TALLER #1 LABORATORIO

1. Describa donde se encuentra el ADN en la clula. Argumente.

2. Considera usted que el DNA est presente en los organismos eucariotas y
procariotas. Argumente su respuesta.
3. Describa a partir del DNA como se forman los cromosomas (teniendo en cuenta
las histonas, octameros y nucleosomas) y explique su estructura.
4. Describa las caractersticas de los cromosomas del cariotipo humano
atendiendo a la posicin del centrmero. Para ello debe auxiliarse con imgenes.
Solucin
1. El ADN se encuentra en todas las clulas del ser vivo , en concreto en el
ncleo de las susodichas y forma parte de los cromosomas.
2. Si la clula es eucariota se encuentra el ADN en el ncleo , en cambio, si la
clula es procariota el material gentico se encuentra disperso en el
citoplasma en ese caso se le llama nucleoide.
3. Las clulas siguen un ciclo de vida, el ciclo celular, en el cual crecen y se
dividen para formar dos clulas hijas. Cuando la clula no se est
dividiendo, el ADN se encuentra esparcido por el ncleo. En su totalidad
mide unos 2 metros, pero su anchura es de tan solo unos pocos
nanometros. Junto con el ADN se encuentran unas protenas bsicas
(cargadas positivamente) llamadas histonas. Al ser positivas son atradas
por el ADN que tiene carga negativa. Existen 5 tipos de histonas: H1, H2A,
H2B, H3, y H4. Esto es lo que llamamos cromatina. Cuando la clula se
divide, tiene que separar el ADN en dos partes iguales. Como la cromatina
esta esparcida por todo el ncleo, no seria fcil separarla. Por eso cada
hebra se enrolla sobre si misma con la ayuda de las histonas hasta formar
los cromosomas. Las histonas se unen en grupos de 8, formando
octmeros, constituidos por dos molculas de cada una de las histonas
menos la H1, H2a, H2b, H3 y H4. La hebra de ADN se enrolla alrededor
de los sucesivos octameros, formando los nucleosomas, unidad basica del
empaquetamiento del ADN. Entre cada nucleosoma hay un trozo de hebra
que los separa, el ADN espaciador o linker. Ha esta estructura con forma
de collar de perlas, es lo que se llama cromatina y es como se encuentra el
ADN en el ncleo cuando la clula no se encuentra en divisin. No es
posible ver el ADN al microscopio cuando este est en forma de cromatina
por su pequea anchura, unos 10nm.
Despus la fibra de cromatina se enrolla sobre si misma helicoidalmente,
formando los denominados solenoides (imagen de abajo) formados por 6
nucleosomas e histonas h1. Estas ultimas interaccionan con el ADN

espaciador. En este momento el ADN tiene un grosor de 30nm. Despus, la

fibra de solenoides se une a un armazn proteico formando lazos y
multiplicando por 10 su anchura, midiendo en este momento 300nm. El
armazon esta formado por enzimas que intervienen en la replicacin del
ADN.
Este armazon se enrrolla de nuevo de forma helicoidal para formar
finalmente los brazos del cromosoma, midiendo cada brazo 700nm. As
cada cromosoma duplicado, que es como se encuentran durante la divisin,
tiene una anchura total de 1400nm.
4. El cariotipo es el complemento cromosmico particular de un individuo y
viene definido por el nmero y morfologa de los cromosomas en la
metafase mittica. En la especie humana la dotacin cromosmica es de
2n = 46 (22 pares de autosomas y un par de cromosomas sexuales).
En el cariotipo humano los cromosomas se ordenan de mayor a menor.
Hay cromosomas grandes, medianos y pequeos. Al ordenar los
comosomas se constituyen 7 grupos atendiendo no slo al tamao sino
tambin a la forma de las parejas cromosmicas, dentro del cariotipo
humano podemos encontrar cromosomas metacntricos (tienen los dos
brazos aproximadamente iguales en longitud), submetacntricos (con un
brazo ms pequeo que otro) y acrocntricos (con un brazo corto muy
pequeo)
Utilizando tcnicas de tincin estndar los cromosomas aparecen
uniformemente teidos en metafase y se clasifican en 7 grupos de la A a la
G atendiendo a su longitud relativa y a la posicin del centrmero que
define su morfologa.
Los autosomas se numeran del 1 al 22 ordenados por tamaos
decrecientes y por la posicin del centrmero. Los cromosomas sexuales X
e Y constituyen un par aparte, independientemente del resto (por su
tamao, el cromosoma X se incluira en el grupo C, y el Y, en el grupo G).
De esta forma el cariotipo humano queda constituido as:
Grupo Pares cromosmicos Caractersticas
A 1, 2 y 3 Cr. muy grandes casi metacntricos (1 y 3 metacntricos, pero 2
submetacntrico)
B 4 y 5 Cr. grandes y submetacntricos, con dos brazos muy diferentes en
tamao
C 6, 7, 8, 9, 10, 11 y 12 Cr. medianos submetacntricos
D 13, 14 y 15 Cr. medianos acrocntricos con satlites

