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PARASITOLOGIE
HUMAINE
TROPICALE
___________
(Notes pratiques)
SEPTEMBRE 2008
Trichostrongylus spp.....................................................................................................................................................44
Wuchereria bancrofti ....................................................................................................................................................45
Brugia malayi................................................................................................................................................................46
Brugia timori.................................................................................................................................................................47
Loa loa ..........................................................................................................................................................................48
Onchocerca volvulus.....................................................................................................................................................49
Mansonella streptocerca...............................................................................................................................................50
Mansonella ozzardi .......................................................................................................................................................51
Mansonella perstans .....................................................................................................................................................52
TABLEAU COMPARATIF DES MICROFILAIRES............................................................................................................................... 53
PROTOZOAIRES ........................................................................................................................................... 54
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
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AMIBES ............................................................................................................................................................................54
Entamoeba histolytica...................................................................................................................................................54
Entamoeba dispar .........................................................................................................................................................54
Entamoeba hartmanni...................................................................................................................................................54
Entamoeba coli .............................................................................................................................................................54
Endolimax nanus...........................................................................................................................................................54
Iodamoeba butschlii......................................................................................................................................................54
Entamoeba gingivalis....................................................................................................................................................54
Naegleria fowleri ..........................................................................................................................................................54
Acanthamoeba spp. .......................................................................................................................................................54
FLAGELLES.....................................................................................................................................................................54
Dientamoeba fragilis.....................................................................................................................................................54
Giardia lamblia.............................................................................................................................................................54
Chilomastix mesnili.......................................................................................................................................................54
Pentatrichomonas hominis............................................................................................................................................54
Trichomonas vaginalis..................................................................................................................................................54
Trypanosoma brucei gambiense ...................................................................................................................................54
Trypanosoma brucei rhodesiense .................................................................................................................................54
Trypanosoma cruzi........................................................................................................................................................54
Trypanosoma rangeli ....................................................................................................................................................54
Leishmania spp. ............................................................................................................................................................54
CILIES...............................................................................................................................................................................54
Balantidium coli............................................................................................................................................................54
SPOROZOAIRES..............................................................................................................................................................54
Plasmodium falciparum ................................................................................................................................................54
Plasmodium vivax .........................................................................................................................................................54
Plasmodium ovale .........................................................................................................................................................54
Plasmodium malariae ...................................................................................................................................................54
Plasmodium knowlesi....................................................................................................................................................54
TABLEAU COMPARATIF DES ESPCES DE PLASMODIUM EN FROTTIS SANGUIN :............................................................... 54
TABLEAU COMPARATIF DES ESPCES DE PLASMODIUM EN GOUTTE PAISSE : ............................................................... 54
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Coloration au Bleu de toluidine O (Chalvardjian et all, 1963, modifie par Marty et all 1981): ................................54
EXAMEN PARASITOLOGIQUE DUNE SCRETION VAGINALE : ..............................................................................................54
EXAMENS PARASITOLOGIQUES DU SANG : ..........................................................................................................................54
Examen direct : .............................................................................................................................................................54
Frottis sanguin :............................................................................................................................................................54
Goutte paisse :.............................................................................................................................................................54
Woo :.............................................................................................................................................................................54
QBC (Quantitative Buffy-Coat) : ..................................................................................................................................54
Mthode de Knott :........................................................................................................................................................54
Mthode de Strout :.......................................................................................................................................................54
Mini colonne mAECT : .................................................................................................................................................54
EXAMENS PARASITOLOGIQUES DERMIQUE :........................................................................................................................54
Skin snip (biopsie cutane exsangue): ..........................................................................................................................54
Scarification profonde : ................................................................................................................................................54
Exsudat dune lsion cutane : .....................................................................................................................................54
EXAMENS PARASITOLOGIQUES DUN SUC GANGLIONNAIRE :..............................................................................................54
EXAMENS PARASITOLOGIQUES DUNE PONCTION DE MOELLE OSSEUSE : ............................................................................54
EXAMENS PARASITOLOGIQUES DUN TISSU MOU (FOIE, RATE) :..........................................................................................54
EXAMENS PARASITOLOGIQUES DUN LIQUIDE CPHALO-RACHIDIEN : ................................................................................54
Numration des leucocytes : .........................................................................................................................................54
Examen direct : .............................................................................................................................................................54
Examen aprs centrifugation : ......................................................................................................................................54
Examen aprs double centrifugation : ..........................................................................................................................54
Evaluation des protines totales : .................................................................................................................................54
Evaluation des protines par la technique de Sicard et Cantaloube : ..........................................................................54
Evaluation des globulines par la raction de Pandy : ..................................................................................................54
FORMOL GEL TEST : ............................................................................................................................................................54
PREPARATION DES REACTIFS ET DES COLORANTS............................................................................... 54
1.
ACIDE ACETIQUE A 5 % (V/V) (POUR CLAIRCISSEMENT DES PROGLOTTIS) : ......................................................54
2.
ACIDE PICRIQUE (POUR COLORATION LHMATOXYLINE FERRIQUE) :..............................................................54
3.
ACIDE TRICHLOROACETIQUE A 30 % (P/V) (POUR VALUATION DES PROTINES DU LCR) : ...........................54
4.
ALBUMINE DE MAYER (POUR COLORATION LHMATOXYLINE FERRIQUE) : ...................................................54
5.
ALCOOL ACIDE DE ZIEHL 3 %(V/V) (POUR COLORATION DE ZIEHL NEELSEN ET L HMATOXYLINE
FERRIQUE) : ........................................................................................................................................................................54
6.
ALCOOL AMMONIACAL (POUR COLORATION LHMATOXYLINE FERRIQUE) : .................................................54
7.
BLEU DE METHYLENE (POUR COLORATION DE ZIEHL-NEELSEN) : .....................................................................54
8.
BLEU DE TOLUIDINE 0 (POUR COLORATION AU BLEU DE TOLUIDINE O) : ............................................................54
9.
EAU FORMOLEE A 2 % (V/V) (POUR LA MTHODE DE KNOTT) : ...........................................................................54
10.
EAU PHYSIOLOGIQUE NACL 0,85 % (P/V) (POUR EXAMENS FRAIS) : .......................................................54
11.
EAU PHYSIOLOGIQUE FORMOLEE A 10 % (V/V) (POUR CONSERVATION DES SELLES) : ..............................54
12.
EAU TAMPONNEE (POUR COLORATION DE GIEMSA) :......................................................................................54
PREPARATION A BASE DE POUDRE (selon Sorensen) :..........................................................................................54
13.
EAU TAMPONNEE (POUR COLORATION DE GIEMSA) :......................................................................................54
PREPARATION A BASE DE COMPRIMES : ..............................................................................................................54
14.
ETHANOL A 70 % (V/V) (ANTISEPTIQUE ET COLORATION LHMATOXYLINE FERRIQUE) :..............................54
15.
FUCHSINE DE ZIEHL (POUR COLORATION DE ZIEHL NEELSEN CHAUD ET LHMATOXYLINE FERRIQUE) : 54
16.
GLYCEROL-VERT DE MALACHITE (POUR K ATO-K ATZ) : ...........................................................................54
17.
HYDROXYDE DE POTASSIUM A 1 % (P/V) : .................................................................................................54
18.
HYDROXYDE DE SODIUM A 1 % (P/V) : ........................................................................................................54
19.
LUGOL FORT SELON DANTONI (POUR EXAMENS DES SELLES) : .......................................................................54
20.
PEPSINE 2 % EN HCL 0.5 % (RECHERCHE DE TRICHINES) : ................................................................................54
21.
REACTIF DE PANDY (POUR MISE EN VIDENCE DES GLOBULINES DANS UN L.C.R.) : .....................................54
22.
REACTIF DE SULFATATION (POUR COLORATION AU BLEU DE TOLUIDINE O) :..............................................54
23.
SAF (SODIUM-ACETATE/ACETIC ACID/FORMALIN POUR FIXATION DES PARASITES DANS LES SELLES) : ..............54
24.
SOLUTION DHEMATOXYLINE FERRIQUE (POUR COLORATION LHMATOXYLINE FERRIQUE) : ............54
25.
SOLUTION SATUREE EN CHLORURE DE SODIUM (WILLIS MODIFIE) :...................................................54
26.
SOLUTION SATUREE EN SULFATE DE ZINC [33% P/V] (WILLIS MODIFIE) : ............................................54
27.
TRCK (LIQUIDE DE DILUTION POUR NUMRATION DES GLOBULES BLANCS) : ...................................................54
ANNEXES : ................................................................................................................................................... 54
ANNEXE 1 : RELATION ENTRE LA VITESSE DE ROTATION DUNE CENTRIFUGEUSE ET LA FORCE CENTRIFUGE.......... 54
ANNEXE 2 : TABLEAU RECAPITULATIF DES UFS DHELMINTHES .......................................................................................... 54
ANNEXE 3 : CARACTERISTIQUES IMPORTANTES POUR LE DIAGNOSTIC DES HELMINTHES PRARASITES (SAUF
FILAIRES).............................................................................................................................................................................................. 54
ANNEXE 4 : TABLEAU RECAPITULATIF DES FORMES VEGETATIVES DES PROTOZOAIRES INTESTINAUX ...................... 54
ANNEXE 5 : TABLEAU RECAPITULATIF DES KYSTES (OU DES OOCYSTES) DES PROTOZOAIRES INTESTINAUX ........... 54
ANNEXE 6 : TABLEAU COMPARATIF DES PRINCIPALES MICROFILAIRES HUMAINES ........................................................... 54
ANNEXE 7 : MORPHOLOGIE DES ELEMENTS SANGUINS SUR FROTTIS COLORE AU MAY-GRNWALD-GIEMSA............ 54
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
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ABREVIATIONS............................................................................................................................................. 54
QUELQUES RESOURCES INTERNET .......................................................................................................... 54
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Le phylum Nmathelminthes [vers ronds, non segments, systme digestif complet, sexes spars, peau
(ou cuticule) solide] avec une classe importante :
les Nmatodes.
Pour les Protozoaires [parasites unicellulaires], une classification simplifie, plus pratique pour le diagnostic de
laboratoire mdical est aussi utilise : Cette classification simplifie repose principalement sur le type de
mobilit du parasite :
Le Groupe des Amibes : Dplacement laide de pseudopodes, les formes parasitaires sont
toujours extracellulaires.
Le Groupe des Flagells : Dplacement par un ou des flagelle(s) qui ne sont cependant pas
toujours prsents pour le stade de dveloppement impliqu en pathologie humaine.
Le Groupe des Cilis : Dplacement et capture des aliments par le jeu de cils couvrant tout
lorganisme.
Le Groupe des Sporozoaires : Pas de mode de locomotion vident, les formes parasitaires
sont gnralement intracellulaires.
Pour quelques parasites, une classification nest pas encore bien dfinie.
Quelques autres parasites soit bactriens, soit fongiques sont aussi abord dans ces notes, en raison de
similitudes techniques pour les mettre en vidence.
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INTRODUCTION A LA MICROSCOPIE
Description du microscope :
Exemple : Olympus, modle CHK
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Objectif
10x
Basse
40x
Intermdiaire
100x
Haute
Diaphragme
+/- ferm
+/- ouvert
Ouvert
Huile
immersion
Non
Non
Oui
Position
du Miroir
Limites et usages
Plat
30 - 500 m
Recherche des ufs, des
larves et des cilis.
(Entomologie).
Plat
5 - 30 m
Dtails des ufs, des larves
et des cilis.
Recherche de certains
protozoaires frais.
(Hmatologie frais).
Concave
0.25 - 5 m
Prparations colores, y
compris pour la recherche de
certains protozoaires.
Objectif immersion :
Les rayons lumineux qui traversent le systme optique du microscope rencontrent diffrents milieux (air, verre,
etc.), avec des indices de rfraction diffrents. En passant dun milieu un autre, ces rayons seront dvis et
ventuellement perdus dans le systme. [Le mme phnomne se passe pour un bton partiellement immerg
dans de leau qui apparat comme bris, parce que les rayons lumineux passant dun milieu (eau) lautre (air)
sont rfracts (dvis) de leur chemin original]. Le degr de dviation dpend du pouvoir rfractant du milieu,
appel indice de rfraction, dont le symbole est n . Lindice de rfraction est dtermin par la loi de Snell.
Quelques valeurs typiques sont donnes ci-dessous :
Air : n = 1.000
Eau : n = 1.330
Verre vitre normal : n = 1.500
Huile immersion : n = 1.515
Baume du Canada (milieu de montages microscopiques) : n = environ 1.5
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Pour les microscopes lectriques, diminuer lintensit lumineuse au maximum (potentiomtre) avant
dteindre le microscope (interrupteur). Ceci permet de prolonger la dure de vie de la lampe.
Prvoir une (des) lampe(s) de rechange. Conserver prcieusement les caractristiques et les
fournisseurs de la lampe.
A la fin du travail, liminer lhuile de lobjectif immersion laide dun papier doux (un papier
hyginique doux non pelucheux peut tre utilis). Lhuile durci en schant et rend limage trouble.
En cas de dpt dhuile, il est possible de nettoyer lobjectif immersion en imbibant trs
lgrement un papier doux avec trs peu de xylne (ou dun mlange alcool/ther 1/1 v/v) puis
essuyer avec un papier doux sec.
Les autres lentilles seront aussi nettoyes avec un autre papier doux (viter tout contact entre les
autres lentilles et lhuile). Certaines lentilles synthtiques ne rsistent pas aux solvants
organiques : Vrifier le(s) type(s) de solvant(s) utilisable(s) pour chaque microscope dans
leurs notices dutilisation.
Ne jamais laisser le tube sans oculaires : Les poussires et les spores de champignons pourraient
entrer dans le tube.
Eliminer la poussire laide dun petit pinceau et dune poire en caoutchouc.
Recouvrir le microscope de sa housse et ranger le en fonction des conditions locales.
Protger le microscope des chocs. En cas de transport, utiliser une boite prvue cet effet, en y
fixant bien le microscope.
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Exemples :
Llment au centre est un globule rouge.
A 1 heure se situe une plaquette sanguine entre deux globules rouges.
Llment 2 heures est un neutrophile.
Llment entre 4 et 5 heures est un monocyte.
Llment entre le centre et 10 heures est un lymphocyte.
Llment sur le bord 8 heures est une partie de lymphocyte.
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Calibration du microscope :
Principe :
La taille est un critre important de dtermination de nombreux parasites, tout particulirement lorsqu'il
s'agit de kystes de protozoaires ou d'ufs dhelminthes. Il est possible davoir une premire estimation
de la taille par comparaison avec le diamtre du champ microscopique observ : En divisant le champ
de vision des oculaires par le grossissement des objectifs, on obtient le vrai diamtre du champ
microscopique observ. On ne tient pas compte du grossissement des oculaires, mais on doit tenir
compte du facteur de tube. Le diamtre vrai obtenu doit encore tre divis par le facteur tube pour
obtenir le diamtre du champ observ en mm.
Le champ de vision (field of view) indique le diamtre en mm de limage intermdiaire dans loculaire
(c'est--dire le diamtre du diaphragme circulaire qui limite limage et se trouve approximativement au
milieu de loculaire. Il est indiqu gnralement sur loculaire, juste aprs le grossissement (exemples :
10x/25, 10x/20, 6x/20,). Le facteur de tube est une caractristique du microscope (la plupart du
temps = 1, vrifier dans la manuel dutilisation du microscope).
Exemple : des oculaires 10x/22 sont utiliss avec un objectif 10 x sur un microscope avec un
facteur de tube de 1. Cette combinaison fournit un champ objet de (22 :10 ):1 = 2.2 mm
Soit pour nos microscopes Olympus CH2 (facteur de tube = 1) :
Oculaires
10x 18L
10x 18L
10x 18L
10x 18L
Objectifs
4x
10 x
40 x
100 x
Diamtre du champ
microscopique observ
4.5 mm
1.8 mm
0.45 mm
0.18 mm
Il est galement possible davoir une premire estimation de la taille dun parasite par comparaison
avec un lment de taille connu (parasites comme S. mansoni ou T. trichiura, globules rouges, etc.).
Pour mesurer avec prcision des lments qui se trouvent dans un champ microscopique, il est
ncessaire que loculaire possde une chelle de mesure (micromtre oculaire). Un micromtre
oculaire est un oculaire muni dune lentille portant grave une chelle, le plus souvent divise en 100
graduations. Ces graduations auront une valeur diffrente selon le grossissement de lobjectif du
microscope.
Le micromtre oculaire doit donc tre calibr pour chaque objectif de chaque microscope. La
calibration consiste donner une valeur en m pour chaque graduation et pour chaque objectif par
comparaison avec une mesure de rfrence. La mesure de rfrence est un micromtre objectif (lame
porte-objet en verre portant une graduation longue de 1 2 mm, dont les plus petites divisions sont
distantes de 10 m exactement). Vu le prix et lusage trs limit dun micromtre objectif, il peut tre
remplac, sans grande perte de prcision, par une cellule de numration. Les cellules de numrations
sont utilises en hmatologie pour dnombrer des lments. Elles se retrouvent dans chaque
laboratoire
Matriel ncessaire :
Microscope, micromtre oculaire, (micromtre objectif ou) cellule de numration, papier optique, huile
immersion.
Calibration dun objectif :
1. Placer une cellule de numration (Neubauer double improved par exemple) sur la platine du
microscope, et mettre la partie quadrille de la cellule au centre du champ microscopique.
2. Enlever loculaire dont la dioptrie nest pas rglable et remplacer le par le micromtre oculaire
talonner.
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Cellules de Neubauer
(Double improved)
Micromtre oculaire
Calibration du micromtre
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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES
PROTOZOAIRES
AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES
CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES
CLASSIFICATION
INCONNUE
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Dveloppement des
ufs dans leau*
miracidium
Dveloppement du
miracidium dans un
mollusque sporocystes,
rdies, cercaires
Mtacercaires dans
des poissons
Mtacercaires
dans des crustacs
* Sauf pour Opisthorchis spp., Heterophyes spp. et Metagonimus spp., pour lesquels les ufs doivent dabords
tre ingrs par le mollusque, avant de librer les miracidium.
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Schistosoma mansoni
Distribution gographique :
Afrique tropicale
Amrique tropicale
Moyen Orient
Htes dfinitifs :
Homme
Rongeurs (Amrique
principalement)
Singes (Afrique
principalement)
Famille :
Classe :
Schistosomatidae
Trmatodes
Pathologie :
Nom commun :
Schistosome intestinal
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Mollusques deau
douce :
Biomphalaria spp.
Localisation de ladulte :
Veines msentriques infrieures (gros intestin).
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation,
[technique de Kato-Katz : Pour enqutes pidmiologiques].
Recherche des ufs dans une biopsie rectale.
Srologie (sur base des CAA circulating anodic antigen et des CCA circulating cathodic antigen) :
- Recherche des anticorps (diffrentes techniques).
- Recherche des complexes immuns circulants (diffrentes techniques).
[Recherche des antignes dans les URINES (CCA, dtection sur strip lateral flow through ou en ELISA)]
Morphologie des ufs :
Dimensions :
110-175 m x 45-70 m.
Forme :
Ovode ou asymtrique en
forme de bouteille.
Coque :
Contenu :
Embryonn : miracidium
(parfois mobile).
Couleur :
Gris jaune.
Caractristiques :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
Si lperon nest pas visible, il est possible de retourner luf en appuyant dlicatement sur la lamelle pour le faire apparatre.
Comme les ufs ne se librent pas facilement de la paroi intestinale, des examens de selles rpts ou une biopsie rectale sont envisager.
Il est parfois possible de retrouver des ufs de S. mansoni dans les urines (ponte dans les veines vsicales). La coloration de Ziehl-Neelsen
peut alors tre utile.
Les tests srologiques sont groupe-spcifiques. Des ractions croises avec dautres trmatodes sont possibles. La combinaison de deux
tests srologiques pour la recherche des anticorps circulant, un test Elisa et un test IHA donne une sensibilit de lordre de 90 %. Les
anticorps peuvent persister des annes aprs un traitement efficace.
Les ufs apparaissent dans les selles 25 60 jours aprs linfestation (priode pr patente). La ponte quotidienne est de lordre de 100 300
ufs par femelle adulte. La dure de vie du ver adulte est estime entre 2 et 18 ans.
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Schistosoma japonicum
Famille :
Classe :
Schistosomatidae
Trmatodes
Distribution gographique :
Nom commun :
Extrme orient
(Chine, Core,
Philippines, Sulawesi, )
Schistosome
Intestinal
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Mollusque amphibie
deau douce :
Homme
Animaux domestiques
(chien, chat, chvre,
porc, cheval, buf,
buffle,)
Animaux sauvages :
(Rongeurs et carnivores)
Pathologie :
Oncomelania spp.
Localisation de ladulte :
Veines msentriques suprieures (intestin grle).
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation,
[technique de Kato-Katz : Pour enqutes pidmiologiques].
[Recherche des ufs dans une biopsie rectale].
Srologie (sur base des CAA circulating anodic antigen et des CCA circulating cathodic antigen) :
- Recherche des anticorps (diffrentes techniques).
- Recherche des complexes immuns circulants (diffrentes techniques).
[Recherche des antignes dans les URINES (CCA, dtection sur strip lateral flow through ou en ELISA).]
Morphologie des ufs :
Dimensions :
68 100 m x 45 80 m.
Forme :
Rond ou ovale.
Coque :
Contenu :
Embryonn : miracidium
(parfois mobile).
Couleur :
Caractristiques :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
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Schistosoma mekongi
Distribution gographique :
Le long du Mkong (Laos,
Cambodge, Thalande), Malaisie
Htes dfinitifs :
Homme
Animaux domestiques
(chien, chat, chvre,
porc, cheval, buf,
buffle,)
Animaux sauvages :
(Rongeurs et carnivores)
Famille :
Classe :
Schistosomatidae
Trmatodes
Nom commun :
Schistosome intestinal
Pathologie :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Mollusque deau
douce :
Tricula aperta.
Localisation de ladulte :
Veines msentriques suprieures (intestin grle).
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation,
[technique de Kato-Katz : Pour enqutes pidmiologiques].
Recherche des ufs dans une biopsie rectale (peu utile).
Srologie (sur base des CAA circulating anodic antigen et des CCA circulating cathodic antigen) :
- Recherche des anticorps (diffrentes techniques).
- Recherche des complexes immuns circulants (diffrentes techniques).
[Recherche des antignes dans les URINES (CCA, dtection sur strip lateral flow through ou en ELISA).]
Morphologie des ufs :
Dimensions :
51 73 m x 39 66 m.
Forme :
Rond ou ovale.
Coque :
Contenu :
Embryonn : miracidium
(parfois mobile).
Couleur :
Caractristiques :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
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Schistosoma intercalatum
Distribution gographique :
Afrique centrale : Congo, Rpublique
Centrafricaine, Gabon, Nigeria,
Cameroun, Burkina Faso, Mali,...
[petits foyers limits quelques
villages].
Htes dfinitifs :
Homme
Rongeurs ?
Famille :
Classe :
Schistosomatidae
Trmatodes
Nom commun :
Pathologie :
Schistosome
intestinal
Htes
intermdiaires :
Mollusques deau
douce :
Bulinus spp.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation,
[technique de Kato-Katz : Pour enqutes pidmiologiques].
Recherche des ufs dans une biopsie rectale.
Srologie (sur base des CAA circulating anodic antigen et des CCA circulating cathodic antigen) :
- Recherche des anticorps (diffrentes techniques).
- Recherche des complexes immuns circulants (diffrentes techniques).
[Recherche des antignes dans les URINES (CCA, dtection sur strip lateral flow through ou en ELISA).]
Morphologie des ufs :
Dimensions :
140 240 m x 50 85 m.
Forme :
Symtrique, en losange, un
ple arrondi.
Coque :
Mince, lisse.
Contenu :
Embryonn : Miracidium
(parfois mobile).
Couleur :
Caractristiques :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
Comme les ufs ne se librent pas facilement de la paroi intestinale, des examens de selles rpts ou une biopsie rectale sont envisager.
Il est parfois possible de retrouver des ufs de S. intercalatum dans les urines (ponte dans les veines vsicales). La diffrentiation peut se
faire au Ziehl-Neelsen.
Il existe aussi des hybrides naturels entre S. haematobium et S. intercalatum.
Les tests srologiques sont groupe-spcifiques. Des ractions croises avec dautres trmatodes sont possibles. La combinaison de deux
tests srologiques pour la recherche des anticorps circulant, un test Elisa et un test IHA donne une sensibilit de lordre de 90 %. Les
anticorps peuvent persister des annes aprs un traitement efficace.
Les ufs apparaissent dans les selles 50 60 jours aprs linfestation. La ponte quotidienne est de lordre de 150 400 ufs par femelle
adulte. La dure de vie du ver adulte nest pas connue.
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Schistosoma haematobium
Distribution gographique :
Afrique
Moyen Orient
Indes.
(Portugal : petits foyers ?)
Htes dfinitifs :
Homme
(Singes)
(Porcs)
Classe :
Schistosomatidae
Trmatodes
Nom commun :
Pathologie :
Schistosome vsical
Htes intermdiaires :
Mollusques deau douce :
Famille :
Bulinus spp.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les urines : Technique de concentration par sdimentation ou par filtration.
Srologie (sur base des CAA circulating anodic antigen et des CCA circulating cathodic antigen) :
- Recherche des anticorps (diffrentes techniques).
- Recherche des complexes immuns circulants (diffrentes techniques).
Recherche des antignes dans les URINES (CCA, dtection sur strip lateral flow through ou en ELISA).
Morphologie des ufs :
Dimensions :
112 170 m x 40 70 m.
Forme :
Coque :
Contenu :
Embryonn : Miracidium
(parfois mobile).
Couleur :
Gris jaune.
Caractristiques :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
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8.
9.
Le nombre dufs prsents dans les urines varie au cours de la journe et montre un pic entre 10 et 14 heures.
