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This is a contribution that presents a translation of the work Terminology for Analytical Capillary Electromigration Techniques by
Riekkola and collaborators (Pure Appl. Chem., Vol. 76, No. 2, 443-451, 2004) from IUPAC for the Portuguese Language. Additional
terms that had not been defined in native Portuguese were included for the benefit of the local community. Additional notes were also
included to clarify some important concepts and to highlight the differences between techniques.
INTRODUO
Tcnicas que empregam eletromigrao em capilares tm se
tornado populares e crescido em importncia na qumica analtica,
especialmente no campo da bioanlise. Parte dos termos empregados pode ser encontrada em um artigo sobre a terminologia de
eletroforese em qumica clnica1, mas em muitos casos estes no
podem ser aplicados a tcnicas capilares e no levam completamente em conta as definies sugeridas pela IUPAC2. Em 1994,
Knox publicou um artigo sobre a terminologia a ser empregada em
tcnicas de eletrosseparao3, embora este no esteja em concordncia com a nomenclatura da IUPAC para cromatografia4. O presente artigo discute e define os termos relevantes utilizados na prtica laboratorial, incluindo os nomes das vrias tcnicas baseadas
nos princpios da eletromigrao. Deve ser notado que diversas aplicaes prticas podem se situar em casos limites, no que diz respeito ao nome de uma destas tcnicas em particular.
As separaes efetuadas com tcnicas de eletromigrao em capilar utilizam capilares de dimetro interno reduzido e empregam
campos eltricos elevados, sendo baseadas em diferentes princpios
de separao que, em alguns casos, podem se sobrepor. Estas incluem as tcnicas eletroforticas capilares e as tcnicas cromatogrficas
capilares que utilizam campo eltrico para bombeamento dos fluidos. Tcnicas de eletromigrao em capilares tm se mostrado altamente eficientes na separao de ons pequenos, tanto orgnicos como
inorgnicos, frmacos, explosivos, corantes, polmeros, protenas e
peptdeos, DNA e RNA, clulas, partculas, etc.5-10.
A presena do fluxo eletrosmtico (EOF, electroosmotic flow)
pode contribuir para a separao, mesmo quando no necessria
(por ex., em focalizao isoeltrica), ou pode ser completamente
indesejvel. O EOF tem sua origem na atuao de um campo eltrico sobre as espcies carregadas na regio difusa da dupla camada
eltrica, formada devido carga da parede interna do capilar. Como
exemplo, para um capilar de slica fundida em contato com uma
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Artigo traduzido de Terminology for analytical capillary electromigration
techniques, publicado em Pure Appl. Chem. 2004, 76, 443, por M. L. Riekkola,
J. A. Jnsson e R. M. Smith. Publicao aprovada pelo Comit Brasileiro para
Assuntos de Qumica junto IUPAC.
*
e-mail: fracassi@iqm.unicamp.br
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uma tcnica eletrofortica de separao em capilares na qual substncias capazes de interagir especificamente (muitas vezes bio-especifica-
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da Silva et al.
Quim. Nova
(1)
Potencial Eletrocintico,
(2)
onde r a permitividade da soluo (usualmente tomada como a
permitividade do solvente puro), 0 a permitividade do vcuo e
a viscosidade dinmica da soluo, na qual se assume que a razo
entre a permitividade e a viscosidade independente do campo eltrico na dupla camada eltrica. 2. O potencial eletrocintico tambm conhecido por potencial zeta.
Tempo de Migrao, tm
o tempo requerido para que o analito percorra o caminho efetivo do capilar, Lef, que a distncia entre os pontos de injeo e
deteco.
Taxa de Migrao (em eletroforese),
a distncia de migrao dividida pelo tempo, s vezes chamada de velocidade de migrao. O smbolo tambm usado para
velocidade2.
Velocidade Eletrofortica, ep
Campo Eltrico, E
a fora que atua sobre uma partcula carregada dividida pela
sua carga eltrica.
Nota: Em tcnicas de eletromigrao capilar, esta tomada como
a componente axial do campo, que a diferena de potencial aplicada nas extremidades do capilar dividida pelo comprimento total
do capilar, Ltot. Existe tambm um campo eltrico radial proveniente da dupla camada eltrica formada nas proximidades da parede
do capilar, que est envolvida no fenmeno da eletrosmose. O comprimento total do capilar tipicamente maior que o comprimento
efetivo, Lef. Veja tambm tempo de migrao.
