Batera de Pruebas Bioqumicas

Aqu estn algunas de las Pruebas Bioqumicas ms frecuentes:

Fermentacin de la lactosa (Mc Conkey) Agar Hierro de Kliger (KIA) Prueba del
Indol Citrato de Simmons Agar Hierro Lisina (LIA) Agar Urea de Christiansens
Prueba de la Fenilalanina (PPA) Reduccin de los Nitratos Movilidad RM - VP
Oxidasa y Catalasa

Fermentacin de la lactosa (Mc Conkey)

El agar Mc Conkey es un medio slido, diferencial y selectivo. Se usa para la
discriminacin de bacterias con capacidad de fermentar la lactosa (Lac + y
-).Composicin g/l :
- Peptona 20.0 : fuente de nitrgeno y carbono para las Lac -.
- Lactosa 10.0 : fuente de carbono para las Lac +.
- Sales biliares 2.5 : le confiere carcter selectivo, inhibiendo el crecimiento de Gram +.

- Cloruro sdico 5.0 : para mantener la tonicidad del medio (evitar osmosis).
- Rojo neutro 0.05 : indicador que va hacer que el medio vire de coloracin. Si las
bacterias son Lac +, producirn cidos derivados de la fermentacin que darn al medio
un aspecto rosceo; si por el contrario son Lac -, el medio se basificar por el uso de la
peptona y se tornar amarillo.
- Cristal violeta 0.001 : interfiere junto con las sales biliares en la selectividad del medio.
- Agar-agar 15.0: da consistencia al medio.

Lac +

Lac -

Agar Hierro de Kliger (KIA)

El agar Hierro de Kliger (KIA), es un medio slido y diferencial. El fundamento se basa
en la capacidad de fermentacin de dos azucares (glucosa y lactosa), en la produccin de
c. sulfhdrico y en la produccin de gas. Composicion g/l:
Extracto de carne 3.0
Extracto de levadura 3.0
Peptona 20.0

Lactosa 10.0

Glucosa 1.0

Cloruro sdico 5.0

Citrato frrico amnico 0.5

Tiosulfato sdico 0.5 : fuente de azufre, las bacterias lo

reducen produciendo c. sulfhdrico (precipitado
negro)

Rojo de fenol 0.03 : indicador, si vira a rosceo , indica basicidad del medio, si es
amarillo indica acidificacin (derivada de c. de la fermentacin)

Interpretacin del Kliger:

NC o SC: no cambio o sin cambio

LC, Alk o K : alcalinidad

H2S o subndice s: si produce c. sulfhdrico

G: productora de gas

Ejemplo: A/As indica que es fermentador de glucosa, lactosa y productor de sulfhdrico

1
2
3

Fermentador glucosa, productor c. sulfhdrico y de gas.

Fermentador glucosa, lactosa y productor de gas.

Prueba del Indol

Pone de manifiesto la presencia de la encima Triptofanasa en nuestras bacterias, si esta
presente degradar el triptofano y liberar al medio Indol, para revelar su presencia
usaremos el reactivo de Kovac; si hay indol se formar un anillo rojo en la superficie,
sino este ser amarillo. Para esto sembramos en caldo con triptofano.
Indol+

Indol-

Citrato de Simmons

Se usa para determinar si el organismo es capaz de utilizar el

citrato como nica fuente de carbono y compuesto
amoniacales como nica fuente de nitrgeno. El medio
contiene citrato sdico, fosfato de amonio y azul de
bromotimol como indicador; este se tornar azul cuando el
medio se basifica. Las bacterias que metabolizan el citrato
liberan iones amonio al medio (degradacin del fosfato
amnico) lo que provoca que este se alcalinice y el indicador
vire azul.
Cit +

Cit -

Agar Hierro Lisina (LIA)

Este medio pone de manifiesto:
- Si la bacteria posee la enzima descarboxilasa (LDC). el medio contiene como indicador
Purpura de Bromocresol, cuando la lisina se descarboxila, el medio se acidifica y el
indicador vira amarillo en el fondo.
- Si es productora de c. sulfhdrico, en cuyo caso el precipitado negro nos impedir ver si
es LDC + o -.
- Si es productora de gas.

1. LDC -, NO H2S, PRODUCTORA GAS.

2. LDC + -, PRODUCTROA H2S Y GAS.
3. LDC - , NO H2S, PRODUCTORA DE GAS

Agar Urea de Christensen

Urea -

Urea +

Pone de manifiesto la actividad de la enzima

ureasa, para degradar la urea en dos molculas
de amoniaco. El medio lleva como indicador
Rojo fenol, que se torna amarillo cuando es
negativo y rosa cuando es positivo. Hay que
tener precaucin por que tambin puede ocurrir
que no se produzca cambio de coloracin, en
este caso es negativo. el medio posee un color
rosceo (mucho menos intenso que los
verdaderos positivos) lo que puede llevarnos a
error (considerar falsos positivos).