E 16, 17 y 18 Cr. pequeos, metacntrico el 16 y submetacntricos 17, 18

F 19 y 20 Cr. pequeos y metacntricos
G 21 y 22 Cr. pequeos y acrocntricos, con satlites.
X, Y El cr. X es parecido al 6. El Y, al grupo G, pero sin satlites.
(Todos los cromosomas autosmicos estn ordenados en orden
decreciente de tamao, excepto el cromosoma 21 que ahora se sabe que
es ms pequeo que el 22)
Sin embargo, atendiendo solamente a estos parmetros no es posible
identificar inequvocamente cada par de cromosomas. Para ello es
necesario utilizar diferentes tcnicas de bandeo cromosmico. Los distintos
patrones de bandas que se consiguen son constantes y especficos de
cada tcnica y determinan la distribucin de regiones cromosmicas que
se revelan positiva o negativamente segn el mtodo utilizado.
En 1956, Tijo y Levan determinaran el complemento cromosmico diploide
del hombre (2n = 46). En 1959 Lejeune describi la primera
cromosomopata o enfermedad originada por una alteracin cromosmica,
el sndrome de Down producido por una trisoma del cromosoma 21.
Desde entonces, la Citogentica Humana ha ido desarrollndose como una
ciencia mdica.
Hay dos tipos fundamentales de cromosomopatas:
- Variaciones cromosmicas estructurales: afectan a la estructura del
cromosoma en cuanto a la ordenacin lineal de los genes. Aqu se incluyen
deleciones, duplicaciones, inversiones y translocaciones.
- Variaciones cromosmicas numricas: afectan al nmero de
cromosomas. Incluyen las poliploidas (triploida: 3n; tetraploida: 4n) y los
diversos tipos de aneuploida (trisomas: 2n+1; monosomas: 2n-1).
Por otra parte, las anomalas cromosmicas pueden afectar a los
autosomas o a los cromosomas sexuales.
Las alteraciones cromosmicas ms frecuentes en humanos son:
Anomalas autosmicas:
Sndrome de Down, por trisoma del cromosoma 21, translocacin 21/21 o
translocacin 14/21.
Sndrome de Patau, por trisoma del par 13.
Sndrome de Edwards, por trisoma del par 18.
Sndrome Cri du Chat, por delecin parcial del brazo corto del cromosoma
5 (5p).

Sndrome de DiGeorge, por delecin parcial del brazo largo del

cromosoma 22 (22q11).
Cromosoma Filadelfia, formado por una translocacin entre los
cromosomas 9 y 22.
Anomalas de los cromosomas sexuales:
Sndrome de Klinefelter, por una constitucin XXY, XXXY, XXXXY.
Sndrome XYY, cromosoma Y extra en varones.
Sndrome de Turner, constitucin X0.
Sndrome XXX, cromosoma X extra en mujeres.}

3. Qu es el cariotipo? Cmo se clasifican los cromosomas humanos? Se llama

cariotipo a la representacin grfica del contenido de cromosomas de las clulas
somticas de una especie dada, que permite observar la forma, tamao, nmero y
otras caractersticas de los cromosomas. Los cromosomas humanos se clasifican
En cromosomas somticos o autosomas y cromosomas sexuales. Los
cromosomas somticos conocidos como autosomas es cualquier cromosoma que
no sea sexual. En el ser humano, los cromosomas del par 1 al 22 son autosomas
y, el par 23 pertenece a los cromosomas sexuales X e Y. Los cromosomas
sexuales conocidos como heterocromosomas o gonosomas, se identifican porque
uno de los cromosomas homlogos es distinto al resto, logrando la determinacin
del sexo del individuo. Las mujeres poseen 2 cromosomas X y el hombre un
cromosoma X y otro Y, de ah resulta la determinacin del sexo en la fecundacin
ya que la madre siempre va aportar el cromosoma X y el padre X o Y, en
consecuencia, una combinacin XX es hembra y una XY es varn.

