EVALUACION DEL ESTADO

INMUNOLOGICO
Introduccin
Para determinar las causas de las fallas o alteraciones inmunolgicas disponemos de
numerosas tcnicas de laboratorio. Tambin por medio de pruebas de biologa molecular
se puede evaluar en mayor detalle el funcionamiento de una clula, de un sistema o
determinar anormalidades en un mecanismo especfico.

Evaluacin de la inmunidad innata

Las respuestas a la quimiotaxis, la fagocitosis, la inflamacin, la funcin de los NKs, y el
sistema del complemento pueden ser analizados de forma independiente.

Evaluacin de la quimiotaxis
La movilizacin de las clulas PMNs hacia los focos de inflamacin es de gran
importancia en la defensa del husped contra la infeccin puesto que tienen la
capacidad de ingerir y destruir partculas extraas. El movimiento puede ser
espontneo en ausencia de estmulos o dirigido hacia un gradiente de concentracin
de productos qumicos (factores quimiotcticos), originados en el foco inflamatorio
(quimiotaxis).
Con el empleo de la cmara de Boyden se mide la magnitud de migracin de PMNs
frente a un estmulo quimiotactico
Las cmaras aisladas por filtros son herramientas adecuadas para determinar con
exactitud el comportamiento de quimiotaxis.
Las clulas mviles se colocan en la cmara superior, mientras que con la sustancia de
ensayo disuelta se llena la primera cmara inferior. El tamao de las clulas mviles
que son investigadas determinan el tamao del poro del filtro, y esto es esencial para
elegir un dimetro que permite una transmigracin activa.
Una de las patologas que afectan la quimiotaxis es el sndrome de ChdiakHigashi
donde las gigantes vesculas intracelulares inhiben la normal migracin de las clulas
La quimiotaxis se encuentra aumentada en la psoriasis, artritis y disminuida en la
esclerosis mltiple
Prueba de la agarosa
Sobre una capa de agarosa se perforan 3 orificios equidistantes uno del otro. En el
central se deposita suspensin de clulas del paciente y en los laterales sustancias
quimioatractantes y buffer control. La distancia de migracin de clulas hacia el pozo
que contiene la sustancia quimioatractante
es comparada con la distancia de
migracin de clulas haca con el buffer control

Ventajas

La medida de la quimiotaxis bajo agarosa tambin ofrece varias ventajas en

comparacin con la cmara de Boyden; es ms rpida, fcil de cuantificar, requiere de
pequeas cantidades de sangre y se utiliza equipo desechable.
Adems est libre de las irregularidades que se encuentran utilizando niveles de
lquido desiguales en dos cmaras o las variaciones de serie de los filtros.

Ventana cutnea de Rebuck

Es una prueba que permite establecer si la llegada de PMNs y Macrfagos ocurre en
cantidad y frecuencia adecuada.

Evaluacin dela fagocitosis

Es necesario cuantificar el nmero de PMNs y Macrfagos, as como su funcionalidad.
Las neutropenias pueden ser producidas por granulocitopenia severa congnita, neutropenia
cclica, se produce una eosinofilia en infecciones parasitarias

Recuento de glbulos blancos y formula leucocitaria

Pueden orientar hacia posibles deficiencias, permite detectar agranulocitosis,
leucopenias. La presencia de un adecuado nmero de neutrfilos no garantizan que
estos cumplan su funcin de defensa, existen varias tcnicas para detectar el ndice
de fagocitosis.

Quimioluminiscencia
Fundamento:
Dos compuestos qumicos reaccionan para formar un intermediario en estado excitado
(alta energa), que se des-excita liberando parte de su energa como fotones de luz
para alcanzar su estado fundamental.
Los neutrfilos emiten pequeas cantidades de radiacin electromagntica despus
de la ingestin de microorganismos. Cuando estos grupos regresan a su estado basal
emiten energa lumnica y se cuantifican en el laboratorio.

