentaje ms alto de rendimiento con 34.95%, luego el fruto de B. alicastrum con
22.85% y las hojas de L. guatemalensis y P. auritum ambas con 20.7%; los rendimientos
ms bajos los dieron las hojas de C. chayamansa (7.70%) y semillas de C. argyrosperma
(3.13%). Estos rendimientos indican que estas especies podran tener un potencial
interesantes, ya que este factor indica que estas especies tendpian un mejor
comportamiento y rendimiento a nivel industrial, toda vez que para la fabricacin de
productos naturales se busca obtener un buen rendimiento del extracto, utilizando la
menor cantidad de planta posible, lo que incidir dirfecdtamente en los costos de
produccin.
El valor de la desviacin estndar es de 9.66, el cual se debe a que cada planta
presenta diferente rendimiento debido a variables como la naturaleza de sus metabolitos,
los que pueden ser polares o apolares y son extraidos segn la polaridad del disolvente
utilizado. En este caso se utiliz etanol como disolvente, el cual extrate metabolitos tanto
polares como apolares. Tambin debe tomarse en cuenta la epoca de colecta, lo que
influye en la cantidad de metabolitos.
En el caso de los extractos de M. zapota y S. mombin se realiz una maceracin
cintica por que por ser frutas no fue posible su extraccin por percolacin. Adems se
prepararon muestras liofilizadas de estos extractos pero al tratar de reconstituirlas con el
disolvente de cada prueba presentaban un precipitado que actuaba como interferente por
lo que se decidi realizar el macerado con etanol al 95%.
35
III.4 OBJETIVO 4
Caracterizar los compuestos fenlicos y grupos qumicos ms importantes de las
especies evaluadas mediante ensayos macro y semimicro y TLC.
III.4.1 Anlisis fitoqumico por TLC
El anlisis fitoqumico se bas en la deteccin cualitativa de los metabolitos
secundarios poseedores, dentro de su estructura qumica, de uno o ms grupos fenlicos,
entre los metabolitos ms importantes se encontraron flavonoides, antocianinas,
antraquinonas, taninos, cumarinas y monoterpenos.
III.4.1.1 Determinacin de flavonoides y antocianinas: En la prueba de flavonoides y
antocianinas, las muestras de P. auritum, F. pandurata y G. sepium presentaron la mayor
cantidad de bandas, con 5 cada una; les siguen los extractos de T. lucida, L.
guatemalensis, E. berteroana y S. nigrescens con 4 bandas cada una (Figura 6).
Los Rfs obtenidos para los estndares de comparacin fueron 0.95 para la
quercetina, 0.45 para rutina, 0.71 para el hiprosido, y 0.63 para el cido clorognico.
Figura 6. TLC para flavonoides y antocianinas.
10
11
12
2. Laurel
6. Pito
10. Chico
B. Quercetina
3. Sta. Mara
7. Loroco
11. Jocote
C. Hipersido
4. Chaya
8. Hierbamora
12. Pepitoria
D. Ac. Clorognico
2. Laurel
6. Pito
10. Chico
3. Sta. Mara
7. Loroco
11. Jocote
10
11
12
4. Chaya
8. Hierbamora
12. Pepitoria
37
10
11
12
2. Laurel
6. Pito
10. Chico
B. Citral
3. Sta. Mara
7. Loroco
11. Jocote
4. Chaya
8. Hierbamora
12. Pepitoria
Los Rfs de los estndares utilizados fueron de 0.53 para el citral y 0.60 para el de
limoneno, que son los que generalmente se usan para esta determinacin. Ninguno de los
Rfs de las especies analizadas coincidi con los mostrados por los estndares. El anlisis
por cromatografa de gases podra ayudar a caracterizar estos aceites esenciales, aunque
no se realiz por no ser un obetivo directo de estye proyecto.
III.4.1.4. Cumarinas: Para la determinacin de la presencia de cumarinas tambin se us
una tcnica de TLC. La muestra de T. lucida fue la que present la mayor cantidad de
bandas con 4 manchas.
Las especies que presentaron bandas con fluorescencia roja fueron consideradas
como negativas, ya que en este caso la coloracin la otorga la presencia de clorofila, por
este motivo las manchas que presentaron P. auritum, C. chayamansa, E. berteroana y S.
nigrescens se consideraron negativas para la presencia de cumarinas de acuerdo a la
tcnica de TLC (Figura 9).
Los Rfs de los estndares utilizados para estas pruebas fueron de 0.09 para
umbeliferona, de 0.09 para cido p-cumrico y 0.48 para cumarinas.
38
10
11
12
2. Laurel
6. Pito
10. Chico
B. Umbeliferona
3. Sta. Mara
7. Loroco
11. Jocote
C. cido p-cumrico
4. Chaya
8. Hierbamora
12. Pepitoria
39
Identificacin
Estndares
Tagetes lucida
Litsea guatemalensis
Flavonoides Antocianinas
Antraquinonas
Citral:
0.53, azul-violeta;
Limoneno: 0.60, azul;
Hojas de sen:
0.38, 0.97 Roja
0.89, Amarilla
0.45, Azul; 0.65, 0.80, 0.86, Amarilla. 0.23, Celeste; 0.83, Celeste
0.38, 0.49, 0.65, Amarilla;
0.74, 0.78, Verde.
No detectadas
Cnidoscolus chayamansa
No detectadas
Brosimum alicastrum
Erythrina berteroana
Manilkara zapota
Spondias mombin
Cucurbita angyrosperma
No detectadas
0.95, Roja
Solanum nigrescens
Gliricidia sepium
Cumarinas
Fase Mvil: tolueno-acetato
de etilo
Revelador: KOH 5%
etanlico
Piper auritum
Fernaldia pandurata
Aceites esenciales
40
No detectadas
No detectadas
0.21, Verde.
0.09, Celeste;
0.17, Rojo; 0.21, Rojo.
0.38, Rojo.
0.11, Violeta
0.15, Morado.
No detectadas
No detectadas
0.15, 0.20, 0.27, 0.33,
Violeta; 0.76, Rojo.
No detetctadas
No detectadas
No detectadas
No detectadas
Gelatina 1%
+
-
Gelatina-Sal
+
-
FeCl3 10%
+
+
-
Resultado
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
2. Laurel
6. Pito
10. Chico
B. cido glico 1/80
1
0
1
1
1
2
3. Sta. Mara
7. Loroco
11. Jocote
C. Acido ascrbico (1mg/ml)
4. Chaya
8. Hierbamora
12. Pepitoria
D. Acido ascrbico 1/12
Nmero de bandas
1
1
1
1
1
0
0
2
2
3
5
0
2
4
0
3
42
Intensidad
+++
+
+++
+
+
+
+
+
+++
++
++
+++
Resultado
Positivo
Positivo
Positivo
Positivo
Positivo
Negativo
Negativo
Positivo
Positivo
Positivo
Positivo
Negativo
Positivo
Positivo
Negativo
Positivo
III.5 OBJETIVO 5
Determinar la actividad antioxidante en extractos de las especies vegetales por
mtodos cromatogrficos y espectrofotomtricos.
III.5.1 Actividades realizadas y resultados obtenidos
III.5.1.1 Se revis la literatura existente en bases de datos electrnicas, revistas y centros de
informacin pblicos y privados, sobre las metodologas usadas para evaluar la actividad
antioxidante por mtodos macromtricos y micromtricos. Se abrieron o enriquecieron
carpetas con la informacin obtenida de cada una de las especies para futuras consultas
III.5.1.2 Se establecieron los procedimientos macromtricos para la evaluacin de la
actividad antioxidante, particularmente en el Departamento de Bioqumica de la Facultad
de CCQQ y Farmacia, donde se hicieron las curvas de calibracin para cada procedimiento
y una vez validados los procedimientos se hicieron las determinaciones especficas de cada
anlisis (Figura 12).
Figura 12. Procesamiento en tubo de las curvas de calibracin con el cido glico y
Espectrofotmetro para realizar cuantificaciones
III.5.1.3 Se analizaron las doce especies vegetales en estudio, que incluy la determinacin
de TDAC utilizando el reactivo DPPH, el contenido de fenoles totales mediante la reaccin
de Folin-Ciocalteu, poder reductor del hierro y peroxidacin de cido linoleico. Despus de
los anlisis realizados se estableci que las especies vegetales en estudio presentan
diferencias significativas en los diferentes parmetros de medicin de actividad
antioxidante. En la Cuadro 9 se muestran los promedios, desviaciones estndar, mnimos y
mximos de los distintos parmetros de actividad antioxidante (fenoles totales
macromtodo, fenoles totales micromtodo, TDAC macromtodo, TDAC micromtodo y
poder reductor del hierro). Los resultados fueron analizados mediante un anlisis
univariado por la prueba de t-student a un nivel de significancia (=0.05). Esta prueba
revel que existen diferencias significativas (p<0.05) entre las diferentes especies
vegetales. Estas diferencias fueron establecidas en cada uno de los diferentes parmetros en
estudio.
43
Cuadro 9. Resumen de los valores de los valores de fenoles totales, actividad antioxidante macromtrico y micromtrico, y poder
reductor del hierro. Los resultados se expresan como mediadesviacin estndar; (valor mnimo-valor mximo)
PARMETRO DE MEDICIN
ESPECIE VEGETAL
Tagetes lucida (pericn)
Litsea guatemalensis (laurel)
Piper auritum (santa Mara)
Solanum nigrescens (hierba mora)
Gliricidia sepium (madre cacao)
Erytrhrina berteroana (pito)
Fernaldia pandurata (loroco)
Brosimum alicastrum (ramn)
Cnidoscolus chayamansa (chaya)
Manilcara zapota (chico zapote)
Spondias mombin (jocote de agosto)
Cucurbita pepo (pepitoria)
Fenoles totales
macromtodo
Fenoles totales
micromtodo
Actividad antixidante
total macromtodo
Actividad antixidante
total micromtodo
133.1912.30
(116.06-146.35)
104.2426.12
(70.45-139.55)
81.114.33
(74.93-85.75)
51.8672.63
(49.38-54.57)
49.943.48
(44.89-54.75)
15.860.82
(14.95-16.96)
44.953.41
(39.63-47.83)
17.280.66
(16.13-18.13)
75.559.99
(65.57-90.77)
23.064.48
(19.05-30.67)
3.531.40
(1.93-5.08)
6.2663.20
(2.24-10.31)
273.2520.67
(253.24-300.93)
217.3248.48
(176.89-293.96)
99.7414.40
(84.82-114.93)
88.453.80
(84.46-94.04)
313.5318.91
(286.00-334.22)
66.651.45
(65.175-68.87)
34.662.39
(31.167-37.33)
88.5283.90
(81.86-91.54)
253.713.36
(249.76-256.89)
47.391.18
(45.74-48.75)
52.872.54
(49.71-56.16)
7.500.14
(7.24-7.66)
0.020.00
(0.02-0.03)
0.050.01
(0.04-0.07)
0.140.07
(0.04-0.22)
0.220.04
(0.17-0.19)
0.470.12
(0.28-0.55)
1.080.12
(0.91-1.21)
1.140.29
(0.83-1.45)
1.270.15
(1.12-1.41)
1.080.58
(0.89-2.42)
1.950.06
(1.84-2.02)
13.420.59
(13.12-13.84)
18.651.17
(16.83-19.74)
0.020.00
(0.02-0.02)
0.040.00
(0.04-0.05)
0.260.02
(0.223-0.28)
0.160.00
(0.16-0.18)
0.310.02
(0.29-0.34)
0.740.05
(0.68-0.78)
0.650.04
(0.59-0.69)
1.260.20
(1.03-1.49)
1.190.08
(1.10-1.31)
1.430.29
(1.09-1.82)
10.090.44
(9.43-10.66)
6.790.29
(6.33-7.05)
35.733.14
(31.01-40.15)
66.752.81
(62.89-70.55)
77.862.15
(75.55-82.30)
155.842.12
(152.92-159.97)
208.291.82
(205.15-211.29)
327.831.46
(325.87-329.99)
343.001.67
(343.22-348.34)
315.261.10
(313.28-317.03)
544.672.22
(541.28-547.25)
528.171.96
(524.33-530.21)
745.562.47
(742.26-748.99)
818.761.37
(816.77-820.95)
Anlisis univariado t-student; = 0.05, nivel de confianza del 95%; valor P = valor de la probabilidad <0.05
Expresado como g equivalentes de cido glico/mg de extracto seco.
