Curs 8

SERIA LEUCOCITARA
Leucocitele = celulele suport de aparare specifica si nespecifica a organismului
MOH sange tesuturi sange mor
Clasificare :
a) nucleu PMN (E, Ba, N) =seria granulocitara
mononucleare (Ly = seria limfocitara ; Mo = seria monocitara )
b) functie fagocite
imunocite

1. VARIATII FIZIOLOGICE SI PATOLOGICE

N = 4000- 9000 /mmc

: >leucocitoza
:<leucopenie

n.n.= 10.000- 20.000/mmc

sugar= 9.000- 12.000/mmc
Leucocitoza numarului de leucocite - PMN
fiziologic: postprandial, sarcina, nastere, menstra, efort , frica, durere,emotii, la copil
(Ly)
patologic: infectii bacteiene (strepto,stafilococice), virale, fungice
hemoragii sau hemolize acute
arsuri, necroze sau rupturi tisulare crush syndrome
infarct miocardic sau pulmonar
boli maligne nehematologice sau hematologice (leucemii,
policitemia vera, boli mieloproliferative)
medicamente sau metale grele
tulburari metabolice (guta, uremie, acidoza metabolica)
Leucopenia = numarului de leucocite
fiziologica- batrani, populatia de rasa neagra
1

patologica

febra tifoida, bruceloza

carente de vitamina B12 si acid folic
intoxicatii cu alcool, droguri, benzol
administrari ndelungate de antihistaminice, antipiretice, antimalarice, antitiroidiene,
analgezice,anticomitiale, sulfamide, cloramfenicol
iradieri cu radiaii ionizante
ocul anafilactic.

2. SERIA GRANULOCITARA NEUTROFILA

Mieloblast
Promielocit
Mielocit si metamielocit
Granulocit nesegmentat
Granulocit segmentat
o
o
o

6.Plasmocit
7.Eozinofil
9.Limfocit

2.1. Granulocitopoieza = parte a hematopoiezei, are loc pe parcursul a aprox. 9 zile n MOH
De aici trec n snge prin fenomenul de diapedez, (unde stau aprox. 9 ore, fiind
meninute imobile, pregtite de o intervenie local), iar n final sunt eliberate n esuturi
(compartimentul tisular) unde timp de 45 zile i ndeplinesc funciile specifice, apoi
sunt distruse.

2.2 Reglarea granulopoiezei neutrofile

prin mecanism de feed - back
punct de plecare: esut snge mduv hematogen,
influenat de factori umorali locali i de factori nervoi i endocrini.

Factori umorali locali:

granulopoietina tisular
sistemul chalon - antichalon (inh AND- stim AND)
factorii de stimulare ai coloniilor:FSC-G , FSC-GM (Mo)

Mecanisme neuro - endocrine generale:

componenta nervoas este reprezentat de centrii simpatici ai granulopoiezei din
hipotalamus, care prin stimulare electric sau prin injectare de antigene strine
determin leucocitoz i stimularea fagocitozei;
componenta endocrina- sistemul hipofizo-cortico-suprarenalian, hipofiza, tiroida,
hormonii androgeni

2.3. Morfologia granulocitelor neutrofile

NNS -1-4% in FL

10-15

citoplasm roz (acidofil),

granulaii fine, albastre

nucleul este fr nucleoli

cu aspect de potcoav sau liter S

NS -62-68% in FL

10-15 ,

citoplasma este acidofil

granulaii fine, brun-violete

nucleul are 2 -5 lobi unii printr-un filament de cromatin

raportul nucleu/citoplasm (N/C) in favoarea citoplasmei.

