INSTRUMENTO DE LA BIOLOGA CELULAR:

Como todas las ciencias experimentales, la investigacin en Biologa Celular depende de los
mtodos de laboratorio que se utilicen para estudiar estructura y funcin celulares. Muchos
avances sobre los funcionamientos de las clulas han conducido a la invencin y
construccin de instrumentos pticos experimentales, que en la actualidad facilitan el trabajo
del estudiante y del bilogo celular en particular.
Debido a que la mayora de las clulas son demasiadas pequeas para ser observadas a
simple vista, el estudio de las clulas ha dependido primordialmente del uso del
microscopio.
ORIGEN E HISTORIA DEL MICROSCOPIO:

La invencin de las lentes como instrumentos de correccin de los defectos de la visin,

suele atribuirse a Salvino Degli Armati, y fue Alejandro Spina quin divulg su uso y
construccin a mediados del siglo XIII.
Johannes Kepler (1571- 1630), estudi los fenmenos pticos y descubri que la
imagen de los objetos se enfoca sobre la retina, gracias a la refringencia del cristalino.
Tambin conoca el papel de las lentes convergentes y divergentes y las combinaciones de
las lentes cncavas y convexas para la construccin de telescopios.
Descartes (1596- 1650), escribe su libro DIOPTRIQUE, en el cual describe diversas
aplicaciones de las lentes asociadas a espejos.
Francisco y Zacaras Janssen, fabricantes de anteojos combinaron lentes convexas
en un tubo, determinando la construccin del primer microscopio compuesto; y Campani
fue quin construy un microscopio que hizo posible la observacin de preparaciones por
transparencia.
Jaime Faber, es el primero en utilizar la palabra MICROSCOPIUM, para designar al
instrumento ptico que nos ocupa y Anastasio Kircker design una clasificacin de los
mismos en su tiempo.
Robert Hooke(1665), en su libro MICROGRAFHIA, describe la circulacin de la
sangre en los peces, y examina lminas muy delgadas de corcho comprobando la existencia
de mltiples cavidades pequeas a las que design con el nombre de celdillas; donde
incorpora, al microscopio por l construido, el ajuste fino y una lmpara equivalente al
sistema condensador. Define tambin el principio fundamental de los actuales objetivos de
Inmersin .

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Borelius afirmaba que se poda ver moscas del tamao de elefantes, mientras
Antonio van Leeuwenhoeck (1632-1723), considerado fundador de la bacteriologa,
observ glbulos de sangre, bacterias y protozoarios, describiendo un mundo microscpico
jams visto por el hombre.
Durante el siglo XVIII continu el progreso de las tcnicas de los microscopios y se hicieron
grandes esfuerzos para corregir aberraciones de las lentes. A Ch. M. Hall se deben los
objetivos cromatizados ms antiguos, construidos por la asociacin de vidrios Flint y
Crown; y mejorados ms tarde por Dollond, quin los us tambin en la tcnica de
telescopios.
Chevallier, en francia, Amaci en Italia y Lister en Inglaterra, a mediados del siglo
XIX, lanzan al mercado nuevos modelos con objetivos Acromticos de gran potencia y se
observa la influencia del espesor de la lmina del cubre- objeto.
Abbe asociado a Carl Zeiss consigue objetivos apocromticos y disean los
objetivos de inmersin.
Ya en el siglo actual el desarrollo de mltiples campos de la investigacin y la tecnologa
incorpora diversas modificaciones al diseo de los microscopios, determinando un gran
avance en la ciencia.
DEFINICIN: Se llama microscopio a todo instrumento ptico capaz de producir
imgenes ampliadas de objetos muy pequeos. Existen dos clases de microscopios: Simples
y Compuestos.
MICROS= PEQUEO

SCOPEIN= VER

MICROSCOPIO SIMPLE: Es el que se halla constituido por una sola lente denominado
tambin LUPA o lente de mano, que produce de 5 hasta 30 Aumentos.
Corrientemente son lentes biconvexas o plano convexas, las cuales se pueden montar sobre
una armadura sencilla o sobre un soporte.