IC50= inhibicin de la concentracin de DPPH al 50% expresado como expresado como mg de extracto seco
4
Expresado como g de extracto seco equivalentes de acido glico necesarios para reducir el 20% de hierro.
44
III.5.1.3.1 Fenoles totales, la Grfica 1 compara el contenido de fenoles totales macromtodo con las doce especies. Puede observarse que T. lucida, L. guatemalensis, P. auritum
y C. chayamansa, son las especies que presentan los valores ms altos y que S. mombin es
quien presenta el menor contenido. Despus de efectuar el anlisis univariado, se procedi
a realizar una comparacin mltiple a travs de la preuba de Tukey ( = 0.05) para cada
parmetro de medicin, tomando en cuenta la doce distintas especies vegetales.
Grfica 1. Contenido de fenoles totales macromtodo en las doce especies en estudio1,2.
1
3
2
Prueba de Tukey (=0.05)
Fenoles totales como g equivalentes de cido glico/mg de extracto seco
Especies vegetales: 1. T. lucida, 2. L. guatemalensis, 3. P. auritum, 4. S. nigrescens, 5. G. sepium, 6. E. berteroana,
7. F. pandurata, 8. B. alicastrum, 9. C. chayamansa, 10. M. zapota, 11. S. mombin, 12. C. argyrosperma
n
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
1
3.53
6.27
15.86
17.27
Subgrupos
4
15.86
17.27
23.06
44.95
49.94
51.87
75.56
81.11
104.32
0.13
0.92
0.94
0.99
1.00
133.19
1.00
Fuente: FODECYT 28-2007 1Comparacin por la prueba de Tukey, = 0.05 2Fenoles totales como equivalentes de
45
1
3
2
Prueba de Tukey (=0.05)
Fenoles totales como g equivalentes de cido glico/mg de extracto seco
Especies vegetales: 1. T. lucida, 2. L. guatemalensis, 3. P. auritum, 4. S. nigrescens, 5. G. sepium, 6. E. berteroana,
7. F. pandurata, 8. B. alicastrum, 9. C. chayamansa, 10. M. zapota, 11. S. mombin, 12. C. argyrosperma
n
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
C. argyrosperma
F. pandurata
M. zapota
S. mombin
E. berteroana
S. nigrescens
B. alicastrum
P. auritum
L. guatemalensis
C. chayamansa
T. lucida
G. sepium
Significancia
217.32
253.71
273.26
0.07
0.58
0.49
0.30
0.97
Subgrupos
1
2
3
4
5
7.51
34.66 34.66
47.39 47.39
52.87 52.87
66.65 66.65
88.45 88.45
88.53 88.53
99.74
46
1.00
0.47
313.19
1.00
1
3
2
Prueba de Tukey (=0.05)
Fenoles totales como g equivalentes de cido glico/mg de extracto seco
Especies vegetales: 1. T. lucida, 2. L. guatemalensis, 3. P. auritum, 4. S. nigrescens, 5. G. sepium, 6. E.
berteroana, 7. F. pandurata, 8. B. alicastrum, 9. C. chayamansa, 10. M. zapota, 11. S. mombin, 12. C.
argyrosperma
Cuadro 12. TDAC por macromtodo en las doce especies vegetales en estudio 1,2.
Especie vegetal
T. lucida
L. guatemalensis
P. auritum
S. nigrescens
G. sepium
E. berteroana
F. pandurata
B. alicastrum
C. chayamansa
M. zapota
S. mombin
C. argyrosperma
Significancia
n
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
Subgrupos
3
2
0.03
0.05
0.14
0.22
0.47
0.47
1.08
1.57
1.95
13.42
0.55
0.11
0.40
0.77
1.00
1
Comparacin por la prueba de Tukey, = 0.05
TDAC: valor de inhibicin de la concentracin de DPPH al 50% (IC50) expresado como mg de extracto seco.
1.08
1.14
1.27
1.57
47
18.65
1.00
1
3
2
Prueba de Tukey (=0.05)
Fenoles totales como g equivalentes de cido glico/mg de extracto seco
Especies vegetales: 1. T. lucida, 2. L. guatemalensis, 3. P. auritum, 4. S. nigrescens, 5. G. sepium, 6. E.
berteroana, 7. F. pandurata, 8. B. alicastrum, 9. C. chayamansa, 10. M. zapota, 11. S. mombin, 12. C.
argyrosperma
Cuadro 13. TDAC por micromtodo en las doce especies vegerales en estudio 1,2.
Especie vegetal
T. lucida
L. guatemalensis
P. auritum
S. nigrescens
G. sepium
F. pandurata
E. berteroana
C. chayamansa
B. alicastum
M. zapota
S. mombin
C. argyrosperma
Significancia
n
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
1
0.023
0.043
0.164
0.258
0.311
Subgrupos
3
0.651
0.738
1.200
1.260
1.430
6.792
0.111
0.999
0.390
1.000
10.093
1.000
1
Comparacin por la prueba de Tukey, = 0.05
Actividad antioxitante total: valor de inhibicin de la concentracin de DPPH al 50% (IC50) expresado como
mg de extracto seco.
48
1
3
2
Prueba de Tukey (=0.05)
Fenoles totales como g equivalentes de cido glico/mg de extracto seco
Especies vegetales: 1. T. lucida, 2. L. guatemalensis, 3. P. auritum, 4. S. nigrescens, 5. G. sepium, 6. E.
berteroana, 7. F. pandurata, 8. B. alicastrum, 9. C. chayamansa, 10. M. zapota, 11. S. mombin, 12. C.
argyrosperma
Cuadro 14. Poder reductor del hierro en las doce especies vegetales en estudio 1,2.
Especie vegeral
T. lucida
L. guatemalensis
P. auritum
S. nigrescens
G. sepium
B. alicastrum
E. berteroana
F. pandurata
M. zapota
C. chayamansa
S. mombin
C. argyrosperma
Significancia
n
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
8
1
35.73
10
11
12
66.75
77.86
155.84
208.29
315.26
327.83
346.00
528.18
544.67
745.56
1
1
Comparacin por test de Tukey, = 0.05
Poder reductor del hierro expresado como g de extracto seco equivalentes de acido glico necesarios para reducir el 20% de hierro.
Subgrupos
6
7
49
818.75
1
Correlacin (%)
Interpretacin
64.43%
Buena
91.10%
ptima
Taninos
Aceites
voltiles
S. mombin
C. pepo
E. berteroana
+
-
B. alicastrum
M. zapota
S. nigrescens
G. sepium
F. pandurata
P. auritum
C. chayamansa
L. guatemalensis
T. lucida
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
Especie vegetal
Cumari Antraquinas
nonas
TDAC
TLC
Subgrupo
0
0
+
1
1
2
+
+
+
+
+
+
0
++
+
+
++
+++
+++
2
3
3
3
4
4
5
6
50
Flavonoides y
Antocianinas
Taninos
Aceites
voltiles
Cumarinas
Antraquinonas
TDAC
TLC
Subgrupo
T. lucida
L. guatemalensis
P. auritum
S. nigrescens
G. sepium
E. berteroana
F. pandurata
B. alicastrum
C. chayamansa
M. zapota
S. mombin
C. argyrosperma
+
+
+
+
+
-
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+++
+++
++
++
+
+
+
+
-
1
1
1
1
1
2
3
3
3
4
5
6
51
Los antioxidantes son sustancias que previenen el dao de los radicales libres y que
pueden ser ingeridos de forma exgena a travs de la ingesta frecuente de vegetales y
frutas. stos tambin pueden ser llamados nutricuticos o sustancias que pueden ser
nutrimentos y que tienen capacidad de potenciar y/o coadyuvar con el sistema inmune
para proteger contra ciertas enfermedades y tener capacidad de modificar una funcin. Es
conocido que muchos de estos antioxidantes pueden ser potenciales preservantes al
prevenir ciertos procesos de oxidacin (Vinson, Su, Zubizk & Bose, 2001). En el presente
estudio fueron incluidas 12 especies vegetales que se evaluaron mediante diferentes
parmetros de medicin para determinacin de actividad antioxidante como posibles
nutricuticos y preservantes.
Se pudo observar que las 12 especies vegetales muestran diferencias significativas
en los diferentes parmetros de medicin de la actividad antioxidante, presentndose
distintos subgrupos en cada parmetro de medicin. Se logr determinar que las especies
T. lucida, L. guatemalensis, P. auritum, S. nigrescens y G. sepium son las que presentan
los mejores rendimientos con los distintos parmetros de medicin.
III.5.2 Discusin de resultados.
Fueron evaluados los parmetros de fenoles totales y TDAC mediante metodologas
macromtricas y micromtricas. Para el contenido de fenoles totales macromtodo se
evidenci que existen seis subgrupos, mientras que para la metodologa micromtrica se
observan ocho subgrupos. De acuerdo a la correlacin llevada a cabo entre ambas
metodologas, esta es buena (64.43%), sin embargo, debera ser excelente la correlacin
para que los resultados fueran comparables.
Durante el proceso de implementacin de la metodologa micromtrica se evidenci
que concentraciones por encima de 1 mg/ml no son detectables, perdindose la linealidad
de las lecturas y que esta metodologa es til para detectar cantidades muy pequeas (<1
mg/ml). La metodologa micromtrica presenta buena reproducibilidad interda y en el
mismo da (CV<15%) (FDA, CDER & CVM, 2001). Sin embargo existen factores
importantes como la longitud de onda en la que fueron ledas las muestras, ya que el
mtodo establece la lectura a longitud de onda de 765 nm (Waterhouse, 2001), pero por
carecer de este filtro se realiz la lectura a 630 nm lo cual significa interferencia de otras
sustancias que emiten color a esta longitud de onda, por lo cual se recomienda que en
futuros anlisis se adquiera el filtro respectivo para minimizar interferencias.
Por otro lado la direccin de la transmisin de la luz con la que se realizan las
lecturas en un fotmetro de microplacas es vertical por lo que la presencia de partculas
de mayor tamao, como ocurre en el caso de los macerados etanlicos interfiere con la
transmitancia de luz, caso que no ocurre en el espectrofotmetro utilizado en el mtodo
macromtrico, en el cual el haz de luz es horizontal en la porcin superior del volumen
del analito ha determinar, con lo que la sedimentacin o precipitacin de partculas no
interfiere con dicho haz de luz, para lo cual se recomienda trabajar con mayores
diluciones que minimicen el efecto de interferencia por tamao de partcula. Ambos
factores son los principales responsables en que casi un 35% de las mediciones no
correlacionen con respecto a la metodologa macromtrica, sin embargo son modificables
52
55
III.6
OBJETIVO 6
Establecer procedimientos espectrofluoromtricos para evaluar la actividad antioxidante.
56
Coeficiente de determinacin
1
2
3
4
5
1.0
0.95
1.0
1.0
1.0
Concentracin de
quercetina (mg/mL)
5 0.00
3,200 30.84
110 5.32
520 5.92
160 3.4
70 0.35
1,800 11.78
25 0.85
2,790 20.34
2,180 42.33
25.9 1.2
1,070 19.65
Brosimum alicastrum
Cnidoscolus chayamansa
Cucurbita argyrosperma
Erythrina berteroana
Fernaldia pandurata
Gliricida sepium
Litsea guatemalensis
Manilkara sapota
Piper auritum
Solanum americanum
Spondias mombin
Tagetes lucida
Fuente: FODECYT 28-2007
Segn la tcnica fluoromtrica se pudo identificar que las especies que presentan mayor
concentracin de quercetina son C. chayamansa, P. auritum, S. americanum, L. guatemalensis
y T. lucida.