Les ufs sont plus facilement retrouvs en fin de miction. Un stress de la vessie (mouvements, gonflement) aide au dcollement des ufs.
Mme chez des patients infects massivement, les ufs ne sont pas toujours prsents dans les urines. Il peut donc tre important de rpter
lexamen.
Si les urines ne sont pas examines rapidement, il est possible de retrouver des miracidies trs mobiles.
Les ufs apparaissent dans les urines 6 8 semaines aprs infestation.
Il est parfois possible de retrouver des ufs de S. haematobium dans les selles (ponte dans les veines msentriques, ou fistules). La
diffrentiation peut se faire au Ziehl-Neelsen.
Il existe aussi des hybrides naturels entre S. haematobium et S. intercalatum.
Les tests srologiques sont groupe-spcifiques. Des ractions croises avec dautres trmatodes sont possibles. La combinaison de deux
tests srologiques pour la recherche des anticorps circulant, un test Elisa et un test IHA donne une sensibilit de lordre de 90 %. Les
anticorps peuvent persister des annes aprs un traitement efficace.
Les ufs apparaissent dans les urines 54 84 jours aprs linfestation. La ponte quotidienne est de lordre de 20 300 ufs par femelle
adulte. La dure de vie du ver adulte est estime entre 3 et 7 ans.
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Fasciola hepatica
Distribution gographique :
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Herbivores
Homme
Rongeurs, porcs
carnivores,
Famille :
Classe :
Fasciolidae
Trmatodes
Nom commun :
Douve du foie
Pathologie :
Htes intermdiaires :
Mollusques amphibies
deau douce
Lymnea spp.
Mode de contamination :
Consommation de plantes aquatiques contamines
par des mtacercaires (exemple : cresson de rivire).
Localisation de ladulte :
Voies biliaires.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
Recherche des ufs dans un liquide de tubage duodnal.
Srologie : Recherche danticorps dirigs contre les produits dexcrtion et de scrtion (ES antigens).
[Recherche de coproantignes (ES antigens)].
Morphologie des ufs :
Dimensions :
120 150 m x 63 90 m.
Forme :
Coque :
Contenu :
Couleur :
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Le nombre dufs prsent dans les selles est souvent limit. Les examens rpts, les techniques de concentration ou le
tubage duodnal sont donc envisager.
La distinction microscopique entre F. gigantica, F. hepatica et Fasciolopsis buski est presque impossible. De plus, il existerait
aussi des hybrides naturels de F. gigantica et de F. hepatica. Une rponse du type prsence dufs de Fasciolidae est donc
la plus correcte.
Il est possible douvrir, sous microscope, lopercule de luf ( uf la coque ) en appuyant dlicatement sur la lamelle,
confirmant ainsi le diagnostic de Fasciolidae.
Il est possible dobserver des ufs de passage (ufs rsultant non dune infestation, mais de la consommation de foie
danimaux contamins par le ver adulte). Des examens de selles rpts aprs une dite alimentaire peuvent exclure cette
hypothse (pseudo distomatose).
Durant la phase dinvasion (migration des stades larvaires dans le parenchyme du foie [7 11 semaines]), on observe une
pathologie, mais sans prsence dufs dans les selles. Les tests srologiques sont donc trs importants durant cette priode.
Si la sensibilit est bonne (95 % 2 4 semaines aprs linfestation), il existe des ractions croises avec dautres trmatodes.
Des infestations non traites avec des douves dans les canaux biliaires peuvent cependant devenir progressivement
srongative en 1 an, vraisemblablement en raison de la suppression de la stimulation antignique.
Les ufs apparaissent dans les selles 11 17 semaines aprs linfestation. La ponte quotidienne est de lordre de 25.000
ufs par adulte hermaphrodite (mais peu arriveraient dans les selles [30 ufs par jours ?]]). La dure de vie du ver adulte est
estime plus de 25 ans.
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Fasciola gigantica
Distribution gographique :
Nom commun :
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Herbivores
Homme
Rongeurs, porcs
carnivores,
Mollusques aquatiques :
Famille :
Classe :
Fasciolidae
Trmatodes
Pathologie :
Lymnea spp.
Localisation de ladulte :
Voies biliaires.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
Recherche des ufs dans le liquide de tubage duodnal.
Srologie : Recherche danticorps dirigs contre les produits dexcrtion et de scrtion (ES
antigens).
[Recherche de coproantignes (ES antigens)].
Morphologie des ufs :
Dimensions :
135 190 m x 68 94 m.
Forme :
Coque :
Contenu :
Couleur :
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Les vers adultes de F. gigantica sont la plupart du temps striles, la recherche des antignes est alors une alternative diagnostique importante.
Si ce nest pas le cas, le nombre dufs prsent dans les selles est souvent limit. Les examens rpts, les techniques de concentration ou le tubage
duodnal sont donc parfois ncessaires.
La distinction microscopique entre F. gigantica, F. hepatica et Fasciolopsis buski est presque impossible (Il existerait aussi des hybrides naturels de F.
gigantica et de F. hepatica). Une rponse du type prsence dufs de Fasciolidae est donc la plus correcte.
Il est possible douvrir, sous microscope, lopercule de luf ( uf la coque ) en appuyant dlicatement sur la lamelle, confirmant ainsi le diagnostic
de Fasciolidae.
Il est possible dobserver des ufs de passage (ufs rsultant non dune infestation, mais de la consommation de foie danimaux contamins par le
ver adulte). Des examens de selles rpts aprs une dite alimentaire peuvent exclure cette hypothse (pseudo distomatose).
Durant la phase dinvasion (migration des stades larvaires dans le parenchyme du foie [7 11 semaines]), on observe une pathologie, mais sans
prsence duf dans les selles. Les tests srologiques sont donc trs importants durant cette priode. Si la sensibilit est bonne (95 % 2 4 semaines
aprs linfestation), il existe des ractions croises avec dautres trmatodes. Des infestations non traites avec des douves dans les canaux biliaires
peuvent cependant devenir progressivement srongative en 1 an, vraisemblablement en raison de la suppression de la stimulation antignique.
Les ufs apparaissent dans les selles 12 15 semaines aprs linfestation. La ponte quotidienne retrouve dans les selles serait de lordre de 30 ufs
par adulte hermaphrodite. Lesprance de vie du ver adulte est estime plus de 11 ans.
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Fasciolopsis buski
Distribution gographique :
Nom commun :
Douve intestinale
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Homme
Porc
Singe
Lapin
(Chien)
Famille :
Classe :
Fasciolidae
Trmatodes
Pathologie :
Hippeutis spp.,
Segmentina spp.
Localisation de ladulte :
Intestin grle.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
Morphologie des ufs :
Dimensions :
130 159 m x 78 98 m.
Forme :
Coque :
Contenu :
Couleur :
Caractristiques :
Hyperosinophilie.
Confusions possibles :
Remarques :
1. Ces ufs sont trs similaires aux Fasciola spp., mais habituellement prsents en grand nombre dans les selles.
Cette haute production rend les techniques de concentration peu utiles.
2. La distinction microscopique entre F. gigantica, F. hepatica et Fasciolopsis buski est presque impossible. Une
rponse du type prsence dufs de Fasciolidae est donc la plus correcte.
3. Il est possible douvrir, sous microscope, lopercule de luf ( uf la coque ) en appuyant dlicatement sur la
lamelle, confirmant ainsi le diagnostic de Fasciolidae.
4. Les ufs apparaissent dans les selles 12 20 semaines aprs linfestation. La ponte quotidienne est de lordre
de 16.000 ufs par ver adulte. La survie des vers adultes chez lhomme est estime 6 mois (contre jusqu 25
ans pour F. hepatica). Ces infestations seraient peu (pas) symptomatiques. Dans des cas extrmement rares, les
vers adultes se localisent dans le cerveau ou le myocarde.
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
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Clonorchis sinensis
(Opisthorchis sinensis)
Distribution gographique :
Douve de Chine.
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Homme.
Mammifres
piscivores.
Classe :
Opisthorchidae
Trmatodes
Nom commun :
Famille :
Pathologie :
1. Mollusques deau
douce. (Parafossarulus
spp., Alocinma spp.,
Bithynia spp.)
Voies biliaires.
Localisation de ladulte :
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
Recherche des ufs dans le liquide daspiration dun tubage duodnal (obstruction des voies biliaires).
Recherche des anticorps sriques (ELISA).
Morphologie des ufs :
Dimensions :
2635 m x 12-14 m.
Forme :
Amphore asymtrique,
(ovode).
Coque :
Contenu :
Embryonn (miracidium,
parfois mobile).
Couleur :
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Le nombre dufs prsent dans les selles est souvent peu lev, ncessitant des examens rpts et/ou des techniques de
concentration (sdimentation).
Il est trs difficile de distinguer microscopiquement les ufs dOpisthorchis sinensis de ceux dautres espces de douves
hpatiques infectant principalement les animaux : Opisthorchis felineus (tenuicollis) [Sud-est de lEurope, Europe centrale],
Opisthorchis viverrini [Sud-est de lAsie, Malaisie]. La biologie et la pathologie associe toutes ces douves hpatiques sont
comparables. Une rponse du type prsence dufs dOpisthorchidae/Heterophyidae est donc la plus correcte.
Il est trs difficile de distinguer microscopiquement les ufs dOpisthorchis sinensis de ceux dautres douves dont les ufs
se retrouvent dans les selles : Heterophyes heterophyes [bassin mditerranen, Moyen-Orient et Afrique occidentale],
Metagonimus yokogawai [Extrme-Orient, partie orientale de lex-URSS et Espagne (?)] et 13 autres espces dHeterophyidae
dcrites [Sud et Sud-est Asiatique, Australie, les du Pacifique, bassin mditerranen, Sud et Est de lEurope, Afrique
Occidentale]. En raison de la courte dure de vie du stade adulte, de sa localisation et de la faible rponse immunitaire de
lhte, les douves intestinales sont peu pathognes.
La salaison ou la fumaison du poisson ne sont pas toujours suffisantes pour tuer les mtacercaires.
Les ufs apparaissent dans les selles environ 1 4 semaines aprs linfestation. La ponte quotidienne est de lordre de 1.000
4.000 ufs par ver adulte. La dure de vie du ver adulte est estime jusqu plus de 25 ans.
Les tests srologiques sont peu utiles par manque de spcificit.
Clonorchis sinensis est lancien nom dOpisthorchis sinensis.
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Paragonimus spp.
Distribution gographique :
Sudest Asiatique (Japon, Laos,
Core, Taiwan, Chine, Thalande,
Malaisie, Philippines, Indes, Npal, )
Afrique : Cameroun, Libria, Nigeria,
Congo, RDC, Afrique du Sud, )
Amrique latine et du nord.
Htes dfinitifs :
Homme,
Flids, canids,
Singes, mangoustes,
Mustlids (loutres,)
Famille :
Classe :
Troglotrematidae
Trmatodes
Nom commun :
Pathologie :
Douve du poumon,
Douve pulmonaire.
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
1. Mollusque deau
douce : Oncomelania
spp, Thiaridae spp.
Localisation de ladulte :
2. Crustacs deau
douce : Crabes,
Poumons, (cerveau, autres organes).
crevisses, crevettes.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les crachats : Concentration par sdimentation aprs liqufaction du crachat.
[Srologie : Recherche des anticorps contre Paragonimus westermani.]
Morphologie des ufs :
Dimensions :
68 118 m x 39 67 m.
Forme :
Irrgulire ou ovode.
Coque :
Epaisseur ingale.
Contenu :
Couleur :
Caractristiques :
Confusions possibles :
DANS LES SELLES
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
En raison du risque de production darosols dangereux durant lexamen parasitologique, liminer la possibilit dune
tuberculose avant recherche parasitologique dans un crachat.
La recherche des ufs dans les crachats est assez difficile, rendant la srologie intressante, surtout pour de faibles
parasitmies. Les tests srologiques nont malheureusement pas de protocole standardis.
Les ufs ne se retrouvent dans les crachats que 2 3 mois aprs linfestation. Lesprance de vie du ver adulte est estime
entre 10 et 20 ans.
Il est possible douvrir, sous microscope, lopercule de luf ( uf la coque ) en appuyant dlicatement sur la lamelle,
confirmant ainsi le diagnostic.
Plusieurs parasites font un passage pulmonaire au stade larvaire (Ascaris, Ancylostomes, Strongyloides, ). Un examen de
crachats nest cependant pas indiqu pour retrouver ces parasites.
Une recherche des ufs dans les selles nest pas indique (les ufs ventuellement ingrs sont trop dilus et ressemble
fortement des ufs dAscaris non fconds). Par contre, si les ufs sont retrouvs dans les selles, un examen de crachat
est recommand (surtout pour exclure les confusions possibles).
La distinction morphologique des diffrentes espces de Paragonimus nest pas possible. [P. westermani, P. heterotremus, P.
miyazakii et P. skyrjabini (Asie, Afrique ?, Amrique du sud ?), P. africanus et uterobilateralis (Afrique), P. kellicotti (Amrique
du nord), P. mexicanus (Amrique latine), ]. Une rponse du type Paragonimus spp. serait donc plus correcte.
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HELMINTHES
(mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES
PROTOZOAIRES
AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES
CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES
CLASSIFICATION
INCONNUE
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Diphyllobothrium latum
Distribution gographique :
Classe :
Diphyllobothriidae
Cestodes
Nom commun :
Tnia du pcheur
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Homme.
Mammifres piscivores.
1. Petits crustacs :
(Cyclops spp. et
Diatomus spp.).
Famille :
Pathologie :
Mode de contamination :
Consommation de poissons deau douce infests par
des larves plrocercodes vivantes.
2. Poissons deau
Intestin.
douce (truites,
saumons,)
Mthodes diagnostiques :
Localisation de ladulte :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, (technique de concentration par sdimentation).
(Identification de segments gravides ventuellement prsents dans les selles).
Morphologie des ufs :
Dimensions :
58 76 m x 40 51 m.
Forme :
Ovode.
Coque :
Mince.
Contenu :
Couleur :
Assez fonc.
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Pas de distinction morphologique possible entre Diphyllobothrium latum, Diphyllobothrium cordatum (Europe du nord, Amrique du nord,),
Diphyllobothrium pacificum (Amrique du sud), qui infestent lhomme. Plus de 50 espces de Diphyllobothrium sont dcrites dont 13 peuvent infeste
lhomme. La rponse parasitologique correcte est donc Diphyllobothrium spp.
Comme les segments gravides du vers sont le plus souvent dcomposs dans lintestin, ils ne se retrouvent quexceptionnellement dans les selles.
Contrairement au Taeniidae, les proglottis mrs ventuellement retrouvs dans les selles sont plus larges que longs (2-4 mm x 10-12 mm).
En raison de la grande production journalire dufs (35.000 100.000 ufs par jours et par ver adulte), les techniques de concentration sont peu
utiles. Lesprance de vie dun vers adulte dans lintestin peut aller jusqu 30 ans.
Les ufs apparaissent dans les selles environ 30 45 jours aprs linfestation.
Les larves plrocercodes sont tues par la conglation du poisson -10 C pendant 24 heures. La salaison et le fumage ne sont pas toujours suffisants
pour tuer les larves.
La sparganose (ou plrocercodose) est une infestation dans laquelle lhomme est infest accidentellement par des larves procercodes ou
plrocercodes despces de Diphyllobothrium nayant que des animaux comme htes dfinitifs (ou des espces apparentes : Sparganum spp. et
Spirometra spp.). Lhomme joue alors le rle dhte paratnique (hte dans lequel le dveloppement du parasite nest pas complet) et les ufs ne sont
jamais retrouvs dans les selles. [Assez frquent en extrme orient ou traditionnellement des grenouilles frachement corches sont appliques sur les
yeux infects ou les plaies].
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Taenia saginata
Distribution gographique :
Nom commun :
Ver solitaire
ou
Tnia inerme
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Les bovids :
Homme
Famille :
Classe :
Taeniidae
Cestodes
Pathologie :
Tniase (F)
Beef tapeworm infection (En)
Teniasis (Es)
Mode de contamination :
Localisation de ladulte :
Intestin grle.
Mthodes diagnostiques :
Identification macroscopique de segments gravides limins en dehors des dfcations (ou dans
les selles). [cf. tableau comparatif avec T. solium]
Dcouverte des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
Dcouverte des ufs dans un scotch test anal.
(Dtection de coproantignes en dipstick : Bonne sensibilit, pas de diffrentiation despce).
(Srologie : Recherche danticorps spcifiques).
(Recherche dADN spcifique par PCR sur extraits fcaux avec diffrentiation despce).
Morphologie des ufs :
Dimensions :
31 43 m.
Forme :
Rond ou ovode.
Coque :
Contenu :
Couleur :
Gris fonc
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Lexamen des selles nest pas toujours positif : Les segments gravides (ou proglottis) sont librs intacts (mme entre les dfcations). Ceci
est moins vrai pour Taenia solium. Les ufs ou les segments matures se retrouvent dans les selles environ 10 12 semaines aprs
linfestation (phase de maturation).
La morphologie des ufs ne permet pas de distinguer Taenia saginata de Taenia solium. Dautres cestodes du genre Echinococcus spp. (ver
solitaire du chien,) produisent aussi des ufs morphologiquement identiques. Ces ufs ne sont cependant jamais retrouvs chez lhomme.
Seule lidentification des segments gravides (ou du scolex) permet la distinction despce. La rponse parasitologique correcte pour des ufs
retrouvs dans les selles est Taenia spp.
Un ver adulte est compos de +/- 200 segments. Chaque proglottis contient environ 100.000 ufs. Un adulte peut produire jusqu 600
millions dufs par an.
Les cysticerques sont tus par une cuisson approfondie de la viande ou une conglation de plus de 24 heures -20C.
Le terme solitaire est impropre : Plusieurs vers adultes peuvent infester un homme en mme temps.
La longvit dun ver adulte est estime jusqu plus de 35 ans.
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Taenia solium
Distribution gographique :
Nom commun :
Ver solitaire
ou
Tnia arm
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Le porc.
Lhomme (cysticercose)
Homme
Famille :
Classe :
Taeniidae
Cestodes
Pathologie :
Intestin grle.
Mthodes diagnostiques :
Identification macroscopique de segments gravides dans les selles (cf. tableau comparatif avec T.
saginata).
Dcouverte des ufs dans les selles : Examen direct, (technique de concentration par sdimentation).
(Dcouverte des ufs dans un scotch test anal).
(Dtection de coproantignes en dipstick : Bonne sensibilit, pas de diffrentiation despce).
(Srologie : Recherche danticorps spcifiques par Western Blot dans le srum ou le LCR, uniquement
pour la cysticercose).
(Recherche dADN spcifique par PCR sur extraits fcaux avec diffrentiation despce).
Imagerie mdicale (principalement utile pour la cysticercose)
Morphologie des ufs :
Dimensions :
31 43 m.
Forme :
Rond.
Coque :
Contenu :
Couleur :
Gris fonc
Luf est parfois entour dun
sac transparent (membrane
priovulaire).
Confusions possibles :
Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Lexamen direct nest pas toujours positif : Les ufs de Tnia solium sont plus rarement retrouvs libre dans les selles que ceux de Tnia
saginata (segments gravides intacts expulss par groupes de 3 6). Les ufs ou les segments matures se retrouvent dans les selles environ
5 12 semaines aprs linfestation. (phase de maturation).
La morphologie des ufs ne permet pas de distinguer Tnia saginata de Tnia solium. Dautres cestodes du genre Echinococcus spp. (ver
solitaire du chien,) produisent aussi des ufs morphologiquement identiques. Ces ufs ne sont cependant jamais retrouvs chez lhomme.
Seule lidentification des segments gravides (ou du scolex) permet la distinction despce. La rponse parasitologique correcte pour des ufs
retrouvs dans les selles est Tnia spp.
En cas de cysticercose, on retrouve dans 40 % des cas une localisation crbrale (hyperosinophilie). Une localisation oculaire (osinophilie
modre) ou une localisation musculaire ou sous-cutane plus asymptomatique sont aussi possibles. Les tests srologiques peuvent tre
ngatifs, surtout dans le cas danciennes infestations. Leur sensibilit est de lordre de 90 %, pour une spcificit proche de 97 %.
Les cysticerques sont tus par une cuisson approfondie de la viande ou une conglation de plus de 24 heures -20C.
Le terme solitaire est impropre : Plusieurs vers adultes peuvent infester un homme en mme temps.
La longvit dun ver adulte est estime jusqu plus de 25 ans.
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CARACTERISTIQUES
Taille du ver adulte
Scolex
Tnia saginata
Tnia solium
De 5 10 mtres de long
De 3 5 mtres de long
Entre 1 et 2 mm de large
4 ventouses
Pas de Rostre, pas de crochets
De lordre de 1 mm de large
4 ventouses
Rostre muni de crochets
De 12 15 mm de long
Trs ramifi :
De 15 32 ramifications unilatrales
Ramifications fines
De 10 12 mm de long
Peu ramifi :
De 7 16 ramifications unilatrales
Ramifications paisses
Mobiles :
(sortent spontanment de lanus)
Bovins
Cysticercus bovis
Peu de cysticerques
Pas de crochets
MUSCLES
MUSCLES OU SNC
N.B. :
Cysticerques dans les
muscles
(ou dans le Systme Nerveux
Central)
Remarques :
1. Les ufs ne permettent pas de faire un diagnostic despce.
2. En raison du risque de cysticercose en cas dingestion dufs (Tnia solium), manipuler les
vers adultes ou les segments de vers adultes avec grande prudence. Toujours manipuler les
segments laide dune pince. Lusage de gants doit tre systmatique.
3. Le diagnostic despce se fait sur laspect macroscopique des segments gravides (plus rarement sur le
scolex) :
Des proglottis trs mobiles donnent un diagnostic de certitude de Tnia saginata.
En cas de proglottis immobiles ou peu mobiles, il faut se baser sur les ramifications de lutrus
(aprs dcoloration lacide actique). Peu ramifi pour Tnia solium, trs ramifi pour Tnia
saginata. Pour viter les doutes en cas de 15 ou 16 ramifications unilatrales, examiner si
possible plusieurs segments.
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
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Vampirolepis nana
(Hymenolepis nana)
Distribution gographique :
Nom commun :
Cosmopolite, principalement
pourtour mditerranen,
Russie, Inde et Amrique.
Tnia nain
Petit ver solitaire
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Homme
Famille :
Classe :
Hymenolepididae
Cestodes
Pathologie :
Hymnolpiase (F)
Dwarf tapeworm infection, hymenolepiasis (En)
Himenolepiasis (Es)
Mode de contamination :
Vecteur :
Vers de farine ?
Intestin grle.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
(Ver adulte retrouv dans les selles)
Morphologie des ufs :
Dimensions :
40 60 m x 30 50 m.
Forme :
Coque :
Mince et lisse.
Contenu :
Couleur :
Caractristiques :
Hyperosinophilie modre.
Confusions possibles :
Remarques :
1. Hymenolepis nana est lancien nom de Vanpirolepis nana.
2. Les Hymenolepis sp. du rat et de la souris (Hymenolepis fraterna) sont morphologiquement identiques : Elles ont
cependant besoin dun hte intermdiaire (puces, blattes et vers de farine). Ces souches peuvent aussi infecter
lhomme. Une rponse du type prsence dufs dHymenolepididae serait donc parasitologiquement plus
correcte.
3. En raison de lautoinfestation, on retrouve souvent une intensit parasitaire importante (surtout chez les enfants).
Le nombre dufs retrouv dans les selles est souvent trs important, ne justifiant pas une technique de
concentration.
4. Les segments gravides sont dtruits au niveau intestinal, librant les ufs qui se retrouvent dans les selles.
5. Les ufs se retrouvent dans les selles environ 20 jours aprs linfestation.
6. Le ver adulte est un ver segment de 1,5 4 cm de long avec un scolex muni de 4 ventouses et de nombreux
crochets. Les vers adultes ont une dure de vie estime quelques mois.
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
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Hymenolepis diminuta
Distribution gographique :
Rongeurs
Homme (Zoonose)
Hymenolepididae
Cestodes
Pathologie :
Hymnolpiase (F).
rat tapeworm infection, hymenolepiasis (En).
Himenolepiasis (Es).
Htes intermdiaires :
Arthropodes :
Classe :
Nom commun :
Cosmopolite
mais trs rare (zoonose).
Favoris par un habitat
prcaire augmentant les
contacts entre les rongeurs et
la nourriture humaine.
Htes dfinitifs :
Famille :
Mode de contamination :
Ingestion de nourriture contamine par des insectes
infests par des larves cysticercodes de H. diminuta.
Localisation de ladulte :
Intestin grle.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation,
technique de concentration par flottaison.
(Ver adulte retrouv dans les selles).
Morphologie des ufs :
Dimensions :
70 86 m x 60 80 m.
Forme :
Coque :
Contenu :
Couleur :
Caractristiques :
Hyperosinophilie modre
Confusions possibles :
Remarques :
1. Les segments gravides sont dtruits au niveau intestinal, librant les ufs qui se retrouvent dans les selles.
2. Le ver adulte est un petit ver segment de 20 60 cm de long avec un scolex muni de 4 ventouses (sans
crochets). Les segments sont plus longs que larges.
3. Les ufs se retrouvent dans les selles environ 20 jours aprs linfestation. Lesprance de vie du ver est estime
entre 5 et 7 semaines.
4. Jusquen 2005, moins de 100 cas dinfestation humaine par Hymenolepis diminuta ont t publis.
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Echinococcus granulosus
Distribution gographique :
Nom commun :
Cosmopolite, principalement
dans des rgions o llevage
du mouton est important.
Kyste hydatique
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Les carnivores
(sauf lhomme)
Onguls
Famille :
Classe :
Taeniidae
Cestodes
Pathologie :
Homme
Mthodes diagnostiques :
Clinique.
Imagerie mdicale.
Srologie : Recherche danticorps spcifiques :
Test de dpistage par Indirect HmAgglutination (IHA), Indirect Fluorescent Antibody Test
(IFAT), ou Enzyme ImmunoAssays (EIA).
