Mara Garca Atencia

Cuestionario 2
Industria textil. P. Woesei o B. Amyloliquefaciens?
Pregunta 1)
Para calcular la vida media de ambas enzimas utilizamos la siguiente
ecuacin:
Ea = Ea0 e^-kd*t
Tomamos logaritmos para que nos quede una recta y as hallar kd, que
ser la pendiente de dicha recta:
lnEa = -kd*t + lnEa0
Tiempo

Ea B.amy
0
3
6
9
15
20
25
30
40

Ln Ea
0,86
0,76
0,7
0,65
0,58
0,46
0,41

-0,15082289
-0,27443685
-0,35667494
-0,43078292
-0,54472718
-0,77652879
-0,89159812

Ea P.woe

Ln Ea
0,45
0,44
0,43
0,43
0,41
0,4
0,39
0,38
0,37

-0,7985077
-0,82098055
-0,84397007
-0,84397007
-0,89159812
-0,91629073
-0,94160854
-0,96758403
-0,99425227

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Representando lnEa frente a t obtenemos la siguiente grfica:

P.woesei y B.amyloliquefaciens
0
0

10

-0,2

30

40

50

y1 = -0,0283x1 - 0,1773
R = 0,9843

-0,4
Ln Ea

20

B.amy

-0,6

P.woe
-0,8
-1
y2 = -0,0049x - 0,8117
R = 0,9794

-1,2

Tiempo

De esta grfica obtenemos los valores de kd1 y kd2, de las protenas

B.Amyloliquefaciens y P.Woesei respectivamente:
kd1=0,00283
kd2=0,0049
Una vez conocidos los valores de la constante de velocidad de
desactivacin, podemos proceder a calcular el tiempo en el que la
actividad de la protena est al 50%, es decir que Ea = Ea0/2, siendo Ea0 la
actividad a tiempo cero:
t = -(lnEa lnEa0)/ kd
t1 =23,5min

Vida media B.Amyloliquefaciens

t2 = 138,7 min

Vida media P.Woesei

A 80C utilizara B.Amyloliquefaciens si el tiempo de utilizacin es inferior

a 23 minutos, ya que a este tiempo y por debajo de este la concentracin
de la enzima es mayor que la de P.Woesei.
Por el contrario, para un proceso de mayor duracin a 80C convendra
utilizar P.Woesei, puesto que la anterior enzima se desnaturaliza y se
vuelve inservible, mientras que P.Woesei es ms termoestable.
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A temperaturas superiores de 80C utilizara P.woesei por ser una enzima

que soporta ambientes extremos de temperatura, por ejemplo para el
tratamiento con alfa-amilasa del que se habla en el cuestionario.

Pregunta 2)
A) Esos mnimos representan el punto donde la protena es ms
estable, ya que la energa libre es mnima. Y todo sistema tiende a
una mnima energa donde es lo ms estable que puede ser.
B) Representan la Tm, o lo que es lo mismo, la temperatura a la que la
protena se ha desnaturalizado al 50%.

C) La protena a es mesoflica ya que se desnaturaliza con una

temperatura de 50C, que no es muy alta. Sin embargo, todas las
dems protenas sufren la desnaturalizacin con una temperatura
muy alta, 100C, es decir que son termoestables. Por lo que
podemos concluir que son termoflicas.
D) Se puede decir que la Tm puede indicar si una protena es meso o
termoflica, mientras que conociendo la energa libre estable no se
puede concluir esto. Como ejemplo se puede ver en el grfico que
tanto la protena a y d coinciden en cuanto a energa libre
mnima pero a es mesoflica y d es termoflica.

Pregunta 3)
En una protena el hecho de incorporar agua deuterada a sus grupos
amidas depende del grado de desnaturalizacin de esta, ya que cuanto
ms desnaturalizada est, ms desdoblamientos habr y por tanto, ms
huecos donde pueda adherirse el agua.

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Dicho esto, analizando el grfico vemos que la curva marcada con crculos
casi no deja incorporar protones con temperaturas bajas, pero a medida
que aumentamos la temperatura, disminuye el porcentaje de protones no
incorporados a la protena, hasta alcanzar su grado mximo de
desnaturalizacin a los casi 100C.
Mientras que en la protena dada por la curva marcada por cuadrados se
aprecia desde un inicio, un alto grado de incorporacin de agua respecto a
su compaera, y vemos que a casi 80C ya se ha desnaturalizado. Con
estos datos podemos concluir que la curva de crculos pertenece a una
protena termoflica y la curva de cuadrados a una mesoflica.
Pregunta 4)
El calcio hace que la protena sea ms estable. Esto se puede ver en la
grfica, ya que a medida que aumenta la concentracin de calcio la
velocidad de inactivacin, es decir, la velocidad a la que la protena se
desnaturaliza, disminuye.
Esto ocurre debido a que el calcio acta como cofactor, y ayuda a la
estabilidad estructural de la protena mediante enlaces coordinados
dativos.

Pregunta 5)
Para la protena Rnase un mayor pH confiere estabilidad a la protena, ya
que se empieza a desnaturalizar a temperaturas cada vez ms altas a
medida que el pH aumenta. Mientras que para Mb sucede lo contrario,
con un pH cada vez menor se necesita una temperatura mayor para que
se desnaturalice por lo que, lo que confiere estabilidad a esta protena es
un pH cada vez menor.
Este fenmeno se da porque alteraciones del pH afectan a la ionizacin de
los grupos carboxilo y amino de los aminocidos. Esto provoca una
desorganizacin entre las atracciones y repulsiones inicas que hacen que
la estructura proteica sea estable.

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