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Plano convexo y biconvexo

Como ejemplos de microscopios simples tenemos: las lupas comunes, las lentes de
bolsillos, las lupas de relojero, el cuenta hilos y el microscopio de diseccin de
fabricacin casera.

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MICROSCOPIO COMPUESTO
Llamado tambin microscopio de campo luminoso, es el que la luz pasa directamente
travs de la clula y en el que la habilidad para distinguir las diferentes partes de la clula
depende del contraste que se obtiene de la absorcin de la luz visible por los componentes
celulares.
Es el que utiliza dos lentes o sistema de lentes convergentes. Un juego forma el objetivo y
produce una imagen amplificada del objeto; el otro juego forma el ocular que tiene como
misin ampliar la imagen formada por el primero. El aumento del microscopio es el
resultado del producto total de los aumentos de los dos sistemas.
Los tejidos observados en el microscopio deben tener un espesor nfimo, para observar las
preparaciones por transparencia. (Fig. 6 adicional).
Para describir un microscopio es necesario dividirlo en dos partes:

a). - parte mecnica o de soporte.

b). - parte ptica o noble.

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PARTE MECNICA:
Llamado tambin estativo o montura. Forma el sostn o armazn del microscopio y contiene
accesorios y aditamentos necesarios para el desplazamiento del tubo y otros elementos.
Se encuentra formado por:
Base o pie.
Columna o Pilar
Asa o limbo
Platina
Subplatina
Tubo
Revolver portaobjetivos
Sistema de enfoque
1. - BASE O PIE:

Ubicado en la parte inferior del microscopio y est destinado a sostener el

instrumento. Presenta diversas formas, U, Y, V, rectangular o circular. Debe ser
slida y pesada, ya que le proporciona estabilidad con tres puntos de apoyo.
2. - COLUMNA O PILAR:
Es un vstago metlico que se proyecta desde el tercio posterior del Pie. Este puede
ser simple, cuando la inclinacin del tubo es fija, o doble al articularse con el Asa,
mediante una Charnela(2 Fig. 6)), punto por donde se inclina, segn sea el
requerimiento del observador.

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3. - ASA O LIMBO:

Tambin llamado brazo, es una estructura en forma de

C, se une en su extremo superior con el tubo y en su
parte inferior con la platina y la columna. Es el lugar por
donde se debe sujetar el microscopio al trasladarlo.

4. - PLATINA:
CARRO DE MOVIMIENTOS

PINZAS DE SUJECIN

NONIUS O VERNIER

Dispositivo plano, de color negro mate para evita la reflexin de la luz de formas
muy variadas: cuadradas, rectangular o circular. Puede ser fija o mvil, segn el
modelo del microscopio.
En ella se colocan las preparaciones a ser observadas. Tiene un orificio en su parte
central para permitir el paso de los rayos luminosos provenientes del sistema de
iluminacin.
En la parte superior presenta el Carro de movimientos o Charriot, un sistema de
vstagos metlicos accionados por una manivela lateral, que permiten fijar y
sostener la laminilla o placa histolgica. Mediante tornillos, ubicados generalmente
a la derecha, se obtienen movimientos antero- posteriores y de lateralidad, lentos y
regulares y adems presenta una escala ya determinada, que sirve para precisar el
sector o rea especfica de estudio denominado, en este caso, Nonius o Vernier.

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5. - SUBPLATINA:
Es el conjunto de piezas ubicadas debajo de la platina y representa un sistema de sostn
para:
Diafragma
Aros porta filtros.
Condensador
Mediante un mecanismo de pin y cremallera proporciona movimientos de
ascenso y descenso para modificar el foco de iluminacin a voluntad, siendo en
otros casos fijo.
6. - TUBO O CUERPO:

Es un cilindro hueco, ennegrecido por dentro, para evitar reflejos.

En su parte superior se insertan los oculares y en su parte inferior el revolver porta
objetivos. Su longitud es de 160 mm.