5.. Cules son los cromosomas humanos que tienen satlites?

SATLITES: Se presenta como una cuerpo esfrico separada del resto por una
Constriccin Secundaria. Tanto el Satlite como la Constriccin Primaria son
caractersticos de cada cromosoma en particular. En el hombre, los organizadores
nucleolares se hallan en los cromosomas 13, 14, 15, 21 y 22, todos los cuales son
acrocntricos y tienen Satlites.
6. Que diferencias existen entre heterocromatina (facultativa y constitutiva) y
eucromatina.

La Heterocromatina es el tipo de cromatina CONDENSADA durante la interfase y

como dice ella, se divide en 2 tipos:
-Constitutiva: Que aparece condensada en todos los tipos celulares y durante todo
el tiempo, porque son oncogenes (genes cancergenos).
-Facultativa: Solo se condensa en ciertas clulas o momentos especiales del
desarrollo. Como el corpsculo de Barr que est en la cromatina X femenina.
Y la Eucromatina es la porcin de la cromatina que permanece en un estado no
condensado y disperso, ocupando el mayor volumen del espacio nuclear, son los
protooncgenes.
En los nucleos interfsicos, la eucromatina se tie menos densamente debido al
menor grado de empaquetamiento, en general se acepta que este es el estado
ms compatible con la actividad gnica y la transcripcin. La heterocromatina se
encuentra en muchos organismos flanqueando las regiones cntromericas,
algunas veces tambien se encuentra en regiones telomricas, e incluso se ha
observado
en algunos casos
la existencia de cromosomas completos
heterocromticos, por ejemplo, el cromosoma Y de Drosophila melanogater. La
funcin de la heterocromatina no es an conocida, se han detectado muy pocos
genes activos en la heterocromatina, en Drodophila existen mutaciones letales en
genes que se localizan en regiones heterocromticas, por tanto, estos genes
deben poseer alguna actividad. En cualquier caso, el porcentaje de genes activos
localizados en regiones heterocromaticas es muy bajo comparado con el de genes
activos situados en la eucromatina. La principal diferencia entre la eucromatina y
la heterocromatina radica por tanto en la actividad de estos dos tipos de
cromatina.
7.Cules son los cromosomas del cariotipo humano que tienen regiones
heterocromticas?
La cromatina mayoritaria, la que constituye la mayor parte del ncleo recibe el
nombre de eucromatina y la minoritaria el de heterocromatina. La heterocromatina
puede aparecer ms densamente teida que la eucromatina (heteropicnosis
positiva) o menos densamente teida que la eucromatina (heteropicnosis
negativa). La aplicacin de determinados tratamientos experimentales en
combinacin con diferentes tipos de tincin de los cromosomas, puede producir la
aparicin de zonas heterocromticas en los cromosomas de muchas especies.
La heterocromatina puede aparecer ms densamente teida que la eucromatina
(heteropicnosis positiva) o menos densamente teida que la eucromatina
(heteropicnosis negativa). La aplicacin de determinados tratamientos
experimentales en combinacin con diferentes tipos de tincin de los cromosomas,

puede producir la aparicin de zonas heterocromticas en los cromosomas de

muchas especies. Estas zonas heterocromticas presentan una distribucin
caracterstica o patrn de bandas tpico de cada cromosoma, que permite
identificar cromosomas distintos. Estas tcnicas reciben el nombre de "tcnicas de
bandeo cromosmico" y son enormemente tiles en la identificacin individual de
los cromosomas y en la construccin de cariotipos.
Bandeo cromosmico[editar]
En algunas especies los pares cromosmicos no pueden diferenciarse claramente
considerando slo sus componentes distintivos en sentido longitudinal; en estos
casos se debe recurrir a tcnicas citolgicas especiales para la tincin de los
cromosomas, que evidencian "bandas" transversales (oscuras y claras) a lo largo
de los mismos, y que corresponden a los distintos tipos de cromatina. En una
especie dada, estas variantes de la cromatina presentan un tamao y disposicin
constante. Las tcnicas de bandeo cromosmico ms usadas son:

