TIPOS DE SIEMBRA

MICROBIOLOGIA

ALUMNOS

SOLIS OLIVAS KRISTEL PORTUGUEZ BAZALAR ANA MARCOS SANTOS WILIAMS

DOCENTE

INTRODUCCION
Las bacterias se cultivan en el laboratorio en materiales nutritivos denominados
medios de cultivo, cuyos componentes son muy variados. La eleccin del
medio se basa en el propsito del estudio.
El material que se inocula en el medio se denomina inocuo. Cuando se inocula
un medio como agar nutritivo u otros medios con agar en placas Petri, por el
mtodo de siembra por estra cruzada en placa, las clulas quedan separadas
individualmente.
Durante la incubacin, las clulas microbianas individuales se reproducen tan
rpidamente que en un tiempo de 18 a 24 horas producen masas visibles a
simple vista, denominadas colonias. Cada colonia que se observe diferente,
presumiblemente es un cultivo puro de una sola clase de bacterias. Si dos
clulas microbianas procedentes del inocuo original quedan muy cerca una de
la otra sobre el medio de agar, las colonias que resultan pueden quedar
mezcladas o muy juntas. La siembra por estra permite aislar las bacterias que
dan lugar a colonias separadas y posteriormente, transfiriendo una sola colonia
a un medio nuevo, se permite el desarrollo de un cultivo puro bacteriano.

OBJETIVOS

Aprender aplicar diferentes tipos de tcnicas de siembra

Comprobar la utilidad que tienen los medios de cultivos: usos generales,

diferenciales y selectivos.

Aprender a trabajar en condiciones de asepsia, es decir, en un ambiente libre

de contaminacin microbiana.

Aprender mediante el uso de las tcnicas tradicionales de laboratorio a aislar y

cultivar microorganismos en medios slidos y lquidos.

Materiales

Placas Petri

tubos de ensayo

Gradilla

mechero de bunsen

Asa de Drigalsky

Asa de koller

Pipetas

Papel toalla

Papel kraft

Autoclave

FUNDAMENTO TEORICO
Mtodos Generales:

1) Siembra por dilucin: Se toma el tubo de ensayo con

medio lquido, como el caldo simple. Se toma el material a diluir
y se siembra en el tubo con el uso del asa de Koller cargada
con el material bacteriolgico, se agita, con movimientos
moderados.
-

Medio de cultivo: Liquido

Instrumento: Asa de Koller
Finalidad: poner la bacteria en suspensin.
2) Siembra por estras en superficie: Se siembra el material
en la superficie del agar inclinado en un tubo de ensayo, all se
extiende por toda la superficie con el asa de Koller, previamente
esterilizada y cargada con el material a sembrar, haciendo
estras no muy amplias, pero tampoco muy estrechas. Se inicia
por la parte ms profunda de la superficie inclinada y se termina
la estra en la parte ms cerca de la boca del tubo.

Medio de cultivo: agar base inclinado

Instrumento: asa de Koller
3) Siembra por estra por agotamiento: Con ste procedimiento se puede conseguir
una buena separacin de las colonias y aislarlas fcilmente. Para ello se funde el
medio de cultivo, se vuelca en la placa Petri y se deja solidificar. Con el asa
de Koller previamente esterilizada se toma material de un cultivo
heterogneo y se descarga sobre la superficie del medio
formando estras. Esto puede realizarse de varias formas:
a- Al comienzo se coloca el inoculo, luego se contina con las estras. Cuando se
quiere obtener colonias muy separadas se puede utilizar dos o tres placas de Petri,
para lo cual se repite la operacin sin tomar con el asa de Koller de nuevo el material.
b- Se puede dividir la placa de Petri en cuatro cuadrantes; una vez depositado el
material en el primero, siguiendo el sentido de las agujas del reloj, se hace una estra
luego en el segundo, tercero y cuarto cuadrante sin cargar nuevamente el asa; en el
ltimo cuadrante aparecern las colonias aisladas.
c- El inculo se extiende sobre una pequea zona de la placa, prxima al borde, se
esteriliza el asa y se traza otra estra a partir del depsito y as sucesivamente.

Medio de cultivo: solido en placa de Petri

Instrumento. Asa de Koller
Finalidad. Obtener colonias aisladas
4) Por picadura o puncin: Con una aguja se toma el material
sembrar y se lo introduce en el tubo, con medio semislido.
Introducir la aguja hasta el fondo, formando un canal de puncin,
trayecto por el cual la retiraremos luego. Este mtodo se utiliza
estudiar la movilidad de las bacterias.