7. - REVOLVER PORTA OBJETIVOS:

Son dos casquetes superpuestos donde el superior est fijo al tubo y la pieza inferior
gira sobre el primero. Es en el segundo casquete, donde se enroscan los objetivos,
los cuales se presentan en nmero variable segn el tipo de microscopio.

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Este sistema presenta, en su parte posterior, una lmina metlica fija al casquete
superior, que encaja en muescas del casquete inferior, indicando por medio de un
chasquido, al coincidir uno sobre el otro, que ambos estn en eje ptico.

Casquete Superior
Rosca universal

Casquete Inferior

8. - SISTEMA DE ENFOQUE:
Este sistema est representado por dos tornillos o botones, separados entre s a
cierta distancia o juntos uno sobre el otro, segn el modelo de microscopio. Estos
son:

a). - Tornillo Macromtrico o de Aproximacin: Es el de mayor tamao

y acerca o aleja rpidamente el tubo de la platina. Estos movimientos
amplios representan entre 0,2 a 0,5 cm. en cada vuelta. El mecanismo de
accin que posee muestra un pin, (rueda dentada), que engrana a una
cremallera, (superficie dentada). Ambas superficies se relacionan al girar

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el tornillo y presentan dientes de direccin oblicua, para evitar el

descenso espontneo ya sea del tubo o de la platina.
b). - Tornillo Micromtrico o de Precisin: Acerca o aleja lentamente el
tubo de la platina y es empleado para lograr un enfoque fino y ntido.
Sus movimientos se logran en micras.
PARTE PTICA:
Compuesto de un sistema de lentes que captan y amplan la imagen del objeto a observar,
consta de:
Objetivos.
Ocular.
Aparato de Iluminacin.
1 OBJETIVOS:
Son un sistema de lentes positivas dispuestas en cilindros huecos. Su extremo inferior
se relaciona con la preparacin y su extremo superior se atornilla al revolver portaobjetivos mediante roscas universales.
Presentan grabado, en su exterior, el aumento (x) y la abertura numrica, (N. A.)
La lente principal, es la inferior, plano convexa, llamada Lente Frontal del objetivo y
es la nica responsable del aumento. Las dems lentes sirven solo para corregir las
aberraciones.

Otras lentes

Frontal del
Objetivo

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Los objetivos pueden ser:

a)

a seco

Lente frontal del

objetivo

Aire

Preparacin

a)
A seco: se denominan cuando entre la lente frontal del objetivo y el preparado, se
interpone AIRE. El menor aumento se denomina AUMENTO DBIL y el de mayor
FUERTE A SECO.
b) de inmersin

Lente frontal del

objetivo

Aceite de cedro
Preparacin

b)
De inmersin: son aquellos objetivo en los cuales se interpone un lquido
trasparente, cuyo ndice de refraccin sea superior al del aire, ej.: Aceite de Cedro (que
tiene un ndice de refraccin igual al vidrio). Es el objetivo ms largo, el de mayor
aumento, adems presenta pintada una banda de color, en la parte inferior, que lo
distingue; o la palabra OIL.
Tiene la MENOR Distancia Frontal y la MAYOR Abertura Numrica.
2 - OCULARES:
Son sistemas ms sencillos que los objetivos. Van contenidos en tubos metlicos
cortos que se adaptan en la parte alta del tubo del microscopio, lugar donde se aplica el
ojo del observador
Su fin es amplificar la imagen formada por el objetivo, dando una imagen virtual y de
mayor tamao que el objeto.

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En todo ocular se distinguen generalmente dos partes:

Una lente ocular propiamente dicha que acta como una lupa sobre la imagen que brinda
la lente inferior.

Una lente de campo o colectora situada muy prxima a la imagen producida por el
objetivo, esta corrige las aberraciones de esfericidad producida por los objetivos y hace la
imagen un poco ms pequea y ms luminosa, proyectndola para que la lente superior la
capte.