57
L. guatemalensis y T. lucida son dos de las especies que han presentado mayor actividad
antioxidante tanto por cuantificacin de fenoles totales como por determinacin de la TDAC
por DPPH. Otros estudios han demostrado que la mayor parte de la capacidad antioxidante de
frutas y vegetales es proporcionada por su contenido en vitamina C, E, carotenos y diferentes
polifenoles, as como propiedades farmacol-gicas de algunas especies han sido relacionadas
directamente con la presencia de polifenoles, especialmente flavonoides, reportndose en
algunos estudios que existe relacin entre quercetina y la actividad antioxidante de especies
vegetales (Diaz & Heinzen, 2006).
Los efectos en la salud de los polifenoles en la dieta han acaparado la atencin de los
nutricionistas en los ltimos aos. Los beneficios de los polifenoles, especialmente los
flavonoides incluyen actividad antioxidante, anticncer y efectos anti-inflamatorios entre
otros. Estudios experimentales soportan fuertemente el papel de los polifenoles en la
prevencin de enfermedad cardiovascular, especialmente al limitar el desarrollo de la lesin
ateromatosa al inhibir la oxidacin de lipoprotenas de baja densidad (Ferrazzano, Amato,
Ingenito, de Natale & Pollio, 2009). Otros estudios han determindo que existe mayor efecto
protector para la oxidacin al combinar -tocoferol y quercetina que la combinacin mostrada
por alfa tocoferol y cido ascrbico (Pineda, Salucci, Lzaro, Maiani & Ferro-Luzzi, 1999).
Segn tamizaje fitoqumico ninguna especie vegetal manifest presencia de quercetina
por cromatografa en capa fina, la discrepancia de resultados se puede deber a varios factores,
entre ellos el hecho que no se pueden comparar mtodos cualitativos y cuantitativos, adems
que la concentracin de los estndares en la de medicin de quercetina por mtodos
fluoromtricos se utilizaron menores concentraciones que las utilizadas en el tamizaje
fitoqumico, esto aunado al hecho de que pueden existir otras sustancias que emitan
fluorescencia a la longitud de onda utilizada para la determinacin de quercetina que puedan
interferir en la determinacin.
58
59
Las ltimas dos ponencias fueron presentadas por estudiantes de las carreras de Qumica
Biolgica y Qumica Farmacutica. El tema de las ponencias fue Efecto del procesamiento y
almacenamiento sobre la actividad antioxidante de plantas comestibles de hoja y Uso de
extractos de frutas como antioxidante en productos cosmticos tipo emulsin. Ambas
ponencias versaron sobre los resultados preliminares que se han obtenido en los trabajos de
tesis y seminario de los estudiantes.
La serie de conferencias propiciaron a que se formularan preguntas y se discutieran
diferentes temas abordados por los conferencistas, as como facilit el alcance de nuevos
conocimientos sobre el tema de los antioxidantes a los profesionales que se dedican
principalmente al la docencia universitaria.
60
PARTE IV.
IV.1
CONCLUSIONES
1. Se colect y revis la literatura disponible sobre las especies vegetales y las tcnicas
analticas, contrndose que de las especies escogidas, de 2 se encontraron ms de 20
referencias sobre los usos y propiedades medicinales, pero de 4 se encontraron menos de
10 referencias y con informacin nicamente etnobotnica y muy poca informacin
farmacolgica y toxicolgica. Basados en la informacin colectada y analizada, se
prepararon las monografas farmacopicas de las doce especies en estudio (Anexos 1-12),
aunque solamente de tres de ellas la informacin es amplia y suficiente.
2. Se colectaron 10 especies no estudiadas previamente y dos que haban demostrado
actividad antioxidante anteriormente, encontrndose que la relacin fresco:seco vari de la
ms baja 100:15.8 (G. glabra) a la mas alta 100:29.3 (S. nigrescens). El porcentaje de
humedad estuvo dentro de los rangos aceptados internacionalmente (4.9-9.6%), lo que
garantiza una buena calidad de la materia prima y una vida media larga al almacenarse.
Del contenido de cenizas no existe una norma estndar, ya que este contenido depende de
cada droga vegetal; la mayora estuvo entre los rangos medios (3.2-9.1%), aunque algunos
dieron valores ligeramente elevados, como P. auritum (10.3%) y F. pandurata (10.2%).
3. Se prepararon extractos secos de las especies colectadas, encontrndose que el promedio
de rendimiento de slidos extrables fue de 15.639.66%, siendo la flor de G. sepium la
que dio el porcentaje ms alto (34.95%) y la semilla de C. argyrosperma la del porcentaje
mas bajo (3.13%). En el caso de los extractos de M. zapota y S. mombin se realiz una
maceracin cintica por que por ser frutas no fue posible su extraccin por percolacin.
4. Se caracterizaron los grupos fenlicos y grupos qumicos ms importantes, demostrndose una alta diversidad qumica en la presencia de flavonoides, antocianinas,
cumarinas y monoterpenos en los extractos de varias especies, aunque en pocos casos los
Rfs coincidieron con los controles estndar utilizados; nicamente L. guatemalensis
demostr la presencia de taninos por los tres mtodos. Ninguno de los extractos demostr
la presencia de antraquinonas, lo que se confirm por una prueba cualitativa.
5. Se demostr una actividad antioxidante importante por la tcnica cualitativa de NPPH en
TLC en cuatro especies (L. guatemalensis, T. lucida, P. auritum y S. nigrescens)
61
62
IV.2
RECOMENDACIONES
1.
2.
3.
4.
Aprovechar las drogas vegetales que tienen alto rendimiento de materia extrable, ya que
estas podran tener un aprovechamiento mas rentable en la industria de los extractos
naturales.
5.
6.
7.
En general la correlacin entra la tcnica macro y micromtrica fue muy buena, aunque
deber optimizarse la tcnica micromtrica para la evaluacin de fenoles totales para que
la correlacin sea ptima entre ambas tcnicas.
8.
9.
10. Realizar eventos en forma sistemtica para socializar las investigaciones que sobre
antioxidantes realizan profesores y estudiantes de diversas reas de las ciencias de la
salud, tanto para
63
IV.3
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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69
IV.4 ANEXOS
70
Anexo 1.
I.
1.
2.
Sinnimos:
Nombres vulgares:
DESCRIPCIN BOTNICA
Distribucin y hbitat:
Bosques hmedos, que se encuentran sobre los 1,000 m en su mayor parte pero se puede
encontrar en los 300 m desde Mxico hasta Brasil. Se encuentra en los departamentos de Petn
Alta Verapaz, Izabal, Escuintla, Guatemala, Retalhuleu Quich, Huehuetenango, Baja
Verapaz, el sur Mxico y Honduras, Salvador y al oeste de las Indias (1). Son rboles de clima
clido que se cultivan hasta 800 m de altura. Se adaptan a climas semihmedos, hmedos y
hasta semiridos. Crecen bien en suelos calizos y rocosos (2). Necesita de una precipitacin
pluvial de 2100-4300 mm anuales y temperaturas entre los 21 y 25C (3).
IV.
(5)
71
Hojas: Las hojas son muy solicitadas para hacer cocimientos con ellas y tomarlo, a fin de
hacer aumentar la secrecin de la leche en las mujeres que estn criando es decir se considera
un buen galactogogo (5). Para clarificar, limpiar o liberar la sangre de sustancias o humores que
daan, especialmente cuando padece de erisipela, sfilis o granos difciles de erradica o sea,
para librar de una infeccin se toma en forma de tisana o puede ser con la corteza (4). Las
infusiones de las hojas son utilizadas en tos y dolores de rin (7).
Ltex: El ltex diluido en agua es empleado en el asma y la bronquitis (10). En Guatemala se
toma el ltex para aliviar desrdenes estomacales (7,8); diluido ayuda en la extraccin de
dientes (7). Tambin se ha empleado como sustituto de la leche humana (8).
Semilla: Se han utilizado como galactogenas (6,9).
Cenizas: La lea produce una ceniza de muy buena calidad para leja, que usan las mujeres,
ellas dicen que con esa agua de leja la suciedad de la ropa se desprende muy bien y rpido y
que no se consume mucha agua para lavar, ni jabn (10).
Sin especificar la parte: Tratamiento para afecciones respiratorias, tuberculosis
es utilizada en remedios populares para cncer de tero y actividad sedante (7).
(4)
. La planta
Uso en combinacin con otros ingredientes: En afecciones del rin, las hojas se emplean
en infusin junto con el cabello de maz y chete; Adems se usa en mordeduras de serpiente,
diabetes, punzada de aire y para bajar de peso. Se le considera balsmico emenagogo y
galactagogo (4).
Otros usos: En Mxico adems de tener usos curativos, se utiliza en los rituales y las prcticas
mgicas. Las semillas se ponen dentro de las sonajas de los adivinos (4); los cakchiqueles lo
utilizaban como alimento o en ceremonias; son comestibles cocinadas y majadas en forma de
harina, y tostadas para preparar una bebida similar al chocolate (2). De la pulpa del fruto se
hacen mermeladas. La semilla es comestible y usada desde pocas de los mayas para sacar
harina para hacer tortillas; tostadas se comen y semejan el sabor de las castaas y hervidas son
substituto de la papa (8). Si adems de purificar la sangre, se requiere aumentarla se agrega
Juglans major, canela, Citrus limon, brasil, cebada, hojas de tomate y raz de malva (4). Junto
con la jicama cimarrona es smbolo del hambre y los aos malos en las profecas. En la
huasteca potosina se le da uso ritual en la danza de ojos que tienen lugar al finalizar el periodo
de Todos Santos (4).
Contra la bilis, se cuecen las hojas de Fraxinus uhdei, cogollos de Mentha piperita, Salvia
officinalis y Verbena carolina, se agrega canela, limn, Tanacetum parthenium, Guazuma
ulmifolia, Oriza sativa, Buddleja sessiliflora, Rosmarinus officinalis y B. alicastrum (4).
Usos etnoveterinarios: Las hojas, tallitos y semillas se utilizan como forraje en la dieta del
ganado vacuno aumenta la produccin de leche, tambin puede ser utilizado para cabras,
ovejas, cerdos (2), mulas, caballos (11).
V.
DROGA VEGETAL
1.
2.
3.
Obtencin: Su poca de floracin es en otoo (6). Se reproduce por semillas, que pierden
rpidamente su poder germinativo. Puede dar 50-75 kg de frutos por ao. Para forraje puede
72
6.
Composicin qumica: Las semillas contienen aceites esenciales, grasas, resinas, cera,
muclago, almidn, albmina, dextrina, glucosa y azcares (8,13). Se ha demostrado que tiene
protenas, aminocidos (triptofano) (2,8), hierro, vitaminas (10), grasa y alcaloides. Se ha descrito
la presencia del compuesto glenoideo 1-4, 2,6-dimetoxi benzoquinona (4).
7.
7.1
Identificacin:
Ensayos:
No hay referencias.
73
VI.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
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desecado para t o infusin. Propuesta COGUANOR NGO 6 074:89
74
Anexo 2.
I.
1.
2.
Sinnimos:
3.
Nombres vulgares:
Distribucin y habitat:
Nativa de Yucatn, introducida en Cuba y en el sur de la Florida (3). Habita en climas clido y
semiclido desde el nivel del mar hasta los 700 m (2).
IV.
Para tratar infeccin urinaria, dolor de estmago, riones o cualquier infeccin interna (6).
Hojas: La decoccin de las hojas es tomada varias veces al da como laxante y diurtico (3). En
Mexico se utiliza para el dolor de riones, se preparan las hojas en decoccin y se administra
oralmente. De igual manera se emplea en casos de diabetes y convalecencias, as como cuando
hay ausencia de leche en los pechos de las seoras (2). Entre las poblaciones adultas de
mexicano-americanos se dice que ayuda a la digestin, es antitusiva, descongestionante y
mejora la memoria (7).
Otros usos: La raz y el fruto con todo y semilla se comen cocidos, tambin se comen el fruto
y las hojas tiernas con verduras (8).
Sin especificar la parte: Se utiliza para tratar el colesterol en la sangre y como medio para
combatir el alcoholismo (2).
Aplicacin tpica: De manera externa se aplica junto con el ltex para reventar nacidos, en
Tabasco (2).
V.
DROGA VEGETAL
1.
2.
3.
Obtencin: No refiere.
4.
5.