la 3% NS femeilor se evideniaz un apendice nuclear (cromatin sexual sau

corpuscul Barr- "b de tob = unul din cei 2 cromozomi X al persoanelor de
sex feminin --- importan n diagnosticarea afeciunilor cromozomiale)

daca 5% dintre NS au 5 lobi / un singur NS are 6 sau mai muli lobi =

hipersegmentare = deficiena de vitamin B12 sau acid folic.
3

2.3. Formula ARNETH

Pentru aprecierea vrstei neutrofilelor, Arneth a propus o formul care mparte
neutrofilele n cinci clase, n funcie de numrul lobilor nucleului:

I - 5% (granulocite nesegmentate, foarte tinere)

II - 30% (nucleu cu doi lobi)

III - 45% (nucleu cu trei lobi)

IV - 18% (nucleu cu patru lobi)

V - 2% (nucleu cu cinci lobi), neutrofilul btrn nainte de dezintegrare.

deviere la stnga a formulei leucocita= crete prcentul de elemente tinere - 50% n

prima clas cu dispariia claseleor IV i V( infecii febrile, grave).
deviere la dreapta =apar celule mari cu diametrul de 20 , nucleu hipersegmentat cu 610 lobi(carene de vitamina B12 i acid folic)

2.4. Deplasarea neutrofilelor spre tesuturi

marginaia- leucocitele se dispun de-a lungul pereilor venulelor postcapilare i se
deplaseaza cu vitez mic - alunecare, rolling indus de factori extravasculari
(histamina, trombina, substane oxidante, leucotriene, IL-1, TNF- = factor de necroz
tumoral)
leucocitele exprim pe suprafa receptori pentru citokine,
chemokine, chemoatractani
receptorii exprimai de endoteliu = L selectine, PAF, PECAM1 (CD31),
IL-8.
aderena receptorii de adeziune leucocitar i cei endoteliali interactioneaza (1. Lselectin- legturi slabe ; 2.integrine- fixeaz ferm neutrofilul la EV)
diapedeza- trecerea leucocitelor prin peretele vascular spre esuturi; este precedat de
emiterea de pseudopode- prin rearanjri repetate ale citoscheletului format din actin (care se
polimerizeaz i depolimerizeaz), miozin, tubulin.In tesuturi isi indeplinesc rolul 4-5 zile.

2.5. Functia neutrofilelor

a) aparare =FAGOCITOZA ( nglobarea germenilor bacterieni; granulocitele nglobeaz particule

mici = microfage). Puterea fagocitar = numrul de microbi fagocitai de 100leucocite N, E, Mo,
Ba, Ly .
Etapele fagocitozei:
opsonizarea, ataarea (prin IgG i C5a)
ingestia -pseudopodele nvelesc particula opsonizat fagozom
digestia i bactericidia -granulele lizozomale fuzioneaz cu vacuola (fagolizozomul) i
elibereaz coninutul n ea (degranulare).
b) secretie :
transcobalamina I =1-globulin care fixeaz i transport vitamina B12
tromboplastina neutrofilic - particip la coagularea sngelui, formnd o barier n esut
ce mpiedic migrarea bacteriilor
interleukina-1 (IL-1) - substan pirogen
bradikinina - produce vasodilataie i favorizeaz diapedeza

2.6. Patologia granulocitelor neutrofile

Neutrofilia

infecii acute localizate/generalizate (bacterii, virusuri, fungi, parazii);

inflamaii acute (artrite, vasculite, boli colagen);
tumori maligne
boli de snge leucemia granulocitar cronic (LGC), policitemia vera
(PV);
hemoragie acut;
hemoliz acut, inclusiv posttransfuzional.
intoxicaii metabolice (uremie, acidoz diabetic, necroz hepatic); -substane chimice i medicamente (Pb, benzen, digital, histamin

Neutropenia

infecii bacteriene (febr tifoid), virale (gripa, rujeola, hepatita, SIDA),

protozoare (malaria, toxoplasmoza);
ageni fizici, chimici, medicamentoi (radiaii ionizante, citostatice,
Sulfamide, Fenilbutazon);
boli cu scderea produciei medulare de neutrofile - deficit de vitamina
B12, acid folic; infiltrarea mduvei (leucemii, mielofibroz), anemii
aplastice;
5

boli cu creterea distruciei de neutrofile imune (prin izoanticorpi sau

autoanticorpi); hipersplenism; mecanice (hemodializ);
stri caectice i debilitate: malnutriie, alcoolism.