Ocular

Huygens
Diafragma

Sumaran directora materno

Colector
a

El tipo de ocular ms utilizado es el denominado de Huygens o Negativo y est constituido

por dos lentes planos- convexas, entre las que se interpone un diafragma, y dispuestas
como indica la figura.
Los microscopios que presentan un solo ocular se denominan monoculares y los que
presentan dos a la vez: binoculares, pudindose observar la imagen con ambos ojos a la vez.
Estos presentan internamente lminas o prismas de reflexin, que se encargan de desviar las
imgenes recibidas por los objetivos y dirigirlas a su vez hacia los oculares.

Lmina
semiplateada

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3 APARATO DE ILUMINACIN:
Est situado en la subpalatina y presenta:
a) condensador
b) diafragma
c) filtros
d) espejo o fuente de luz
a) CONDENSADOR: Tiene el objeto de reunir (condensar) los rayos luminosos
provenientes del espejo o la fuente de luz, en un cono luminoso que atraviese la
preparacin,
(iluminada
por
transparencia).

PREPARACIN
Frontal

Colectriz

El condensador est constituido por dos lentes: una superior plano convexa, denominada
lente frontal del condensador y una inferior biconvexa llamada lente colectriz.

El condensador en algunos casos esta fijo en la platina y en otro posee movimientos de

ascenso y descenso para variar el foco a gusto del observador. Si bien el condensador no
tiene accin sobre la amplificacin de la imagen, es de vital importancia ya que da la
iluminacin con la cual el objetivo captar la imagen.

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En algunos casos el condensador est localizado sobre el objetivo (epicondensador), y

mediante un sistema de prismas la luz es proyectada sobre la preparacin, a travs del
objetivo, el haz luminoso incide sobre la muestra y es captado nuevamente por el objetivo.
b) DIAFRAGMA IRIS: Permite al observador controlar la cantidad de rayos
luminosos que han de ser empleados en la observacin y habitualmente se
localiza por debajo del condensador.
Presenta varias laminillas imbricadas unas sobre las otras, de tal manera
que conforman un orificio central, que pueden ser agrandados o
disminuidos a voluntad, segn la cantidad de luz que se requiere,
mediante una manecilla lateral.

Otros tipos de diafragmas se presentan formando un disco con orificios

de diferentes dimetro, los cuales al girar regulan el cono luminoso que
incide sobre el objeto.

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c) FILTROS: Son lminas de vidrio de diferentes colores que se emplean para dar un color
a la luz de acuerdo a las necesidades, se colocan en los aros porta filtros descritos en la
parte mecnica. Son muy importantes para obtener el mximo de detalles, especialmente
cuando se emplea luz artificial, que generalmente es amarilla.
d) ESPEJO O FUENTE DE LUZ: Cuando se emplea luz natural, en la observacin, se
usa el espejo para desviar los rayos luminosos hacia el condensador.

El espejo del microscopio presenta dos caras, una plana que se emplea
cuando la luz es suficiente y otra cncava que se emplea cuando la luz es
deficiente.
El espejo est sujeto al microscopio por un sistema de cardn que le
brinda amplios movimientos de rotacin, tanto antero posteriores, como
laterales.
Segn el modelo, microscopio puede tener una fuente de luz
incorporada, (lmpara) brindando sta, iluminacin adecuada y directa .

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CONCEPTOS ADICIONALES.Se describe a continuacin los conceptos de:

