UNIVERSIDAD TECNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIAS E INGENIERIA EN ALIMENTOS

CARRERA DE INGENIERIA BIOQUIMICA
INGENIERA DE LAS ENZIMAS

Alumnos:
Danny Chango
Fecha:
08/07/2015
Profesor: Ing. Cecilia Carpio
Semestre: Octavo U
TEMA:
VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LOS PARMETROS CINTICOS DE
LINEALIZACIN
DIAGRAMA DE LINEWEAVER-BURKE
Se emplea como herramienta
grfica
para
calcular
los
parmetros cinticos de una
enzima.
Consiste en que el recproco
de la cintica de MichaelisMenten
es
fcilmente
representable y que de l
emanan mucha informacin de
inters.
La representacin grfica de
Lineweaver-Burk
permite
identificar el Km y Vmax; el
punto de corte con el eje de
ordenadas es el equivalente a
la inversa de Vmax, y el de
abscisas es el valor de -1/Km

Ventajas

Este mtodo se puede aplicar

a la ecuacin de MichaelisMenten
Permite identificar la Km y
Vmax; a partir del punto de
interseccin
El mtodo es muy sencillo y no
requiere
un
software
especfico.
Resulta
fcil
de
evaluar
estadsticamente
Es el nico en el cual las
variables
dependiente
e
independiente
estn
separadas

Desventajas

Este
Mtodo
es
muy
dependientes de la calidad de
los datos de velocidad.
Se
aplican
slo
para
mediciones
de
velocidad
inicial
Los
errores
en
la
determinacin de velocidad a
bajas
concentraciones
de
sustrato se amplifican en este
mtodo , estas distorsiones se
incrementan
en
transformaciones
que
combinan los valores de x y y.

DIAGRAMA DE HANES WOOLF

Se emplea como herramienta grfica para calcular los parmetros
cinticos de una enzima.
Si
multiplicamos
ambos
miembros de la ec. de dobles
inversos, por [S]
OBTENEMOS LA ECUACION
DE HANES-WOOLF.
Pendiente = 1/Vmax
corta en el eje [S]/v en un
punto = Km/Vmax,
Corta en el eje [S] en un
punto = - Km

Ventajas

El error est ms igualmente

distribuido que en grfico de
Lineweaver-Burk
La representacin de Hanes es
preferible
a
otras
linealizaciones de la ecuacin
de Michaelis-Menten.
contiene
la
variable
independiente en el eje Y
(dependiente)

Desventajas

las
variables
no
estn
separadas en este mtodo
obscurece en alguna extensin
la interpretacin de los datos.

DIAGRAMA DE EADIE Y HOFSTEE

Se emplea como herramienta grfica para calcular los parmetros
cinticos de una enzima.
relaciona la velocidad de una
reaccin
con
la
concentracin del sustrato:

multiplica
obtiene

Ventajas

por

Vmax,

se

contiene
la
variable
dependiente en el eje X
(independiente)
permite
visualizar
rpidamente los parmetros
cinticos importantes como
Km y vmax
est menos afectado por el
margen
de
error
que
el
diagrama de Lineweaver-Burke
asigna el mismo peso a todos
los puntos para cualquier
concentracin del sustrato o
velocidad de reaccin

Desventajas

las variables en la ordenada y

en
la
abscisa
no
son
independientes.
ambas
dependen
de
la
velocidad de reaccin
Cualquier error experimental
se manifiesta en ambos ejes.

DIAGRAMA DE INTEGRALES
Se emplea como herramienta grfica para calcular los parmetros
cinticos de una enzima.
Determinacin de los parmetros cinticos es el basado en la
evaluacin de la concentracin de sustrato a travs del tiempo. De
hecho, por integracin de la ecuacin de Michaelis-Menten:

Ventajas

Desventajas

Permite la determinacin de
los parmetros cinticos a
partir de la pendiente e
interceptos del grfico de 1/t
ln(Si/S) vs (Si-S)/t
Este sistema es ms simple
que
el
basado
en
las
mediciones de la velocidad
inicial puesto que solamente
se necesita un experimento.
tiempos cortos de reaccin se
deben usar, especialmente si
la enzima es inestable o est
sujeta a fuerte inhibicin por
producto.
las
condiciones
del
experimento
deben
ser
cuidadosamente escogidas y
controladas
como
para
discriminar cualquier factor
distinto al agotamiento del

sustrato que puede afectar la

actividad de la enzima.
El
experimento
se
debe
conducir
entonces
bajo
condiciones en las cuales la
inactivacin,
inhibicin por
producto y reversibilidad de la
reaccin son despreciables

Fuente:
Eadie,
GS
(1942).
The
Inhibition of Cholinesterase
by
Physostigmine and Prostigmine. Journal of Biological Chemistry
146: 8593.
Voet,D., Voet, J.G. and Pratt, C.W. . 2008. Fundamentals of
Biochemistry. Life at the molecular level. pp. 377-393.