Descripcin microscpica de la droga: Por un mtodo enzimtico y tcnicas UV-Vis
se cuantificaron los glicsido cianognicos, encontrndose valores de 0.790.2 g de HCN
equivalente; por HPTLC se identific este glicsido como linamarina (9). Se determin la
presencia de flavonoides, tales como kaempferol-3-O-glicsido y quercetin-3-O-glicsido (10).
6.
Composicin qumica: Las hojas frescas contienen protena, fibra, carbohidratos,
calcio, fsforo, hierro carotenos, tiamina, riboflavina, niacina y cido ascrbico (3).
7.
7.1. Identificacin:
7.1.1. Descripcin macroscpica: No refiere
7.1.2. Descripcin microscpica: No refiere
7.1.3. Caractersticas organolpticas: No refiere
7.2
Ensayos:
7.2.1
Caractersticas fisicoqumicas:
Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10%.
Partes de otras plantas: No debe presentar.
Insectos o larvas: No debe presentar.
Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10% (11).
Cenizas totales: Por incineracin en mufla a 700-750C, no debe pasar el 9% (11).
7.2.2
Anlisis microbiolgico: El producto en cualquiera de sus presentaciones no
contendr microorganismos patgenos o sus toxinas.
7.2.2.1 Coliformes totales: Menor al 104 NMP de coliformes totales.
7.2.2.2 Coliformes fecales: Menor al 103 NMP de coliformes fecales.
7.2.2.3 Escherichia coli: Menor al 102 NMP de E. coli.
7.2.2.4 Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 UFC/mL (11).
7.2.3
Datos farmacolgicos
76
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77
Anexo 3.
I.
1.
2.
Sinnimos:
Nombres vulgares:
DESCRIPCIN BOTNICA
Tiene un habito rastrero o trepador, los tallos son rgidos angulosos y surcados, las hojas
profundamente lobadas pero no palmatifidas con el lbulo terminal pinnatifido, redondea-do a
agudo; margen denticulado a inciso; usualmente con manchas blancas o plateadas a lo largo de
las venas. Indumento (pecolos y venas primarias de las lminas por abajo) suave y cortante
pubescente a piloso. El receptculo en las flores estaminadas es ancha-mente campanulado,
ligeramente constreido justo debajo de los spalos; raramente surcados o slo ligeramente
foliceos; la corola est formada de ptalos agudos a acuminados, algunas veces obtusos;
margen entero, aunque algo ondulado o doblado; los filamentos son glabros, gradualmente
angostndose desde la base hasta el pice; el pednculo es rgido, anguloso o no excepto en el
punto de unin con el fruto, liso o costado. Frecuentemente muy engrosado, tornndose
cilndrico, claviforme o subgloboso.
La forma y tamao del fruto es variable 14-50 cm de largo, 14-25 cm de dimetro, globoso,
ovoide, piriforme o claviforme, estos ltimos rectos o encorvados en la porcin ms delgada o
angosta; estilo raramente persistente; la superficie del fruto generalmente lisa, sin costillas,
algunas veces con excrecencias leosas que parecen extenderse o escurrirse desde el
pednculo hacia el pice del fruto. Comnmente el color del fruto es blanco con franjas
reticuladas verdes o verde con manchas y franjas irregulares blancas o crema, algunas veces
totalmente blancos o verde oscuro, tornndose de color amarillo o pardo claro al madurar o
algunas veces anaranjados, raramente bicolores. La pulpa del fruto es ligeramente fibrosa a
muy fibrosa. De color blanco-verdoso, amarillo plido o anaranjado claro, algunas veces con
un tinte verde oscuro a negro en las placentas;
Las semillas son elpticas a lanceoladas, planas a ms o menos infladas o tumescentes, algunas
veces hasta 35 mm de largo; testa delgada (<1 mm de grueso), rgida. El color de las semillas
es usualmente blancas, algunas veces blanco opacas, pardas o bronceadas; mrgenes del
mismo color que el centro de la semilla o poco ms obscuros, algunas veces amarillento a
dorado, nada muy ligeramente fibrilloso, o azul-grisceo-verdoso (1).
78
Distribucin y habitat:
Frutos: Para quemaduras se emplea la pulpa en fresco de frutas maduras y se coloca en las
zonas afectadas, lo mismo para cicatrizar llagas del seno (3).
Hojas: Para curacin de granos o erupciones cutneas se estrujan y aplican las hojas (3).
Semillas: En Guerrero, Sonora y Yucatn las semillas se utilizan para eliminar parsitos
intestinales. Tambin en caso de hemorroides, se pone el aceite de las semillas crudas y
descascaradas (3).
Toda la planta: Es estimulante del apetito (3).
Otros usos: Las semillas se utilizan en diversas preparaciones culinarias y en cierta clase de
mazapn. En Guatemala se prepara un dulce hecho con las semillas tostadas y un jarabe de
azcar llamado pepitoria. Se emplean en preparaciones culinarias indgenas como el aiguashte,
alguashte, aiguate o guasote, que es comn ver sobre el atol de maz o dentro de tamales o
guisos de iguana. Se preparan refrescos con semillas molidas (4).
V.
DROGA VEGETAL
1.
2.
3.
Obtencin: No refiere.
4.
5.
6.
Composicin qumica: En cuatro accesiones, el rendimiento del extracto lipoflico es
de 24.48-43.0 %, con una composicin de cido palmtico de 13.52-21.08%, cido esterico
de 6.33-10.44% y cido linolico de 35.67-47.68% (5). Contiene aminocidos raros metacarboxifenilalanina y cucurbitita (3).
7.
7.1.
Identificacin:
79
7.2
Ensayos:
2.
3.
4.
5.
6.
7.
REFERENCIAS
Lira, R. (1995) Estudios Taxonmicos y Econogeogrficos de las Curcurbitaceae Latinoamericanas de
Importancia Econmica. Systematic and Ecogeogaphic Sudies on CropGenepoles. International Plant
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Mxico, p583.
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Subexplotados de Mesoamrica. Santiago, FAO, 50-53 p.
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Departamento de Control de Calidad; Laboratorio de Productos Fitoteraputicos, Farmaya, S.A. (2007)
Certificados de Control de Calidad de Materia Prima Vegetal. Guatemala.
Ministerio de Economa (1989). Comisin Guatemalteca de Normas. Productos Fitoteraputicos. Pericn
desecado para t o infusin. Propuesta COGUANOR NGO 6 074:89
80
Anexo 4.
I.
1.
2.
Sinnimos:
Nombres vulgares:
Pito, miche, machetillos, palo de pito (Gua.); coralillo, tzint (quecch); tzite (quich) (3);
brucal (Haiti); bucare (Cuba, PR); pion de cerca, pion de pito (Cuba); bucayo enano,
machete (PR), cresta de gallo, gallito, parnu, pernilla de casa (Pan.), elequeme (Nic.); mata
caiman, peronio, pion de Peronilla (Col.); pion de Espaa (RD); pitn (Sal, Hon. y Gua.);
poro, poro de cerca (CR) (4); pito, quilite, poro de montaa (Sal.) (5); coralbean (ingls) (6);
colorin (Mx.) (7).
II.
DESCRIPCIN BOTNICA
Distribucin y hbitat:
Desde el sur de Mxico y las Antillas, hasta Amrica del Sur. En Costa Rica frecuente en la
Vertiente del Pacifico (6). En Costa Rica se encuentra a elevaciones bajas a medianas, con
climas de secos a muy hmedos propagada y plantada comnmente como postes vivos en las
cercas. En Guatemala se encuentra de 0-2000 msnm (8). Ms comn a 1000 msnm, en Petn,
Alta Verapaz, Zacapa, Chiquimula, Jutiapa, Santa Rosa, Escuintla, Guatemala,
Chimaltenango, Solol, Retalhuleu, Quetzaltenango, Huehuetenango. Sur de Mxico,
Honduras y El Salvador hasta Panam, Indias Occidentales, Colombia (3).
IV.
Insomnio, agilizar el parto, dolor de muelas, fuego en el estmago, fuego en la boca, dolor de
vientre, esterilidad en la mujer, nervios (9).
Hojas: Las hojas cocidas, se utilizan para darse baos en la cabeza, bueno para el insomnio y
el dolor de cabeza (5). En Guatemala se utilizan las hojas y flores bajo la almohada para inducir
el sueo (4). Las hojas y la corteza se utilizan por su accin como hipntica, purgante y
diurtica. Las hojas se consideran emenagogas (1).
Corteza: La decoccin de la corteza se utiliza para el dolor de muelas y el fuego en el
estmago y la boca (9). En Veracruz se utiliza en los piquetes de animales ponzoosos, para lo
81
cual se elabora una maceracin con la corteza y las hojas, se puede tomar en fresco o como
cataplasma (7).
Flores: Se ingieren y sirven para el insomnio (9). La decoccin de las flores es sedante y sirve
como remedio para el nerviosismo, hemorragias y disentera (4,10). Se utilizan para las
afecciones del pecho (1).
Toda la planta: Las hojas y las ramitas tiernas, as como los botones de las flores pueden
comerse como verduras, pero se debe cambiar el agua decoccin por lo menos dos veces para
eliminar los agentes txicos (11).
Uso en combinacin con otros ingredientes: Los cogollos de pito e izote junto con las hojas
de siguapate, se preparan en decoccin y son tiles para agilizar el parto. Para la esterilidad y
el dolor de vientre, se prepara la decoccin de la corteza de pito, junto con cedro, liquidmbar,
jiote, guacamaya, semillas de culantro de castilla, clavos, alhucema, romero, ans, pimienta
gorda, organo y canela (9).
Sin especificar la parte: Los indios Cuna de Panam la emplean como remedio para
problemas femeninos (4). En Oaxaca esta planta se emplea para la tosferina.
Otros usos: Dicen que las hojas colocadas de bajo de la almohada, inducen el sueo, la
corteza produce un tinte amarillo para colorear tejidos (12).
V.
DROGA VEGETAL
1.
2.
5.
7.1
Identificacin:
82
7.2 Ensayos
7.2.4 Caractersticas fisicoqumicas:
- Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
- rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10%.
- Partes de otras plantas: No debe presentar.
- Insectos o larvas: No debe presentar.
- Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
- Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10%.
- Cenizas totales: Por incineracin en mufla a de 700-750C, no debe pasar el 9% (10).
7.2.2 Anlisis microbiolgico:
- Coliformes totales: Menor al 104 NMP/mL de coliformes totales.
- Coliformes fecales: Menor al 103 NMP/mL de coliformes fecales.
- Escherichia coli: Menor al 102 NMP/mL de E. coli.
- Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 ufc/mL (19)
7.2.3 Contaminantes qumicos o biolgicos: El producto no deber contener contaminantes
qumicos o biolgicos en cantidades que sobrepasen los lmites mximos aceptados por la
unidad sanitaria respectiva (15).
8. Ficha tcnica de seguridad y eficacia:
Actividad antimicrobiana y toxicidad: los extractos acuosos y etanlicos de raz, corteza y hoja
no manifestaron actividad inhibitoria en los cultivos de S. aureus y E. coli (5).
8.1 Propiedades farmacodinmicas
8.1.1 Toxicidad
Presenta principios txicos:
Erysodina (HCL)- DL50 oral en ratn: 155 mg/Kg. de m.c.
Erysopina (HCL) DL50 oral en ratn: 18 mg/Kg. de m.c.
DL50 subcutnea en ratn: 76 mg/Kg de m.c.
Erysothiopina (Na)- DL50 Subcutnea en ratn: 76 mg/Kg. de m.c.
Erythralina (HBr)- DL50 oral en ratn: 80 mg/Kg de m.c.
DL50 subcutnea en ratn: 92 mg/Kg de m.c.
Erythramina (HBr)- DL50 sub cutnea en ratn: 104 mg/Kg. de m.c.
Beta-Erythroidina- DL50 intraperitoneal en ratn: 24 mg/Kg de m.c.
DL50 intravenosa en conejo: 8.6 mg/Kg. de m.c.
Adems posee eritrocoraloidina (1).
Partes Txicas: Semillas, corteza y vainas (1)
Sntomas: Produce hipnosis, parlisis, incoordinacin y puede causar la muerte (1)
VI.
1.
2.
3.