Test de confirmation par immunoblot dmontrant larc 5 en double diffusion
(Identification de protoscolex et de crochets libres dans un liquide de ponction.
lments retrouvs dans un kyste hydatique :
Confusions possibles :
Autres chinococcoses.
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
Il faut formellement dconseiller la ponction des kystes pour la dtection des protoscolex et des crochets libres
(risque trs important dessaimage). Cette ponction expose aussi le patient un risque de choc anaphylactique.
Les ufs des Echinococcus spp. (identiques ceux de Taenia spp.) ne sont jamais retrouvs dans des selles humaines.
Une srologie ngative nexclu pas le diagnostic (sensibilit de lordre de 90 %) : Anticorps indtectables en fonction de la
localisation, de lintgrit et de la vitalit des larves. La sensibilit est meilleure pour les localisations hpatiques ou osseuses
que pour les autres localisations. Les patients avec des kystes calcifis, morts ou en dgnrescence sont souvent
srongatifs.
La srologie peut tre faussement positive en cas dinfestation par dautres helminthes, de cancer ou de dsordres
immunologiques chroniques. Une raction faussement positive est aussi retrouve dans 5 25 % des patients avec une
neurocysticercose (Taenia solium) et pour des patients atteints par Echinococcus multilocularis, Echinococcus vogeli et
Echinococcus oligarthrus.
Dautres chinococcoses avec des cycles presque identiques peuvent se retrouver plus rarement chez lhomme : E.
multilocularis (chinococcose alvolaire, hmisphre nord (Suisse, France, Allemagne, Autriche), Taenia du renard avec
comme htes intermdiaires les rongeurs [homme] 8 cas humains en Belgique (Wallonie) entre 1998 et 2005, affection
gravissime, localisation hpatique et plus rarement pulmonaire, rnale ou mninge). E. vogeli (chinococcose polykystique,
Amrique centrale et du sud, Taenia du chien sauvage avec comme htes intermdiaires des rongeurs [homme], localisations
principales hpatiques ou pulmonaires). E. oligarthrus (chinococcose extrmement rare, Amrique centrale et du sud,
Taenia des flids avec comme htes intermdiaires des rongeurs [homme], localisation variables).
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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES
PROTOZOAIRES
AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES
CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES
CLASSIFICATION
INCONNUE
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Ascaris lumbricoides
Distribution gographique :
Nom commun :
Cosmopolite.
Ascaris.
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Homme.
Porc
Autres espces
animales ?
Super Famille :
Ascaridoidea
Nmatodes
Pathologie :
Ascaridiase (F)
Giant Roundworm infection, Ascariasis (En)
Ascaridiasis (Es)
Mode de contamination :
Et
sans vecteur
Classe :
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, (technique de concentration par sdimentation).
Identification macroscopique de vers adultes dans les selles ou les vomissements.
Radiographie (principalement pour des infestations par des vers adultes mles).
Srologie : recherche danticorps spcifiques (pour le stade larvaire ou les infestations par des vers adultes mles).
Morphologie des ufs fconds:
Dimensions :
Forme :
Coque :
Contenu :
Couleur :
45-84 m x 35-58 m.
Ovalaire et symtrique,
(sphrique)
Lisse, incolore, paisse, en gnral
entoure dune couche albumineuse
mamelonne, brune ou grise.
Masse centrale granuleuse unique et
ronde (zygote).
Brun jauntre, moins colors si
semi-dcortiqus.
78-105 m x 38-55 m.
Ellipsodale ou irrgulire
Lisse, incolore, paisse en gnral
entoure dune couche albumineuse
mamelonne, brune ou grise.
Granulations (gouttes) trs
rfringentes (cellules vitellines).
Brun jauntre, moins colors si semidcortiqus.
Confusions possibles :
ufs de Schistosoma japonicum ou S.
mekongi.
Cellules vgtales ou spores (carie du bl,
lycopode, ascospore de truffe,)
Pollens (Safran, artichaut,).
Ancylostomidae (ufs dcortiqus).
ufs de Fasciolidae.
ufs de Paragonimus spp.
ufs dAscaris suum (ascaris du porc).
Dioctophyma spp (dans les urines ?).
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Il doit sagir de luf le plus difficile identifier en raison de sa grande variabilit morphologique et de sa ressemblance avec des cellules vgtales.
Les ufs napparaissent dans les selles que 2 3 mois aprs linfestation (migration somatique et maturation sexuelle).
Les ufs ncessitent une maturation avant de devenir infestants : Dure variable en fonction de la temprature et de lhumidit (minimum 18 jours).
Le nombre dufs retrouvs dans les selles est souvent trs important (un ver femelle pond environ 200.000 ufs par jour). Les techniques de concentration sont
donc peu utiles.
Des formes larvaires dAscaris lumbricoides peuvent tre retrouves dans les crachats (technique non indique comme diagnostic).
Les Ascaris adultes, principalement les mles sont trs sensibles au stress (variation de temprature corporelle, prise de mdicaments, ) : Ils quittent le corps
par tous les orifices possibles. La dure de vie dun vers adulte dans lintestin est estime maximum 2 3 ans (20 ans ?).
Lascaris du porc (Ascaris suum) peut infester lhomme, mais il narrive gnralement pas maturit. Cette infestation se manifeste donc habituellement par une
larva migrans viscrale. Dans ce cas, les ufs ne sont jamais retrouvs dans les selles.
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Anisakis spp.
Distribution gographique :
(li la consommation de
poisson de mer crus)
Ascaris du hareng
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Mammifres marins :
phoques, marsouins,
Classe :
Ascaridoidea
Nmatodes
Nom commun :
Cosmopolite
Super Famille :
1. Crustacs
2. Poissons de mer
(HOMME)
(hte paratnique)
Pathologie :
Mthodes diagnostiques :
Clinique.
Srologie : Recherche danticorps spcifiques.
Mise en vidence de larves dans les tissus : Endoscopie, gastroscopie, biopsie sous endoscope).
Morphologie des ufs :
Dimensions :
Forme :
Coque :
Contenu :
Couleur :
Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :
Hyperosinophilie.
Confusions possibles :
Remarques :
1. Comme le parasite ne se dveloppe pas jusquau stade adulte chez lhomme (hte paratnique), les ufs
ne sont jamais retrouvs dans des selles humaines.
2. Le diagnostic srologique bien que peu sensible reste dintrt diagnostique.
3. Les larves peuvent survivre basse temprature (-5C), au saumurage et la fumaison jusqu 50 C. Une
conglation de 24 heures 20 C tue les larves.
4. Anisakis simplex et Anisakis marina rencontr trs rarement aux Pays-Bas depuis que lon congle suffisamment
et systmatiquement le poisson (maatjes).
5. Contracoecum, Phocanema et Pseudoterranova provoquant aussi des anisakiases sont frquents au Japon, mais
galement retrouvs rarement aux Belgique, au Chili, en Belgique, en Belgique et en Belgique.
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Super Famille :
Classe :
Ascaridoidea
Nmatodes
Toxocara canis
Distribution
gographique :
Nom commun :
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Canids
(Homme, en tant
quhte paratnique)
Pathologie :
Larva migrans viscrale ou oculaire, Toxocarose (F)
Visceral or ocular larva migrans, Toxocariasis (En).
Larva migrans visceral o ocular, Toxocariasis (Es).
Htes intermdiaires :
Sans hte Intermdiaire
Mode de contamination :
Ingestion dufs embryonns.
Et
Sans vecteur
Mthodes diagnostiques :
Clinique.
Srologie : Recherche danticorps spcifiques par diffrentes techniques.
(Mise en vidence de larves fixes dans lil).
Morphologie des ufs :
UNIQUEMENT DANS LES SELLES DE CANIDES
Dimensions :
Forme :
Ovode.
Coque :
Contenu :
Couleur :
Bruntre, fonc.
Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :
Hyperosinophilie.
Confusions possibles :
Remarques :
1. Comme le parasite ne se dveloppe pas jusquau stade adulte chez lhomme, les ufs ne sont jamais
retrouvs dans des selles humaines. La prsence dautres ufs dhelminthes dans les selles du patient,
comme des ufs dAscaris spp. ou de Trichuris spp., indique cependant une exposition fcale, augmentant la
probabilit de Toxocara spp. dans les tissus en cas de suspicion clinique.
2. Toxocara cati (ascaris du chat) et Baylisascaris procyonis (ascaris du raton laveur) peuvent aussi produire des
larva migrans viscrales ou oculaires (moins frquent).
3. La srologie nest utile quen confirmation dun diagnostic clinique. Les tests srologiques bass sur les TES
(Toxocara Excretory-Secretory antigens) seraient prfrables (meilleure spcificit). Des ractions croises avec
dautres nmatodes existent cependant. Lvaluation de la sensibilit (de lordre de 90 %) et de la spcificit de
ces tests nest pas facile en raison du manque de mthodes parasitologiques pour mettre en vidence Toxocara.
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Enterobius vermicularis
Distribution gographique :
Nom commun :
Oxyure
Homme
Oxyuroidea
Nmatodes
Oxyurose (F).
Pinworm infection, threadworm infection,
enterobiasis (En).
Enterobiasis, Oxiuriasis humana (Es).
Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
Classe :
Pathologie :
Htes dfinitifs :
Super Famille :
Mode de contamination :
Ingestion des ufs (auto infestation aussi possible).
Et
sans vecteur
Localisation de ladulte :
Colon, appendice.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs par scotch test (tape test ou Test de Graham).
Observation des vers adultes sur la peau pri-anale (principalement la nuit)
(Dcouverte des ufs dans selles : Examen direct ou technique de concentration par sdimentation)
Morphologie des ufs (en scotch test) :
Dimensions :
50 60 m x 20 32 m.
Forme :
Asymtrique, ovode ou en
forme de tranche de pain.
Coque :
Contenu :
Couleur :
Transparent.
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1. Le scotch test doit tre ralis le matin, avant dfcation ou toilette matinale. Trois tests raliss sur une semaine
permettent de dceler 95 % des infestations.
2. Des ufs de Taenia spp sont aussi parfois retrouvs en tape test.
3. Les ufs dEnterobius spp. sont rarement retrouvs dans les selles.
4. Les vers adultes (8 15 mm pour la femelle) doivent tre diffrencis de fibres vgtales (dbris alimentaires) ou
de petits morceaux de papier hyginique.
5. Il est assez frquent de retrouver les ufs doxyure dans les urines (principalement chez les fillettes, localisation
ectopique vaginale de loxyure femelle).
6. Ce parasite se dveloppe entirement dans la lumire de lintestin en 3 semaines. Il ny a donc pas de migration
somatique. Si la dure de vie des adultes est infrieure 55 jours, les auto-infestations expliquent un portage
prolong. Un ver femelle adulte produit environ 10.000 ufs durant sa vie (soit une production journalire de
lordre de 500 ufs).
7. Une seconde espce, Enterobius gregorii est dcrite pour lEurope, lAsie et lAfrique. Sa morphologie, son cycle,
sa prsentation clinique et son traitement sont identiques.
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
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Trichuris trichiura
Distribution gographique :
Nom commun :
Cosmopolite,
surtout dans les pays
Chauds et humides
Trichocphale
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Super Famille :
Classe :
Trichuroidea
Nmatodes
Pathologie :
Homme
Sans hte
Intermdiaire
Et
sans vecteur
Localisation de ladulte :
Caecum, (colon, appendice).
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
Dcouverte de vers adultes la surface des selles.
Morphologie des ufs :
Dimensions :
49 65 m x 20 29 m.
Forme :
En forme de citron.
Coque :
Contenu :
Couleur :
Caractristiques :
Hyperosinophilie de lordre de 15 %.
Anmie hypochrome ferriprive (charge parasitaire
importante).
Confusions possibles :
Remarques :
1. Des ufs de plus grande taille, ayant une forme ou une paisseur de coque anormale se retrouvent parfois dans les
selles. Cette dformation se prsente sous antihelminthiques ou lors de lingestion de Trichuris vulpis (parasite du
chien, ufs de passage [70 90 x 32 41]).
2. Trichuris suis, parasite du porc est tudi comme traitement non conventionnel pour les colites ulcratives ou la maladie
de Crohn. Dans le cadre de ces traitements, un dveloppement en adultes matures avec production dufs chez
lhomme a t dcrit.
3. La maturation des ufs ncessite de 10 jours plusieurs mois en fonction de la temprature et de lhumidit du milieu
extrieur.
4. Les ufs napparaissent dans les selles que 30 90 jours aprs linfestation (maturation du ver adulte). Certaines
tudes donnent une priode prpatente pouvant aller jusqu 130 jours.
5. Ponte quotidienne entre 3.000 et 20.000 ufs par femelle adulte. Comme la svrit des symptmes est lie la
charge parasitaire, un comptage des ufs peut-tre utile (certaines personnes seraient cependant hypersensibles).
6. Ce parasite ce dvelopperait compltement dans la lumire intestinale. Il ny a donc pas de migration somatique.
7. Le ver adulte de 3 5 cm de long une forme trs typique : La partie antrieure du corps est trs effile et ressemble
un fouet. La dure de vie de ladulte est estime entre 1 4 ans en moyenne (avec des extrmes publis allant jusqu
20 ans).
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
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Capillaria philippinensis
Distribution gographique :
Classe :
Trichuroidea
Nmatodes
Nom commun :
Philippine et Thalande
(endmique), rarement Asie,
Colombie et Moyen orient.
Htes dfinitifs :
Super Famille :
Pathologie :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Ingestion de poisson infest par des larves.
Oiseaux piscivores
Homme (rare)
Recherche ufs ou des larves dans les selles : Examen direct, technique de concentration par
sdimentation.
Dcouverte des vers adultes dans les selles.
Morphologie des ufs :
Dimensions :
50 60 m x 20 30 m
Forme :
Coque :
Contenu :
Couleur :
Caractristiques :
Hyperosinophilie.
Confusions possibles :
Remarques :
1. Il est impossible de distinguer microscopiquement les diffrentes espces de Capillaria : Capillaria
philippininensis, Capillaria aerophila (cosmopolite, sans hte intermdiaire, ingestion des ufs embryonns,
infestant les chiens, chats, renards et mustlids et exceptionnellement lhomme), Capillaria hepatica
(cosmopolite, sans hte intermdiaire, ingestion des ufs embryonns, infestant diffrents animaux dont les
rongeurs et exceptionnellement lhomme). Pour ces deux dernires espces, moins de 100 infestations humaines
ont t dcrites dans la littrature. La rponse parasitologique correcte pour des ufs retrouvs dans les selles
est donc Capillaria spp.
2. Les femelles pondent des ufs non embryonns dans lintestin. Certains dentres eux peuvent sembryonns et
librs des larves qui peuvent ainsi causs une auto-infestation, entranant une infestation massive.
3. Les vers adultes sont des petits nmatodes de 2,5 4,3 mm.
4. Lesprance de vie du ver adulte est estime entre 1 et 4 mois pour Capillaria hepatica et environ 1 an pour
Capillaria aerophila. Les ufs apparaissent dans les selles 2 3 semaines aprs linfestation (Capillaria hepatica)
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
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Trichinella spp.
Distribution gographique :
Cosmopolite
sauf Australie
Htes dfinitifs :
Mammifres (Homme).
Classe :
Trichuroidea
Nmatodes
Nom commun :
Trichines
Pathologie :
Htes intermdiaires :
Sans hte Intermdiaire
Super Famille :
Mode de contamination :
Ingestion de viande contenant des larves
(trichines) vivantes.
(Localisation des adultes :)
Et
Sans vecteur
(Intestin grle).
Localisation des larves :
Larves enkystes dans les muscles stris.
Mthodes diagnostiques :
Clinique suggestive.
Recherche des larves dans des biopsies musculaires.
Srologie : Recherche danticorps spcifiques contre les antignes ES,
(Identification des adultes ou des larves dans les selles).
Morphologie des trichines :
BIOPSIE MUSCULAIRE
Dimensions :
Forme :
Contenu :
Larves enroule
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1. Les vers adultes (1 - 4 mm x 60 75 m) ou les larves (80 120 m) peuvent exceptionnellement se retrouver
dans les selles. Les vers adultes survivent peu de temps dans lintestin (maximum 4 mois). Durant leur vie, les
vers adultes femelles produisent entre 1.000 et 2.000 larves qui vont senkyster dans les muscles stris. Les
larves intracellulaires dtournent le fonctionnement cellulaire leur profit (Nurse cell).
2. Les trichines sont tues par une conglation de la viande de plus de 10 jours -18C, par une cuisson prolonge
(10 minutes 80 C) ou par une saumure importante (6 semaines dans 19 % de NaCl).
3. Trichinella spiralis (Cosmopolite, mammifres et omnivores) est le plus souvent incrimine dans les infestations
humaines. [En 2004, un sanglier tu Mettet (Belgique) tait infest]. Dautres espces de Trichinella sont
parfois retrouves chez lhomme : Trichinella pseudospiralis (Cosmopolite, infectant les mammifres et les
oiseaux), Trichinella nativa (Ours arctiques), Trichinella nelsoni (Prdateurs africains), Trichinella britovi
(Carnivores dEurope et de louest asiatique), ...
4. Pour les tests srologiques, lantigne ES TSL-1 serait prfr. Il est en effet conserv au sein des diffrentes
espces de Trichinella. La srologie ne se positive habituellement que 3 5 semaines aprs linfestation.
5. La biopsie musculaire est examine entre deux lames faible grossissement. Il est possible de faire un
enrichissement par digestion de la biopsie (digestion par pepsine 2 % en HCl 0,5 %, pendant 2 heures 37 C,
puis sdimentation sur gaze pour liminer les gros dbris).
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
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Ancylostoma duodenale
Necator americanus
Distribution gographique :
Homme
Ver du mineur
Htes intermdiaires :
Sans hte Intermdiaire
Pour A. duodenale :
Singes, porcs, flids
et canids.
Classe :
Ancylostomatoidea
Nmatodes
Nom commun :
Ancylostoma duodenale :
Europe, Afrique du nord, Asie.
Necator americanus :
Amriques, Afrique, Chine,
Indonsie, Australie.
Htes dfinitifs :
Super Famille :
Et
Pathologie :
Ankylostomiase (F).
Ancylostomiasis, Hookworm infection (En).
Uncinariasis, anemia de los mineros (Es).
Mode de contamination :
Transcutane par contact avec de la boue contamine par
des larves infestantes. (+ voie orale pour A. duodenale).
[transmission verticale possible de la mre son enfant
pour A. duodenale].
Localisation de ladulte :
Sans vecteur
Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
(Identification de larves strongyloides ou rhabditodes dans les selles.)
Morphologie des ufs :
FORME FREQUENTE dans les selles
(cf. tableau comparatif avec S. stercoralis)
Dimensions :
60 80 m x 35 40 m.
Forme :
Ovode, symtrique
Coque :
Mince, simple
Contenu :
de 4 (Ancylostoma sp.) 8
(Necator sp.) blastomres.
Couleur :
Incolore.
Caractristiques :
En gnral contient des
blastomres, parfois une
morula ou un embryon
Morphologie des larves rhabditodes :
Morphologie des larves Strongyloides (filariformes ) :
FORME RARE dans les selles
FORME TRES RARE dans les selles
(cf. tableau comparatif avec S. stercoralis)
(cf. tableau comparatif avec S. stercoralis)
Dimensions :
200 300 m. x 14 17 m.
Caractristiques :
Hyperosinophilie de lordre de 30 %.
Anmie hypochrome microcytaire, diminution du
fer srique (atteinte chronique).
500 700 m. x 20 24 m.
Dimensions :
Caractristiques :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Il est impossible de distinguer microscopiquement A. duodenale, A. ceylanicum N. americanus. Les ufs seront rapports comme ufs dAncylostomids.
La distribution gographique nest pas un critre de distinction des espces : En effet, la rpartition des deux espces se chevauche suite des importations. Les
tempratures optimales de dveloppement sont cependant un peu diffrentes (21 27 C pour Ancylostoma spp., 25 35 C pour Necator sp.).
Oesophagostomum bifurcum, parasite zoonotique retrouv au nord du Togo et au Ghana, responsable de la multinodular disease , produit aussi des ufs indistinguables
microscopiquement des ancylostomids.
Les stades larvaires ne sont retrouvs que dans des chantillons de selles qui sont examins longtemps aprs mission (plus de 12 heures).
La quantit de sang absorbe ou gaspille quotidiennement par A. duodenale est estime 0.2 ml par ver adulte (0.02 ml pour N. americanus).
Ponte journalire de 5.000 22.000 ufs par jours et par femelle adulte (3.000 6.000 pour N. americanus.).
Les ufs napparaissent dans les selles que 15 40 jours aprs linfestation (migration somatique du parasite et maturation sexuelle). Des formes larvaires peuvent tre
retrouves dans les crachats durant la phase pulmonaire (technique non indique pour le diagnostic).
La dure de vie de ladulte est estime entre 4 20 ans pour N. americanus et entre 1 et 9 ans pour A. duodenale.
Dautres espces dAncylostomes infectant normalement les animaux peuvent aussi parasiter lhomme : A. ceylanicum [hamster] qui est morphologiquement et
pathologiquement identique A. duodenale, et dautres espces du type A. braziliense qui ne peuvent se dvelopper compltement et provoquent des larva migrans cutane.
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Strongyloides stercoralis
Distribution gographique :
Pays tropicaux ou subtropicaux
Sporadique en zone froide ou
tempre (mines, tunnels, )
Htes dfinitifs :
Homme
Chimpanz, chien,
chats.
Classe :
Rhabdiasoidea
Nmatodes
Nom commun :
Anguillule
Pathologie :
Anguillulose (F)
Threadworm infection, strongyloidiasis (En)
Estrongiloidiasis (Es)
Htes intermdiaires :
Sans htes intermdiaire
Et
sans vecteur
Super Famille :
Mode de contamination :
Transcutane par contact avec de la boue contamine
par des larves strongyloides infestantes.
Auto-infestation trans-intestinale ou trans-pri-anale.
Localisation de ladulte :
Duodnum.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des larves dans les selles : Examen frais, technique de concentration par sdimentation,
technique de concentration spcifique de Baermann, culture en agar.
(Recherche des larves dans un liquide dintubation duodnale ou dans un Enterotest ).
Identification des ufs prsents dans les selles.
Srologie : Recherche danticorps spcifiques (antignes provenant de larves filariformes).
Morphologie des larves rhabditodes :
FORME TRES FREQUENTE dans les selles
(cf. tableau comparatif avec A. duodenale)
200 - 300 m. x 16 20 m.
Dimensions :
Caractristiques :
50 76 m x 35 47 m.
Ovode, symtrique
Mince, simple, lisse.
Embryonn.
Incolore.
En gnral contient un embryon,
rarement une morula.
Autres signes biologiques associs :
Dimensions :
Forme :
Coque :
Contenu :
Couleur :
Caractristiques :
Hyperosinophilie oscillante de 5 30 %.
Prsence frquente de cristaux de Charcot-Leyden
dans les selles.
Dimensions :
450 - 550 m. x 20 24 m.
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
42 / 138
Stades
ufs
Strongyloides stercoralis
Ancylostoma duodenale
Necator americanus
< 1 heure
Larves
rhabditodes
12 heures
Gnralement entre 50 - 55 m
(minimum 50 m, maximum 76 m)
Gnralement embryonn
Gnralement entre 60 - 65 m
(minimum 60 m, maximum 80 m)
Gnralement blastomres ou morula
10 jours
qq heures
Larves
strongylodes
Ou
Larves
filariformes
80 m
60 m
50 m
Strongyloides stercoralis
Ancylostoma spp.
> 100 m
Trichostrongylus spp.
Acariens
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Trichostrongylus spp.
Distribution gographique :
Trichostrongyloidea
Nmatodes
Pathologie :
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Homme (Zoonose)
Classe :
Nom commun :
Cosmopolite
Super Famille :
Trichostrongylose (F)
Trichostrongyliasis (En)
Trichostrongiliasis (Es)
Mode de contamination :
Et
Sans vecteur
Lumire Intestinale.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des larves dans les selles : Examen frais, technique de concentration par sdimentation.
Morphologie des ufs :
(cf. tableau comparatif avec
A. duodenale et S. stercoralis)
Dimensions :
79 100 m x 40 50 m.
Forme :
Coque :
Mince, lisse.
Contenu :
Nombreux blastomres ou
une morula, gristre.
Couleur :
Incolore.
Caractristiques :
Hyperosinophilie.
Anmie hypochrome microcytaire, diminution du fer
srique (atteinte chronique).
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
Aprs linfestation orale, il ny a pas de migration somatique. Les vers adultes stablissent et se dveloppent dans lintestin.
Les espces de cette super famille infestant lhomme sont toutes zoonotiques. Certaines dentre-elles ninfestent quoccasionnellement
lhomme, dautres peuvent tre responsables dinfestations de masse. Il sagit dun parasite peut pathogne pour lhomme.
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Super Famille :
Classe :
Filarioidea
Nmatodes
Wuchereria bancrofti
Distribution gographique :
Nom commun :
Rgions tropicales et
subtropicales (sauf dsert).
Turquie (petit foyer rsiduel ?).
Filariose de Bancroft.
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Vecteurs : Culicids :
Homme.
Culex spp.,
Aedes spp.,
Mansonia spp.,
Anopheles spp..
Pathologie :
Wuchereriase (F)
Bancroftian filariasis, lymphatic filariasis (En)
Wuchereriasis, filariasis linftica (Es)
Localisation de ladulte :
Organes lymphatiques.
Localisation des microfilaires :
Sang.
Mthodes diagnostiques :
- frais dans une goutte de sang (peu sensible, pas didentification de lespce).
- en goutte paisse colore au Giemsa [hmatoxyline ou Carazzi] (identification de lespce).
- en Woo frais (pas didentification de lespce).
- en Knott color (technique de concentration, tirement des microfilaires).
- aprs filtration sur membrane et coloration (trs sensible. Usage plus pidmiologique).
Recherche dantignes filariens dans le sang (dipstick, sensibilit proche de celle du Knott).