Evaluacin de la inflamacin
Eritrosedimentacion
Consiste en medir la velocidad con la que sedimentan (decantan, caen) los glbulos
rojos o eritrocitos de la sangre, provenientes de una muestra de plasma sanguneo
(tratado con solucin de citrato o con EDTA), en un periodo determinado de tiempo.
Es un ndice inespecfico, sobre la existencia de inflamacin que no orienta ni sobre la
localizacin o causa. Un valor normal descarta una infeccin bacteriana

Dosificacin de protena C reactiva

Es una prueba inespecfica de inflamacin. Mide la concentracin de protena C
reactiva en suero que es producida en el suero y cuyos niveles se incrementan durante
episodios de inflamacin aguda
Fundamento

El mtodo se fundamenta en una reaccin de aglutinacin de una suspensin de

partculas de ltex poliestireno sensibilizadas con anticuerpos altamente purificados de
anti-protena C-reactiva. La aglutinacin es visible a una concentracin de PCR en
suero igual o superior a 6 mg/L
La protena C reactiva suele estar elevada en el lupus eritematoso y en la artitis
reumatoidea

Prueba de liberacin de la histamina

Se evalan por las tcnicas de Osler y Campbell que mide la degranulacin de
basfilos.
Esta prueba cuantifica y analiza cuanto se eleva la histamina ante el estmulo de un
alergeno

Dosificacin de factores del complemento

Las acciones anafilotxicas, quimiotxicas y opsonizantes del complemento lo
convierten en un factor fundamental en la potenciacin de la inflamacin, fenmeno
bsico en la defensa frente a la infeccin.
Es un buen sistema de evaluar un proceso inflamatorio, especialmente, si l es
producido por complejos inmunes. Su dosificacin se hace por inmunodifusin radial.
En condiciones normales, se pueden detectar inmunocomplejos solubles circulando en
sangre. Estos inmunocomplejos son potencialmente peligrosos, pues de precipitar en
algn tejido activaran el complemento e iniciaran un foco inflamatorio. No obstante,
existe un mecanismo fisiolgico de aclaramiento de inmunocomplejos. Los eritrocitos,
las clulas ms abundantes de la sangre, presentan CR1 en su membrana y mediante
este receptor captan inmunocomplejos circulantes a travs del factor C3b. Cuando los
hemates atraviesan el hgado o el bazo, los macrfagos de estos rganos, mediante
sus receptores CR1, CR3 o CR4, unen los inmunocomplejos a travs de C3b (o
mediante receptores para Fc a travs de IgG) y los fagocitan. Los eritrocitos quedan
libres para captar nuevos inmunocomplejos.
Niveles bajos de C3 se presentan en enfermedades como LES, algunas vasculitis y
glomerulonefritis (como la GNF post estreptoccica, hipercatabolismo, necrosis masiva
de tejido, sepsis y viremia.
C4 Puede estar disminuido en enfermedad por complejos inmunes como nefritis lpica,
en glomerulonefritis aguda, edema angioneurtico hereditario o cuando la va clsica
del complemento se activa

Evaluacin de clulas NKs

Para cuantificar las NKs se pueden separar de otras clulas mononucleares de sangre
perifrica por gradientes de Ficoll Hipaque y por medio de Acs monoclonales CD16,
CD56, CD57.
La tcnica de Ficoll hypaque es una tcnica de centrifugacin por gradiente de
densidad para separar Clulas Mononucleares de Sangre Perifrica (CMSP) de otras
clulas de la sangre. Durante la centrifugacion se van formando varias capas, el

sedimento que est formado principalmente por granulocitos y eritrocitos ha migrado a

travs de la gradiente de densidad que es mayor al del ficoll hypaque, encima estara
otra capa que sera el ficoll hypaque que es menos denso, y encima estara otra capa
fina opalescente que seran las CMSP, finalmente sobre esa capa estara las plaquetas
y el plasma que con futuros lavados se estaran removiendo para tratar de obtener
solo los linfocitos.
En la diabetes mellitus tipo 2 los Nks se encuentran disminuidos