3. SERIA GRANULOCITARA EOZINOFILA

rezervoarele medulare snge diapedez esuturi (traiesc cteva sptmni: in
piele, pereii intestinali, organele genitale externe, plmni, canalul limfatic i n
ganglioni)
Nr x 500 ori mai mare dect n snge
atragerea n aceste esuturi --- factori chemotactici: IL-5, ECF-A (factor chemotactic
eozinofilic al anafilaxiei), PAF (factor de activare plachetar), C5a

capabile s omoare helmini, protozoare parazite i celule tumorale in

vitro

3.1. Morfologia granulocitelor eozinofile

diametru de 10-15 ,
2 lobi sensibili egali( "halter" sau "desag" )
raportul N/C n favoarea C
granulaiile sunt mari, rotunde, egale, colorate n rou - portocaliu, asemntoare "icrelor
de Manciuria", nu acoper nucleul
membrana plasmatic este bogat n lizofosfolipaze, enzime care pot cristaliza i forma
cristalele CharcotLeyden prin dezintegrarea masiv de eozinofile .
3.2. Functia granulocitelor eozinofile
In aprarea antimicrobian- fagocitoz (bacterii, fungi, complexe atg-atc) Factorii cei mai
activi chemotaxic sunt heteroproteinele (parazii, proteine alimentare i histamina care mediaz
reacia antigen-anticorp), de aceea au fost numite "celulele alergiei i anafilaxiei

reaciile de hipersensibilitate imediat (secunde-ore)

reaciile de hipersensibilitate subacut (1-3 ore ---10-15 ore)
reaciile de hipersensibilitate ntrziat (1-2 zile---saptamani) Ma

In infestrile helmintice (agenii parazitari->atc IgE specifici de pe suprafaa mastocitelor>elibereaz factori chemotactici-> atrag eozinofilele).
6

Alte roluri:

n bolile alergice intervin n procesul inflamator prin enzimele proteolitice;

eozinofilele sintetizeaza LT si PG
rol citotoxic parazii, celule tumorale in vitro
inhib granulocitopoieza prin coninutul mare n PG-E;
n hemostaz prin aciunea antiheparinic;
n procesele de cicatrizare, prin plasminogen ndeprteaz excesul de
fibrin prin fibrinoliz.

3.3. Patologia granulocitelor eozinofile

Eozinofilii

boli alergice (astm bronic, rinit alergic, vasculite alergice, reacii de

hipersensibilitate la medicamente);
boli parazitare cu invadarea esuturilor (trichinoza) i infeciile cu
protozoare (toxoplasmoza, giardioza, malaria);
boli dermatologice: psoriazis, eczeme, dermatoze alergice;
afeciuni ale organelor hematopoetice (LGC, boala Hodgkin, leucemia cu
eozinofile);
tumori metastazate sau necrozante;
boli diverse (infiltrat pulmonar cu eozinofile, dermatomiozita, boli renale
cronice);
dup iradiere.

Eozinopenii

mielopoiezei sau aplazia medular;

secreie exagerat sau administrare de corticoizi (testul Thorn - dg
diferenial ntre insuficiena corticosuprarenal pur i cea secundar
insuficienei hipofizei anterioare)
n stri de stres - prin hipersecreie de glucocorticoizi.
la bolnavii cu cardiopatie ischemic, apariia eozinopeniei indic iminen
de infarct;

4. SERIA GRANULOCITARA BAZOFILA

MOH:

CFU-Ba -> mieloblast ->promielocitul -> mielocitul (are granulaii specifice bazofilului)

din mduv ->n esuturi (Ma)

au durat de via mai lung.