Recherche des anticorps sriques [principalement IgG4].
Recherche dADN spcifique par PCR.
Dtection des vers adultes et des dilatations lymphatiques anormales par imagerie mdicale.
Dimensions :
240 300 m.
Diamtre :
7.5 10 m.
Gaine :
Queue :
Espace cphalique :
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
Ces microfilaires sont priodicit nocturne ou parfois sub-priodiques. Les prlvements sanguins doivent tre effectus entre 23 heures et
4 heures du matin (pour les personnes ayant une activit diurne).
Les microfilaires napparaissent dans le sang que 8 12 mois aprs linfestation maturation (jusquau stade adulte). Les vers adultes peuvent
survivre plus de 25 ans chez lhomme et les microfilaires plus de 70 jours.
En cas dlphantiasis (symptme tardif), il est presque impossible de retrouver des microfilaires dans le sang. Si cette lphantiasis touche
les jambes, elle affectera le dessus et le dessous des genoux.
Il est aussi possible de retrouver des microfilaires dans les urines (chylurie).
Les tests srologiques ne permettent pas de faire une distinction despce. Il existe des ractions croises avec dautres nmatodes et E.
granulosus.
45 / 138
Super Famille :
Classe :
Filarioidea
Nmatodes
Brugia malayi
Distribution gographique :
Nom commun :
Filariose malaise.
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Vecteurs : Culicids
Homme.
Pathologie :
Localisation de ladulte :
Certains singes.
Chats ?
Mansonia spp.
Anopheles, spp.
Organes lymphatiques.
Localisation des microfilaires :
Sang.
Mthodes diagnostiques :
- frais dans une goutte de sang (peu sensible, pas didentification de lespce).
- en goutte paisse colore au Giemsa [hmatoxyline ou Carazzi] (identification de lespce).
- en Woo frais (pas didentification de lespce).
- en Knott color (technique de concentration, tirement des microfilaires).
- aprs filtration sur membrane et coloration (trs sensible. Usage plus pidmiologique).
175 230 m.
Diamtre :
5 6 m.
Gaine :
Queue :
Espace cphalique :
Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Ces microfilaires sont priodicit nocturne. Les prlvements sanguins doivent tre effectus entre 23 heures et 4 heures du matin (pour les
personnes ayant une activit diurne). Sauf dans certaines parties de lIndonsie, de la Malaisie, des Philippines et de la Thalande (subpriodicit
nocturne).
La gaine se perd dans 50 % des microfilaires du type sub-priodique. Elle est gnralement visible pour les microfilaires du type priodique. La gaine
empche parfois la coloration correcte des noyaux.
En cas dlphantiasis (symptme tardif), il est presque impossible de retrouver des microfilaires dans le sang. Si cette lphantiasis touche les jambes
cela affectera le dessous des genoux.
Le dveloppement jusquau stade adulte ncessite entre 67 et 98 jours. Les vers adultes ont une dure de vie estime plus de 15 ans.
Il est aussi possible de retrouver des microfilaires dans les urines.
Les tests srologiques ne permettent pas de faire une distinction despce. Il existe des ractions croises avec dautres nmatodes et E. granulosus.
46 / 138
Super Famille :
Classe :
Filarioidea
Nmatodes
Brugia timori
Distribution gographique :
Nom commun :
Archipel indonsien : De
Timor Bali et aux petites les
de la Sonde.
Filariose
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Vecteurs : Culicids
Homme.
Pathologie :
Filariose du Timor (F)
Timorean filariasis (En)
Filariasis de Timor (Es)
Localisation de ladulte :
Anopheles, spp.
Organes lymphatiques.
Localisation des microfilaires :
Sang.
Mthodes diagnostiques :
- frais dans une goutte de sang (peu sensible, pas didentification de lespce).
- en goutte paisse colore au Giemsa [hmatoxyline ou Carazzi] (identification de lespce).
- en Woo frais (pas didentification de lespce).
- en Knott color (technique de concentration, tirement des microfilaires).
- aprs filtration sur membrane et coloration (trs sensible. Usage plus pidmiologique).
265 325 m.
Diamtre :
4.4 6.8 m.
Gaine :
Queue :
Espace cphalique :
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
Ces microfilaires sont priodicit nocturne stricte. Les prlvements sanguins doivent tre effectus entre 23 heures et 4 heures du matin (pour les personnes
ayant une activit diurne).
En cas dlphantiasis (symptme tardif), il est presque impossible de retrouver des microfilaires dans le sang. Si cette lphantiasis touche les jambes affectera le
dessous des genoux.
Il est aussi possible de retrouver des microfilaires dans les urines.
Les tests srologiques ne permettent pas de faire une distinction despce. Il existe des ractions croises avec dautres nmatodes et E. granulosus.
47 / 138
Super Famille :
Classe :
Filarioidea
Nmatodes
Loa loa
Distribution gographique :
Nom commun :
Pathologie :
Loase (F).
Loiasis, eye worm disease (En).
Loasis (Es).
Afrique centrale,
Afrique de louest.
(zone forestire)
Filariose
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Homme.
Vecteurs : Taons
Primates.
Chrysops spp.
Localisation de ladulte :
Tissus sous-cutans et conjonctives.
Localisation des microfilaires :
Sang.
Mthodes diagnostiques :
- frais dans une goutte de sang (peu sensible, pas didentification de lespce).
- en goutte paisse colore au Giemsa [hmatoxyline ou Carazzi] (identification de lespce).
- en Woo frais (pas didentification de lespce).
- en Knott color (technique de concentration, tirement des microfilaires).
- aprs filtration sur membrane et coloration (trs sensible. Usage plus pidmiologique).
Visualisation du ver adulte dans lil (et identification aprs extraction). [Jusqu 7 cm de long].
Recherche des anticorps sriques.
Recherche dADN spcifique PCR.
Morphologie de la microfilaire (GE, Giemsa) :
Dimensions :
230 250 m.
Diamtre :
5 7 m.
Gaine :
Queue :
Espace cphalique :
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
Ces microfilaires sont priodicit diurne. Les prlvements sanguins doivent tre effectus entre 11 heures et 16 heures.
Le dveloppement dans lhomme jusquau stade adulte ncessite de 6 12 mois. La longvit des vers adultes est estime entre 4 et 7 ans
(jusqu 25 ans pour certains auteurs).
La microfilarmie est alatoire. La recherche de microfilaires est assez souvent ngative (principalement durant les premires annes
dinfestation).
Il est aussi possible de retrouver exceptionnellement ces microfilaires dans les urines.
Les tests srologiques ne permettent pas de faire une distinction despce. Il existe des ractions croises avec dautres nmatodes et E.
granulosus.
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Super Famille :
Classe :
Filarioidea
Nmatodes
Onchocerca volvulus
Distribution gographique :
Afrique centrale et de louest,
Ymen.
Amrique centrale, nord-est du
Brsil, nord-est du Venezuela.
Htes dfinitifs :
Homme.
Nom commun :
Ver des aveugles
Pathologie :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Vecteurs :
Simulium spp.
Localisation de ladulte :
Derme, tissus sous-cutans. Soit libres soit dans des
nodules.
Localisation des microfilaires :
Peau.
Mthodes diagnostiques :
Recherche de microfilaires dans une biopsie cutane exsangue (Skin snip) frais ou aprs coloration
au Giemsa [hmatoxyline ou Carazzi].
Recherche de microfilaires dans une scarification dermique profonde aprs coloration au Giemsa.
Test de Mazzotti (essai pathognomique, technique contre indique, risque de ractions allergiques).
Visualisation des microfilaires dans lil (lampe fentes)
Recherche des filaires adultes dans les nodules (biopsie ou ponction). La ponction est cependant
contre indique en raison dun risque de raction allergique.
Recherche des anticorps sriques, principalement IgE.
Recherche dADN spcifique par PCR.
Morphologie de la microfilaire (Giemsa) :
Dimensions :
280 320 m.
Diamtre :
5 9 m.
Gaine :
Non
Queue :
Espace cphalique :
Caractristiques :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
Microfilaire apriodique.
Il est aussi possible de retrouver O. volvulus dans les urines et dans le sang (surtout en cas dutilisation de Diethylcarbamazine Citrate (DEC),
non en cas dutilisation divermectine) ou dans les liquides dhydrocle.
Le dveloppement jusquau stade adulte ncessite plus de 6 mois. La longvit des vers adultes est estime plus de 15 ans. Les
microfilaires peuvent survivre jusqu 2 ans dans la peau
Les scarifications profondes sont toujours contamines par du sang. Il est donc aussi possible dy retrouver des microfilaires sanguines.
Les tests srologiques ne permettent pas de faire une distinction despce. Il existe des ractions croises avec dautres nmatodes et E.
granulosus.
49 / 138
Super Famille :
Classe :
Filarioidea
Nmatodes
Mansonella streptocerca
Distribution gographique :
Nom commun :
Pathologie :
Afrique de louest,
Afrique centrale
(fort).
Filariose
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Vecteurs : Maringouins
Homme.
Localisation de ladulte :
Certains singes.
Culicoides spp.
Mthodes diagnostiques :
Identification de microfilaires retrouves dans une biopsie cutane exsangue (Skin snip) frais ou aprs
coloration au Giemsa.
Identification de microfilaires retrouves dans une scarification dermique profonde aprs coloration au
Giemsa.
Morphologie de la microfilaire (Giemsa) :
Dimensions :
180 240 m.
Diamtre :
5 6 m.
Gaine :
Non.
Queue :
Espace cphalique :
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
50 / 138
Super Famille :
Classe :
Filarioidea
Nmatodes
Mansonella ozzardi
Distribution gographique :
Nom commun :
Pathologie :
Filariose
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Vecteur :
Homme
Certains singes
1. Maringouins
(Culicoides spp.)
Localisation de ladulte :
Cavit msentrique, tissus sous pritonal.
2. Simulium spp.
Mthodes diagnostiques :
160 205 m.
Diamtre :
3 5 m.
Gaine :
Non.
Queue :
Espace cphalique :
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
51 / 138
Super Famille :
Classe :
Filarioidea
Nmatodes
Mansonella perstans
Distribution gographique :
Nom commun :
Pathologie :
Filariose
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Vecteurs : Maringouins
Culicoides spp.
Localisation de ladulte :
Homme
Certains singes
150 200 m.
Diamtre :
3 5 m.
Gaine :
Non.
Queue :
Espace cphalique :
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
52 / 138
Vecteurs
Pathogncit
Localisation de
Ladulte
Localisation de la
microfilaire
Diagnostic
Priodicit
Wuchereria
bancrofti
Brugia
malayi
Brugia
timori
Loa
loa
Mansonella
ozzardi
Mansonella
perstans
Mansonella
streptocerca
Onchocerca
volvulus
Rgions tropicales
et subtropicales
(sauf dsert),
Turquie (petit foyer
rsiduel ?)
Asie du sud-est,
Inde
Archipel indonsien
De Timor Bali
et aux
petites les de la
sonde
Afrique centrale
Afrique de l'ouest
(zone forestire)
Amrique centrale
Amrique du sud
Pacifique (les)
Carabes
Afrique
Amrique centrale
Amrique du sud
Afrique de l'ouest
Afrique centrale
(forts)
Moustiques
(Culicids)
Signes
lymphatiques
(dmes,
Elphantiasis)
Moustiques
(Culicids)
Signes
lymphatiques
(dmes,
Elphantiasis)
Moustiques
(Culicids)
Signes
lymphatiques
(dmes,
Elphantiasis)
Taons
(Chrysops spp.)
Moucherons
(Mouches noires)
Moucherons
(Culicoides spp.)
Moucherons
(Culicoides spp.)
Afrique centrale
Afrique de l'ouest
Ymen
Amrique centrale
N-E Brsil
N-E Vnzula
Mouches noires
(Simulium spp.)
Dermite
Ccit
Lymphatique
Lymphatique
Lymphatique
Tissus sous
cutans
Msentre
Msentre
Derme
Derme
Sang
Sang
Sang
Sang
Sang
Sang
Derme
Derme
Examen du sang
Examen du sang
Examen du sang
Examen du sang
Peau
Peau
Nocturne
Diurne
Apriodique
Apriodique
Apriodique
Apriodique
Examen du sang
1
Gaine
Diamtre
Longueur
Frottis et GE
Formol
Biopsie
Queue
Espace cphalique
Caractristiques
Nocturne
Examen du sang
Nocturne
Prurit
dme fugace
Cardiaque
Oui
Oui
Oui
Oui
Non
Non
Non
Non
7,5 - 10 m
5 6 m
4,4 6,8 m
5 7 m
3 5 m
3 5 m
5 6 m
5 9 m
Court : 1/1
Aussi long que
large
Noyaux bien
individualiss se
terminant avant
lextrmit
Gaine rarement
colore en rose au
Giemsa
Long : 2/1
2 x plus long que
large
2 noyaux
lextrmit caudale
Gaine souvent
colore en rose au
Giemsa (sauf subpriodiques)
Court : 1/1
Aussi long que
large
Hernies
Range simple de
noyaux jusqu
lextrmit
Gaine non colore
au Giemsa
Trs court
Trs court
Trs court
Queue vide
4 noyaux en file
indienne
lextrmit
Noyaux angulaires.
Dernier noyau plus
gros ou plus fonc
8 noyaux en file
indienne
lextrmit
Long
Plus long que large
Queue pointue et
vide
Si les microfilaires sont retrouves uniquement durant la nuit, il sagit dune microfilaire priodicit nocturne [maximum entre 23 heures et 4 heures], Si les microfilaires ne circulent dans le sang que durant la journe, il sagit de
microfilaires priodicit diurne [maximum entre 11 heures et 16 heures]. Les microfilaires subpriodiques sont retrouves tant le jour que la nuit, mais avec une augmentation significative soit le jour (subpriodicit diurne) soit la
nuit (subpriodicit nocturne).
2
Subpriodicit diurne en Nouvelle Caldonie et en Polynsie, subpriodicit nocturne en Thalande.
3
Subpriodicit nocturne dans certaines parties de lIndonsie, de la Malaisie, des Philippines et de la Thalande.
1
HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES
PROTOZOAIRES
AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES
CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES
CLASSIFICATION
INCONNUE
54 / 138
Entamoeba histolytica
Distribution gographique :
Classe :
Entamoebidae
Rhizopodea
Nom commun :
Pathologie :
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Famille :
Amibiase (F).
Amebiasis (En).
Amibiasis (Es).
Htes intermdiaires :
Homme
Primates
et
Autres animaux :
(Chiens, chats,).
Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes mrs.
Contacts sexuels : Kystes et trophozotes
Forme minuta :
sans vecteur
Mthodes diagnostiques :
Recherche des formes vgtatives hmatophages dans les selles, (dans des pus dabcs, dans des biopsies rectales ou dans
les crachats) : Examen direct.
Recherche des kystes dans les selles : Examen direct, coloration au lugol, technique de concentration par sdimentation.
Recherche de coproantignes en Elisa (galactose adhesins : N-acetyl-D-galactosamine-binding lectin).
Recherche dADN spcifique par PCR (diffrents prlvements)
Srologie : Recherche danticorps sriques. (IFAT, ELISA, IHA, agglutination directe).
Diffrentiation entre E. histolytica de E. dispar sur diffrents prlvements: PCR, ELISA (galactose adhesins).
Morphologie des trophozotes :
Forme magna
20-60 m
Forme minuta
10-60 m
10 20 m.
Sphrique ou ovode.
Mince.
Maximum 4 noyaux, le plus souvent
1 2, caryosome souvent central.
Contenu :
Granuleux.
Caractristiques :
Kyste jeune 1 noyau, parfois
corps chromatode extrmits
arrondies et une masse diffuse
de glycogne.
Confusions possibles :
Dimensions :
Forme :
Paroi :
Noyaux :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
La distinction morphologique sur base des kystes et des trophozotes entre une forme jamais pathogne (E. dispar) et une forme parfois pathogne (E. histolytica) nest pas
possible : seule la prsence de trophozotes hmatophages (forme magna) donne un diagnostic de certitude damibiase. Une diffrentiation par PCR ou par ELISA peut aussi
tre envisage.
Entamoeba dispar est largement plus rpandue chez lhomme quEntamoeba histolytica : Parmi les infestations observes pour les patients de la polyclinique de lInstitut de
Mdecine Tropicale, environ 94 % des infestations E. histolytica/ ou dispar sont en fait des infestations E. dispar).
Les trophozotes hmatophages ne sont retrouvs que dans les selles glairo-sanglantes. Les selles doivent tre examines trs rapidement aprs mission (immobilisation rapide des
trophozotes, qui deviennent alors introuvables). Les formes hmatophages apparaissent 2 4 semaines aprs linfestation. Les formes hmatophages (magna) peuvent aussi tre
retrouves dans des pus (gnralement colors : jaunes, bruns ou chocolats). Lexamen parasitologique dun pus est cependant souvent ngatif puisque les trophozotes se trouvent la
priphrie du kyste et que la ponction se fait souvent au centre.
E. histolytica (forme minuta) vit dans la lumire du caecum, du clon et du rectum. Le parasite devient parfois pathogne (forme magna ou histolytica) avec invasion de la muqueuse et de la
sous muqueuse du clon et du rectum. Un essaimage vers le foie, les poumons, le systme nerveux central et dautres organes est alors possible. E. dispar nest jamais pathogne. Seuls
les trophozotes E. histolytica minuta et E. dispar peuvent senkyster. En cas damibiase intestinale, les kystes ne seront jamais prsents dans les selles.
Entamoeba dispar est largement plus rpandue chez lhomme quEntamoeba histolytica : Parmi les infestations observes pour les patients de la polyclinique de lInstitut de Mdecine
Tropicale, plus de 97 % des infestations E. histolytica/ ou dispar sont en fait des infestations E. dispar).
La srologie nest utile que dans les amibiases invasives : la sensibilit est de lordre de 95 % pour les amibiases extra intestinales, de lordre de 70 % pour les amibiases intestinales
invasives et de lordre de 10 % pour des porteurs asymptomatiques de kystes dE. histolytica. La spcificit est de lordre de 95 %. Aprs gurison, la srologie reste positive quelques mois.
La distinction entre E. histolytica et E. dispar par ELISA (galactose adhsines) aurait une sensibilit de lordre de 70 % et une spcificit de lordre de 97 %.
E. moshkovski et E. dispar, morphologiquement identique seraient soit le mme protozoaire soit des espces diffrentes. E. moshkovski, tout comme E. dispar ne serait jamais pathogne.
Les kystes ne sont pas dtruits par le niveau de chlore habituellement utilis pour la purification de leau potable (la filtration est donc ncessaire).
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Entamoeba dispar
Distribution gographique :
Famille :
Classe :
Entamoebidae
Rhizopodea
Nom commun :
Pathologie :
NON PATHOGENE
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Homme
Primates,
Autres animaux.
Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
et
sans vecteur
Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes mrs.
Localisation des trophozotes et des kystes :
Lumire intestinale (Colon).
Mthodes diagnostiques :
Identification des formes vgtatives dans les selles : Examen direct.
Identification des kystes dans les selles : Examen direct, coloration au lugol, technique de concentration
par sdimentation.
Diffrentiation entre E. histolytica et E. dispar dans les selles: PCR, ELISA (galactose adhesins).
Morphologie des trophozotes :
Dimensions :
Mouvements :
Noyau :
10 60 m
Pseudopodes fins et arrondis,
dplacement orient et vif.
Peu visible, caryosome central,
grains de chromatine priphrique
rguliers.
Granuleux.
Jamais de globules rouges
ingrs.
Morphologie des kystes :
Contenu :
Caractristiques :
10 20 m.
Sphrique ou ovode.
Mince.
Maximum 4 noyaux, le plus
souvent 1 2.
Contenu :
Granuleux.
Caractristiques :
Kyste jeune 1 noyau, parfois
prsence dun corps
chromatode extrmits
arrondies et une masse diffuse
de glycogne.
Confusions possibles :
Dimensions :
Forme :
Paroi :
Noyaux :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
La distinction morphologique sur base des kystes et des trophozotes entre une forme jamais pathogne (E. dispar) et
une forme parfois pathogne (E. histolytica) nest pas possible : seule la prsence de trophozotes hmatophages
donne un diagnostic de certitude damibiase. Une diffrentiation par PCR ou par ELISA peut aussi tre envisage.
Entamoeba dispar est largement plus rpandue chez lhomme quEntamoeba histolytica : Parmi les infestations
observes pour les patients de la polyclinique de lInstitut de Mdecine Tropicale, environ 94 % des infestations E.
histolytica/ ou dispar sont en fait des infestations E. dispar).
Les trophozotes ne se retrouvent que dans des selles diarrhiques. Comme la mobilit est un lment du diagnostic,
lexamen doit tre ralis le plus rapidement possible aprs mission des selles.
Les kystes ne se retrouvent que dans des selles non diarrhiques.
La distinction entre E. histolytica et E. dispar (ELISA, galactose adhsine) aurait une sensibilit de lordre de 70 % et une
spcificit de lordre de 97 %.
E. moshkovski et E. dispar, morphologiquement identique seraient soit le mme protozoaire soit des espces diffrentes. E.
moshkovski ne serait cependant jamais pathogne.
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Entamoeba hartmanni
Distribution gographique :
Famille :
Classe :
Entamoebidae
Rhizopodea
Nom commun :
Pathologie :
NON PATHOGENE
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
Homme
et
sans vecteur
Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes mrs.
Localisation des trophozotes et des kystes :
Lumire du clon.
Mthodes diagnostiques :
5 12 m.
Mouvements :
Pseudopodes arrondis,
dplacement orient.
Noyau :
Contenu :
Granuleux.
Caractristiques :
5 10 m.
Forme :
Sphrique ou ovode.
Paroi :
Fine.
Noyaux :
En gnral 1 2, maximum 4
noyaux.
Contenu :
Caractristiques :
Petit histolytica
Confusions possibles :
Remarques :
1. Comme ce protozoaire nest pas pathogne, il nest pas rechercher, mais doit tre diffrenci dE. histolytica.
2. La diffrentiation entre les kystes dE. histolytica/dispar et les kystes dE. hartmanni ne peut se faire que sur base
de la taille (utilisation dun micromtre oculaire).
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
57 / 138
Entamoeba coli
Distribution gographique :
Famille :
Classe :
Entamoebidae
Rhizopodea
Nom commun :
Pathologie :
NON PATHOGENE
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Homme
Primates
Chiens
Porcs
Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes mrs.
Localisation des trophozotes et des kystes :
et
Lumire du clon.
sans vecteur
Mthodes diagnostiques :
15 50 m.
Mouvements :
Pseudopodes larges,
dplacement non orient et lent
Noyau :
Contenu :
Granuleux.
Caractristiques :
10 35 m.
Forme :
Sphrique ou ovode.
Paroi :
Epaisse, double .
Noyaux :
Contenu :
Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :
NON PATHOGENE
Confusions possibles :
Remarques :
1. Comme ce protozoaire nest pas pathogne, il nest pas rechercher, mais doit tre diffrenci dE. histolytica.
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Endolimax nanus
Distribution gographique :
Famille :
Classe :
Entamoebidae
Rhizopodea
Nom commun :
Pathologie :
NON PATHOGENE
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Hommes.
Primates.
Porcs.
Chiens.
Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
et
sans vecteur
Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes mrs.
Localisation des trophozotes et des kystes :
Lumire du clon.
Mthodes diagnostiques :
6 12 m.
Mouvements :
1 pseudopodes la fois,
dplacement non orient et lent
Noyau :
Contenu :
Granuleux.
Caractristiques :
5 10 m.
Forme :
Paroi :
Trs mince.
Noyaux :
Contenu :
Cytoplasme uniformment
color (trs ple).
Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :
NON PATHOGENE
Confusions possibles :
Remarques :
1. Comme ce protozoaire nest pas pathogne, il nest pas rechercher, mais doit tre diffrenci dE.
histolytica/dispar.
2. Lancien non de cette amibe tait Endolimax nana.
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Iodamoeba butschlii
Distribution gographique :
Famille :
Classe :
Entamoebidae
Rhizopodea
Nom commun :
Pathologie :
NON PATHOGENE
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Homme
Primates
Porcs
Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
et
sans vecteur
Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes mrs.
Localisation des trophozotes et des kystes :
Lumire du clon.
Mthodes diagnostiques :
8 20 m.
Mouvements :
Pseudopodes transparent,
dplacement non orient et lent
Noyau :
Contenu :
Granuleux.
Caractristiques :
5 20 m.
Forme :
Tr s variable.
Paroi :
Mince.
Noyaux :
Contenu :
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1. Comme ce protozoaire nest pas pathogne, il nest pas rechercher, mais doit tre diffrenci dE. histolytica.
2. Le contact des selles avec du formol ou de lther (lors de la fixation ou de techniques denrichissements) limite
trs souvent la colorabilit de la vacuole de glycogne par le lugol.
3. Lancien non de cette amibe tait Pseudolimax butschlii.
60 / 138
Entamoeba gingivalis
Distribution gographique :
Famille :
Classe :
Entamoebidae
Rhizopodea
Nom commun :
Pathologie :
NON PATHOGENE
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Homme.
Chien.
Cheval.
Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
Mode de contamination :
Contact oral oral (baiser).
et
sans vecteur
Mthodes diagnostiques :
(identification des formes vgtatives dans la salive ou dans des frottis dentaires : Examen direct).
Morphologie des trophozotes :
Dimensions :
10 25 m.
Mouvements :
Noyau :
Contenu :
Caractristiques :
Confusions possibles :
NON PATHOGENE
Remarques :
1. Amibe non pathogne vivant dans la cavit buccale, qui se nourrit de cellules pithliales mortes, de bactries et
dautre dbris.
2. E. gingivalis ne doit pas tre confondue avec des trophozotes dE. histolytica ventuellement prsents dans le
crachat en cas damibiase pulmonaire. Les trophozotes dE. histolytica contiennent cependant toujours des
globules rouges ingrs.