1. PODERES DEL MICROSCOPIO: son los siguientes:
a) Poder de Resolucin
b) Poder de Penetracin
c) Poder de Definicin
a) PODER DE RESOLUCIN: Se refiere a la capacidad del microscopio de separar
distintamente las imgenes de dos puntos muy prximos, y no verlos fusionados,
determinando, as, los ms finos detalles.(Poder separador).
El ojo humano tiene un poder de resolucin de 0.2 mm. Es decir que
estructuras que estn separadas por espacios menores a 0,2 mm. Se
observan como juntas.
El poder de resolucin del microscopio ptico es de 0,25 micrmetros y
est en relacin a la longitud de onda de la luz visible.
b) PODER DE PENETRACIN: Tambin llamado poder de profundidad de foco; es
la capacidad de presentar perfectamente detallados los diversos planos del espesor
de una preparacin, sin variar el enfoque. Es as que a mayor aumento, menor
poder de penetracin, y a menor aumento, mayor poder de penetracin.
c) PODER DE DEFINICIN: Es la capacidad del microscopio de formar imgenes
claras, ntidas de contornos definidos. El primer objetivo posee esta propiedad.
2. APERTURA NUMRICA: (N. A.)
Es el ngulo mximo de los rayos luminosos que llegan a la lente frontal del objetivo,
multiplicado por el ndice de refraccin del medio empleado (aire o aceite) segn sea
el objetivo a seco o de inmersin. La calidad de un objetivo es tanto mayor cuanto
ms elevada es su apertura numrica. (Fig. 7).
Muchos rayos luminosos al sufrir refracciones se desvan de tal modo que ya no
pueden ser empleados por el objetivo. Para evitar perderlos, el objeto de inmersin

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requiere un lquido entre este y la preparacin, lo ideal es que el lquido tenga un

ndice de refraccin similar al del vidrio (material con el cual estn construidos el
Cubre y porta objetos), as los rayos luminosos no sufren mayor desvo de su
trayecto. La abertura numrica est en directa relacin con el aumento.

Lente frontal del

objetivo

Lente frontal del

objetivo

Aceite de cedro

Aire

IR=1.52

IR=1

Porta y cubre objetos

IR=1.52
3. DISTANCIA FRONTAL, o de trabajo:
Lente frontal del
objetivo

Es la distancia existente entre la lente

frontal del objetivo y la preparacin,
una vez que est enfocado. La
distancia frontal est en relacin
inversa al aumento del objetivo

4. EJE PTICO:
Se estn en eje ptico, cuando los centros de
curvatura de todas las lentes estn sobre un mismo
eje principal. Es el centrado de las mismas.

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5. AUMENTO TOTAL:
El aumento total del microscopio se obtiene multiplicando el aumento que brinda el
objetivo, por el que logra el ocular, as por ejemplo:
Objetivo = 10x
X

Ocular = 5x
50 X.
MARCHA DE LOS RAYOS LUMINOSOS:
Los rayos luminosos provenientes de la fuente de luz, son concentrados por el condensador
en un punto brillante, atravesando la preparacin; luego los rayos luminosos pasan por la
lente frontal del objetivo, ampliando la imagen observada de acuerdo al cuarto caso de
formacin de imgenes, proyectndola hacia el interior del tubo, donde es recogida por la
lente colectriz del ocular, sta la proyecta para que la lente superior del ocular la capte y
forme la imagen de acuerdo al sexto caso de formacin de imgenes.
Los rayos luminosos son prolongados por el ojo humano, formando la imagen virtual,
derecha y de mayor tamao, aproximadamente a unos 250mm del ojo del observador, ms o
menos a nivel de la subplatina.
Ojo

6 Caso

Ocular

Imagen real

4 Caso
Objetivo

4 Caso

Objeto
Condensador
Imagen virtual

Imagen virtual

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BIBLIOGRAFA
"OPTICA, INSTRUMENTOS PTICOSY MICROSCOPA"

DR. RENE BOTHELO PERPICH

"HISTOLOGA HUMANA NORMAL"(TOMO I)

DR. FERMIN HUMBOLDT B.

"TEORA Y PRCTICA DEL MICROSCOPIO"

J. AGUILAR PERIS

"EL MICROSCOPIO, GUA TERICO- PRCTICA"

F.JAVIER CERD

"HISTOLOGA"

FINN GENESER

"HISTOLOGA TEXTO Y ATLAS"

L. P. GARTNER, J. L. HAIATT

"HISTOLOGA"

SOBOTTA

"HISTOLOGA"

ROSS, ROMRELL KAYE

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