Materiales

15 tubos de ensayo
Gradilla para tubos de ensayo
Pipetas Pasteur
Solucin de sacarosa 2,5%
Solucin de sacarosa 20%
Solucin de albmina 2,5%
Solucin de NaCl 0.2% (Hipertnica)
Solucin de NaCl 0.9% (Isotnica)
Solucin de NaCl 5% (Hipertnica)
Glicerol
Aceite comestible
Azul de metileno
Frasco con anticoagulante
Sangre (con anticoagulante)
Guantes
Portaobjetos y cubreobjetos (1 caja)
Microscopio ptico compuesto
Cebolla
Hoja de afeitar
Lugol
Bolsa de Dilisis
Glucosa 2%
Agua destilada
1 Vaso precipitado
Capsulas Petri}

Experimento N 1.
A cada grupo se le entrega una gradilla con tubos de ensayo, lo cuales se deban
rotular segn la solucin que contenan.
En 4 tubos de ensayo se colocaron respectivamente:
sacarosa 2,5%, sacarosa 20,0% y albmina 2,5%.

3 mL de agua destilada,

En forma simultnea, se dej escurrir por las paredes de cada uno 2 gotas de Azul
de Metileno 0,5%. De manera inmediata se observ y se compar la velocidad de
difusin en cada caso.

Experimento N 2.
En 4 tubos de ensayo se agregaron con una pipeta 3 mL de glicerol, aceite
comestible, sacarosa 2,5% y agua en cada uno, respectivamente.
En forma simultnea, se dej escurrir por las paredes de cada tubo, 1 gota de azul
de metileno 0,5%. De manera inmediata se observ y se compar la velocidad de
difusin en cada caso.

Experimento N 3 (dilisis)
En un vaso precipitado se mezclaron 2 ml de solucin de albmina 2,5% y 2 ml de
NaCl al 4%. Luego se utiliz una bolsa de difusin hecha a base de una
membrana artificial, que se debi sumergir previamente en agua destilada. Se
amarr firmemente un extremo de ella con un hilo, posteriormente, se verti en
ella la ya mezcla preparada y se cerr el extremo que se encontraba abierto para
as evitar que la mezcla saliera hacia el exterior. Se dej escurrir un poco de agua
destilada por fuera de la bolsa para asegurar que no quedase mezcla en el
exterior. Despus de aquello la membrana con la mezcla se coloc en un soporte
universal y se sumergi en un vaso precipitado que contena agua destilada y se
dej all y se dej reposar durante aproximadamente 20 minutos.
Una vez transcurrido el tiempo se retir la bolsa, se tomaron 3 alcuotas de 5 mL
del agua contenida en el vaso precipitado y se colocaron en tubos de ensayo
separados y rotulados.
Para verificar la presencia de cloruro se adicion nitrato de plata, en la otra
alcuota se verific la presencia de Albmina mediante la aplicacin del test de
Biuret y, finalmente, se verific la presencia de glucosa mediante el test de
Benedict.

Experimento N 4
En 3 tubos de ensayo marcados se colocaron 3 mL de NaCl 0,2%, 3 mL de
solucin de NaCl 0,9% y 3 mL al 5,0% en cada uno de ellos, respectivamente.
Luego, se agregaron 5 gotas de sangre en cada uno de los tubos enumerados y
se agreg anticoagulante, finalmente se mezcl el contenido de los tubos y se
describieron las observaciones macroscpicas de cada uno de ellos.

Finalmente se hace una preparacin microscpica del contenido de cada tubo, se

observaron
con diferentes objetivos y se anotaron los resultados.
Experimento N 5
Se realiz una preparacin de epidermis de catafilo de cebolla y de eritrocitos, a la
que se agreg una solucin de NaCl al 5%, a otra preparacin se le agreg una al
0,9%, y por ltimo se agreg una al 0,2%, despus se observ al microscopio con
diferentes aumentos ( 4X, 10X Y 40X) y finalmente se anotan los resultados.

Discusin
Experimento N1:
En el primer experimento se realiz el anlisis de la velocidad de difusin de las
soluciones de sacarosa a distintas concentraciones y albmina. Y para medir esto
se utiliz azul de metileno, que es un mtodo de tincin que no daa las
estructuras de la clula, el cual se utiliz para medir la velocidad de difusin de
las soluciones anteriormente mencionadas.
En el tubo 1, se observ la difusin de mayor rapidez, ya que como el agua
destilada posee partcula pequeas, esto permite una mayor fluidez del azul de
metileno, porque el solvente posee poca viscosidad, esto provoca que aumente
la difusin. (ver imagen 1)
En el tubo 2, se observ una difusin rpida, pero ms lenta que en el agua,
debido a que el tamao de las molculas de la sacarosa no permite una difusin
rpida del azul de metileno. (ver imagen 1)
En el tubo 3, se observ una difusin mucho ms lenta que la anterior, debido a
que hay mayor concentracin de sacarosa, entonces esto produce que azul de
metileno no difunda libremente. Debido a esto el azul se estanca y slo difunde un
poco. (ver imagen 1)
En el tubo 4, se ve una difusin ms lenta que en el tubo 1 y 2 y no es totalmente
homognea, el azul de metileno baja y luego vuelve a la superficie. Esto es debido
a que la albmina es una protena de gran tamao, por lo tanto, lo cual impide el
paso de fluidos del azul de metileno en la solucin.