3. Les trophozotes avals sont dtruits dans lestomac. Et comme cette amibe ne forme pas de kyste, elle nest
jamais retrouve dans les selles.
4. La prsence dE. gingivalis dans la salive indique le plus souvent un manque dhygine buccal.
61 / 138
Naegleria fowleri
Distribution gographique :
Famille :
Classe :
Vahlkampfiidae
Rhizopodea
Nom commun :
Pathologie :
Exceptionnelle
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
et
sans vecteur
Mthodes diagnostiques :
Recherche des trophozotes amibodes dans le LCR : Examen frais, coloration de Giemsa, culture.
Identification des amibes par immunofluorescence (Anticorps spcifiques marqus).
[biopsie crbrale].
Morphologie des trophozotes amibodes :
Liquide Cphalo-Rachidien
10 20 m.
Trs actifs, pseudopodes
arrondis explosifs .
Noyau :
Un grand noyau avec un grand
caryosome.
Contenu :
Nombreuses vacuoles.
Caractristiques :
Mouvements explosifs .
Morphologie des trophozotes flagells :
Eau [LCR]
Dimensions :
10 20 m.
Mouvements :
Noyau :
1 noyau.
Contenu :
Caractristiques :
2 4 flagelles
Dimensions :
Mouvements :
Acanthamoeba spp.
Balamuthia mandrillaris.
Macrophages mobiles.
Autres trophozotes damibes (contaminants).
Remarques :
1.
2.
3.
4.
Naegleria spp. et les amibes du genre Acanthamoeba spp. sont des organismes libres trouvs habituellement dans leau (lacs, piscines, eau
de distribution, eau des systmes de chauffage ou de conditionnement dair,). Leur temprature optimale de multiplication est de 35 C.
Naegleria fowleri, seule espce occasionnellement pathogne pour lhomme, se retrouve plus dans les eaux chaudes (20-25C), les
Acanthamoeba supportent des tempratures plus basses. Balamuthia mandrillaris na jamais t retrouve dans lenvironnement.
La mningo-encphalite amibienne primitive a tendance apparatre comme une petite pidmie chez des individus qui simultanment ont eu
un contact avec de leau contamine (piscine,).
Naegleria fowleri est une amibe particulire puisquelle prsente 3 formes dans son cycle volutif : le trophozote amibode (forme parasitaire),
le trophozote flagell (forme libre qui se multiplie, exceptionnellement retrouv dans le LCR) et le kyste (forme rsistante dans le milieu
extrieur). Les kystes rsistent bien la dessiccation, mais mal au chlore (sensibles 4 ppm).
Dans une mningo-encphalite amibienne primitive, on retrouve un liquide cphalo-rachidien purulent, avec prdominance de polynuclaires
(500-20.000 cellules/mm de LCR), une hyperalbuminorachie, un glycorachie normale ou abaisse, des examens bactriologiques ngatifs et
la prsence damibes trs mobiles.
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Acanthamoeba spp.
Distribution gographique :
Famille :
Classe :
Hartmanellidae
Rhizopodea
Nom commun :
Pathologie :
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Accidentellement : Homme
Mode de contamination :
Contact cutan (oculaire) avec de leau contamine.
Localisation des parasites :
et
sans vecteur
Mthodes diagnostiques :
Recherche des trophozotes amibodes et des kystes dans des frottis cornens : Examen frais,
coloration au Giemsa,
Recherche des trophozotes amibodes et des kystes dans des biopsies (peau, corne, tissus crbral) :
Examen frais, coloration au Giemsa,
Identification des amibes par immunofluorescence (Anticorps spcifiques marqus).
[Culture].
[Recherche des trophozotes amibodes et des kystes dans le LCR : Examen frais, coloration au
Giemsa, ].
Morphologie des trophozotes amibodes :
10 40 m.
Lent, pseudopodes spiculs.
Un grand noyau avec un grand
caryosome.
Contenu :
Nombreuses vacuoles
alimentaires.
Caractristiques :
Pseudopodes effils ou
filamenteux.
Morphologie des kystes :
Dimensions :
Mouvements :
Noyau :
Dimensions :
Forme :
Paroi :
10 20 m.
Ovode.
Double, paroi extrieure
plisse.
1 seul noyau, pas/peu visible.
Noyau :
Contenu :
Caractristiques :
Kystes daspect polygonal.
Confusions possibles :
Naegleria spp.
Balamuthia mandrillaris.
Macrophages mobiles.
Autres amibes (kyste ou trophozotes contaminants).
Spores vgtales (kystes).
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
Naegleria spp. et les amibes du genre Acanthamoeba spp. sont des organismes libres trouvs habituellement dans leau (lacs, piscines, eau de distribution, eau
des systmes de chauffage ou de conditionnement dair,). Leur temprature optimale de multiplication est de 35 C. les Acanthamoeba (lacs, etc.) supportent
des tempratures plus basses que Naegleria fowleri (piscines etc.). Diffrentes espces dAcanthamoeba sont parfois pathognes (opportunistes) : A. polyphaga,
A. castellani, A. culbertsoni, A. astronyxis, A. hatchetti, A. rhysodes, Balamuthia mandrillaris na jamais t retrouve dans lenvironnement.
Contrairement Naegleria fowleri, B. mandrillaris et les amibes du genre Acanthamoeba nont que deux formes : une forme amibode et une forme kystique.
Les amibes du genre Acanthamoeba et Balamuthia sont morphologiquement identique en microscopie optique.
Ces deux amibes provoquent des kratites, suite des lsions ou des irritations de la cornes (greffe, traumatisme, lentilles de contacts,) ou des encphalites
(opportunistes, suite une dficience immunologique).
Dans une encphalite granuleuse amibienne, on retrouve un liquide cphalo-rachidien clair, avec prdominance de mononuclaires, une hyperalbuminorachie, un
glycorachie normale ou abaisse, des examens bactriologiques ngatifs et la prsence damibes mobiles (trs difficiles) et de kystes polygonaux.
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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES
PROTOZOAIRES
AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES
CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES
CLASSIFICATION
INCONNUE
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Dientamoeba fragilis
Distribution gographique :
Hommes.
Classe :
Monocercomonadidea
Rhizopodea
Nom commun :
Pathologie :
Pas de nom spcifique pour la pathologie (encore
hypothtique) cause par ce parasite.
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Super Famille :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Lumire du clon.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des trophozotes dans les selles : Colorations permanentes (hmatoxyline ferrique, noir de chlorazol,
).
[Identification des trophozotes dans les selles : Examen frais, suivi dune coloration permanente].
[Culture sur milieux xniques (Robinson par exemple)].
[Srologie : Recherche danticorps spcifiques dans le srum].
Recherche dADN spcifique par PCR dans les selles.
Morphologie des trophozotes :
(coloration permanente)
Dimensions :
4 20 m.
Mouvements :
Noyau :
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
65 / 138
Giardia lamblia
Distribution gographique :
Hommes (rservoir)
Primates
Rongeurs (rservoir ?)
(Porc ?)
Classe :
Hexamitidae
Zoomastigophorea
Nom commun :
Pathologie :
Cosmopolite.
Htes dfinitifs :
Famille :
Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
Et
sans vecteur
Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes.
Localisation des trophozotes et des kystes :
Duodnum et premier quart de lintestin.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des formes vgtatives dans des selles diarrhiques : Examen direct.
Recherche des kystes dans des selles moules : Examen direct, coloration au lugol, technique de
concentration par sdimentation.
Recherche des trophozotes dans le produit du tubage duodnal (ou sur le fil dun stringtest du type
Entrotest) : Examen direct.
Recherche de coproantignes spcifiques (GSA 65 par ELISA).
[Srologie : Recherche danticorps spcifiques dans le sang (IFAT)].
Recherche dADN spcifique par PCR (sur les selles).
Morphologie des trophozotes :
Dimensions :
Forme :
Mouvements :
Noyau :
Caractristiques :
Dimensions :
8-19 m x 7-10 m.
Forme :
Ovode.
Paroi :
Epaisse.
Noyau :
2 4 noyaux, regroups en
position antrieure.
Axostyle en forme de S, corps
parabasaux en forme de
virgule, cytoplasme souvent
rtract donnant une paroi
double ligne.
Confusions possibles :
Caractristiques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Seuls les kystes sont retrouvs dans des selles moules. Les trophozotes ne se retrouvent que dans des selles diarrhiques.
Les selles diarrhiques doivent tre examines rapidement aprs mission (immobilisation rapide des trophozotes, qui deviennent alors introuvables).
La sensibilit dun seul examen de selles est de lordre de 75 % (expulsion intermittente des kystes). La rptition des examens de selles sur 3 jours conscutifs
est donc parfois ncessaire pour mettre en vidence ce parasite.
La coloration au lugol tue immdiatement les trophozotes, ne les rendant plus identifiables par leurs mouvements Cette coloration rend cependant la structure des
kystes mieux visible.
La recherche des coproantignes prsente une trs bonne sensibilit et une trs bonne spcificit.
Giardia intestinalis, Giardia duodenalis, Lamblia intestinalis sont des anciens noms pour Giardia lamblia.
Les kystes sont rsistants aux doses de chlore habituellement utilises dans le traitement de leau potable (mais dans les systmes dpuration des eaux uses).
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Chilomastix mesnili
Distribution gographique :
Super Famille :
Classe :
Retortamonadidea
Retortamonadea
Nom commun :
Pathologie :
NON PATHOGENE
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Hommes.
Singes.
Porcs.
Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes.
Et
sans vecteur
Mthodes diagnostiques :
6 20 m x 4 7 m.
Forme :
Mouvements :
Noyau :
Contenu :
Granuleux.
Caractristiques :
7 10 m x 4 6 m.
Forme :
Piriforme.
Paroi :
Epaisse.
Noyaux :
1 noyau central.
Contenu :
Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :
NON PATHOGENE
Confusions possibles :
Remarques :
1. Comme ce protozoaire nest pas pathogne, il nest pas rechercher, mais doit tre diffrenci des amibes ou des
flagells pathognes.
2. Retortamonas (ou Embadomonas) intestinalis (non pathogne, cosmopolite, retrouv chez lhomme et le singe) et
Enteromonas hominis (non pathogne, cosmopolite, retrouv chez lhomme, le singe mais aussi le porc, les
rongeurs et les amphibiens) ont une morphologie identique mais sont lgrement plus petits (4 - 10 m).
67 / 138
Pentatrichomonas hominis
Distribution gographique :
Super Famille :
Classe :
Trichomonadidae
Parabasalea
Nom commun :
Pathologie :
NON PATHOGENE
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Hommes.
Singes.
Porcs.
Chien.
Chat.
Rongeurs
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion des formes vgtatives.
Et
sans vecteur
Mthodes diagnostiques :
8 15 m x 4 6 m.
Forme :
Mouvements :
Noyau :
Caractristiques :
Confusions possibles :
NON PATHOGENE
Remarques :
1. Comme ce flagell nest pas pathogne, il nest pas rechercher, mais doit tre diffrenci des flagells
pathognes que lon peut retrouver dans les selles.
2. Pentatrichomonas hominis est un des flagells les plus rsistants (pas de forme kystique). Il reste donc mobile
assez longtemps dans des selles.
3. Trichomonas hominis et Trichomonas intestinalis sont les anciens noms de ce protozoaire.
4. Trichomonas tenax (anciens noms : Trichomonas elongata ou Trichomonas buccalis) a une morphologie
identique. Cet autre flagell non pathogne pour lhomme se retrouve au niveau de la cavit buccale, sur les
gencives, entre les dents ou dans la salive.
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
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Trichomonas vaginalis
Distribution gographique :
Classe :
Trichomonadidae
Parabasalea
Nom commun :
Pathologie :
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Famille :
Trichomoniase (F).
Trichomonosis (En).
Trichomoniasis urogenital (Es).
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Par contact sexuel.
et
sans vecteur
Hommes.
Systme urognital.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des formes vgtatives dans les scrtions vaginales ou dans un exsudat urtral (examen direct
[ou aprs coloration de gram]).
(Recherche des formes vgtatives dans les urines : examen direct du culot de centrifugation).
[Recherche des antignes (dans lurine ou dans une scrtion vaginale) : ELISA ou IFAT].
[Culture].
Recherche dADN spcifique par PCR.
Morphologie des trophozotes :
Dimensions :
5-19 m x 3-12 m.
Forme :
Mouvements :
Noyau :
Caractristiques :
4 flagelles antrieurs,
membrane ondulante, axostyle.
Confusions possibles :
Remarques :
1. Dans les examens directs, la recherche du parasite est base sur son mouvement. Comme le parasite
simmobilise trs rapidement en dehors de son milieu naturel, les chantillons doivent tre examins trs
rapidement.
2. Comme le parasite se retrouve dans lurtre, lexamen des premires gouttes durines, rcoltes aprs absence
de miction durant 4 ou 5 heures, est la mthode recommande pour rechercher le parasite dans lurine (hommes).
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
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Trypanosoma brucei
gambiense
Distribution gographique :
Nom commun :
Maladie du sommeil
ouest africaine
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
(animaux domestiques :
porcs ?,).
(animaux sauvages :
buffles, etc.).
Trypanosomatidae
Mastigophorea
Homme.
Classe :
Pathologie :
Famille :
Vecteur :
Mouche ts-ts
Glossina
Groupe palpalis
Mthodes diagnostiques :
Srologie : CATT (pour dpistage de masse), latex (pour le Nigeria principalement), ELISA, immunofluorescence,
Recherche des formes trypomastigotes dans la lymphe (ganglions cervicaux : signe de Winterbottom)
Recherche des formes trypomastigotes dans le sang :
frais dans une goutte de sang.
(en frottis sanguin ou) en goutte paisse colore au Giemsa.
en Woo frais.
en QBC frais.
en mini colonne mAECT.
Recherche des formes trypomastigotes dans le liquide cphalo-rachidien : diagnostic et dtermination du stade :
frais dans la cellule de numration.
- simple ou double centrifugation.
Recherche dADN spcifique par PCR.
1525 m.
Fusiforme, avec un flagelle et une
membrane ondulante (bleut).
Contenu :
Noyau assez gros, souvent
central et petit kintoplaste
(rougetre).
Caractristiques :
Membrane ondulante partant du
kintoplaste (sub-terminal) et se
terminant par le flagelle.
Confusions possibles :
Dimensions :
Cytoplasme :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Il nexiste aucune diffrence morphologique entre T. b. gambiense et T.b. rhodesiense. Les deux espces sont dimorphes avec des formes longues (en
multiplication) et des formes courtes (infestantes pour le vecteur). Le diagnostic despce est donc clinique et gographique.
En raison de la toxicit des traitements (entre 5 et 10 % de mortalit suite au traitement pour des patients en stade 2), la srologie nest pas suffisante pour faire un
diagnostic. Les parasites doivent obligatoirement tre mis en vidence. De plus, la confirmation du diagnostic microscopique par une seconde personne est utile.
Suite laction immunitaire de lhte, on observe une succession de vagues de parasitmie correspondant des variants antigniques. Il peut donc tre utile de
rpter les examens parasitologiques et dutiliser des techniques de concentration.
La dtection des trypanosomes frais doit tre faite le plus rapidement possible aprs prlvement. La probabilit de dtecter les trypanosomes diminue
drastiquement en fonction du temps (immobilisation des trypanosomes lorsquils ont consomm le glucose). Les trypanosomes sont aussi immobiliss par le soleil.
Lanticoagulant de premier choix utilisable pour la recherche des trypanosomes frais dans le sang est lhparine.
Aprs coloration au Giemsa, au moins 4 des 5 caractristiques dune forme trypomastigote doivent tre prsentes pour avoir un diagnostic de certitude de
trypanosomiase : 1 : taille, 2 : noyau, 3 : kintoplaste, 4 : cytoplasme, 5 : membrane ondulante et flagelle. Comme Trypanosoma brucei se divise par scission
binaire, il est possible dobserver des formes en cours de division avec deux noyaux, deux kintoplastes etc.
Le diagnostic du stade de la maladie repose sur linvasion du systme nerveux central. Diffrents paramtres sont utilisables sur le liquide cphalo-rachidien :
nombre de leucocytes, prsence de trypanosomes, augmentation des protines totales, augmentation anormale des IgM, prsence de cellules de Mott, prsence
danticorps spcifiques, Comme il ny a pas de relation troite entres ces paramtres, lOMS recommande dutiliser au moins les 3 paramtres suivants (le
nombre de leucocytes, la prsence de trypanosomes et la protinorachie) pour dterminer le stade de la maladie.
Trypanosoma brucei gambiense provoque une forme chronique de la maladie, toujours fatale sans traitement. La souche de Trypanosoma brucei gambiense de
type II, que lon retrouve en Cte dIvoire provoque cependant une maladie volution plutt aiges.
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Trypanosoma brucei
rhodesiense
Distribution gographique :
Nom commun :
Afrique de lest
(entre 15 latitude nord et 25
latitude sud)
Maladie du sommeil
est africaine
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
(Homme).
Glossina
Groupe morsitans
Mastigophorea
Mode de contamination :
Injection de salive contenant des formes
mtacycliques lors du repas sanguin dun vecteur
infest.
(Transfusion sanguine).
(transmission mcanique exceptionnelle par un
insecte hmatophage)
Localisation des parasites :
Vecteur :
Mouche ts-ts
Trypanosomatidae
animaux sauvages.
(animaux domestiques).
Classe :
Pathologie :
Savane
Famille :
Mthodes diagnostiques :
1525 m.
Fusiforme, avec un flagelle et une
membrane ondulante (bleut).
Noyau assez gros, souvent
central et petit kintoplaste
(rougetre).
Membrane ondulante partant du
kintoplaste (sub-terminal) et se
terminant par le flagelle.
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Il nexiste aucune diffrence morphologique entre T. b. gambiense et T.b. rhodesiense. Les deux espces sont dimorphes avec des formes longues (en
multiplication) et des formes courtes (infestantes pour le vecteur). Le diagnostic despce est donc clinique et gographique.
En raison de la toxicit des traitements (entre 5 et 10 % de mortalit suite au traitement pour des patients en stade 2), les parasites doivent obligatoirement tre mis
en vidence. De plus pour augmenter la spcificit, la confirmation du diagnostic microscopique par un second technicien est utile.
Suite laction immunitaire de lhte, on observe une succession de vagues de parasitmie correspondant des variants antigniques. Il peut donc tre utile de
rpter les examens parasitologiques. Globalement, la parasitmie est plus leve que celle observe avec Trypanosoma brucei gambiense.
La dtection des trypanosomes frais doit tre faite le plus rapidement possible aprs prlvement. La probabilit de dtecter les trypanosomes diminue
drastiquement en fonction du temps (immobilisation des trypanosomes lorsquils ont consomm le glucose). Les trypanosomes sont aussi immobiliss par le soleil.
Lanticoagulant de premier choix utilisable pour la recherche des trypanosomes frais dans le sang est lhparine.
Aprs coloration au Giemsa, au moins 4 des 5 caractristiques dune forme trypomastigote doivent tre prsentes pour avoir un diagnostic de certitude de
trypanosomiase : 1 : taille, 2 : noyau, 3 : kintoplaste, 4 : cytoplasme, 5 : membrane ondulante et flagelle. . Comme Trypanosoma brucei se divise par scission
binaire, il est possible dobserver des formes en cours de division avec deux noyaux, deux kintoplastes etc.
Le diagnostic du stade de la maladie repose sur linvasion du systme nerveux central. Diffrents paramtres sont utilisables sur le liquide cphalo-rachidien :
nombre de leucocytes, prsence de trypanosomes, augmentation des protines totales, augmentation anormale des IgM, prsence danticorps spcifiques,
prsence de cellules de Mott, Comme il ny a pas de relation troite entres ces paramtres, lOMS recommande dutiliser au moins les 3 paramtres suivants
(nombre de leucocytes, la prsence de trypanosomes et la protinorachie) pour dterminer le stade de la maladie.
Trypanosoma brucei rhodesiense provoque une forme aigue de la maladie, toujours fatale sans traitement. La souche de Trypanosoma brucei rhodesiense de type
Zambia, que lon retrouve en Zambie et au Malawi provoque cependant une maladie volution plutt chronique.
71 / 138
Trypanosoma cruzi
Distribution gographique :
Nom commun :
Amrique latine
Du sud des USA jusquau nord
de largentine
Trypanosomiase
amricaine
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Homme.
animaux domestiques.
animaux sauvages.
Vecteur :
Punaise hmatophage
(kissing bug)
Triatominae
Classe :
Trypanosomatidae
Mastigophorea
Pathologie :
Famille :
Mthodes diagnostiques :
Examens srologiques : immunofluorescence indirecte, agglutination, fixation du complment, Dot Blot, ELISA,
(Recherche des formes amastigotes dans une ponction ganglionnaire ou dans une biopsie).
Recherche des formes trypomastigotes dans le sang (phase aigue ou congnitale) :
frais dans une goutte de sang.
(en frottis sanguin ou) en goutte paisse colore au Giemsa.
en Woo frais.
en QBC frais.
Mthode de Strout.
Recherche dADN spcifique par PCR.
[Recherche des parasites aprs mise en culture du sang (KIVI : Kit for in vitro isolation, NNN-medium [Novy-Nicolle-McNeal agar],...).
[Xnodiagnostic : Recherche du parasite dans les selles dune nymphe de Triatoma infestans, entre 15 et 60 jours aprs un repas
sanguin sur un patient].
46 m.
Ovode ou arrondi (bleut).
Noyau assez gros et kintoplaste
(rougetre).
Caractristiques :
Intra- ou extra-cellulaires
Confusions possibles :
Dimensions :
Cytoplasme :
Contenu :
Remarques :
1.
Trypanosoma rangeli, espce non pathogne infestant aussi lhomme dans les mmes rgions doit tre diffrencie de Trypanosoma cruzi. La
diffrence de taille du kintoplaste est un bon critre de diffrentiation.
2.
La dtection des trypanosomes frais doit tre faite le plus rapidement possible aprs prlvement. La probabilit de dtecter les trypanosomes
diminue drastiquement en fonction du temps (immobilisation des trypanosomes lorsquils ont consomm le glucose). Les trypanosomes sont aussi
immobiliss par le soleil.
3.
Lanticoagulant de premier choix utilisable pour la recherche des trypanosomes frais dans le sang est lhparine.
4.
Les trypomastigotes sont principalement retrouvs dans le sang durant la phase aigue de la maladie (mais avec plus de difficults que pour la
trypanosomiase africaine). En phase chronique, le diagnostic repose principalement sur la srologie (la culture, le xnodiagnostic ou la PCR).
5.
Les formes trypomastigotes de Trypanosoma cruzi ne se divisent pas. Seules les formes amastigotes se multiplient par division binaire.
6. Dans des prparations tissulaires, en plus des formes amastigotes, on peut aussi retrouver des formes intermdiaires epimastigotes (entre amastigotes
et trypomastigotes).
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
72 / 138
Trypanosoma rangeli
Distribution gographique :
Famille :
Classe :
Trypanosomatidae
Mastigophorea
Nom commun :
Pathologie :
Amrique latine
NON PATHOGENE
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Vecteur :
Homme.
animaux domestiques.
animaux sauvages.
Punaise hmatophage
(Rhodnius spp.)
Triatominae
Mthodes diagnostiques :
30 35 m.
Cytoplasme :
Contenu :
Caractristiques :
Confusions possibles :
NON PATHOGENE
Trypanosoma cruzi.
Bactries mobiles (Borrelia spp. ou contaminant de leau) ou
exflagellation des gamtocytes de Plasmodium (pour les
examens frais).
Trypanosoma brucei rhodesiense (Afrique).
Trypanosoma brucei gambiense (Afrique).
Trypanosomiases animales (Trypanosoma brucei brucei,).
Remarques :
1. Trypanosoma rangeli, espce non pathogne infestant aussi lhomme dans les mmes rgions doit tre
diffrencie de Trypanosoma cruzi. La diffrence de taille du kintoplaste est un bon critre de diffrentiation.
2. Il nexiste que peu de diffrences morphologiques ( lexception de la taille) entre Trypanosoma brucei gambiense,
Trypanosoma brucei rhodesiense et Trypanosoma rangeli. Les trois espces sont dimorphes avec des formes
longues et des formes courtes. Le diagnostic despce est donc principalement clinique et gographique.
3. A la diffrence de Trypanosoma cruzi, Trypanosoma rangeli ne se retrouve chez lhomme que sous forme
trypomastigote (dans le sang).
4. Il nexiste pas dimmunit de protection croise entre Trypanosoma cruzi et Trypanosoma rangeli.
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Leishmania spp.
Distribution gographique :
Homme
Chiens, rongeurs et
divers animaux
(selon lespce de
Leishmania)
Trypanosomatidae
Mastigophorea
Pathologie :
Htes intermdiaires :
Vecteur :
Classe :
Nom commun :
Super Famille :
Mode de contamination :
Dpt sur la peau ou injection de formes
mtacycliques lors du repas sanguin dun vecteur
infest.
Contact direct avec des plaies contenant des
Leishmania.
Transfusion sanguine.
[Ecrasement dun vecteur contamin sur la peau
(abime) ou sur les muqueuses].
[Exceptionnellement par contact avec des selles dun
vecteur contamin].
Localisation des parasites :
Sous formes amastigotes dans les macrophages, les
monocytes ou les histiocytes.
Mthodes diagnostiques :
Recherche microscopique, aprs coloration au Giemsa des formes amastigotes dans les exsudats ou les biopsies de
lsions superficielles (formes cutanes ou muco-cutanes), dans des ponctions [splniques, hpatiques], dans la
moelle osseuse ou dans les ganglionnaires (formes viscrales), ou dans un buffy coat (formes viscrales).
Mise en culture des parasites prsents dans des biopsies sur des milieux spcifiques (toutes formes de
leishmanioses) Nogushi Wenyon, Tobie Sang Lapin + Locke, etc.
Intradermo-raction de Montngro ( vise principalement pidmiologique pour les formes muco-cutanes et
cutanes).