REFERENCIAS
Alfonso, H.A., Tablada Prez, R., Quesada Pastor, N., Carballo Velsquez, N., Acosta Pedroso, B. &
Snchez, L.M. (2000) Plantas Txicas. La Habana, Editorial Capitn San Lus, p.155
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Standley, P.C. & Williams, L. (1961) Flora of Guatemala. Fieldana: Botany 24(5), 253.
83
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
Morton, J. (1981) Altas of Medicinal Plants of Middle America. Springfield, Charles C. Thomas, pp. 316317.
Mena, G. (1994) Obtencin y aprovechamiento de extractos vegetales de la flora salvadorea. San Salvador,
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Centro de Estudios Conservacionistas (1984) Plantas Comestibles y Txicas de Guatemala. Guatemala. p.77
Nelson, C. (1986). Plantas Comunes de Honduras, Tomo II. Tegucigalpa, Editorial Universitaria, p. 484.
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Departamento de Control de Calidad; Laboratorio de Productos Fitoteraputicos Farmaya, S.A. (2007)
Certificados de Control de Calidad de Materia Prima Vegetal. Guatemala.
84
Anexo 5.
I.
1.
2.
Sinnimos:
Amblyanthera pandurata
Echites pandurata (A.DC.) en D.C.
Echites pinguifolia Standl.
Urechites karwinskii Muell. Arg.
3.
Nombres vulgares:
Loroco
II.
DESCRIPCIN BOTNICA
Hierba trepadora, pequea o grande, densamente puberulenta o cortamente aterciopeladapilosa en todas partes. Hojas, membranosas, en peciolos de 1-2 cm de largo, oblongo 1.5-8 cm
de ancho, cortamente acuminadas, las hojas de truncadas, usualmente muy densas y
suavemente pilosas en el envs. Flores de 8-18 en la inflorescencia, brcteas ovaladas, de 1-2
mm de largo. Cliz con lbulos ovalados, agudos y obtusos, de 2-3 mm de largo. Corola
blanca internamente, verduzca exteriormente y glabra, el tubo de 20-22 mm de largo, la
garganta ampliamente campanulado-cnica, de 9-12 mm de largo, de 7-9 mm de ancho, los
lbulos ciliados, de 10-13 mm de largo, densamente velludo-aracnoides en la base (1).
III. DATOS AGROTECNOLGICOS
1.
Distribucin y hbitat:
Las flores y yemas florales se comen cocidas en tamalitos de carne o arroz (3,4,5) y se usa como
un saborizante agradable en las comidas (6).
V.
DROGA VEGETAL
1.
2.
Definicin: No refiere
3.
Obtencin: No refiere
4.
Descripcin macroscpica: La raz es fibrosa y posee sustancias con ciertas
caractersticas alcaloides. El tallo es una enredadera delgada (tipo liana), dbil y pubescente,
tiene una base leosa que persiste. Las hojas son oblongas, elpticas, opuestas, bastantes
85
acuminadas, con bordes externos un poco ondulados, con dimensiones de 4-22 cm de largo y
de 1.5-12 cm de ancho. La inflorescencia se da en racimos y cada uno de ellos posee de 10 a
32 flores, dando un promedio de 25 por racimo. El fruto es un folculo cilndrico, alargado,
recto o curvado hacia adentro pudiendo alcanzar hasta 34 cm de longitud y entre 5-6 mm de
dimetro. Dentro de cada folculo pueden hallarse desde 25 hasta 190 semillas, dependiendo
de su longitud, encontrndose diferentes tipos de tamao; cuando tierno es de color verde y
luego maduro es caf oscuro. La semilla tiene un dimetro entre 2-3 mm. Posee gran cantidad
de pelos algodonoso en el extremo, que facilitan su dispersin por el viento (7).
5. Descripcin microscpica de la droga: No refiere
6. Composicin qumica: 100 g de hojas frescas contienen 79 g humedad, 1.65 g cenizas;
8.25 g protena; 1.94 g fibra cruda; 7.23 g total de carbohidratos, 421 mg. calcio; 63 mg
fsforos; 11.61 mg hierro; 8.52 caroteno; 0.23 mg. timina; 0.35 mg. riboflavina; 1.74 mg.
niacina y 274 mg cido ascrbico (8).
Las flores machacadas contienen fibra cruda, nitrgeno, calcio, fsforo, hierro, carotenos,
tiamina, niacina, y cido ascrbico (9).
7. Monografa de control de calidad:
7.1 Identificacin:
7.1.1 Descripcin macroscpica: No refiere
7.1.2 Descripcin microscpica: No refiere
7.1.3 Caractersticas organolpticas: No refiere
7.2 Ensayos:
7.2.4 Caractersticas fisicoqumicas:
Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10 %.
Partes de otras plantas: No debe presentar.
Insectos o larvas: No debe presentar.
Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10% (10).
7.2.5 Anlisis microbiolgico: El producto en cualquiera de sus presentaciones no contendr
microorganismos patgenos o sus toxinas.
Coliformes totales: Menor al 104 NMP/mL de coliformes totales.
Coliformes fecales: Menor al 103 NMP/mL de coliformes fecales.
Escherichia coli: Menor al 102 NMP/mL de E. coli.
Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 ufc/mL (10).
7.2.5 Contaminantes qumicos o biolgicos: El producto no deber contener contaminantes
qumicos o biolgicos en cantidades que sobrepasen los lmites mximos aceptados por la
unidad sanitaria respectiva (10).
86
8.
REFERENCIAS
1.
2.
Standley, P.C. & Steryermark, J.A. (1946) Flora of Guatemala. Fieldiana: Botany 24(4), 493 pp.
FAO (1993) Valor Nutritivo y Usos en Alimentacin Humana de Algunos Cultivos Autoctonos
Subexplotados de Mesoamerica, Chile p.155.
3. Nelson, C.H. (1986) Plantas Comunes de Honduras. Tegucigalpa, Editorial Universitaria, pp. 380.
4. Ronquillo, F.A., Melgar, M.R., Carrillo, J.E. & Martnez, A.B. (1988) Especies vegetales de uso actual y
potencial en alimentacin y medicina de las zonas semiridas del norodiente de Guatemala. Cuadernos de
Investigacin DIGI No. 7-88, pp. 213-215.
5. Pll, E. de (1983) Plantas comestibles y txicas de Guatemala. CECON Serie Documentos Ocasionales #1.
Guatemala, CECON, pp. 60.
6. Ayala, H. (1999) Agrobiodiversidad de Guatemala. Guatemala, Ed. Serviprensa, pp. 85.
7. Loroco; www.centa.gob.sv/uploads/documentos/loroco.pdf
8. Duke, J.A. & Atchley, A.A. (2000) Handbook of Proximate Analysis Tables of Higher Plants. Boca Raton,
CRC Press, p. 74.
9. Morton, J.F., Alvarez, E. & Quinez, C. (1990). Loroco, Fernaldia pandurata (Apocynaceae) a popular
edible flower of Central America. Economic Botany 44, 301-310.
10. Departamento de Control de Calidad; Laboratorio de Productos Fitoteraputicos, Farmaya, S.A. (2007)
Certificados de Control de Calidad de Materia Prima Vegetal. Guatemala.
87
Anexo 6.
I.
1.
Denominacin:
Sinnimos:
Nombres vulgares:
Acacia, desnudo florecido, madrecacao, matarratn, pion florido (Col.); madriado, sangre de
drago (Cos.); amor y celos, bien vestido, florezco, pion amoroso, pion florido (Cub.); palo
de hierro, sangre de drago (Sal.); kante, kansim, masera negra, madriado, matasarna, sacyab,
yaite (Gua.); lengua de perico, cahuanandre, cacahuanano, cacahua-nantl (Mx.);
cacahuananche (Nic.); balo, bala, madera negra (Pan.); raborratn (Ven.); cocoite, cochito,
sayab, sacyab, sayuiab (Mex); cacante (Filipinas); quick stock (Jam.).
II.
DESCRIPCIN BOTNICA
88
89
Toda la planta: El cocimiento de las hojas y corteza se usa para tratar afecciones
gastrointestinales (diarrea, dolor de estomago, tifoidea), respiratorias (resfriado, fiebre, flemas)
y de la piel (erupciones, erisipela, imptigo, gangrena, granos, jiote, gonorrea, quemaduras,
picaduras de insectos, lceras), paludismo y paperas. Se les atribuye propiedad
antihistamnica, antimalrica, antisptica, cicatrizante, diurticas, expectorante y febrfuga.
Las semillas, corteza y las hojas son usadas por su efecto raticida (7).
Uso en combinacin con otros ingredientes: Para la lepra se mezclan con quina, jocote,
jiote, matilisguate, guachipilin, se cocinan y se hacen fomentos, lavados y baos (9) Con
Annona squamosa se utiliza para resfriados y con Ocimum sanctum tambin se utiliza para
resfriados (14).
Sin especificar la parte: Contra el jiote, como rodenticida y como desinflamatorio (15).
Otros usos: Entre los nahuas, esta especie se usa en el tratamiento de la quemada o
netlatilli, que tiene su origen a causa de una discusin o ria en el seno de una familia donde
recientemente se ha tenido un parto. Es un caso caliente, por lo tanto, si hay golpes o discusin
puede producirse la quemada en la nueva madre o en quienes hayan discutido. Los sntomas
son falta de apetito, manchas cenizas, se adelgaza y no se quiere tocar el agua. El tratamiento
consiste en efectuar baos con kun-kuite o palo de corral y otra planta llamada tepochote. El
agua que va a ocuparse para el bao debe ser trada del pozo la maana en que se va emplear.
Esto se realiza durante siete das todas las maanas (16).
Otras afecciones tratadas con esta especie son dolor de cabeza, dispela y para parsitos, y se
le atribuyen propiedades diurticas y antihistamnicas (16). En Panam, se usa para sarnas,
hongos, urticaria, correcamino e infecciones cutneas (7).
La flor, hoja, corteza o los tallos: se cocinan y se hacen baos diarios, para aliviar el
salpullido, granos, dispela y rasquia. La corteza por ser madera dura y pesada se utiliza
como combustible. La madera tiene un acabado liso y es apropiada para muebles (17).
V.
USOS ETNOVETERINARIOS
Zumo: Las bestias suelen ramonear las hojas que estn a su alcance, el zumo de stas se usa
para combatir la neumatosis conocida como torzn de las caballeras (7).
Hojas: Parecen tener actividad abortiva para el ganado vacuno (7). Las hojas se usan
ampliamente como forraje; es muy rico en protenas (18-28%) (18), las hojas y ramas pequeas
se usan para ahuyentar los piojos de las gallinas (piojillo de las aves), tambin estregndolo el
cogollo cura a los perros con sarna y ahuyenta las pulgas (10).
Flores: Son una fuente de alimento para las abejas productoras de miel (17).
Races: En Nicaragua y Costa Rica se considera muy eficiente en la destruccin de la taltuza y
otros pequeos roedores, para los cuales las races constituyen un veneno mortfero. Las hojas
son peligrosas para los caballos, pero se dice que no causan dao al ganado vacuno y cabrio
(7)
.
Toxicidad para los animales: El follaje presenta cierta toxicidad para el caballo, cerdos,
conejos y aves; se ha notado una inhibicin del crecimiento de conejos y aves an con
cantidades pequeas. Se han alimentado cerdos con 15% de hojas sin efectos secundarios (19).
El extracto acuoso de semillas no es txico a peces dorados; la canavinina es txica a
90
DROGA VEGETAL
1.
2.
Definicin: No refiere.
3.
4.
5.
6.
Composicin qumica: El tamizaje fitoqumico de las hojas indica la presencia de
alcaloides no cuaternarios, saponinas, esteroles insaturados, flavoides y polifenoles. Las hojas
y corteza contienen flavonoides (2-o-metisepiol, 7,3,4trihidroflavona, sepiol, robinetina),
carbohidratos (pinol), cumarinas y cidos o-cumarnico y meliltico. El anlisis proximal de
100 g de hojas frescas contiene: 52 caloras, agua (84.7 g), protenas (2.4 g) grasas (0.5 g),
carbohidratos totales (11.9 g), fibra (1.3 g), cenizas (0.5 g), calcio (17 mg), fsforo (34 mg),
hierro (0.8 mg), tiamina (0.14 mg), riboflavina (0.08 mg), niacina (1.0 mg) y cido ascrbico
(12 mg) (19).