Evaluacin del sistema del complemento

Actividad hemoltica total
La investigacin de la actividad del complemento es importante en el diagnstico y
tratamiento de enfermedades tales como l LES y la artritis reumatoide.
Hasta el momento, el ensayo ms utilizado para el complemento total ha sido el
basado en la hemlisis mediada por complemento de hemates sensibilizados con
anticuerpos. En este mtodo, se necesitan diluciones apropiadas del suero para medir
las lisis de las clulas indicadoras.
CH50 hace referencia a la actividad del complemento que causa un 50% de hemolisis
en una suspensin de eritrocitos
Determinacin de la actividad hemoltica de la va clsica del sistema del
complemento (CH50): La hemolisis de eritrocitos de carnero mediada por anticuerpos
especficos de la clase IgM en presencia de complemento, fue utilizada como la prueba
de la actividad del complemento el suero humano.
Esta tcnica identifica una reduccin de la funcin pero no identifica qu componente
especfico de la va clsica est involucrado.
Determinacin de la actividad hemoltica de la va alterna del sistema del
complemento (AH50): La lisis de eritrocitos de conejo en presencia de complemento
humano se us para evaluar la actividad de la va alterna del sistema de complemento
en el suero humano.
Se ha desarrollado un mtodo sencillo que no requiere diluciones del suero, ni
eritrocitos.
Autokit CH50: Es un inmunoensayo, en el que se utiliza tecnologa de los liposomas
(vescula esfrica con una membrana compuesta de una doble capa de fosfolpidos)
para la determinacin del complemento total CH 50 en suero humano, se trata de una
tcnica homognea que puede ser completamente automatizada.
Principio: Cuando la muestra se mezcla con los liposomas y el sustrato, los
anticuerpos presentes en el reactivo se combinan con el Dinitrofenil (DNP) incorporado
a los liposomas (Ag). El complejo antgeno-anticuerpo activa el complemento presente
en la muestra del paciente. El complemento activado rompe la membrana de los
liposomas. La enzima G6PDH contenida en los liposomas, reacciona con el NAD y la
G6P presentes en el reactivo. Durante la reaccin enzimtica el NAD es reducido a
NADH, incrementndose la absorbancia a 340 nm.

El incremento de absorbancia es proporcional a la actividad total del complemento

(CH50) en la muestra.
Reaccin enzimtica:

G6PDH

D- glucosa-6-fosfato + NAD

-Gluconolactona-6-fosfato + NADH
Deteccin a 340
nm.

Dosificacin individual de factores

Las determinaciones de mas uso en la clnica se da en el estudio de enfermedades
autoinmunes y en monitoreo de rechazo de trasplantes son los factores ms
estudiados son C3 y C4.

Evaluacin de la inmunidad adquirida

Inmunidad Celular
Evaluacin de linfocitos

Extendido de sangre.-

Permite establecer la ausencia, disminucin o

incremento de Ls o alteraciones morfolgicas.
La presencia de un nmero normal de Ls no excluye un defecto funcional, pero su
ausencia o disminucin ponen en alerta sobre una inmunodeficiencia.

Recuento total de linfocitos.- Menos de 1000 mm3 indica deficiencia. Un

incremento indica infeccin o proliferacin maligna.

Estudio de subpoblaciones de Ls
Es necesario dar los sgtes pasos:
a) Separacin de linfocitos de las dems clulas sanguneas, por medio de
centrifugaciones por densidad diferencial, para lo cual se emplea concentraciones
variables de Ficoll Hypaque
b) Marcar las diferentes subpoblaciones con fluorocromos (rodamina,
fluorescena) por medio de Acs monoclonales contra las diferentes molculas CDs
que caracterizan distintas subpoblaciones de Ls.
c) Citometra de flujo; Tcnica de anlisis celular, se basa en pasar una suspensin
de clulas de una en una por delante de un haz de laser focalizado. El impacto de
cada clula con el rayo de luz produce seales que corresponden a diferentes
parmetros celulares y que son captados por distintos detectores. Estos convierten
dichas seales en electrnicas que son digitalizadas permiten cuantificar los Ls
El monitoreo de subpoblaciones linfocitarias en el sndrome de inmunodeficiencia
adquirida (SIDA), fundamentalmente la cuantificacin en sangre perifrica de las
clulas CD4+ y los linfocitos CD8+ aportan un valor diagnstico y pronstico en
esta patologa

Clasificacin del grado de desarrollo de Ls

Con Acs Mcs que reconozcan diferentes CDs presentes en membranas de Ls y Mos, se
puede determinar el grado de madurez de las clulas, es til para clasificacin de
leucemias implicaciones pronosticas y tratamiento que establecen el grado de
madurez de Ls.

 Estudio de Citoquinas
Existe un juego de reactivos comerciales que permiten detectar y cuantificar cada una
de las diferentes citosinas, como la Citometra de flujo

Inmunidad humoral
Se hacen acudiendo a diferentes mtodos. Unos cuantifican inmunoglobulinas, otras
evalan la reaccin Ag-Ac, otras sirven para detectar concentraciones bajas de
determinadas protenas.