Srologie : recherche danticorps spcifiques par tests rapides, IFAT, ELISA, DATS,
Recherche dADN spcifique par PCR (diagnostic des espces et des sous-espces).
Cytoplasme :
Contenu :
Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :
En cas de leishmaniose viscrale on observe gnralement
une pancytopnie importante : abaissement des globules
blancs, des plaquettes et des globules rouges (anmie).
Perturbation des tests de coagulation et des tests hpatiques,
augmentation des globulines sanguines [IgG] (V.S. augmente,
formol gel test positif) et une diminution de lalbumine srique.
Remarques :
1.
2.
3.
4.
Les diffrentes espces de leishmanies sont microscopiquement identiques. La distinction despces, importante cliniquement, peut se faire par anticorps
monoclonaux, iso-enzymes ou par PCR. Lorigine gographique est aussi indicative.
Pour le diagnostic de la leishmaniose viscrale, la sensibilit de la mise en vidence des parasites aprs coloration au Giemsa dpend du type de prlvement : de
lordre de 95 % pour la ponction splnique, 50 85 % pour la ponction sternale, 70 % pour la ponction hpatique et 65 % pour la ponction ganglionnaire. Les
ponctions splniques et hpatiques sont souvent vites en raison de leurs dangers.
Les tests srologiques sont principalement utiles pour les formes viscrales. En cas de leishmaniose viscrale, les anticorps sont mme prsents avant lapparition
de signes cliniques. La sensibilit est bonne, du moins pour les personnes non immunodprimes. Pour les autres formes de leishmanioses, la srologie est peu
sensible et le test est souvent ngatif. Il existe des ractions croises avec les autres Trypanosomatidae. Le formol gel test, test non spcifique de mise en
vidence dune augmentation importante des gammaglobulines srique peut tre utile.
Sans traitement, la leishmaniose viscrale est mortelle.
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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES
PROTOZOAIRES
AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES
CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES
CLASSIFICATION
INCONNUE
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Balantidium coli
Distribution gographique :
Parasite rare
(leveurs de porc)
Homme (zoonose).
Balantidiae
Listomatea
Pathologie :
Porc,
Singes, rats, chiens,
Classe :
Nom commun :
Cosmopolite.
Htes dfinitifs :
Famille :
Htes intermdiaires :
Sans htes intermdiaire
Mode de contamination :
ET
Sans vecteurs
Lumire du colon.
Mthodes diagnostiques :
50 200 m x 40 70 m.
(le plus souvent 60 et 70m).
Ovode ou sphrique.
Recouverte de trs nombreux
cils courts anims de
battements rapides, cytostome
Deux noyaux (micro - [arrondi]
et macro-nuclus [rniforme]) et
deux vacuoles contractiles.
Gris bruntre.
Trs mobile, direction
marque. Cytostome souvent
bien visible.
40 65 m.
Sphrique ou ovode.
Double , irrgulire, floue.
Macronuclus rniforme bien
visible, micronuclus arrondi
parfois visible.
Gris bruntre.
Un cytostome rudimentaire et
les cils accols la paroi sont
parfois visibles.
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
Les kystes sont retrouvs principalement dans des selles moules tandis que les formes vgtatives sont retrouves dans des
selles diarrhiques. Les formes vgtatives sont rapidement dtruites, une fois lextrieur du colon. Comme le mouvement
est un lment important du diagnostic, les chantillons diarrhiques doivent tre observs le plus rapidement possible.
Il existe un trs grand nombre de cilis non pathognes que lon retrouve dans leau ou le sol. Une contamination doit donc
toujours tre envisage (eau physiologique utilise pour la suspension des selles, )
Les formes vgtatives sont mises de faon intermittente dans les selles. Des examens rpts sont donc envisager.
Ni les formes vgtatives, ni les kystes ne se colorent bien liode ou aux colorants permanents.
Des localisations non intestinales (poumon, foie, cur) ont aussi t rapportes (rarissime, mais B. coli aurait un pouvoir
invasif tissulaire).
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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES
PROTOZOAIRES
AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES
CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES
CLASSIFICATION
INCONNUE
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Plasmodium falciparum
Distribution gographique :
Nom commun :
Tropiques
Paludisme
Homme.
Classe :
Plasmodiidae
Haemosporidea
Pathologie :
Malaria
(Aroport)
Famille :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Vecteur :
Moustiques femelles
Genre
Anopheles spp.
Mthodes diagnostiques :
Fivre.
Thrombocytopnie.
Anmie (hmolytique).
Bilirubine (surtout directe) et LDH leve.
Haptoglobine basse.
Hypoglycmie.
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
En goutte paisse, laspect uniforme et monotone de Plasmodium falciparum facilite son diagnostic diffrentiel.
Exceptionnellement, en cas dinfestation grave, les parasites ne sont pas retrouvs dans le sang priphrique (squestration des parasites par cyto-adhrence des globules
rouges infests au niveau de lendothlium des capillaires).
La prsence de schizontes de Plasmodium falciparum dans le sang circulant et la prsence de pigment ingr dans les leucocytes sont des signes de gravit de linfestation.
Les gamtocytes apparaissent une dizaine de jours aprs linvasion initiale. Exceptionnellement, les gamtocytes peuvent tre ronds ou en exflagellation.
Parasitmie pouvant atteindre plus de 50 % des globules rouges infests (ou plus de 2.500.000/l de sang).
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Plasmodium vivax
Distribution gographique :
Isotherme de min 16C en
saison chaude
Afrique, Amrique, Asie,
Htes dfinitifs :
Homme.
Classe :
Plasmodiidae
Haemosporidea
Nom commun :
Pathologie :
Paludisme
Malaria
Htes intermdiaires :
Moustiques femelles
Genre
Anopheles spp.
Vecteur :
Famille :
Mthodes diagnostiques :
Fivre.
Thrombocytopnie.
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
En goutte paisse, laspect nuageux des trophozotes de Plasmodium vivax facilite son diagnostic diffrentiel.
Il est possible de rencontrer tous les stades en mme temps dans le sang priphrique.
En raison de la raret du groupe sanguin Duffy positif (porte dentre du parasite dans le globule rouge), ce parasite se rencontre peu en Afrique centrale.
Les hypnozotes (schizontes hpatiques persistant pendant plusieurs mois ou annes aprs linfestation) expliquent la possibilit de rechutes tardives.
Parasitmie nexcdant pas 4 % des globules rouges infests (soit 200.000 parasites par l de sang).
79 / 138
Plasmodium ovale
Distribution gographique :
Nom commun :
Afrique tropicale et
subtropicale, Partie ouest du
Pacifique, Amrique du sud
Paludisme
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
(petits foyers)
Homme.
Classe :
Plasmodiidae
Haemosporidea
Pathologie :
Malaria
Vecteur :
Moustiques femelles
Genre
Anopheles spp.
Famille :
Mthodes diagnostiques :
Fivre.
Remarques :
1.
2.
3.
Il est possible de rencontrer tous les stades en mme temps dans le sang priphrique.
Les hypnozotes (schizontes hpatiques persistant pendant plusieurs mois ou annes aprs linfestation) expliquent la possibilit de rechutes tardives.
Parasitmie nexcdant jamais 4 % des globules rouges infests (soit 200.000 parasites par l de sang).
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Plasmodium malariae
Distribution gographique :
Presque cosmopolite
Frquent en Afrique et en Asie,
Moins frquent en Amrique
Htes dfinitifs :
Homme.
Famille :
Classe :
Plasmodiidae
Haemosporidea
Nom commun :
Pathologie :
Paludisme
Malaria
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Vecteur :
Moustiques femelles
Genre
Anopheles spp.
Mthodes diagnostiques :
Fivre.
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
En goutte paisse, laspect sale des parasites de Plasmodium malariae facilite son diagnostic diffrentiel.
Il est possible de rencontrer tous les stades en mme temps dans le sang priphrique.
Parasitmie nexcdant jamais 1 % des globules rouges infests (soit 50.000 parasites par l de sang).
Plasmodium knowlesi, une espce de Plasmodium infestant le singe et sporadiquement lhomme en Malaisie et Borno, montre une
morphologie comparable P. malariae, mais avec une parasitmie beaucoup plus leve (jusqu plus de 10% des globules rouges infects
ou plus de 500.000 parasites par l de sang. Comme P. knowlesi se rplique toutes les 24h, un traitement rapide et efficace est essentiel.
Quelques cas ont aussi t dcrits en Thalande, au Myanmar, Singapour et au Philippines. Tout patient en provenance du sud-est
asiatique et prsentant limage dune hyper-parasitmie P. malariae doit tre trait comme un accs svre de P. falciparum.
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Caractristiques
Plasmodium falciparum
Plasmodium vivax
Plasmodium malariae
7 - 21 jours
Moyenne 12
Non
Non, mais exceptionnellement
recrudescence possible jusqu 1
an aprs linfestation
8 - 31 jours
Moyenne 14
Oui
19 - 37 jours
Moyenne 28
Non
24-48 heures
48 heures
72 heures
48 heures
Granulations de Schffner :
ponctuation abondante trouve dans
les hmaties plus ges
Priode d'incubation
Hypnozotes
Rechutes
Dure schizogonie
rythrocytaire
Stades prsents
Parasitmie
Non
Plasmodium ovale
11 16 jours
Oui
Granulations de Schffner :
ponctuations abondantes et
videntes, trouves dans presque
toutes les hmaties.
Maximum 200.000/l
Maximum 50.000/l
Maximum 200.000/l
Anneau compact
1 2 grains de chromatine
1 grain lourd
Bien visible
Non
Souvent
Grande
Non
Parfois
Trs rare
Dvelopp, irrgulier
2 ou plusieurs, variables en taille
Parfois jusque 4 petites vacuoles
Ponctuations sombres disperses
sur le parasite
Compact
24
Non
Ponctuations sombres abondantes
sur le parasite
Compact
2-4
Non
Ponctuations sombres disperses
sur le parasite
Trophozotes jeunes :
Cytoplasme
Noyau
Taille du trophozote par
rapport au diamtre du
globule rouge
Vacuole
Pigment
Polyparasitisme
Trophozotes gs :
Cytoplasme
Noyau
Vacuole(s)
1 ou 2 noyaux tirs
1 ou plusieurs, variables en taille
Exceptionnellement prsent, en 1
grain noir
Pigment
Schizontes jeunes :
Cytoplasme
Noyaux
Vacuole(s)
Pigment
Caractristiques
Schizontes mrs
Plasmodium falciparum
Plasmodium vivax
Plasmodium malariae
Plasmodium ovale
Ponctuations bruntres
disperses sur le parasite
Ponctuations sombres
disperses sur le parasite
Ponctuations sombres
disperses sur le parasite
Ponctuations sombres
disperses sur le parasite
Ponctuations sombres
disperses sur le parasite
Cytoplasme
Noyaux
Pigment
4 - 16
Caractristiques
Plasmodium falciparum
Plasmodium vivax
Plasmodium malariae
Plasmodium ovale
Non
Granulation de Schffner :
ponctuation abondante trouve
dans "fantmes" des hmaties.
Non
Granulation de Schffner :
ponctuations abondantes et
videntes trouves dans les
"fantmes" des hmaties.
Petits
Petits moyens
Rgulier et dense
Normalement 1 grain de
chromatine
Dispers, abondant,
1 2 grains de chromatine
Exceptionnel, concentr
Petits grands
Anneau ouvert ou forme
irrgulire
Irrgulier et fragment
Assez volumineux, parfois 2
grains de chromatine
Rarement, dispers et fin
Petit, compact
8 24, parfois plus
Concentr en 1 masse
Grand
12 24, gnralement 16
Masse diffuse
Petit, compact
6 - 12, gnralement 8
Concentr, parfois central
Moyen
4 - 16, gnralement 8
Concentr
Banane
(exceptionnellement arrondie)
Ronde, grande
Ronde, compacte
Ronde, moyenne
Dispers, fin
Stades prsents
Trophozotes :
Taille
Forme
Cytoplasme
Petits moyens
Forme de bague, couramment en
virgule
rgulier, fin, charnu
Noyau
Pigment
1 grain lourd
Dispers en gros grains
Schizontes :
Taille
Noyaux
Pigment
Gamtocytes :
Forme
Noyau
Pigment
Normalement pas de
schizontes dans le sang
priphrique, except en cas
d'infestation grave.
Trophozotes fins, en forme
de bagues; image uniforme.
Gamtocytes en forme de
bananes.
Babesia spp.
Distribution gographique :
Diffrents animaux
domestiques.
Diffrents animaux
sauvages.
(Homme).
Babesiidae
Piroplasmidea
Pathologie :
Classe :
Nom commun :
Cosmopolite ?
Htes dfinitifs :
Famille :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Vecteur et rservoir :
Genre
Ixodes spp.(dures),
Ornithodoros spp.(molles)
Mthodes diagnostiques :
Variable, de 1 5 m.
Localisation :
De 1 4 trophozotes par
globule rouge (extracellulaire)
Forme :
Cytoplasme :
Noyau :
Caractristiques :
Fivre.
Anmie
Thrombocytopnie.
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Plus de 110 espces sont dcrites en mdecine vtrinaire mais seulement quelques unes comme infestant aussi lhomme : Babesia microti, Babesia
WA, Babesia MO1 (Amrique), Babesia divergens, Babesia bovis (Europe),
Pathologie rare. La majorit des infestations humaines devraient tre asymptomatiques, comme le laisse supposer les rsultats de surveillance
srologique en zone endmique. Limmunodpression, la splnectomie et aussi le grand ge, confrent lhomme une sensibilit particulire.
Babesia divergens (Europe) serait cependant plus dangereuse mais heureusement aussi plus rare.
Le diagnostic diffrentiel par rapport des trophozotes de Plasmodium falciparum est difficile, ce qui pourrait tre lorigine dattribution errone de
malaria ces infestations (surtout en zone o la malaria est endmique). Ceci pourrait expliquer le peu de cas diagnostiqus en Afrique.
La coinfection avec Borrelia burgdorferi (maladie de Lyme, mode de contamination identique, vecteurs coinfests frquents et transmission
exprimentale possible des deux agents pathognes durant un mme repas sanguin) est bien dcrite en Amrique (jusqu 89 % des cas babsioses).
Une autre famille de bactrie (Ehrlichia spp.) transmise aussi par des tiques au Etats-Unis et au Japon, provoque lehrlichiose granulocytique humaine
(EGH). Il sagit dune pathologie rare avec un tableau biologique assez similaire. Son diagnostic est srologique.
Il existe une transmission transovarienne des parasites chez les tiques. Lhte vertbr nest donc pas indispensable la survie du parasite. La
terminologie d hte dfinitif pour le vertbr est donc impropre.
Une autre famille de parasites assez similaires Theileria spp. infeste les animaux. Il naurait cependant pas t dcrit dans des infestations humaines.
85 / 138
Toxoplasma gondii
Distribution gographique :
Classe :
Sarcocystidae
Coccidea
Nom commun :
Pathologie :
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Famille :
Toxoplasmose (F).
Toxoplasmosis (En).
Toxoplasmosis (Es).
Htes intermdiaires :
Mammifres
Oiseaux
Flids (chats,)
Mode de contamination :
Homme
Indirect : srologie (Ig M, Ig G, Ig A, [Ig E]). Presque uniquement dans le cadre dinfestations
congnitales.
Recherche des tachyzotes (placenta, liquide amniotique, L.C.R., moelle osseuse, ganglions, empreinte
dorganes, ) aprs coloration au Giemsa. Dans le cadre de patients immunodprims, on peut aussi
retrouver des tachyzotes dans les monocytes du sang priphrique.
Recherche de bradyzotes ou tachyzotes dans les coupes histologiques (P.A.S.)
[Recherche des parasites aprs culture cellulaire ou inoculation lanimal].
Recherche dADN spcifique par PCR.
Radiographie, scanner, chographie, fond de lil,
Morphologie des tachyzotes (Giemsa) :
(homme)
5 -12 m x 2 4 m, intracellulaires (macrophages)
[ovode] ou extracellulaires [en forme de goutte deau
un peu arque], cytoplasme bleut avec un noyau
central granuleux rougetre.
Morphologie des kystes :
(homme animal)
(principalement dans le cerveau et dans les muscles)
Jusqu 200 m, sphriques ou ovodes, entours
dune membrane paisse, contenant de 50
quelques milliers de bradyzotes.
Morphologie des oocystes :
(excrments de chats)
10 15 m, ovodes. Les oocystes non sporuls (non
infectants) contiennent une masse granuleuse
lintrieur, alors que les oocystes sporuls contiennent
2 sporocystes composs chacun de 4 sporozotes.
Autres signes biologiques associs :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
La recherche parasitologique est assez difficile en raison de la raret des tachyzotes dans les prlvements.
La srologie, principalement utilise dans le cadre des infestations congnitales peut aussi tre utile dans le cadre de patients
immunodprims. Son interprtation est nanmoins difficile.
Les oocystes non sporuls excrts ncessitent une maturation de 1 5 jours (en fonction des conditions extrieures) avant de devenir
infestants. Ces oocystes sont trs rsistants.
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Sarcocystis spp.
Distribution gographique :
Cosmopolite
Carnivores.
Omnivores.
(Homme).
Classe :
Sarcocystidae
Coccidea
Nom commun :
Pathologie :
Htes dfinitifs :
Famille :
Htes
intermdiaires :
Herbivores.
Porcs.
Mthodes diagnostiques :
Forme intestinale :
Recherche des oocystes sporuls dans les selles : examen direct, technique de concentration par sdimentation ou
par flottation.
Ovode ou variable.
Paroi :
Contenu :
Caractristiques :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Les deux formes dinfestation, tant intestinales que musculaires, seraient la plupart du temps asymptomatiques. Ces parasites seraient plus des opportunistes
(immunodprims).
Dans la forme intestinale, les oocystes apparaissent dans les selles 2 semaines aprs linfestation. Le nombre de parasites prsents dans les selles est souvent
trs bas, ncessitant des techniques denrichissement.
Lorsque lhomme est lhte dfinitif (Sarcocystis bovi-hominis, avec un herbivore comme hte intermdiaire ; ou Sarcocystis sui-hominis, avec un porc comme hte
intermdiaire), on obtient une sarcocystose intestinale. Lorsque lhomme est lhte intermdiaire (diffrentes autres espces de Sarcocystis, diffrents htes
dfinitifs), on obtient une sarcocystose musculaire.
Les oocystes prsents dans les selles humaines ne seraient pas infectieux pour lhomme.
Les oocystes de sarcocystis spp. sont majoritairement Alcoolo-Acido rsistants. Aprs coloration de Ziehl-Neelsen, la majorit des oocystes seront colors en rose
ple pourpre intense sur un fond bleu. Certains oocystes resteront cependant incolores.
Aprs coloration rapide de Heine, les oocystes apparaissent incolores et trs rfringents sur un fond rougetre.
Les oocystes peuvent aussi tre identifis sur base de leur auto-fluorescence : Ils fluorescent en violet 405 nm, en vert 436 nm ou en bleu 436 nm). Cette
technique nest utilisable que sur des prparations fraiches (examen direct ou aprs SAF fixation ou aprs concentration par sdimentation).
Durant la courte partie sanguine du cycle de ce parasite chez lhomme (pour la forme musculaire uniquement), les rares sporozotes prsents dans le sang peuvent
tre confondus avec des gamtocytes de P. falciparum ou avec des toxoplasmes.
Isospora hominis est lancien nom pour le parasite de la forme intestinale humaine de Sarcocystis spp.
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Isospora belli
Distribution gographique :
Homme.
Eimeriidae
Coccidea
Pathologie :
Isosporose (F).
Isosporiasis (En).
Isosporiasis (Es).
Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
Classe :
Nom commun :
Cosmopolite
Plus commun en rgions
tropicales ou subtropicales
Htes dfinitifs :
Famille :
Mode de contamination :
Et
sans vecteur.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des oocystes dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation
ou par flottation.
Recherche des parasites dans un produit daspiration duodnal (ou dans des biopsies duodnales).
Recherche dADN spcifique par PCR.
Morphologie des oocystes :
(dans les selles)
Dimensions :
25 - 33 m x 12 16 m.
Forme :
Paroi :
Contenu :
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Parasite exclusivement humain, normalement peu pathogne, il devient plus agressif en cas dimmunodpression (parasite
opportuniste).
Malgr sa grande taille, ce parasite nest que peu visible sous un grossissement de 100 x (paroi fine et transparente). Sa recherche
doit donc tre faite avec un grossissement 400 x. Les examens rpts sont parfois utiles pour les mettre en vidence.
Les oocystes ne sont jamais sporuls lors de lmission. Ils ncessitent une maturation dans le milieu extrieur avant de devenir
infestants. Cette maturation dure de quelques jours quelques semaines, en fonction de la temprature et de lhumidit. A la fin de la
maturation, un oocyste contiendra deux sporocystes forms chacun de 4 sporozotes.
Les oocystes sont trs rsistants (ils restent viables durant plusieurs mois dans des milieux liquides). Ils rsistent certains
dsinfectants (crsyl, iode, hypochlorites, soude caustique et produits base daldhydes). Ils sont cependant rapidement tus par
lammoniaque ou le formol).
Les oocystes dIsospora belli sont majoritairement Alcoolo-Acido rsistants. Aprs coloration de Ziehl-Neelsen, la majorit des
oocystes seront colors en rose ple pourpre intense sur un fond bleu. Certains oocystes resteront incolores. La forme typique en
double obus sera toujours visible.
Aprs coloration rapide de Heine, les oocystes apparaissent incolores et trs rfringents sur un fond rougetre.
Les oocystes peuvent aussi tre identifis sur base de leur auto-fluorescence : Ils fluorescent en violet 405 nm, en vert 436 nm ou
en bleu 436 nm). Cette technique nest utilisable que sur des prparations fraiches (examen direct ou aprs SAF fixation ou aprs
concentration par sdimentation).
88 / 138
Cyclospora cayetanensis
Distribution gographique :
Coccidea
Cyclosporose (F).
Cyclosporosis (En).
Cyclosporosis (Es).
Htes intermdiaires :
Homme.
Autres animaux ?
Eimeriidae
Pathologie :
Classe :
Nom commun :
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Famille :
Mode de contamination :
Et
Sans vecteur.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des oocystes dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
Recherche des oocystes dans un produit daspiration duodnal (ou dans des biopsies duodnales).
Recherche dADN spcifique par PCR.
Morphologie des oocystes :
(Dans les selles)
Dimensions :
8 10 m.
Forme :
Rond.
Paroi :
Contenu :
Caractristiques :
Confusions possibles :
Remarques :
1. Parasite normalement peu pathogne, il devient plus agressif en cas dimmunodpression (parasite opportuniste).
2. Les oocystes retrouvs dans les selles sont gnralement non sporuls. La sporulation qui se droule dans le
milieu extrieur, ncessite de quelques jours quelques semaines (en fonction de la temprature et de lhumidit).
Un oocyste sporul contient deux sporocystes contenant chacun deux sporozotes.
3. Aprs coloration rapide de Heine, les oocystes apparaissent incolores et trs rfringents sur un fond rougetre.
4. Aprs coloration au Ziehl-Neelsen modifie, ils apparaissent colors en rose violet sur un fond bleu. Tous les
oocystes de C. cayetanensis ne sont cependant pas Alcoolo-Acido Rsistants.
5. Aprs coloration rapide de Heine, les oocystes apparaissent incolores et trs rfringents sur un fond rougetre.
6. Les oocystes peuvent aussi tre identifis sur base de leur auto-fluorescence : Ils fluorescent en violet 405 nm,
en vert 436 nm ou en bleu 436 nm). Cette technique nest utilisable que sur des prparations fraiches
(examen direct ou aprs SAF fixation ou aprs concentration par sdimentation).
7. Les oocystes de C. cayetanensis ne prennent pas le lugol.
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Cryptosporidium spp.
Distribution gographique :
Homme.
De trs nombreux
animaux.
Cryptosporiidae
Coccidea
Pathologie :
Cryptosporidiose (F).
Cryptosporidiosis (En).
Cryptosporidiosis (Es).
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Classe :
Nom commun :
Cosmopolite.
Htes dfinitifs :
Famille :
et
sans vecteur.
Mthodes diagnostiques :
Recherche des oocystes dans les selles : coloration rapide de Heine, de Ziehl-Neelsen modifie, soit
directement sur les selles, soit aprs concentration par sdimentation.
[Recherche des oocystes dans les aspirations bronchiques, lavages broncho-alvolaire ou biopsies.]
Recherche de coproantignes : EIA, ELISA,
[Recherche danticorps spcifiques (IFAT, )]
Recherche dADN spcifique par PCR.
Morphologie des oocystes :
(Aprs coloration spcifique)
Dimensions :
3 - 6 m.
Forme :
Contenu :
Caractristiques :
Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
La cryptosporidiose est principalement une infestation opportuniste : Si chez un patient immunocomptent, lpisode dpasse rarement 10
jours et rgresse spontanment, chez un sujet immunodprim, lvolution na aucune tendance la rmission.
Les auto-infestations sont possibles (oocystes directement infectants).
Les selles des malades tant trs infectantes, il est important de prendre des prcautions drastiques dans les services o sjournent des
personnes immunodprimes.
Les oocystes ne sont identifiables ni dans un examen direct ni aprs coloration au lugol (les oocystes ne prennent pas le lugol). Ils sont
indistinguables des levures et dautres lments ovodes. Une coloration spcifique est donc indispensable.
Aprs coloration au Ziehl-Neelsen modifi, les oocystes apparaissent rose violet sur un fond bleu. Aprs coloration rapide de Heine, ils
apparaissent incolores et trs rfringents sur un fond rougetre.
Les oocystes peuvent aussi tre identifis sur base de leur auto-fluorescence : Ils fluorescent en violet 405 nm, en vert 436 nm ou en bleu
436 nm). Cette technique nest utilisable que sur des prparations fraiches (examen direct ou aprs SAF fixation ou aprs concentration par
sdimentation).