Todo el rbol es rico en flavonoides, compuestos que se sabe tienen mltiples actividades
farmacolgicas. La corteza contiene taninos y triterpenos. La mdula contiene isoflavinas, una
isoflavina fenlica y gliricidina, sepinol y gliricidol (9). La raz contiene triterpenos (15). Se ha
reportado adems: astragalina, 2,7-dihidroxi-3-metoxiisoflavano, gliricidina, (-)siomucronulatol, robinina, sepinol, sepiol y trifolina, canavanina, pinitol y sacarosa (7). El
duramen contiene flavonoides (isoflavanes, 2 butin (flavona), isoflavan fenlico, isoflavana
(gliricidin 6 alfa), dihidroflavanol (sepiol 7a), gliricidol, isomucronulatol, robinetina) y B
hidroxidihidrochalcona (glicidol 9 alfa). Las flores contienen flavonoides (gastragalina,
robinina, sepinol, trifolina) y carbohidratos. Las semillas contienen canavanina, con una
potente actividad inhibidora del crecimiento de varios organismos (3).
7.
7.1
8.1
Datos farmacolgicos
8.1.1 Estudios farmacolgicos in vitro: Por una tcnica de difusin se determin que los frutos
poseen actividad contra S. aureus y las hojas y la raz contra S. pyogenes. Se demostr que la
raz, corteza y flores poseen actividad contra P. aeruginosa (22). La tintura de la corteza y hojas
no inhibe enterobacterias patgenas ni C. albicans. La decoccin de las hojas es activa contra
el M. canis y T. mentagrophytes, con CIM de 100-200 mg y actividad fungicida y fungisttica.
La maceracin etanlica de las hojas es activa contra N. gonorrohea y un espectro de
inhibicin de un 80% de cepas patgenas (7).
8.1.2 Estudios farmacolgicos in vivo: La actividad antiinflamatoria de un extracto de etanolagua (1:1) fue demostrada en el modelo de induccin de edema en la pata de ratas, al ser
administrado por va oral a dosis de 0.375 mg/kg. Al mismo extracto se le evalu la actividad
diurtica en ratas por va intraperitoneal a dosis de 0.185 mg/kg, obtenindose resultados
positivos. Estudios de farmacolgia experimental demuestran que el extracto hidroalcohlico
de la corteza tiene actividad pero no tiene actividad analgsica, antimicrobiana,
anticonvulsivante, antiviral, antilevaduras (C. albicans y C. neoformans) e hipoglucemiante (3).
8.2
Las races, corteza y semillas de este rbol son venenosas. Las hojas tambin pueden ser
txicas para los humanos, a pesar de que en algunas partes del trpico, se utilizan para
consumo humano. Posiblemente el proceso de coccin anula la toxicidad (17).
8.2.1 Estudios de toxicidad aguda: Los extractos clorofrmicos y metanlicos demostraron
actividad contra las larvas de Artemia salina, con valores de LC50 de 777 y 465 ug/mL
respectivamente. Siendo el extracto metablico con mayor actividad se realiz la prueba de
toxicidad despus de 24 horas de incubacin contra las larvas de A. salina demostrando una
LC50 de 427 g/mL (23).
92
VII. REFERENCIAS
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
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93
Anexo 7.
I.
1.
Denominacin:
Sinnimos:
Nombres vulgares:
DESCRIPCIN BOTNICA
Es un rbol pequeo de hasta 6 m de alto, ramas delgadas, cafs. Hojas coriceas, pecolos 1.5
cm de largo, elptico-lanceoladas, 8 cm de largo, agudas en la base, lustrosas, glabras. Flores
axilares, pednculo simple, solitarias, 15 mm de largo, 5-11 flores; brcteas de involucro
deciduo; filamentos glabros (1).
III. DATOS AGROTECNOLGICOS
1.
Distribucin y habitat:
DROGA VEGETAL
1.
2.
3.
Obtencin: Se recolecta en los campos de crecimiento silvestre en regiones fras y
montaosas del Altiplano del pas. Florea de febrero a junio, las hojas y flores se colectan
hacia finales de la floracin y se secan a la sombra (4).
94
4.
5.
6.
Composicin qumica: El tamizaje fitoqumico indica en las hojas la presencia de
alcaloides cuaternarios y no cuaternarios, saponinas, esteroles insaturados, cardenlidos,
bufadienlicos, flavonoides, leucoantocianinas, quercitina, estilbina, taraxon y aceite esencial
que contiene limoneno y citral (2). El aceite esencial contiene 1,8-cineol (26.8%), -terpineol
(14.5%) y linalool (10.8%) (5). Las hojas contienen carotenos (8,300 g) y riboflavina (0.85
g) (6).
7.
7.1. Identificacin:
7.1.1. Descripcin macroscpica: No refiere
7.1.2. Descripcin microscpica: No refiere
7.1.3. Caractersticas organolpticas: No refiere
7.2.
Ensayos:
8.1
Datos Farmacolgicos
95
8.2
5.
6.
7.
8.
Standley, P.C. & Steyermark, J. (1946) Flora of Guatemala. Fieldiana: Botany 24(6), p. 493.
Cceres, A. (1996) Plantas de Uso Medicinal. Primera Edicin. Editorial Universitaria. p.239.
Cceres, A. (2006) Vademcum Nacional de Plantas Medicinales. Editorial Universitaria, Guatemala, p.
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Centro Mesoamericano de Estudios sobre Tecnologa Apropiada (CEMAT) y Laboratorio y Droguera de
Productos Fitofarmacuticos FARMAYA, S.A. 1990. Fichas Populares sobre Plantas Medicinales. Segunda
Edicin. Guatemala. p. 98.
Vallverd, C., Villa, R., Cruz, S.M., Cceres, A. & Caigueral, S. (2005) Composition of the essential oil
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Duke, J.A. & Atchley, A.A. (1986) Handbook of Proximate Analysis Tables of Higher Plants. Boca Raton,
CRC Press, pp. 99 (389 p)
Departamento de Control de Calidad; Laboratorio de Productos Fitoteraputicos, Farmaya, S.A. (2007)
Certificados de Control de Calidad de Materia Prima Vegetal. Guatemala.
Ministerio de Economa (1989). Comisin Guatemalteca de Normas. Productos Fitoteraputicos. Pericn
desecado para t o infusin. Propuesta COGUANOR NGO 6 074:89
96
Anexo 8.
I.
1.
2.
Sinnimos:
Nombres vulgares:
DESCRIPCIN BOTNICA
rbol de 20-40 m de alto, con abundante resina lechosa. Hojas siempre verdes, agrupadas en
rosetas al final de las ramas, verde oscuro, lisas, lanceoladas, brillantes, de 12 cm de largo y 4
cm de ancho. Flores solitarias, pequeas, blancas parcialmente encerradas en un cliz caf
verdoso. Frutas ovales o redondas, hasta 10 cm de ancho, cscara delgada con una costra caf,
gomosa y astringente cuando tierna; al madurar es jugosa, amarillenta, ms o menos granulosa
y dulce. Semillas agrupadas en el centro, 2.5 cm de largo, duras, brillantes, planas, ovales,
negras, con un gancho blanco en un extremo (2).
III. DATOS AGROTECNOLGICOS
1.
Distribucin y hbitat:
Nativo del sur de Mxico y Amrica Central. Introducido a las Antillas, sur de la Florida, las
Filipinas y a todos los pases tropicales de Asia y frica. En Guatemala se cultiva hasta los
1,200 msnm en Petn, Alta Verapaz, Baja Verapaz, Suchitepquez y Retalhuleu (3).
IV.
de frutas verdes y hojas se usa para tratar diarrea y disentera, inflamacin intestinal e
inapetencia (3).
V.
DROGA VEGETAL
1.
2.
3.
Obtencin: La cosecha se realiza manualmente, recolectando los frutos cuando han
alcanzado su madurez fisiolgica en el rbol. La fruta no debe ser expuesta al sol o a la lluvia
(5)
.
4.
5.
6.
Composicin qumica: La corteza contiene bastante cantidad de taninos, malato de
potasio y cal, sustancia roja, goma, fosfatos de calcio, magnesio y hierro, sulfatos y cloruros
de potasio, una sustancia semejante a la zaponina: la patina y adems de una abundante
cantidad de una sustancia semejante a la goma elstica. Las semillas contienen, adems, una
sustancia resinosa y una materia grasa (3).
El principal producto es el ltex. El chicle contiene resina, goma elstica, azcar, goma,
almidn, materia colorante y sales (6). La zapotina es un alcaloide antitrmico o sudorfico, por
lo que es til en las enfermedades con fiebre: paludismo, fiebre tifoidea y viruela entre otros,
especialmente si al cocimiento se le agrega una pequea cantidad de alcohol que aumenta su
actividad, pues favorece la disolucin de la zapotina (2).
7.
7.1. Identificacin:
7.1.1 Descripcin macroscpica: Fruto redondo de color caf claro. Sus hojas son verde
oscuro brillante por la parte de encima por la parte de abajo, verde opaco, la forma de la hoja
es lanceolada, flores solitarias en las axilas de las hojas (6-8).
7.1.2 Descripcin microscpica: No refiere.
7.1.3 Caractersticas organolpticas: Fruto globoso, de 5-7 cm de dimetro, de color moreno
oscuro, con 4 5 semillas deprimidas, negras y brillantes. Pulpa de sabor dulce; de olor
agradable (6-8).
7.2 Ensayos:
7.2.6 Caractersticas fisicoqumicas:
Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10%.
Partes de otras plantas: No debe presentar.
Insectos o larvas: No debe presentar.
Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10% (9).
Cenizas totales: Por incineracin en mufla a 700-750C, no debe pasar el 9% (9).
98
8.1
Datos farmacolgicos
REFERENCIAS
Standley, P.C. & Williams, L. (1961) Flora of Guatemala. Fieldana: Botany 24, 223.
Cabrera, L. (1958) Plantas Curativas de Mxico. Editorial Ciencias Mdicas. Mxico. p. 384.
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24.
Martnez, M. (1959) Plantas tiles de la Flora Mexicana. Ediciones Botas, Mxico, p. 621.
Lanza Rosado, F. (1996) Manual de rboles de Tikal, Direccin General de Instituto de Cooperacin
Iberoamericana, Alicante, p. 121.
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Mxico, p. 266.
Departamento de Control de Calidad; Laboratorio de Productos Fitoteraputicos Farmaya, S.A. (2007)
Certificados de Control de Calidad de Materia Prima Vegetal. Guatemala.
99
Anexo 9.
2.
Sinnimos:
Nombres vulgares:
DESCRIPCIN BOTNICA
Arbusto herbceo de 2.5-5 m de alto con tallos gruesos. Hojas alternas enteras. Limbos
cartceos con puntos traslcidos, de elptico aovados a aovados, de 15-50 cm de largo y de 831 cm de ancho, de agudos a acuminados en el pice, inequilteros y profunda-mente
acorazonados en la base, con las venas pennadas, hasta ms all del medio, ms o menos
pubescente en la cara superior con pelos cortos, la pubescencia es especialmente conspicua a
lo largo del margen de las hojas jvenes; pubescentes debajo especialmente en las venas o a
veces aterciopeladas. Flores en espigas delgadas, opuestas a las hojas y ms cortas que estas;
pednculos comnmente ms cortos que los alados pecolos. Estambres de 2 a 6; filamentos
cortos; anteras 2-loculares. Ovario sesil; estigmas de 2 a 5. Fruto pequeo subgloboso (1,2).
III.
DATOS AGROTECNOLGICOS
1. Distribucin y hbitat:
Es la especie ms dispersada del gnero, se encuentra casi en todas las bajas tierras a lo largo
de Amrica Central (2). Es Nativa del sureste de Mxico y Colombia, cultivada y naturalizada
en Cuba y sureste de Florida (3). Crece en macizos aislados, en los sitios frescos y frtiles,
desde la orilla del mar hasta una altitud de 1.200 m. Es silvestre desde Mxico hasta
Colombia, y a menudo se le encuentre en patios, jardines y en sitios sombreados y hmedos,
en la Amrica Central y Colombia (4).