7

 cortizonul, tiroxina, progesteronul --->>>scad numrul de bazofile circulante

estrogenii l cresc
Mofologie:

0,5-1% FL
10-13 .
nucleul are 2-3 lobi
raportul N/C n favoarea C
citoplasma este acidofil
granulaii mari, inegale, albastru nchis,
acoper ntotdeauna nucleul
granulaiile- solubile "petele de cerneal",

Mastocitul:

celul tisular (nu circul prin snge)

are o durat de via mai lung
20-35
nucleu nesegmentat
granulaii mai mici, numeroase
citoplasma invizibila

Mastocitele sunt localizate mai frecvent n esuturile cu interfa ntre mediul extern i cel
intern: piele, cile aeriene, tractul gastrointestinal i la nivelul membranelor bazale epiteliale
i endoteliale.
4.1. Functiile granulocitelor bazofile si ale mastocitelor
1. Fagocitoza, mai redus ca la neutrofil i eozinofil;
2. Degranularea i eliberarea substanelor coninute.
factorul stimulator al degranulrii este hiperlipemia postprandial
Ba ------ heparina ------- lipaza lipoproteica -------

TG

prin eliberarea histaminei i serotoninei crete permeabilitatea vascular i contracia

musculaturii nete a vaselor;
histamina are rol chemotaxic asupra eozinofilelor, de aceea eozinofilia nsoeste
ntotdeauna bazofilia;
mastocitul activat --- joac un rol important n inflamaie, prin mediatorii si proinflamatori
eliberai prin degranulare i care particip la componentele umorale i celulare ale
inflamaiei;
8

--- angiogenez, vindecarea rnilor, remodelarea osoas, ateroscleroz,

boala ulceroas i n unele procese inflamatorii (artrita reumatoid, sclerodermia, colita
ulceroas).

4.2. Patologia granulocitelor bazofile

Bazofilii
leucemii acute i leucemii cronice (LGC)
niveluri crescute de IgE din reaciile inflamatorii din colitele ulceroase, artrita reumatoid,
urticarie, stri alergice.
Bazopenii (fr semnificaie diagnostic)

hipertiroidism

dup administrare de glucocorticoizi sau ACTH

stress, oc, infecii acute

Mastocitozele :
reactive (reacii de hipersensibilitate imediat sau ntrziat)
propriu- zise = boli primare, idiopatice, proliferare excesiv a mastocitelor n diverse
organe.

5. SERIA LIMFOPLASMOCITARA
Ly si Pls particip la recunoaterea celulelor self infectate sau a celulelor strine,
determinnd eliminarea lor prompt (apararea specifica)
CSH pluripotenta-> CSH orientat pe linie limfoid->organe limfatice ->limfoblast>prolimfocit-> limfocit
OL centrale: timus i organe bursale (apendice cecal, plci Payer, amigdalele)
Ly T 80%
Ly B <20%-> plasmocit
2-10% Ly nule (non T, non B)
OL periferice: gg, splin, snge

Maturarea presupune dobndirea unor molecule de suprafa care s le confere :

specificitate antigenic = markeri antigenici -CD4, CD8, CD19

capacitatea de a primi informaii legate de antigenele proprii sau strine,
aceste molecule funcionnd ca nite antene, ele fiind de fapt receptorii
limfocitari