Cryptosporidium parvum et Cryptosporidium hominis (regroups en C. parvum genotype 1) seraient les principaux agents de linfestation
humaine. Des infestations humaines par C. felis (flins), C. meleagridis (oiseaux), C. canis (canids), C. nasorum (poissons), C. muris
(rongeurs), etc. ont aussi t rapportes. La spcificit dhte ne serait pas rigoureuse.
Les Cryptosporidium sont retrouvs dans leau potable et dans les eaux de baignade (piscines, jacuzzis, lacs, rivires, sources, etc.)
contamines par des excrments. Comme les oocystes sont trs rsistants aux dsinfectants base de chlore, une filtration est ncessaire.
Labsence actuelle de traitement efficace, limite lintrt de la recherche des Cryptosporidium spp.
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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES
PROTOZOAIRES
AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES
CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES
CLASSIFICATION
INCONNUE
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Pneumocystis jiroveci
(Pneumocystis carinii)
Distribution gographique :
Htes dfinitifs :
Classe :
Pneumocystidaceae
Archiascomycetes
Nom commun :
Pathologie :
Pneumonie Pneumocystis carinii (F)
Pneumocystis carinii pneumonia (En)
Neumonia Pneumocystis Carinii (Es)
Cosmopolite
CHAMPIGNONS
Famille :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
Arienne ?
Htes intermdiaires
Homme.
rservoir ?
infection (infestation) latente ?
vecteur
?
Localisation du parasite :
Pulmonaire
(Possibilit de dissmination extra pulmonaire).
Mthodes diagnostiques :
Radiographie pulmonaire.
Recherche des parasites dans une expectoration induite, un lavage alvolaire ou une empreinte de biopsie
pulmonaire (Bleu de toluidine O, Giemsa, ou RAL 555).
Recherche dADN spcifique par PCR sur biopsie pulmonaire ou L.B.A.
Morphologie des diffrentes formes
Trophozotes :
Pr kystes :
2 6 noyaux,
paroi paissie,
de 3 6 m.
Kystes :
contenant 8 parasites,
paroi paisse,
de 4 8m.
Kystes vides :
de 4 8 m,
Paroi paisse.
Immunodpression.
Confusions possibles :
Histoplasma capsulatum
Remarques :
1. La paroi des kystes et des pr-kystes est colore en bleu au bleu de toluidine O.
2. Les trophozotes et les corps intra kystiques sont colors en bleu avec un noyau rouge au Giemsa. La plupart du
temps, seul le noyau est color. La paroi nest jamais colore.
3. Pneumocystis carinii est lancien nom pour Pneumocystis jiroveci.
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Famille :
Borrelia spp.
Spirochataceae
Nom commun :
Pathologie :
Fivres rcurrentes poux ou tiques,
Borrliose (F).
Relapsing fever, louse or tick borne
Borreliosis(En).
Borreliosis, fiebre recurrente por piojos o por
garrapatas (Es).
Mode de contamination :
Ou
Localisation rgionale et
5
endmique
Htes intermdiaires :
Vecteurs :
Homme .
Animaux et Hommes
Poux :
Vecteurs et Rservoir :
Localisation de la bactrie :
Tiques molles :
Ornithodorus spp,
Classe :
Spirochaetes
Cosmopolite et pidmique .
Htes dfinitifs :
BACTERIES
Sang, (L.C.R.).
Mthodes diagnostiques :
Recherche de la bactrie dans le sang : examen direct, Woo, goutte paisse colore au Giemsa.
(recherche des bactries dans le LCR ou lurine : examen direct, coloration au Giemsa).
(tests srologique, peu tudis, peu disponibles, raction croises avec Treponema spp.)
Morphologie de la bactrie
(aprs coloration au Giemsa)
Fine et longue bactrie 10 20 m x 0,5 m
Hlicodale,
Colore en Bleu (au Giemsa)
Trs mobile (examen frais)
Autres signes biologiques associs :
Confusions possibles :
Trponmes.
Leptospires.
Exflagellation des gamtocytes de
Plasmodium spp.
Remarques :
1.
Cette bactrie se retrouve dans des notes de parasitologie en raison de lutilisation de techniques de parasitologie pour la mettre en vidence
(examen frais du sang, Woo, goutte paisse, etc.), mais aussi en raison de son diagnostic diffrentiel de la malaria.
Les Borrelia sont des spirochtes hlicodaux trs mobiles Gram ngatif qui peuvent aussi tre colors au Giemsa. Toutes les espces de
Borrelia ont la mme morphologie et sont indistinguables au microscope. La culture nest pas une mthode de diagnostic de routine.
Le prlvement du sang devrait concider avec le pic fbrile (bactrimie maximale, sensibilit optimale).
Les fivres rcurrentes poux sont causes par Borrelia recurrentis (frquentes sur les haut plateaux africains : Ethiopie, Rwanda, Burundi ;
moins frquente en Afrique du nord-ouest et de lest, au Prou, en Bolivie et en Indes.
Les fivres rcurrentes rgionales tiques sont causes par : B. duttoni (Madagascar, Afrique centrale et La runion) ; B. hispanica (Afrique
centrale et du nord, Espagne, Grce) ; B. persica (Egypte, Iran, Afghanistan), B. turicatae, B. parkeri, et B.hermsii (USA) ; B. venezuelensis
(Amrique du sud), ... Dans ces cas, les bactries sont aussi transmisses dune gnration de tiques lautre (transmission transovarienne).
Les tests srologiques non standardiss sont peu tudis et peu disponibles pour les fivres rcurrentes.
Borrelia burgdorferi, agent causal de la maladie de Lyme est aussi transmis par des tiques dures, sans cependant provoquer de fivre
rcurrente. La coloration au Giemsa nest daucune utilit dans ce cadre (bactrimie trop basse pour tre dtecte). Des tests srologiques
sont cependant disponibles.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
4
5
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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES
PROTOZOAIRES
AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES
CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES
CLASSIFICATION
INCONNUE
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Groupe : Protozoaires ?
Blastocystis hominis
Distribution gographique :
incertae sedis
Famille :
Classe :
Opalinidae
Nom commun :
Blastocystea
Pathologie :
Incertaine ?
Cosmopolite
Htes dfinitifs :
Htes intermdiaires :
Mode de contamination :
? fco-oral ?
Homme
Mthodes diagnostiques :
Recherche des parasites dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation (sur selles
formoles).
3 40 m.
Forme :
Vacuole, [multi-vacuolaire,
granuleuse, kystique ou
amibode].
Caractristiques :
Confusions possibles :
Kystes de protozoaires.
Remarques :
1. Ce parasite reste bien des gards une nigme : tant pour son cycle et son pouvoir pathogne que pour sa
taxonomie. Aprs avoir t classs parmi les champignons puis les algues, il serait un protozoaire (CavalierSmith, 1998). Sa pathogncit ventuelle dpendrait de lintensit dinfestation (Plus de 5 Blastocystis par
champ microscopique [examen direct, grossissement 400 x]) ou dune association avec dautres organismes.
2. Le parasite nest plus retrouv aprs concentration par sdimentation (sauf si les selles ont t formoles ou
fixes au pralable).
3. Il existe aussi des formes multi-vacuolaires, kystiques ou amibodes. Ces morphologies ne sont cependant pas
reconnaissables lexamen direct.
4. Lusage du lugol de DAntoni peut tre utile.
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Lmission des lments parasitaires peut tre discontinue. Dans ce cas, il faut rpter les
examens et ne pas se contenter dun seul examen ngatif.
Il ny a pas dmission dufs, sil ny a que des vers adultes mles (rare).
Il ny a pas dmission dlments parasitaires pendant la phase de latence qui peut
correspondre la maturation in situ du parasite ou/et la phase de migration interne.
Tous les parasites du tractus digestif et de ses annexes ne donnent pas dlments parasitaires
dans les selles, do la ncessit de bien connatre la biologie du parasite (exemples : ufs
doxyures pondus la marge de lanus, embryophores de certains grands tnias vacus avec
et dans les proglottis entiers, etc.).
Certains ufs prsents dans les selles peuvent indiquer non une infestation, mais
contamination par des ufs de passage (Fasciola spp. par exemple).
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Examen macroscopique
Il est important de raliser l'examen macroscopique ds l'arrive de l'chantillon au laboratoire. Celui-ci
consiste dterminer la consistance (selles moules, molles, diarrhiques, aqueuses, dysentriques), la
prsence ventuelle de sang et de glaires et la prsence de segments de vers ou de vers adultes. Les selles
liquides et/ou sanglantes doivent avoir la priorit pour l'examen microscopique direct (Certains lments,
comme les formes vgtatives des amibes, vont se dcomposer ou se modifier assez rapidement aprs
l'mission des selles et ne seront donc plus identifiables).
Examen direct :
Lexamen direct consiste faire un examen microscopique des selles son arrive au laboratoire, sans
manipulation pralable, aprs adjonction tout au plus deau physiologique ou dun colorant (Lugol, MIF [colorant
fixateur pour les formes vgtatives des protozoaires, bleu de mthylne tamponn, etc.).
Si les selles sont liquides, placez une goutte de celles-ci sur une lame porte-objet. [Pour des selles
muqueuses et/ou sanglantes, prlevez la partie muqueuse]. Recouvrez le tout d'une lamelle couvreobjet (20mm x 20mm). Examinez compltement et systmatiquement l'objectif 10 x la prparation
pour la recherche des ufs, des larves (et des formes vgtatives de Balantidium coli), puis examinez
3 lignes l'objectif 40 x pour la recherche des protozoaires. Les dtails ventuels des ufs seront
observs au 40 x.
Les selles de consistance normale ou presque normale sont mises en suspension sur la lame porteobjet dans une goutte d'eau physiologique. Recouvrez le tout d'une lamelle (20 mm x 20 mm) et
examinez systmatiquement l'objectif 10 x pour la recherche des ufs, des larves et des formes
vgtatives, puis examinez 3 lignes l'objectif 40 x pour la recherche des protozoaires. Les dtails
ventuels des ufs seront observs au 40 x.
Notation semi-quantitative
des rsultats
Rares
+
++
+++
++++
Le nombre d'ufs trouvs dans l'examen systmatique d'une prparation, permet d'valuer trs grossirement
la charge parasitaire. Cette valuation peut cependant tre utile en clinique. Le nombre d'ufs trouvs
dpend du parasite et de son mode de reproduction, de la consistance et du volume des selles, de lge du
patient, etc. Pour certains parasites, comme les Tnia spp., cette quantification na pas de sens. Pour les
protozoaires, une valuation de la charge parasitaire est peu utilise en raison de sa faible corrlation la
gravit de l'atteinte clinique.
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Cette mthode est uniquement indique pour la recherche des ufs dhelminthes. En fonction du temps de
contact, les ufs deviennent de plus en plus transparents sous laction de la glycrine. Cet claircissement
dpend de lpaisseur de la coque des ufs. Si la lecture se droule trop longtemps aprs prparation,
certains ufs coques minces deviennent invisibles. Cette mthode nest donc pas indique comme examen
de routine (qui doit permettre de retrouver tous les parasites). Elle reste toutefois une bonne technique lorsque
lon travaille sur un sujet bien dtermin (enqute pidmiologique de dpistage pour Schistosoma mansoni par
exemple). Le temps dclaircissement doit tre adapt aux ufs dhelminthes mettre en vidence. La
mthode peut tre rendue quantitative en prenant une quantit donne de selles (de 20 50 mg, usage dun
gabarit en matire plastique).
Coloration au lugol :
Cette technique permet de reprer plus facilement les kystes des protozoaires, en soulignant leurs
caractristiques morphologiques. Dans une solution iode, le cytoplasme des kystes se colore en jaune ou en
brun clair et les noyaux en brun fonc. Cette technique peut tre combine un examen direct ou un
examen aprs enrichissement.
Sur une lame porte objet, mettez en suspension une petite quantit de selles dans une goutte de lugol de
D'Antoni (Attention, cette solution est plus concentre que celle utilise en bactriologie). En raison de la taille
des lments observer, examinez la prparation un grossissement de 400x. Un micromtre oculaire est
ncessaire pour permettre de mesurer la taille des kystes. Cette technique peut aussi tre utilise pour la
coloration des ufs de Schistosoma haematobium dans la technique de filtration des urines.
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Techniques de concentration :
Les lments parasitaires sont souvent prsents en petit nombre dans les selles. Dans ce cas, lexamen direct
peut ne pas suffire pour dceler une infestation. Le but dune technique de concentration est de traiter un
volume assez important de selles afin de concentrer les parasites rares disperss dans un grand volume vers
un volume rduit. Ce petit volume pr-trait, qui contiendra donc un plus grand nombre de parasites, sera
examin comme pour lors dun examen direct. Les techniques de concentration ne permettent cependant pas
de mettre en vidence les formes vgtatives des protozoaires qui sont dtruites par le processus de
concentration. Lexamen direct dune prparation frais est donc la premire tape obligatoire de tout examen
microscopique.
Il existe un grand nombre de techniques de concentration avec diffrentes variantes. La majorit des
techniques sont bases sur des diffrences poids spcifiques. Le tableau suivant donne titre indicatif, les
poids spcifiques de diffrents lments.
ELEMENTS
Solution sature en sulfate de Zinc
Eau physiologique formole 10 % (v/v)
Ether
ufs dAncylostoma duodenale
Kystes de Giardia lamblia
Kystes dEntamoeba histolytica
Kystes dEntamoeba coli
Kystes dEndolimax nana
ufs fconds dAscaris lumbricoides
ufs de Trichuris trichiura
Kystes de Chilomastix mesnili
ufs non fconds dAscaris lumbricoides
POIDS SPECIFIQUES
1.180
1.019
0.714
1.055
1.060
1.065 1.070
1.065 1.070
1.065 1.070
1.110
1.150
1.180
1.200
Nous ne dcrirons ici que les techniques les plus simples le plus couramment utilises.
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
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ATTENTION :
ATTENTION :
Le formol est une substance toxique par inhalation, par contact avec la peau et par
ingestion. Les vapeurs de Formol sont irritantes pour les yeux et les muqueuses. Manipulez ce produit fentres
ouvertes (ou sous une hotte chimique) en utilisant des gants.
Aprs centrifugation, on
retrouve 4 couches :
Ether et graisses
Dbris
La technique de Ritchie permet aussi dobtenir un rsultat quantitatif : OPG (nombre dufs par gramme de
selles). LOPG nest PAS utile pour les cestodes, Enterobius vermicularis et Ascaris lumbricoides.
Calcul : 3 grammes de selles dans un volume final de 45 ml. Comme on examine entirement le culot
de centrifugation obtenu sur 1,5 ml de cette dilution de selles, on obtient le nombre dufs prsents
dans 0,1 gramme de selles. En multipliant donc le nombre dufs compts dans tout le sdiment par
10, on obtient le nombre dufs par gramme de selles.
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ATTENTION : Comme les ufs sont trs collants et directement infectants, Il est indispensable
dutiliser des gants et de se laver les mains aprs manipulation.
personne effectuant le prlvement sans prcaution est important.
Repliez un ruban autocollant transparent sur lextrmit dun tube essai, face collante dirige vers lextrieur.
Tout en cartant les fesses du patient, appliquez lextrmit du tube portant le ruban en diffrents endroits de la
marge anale pour collecter les ufs ventuellement prsents. Le ruban est ensuite coll sur une lame porteobjet et examin au microscope (objectif 10x). Pour augmenter la qualit de limage au microscope, il est
conseill de mettre un peu deau (ou un peu de dhydroxyde de sodium 1%) entre la lame et le ruban adhsif.
Les extrmits du ruban doivent cependant rester sches autrement il nadhrera pas la lame.
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Le nombre dufs de S. haematobium prsents dans les urines varie au cours de la journe et montre un pic
entre 10 et 14 heures. Les ufs sont plus facilement retrouvs en fin de miction. Un stress de la vessie
(mouvements, gonflement) aide au dcollement des ufs. Si les urines ne sont pas examines rapidement, il
est possible de retrouver des miracidiums trs mobiles. Pour la recherche des ufs de S. haematobium, les
derniers ml durines sont les plus importants, alors que Trichomonas vaginalis est plus prsents dans le premier
jet urinaire.
Ces lments sont donc prendre en compte dans le prlvement. Lusage de rcipients en plastique large
ouverture est recommand. Le volume rcolt doit tre de 10 ml au minimum. En augmentant le volume
durine rcolte, on augmente la sensibilit de la dtection.
Lexamen parasitologique des urines a ses limites :
Lmission ou la prsence dlments parasitaires dans les urines peut tre discontinue. Dans
ce cas, il faut rpter les examens et ne pas se contenter dun seul examen ngatif.
Il ny a pas dmission dufs, sil ny a que des vers adultes mles (rare).
Il ny a pas dmission dlments parasitaires pendant la phase de latence qui peut
correspondre la maturation in situ du parasite, et/ou la phase de migration interne et/ou au
temps de passage pour les ufs des veinules la lumire vsicale.
La sdimentation et la filtration sont les deux mthodes employes pour dceler les ufs de S. haematobium.
La sdimentation est moins sensible, mais elle est plus conomique et plus simple mettre en uvre que la
filtration. La technique de filtration est surtout utilise dans des enqutes pidmiologiques ncessitant des
donnes quantitatives.
Technique de sdimentation :
Agitez soigneusement lchantillon durine et versez-le dans un verre pied conique. Laisser sdimenter
pendant une heure au moins. Eliminez dlicatement le surnageant en conservant environ 10 ml durine au fond
du verre pied. Mlangez et transvasezle dpt dans un tube centrifuger fond conique. Centrifugez le
tube 2.500 rpm (1.000 g) pendant 5 minutes. Eliminez prudemment le surnageant, remettez le culot de
centrifugation en suspension, transvasez le tout sur une lame, recouvrez dune lamelle et observez
systmatiquement toute la prparation au microscope pour rechercher les ufs de Schistosoma haematobium
(objectif 10 x). [La recherche de Trichomonas vaginalis se fait en utilisant un objectif 10 x et 40 x].
Technique de filtration :
Adaptez un filtre (porosit de 12 20 m) dans le porte-filtre. Aprs avoir bien homognis les urines,
prlevez 10 ml dans une seringue. Adaptez la seringue au porte-filtre. En maintenant le tout vertical, faites
passer lurine travers le filtre. Dvissez soigneusement le porte-filtre. Remplissez la seringue dair, refixez-la
au porte filtre et expulsez lair. Cette tape est importante, car elle permet dliminer lexcs durine dans le
porte-filtre et de plaquer les ufs sil y en a, sur le filtre. Dvissez le porte-filtre, retirez le filtre avec une pince
et dposez-le sur une lame, face filtrante vers le haut. Recouvrez dune lamelle et observez systmatiquement
le filtre au microscope (objectif 10x). Il est possible dajouter une goutte de lugol de DAntoni pour augmenter la
visibilit des ufs par leur coloration orange. Grce cette technique de filtration, Il est possible davoir un
rsultat quantitatif (nombre dufs par ml durine).
Il existe plusieurs types de filtres : Des filtres usage unique en papier ou des filtres [rutilisables] en nylon
(Nytrel) ou en polycarbonate (Sartorius, Millipore,...).
Avant rutilisation, les filtres doivent tre
dcontamins une nuit dans de leau de javel domestique (Hypochlorite 1%), lavs et vrifis. La vrification
des filtres consiste examiner systmatiquement le filtre nettoy au microscope pour sassurer quil est bien
dbarrass de tout parasite.
Urines
Air
Filtre
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ATTENTION :
Des instructions prcises doivent tre donnes chaque patient sur la manire de produire un bon chantillon.
Une bonne procdure de prise dchantillon est en effet indispensable pour obtenir des rsultats de laboratoire
fiables moindre risques pour le personnel :
Le risque dinfection du personnel de sant (mais aussi dautres personnes) est important lorsquun patient
suspect de tuberculose tousse. Pour cette raison, la prise dchantillon doit se faire lextrieur, le plus loin
possible dautres personnes, en tenant compte de lorientation du vent. En cas dimpossibilit, une pice
spciale, spare et trs bien ventile, peut tre utilise (attention la position du patient par rapport aux
ventilations et au sens des courants dair provenant de portes ou de fentres ouvertes).
Chaque crachoir doit tre identifi (date, nom du patient, numro de patient, n de lchantillon, etc.). Pour
viter tout risque dinversion, ces donnes doivent figures sur le pot et non sur le couvercle du crachoir.
Des crachoirs en plastique dur, usage unique avec couvercle vis tanche et avec un diamtre douverture
de 2 3 cm sont vivement recommands. En cas dimpossibilit, des crachoirs rutilisables en verres, avec
les mmes caractristiques peuvent tre utiliss (ils doivent alors bien videmment tre dcontamins, lavs et
striliss avant toute rutilisation). Les crachoirs doivent tre transparents pour permettre un contrle visuel de
la qualit du prlvement sans devoir les ouvrir.
Le crachat doit provenir du plus profond possible du poumon. Ceci peut le plus souvent tre obtenu aprs
plusieurs profondes inspirations suivies dune expiration force. Le volume de lchantillon doit tre suffisant (3
5 ml) et doit contenir des particules solides ou purulentes. (La salive nest pas un bon chantillon en raison du
faible nombre de bacilles pulmonaires que lon peut y trouver et de la prsence possible de mycobactries
commensales. Il en est de mme pour les scrtions nasales). Le crachat nest cependant pas toujours
purulent, pour un tuberculeux en cours de traitement.
On rcolte 2 ou 3 crachats : le premier sur place lors de la consultation (on the spot sputum), le deuxime la
maison (crachat du saut du lit ou early morning sputum) et ventuellement le troisime sur place loccasion de
la consultation suivante. (Le processus ncessite donc 2 jours). Le meilleur chantillon sera le prlvement
matinal qui concentre les scrtions de toute une nuit. Pour cette raison, dans certains programmes de lutte
contre la tuberculose, deux crachats matinaux et un crachat sur place sont utiliss.
Comment juger de la qualit dun crachat : Un bon prlvement ne doit pas ressembler de leau. Sa
couleur peut varier : du blanchtre au jauntre purulent, avec parfois un peu de sang. (Du sang pur nest
pas cependant pas adquat). Un chantillon ressemblant de la salive devrait tre refus, et le patient
devrait tre encourag produire un nouvel chantillon valable. Au cas o rien de mieux ne peut tre
obtenu (surtout en cours de traitement pour une tuberculose), un chantillon aqueux pourrait cependant
tre analys.
La qualit du crachat peut aussi tre value aprs talement et coloration : Un chantillon salivaire sera
trs peu pais et souvent avec des bulles . Sous le microscope, un vrai crachat doit contenir des
filaments muqueux et des globules blancs, tandis quun prlvement salivaire contiendra principalement
des cellules pithliales. Un vrai crachat devrait contenir 20 x plus de globules blancs que de cellules
pithliales.
Un crachat peut tre conserv assez longtemps avant analyse microscopique bactriologique (plus dune
semaine temprature ambiante pour recherche de BAAR). Ceci nest bien videmment pas vrai pour des
cultures ou pour la recherche de parasites.
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Aprs examen bactriologique ngatif, transvasez environ 5 ml de crachat dans un tube centrifuger fond
conique. Ajoutez 5 ml dune solution dhydroxyde de sodium ou de potassium 1 % (p/v). Fermez
hermtiquement le tube avec un bouchon et mlangez vigoureusement durant une minute. La solution
dhydroxyde liqufiera et claircira le crachat. Aprs une heure de repos, re-mlangez vigoureusement le tube
durant une minute. Centrifugez le tube 2.500 rpm (700 g) pendant 5 minutes. Eliminez le surnageant et
transvasez le culot de centrifugation sur une lame porte-objet. Recouvrez dune lamelle et observez
compltement et systmatiquement au microscope (objectif 10x). Regarder plus attentivement les masses
gristres prsentes qui cachent souvent les ufs.
Coloration au RAL-555 :
Technique plutt utilise pour la recherche de Pneumocystis jiroveci dans un produit de lavage alvolaire ou
dans une biopsie ou une ponction pulmonaire. Cette coloration permet de mettre lintrieur des kystes en
vidence. Elle peut tre remplace par une coloration au Giemsa (identique celle dun frottis sanguin).
Centrifugez (10 minutes, 2.000 RPM ou 600 g) le produit de lavage alvolaire et ralisez un frottis mince du
culot de centrifugation (ou ralisez des empreintes de la biopsie sur des lames). Aprs schage lair, fixez les
lames au mthanol puis immergez-les pendant 25 secondes dans le ractif 2 (solution aqueuse dosine, code
RAL 361643). Plongez ensuite dans les lames pendant 40 secondes dans le ractif 3 (solution aqueuse de
bleu de mthylne, code RAL 361653). Rincez leau courante. Il nest pas ncessaire de rincer les lames
entre les diffrents bains. Aprs schage, les lames sont observes au microscope (objectif 100 x, oculaire 10
x). Les renseignements concernant les ractifs RAL et leurs distributeurs peuvent tre obtenus sur le site
internet : http://www.reactifs-ral.fr/
Coloration au Bleu de toluidine O (Chalvardjian et all, 1963, modifie par Marty et all 1981):
Technique plutt utilise pour la recherche de Pneumocystis jiroveci dans un produit de lavage alvolaire ou
dans une biopsie ou une ponction pulmonaire. Cette coloration permet de mettre les parois des kystes en
vidence. Centrifugez (10 minutes, 2.000 RPM ou 600 g) le produit de lavage alvolaire et ralisez un frottis
mince du culot de centrifugation (ou ralisez des empreintes de la biopsie sur des lames). Aprs schage
lair, fixez les lames au mthanol puis immergez-les pendant 5 minutes dans le ractif de sulfatation. Aprs
rinage leau courante, les lames sont plonges 5 minutes dans une solution de bleu de toluidine O. Les
lames sont ensuite passes dans 3 bains dalcool isopropylique (environ 1 minute par bain). Aprs schage,
les lames sont observes au microscope (objectif 100 x, oculaire 10 x).