IV.
Hojas: Las hojas frescas aplicadas en la frente se emplean para aliviar el dolor de cabeza,
puestas sobre heridas, evitan la inflamacin (4). En Cuba las hojas de esta planta se usan como
emoliente. En Mxico las usan para sazonar los tamales y en Costa Rica las aplican frescas a
la frente para aliviar el dolor de cabeza. Se le atribuyen propiedades diaforticas, diurticas y
estimulantes; empleada en el tratamiento de anginas, erisipelas, fiebres, gota y reumatismo; las
hojas soasadas so aplicadas a las llagas (1).
Se usa para curar lceras en la boca, irritacin de la piel, dolor abdominal, indigestin, diarrea,
dolor de cabeza y problemas urinarios (5). En Mxico, la infusin de la mitad de una hoja
puede ser tomada despus de las comidas como estomquico. La decoccin de la hoja se ha
100
DROGA VEGETAL
1.
2.
3.
Obtencin: No refiere.
4.
5.
6.
Composicin qumica: La hoja contiene aceite esencial: safrol (70-85% del aceite
esencial), elemicina, eugenol y miristicina, borneol, acetato de borneol, -cadineno, canfeno,
acadina-1-4-dieno, -bisaboleno, -borboneno, cariofileno; diterpenos, tranfitol; fenlicos:
aurantiamida I y II; esteroides: -sitosterol; bencenoides: cido piperoico; flavonoides
derivado de flavona; alcanos n-hexadecano, nonan-2-ona; heterociclos oxigenados: cido
piperocromanoico y piperocromenoico. La planta entera contiene alcaloides: aporfina, aceite
esencial (0.47-0.58%): cefaradiona A y B (3). 1,8 cineol, cido benzoico, linalool, mireceno,
miristicina, safrol, -pineno, -pineno, cariofileno (9).
7. Monografa de control de calidad:
7.1
Identificacin:
Ensayos:
Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10% (10).
Cenizas totales: Por incineracin en mufla a 700-750C, no debe pasar el 9% (10).
REFERENCIAS
Roig, J.T. (1988) Plantas Medicinales Aromticas o Venenosas de Cuba. Editorial Cientfico-tcnica La
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Morton, J. (1981) Atlas of Medicinal Plants of Middle America. Charles C. Thomas Publisher. Springfield.
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Costa Rica. CATIE, Costa Ria. p.117
House, P.R. Torres, C., Lagos-Witte, S., Meja, T., Ochoa, L. & Rivas, M. (1995) Plantas Medicinales
Comunes de Honduras. Litografa Lpez S. de R.L., Tegucigalpa, p. 353.
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Spices. CRC Press, Boca Raton, p. 251-253.
102
Anexo 10.
2.
Sinnimos:
Nombres vulgares:
DESCRIPCIN BOTNICA
Es de 0.5-3 m de alto; tallo piloso. Hojas en pares o solitarias de diferentes tamaos, forma
similar, enteras o dentadas, lanceoladas, 3-18 cm. de largo, pice acuminado, base atenuada.
Peciolo 5-35 mm de largo; inflorescencia internodal, racemiforme; pednculos 1-3 cm. de
largo; cliz 1-1.5 mm de largo, lobulado; corola blanca o lila, mancha obscura en la base;
filamentos ciliados; anteras 3-4 mm de largo; (3) 5 estambres que en conjunto forman un cono
de 2-3 mm de largo. Flor bisexual; cliz 5 lobulado, de 1 a 1.25 mm de largo, ligeramente
acrescente, deflexo, verde; ovario glabro. Fruto globoso, negro, en baya de 4-7 mm de
dimetro; semilla 1-1.5 mm de largo (3).
III. DATOS AGROTECNOLGICOS
1.
Distribucin y hbitat:
dan baos con el cocimiento de toda la planta. Tambin se emplea en heridas; en las cuales se
aplican cataplasmas con las hojas de esta planta. Para limpiar las heridas se hierven las ramas
y hojas o se usa toda la planta molida y se pone diariamente, hasta que cicatrice la herida (5).
En casos de reumatismo, se dan baos con el cocimiento de las ramas o frotaciones con la
extraccin alcohlica de las ramas. Contra la tos, se toma el cocimiento de toda la planta. Este
mismo en aplicacin tpica se emplea para alergias en la piel; aplicando como fomento se usa
en hinchazones o cuando hay calentura. Usado en baos de asiento sirve para tratar las
hemorroides, este mismo cocimiento se deja enfriar para baar al enfermo y bajarle la
calentura (5). Suele emplearse en trastornos digestivos como bilis, dolor de estmago,
estreimiento de bebes recin nacidos, para el hgado, en la inflamacin estomacal por alcohol
y en lceras estomacales (5).
Otros usos son para problemas de bronconeumona, catarro y pulmn; en inflamacin de
vientre y de rin; cuando hay calor del cuerpo; contra mordida de coyote, piquete de hormiga
o de insecto, tiricia y contra el susto. Se menciona su utilidad como cicatrizante, excitante,
tnico y vulnerario y para usarlo como enjuague de pelo (5). Se usa para bajar la calentura; se
hierve un rollo de la planta en agua y se baa al enfermo cuando el agua est fra (2). Por su
contenido de sales minerales es buen reconstituyente, por lo que se recomienda en el
tratamiento de anemia y debilidad del organismo (7).
Otros: Las hojas se comen en caldo o fritas con huevo; es una hierba que se consume en
grandes cantidades en Guatemala y es frecuente encontrarla en los mercados, se acostumbra
comerla en la convalecencia y recuperacin de diversas enfermedades (8).
V. DROGA VEGETAL
1.
2.
3.
Obtencin: No refiere.
4.
5.
7.1 Identificacin:
7.1.1 Descripcin macroscpica: No refiere.
7.1.2 Descripcin microscpica: No refiere.
7.1.3 Caractersticas organolpticas: No refiere
7.2 Ensayos:
7.2.1 Caractersticas fisicoqumicas:
Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
104
Cceres, A. (1996) Plantas de Uso Medicinal. Primera Edicin. Editorial Universitaria. p.239.
Martnez, M. (1992) Las Plantas Medicinales de Mxico, Ediciones Botas, Mxico, 656 pp.
Standley, P.C. & Williams, L. (1961) Flora of Guatemala. Fieldana: Botany 24(10), 105
105
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
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Subexplotados de Mesoamerica, Chile p155
Argueta, A., Cano Asseleih, L.M. & Rodarte, M.E. (1994) Atlas de Plantas de la Medicina Tradicional.
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106
Anexo 11.
I.
1.
2.
Sinnimos:
Spondias purpurea L. (1,3).
Spondias lutea L. (1).
Spondias rodlkoferi Donn. Smith (1).
Spondias brasiliensis Mart. (2).
Spondias myrobalanus L. (2).
Spondias aurantiaca Schum & Thonn (2).
Spondias axillaris Roxb (3).
Spondias cythera Tussac (3).
Spondias dubia A. Rich (3).
Spondias graveolens Macfadyen (3).
Spondias lucida Salisb (3).
Spondias nigrescens Pitt (3).
Spondias pseudomyrobaslanus Tussac (3).
Spondias radlkoferi J.D. Smith (3).
Spondias venulosa (Engler) Engler (3).
Spondias zansee G. Don (3).
3.
Nombres vulgares:
Hobo (Col., Ecu.). Jobo (Col., Ven.). Jobo de castilla, jobo colorado (Col.) (1,4). Jobo arisco (1),
jocote, jocote jobo, poc (quecch), jobo jocote, kinim (Petn) (7). Ubos, uvos, shungu, tobo de
la montaa (Per); tapereb caja, cajamirin (Bra.) (4). Ciruela, ciruela amarilla, ciruela
campechana, ciruelo, ciruelo de hueso grande, ciruelo rojo cimarrn, fondura, cua-puat, cuaspua (cora), maxpy, obo (mixe), catan (tepehua), cuauhxonat (nahua), scatan, shipa (totonaco),
abal, huh, kankan-aba (maya), abal, abal ak, abalil kaax, abal soots, juujub, kabal, kaan
abal, kaankan abal, kiinil, kinil abal, xkiinil, xokat (maya), knim, knim te (tenek) (5).
Acaja, acaj, ajuela, binbish-sheshon (phipibo). caja, caja mirin y tapereba (Bra.). Canyarana,
cansa boca, ciruela de cerdo, ciruela amarilla, ciruela del maraon, cancharana, hobo, jocote
(nahuatl). Rompe, ushum, uvo, xukoom y sheshon (arahuaca). Tronador, tsiyoroqui y
metsoqui (ashninka). Tapareba, ciruela agria, diji (ese eja) y lopo (piro, yine), sheson (shipibo
conibo), ubo, mope (6). Jocote de corroncha, jocote jobo, jobo (Sal.), ciruela amarilla (Mx.),
jocote jobo (Gua.), ciruela de monte, jocote, jocote jobo (Hon., Nic.), Hogplum (ingles) (8).
II.
DESCRIPCIN BOTNICA
107
Distribucin y hbitat:
Se encuentra distribuida desde Mxico hasta Brasil y Per, no pasa de 1500 msnm (1). Se
encuentra en bosques hmedos o lluviosos a menudo cerca de riachuelos, comunes en segundo
crecimiento, mas comnmente a 600 m o menos; desde el sureste de Mxico, hasta los
trpicos de Sur Amrica y del Viejo Mundo, probablemente introducido. En Guatemala se ha
descrito en Petn, Alta Verapaz, Izabal, Zacapa, Chiquimula, Huehuetenango, Quetzaltenango,
Suchitepquez, Retalhuleu y San Marcos (5).
Originaria de los trpicos americanos, habita en climas clido y semiclido, desde 0 hasta los
1500 msnm. Esta asociada a bosques tropicales caducifolio y perennifolio (5).
IV.
Hojas: En Veracruz se utilizan el frote de las hojas para tratar salpullido (10). El zumo de las
hojas frescas o el cocimiento cargado constituye un remedio domstico contra el sapillo o aftas
de los nios. Las hojas usadas externo o internamente, segn los casos, son tambin tiles
contra las fiebres biliosas, la constipacin del vientre, los dolores de estmago, las
constipaciones complicaciones consecuentes a los partos, y para varias enfermedades de los
ojos y la laringe (11). La infusin de las hojas se utiliza en el tratamiento de la diarrea, infeccin
vaginal, estomacal y dermatitis (4).
Corteza: Es utilizada para tratar la diarrea (12). En Puebla se utiliza el cocimiento de la corteza
para el dolor de estmago (10). Las hojas y corteza son astringentes muy poderosos. Los
Tikunas toman una decoccin de la corteza para aliviar el dolor y prevenir el sangrado
excesivo durante la menstruacin (13). La decoccin se refiere como anticonceptivo y en la
curacin de infecciones vaginales y estomacales (4). Es la parte ms empleada, se prepara
hervida se bebe como agua de uso durante tres das para el sarampin o dolor de estmago (5).
Para usarla como antisptico, la corteza se deja secar al sol junto con las hojas, esto se muele y
se le agrega agua hervida ms un poco de sal de mar y con la ayuda de un pao se ponen gotas
en los ojos o se aplica en las heridas. Para la dentadura se mastica la corteza, se hacen buches,
despus la saliva se escupe. Para el ombligo salido la forma de uso es la siguiente: se marca el
pie de un beb en el tallo del ciruelo al nacer el sol, as cuando la planta encarna el ombligo
se mete; y se coloca sobre el ombligo un poco de resina de la misma planta y se aprieta con
fajerito. La corteza seca y pulverizada, se pone sobre la mordedura de la serpiente (5).
Frutos: Tienen propiedades balsmicas, por ello se dice que son calientes (14). En Veracruz se
maceran los frutos y luego se aplican sobre la piel para tratar inflamaciones (10,15). En medicina
tradicional, se utiliza en el tratamiento de erisipelas e hinchazones y como antiespasmdico y
oftlmico; ingeridos en grandes cantidades, son vmitos (4). En Morelos se utiliza el
cocimiento del fruto y las semillas para la diarrea (10). En Cuba se utilizan los frutos como
emticos o emetocatrticos, tomados en gran cantidad. El macerado de la pulpa de los frutos
es til contra ascitis y uretritis (11).