Mobilidade Eletrosmtica, u ou eo
Velocidade eletrosmtica dividida pelo campo eltrico.
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(3)
(8)
Nesta equao, f o coeficiente de atrito, z o nmero de cargas elementares do on e e a carga elementar. O coeficiente de
atrito aumenta com o tamanho do on e com a viscosidade do
eletrlito suporte. Para ons esfricos rgidos, de raio r, movendose em um meio de viscosidade , o coeficiente de atrito pode ser
estimado utilizando-se a Lei de Stokes:
(4)
Coeficientes de atrito para partculas de outros formatos, como
elipsides, podem ser estimados utilizando-se equaes mais complexas.
(5)
Velocidade Total do Analito (em eletroforese capilar), tot
a soma da velocidade eletrofortica, ep, com a velocidade
eletrosmtica, eo.
(6)
Esta quantidade pode ser medida experimentalmente dividindo-se o comprimento efetivo do capilar pelo tempo de migrao
(Lef / tm).
Notas: 1. Dependendo dos sinais e magnitudes relativas destas
velocidades, a velocidade total de um analito pode possuir o mesmo
sentido da velocidade eletrosmtica ou o sentido contrrio. 2. A velocidade total a velocidade do on medida como o seu deslocamento
em relao parede do capilar dividida pelo tempo. 3. O termo velocidade aparente tambm denomina a velocidade total do analito.
Tempo de Migrao das Micelas, tmc
determinado experimentalmente pelo tempo de migrao de
um composto que completamente retido na fase micelar.
RAZO DE DISTRIBUIO DE MASSAS (EM
CROMATOGRAFIA ELETROCINTICA MICELAR),
kMEKC
definida como:
(7)
onde nmc e naq so os nmeros de moles de analito nas fases micelar
e aquosa, respectivamente, K a constante de distribuio e Vmc e
Vaq so os volumes correspondentes das fases.
Notas: 1. Para o caso de analitos eletricamente neutros, kMEKC
pode ser diretamente calculado a partir dos tempos de migrao:
ACE
CAE
CE
CEC
CGE
CIEF
CITP
CZE
CSE
EKC
MECC
MEECC
MEEKC
MEKC
SMBOLOS
e
E
f
K
kMEEKC
kMEKC
Lef
Ltot
naq
nmc
r
teo
tm
tmc
Vaq
Vmc
z
r
0
ef
eo
ep
eo
Carga elementar
Campo eltrico
Coeficiente de atrito
Constante de distribuio
Razo de distribuio de massas em MEEKC
Razo de distribuio de massas em MEKC
Comprimento efetivo do capilar
Comprimento total do capilar
Nmero de moles de analito na fase aquosa
Nmero de moles de analito na fase micelar
Raio de Stokes
Tempo de migrao eletrosmtica
Tempo de migrao do analito
Tempo de migrao das micelas
Volume da fase aquosa
Volume da fase micelar
Nmero de cargas elementares
Permitividade da soluo
Permitividade do vcuo
Potencial eletrocintico (ou zeta)
Viscosidade dinmica
Mobilidade eletrofortica
Mobilidade efetiva
Mobilidade eletrosmtica
Mobilidade eletrofortica
Taxa de migrao
Velocidade eletrosmtica
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ep
tot
u
da Silva et al.
Velocidade eletrofortica
Velocidade total do analito
Mobilidade eletrosmtica
REFERNCIAS
1. Frard, G.; Pure Appl. Chem. 1994, 66, 891.
2. McNaught, A. D.; Wilkinson, A.; Compendium of Chemical Terminology
(The Gold Book), 2nd ed., Blackwell Science: Oxford, 1997.
3. Knox, J. H.; J. Chromatogr., A 1994, 680, 3.
4. Ettre, L. E.; Pure Appl. Chem. 1993, 65, 819.
5. Foret, F.; Krivankova, L.; Bocek, P.; Capillary Zone Electrophoresis, VHC,
Weinheim, 1993.
6. Engelhardt, H.; Beck, W.; Schmitt, T.; Capillary Electrophoresis. Methods
and Potentials, Vieweg: Wiesbaden, 1996.
7. Camillari, P.; Capillary Electrophoresis, 2nd ed., CRC Press: Boca Raton,
FL, 1998.
Quim. Nova