Ly au o mobilitate de 33-35 /min

n timpul deplasrii cpta forme de "rachete de tenis

sensul lor de circulaie este dublu: snge - esuturi i napoi n snge

formarea limfocitelor dureaz ntre 18 i 30 de ore; rmn n circulaie n jur de 10
ore, dup care se rennoiesc
Spre deosebire de celelalte leucocite, cnd sunt stimulate antigenic sufer
"transformare blastic", se multiplic foarte activ i dau natere unor elemente
plasmocite- care intervin n imunitatea umoral i celular.
Prin marcare cu izotopi s-a vzut c limfocitele triesc n medie 45 ani.
12-18 (limfocite mari- la copii)
LY
6 - 9 (limfocite mici)
nucleul mare, oval sau reniform
raportul N/C n favoarea nucleului, cu cromatina nuclear dispus sub form de grmezi
mari i grosolane
Citoplasma este bazofil, ca o band perinuclear, fr granulaii.
- limfocitele -tip T - timodependente
-tip B bursodependente
!!!!nu pot fi difereniate morfologic la microscopul optic, ci numai prin tehnici speciale cu
ajutorul anticorpilor monoclonali

Ly B stimulat antigenic ->PLASMOCIT

-celule sferice sau eliptice
-nucleu situat excentric
-cromatina nuclear n blocuri dense, dispus n "spi de roat" sau n "carapace de
broasc estoas".
-citoplasma bazofil poate fi vzut uneori doar ca un halou citoplasmatic
Plasmocitele nu sunt prezente normal n sngele periferic, dect incidental i se
raporteaz numrul gsit la 100 de leucocite.
5.1. Functiile limfocitelor si plasmocitelor
1. secreia de anticorpi, realiznd imunitatea umoral;
10

2. reaciile mediate celular, ce se afl la baza imunitii celulare

Ly B - familii sau clone cu specificitatea de interaciune cu un anumit antigen (epitop)
- contactul antigenului cu suprafaa limfocitului determina transformarea limfoblastic->
plasmocite->secreta anticorpi.
- o parte din limfoblatii difereniai devin limfocite B cu memorie imunologic-> n
organele limfoide
- anticorpii= imunoglobuline Ig-segmentul efector al imunitii umorale
cleareance-ul complexului antigen-anticorp
liza sau aglutinarea celulelor pe care s-au fixat
=electroforetic: albumina + globuline (1, 2, , )
- IgG, IgM, IgA, IgD, IgE

Ly T - de memorie : triesc ani de zile, recirculate de mai multe ori, pstreaz informaia
antigenic (au memorie imunologic)
- citotoxice : produc liza celulelor int prin contact direct membrande mediatori celulari, limfokine

membran, ajutate

-T cooperante, ajuttoare (helper) : asigur protecia fa de reaciile autoimune sinteza de

Ig, activarea LyT citotoxice i a macrofagelor
- T supresoare regleaz intensitatea rspunsului imun, asigurnd protecie mpotriva unei
reacii imune excesive
- nule citotoxice-killer particip n procesele imunologice, numai dup
diverse clase (M, G)

cuplarea cu Ig de

- NK naturalkillerla indivizii neimunizai i n absena complementului distrug

mare de celule normale i tumorale nenvelite cu anticorpi.

un numr

5.2 Patologia limfocitelor si plasmocitelor

Limfocitele se gsesc n snge n proporie de 25-32 %
Limfocitoze - fiziologic numai la copii
infecii virale (tuse convulsiv, mononucleoza infecioas)

11

 alte boli infecioase acute (rujeol, varicel, hepatit) sau cronice (TBC, sifilis);
tulburri de metabolism (rahitism, hipertiroidism);
neoplazii
leucemii, limfoame-modificri numerice i atipii celulare; n leucemia limfatic
cronic (LLC) se ating cifrele maxime ale limfocitozei
Limfocitopenii - malnutriie, radiaii, citostatice, mixedem, infecii virale (rujeol, varicel,
SIDA), pierderi n rupturi sau fistule ale canalului toracic sau din limfaticele intestinale, n
enteropatiile cu pierderi de proteine .
Plasmocitoza- boli infecioase la copil (rubeol, rujeol, scarlatin, varicel, mononucleoz
infecioas, hepatit epidemic), leucemia cu plasmocite, cu forme imature i atipice de
plasmocite, mielomul multiplu (plasmocitom).