Medicin de Inmunoglobulinas
Electroforesis.-

La electroforesis es una tcnica para la separacin de molculas segn la movilidad

de stas en un campo elctrico. La separacin puede realizarse sobre la superficie
hidratada de un soporte slido (p. ej., electroforesis en papel o en acetato de
celulosa), a travs de una matriz porosa (electroforesis en gel), o bien en disolucin
(electroforesis libre). Dependiendo de la tcnica que se use, la separacin obedece
en distinta medida a la carga elctrica de las molculas y a su masa.
Fundamento: Cuando una mezcla de molculas ionizadas y con carga neta son
colocadas en un campo elctrico, estas experimentan una fuerza de atraccin hacia
el polo que posee carga opuesta, las molculas cargadas (+) se desplazaran hacia
el ctodo (polo -) y aquellas cargadas (-) se desplazaran hacia el nodo (polo +).

Inmunoelectroforesis
La Inmunoelectroforesis es el nombre genrico que reciben un amplio nmero de
mtodos bioqumicos para la separacin y caracterizacin de protenas basadas en
la electroforesis y la reaccin con anticuerpos. Todas las variantes de la
Inmunoelectroforesis requieren inmunoglobulinas, anticuerpos que van a reaccionar
con las protenas que se desea separar o caracterizar.
Es una tcnica que pone en evidencia la falta de alguna clase de inmunoglobulina.
En la inmunodeficiencia variable comn se manifiesta por la falta de IgA e IgG

Dosificacin individual de Igs A, G, M

Puede indicar el tipo inmunodeficiencia de tipo humoral.
La cuantificacin de IgM contra Ags bacterianos sirve para determinar si hay una
infeccin aguda. Su presencia en el cordn umbilical denota que hubo una infeccin
en la vida intrauterina del feto.
La cuantificacin de los Ags de los virus de la hepatitis A y B permite en los
casos de ictericia, hacer el diagnstico diferencial entre la clases de hepatitis, el
estado de inmunidad y la fase de desarrollo o complicacin de la enfermedad.

Dosificacin de IgE
Esta Ig es citoflica, sus concentraciones plasmticas son pequeas y no
detectables por inmunodifusin radial es necesario acudir a la nefelometra

procedimiento que se basa en la dispersin de una radiacin que atraviesa las

partculas. Su diagnostico es importante en alergias

Evaluacin de las reacciones Antgeno- Anticuerpo

Las
reacciones antgeno anticuerpo defienden al organismo de los efectos
txicos o invasivos de antgenos, para entender lo que ocurre in vivo es
importante ver y saber lo que ocurre in vitro
Los mtodos in vitro permiten primero, buscar e identificar si hay o no un
anticuerpo y en segundo lugar cuantificarlo. Entre estos mtodos tenemos:
Reacciones de precipitacin
En este caso el antgeno es una molcula soluble y al ponerse una solucin del
mismo, en contacto con los anticuerpos que origin, se forman complejos Ag-Ac
que al insolubilizarse en su mayor parte, dan una reaccin de precipitacin. Esto se
da en 2 etapas, la primera se desarrolla rpidamente formndose los complejos
Ag-Ac, esta etapa est influenciada muy poco por la T, la concentracin de
electrolitos y la agitacin. En la segunda etapa los complejos se agregan formando
micelas o redes que al alcanzar determinado tamao precipita. Esto se acelera con
aumento de la T y concentracin de electrolito (Esta es mucho ms lenta)

Inmunodifusion doble (ouchterlony)

La inmunodifusin doble de Ouchterlony (Prueba cualitativa) es un mtodo
inmunolgico sencillo y rutinariamente usado en el laboratorio clnico para la
deteccin de antgenos o anticuerpos en una muestra biolgica.
Consiste en colocar en una placa de Petri Agar 15% al cual se le realizan
perforaciones en forma de pocillos. Se coloca un extracto de clulas humanas
(cctel de Ags Humanos) naturales en el pocillo del centro. El suero del paciente es
colocado en una de los pocillos exteriores y luego se deja por 48 Horas para su
revelado
Durante este tiempo, los antgenos y los anticuerpos en el pocillo del suero
migrarn de manera radial hacia afuera de sus respectivos pocillos.
Al encontrarse ambos a mitad de camino y de haber Acs contra los Ags se unirn
en una red de enlaces llamados complejos inmune, el cual precipita en el gel
revelando una lnea blanquecina.
Esta tcnica se utiliza para detectar anticuerpos que se unen a antgenos fngicos
por
ejemplo
especies
de
histoplasma,
especies
de
blastomicosis,
coccidioidomicosis.

