CUESTIONARIO HPLC

1- En qu ao fue desarrollada la tcnica de HPLC?

1903
2- Cules son las principales aplicaciones?
Parte bioqumica y analtica para separar, identificar y cuantificar
compuestos de una mezcla.
3- Cul es la principal diferencia entre la cromatografa de gases y la
cromatografa lquida de alta eficiencia?
Utiliza alta presin y muestras no voltiles muestras no deben ser
vaporizadas.
4- Nombre los compuestos que pueden ser analizados por medio de la
cromatografa lquida.
Determinar aminocidos, protenas, cidos nucleicos, esteroides,
drogas, plaguicidas, antibiticos, especies organometalicas y ciertas
sustancias de carcter inorgnico.
5- Ventajas de la tcnica.
Altamente sensible, ms rpida en la respuesta de los compuestos y
es mucho ms verstil.
6- Partes del equipo.
Sistema cromatogrfico
Reservorios
Bombas
Sistema de inyeccin
Columna
Sistema de deteccin
Registrados de datos
7- Cul es la funcin de la bomba?
Generan una alta presin del gas para que el lquido eluya y pasa a
travs de las columnas cromatografas.
8- Explique los diferentes tipos de inyeccin que existen para HPLC.
Automticos: Utilizan una jeringa que no tiene punta, emplea
de 1 a 10 uL de muestra y se ubica entre la bomba y la
columna.
Manual: Mediante vlvulas lup de flujo constantes que inyectan
una determinada cantidad en la columna.
9- Cul es el rango de temperatura en el que puede trabajar la columna
en HPLC.
20 C

10-Describa las columnas para HPLC. Material, tamao.

Material acero inoxidable o plstico

Longitud de 5 a 30 cm
Dentro se encuentran fase estacionaria con partculas de slice
o carbn activo
Dimetro de 1 a 5 mm

11-Cul es la funcin de la precolumna? Y qu tipo de fase estacionaria

debe tener.
En la precolumna se quedan todas las partculas o suciedades que
puedan daar a la columna, la fase estacionaria debe ser la misma en
la columna y precolumna.
12-Que preparacin se le debe dar a la muestra?
Deben ser filtradas que tienen un dimetro de 1 a 5 um
13-Nombre los diferentes tipos de detectores y cul es la aplicacin de
cada uno.
Detector del ndice de refraccin: Trabaja con modo isocrtico
Detector de fluorescencia: Analitos fluoresecntes por
naturaleza
Detector de arreglo de fotodiodos: Utiliza lmparas de deuterio,
xenn, wolframio y un monocromador.
Detector del espectrmetro de masas: Cuantificar los
compuestos en una muestra
14-Que es modo isocrtico
La fase mvil es constante en el tiempo o utiliza un solo disolvente al
inyectar la muestra
15-Que es modo gradiente
Fase mvil varia con el tiempo, utiliza una mezcla de solventes para
trabajar las muestras
16-Explique el proceso completo de anlisis por HPLC.
a) La muestra es colocada en un vial mbar y disuelta en los
disolventes orgnicos
b) La muestra es colocada en el automuestradeor.
c) El sistema de inyeccin toma 10 uL de muestra y los inyecta en
la columna.
d) En la columna se separan los compuestos y luego pasan a ser
cuantificados en un detector.
e) La respuesta de los detectores es un cromatograma que nos
indica el numero de compuestos que tiene la muestra, cada
pico significa un compuesto diferente.

Cromatografa de lquidos de alta eficiencia. (2013). Retrieved from

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