Medio de cultivo: Semislido

Instrumento: aguja bacteriolgica
Finalidad: Estudiar la movilidad de las bacterias

que se quiere
para

5) Siembra en TSI: (Por picadura y estras en superficie): el

TSI (Triple Sugar Iron) es un medio que contiene glucosa,
sacarosa y lactosa, hierro y un indicador que es el rojo fenol.
En este medio sembraremos por picadura y estras en
superficie, como ya conocemos, para estudiar los cambios
que ocurrirn en superficie y profundidad. A lo largo del
canal se desarrollan los microorganismos, y segn lo hagan
en la parte superior o inferior del tubo, estarn indicando su
comportamiento frente a los azucares, los cambios indican
lo siguiente:

6) Estra nica: depositamos la muestra lo ms alejado

de nosotros y realizamos la siembra en forma de zigzag. De esta forma vamos descargando la muestra del
asa. Es importante no volver a repasar el trozo de
medio de cultivo que ya hemos sembrado. Para
conseguir que al final de la estra tengamos colonias
aisladas es importante que al principio hagamos la
estra ms junta y que la cantidad de muestra tomada
en el asa de Koller sea la adecuada.
7) Siembra en superficie (diseminacin): se vierte sobre una placa de Petri
el medio de cultivo fundido, se deja solidificar y se coloca sobre la superficie
0,1ml de la muestra del inculo. Con ayuda de una esptula de Drigalsky se
extiende el inculo hasta su absorcin total por el medio de cultivo. Este tipo de
siembra se recomienda para microorganismos aerobios estrictos.

8)
siembra
por
difusin (inclusin o vertido en
placa): se coloca una alcuota de la muestra en una placa Petri y sobre el
mismo se vierte el medio de cultivo girando a la derecha y a la izquierda,
previamente fundido. Este mtodo se utiliza para microorganismos aerobios.

RESULTADOS
En los cultivos lquidos no tiene lugar la formacin de colonias, por lo tanto
se examinar la existencia de enturbiamiento ms o menos intenso, la

formacin de una pelcula o velo sobre la superficie, la aparicin de sedimento

en el fondo del tubo, etc.
La utilizacin de medios de cultivo lquidos permite la obtencin de una
poblacin microbiana grande, con un elevado nmero de microorganismos,
para ser utilizados posteriormente.
En medio slido (agar inclinado) se observar el aspecto general del medio y
la aparicin de crecimiento sobre su superficie. Este tipo de siembra permite el
cultivo de microorganismos aerobios o anaerobios facultativos. Adems, se
utiliza para almacenar cultivos durante cortos perodos de tiempo, a
temperaturas de 4C.
En medio semislido se podr comprobar si el microorganismo es o no mvil,
ya que en el primer caso se observar que el crecimiento difunde alrededor de
la zona donde se hizo la picadura, detectndose turbidez. Por eso es tan
importante que, cuando se inocula el medio de cultivo, no se distorsione el agar
y se vuelva a sacar el hilo por el mismo sitio de inoculacin. Los
microorganismos inmviles crecern nicamente a lo largo de la picadura.
Este tipo de siembra en picadura sirve, tambin, como otro de mtodo de
conservacin de microorganismos anaerobios facultativos
CONCLUSIN
Esta prctica, se dividi en distintas sesiones, nos permiti conocer y aplicar de
manera favorable, los procesos bsicos para el estudio de microorganismos en
el laboratorio, tales como la esterilizacin, medios de cultivo, siembra, los
cuales son la base para realizar los pasos prcticos posteriores.
Tambin es necesario destacar que pudimos aprender sobre la seguridad en el
laboratorio y las medidas necesarias para evitar riesgos, los cuales son muy
importantes cuando se trabaja con microorganismos patgenos, ya que una
incorrecta manipulacin puede llevar a un contagio del manipulador o de
quienes le rodean.
Hemos podido observar los diferentes tipos de siembra, del mismo modo
pudimos reconocer las caractersticas de los microorganismos que
se
desarrollan tanto el cambio de color del cultivo como las precipitaciones y otros.

REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
LIBROS

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microorganismos. 10 Ed. Prentice Hall Iberia. Espaa.

Ramrez-Gama, R. M., B. Luna Milln, O. Velsquez Madrazo, L. Vierna

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Mggenburg, A. Camacho Cruz y M del C. Urza Hernndez. 2006.
Manual de Prcticas de Microbiologa General. 5 edicin. Facultad de
Qumica, UNAM. Mxico.

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Vullo, D., M. Wachsman, L. Alche. 2000. Microbiologa en Prctica.

Manual de laboratorio para la enseanza de Microbiologa bsica y
aplicada. 1 edicin. Atlante S. R. L. Argentina

PAGINAS WEBS
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http://html.rincondelvago.com/microbiologia_21.html

https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivoen-un-laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf

https://www.google.com.pe/url?
sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=4&cad=rja&uact=8&ved=0CC0
QFjAD&url=http%3A%2F%2Fwww2.cbm.uam.es%2Fjalopez
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ei=zV1SVa2VHsWaNpSpgdgP&usg=AFQjCNGqyKgYuk1ftSoYOmYAru2
AWxjHzA&sig2=ayar5394k2b3gAhQrlAhiw

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