Inmunodifusin radial simple

La inmunodifusin radial (IDR) es una tcnica que puede determinar
cuantitativamente la concentracin de un antgeno. Es una tcnica sensible que es
usada clnicamente para detectar niveles de protenas plasmticas

Este mtodo fue utilizado de manera sistemtica en inmunologa clnica:

Determinaciones de inmunoglobulina. Protena C reactiva. Protena embrionaria
(-feto protena) se asocia con ciertos tumores hepticos.

Reacciones Aglutinacin
Pruebas de aglutinacin: Se basan en la unin de antgenos particulados a los
anticuerpos, preferentemente de clase IgM. Suele tratarse de pruebas muy
sensibles pero con poca especificidad.
Esta prueba es til para el diagnstico de tifo exantemtico, fiebre tifoidea,
igualmente lo es en la clasificacin de grupos sanguneos del sistema ABO.

Prueba de Coombs
La prueba de Coombs (tambin conocida como prueba de antiglobulina) es un
examen de sangre que se usa en inmunologa y hematologa. Este anlisis puede
detectar la presencia de anticuerpos en suero que reaccionan con antgenos en la
superficie de los glbulos rojos
Existen 2 variantes de esta prueba:
Prueba de Coombs directa: cuando la anti globulina humana se emplea
para detectar anticuerpos unidos a eritrocitos in vivo
Fundamento: investigar anticuerpos anti-Rh
que se encuentran
recubriendo los eritrocitos del recin nacido.
En casos de eritroblastosis fetal, anemia
hemoltica
y reacciones
hemolticas por transfusin puede haberse efectuado el recubrimiento in
vivo del eritrocito.
Se utiliza
para
investigacin de enfermedades autoinmunes
que
involucran la unin de inmunoglobulinas y/o fracciones del complemento a
los glbulos rojos, tambin en investigacin de reacciones dudosas en una
transfusin

Prueba de Coombs indirecta: cuando la anti globulina humana se usa

para reconocer la reaccin de anticuerpos y antgenos in vitro despus de
una apropiada fase de incubacin
Esta prueba permite la identificacin de anticuerpos irregulares en suero
problema se utiliza para la determinacin del fenotipo de los glbulos rojos
y es parte de las pruebas cruzadas

Aplicacin en deteccin de AHRN, en mujeres embarazadas Rh-, Esta prueba se

utiliza para las pruebas de compatibilidad previas a la transfusin, identificacin
de fenotipos de glbulos rojos,

Hemaglutinacin
Estas pruebas se basan en la capacidad de algunos patgenos (p.ej. el virus de la
influenza) para causar la aglutinacin de los eritrocitos. Pueden utilizarse para
detectar el patgeno (pruebas de hemaglutinacin) o los anticuerpos dirigidos

contra las hemaglutininas del microorganismo (inhibicin de la hemaglutinacin).

Suelen ser pruebas especficas de serotipo o subtipo y bastante sensibles
Las pruebas de hemaglutinacin se utilizan con patgenos que poseen esta
capacidad, generalmente virus. El ejemplo ms clsico es el diagnstico de la
influenza.
Se utiliza esta prueba para la deteccin de mononucleosis infecciosa y partculas
virales

Fijacin del complemento

La fijacin del complemento se basa en la capacidad del complemento para unirse
a los complejos antgeno-anticuerpo. La prueba incluye la adicin de eritrocitos
sensibilizados con una hemolisina. Si el suero posee anticuerpos especficos, se fija
el complemento y no puede unirse a la hemolisina para lisar los eritrocitos. Se
trata de una prueba muy especfica.
La reaccin antgena anticuerpo activa el complemento y lo consume, lo cual
permite indagar si en un suero existe determinado anticuerpo
Una de las aplicaciones clnicas ms importantes de la fijacin del complemento
es la prueba de Wasserman empleada en el diagnstico de sfilis

Deteccin de antgenos y de anticuerpos

La identificacin de antgenos por medio de anticuerpos permite su deteccin y
cuantificacin aun en muestras en pequeas cantidades que dificultan el que lo
sean por medios qumicos. A su vez si se dispone de un antgeno puro es factible
detectar anticuerpos contra este en muestras de sangre y en tejidos
Entre estas pruebas estn:

Prueba de citotoxinas
Permite la deteccin e identificacin de anticuerpos especficos por la lisis de
clulas blanco en presencia del complemento.
Se pone en incubacin el complemento y clulas con anticuerpos contra su
membrana, se producir la activacin del mismo
y como consecuencia
alteraciones en la membrana de las clulas las cuales se hacen permeables.
Tiene aplicacin en el diagnstico de bordetella pertussis