Bandeo C : es relativamente sencilla, y se basa en el uso del colorante Giemsa

que tie regiones con heterocromatina constitutiva, que en vegetales se halla
localizada principalmente en regiones telomricas, mientras que en animales, se
encuentra en regiones centromricas.
Bandeos G, R, Q : son tcnicas basadas en tratamientos enzimticos que ponen
de manifiesto distintos patrones de bandas de la eucromatina a lo largo del
cromosoma. El material se tie con colorante Giemsa (G, R) colorantes
fluorescentes, como la quinacrina (Q). Son las bandas ms estudiadas en
animales y en el hombre. En los vegetales son muy difciles de obtener por el alto
grado de empaquetamiento de los cromosomas metafsicos.
Bandeo NOR : permite identificar cromatina con secuencias medianamente
repetidas de ADNr, asociada a las regiones NOR del cromosoma. El nmero total
y localizacin de las regiones NOR es variable, por lo cual, como ya se expres,
adems de su importancia funcional tiene valor cariotpico.
8. En qu consiste la citogentica. Es la ciencia que tiene por objeto el estudio de
la estructura y comportamiento cromosmico, a travs de tcnicas de
microscopa La citogentica puede ser utilizada tanto para el estudio de
enfermedades congnitas como enfermedades adquiridas. Permite identificar
alteraciones cromosmicas en el feto, como los sndromes de Down, de Edwards,
de Turner o de Klinefelter, entre otros, o bien diagnosticar malformaciones
posteriores Qu son los bandeos cromosmicos Bandeo Cromosmico Consiste
en someter a los cromosomas a desnaturalizaciones, a digestin enzimtica o a

ambos, seguido de una tincin con colorante especfico para ADN. Esto hace que
los cromosomas se tian con una serie de bandas claras y oscuras. 10. Defina
para que se utilizan y en qu consisten las bandas G, C, Q, T, N, R y NOR (Si
usted encuentra otras adjntelas). Bandeo G Los cromosomas son sometidos a
digestin con la enzima tripsina de manera controlada. Los cromosomas se
desnaturalizan mediante calor en solucin salina (esto desnaturalizar ADN con
abundantes AT) y, a continuacin,se tien con Giemsa que es un colorante
qumico que enlaza ADN. Las bandas oscuras de tincin positiva, son las bandas
G. Las plidas son G negativas, se denominan bandas R. Las regiones oscuras
son las que se replican ms tarde en la fase S y contienen contienen cromatina
ms condensada. Las bandas R suelen replicarse temprano en la fase S y tienen
menos condensada la cromatina. Los genes se concentran sobre todo en esta
banda, mientras que el ADN de las bandas G es menos activo
transcripcionalmente. Las bandas R son Q negativas. Bandeo Q Se tien los
cromosomas con un colorante fluorescente que se enlaza preferentemente a ADN
abundante en AT y se observan mediante fluorescencia UV. Las bandas
fluorescentes indican los mismos segmentos que las bandas G. Bandeo T
Identifica un subgrupo de bandas R que estan concentradas sobre todo en los
telmeros. Las bandas T son las R que se tieron de manera ms intensa. Bandeo
C Muestra heterocromatina constitutiva sobre todo en los centrmeros. Se hace
mediante un tratamiento alcalino drstico. Mtodos dinmicos Se aplica sobre las
clulas en cultivo. Uno de ellos es aadir istopos radiactivo, como la timidina
tritiada, en un periodo temprano de la replicacin, para que se vaya aadiendo al
ADN. El resultado es un patrn de bandas de replicacin temprana, que suele
coincidir con las bandas R. Si se hubiese aadido la timidina tritiada en un
momento tardo de la replicacin, las bandas coincidirian con las G. Bandas AgNOR Se conoce como bandas Ag-NOR aquella que colorea las Regiones
Organizadoras Nucleares ( de ah la nomenclatura NOR) en ocasiones son
tambin llamadas Banda N, su coloracin es debido a la afinidad con el Nitrato de
Plata. Bandas RHG Este patrn de bandas es, en trminos generales, el inverso
(reverse) de las bandas G, o sea, las bandas G-positivas son R-negativas, y las Gnegativas son R-positivas; se les denomina bandas RHG para significar que son
bandas reversas obtenidas por calor usando Giemsa como colorante.