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FACULTAD DE INGENIERA
PROGRAMA INGENIERA DE ALIMENTOS
Asignatura
Tema
:
:
Biotecnologa
Fermentaciones
GUA DE LABORATORIO
CULTIVO DE LEVADURAS
1. OBJETIVOS
1.1 Objetivo General
Aplicar conceptos bsicos de microbiologa industrial en la produccin de
levaduras a partir de un cultivo puro, mediante tcnicas que permitan
medir la cantidad de biomasa producida.
1.2 Objetivos Especficos
2. INTRODUCCIN
Las levaduras son organismos heterotrficos que pueden usar azcares
y una variedad de compuestos orgnicos como fuente de nutrientes. Son
hongos unicelulares no filamentosos, de forma ovoide o esfrica y que
se reproducen por gemacin o por fisin.
El caldo de cultivo de las levaduras debe contener todos los nutrientes
necesarios para su desarrollo. Por ejemplo, para el crecimiento de la
levadura ms utilizada industrialmente, la Saccharomyces cerevisiae, se
Cantidad
80 g
1,5 ml
1,0 g
1,5 g
500 ml
Placa cern
Agitador de vidrio
Gasa
Algodn
Mechero de gas
Biorreactor
Incubadora
orbital
de
agitacin
Melaza*
Levadura Comercial
Solucin de cloruro frrico al 10%
Fosfato trisdico
rea
cido clorhdrico diluido (aproximadamente al 3,5%)
4.3 Montaje
Se usar el Erlenmeyer de 1000 ml como Biorreactor de laboratorio, se
acondicionar un tapn microbiolgico para evitar contaminacin y se
incubarn a 30 C en una incubadora de agitacin orbital.
Biorreactor opcional:
Se utilizar un montaje de biorreactor de laboratorio de entre 1 y 3 L.
Para ello se emplearn frascos de los volmenes indicados con tapas
metlicas que cierren hermticamente. Se acondicionar un sistema de
aireacin que constar de una bomba de acuario con la cual se pretende
adicionar el suficiente aire para el desarrollo del proceso de cultivo de
levadura. El aire se conducir al biorreactor por un sistema de
mangueras. Se debe disponer de una vlvula de paso a la entrada del
biorreactor para controlar el flujo de aire entrante. De la bibliografa
disponible se debe definir cul debe ser el dimetro de los orificios de la
rejilla de burbujeo del sistema de aireacin.
Como uno de los objetivos del biorreactor es poder obtener fcilmente
muestras cuyo volumen oscile entre los 40-50 mL, se debe acondicionar
una jeringa con capacidad de 50 ml, para que por succin se obtengan
las distintas muestras. Igualmente se deben ubicar pinzas de presin
que estrangulen la manguera por donde se succionan las muestras
durante el tiempo en que stas no se tomen.
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Sistema de
Tapn
Agitacin
Toma de
Muestras
Tapn
4.5. Resultados
Consignar en la Tabla 2 los datos correspondientes a las concentraciones
de biomasa y a los valores de grados Brix durante la marcha de la
fermentacin. Se recomienda tomar muestras cada cuatro horas. En
caso de no ser posible tomar las muestras cada cuatro horas, justificar la
disminucin en el nmero de muestras durante las 48 horas de
fermentacin.
4h
Concentracin celular
(g/L en peso seco)
Concentracin de
azcares g/L del caldo
de fermentacin
Concentracin
(%)
4.3.
10
11
12
X
(g/L)
X/ t
-
(1/X)*( X/
t)
-
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
Tabla 5. Comparacin de los datos experimentales y los arrojados por el
modelo.
Tiempo
(h)
0
Xexp
Xmod
(g/L)
(g/L)
promedio =
5.4. Anlisis de Resultados
5.4.1. Interprete la Figura 2 haciendo nfasis en la presencia de mximos
y su relacin con la fase de crecimiento.
5.4.2. Indique la ecuacin de regresin para la Figura 3. Igualmente
muestre el coeficiente de regresin. Cul es el sentido fsico de
este coeficiente?
5.4.3. Cmo se justifica la exclusin de puntos de la figura 3 con el fin
de mejorar los resultados de la regresin lineal?
5.4.4. Cul es la utilidad de los modelos matemticos de
fermentaciones?
5.4.5. Qu otros modelos matemticos pueden aplicarse a los datos
experimentales obtenidos?
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