Radioinmunoanlisis
Se basa en evidenciar el antgeno anticuerpo a travs de la utilizacin de una
antigamaglobulina humana marcada con un radioistopo y la utilizacin de un
sustrato que dar una reaccin de color
Ventajas: alta sensibilidad y especificidad, es una tcnica rpida
Desventajas: la radiacin es un problema serio en la salud es cancergena, el
equipo es de alto costo

Se utiliza para detectar marcadores tumorales

Ensayo inmunoenzimatico ( ELISA)

Se basan en evidenciar la RX antgeno anticuerpo a travs de la utilizacin de

una antigamaglobulina humana marcada con una enzima y la utilizacin de
un sustrato que va a dar una reaccin de color.
El ELISA indirecto es el mtodo de eleccin para detectar la presencia de
anticuerpos sricos contra el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH),
agente causante del sndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA). Segn
esta tcnica, protenas recombinantes de la envoltura y el ncleo del VIH se
absorben como antgenos en fase slida a los pocillos. Las personas afectadas
de VIH producen anticuerpos sricos contra eptopos en estas protenas vricas.
En general, el ELISA indirecto permite detectar anticuerpos sricos contra VIH
desde las primeras seis semanas de una infeccin.

Anticuerpos fluorescentes o inmunofluorescencia

Estas son pruebas que permiten identificar microorganismos y detectar la
presencia de anticuerpos especficos o antgenos en suero, secreciones tejidos u
otros tipos de muestras del paciente. Estas pruebas son rpidas, muy sensibles
y especficas. Tienen amplia aplicacin en el diagnstico de enfermedades
infecciosas.
IF directa (IFD): Se utilizan para identificar microorganismos
IF indirecta (IFI): esta variante de IF, pero que en vez de identificar antgenos
mide la cantidad de anticuerpos de una muestra
Identificacin de treponema pallidum cursando una siflis.

Identificacin de Ags del MHC

Reaccin en cadena de la polimerasa
La reaccin en cadena de la polimerasa, conocida como PCR por sus siglas en
ingls (polymerase chain reaction), es una tcnica de biologa molecular. Su
objetivo es obtener un gran nmero de copias de un fragmento de ADN
particular, partiendo de un mnimo; en teora basta partir de una nica copia de
ese fragmento original, o molde.
Esta tcnica sirve para amplificar un fragmento de ADN; su utilidad es que tras la
amplificacin resulta mucho ms fcil identificar con una muy alta probabilidad,
virus o bacterias causantes de una enfermedad, identificar personas (cadveres)
o hacer investigacin cientfica sobre el ADN amplificado. Estos usos derivados
de la amplificacin han hecho que se convierta en una tcnica muy extendida,
con el consiguiente abaratamiento del equipo necesario para llevarla a cabo
1 Fundamento e importancia
Esta tcnica se fundamenta en la propiedad natural de los ADN polimerasas para
replicar hebras de ADN, para lo cual se emplean ciclos de altas y bajas
temperaturas alternadas para separar las hebras de ADN recin formadas entre

s tras cada fase de replicacin y, a continuacin, dejar que las hebras de ADN
vuelvan a unirse para poder duplicarlas nuevamente.
Por lo general, la PCR es una tcnica comn y normalmente indispensable en
laboratorios de investigacin mdica y biolgica para una gran variedad de
aplicaciones. Entre ellas se incluyen la clonacin de ADN para la secuenciacin,
la filogenia basada en ADN, el anlisis funcional de genes, el diagnstico de
trastornos hereditarios, la identificacin de huellas genticas (usada en tcnicas
forenses y test de paternidad) y la deteccin y diagnstico de enfermedades
infecciosas.
Aplicaciones
Permite el genotipar la especie o especies que provocan un determinado cuadro
infeccioso
La PCR tambin se puede usar en revisiones mdicas rutinarias, como en los
servicios de donantes de sangre, para test de rutina. A travs de esta tcnica se
pueden detectar infecciones en el donante (como VIH o Hepatitis B) mientras an
estn en el periodo de incubacin
El diagnstico de enfermedades hereditarias presentes en el genoma es un
proceso largo y complicado que puede acortarse significativamente gracias a la
PCR. Cada uno de los genes prueba se pueden amplificar mediante sus
correspondientes cebadores y posteriormente secuenciar para detectar la
existencia de mutaciones.