Flores: Son aromticas y cuyo macerado, adems de refrigerante, es reconocidamente
ventajoso para combatir las diarreas de la primera infancia (11).
Toda la planta: Los cogollos de los pices de las ramas de estos rboles del trpico y
subtrpico, se comen crudos, con o sin sal; se dice que contrarrestan la anemia (16).
108
DROGA VEGETAL
1.
2.
3.
Obtencin: Produce flor durante la estacin seca, especialmente en agosto y septiembre
en la regin de Manaus; el fruto esta maduro entre diciembre y febrero, aunque se encuentra
algunos frutos maduros en cualquier poca del ao (9). La fruta se cosecha cuando madura en
el rbol, se toma suave y el color cambia de verde hacia un tono amarillento. La fruta puede
ser cosechada cuando est todava dura y verde, logrando un buen sabor en el proceso de
maduracin. Sin embargo, el mejor sabor se obtiene cuando est madura en el rbol. Se
cosecha a mano o se colectan las frutas cadas.
4.
5.
6.
Composicin qumica: En las hojas y tallos se han identificado los compuestos
fenilicos cido clorognico, geranin, galoill-geranin y se detectaron saponinas presentes en las
hojas (15).
7.
7.1
Identificacin:
Ensayos:
8.1
Datos farmacolgicos
8.2.1 Estudios de toxicidad aguda: Se calcul el valor de la dosis letal media de un extracto
acuoso de hojas, evaluado en ratones hebras, por la va intraperitoneal, que fue de 1.863 g/kg.
Extractos acuosos de las hojas, evaluados en ratones por la va intraperitoneal y en cobayos
110
por la va intragstrica, presentaron un efecto abortivo a las dosis de 750 mg/kg en el primero
y 20 ml/animal de los extractos para el segundo. Martnez indica que puede llegar a ser daina
la especie si se consume en exceso (5).
VI.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
REFERENCIAS
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90.
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Ethnopharmacology 103, 166-175.
111
Anexo 12.
I.
1.
2.
Sinnimos:
Nombres vulgares:
DESCRIPCIN BOTNICA
Distribucin y hbitat:
DROGA VEGETAL
1.
2.
3.
Obtencin: Se recomienda realizar la cosecha en poca de plena floracin, en la que se
ha comprobado que se obtiene el mayor contenido de aceite esencial y otros componentes
qumicos de inters (3).
4.
Descripcin macroscpica: De acuerdo a la taxonoma de la planta: hierba perenne,
glabra, hojas ssiles, oblongo lanceoladas con margen dentado (7).
5.
Descripcin microscpica de la droga: La estructura microscpica de las hojas
muestra hojas enteras o fragmentos hojas aserradas, con caras superior e inferior que presentan
numerosas glndulas de color amarillo brillante y clulas de parnquima. Las flores enteras o
fragmentos de flores, color amarillo naranja ligulado, presentando un cliz con numerosas
glndulas, un ovario unilocular o uniovular sostenido por papus membranoso y otro
filamentoso. Presentan numerosos grnulos de poln equinados (7).
6.
Composicin qumica: Las hojas y flores contienen: aceite esencial (limoneno, 16.5%;
-ocimeno, 14%; -cariofileno, 28%; mirceno, 4-5%, alilanisol, esdragol, ter metilico de
eugenol, tagedona, dihidrotagetona, tetrahidrotagetona, inalol), alcaloides cuaternarios,
flavoloides (quercetagetina, patuletina), saponinas, taninos, leucoantocia-nias, acido galico,
poliacetilenos, gliccidos cianogenicos, cumarinas, derivados de tiofeno, pliacetilenos,
goma, dextrina, grasas, pectina, tres resinas aciditas, taninos y sales minerales (4,6). Contiene
alcaloides, las hojas y tallos mostraron depresin en el sistema nervioso central y poca
actividad hipotensora (4,6). Tambin presenta otras aceites esenciales como Estragole
fenilpropanoide, adems de flavonoides (patuletin-3-arabinosil-galactosido, quercetagetin-3O-arabinosil-galactosido, rhamnetina, Iso: 3-oarabinosil-galactosido y rhamnetina, Iso: 7-O-D-glucosido) (8).
7.
Monografa de control de calidad: El producto debe estar constituido por las flores y
hojas desecadas enteras, molidas en forma gruesa o picadas en forma fina. Debe proceder de
materia prima que no est alterada, adulterada o contaminada. No debe contener insectos en
cualquiera de sus formas de desarrollo ni otras impurezas que denoten un deficiente estado
higinico sanitario (7).
113
7.1. Identificacin:
7.1.1 Descripcin macroscpica: Color: hojas verdes y flores amarillas. Olor: dulce,
agradable, suave (9).
7.1.2 Descripcin microscpica: No refiere.
7.1.3 Caractersticas organolpticas: Olor: aromtico fuerte a ans; Sabor: aromtico, algo
picante; aspecto: hojas y flores enteras, polvo grueso o partculas grandes (7).
7.2 Ensayos:
7.2.5 Caractersticas fisicoqumicas:
Materia extraa: No debe contener ms del 10%.
rganos ennegrecidos o deteriorados: No debe contener ms del 10%.
Partes de otras plantas: No debe presentar.
Insectos o larvas: No debe presentar.
Partculas de tierra, arena, piedras y otra materia extraa: No debe presentar.
Humedad: Por mtodo gravimtrico cuando la materia seca vegetal contiene sustancias
voltiles: No debe contener ms del 10% (14).
Cenizas totales: Por incineracin en mufla a 700-750C, no debe pasar el 9% (10).
7.2.6 Anlisis microbiolgico: El producto en cualquiera de sus presentaciones no contendr
microorganismos patgenos o sus toxinas.
Coliformes totales: Menor al 104 NMP de coliformes totales.
Coliformes fecales: Menor al 103 NMP de coliformes fecales.
Escherichia coli: Menor al 102 NMP de E. coli.
Recuento de mohos y levaduras: Mximo 1x104 UFC/mL. (10).
7.2.7 Contaminantes qumicos o biolgicos: El producto no deber contener contaminantes
qumicos o biolgicos en cantidades que sobrepasen los lmites mximos aceptados por la
unidad sanitaria respectiva (10).
8.
8.2.1 Toxicidad aguda: La infusin no es txica hasta 50 g/Kg (6). Popularmente se le atribuye
propiedad abortiva. La DL50 de los extractos con actividad espasmoltica por va oral es mayor
a 100 mg/Kg de peso. El extracto alcohlico provoca en algunas personas sntomas
cardiovasculares. El -tertienilo puede ser fototxico en presencia de la luz ultravioleta
cercana y producir una fotodermatitis por un mecanismo que no depende de la peroxidacin
lipdica de membrana (4).
VI. REFERENCIAS:
1.
2.
115
Cav. en
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
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116
Nombre
comn
Parte
utilizada
Annona cherimolla
Anona
Fruto
Annona purpurea
Anona
Fruto
Annona reticulata
Anona
Fruto
Chamaedorea
tepejilote
Pacaya
Inflorescencia
Cucurbita pepo
Gicoy
Fruto
Lippia graveolens
Organo
Hojas
Neurolaena lobata
Tres Puntas
Hojas
Ocimum micranthum
Albahaca de
Monte
Hojas
Phlebodium
pseudoaureum
Calahuala
Hojas
Pimenta dioica
Pimienta
gorda
Fruto
Smilax domingensis
Zarzaparrilla
Hojas
Yucca elephantipes
Izote
Inflorescencia
Coordenadas
geogrficas
Nmero de
Herbario*
Lat. 1436'9.72'' N
Long. 9040'12.47'' O
1013
Procedencia
San Bartolom
Milpas Altas
Sacatepquez
Samayac,
Suchitepquez
Asuncin Mita,
Jutiapa
Salam, Baja
Verapaz
San Juan,
Sacatepquez
Samayac,
Suchitepquez
Samayac,
Suchitepquez
Samayac,
Suchitepquez
San Jos
Pinula,
Guatemala
Salam, Baja
Verapaz
Samayac,
Suchitepquez
San Juan,
Sacatepquez
Lat. 1433'49.3'' N
Long. 9127'28.2'' WO
Lat. 1419'58'' N
Long. 8942'34'' WO
Lat. 1506'05'' N
Long. 9019'7'' O
Lat. 1443'09'' N
Long. 9038'25'' O
Lat. 1433'05'' N
Long. 9128'15'' WO
Lat. 1433'37'' N
Long. 9128'17'' WO
Lat. 1433'07'' N
Long. 9127'14'' WO
1047
Lat. 1432'41.5'' N
Long. 9024'47.4'' O
1039
Lat. 1506'10'' N
Long. 9019'30'' O
Lat. 1433'37'' N
Long. 9128'15'' WO
Lat. 1443'14.1'' N
Long. 9038'34.53'' O
117
1052
1051
1045
1083
482
723
1050
662
1046
Annona cherimolla
Lippia graveolens
Neurolaena lobata
Chamaedorea tepejilote
Annona purpurea
Pimenta dioica
Phlebodium pseudoaureum
Yucca elephantipes
118
Annona reticulata
Ocimum micranthum
Smilax domingensis
Cucurbita pepo
Humedad
(%)1
N/A
N/A
N/A
7.93
N/A
5.45
5.87
8.43
6.25
7.35
8.50
6.75
Cenizas
totales (%)2
N/A
N/A
N/A
3.56
N/A
4.46
3.76
4.86
3.40
4.30
4.45
4.78
* Fuente: Datos Experimentales 1 Valores aceptables de humedad: <10 %. N/A: no aplica 2 Valores aceptables de cenizas totales: < 5 %.
119
Flavonoides y
Antocianinas
(CCF)
Taninos
(Ensayo
Macromtrico)
Aceites
voltiles
(CCF)
Cumarinas
(CCF)
Tamizaje Fitoqumico
Actividad
antioxidante
por TLC
Intensidad
Smilax domingensis
+++
Pimenta dioica
++
Phlebodium pseudoaureum
++
Ocimum micranthum
Lippia graveolens
Neurolaena lobata
Yucca elephantipes
Chamaedorea tepejilote
Annona reticulata
Annona cherimolla
Annona purpurea
Cucurbita pepo
Ensayo
micromtrico
g Eq. de cido
glico/g de
extracto seco
184.2921
0.4170
75.8995
0.1572
74.2898
0.6542
33.8389
0.0685
28.5436
0.0342
28.1131
0.0785
15.5431
0.1031
13.4067
0.0836
11.0933
0.3737
9.3812 1.7969
7.5726 0.6534
4.3455 1.6820
Promedio +
Promedio +
desviacin
desviacin
estndar
estndar
Valor de p:=1.40 E-17
120
Ensayo
micromtrico
mg de extracto
seco
mg de extracto
seco
0.0158
0.0085 0.0005
0.0001
0.0160
0.0158 0.0003
0.0001
0.0516
0.0406 0.0021
0.0004
0.1253
0.1213 0.0028
0.0022
0.1369
0.1277 0.0036
0.0011
0.2679
0.1615 0.0154
0.0083
1.0005
1.0332 0.0104
0.0260
1.1553
1.1620 0.0190
0.0194
2.2261
2.1333 0.0203
0.0248
4.8637
4.4265 0.1774
0.1847
5.0862
5.0881 0.2925
0.2924
7.5350
7.5351 0.2335
0.2335
Promedio +
Promedio +
desviacin
desviacin
estndar
estndar
Valor de p= 8.26 E-9
TDAC (macromtrico) en mg de extracto seco necesario para inhibir 50 % del reactivo de DPPH.
Grfica 3: Especies con mayor actividad
Grfica 4: Especies con menor actividad
TDAC (micromtrico) en mg de extracto seco necesario para inhibir 50% del Reactivo de DPPH.
Grfica 5: Especies con mayor actividad
Grfica 6: Especies con menor actividad
Vo.Bo. __________________________
Dr. Oscar Cobar Pinto, Decano
Representante Legal Institucin
121
V.1
INFORME FINANCIERO
122