Experimento N2
En el caso del 2 experimento de difusin se puede apreciar el cambio en la
velocidad de difusin afectado principalmente por el tamao de las molculas, la
naturaleza del soluto y la viscosidad de ste. Para el caso del aceite por ejemplo,
la difusin fue nula, debido a que es una molcula hidrofbica (sustancia apolar)
razn por la cual no tuvo interaccin con el azul de metileno, ya que esta es una
sustancia polar, y para que ocurra interaccin entre 2 molculas deben tener una
misma naturaleza qumica, o sea ambas ser apolares, o ambas polares.
Para el caso del glicerol, que es una molcula hidroflica, esta si interaccion con
el azul de metileno, por lo cual la velocidad de difusin fue rpida, esto se debe a
la concentracin y tamao del soluto.

Experimento N3
La membrana artificial semipermeable permite el paso sustancias simples, es
decir, molculas de tamao pequeo y con carga, como es el caso del cloruro de
sodio que se disoci en Na+ y Cl-, mientras que las molculas grandes como las
protenas y la glucosa no pueden atravesar la membrana, debido a su tamao.
Esto se comprob en el primer tubo de ensayo, en donde se sac una alcuota del
agua que estaba en el vaso precipitado, ya que al agregarle nitrato de plata se
form un precipitado blanco, lo cual indica que se identific la presencia de cloro ,
razn por la cual se infiere que si pasa cloro a travs de la membrana, tambin
pasa sodio debido a sus tamaos similares (ver imagen 5)
Para detectar la presencia de albmina se utiliz el test de Biuret, como resultado
el test dio negativo, ya que no se obtuvo coloracin que se requera, lo que indica
que esta protena no pudo atravesar la membrana semipermeable. Esto se explica
porque la albmina es una protena y ella en condiciones normales dentro nuestro
metabolismo se transportan por difusin facilitada, de esta manera entran a la
clula.
Experimento N4
Se observ el proceso de osmosis, el cual est definido como: es la difusin de del
agua a travs de una membrana semipermeable, que mantiene una gradiente de
concentracin de un soluto a travs de s misma. ( 2003, Remington Farmacia)

La muestra de sangre con NaCl al 0,2%, se considera una solucin hipotnica en

comparacin a los eritrocitos de la sangre. En este caso, el paso de solvente es
del medio extracelular al medio intracelular, debido a las distintas concentraciones
que presentan ambos medios. Al observar este proceso con el microscopio ptico
se denot el cambio en las clulas al estar en diferentes concentraciones, en este
caso el agua entr a las clulas y estas se hincharon, en algunos casos ocurri
hemolisis, es decir, algunas clulas se rompieron, liberndose la hemoglobina. (ver
imagen 10)
En la muestra de sangre con NaCl al 0,9% la que se considera una solucin
isotnica, por lo cual el paso de solvente es constante a travs de la membrana,
tanto para el medio intracelular como para el medio extracelular, esto significa que
estn en constante intercambio y, por lo tanto, en un equilibrio dinmico. Razn
por la que al observar este proceso al microscopio no presenta ningn cambio
visible, ya que no hay cambio de gradientes de concentracin. (ver imagen 11)
En cambio en la muestra de sangre con NaCl al 5% %, la cual es considerada
hipertnica al compararla con la concentracin intercelular de los eritrocitos
presentes en la sangre, esto indica que ocurri cambio en las gradientes, lo cual
se observ fcilmente en el microscopio, ya que el agua sali de las clulas y
estas se arrugaron, pegndose las paredes de la membrana a los organelos
celulares, este fenmeno se denomina crenacin. (ver imagen 12)

Experimento N5
Finalmente, para la observacin del catafilo de cebolla, esta se puso en una
solucin de NaCl al 5%, este es un medio hipertnico en relacin al medio
intracelular, por lo cual las clulas vegetales permitirn una salida de agua desde
el medio intracelular hacia el medio extracelular a fin de igualar las
concentraciones osmticas, en este caso la membrana plasmtica que estaba
pegada a la pared celular se arruga, proceso llamado plasmlisis.
Para el caso de NaCl al 0.9% que es un medio isotnico, las clulas del catafilo de
cebolla no sufren ninguna variacin, debido a que las concentraciones de soluto
son iguales a ambos lados de la membrana.
Al poner las clulas en un medio hipotnico, en solucin de NaCl al 0,2%, se
observa la turgencia de la clula, debido al ingreso de agua a travs de la
membrana, presin la cual es soportada por la pared celular impidiendo que la
clula se rompa.