6. SERIA MONOCITO-MACROFAGIC (sistemul macrofagic; SRE - sistem reticulo-endotelial;

SRH - sistem reticulo-histiocitar; sistemul fagocitelor mononucleare)

monoblatii i promonocitele din mduv;

monocitele din sngele periferic;
diverse tipuri de macrofage (histiocite) din esuturi

Monocit
- 4 - 8% din FL
-10-15 mici / 20-25 mari
- citoplasma este bazofil, gri-albstrui ("fumuriu"), cu granulaii azurofile, foarte fine, roz
- nucleul este mare, excentric, reniform sau incizat,ocup aproape jumtate din suprafaa
celular
Macrofagul

celula pivot a rspunsului imun se gsete n esuturi

numrul este de 400/1 fa de numrul monocitelor circulante
triete 2-3 luni
i recapt capacitatea de diviziune, devenind celule mari, gigante cu
diametrul de 25-50 i cu o durat de via de sute de zile sau chiar ani
distrugerea macrofagelor se face n special n alveolele pulmonare i n
tractul gastro-intestinal.
emit pseudopode pn la agentul care le-a atras, pe care l fagociteaz i
l distruge, cu pstrarea informaiei antigenice!!!
12

Ex : histiocit (histiocitul din esutul osos este osteoclastul), histiocite "cltoare" , histiocitele
SNC - sunt microgliile, celulele Kupffer, macrofagele alveolare

6.1. Ciclul de via al monocitelor i macrofagelor

Monocitele din mduv rmn n spaiile medulare aproximativ 24 ore, apoi apar rapid n
snge
au ritm rapid de rennoire (nu au depozit n mduv)
Circuitul monocitelor este unidirecional: mduv snge esuturi
cu ajutorul moleculelor de adeziune migreaz prin pereii vasculari spre diverse esuturi
i organe
n esuturi, nu se mai rentorc n circulaie i devin active funcional, transformndu-se n
macrofage, unele devenind macrofage tisulare fixe, altele se rentorc n snge
triesc n esuturi cteva luni, dup care sunt distruse n alveolele pulmonare i lumenul
intestinal

6.2. Funciile monocitelor i macrofagelor

1.fagocitoza
simpl, neimun monocitul sau macrofagul ader de particula de fagocitat pe care apoi o
nglobeaz
- imun sau opsonic: antigenul este recunoscut mai nti de anticorpul specific, rezultnd
complexul antigen-anticorp, care se fixeaz apoi pe monocit sau macrofag prin fragmentul Fc al
Ig.
2. funcie imunitar
v prezint antigenul prelucrat Ly
v secret IL-1 care activeaz Ly T
3. rol n aprarea antitumoral
secret proteine cu proprieti antitumorale (TNF = factor de necroz
tumoral)
reine ionii de Fe care ar trebui s intre n celula tumoral
13

4. funcie secretorie

factori de coagulare i fibrinoliz (V, VII, IX, X, tromboplastina, protrombina )

proteine de fixare: transferina, transcobalamina II
factori de cretere pentru limfocitele B i T
citokine: IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, FSC-GM, interferon i

6.3. Patologia fagocitelor mononucleare

Macrofagele mpreun cu neutrofilele formeaz sistemul major de aprare antimicrobian
(imunitatea nespecific)!!!!!
Monocitoze:
asociate infeciilor bacteriene: tuberculoz, febr tifoid, tifos exantematic, sifilis, boli
pulmonare, infestri cu protozoare;
boli neoplazice hematologice (leucemiile monocitare i mielo-monocitare, limfoame
maligne, boli mieloproliferative, mielom multiplu);
boli neoplazice nehematologice (neoplasm de ovar, sn, tract gastro-intestinal);
n unele reacii medicamentoase .

Monocitopenii:
n toate situaiile cu insuficien renal
aplazia medular
leucemia cu celule proase
dup corticoterapie (dup tratament cu Prednison)

14

15