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Examen direct :
Cette mthode est la plus facile mais aussi la moins sensible pour dceler la prsence de parasites assez
grands et mobiles dans le sang (les trypanosomes, les Borrelia spp. des fivres rcurrentes et les microfilaires
sanguines).
Elle est cependant fastidieuse puisquil faut observer systmatiquement la prparation
microscopique. Comme autre inconvnient, il est signaler quil faut observer immdiatement les lames aprs
leur prparation surtout pour la recherche de trypanosomes. En effet, les trypanosomes tant reconnus leur
mouvement, il faut procder lexamen microscopique avant quils ne simmobilisent, cest--dire 10 15
minutes aprs le prlvement sanguin. (Attention : Les UV du rayonnement solaire immobilisent aussi les
trypanosomes). Ce test prsente cependant un certain intrt, surtout pour la trypanosomiase rhodesiense
au sommet de la vague parasitaire, au moment o lon peut retrouver un nombre relativement important de
trypanosomes dans le sang et pour les fivres rcurrentes (chantillon de sang pris au pic de fivre). Ceci
permet dviter de recourir des techniques plus perfectionnes et plus coteuses. Le seuil de positivit est de
lordre de 15 40 microfilaires et 10.000 trypanosomes par ml de sang.
Une petite goutte de sang [prlvement capillaire ou veineux sur un anticoagulant tel que lEDTA pour la
recherche de microfilaires ou de Borrelia ; ou lhparine pour la recherche de trypanosomes] est place sur une
lame et recouverte dune lamelle. La prparation est examine directement au microscope lobjectif 10 x pour
la recherche de microfilaires (ou 40 x pour la recherche de Borrelia spp. ou de trypanosomes).
Frottis sanguin :
Cette mthode, assez peu sensible nest vraiment utile en parasitologie que pour lidentification exacte de
lespce de Plasmodium infestant une personne (et plus exceptionnellement pour la recherche et/ou
lidentification de Babesia spp). Elle est principalement utilise en hmatologie pour la diffrentiation des
globules blancs et lanalyse de la morphologie cellulaire.
Une petite goutte de sang [provenant dun prlvement
capillaire ou dun prlvement veineux sur un anticoagulant
ne dformant pas les cellules tel que lEDTA] est dpose
lextrmit dune lame porte objet. Sans attendre, dplacez
le petit ct dune autre lame (rode de prfrence) pour
venir toucher la goutte de sang. Les deux lames doivent
former un angle compris entre 30 et 45 . Attendez que le
sang se rpande par capillarit entre les deux lames.
Poussez ensuite la lame incline vers lautre extrmit de la
lame porte objet en entranant derrire elle le sang qui
stale en couche mince. Ce mouvement doit tre rgulier et
ininterrompu jusqu puisement de la goutte de sang. Il doit
aussi tre ni trop lent, ce qui produirait un frottis trop court et
trop pais ; ni trop rapide, ce qui donnerait un frottis trop
long et trop fin. Immdiatement aprs confection du frottis,
agitez la lame pour la faire scher rapidement. En zone
tropicale, le schage dun frottis durant la saison des pluies
peut-tre trop long. Lusage dun sche-cheveux permet
alors de diminuer le temps de schage et dviter la
dformation des globules rouges.
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Un bon frottis est assez pais au dbut de ltalement (3) pour samincir et finir en forme de flamme avant la fin
de la lame (1). La partie intermdiaire du frottis (2) est la plus approprie pour lexamen macroscopique. Dans
cette zone, on doit retrouver une couche monocellulaire de cellules, sans superposition.
(1)
(2)
(3)
Fixez la prparation en faisant couler 2 ou 3 gouttes de mthanol absolu sur le frottis dispos verticalement.
Aprs vaporation du mthanol, la lame peut tre colore au Giemsa : Couvrez compltement la prparation
de Giemsa dilu 3,5 % dans de leau tamponne un pH adapt aux parasites recherchs (cf. tableau). [Soit
pour obtenir une dilution 3,5% prparez par lame colorer, 4 ml deau tamponne laquelle vous ajoutez 5
gouttes de Giemsa concentr [Merck N 1.01424]. Laissez colorer pendant 20 30 minutes. Egouttez et
rincez prudemment leau courante. Laissez scher et examinez au microscope sous immersion lobjectif
100x (ou lobjectif 50x).
Pour viter la dgradation du Giemsa par raction acide-base, la prparation de la dilution du Giemsa
doit aussi tre extemporane. Le Giemsa concentr doit aussi tre filtr avant utilisation (au moment du
transvasement dans un petit flacon compte gouttes. Pour obtenir de bonnes colorations, il est
indispensable que leau de dilution ait un pH adquat au but poursuivi. Une eau trop acide colore tout
trop rouge, alors quune eau alcaline colore tout trop bleu. Utilisez un pH adapt lexamen.
pH
6.6
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
Hmatologie
et
Paludisme
Paludisme
Leishmanioses
* le pH de 8,0 permet de mettre en vidence les taches de Maurer de P. falciparum.
Utilisations
Hmatologie
Paludisme*
et
Microfilaires
Trypanosomiases
Dans un petit laboratoire, pour viter des erreurs, il est cependant prfrable de standardiser le pH de
leau de dilution 7,2 pour tous les examens, y compris lhmatologie (compromis acceptable pour tous
les usages).
Coloration de GIEMSA
(hmolyse [pour chantillons non fixs] et coloration)
La coloration panoptique de Pappenheim (May-Grnwald-Giemsa), qui sert colorer les frottis pour formules
leucocytaires, peut aussi tre utilise la place de la coloration de Giemsa, sans amliorer notablement la
coloration des parasites sanguins.
Coloration de May-Grnwald-Giemsa : Pour une coloration au May-Grnwald-Giemsa, la fixation du frottis au
mthanol nest pas ncessaire : La premire tape de cette coloration assure la fixation du frottis. Ds que le
frottis est sec, recouvrez compltement la lame de May-Grnwald [Merck N 1.01424] et laissez agir 3 minutes
(fixation). Ajoutez ensuite gouttes gouttes, 4 ml deau tamponne un pH adapt lexamen. (cf. tableau
supra). Laissez agir le colorant dilu 1 minute, puis liminez-le. Sans rincer, recouvrez la lame de Giemsa
dilu 3,5 % dans de leau tamponne un pH adapt lexamen (cf. tableau supra). [Soit pour obtenir une
dilution 3,5% prparez par lame colorer, 4 ml deau tamponne laquelle vous ajoutez 5 gouttes de Giemsa
concentr [Merck N 1.01424]. Laissez colorer pendant 20 30 minutes. Egouttez et rincez prudemment
leau courante. Laissez scher et examinez au microscope sous immersion lobjectif 100x (ou lobjectif
50x).
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
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N.B. : Numration parasitaire en frottis sanguin (uniquement valable dans le cadre de la malaria et des
infestations Babesia spp.) :
La numration parasitaire en frottis sanguin se fait en comptant le nombre de globules rouges parasits par
des formes asexues du parasite sur au moins 25 champs microscopiques lobjectif 100 x (ou lobjectif 50 x).
Cette mthode ncessite la dtermination prliminaire du nombre moyen drythrocytes prsents par champs
microscopique (cette valeur est de lordre de 200 mais varie considrablement en fonction de la qualit de
ltalement et du grossissement utilis). Elle ncessite aussi la numration des globules rouges.
Le rapport du nombre de globules parasits par champ microscopique sur le nombre total drythrocytes par
champ donne le pourcentage dhmaties parasites.
Nombre drythrocytes infect
------------------------------------------ x 100 = % dhmaties parasites
Nombre drythrocytes observs
Si le nombre de globules rouges par microlitres de sang nest pas connu, on considre que 1% dhmaties
parasites corresponds 50.000 parasites par l de sang.
Goutte paisse :
Cette mthode est une technique de concentration. Elle utilise +/- 4 fois la quantit de sang (20 l) ncessaire
pour un frottis mince (5 l). Comme le sang est moins tal, les parasites ventuellement prsents sont plus
frquents par unit de surface. Cette technique est utilisable pour la recherche des Plasmodium spp., des
trypanosomes, des microfilaires sanguines et des Borrelia spp. responsables des fivres rcurrentes.
Le seuil de positivit est de lordre de 5 10 (100 en routine) plasmodies par l de sang, 10.000 trypanosomes
ou 15 40 microfilaires par ml de sang.
Une goutte de sang est place sur une lame porte objet et
immdiatement dfibrine pendant 20 30 secondes par un
mouvement en spirale fait laide du coin dune autre lame (la
dfibrination est prfrable lutilisation dun anticoagulant, lEDTA
tant le moins mauvais, sauf pour la recherche de trypanosomes
pour lesquels lhparine est prfrable).
Ce mouvement aura aussi pour effet dtaler le sang sur une surface de 1 2 cm de diamtre. Ltalement doit
tre dune paisseur telle quil est possible de voir des caractres dun journal travers. Laisser scher sans
chauffage et sans exposition au soleil pour viter la fixation des hmaties qui empcherait leur destruction. La
goutte paisse ne peut tre colore que si elle est compltement sche. Pour viter une contamination croise
entre diffrentes gouttes paisses lors de la coloration, lusage de cuve de coloration est viter. Couvrez
compltement la prparation de Giemsa dilu 3,5 % dans de leau tamponne un pH adquat (cf. tableau
supra) [Soit pour obtenir une dilution 3,5% prparez par lame colorer, 4 ml deau tamponne laquelle vous
ajoutez 5 gouttes de Giemsa concentr [Merck N 1.01424]. [Pour la recherche et lidentification des
microfilaires, la coloration de Giemsa devrait tre deux fois plus longue (40 minutes) et le Giemsa deux
fois plus concentr (10 gouttes de Giemsa concentr pour 4 ml deau tamponne idalement pH 8)].
La solution aqueuse de Giemsa aura une double action : hmolyse et coloration.
Egoutter et rincer
prudemment leau courante. Laisser scher et examiner au microscope ( lobjectif 10 x pour la recherche
de microfilaires, ou sous immersion pour la recherche des autres parasites sanguins). Les globules rouges ont
clat et seuls sont rests sur la lame les leucocytes et les parasites ventuels.
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Pour viter la dgradation du Giemsa par raction acide-base, la prparation de la dilution du Giemsa
doit aussi tre extemporane. Le Giemsa concentr doit aussi tre filtr avant utilisation (au moment du
transvasement dans un petit flacon compte gouttes. Pour obtenir de bonnes colorations, il est
indispensable que leau de dilution ait un pH adquat au but poursuivi. Une eau trop acide colore tout
trop rouge, alors quune eau alcaline colore tout trop bleu. Utilisez un pH adapt lexamen.
pH
Utilisations
6.6
6.8
Hmatologie
Hmatologie
et
Leishmanioses
7.0
Paludisme
7.2
Paludisme
7.4
7.6
7.8
8.0
Paludisme
et
Microfilaires
Trypanosomiases
Dans un petit laboratoire, pour viter des erreurs, il est cependant prfrable de standardiser le pH de
leau de dilution 7,2 pour tous les examens, y compris lhmatologie (compromis acceptable pour tous
les usages).
N.B. : Numration des parasites en goutte paisse (uniquement valable dans le cadre de la malaria) :
La recherche de parasites est considre comme ngative si aucun parasite na t retrouv durant lexamen dau moins 200 champs
microscopiques lobjectif 100 x (ou objectif 50 x). Ceci ncessite peu prs 5 10 minutes pour un technicien expriment.
La numration parasitaire en goutte paisse, se fait en comptant le nombre de formes asexues de parasites par 200 leucocytes (nombre
de parasites compts dans autant de champs microscopiques quil est ncessaire pour compter un peu plus de 200 leucocytes). Pour
Plasmodium falciparum, les gamtocytes doivent tre reports sparment. En connaissant la concentration leucocytaire, on peut obtenir le
nombre de parasites par l de sang :
Nombre de parasites asexus compts
----------------------------------------------------- x Concentration leucocytaire = Nombre de parasites/l de sang
Nombre de leucocytes compts
Si la numration leucocytaire nest pas ralise, lOMS recommande dutiliser comme valeur 8.000 leucocytes par l de sang pour tous les
patients.
Chez des personnes non immunes, des parasitmies mmes faibles peuvent donner lieu des phnomnes pathologiques. En absence
dimmunit surtout, la corrlation entre la densit parasitaire de P. falciparum et la gravit des symptmes est nette. [N.B. : Dans les
infestations P. falciparum, lexamen de sries de frottis prlevs toutes les 6 12 heures montrent dimportantes fluctuations dans les
densits parasitaires. Ceci est d la squestration des rythrocytes parasits au moment de la schizogonie. Dans les infestations o le
dveloppement des parasites est synchrone, ceux-ci peuvent disparatre temporairement des prlvements].
Pour la routine dun petit laboratoire tropical, une estimation de la charge parasitaire en goutte paisse est suffisante pour Plasmodium spp.
Ce systme propos par lO.M.S. indique labondance relative des formes asexues des parasites laide dun code allant de 1 4 signes
plus , comme suit :
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Woo :
Bonne technique de concentration pour la recherche des trypanosomes, des microfilaires sanguines et des
Borrelia spp. responsables des fivres rcurrentes. Cette technique est relativement facile raliser, mais
ncessite lutilisation dune centrifugeuse hmatocrite lectrique. Ce test est trs sensible car il concentre les
parasites partir de 50 60 l de sang. Cette technique ne permet cependant pas didentifier le type de
microfilaire. De plus, en cas de prsence de microfilaires, il est impossible de visualiser les trypanosomes ou
les Borrelia spp. ventuellement prsents. L'examen microscopique des tubes reste dlicat mme pour un
technicien expriment. Le seuil de positivit est de lordre de 250 trypanosomes et 25 microfilaires par ml de
sang.
La centrifugation d'un tube capillaire rempli de sang provoque la sparation des
globules rouges et du plasma. (Centrifugation de 5 minutes 12.000 rpm ou
15.000 g). Les leucocytes et les thrombocytes qui sont plus lgers que les
hmaties se regroupent l'interface entre la colonne rouge et le plasma, et
Plasma
forment ainsi un trait blanchtre (le buffy coat). Les parasites qui ont peu
prs la mme densit que les globules blancs, se retrouvent dans la mme
Globules blancs
buffy coat
et plaquettes
rgion.
Globules rouges
Aprs centrifugation, le tube est dpos sur une lame spciale et immerg
dans de leau. La lame porte tube est place sous lobjectif du microscope.
Centrez lobjectif sur linterface du tube lire, au niveau du buffy coat. Les
parasites apparaissent anims de mouvements ondulants, soit libres dans le
plasma proximit de la couche de globules blancs, soit enfoncs dans cette
couche ce qui les rend plus difficiles observer. Quel que soit l'objectif utilis
(10x ou 20x), il ne peut permettre la lecture sur toute la profondeur du tube,
aussi faut-il tourner le tube sur lui-mme pour pouvoir examiner tout linterface.
Comme lpaisseur de la prparation empche lutilisation dun objectif 40x
standard, il peut tre utile dutiliser des oculaires 15x.
Pour identifier les parasites retrouvs, on pourrait envisager de couper le capillaire au niveau de la couche des
globules blancs, dtaler cette fraction sur une lame et de raliser une coloration au Giemsa. Cependant, en
raison du risque important de se blesser et donc de sinfecter, cette procdure est dconseiller.
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Mthode de Knott :
Il sagit dune mthode asse sensible pour la recherche des microfilaires. La limite de dtection est de lordre
dune microfilaire par ml de sang.
1 ml de sang est mlang avec 10 ml de formol 2 % v/v. Cette concentration en formol est suffisante pour
fixer les microfilaires, sans fixer les globules rouges qui seront donc hmolyss. Aprs hmolyse, le mlange
est centrifug 1.000 rpm (160 g) pendant 5 minutes. Le surnageant est limin et le culot tal sur une lame.
Aprs coloration au Giemsa (comme pour une goutte paisse), la lame est examine systmatiquement au
microscope (objectif 10 x). Si ncessaire, les grossissements 400 x et 1.000 x peuvent tre utiliss pour
lidentification de lespce.
Mthode de Strout :
Il sagit dune mthode assez sensible, utilise pour la recherche des formes trypomastigotes de Trypanosoma
cruzi.
Prlevez 20 ml de sang sans anticoagulant. Laissez coaguler le sang. Aprs coagulation, enlevez le caillot.
Centrifugez le srum ainsi obtenu 2.500 rpm (1.000 g) pendant 5 minutes. Examinez le culot de
centrifugation lobjectif 10 x ou 40 x (comme pour un examen direct pour recherche des trypanosomes
mobiles). Comme la dure de la ralisation du test est assez longue, les trypanosomes peuvent tre immobiles.
Il est donc prfrable dtaler et colorer au Giemsa le culot de centrifugation (comme pour une goutte paisse)
puis de lexaminer au microscope immersion (objectif 50 x ou 100 x).
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Scarification profonde :
Cette technique de prlvement de suc dermique est utilise pour la recherche des microfilaires dermiques
(Onchocerca volvulus et ventuellement Mansonella streptocerca). Elle permet de retrouver dans la mme
prparation des microfilaires sanguines mais aussi accidentellement des plasmodies, des trypanosomes ou des
Borrelia spp. Cette mthode nest pas recommande pour la recherche de ces parasites.
Les sites de prlvement sont les mmes que ceux utiliss pour une skin snip . Aprs avoir dsinfect la
peau, incisez la peau au scalpel sur 1 cm de long et 2 mm de profondeur. La profondeur est correcte, sil ny a
quun peu de sang qui perle de lincision. Incisez la peau une seconde et une troisime fois quelques mm de
la premire incision. Si la profondeur de la premire incision ntait pas assez importante (pas de sang perlant
de la scarification), appuyez un peu plus fort sur le scalpel. Pressez la peau autour des scarifications pour faire
sortir la lymphe contamine de sang hors de la scarification. Recueillez ce mlange plusieurs fois sur une lame
porte objet. Laissez scher la prparation. Colorez cette prparation au Giemsa comme une goutte paisse.
Observez systmatiquement la prparation lobjectif 10 x pour rechercher les microfilaires.
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6
Notons que la cellulorachie normale peut aller jusqu 30 cellules par l de LCR pour des enfants de moins dun an, jusqu 20 cellules pour des enfants de 1 4 ans et jusqu 10
cellules pour des enfants de plus de 5 ans et ce jusqu la pubert.
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Examen direct :
Rarement, des parasites mobiles peuvent tre retrouvs frais, lors de la numration des leucocytes du L.C.R.
Il peut sagir de trypanosomes, indiquant alors un stade II de la trypanosomiase, des trophozotes amibodes de
Naegleria ou dAcanthamoeba spp. (quil ne faut pas confondre avec des macrophages, mobiles galement par
leurs pseudopodes). On peut aussi retrouver exceptionnellement des kystes dAcanthamoeba spp.
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Mthode
Prcipitation au TCA 5 %
Prcipitation
lacide
sulfosalicylique 3 %
Colorimtrie au bleu de
Coomasie brillant
Colorimtrie au BCA
Valeur seuil
(en g/l)
0,25
0,45
0,37
Donne non disponible pour
les LCR
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4 ml
2 ml
1 ml
Une mthode assez simple est la technique de Sicard et Cantaloube. Il sagit dun
test de floculation : les protines coagulent sous leffet combin de la chaleur et du
milieu acide en flocons blanchtre qui sdimentent au fond du tube. La hauteur du
sdiment est proportionnelle la quantit de protines (albumine) prsente. Les tubes
de Sicard et Cantaloube sont malheureusement difficiles trouver.
Versez dans le tube de Sicard 4 ml du LCR examiner (surnageant aprs
centrifugation du LCR). Chauffez lgrement le tube jusqu 50C. Ajoutez
immdiatement 12 gouttes dacides trichloroactique 30 % (p/v). Fermez le tube et
retournez-le 3x pour homogniser le contenu (ne secouez jamais le tube). Laissez
reposer le tube en position rigoureusement verticale pendant au moins 5 heures (on
peu diffrer la lecture jusqu 24 heures sans grande modification du rsultat). La
hauteur du culot trouble indiquera la quantit de protines prsentes. Par cette
mthode, Un LCR normal ne doit pas dpasser 0,40 g/l.
ATTENTION : Le Phnol est extrmement corrosif et toxique. Manipulez ce produit avec grande
prcaution.
Ce test simple, bas sur la prcipitation des globulines en prsence de phnol, permet dvaluer la quantit de
globulines prsentes. En raison de son seuil de positivit, ce test nest utilisable que sur du L.C.R. Mesurez
dans un petit tube essais 1 ml de ractif de Pandy puis placez le tube devant un morceau de carton noir.
Ajoutez goutte--goutte 3 gouttes du surnageant du L.C.R. centrifug et examinez le tube aprs chaque goutte.
Lorsquun prcipit blanc se forme lorsque la goutte de L.C.R entre en contact avec le ractif, le test est positif
(ce qui indique la prsence dune quantit importante de globulines dans le L.C.R.).
Le test est ngatif si aucun prcipit blanc ne se forme, si le mlange reste limpide ou si un lger trouble
apparat mais se re-dissout. Ce test est positif en cas de trypanosomiase (stade 2), de mningite bactrienne,
fongique (cryptococcose) ou parasitaire (amibes). Il est galement positif en cas de malaria crbrale, de
tumeur crbrale, de blessures crbrales,
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ATTENTION :
Ne versez jamais d'eau dans l'Acide Actique Glacial. L'addition d'une faible quantit d'eau dans un
acide produit suffisamment de chaleur pour faire exploser la bouteille. Mesurez 950 ml deau distille
dans un cylindre de 1.000 ml et versez-la dans un flacon de 1.000 ml. Mesurez 50 ml dAcide Actique
Glacial dans un cylindre de 50ml. Ajoutez lentement les 50 ml dAcide Actique Glacial dans le flacon.
Le contenu schauffera.
Ce ractif peut tre remplac par du vinaigre blanc de cuisine.
CONSERVATION : Au moins 1 an dans un flacon brun.
2. ACIDE PICRIQUE
ATTENTION
: LAcide picrique est inflammable et explosif sec. Evitez les chocs, les
frottements et la dispersion de poussires. Ce produit est manipuler avec une extrme prudence, loin
dune flamme
Solution stock dacide picrique:
Acide picrique(C6H3N3O7)..........................................
Eau distille...............................................................
13 g
1.000 ml
Dissolvez les 13 grammes dacide picrique (VWR 1.00621) dans 1.000 ml deau distille dans
un bain-marie 60C.
CONSERVATION : 1 an dans un flacon brun hermtiquement bouch.
80 ml
80 ml
Ne versez jamais d'eau dans de l'Acide Picrique. L'addition d'une faible quantit d'eau dans
un acide produit suffisamment de chaleur pour faire exploser la bouteille. Mlangez une mme
quantit deau distille et de la solution stock dacide picrique.
CONSERVATION : 1 semaine (et/ou approximativement 200 prparations).
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ATTENTION :
Ne versez jamais d'eau dans l'Acide Trichloroactique. L'addition d'une faible quantit d'eau dans
un acide produit suffisamment de chaleur pour faire exploser la bouteille.
CONSERVATION : Quelques semaines.
5. ALCOOL ACIDE DE ZIEHL 3 %(v/v) (pour coloration de Ziehl Neelsen et l hmatoxyline ferrique) :
ATTENTION
Dans un flacon d'un litre, versez 970 ml d'Ethanol 96 %. Ajoutez lentement 30 ml d'Acide
Chlorhydrique en le laissant couler le long de la paroi. Mlangez. Le contenu s'chauffera. Les ractifs
de bases peuvent tre de qualit technique.
CONSERVATION : Quelques annes dans un flacon brun hermtiquement bouch.
250 ml
3 ml
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ATTENTION :
25 g
250 ml
Le contenu d'un flacon de 25 g de Bleu de Mthylne est introduit dans une bouteille brune de
250 ml qui est ensuite remplie d'Ethanol 96 %. La bouteille est vigoureusement agite trois
reprises dans la mme journe. Laissez dposer. La solution est prte l'emploi ds le
lendemain. On peut ajouter de l'Ethanol tant qu'il reste un dpt de Bleu de Mthylne.
N.B. Le Bleu de Mthylne peut tre dissous dans du Mthanol la place de l'Ethanol. Il ne
faut pas laver ou rincer les flacons contenant des solutions satures. Il faut seulement ajouter
de temps en temps un peu de colorant et un peu d'alcool. Tant qu'il reste un peu de poudre au
fond du flacon, on peut considrer que le surnageant est satur.
CONSERVATION : Quelques annes dans un flacon brun hermtiquement bouch.
Bleu de mthylne, solution de travail :
Solution sature de Bleu de Mthylne filtre.............
Eau Distille.................................................................
100 ml
900 ml
ATTENTION :
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ATTENTION : Le formol est une substance toxique par inhalation, par contact avec la peau et
par ingestion. Les vapeurs de Formol sont irritantes pour les yeux et les muqueuses. Manipulez ce
produit fentres ouvertes (ou sous une hotte chimique) en utilisant des gants.
Formol 37 % (Formaldhyde) (CH2O).................................................... 2 ml
Eau distille ................................................................................ 98 ml
CONSERVATION : au moins 2 ans dans un flacon brun.
ATTENTION : Le formol est une substance toxique par inhalation, par contact avec la peau et
par ingestion. Les vapeurs de Formol sont irritantes pour les yeux et les muqueuses. Manipulez ce
produit fentres ouvertes (ou sous une hotte chimique) en utilisant des gants.
Formol 37 % (Formaldhyde) (CH2O)........................................................10 ml
Eau Physiologique ..........................................................................90 ml
CONSERVATION : Au moins 2 ans dans un flacon brun.
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Solution stock B :
Phosphate Disodique dihydrate (Na2HPO4.2H2O).. 11,9 g
Eau distille................................................................... jusqu' 1.000
ml
Utilisez un ballon jaug pour dissoudre le ractif et mesurer le volume d'eau distille.
CONSERVATION : Plusieurs mois au rfrigrateur dans un flacon en verre brun. Ce ractif
doit tre vrifi rgulirement pour sassurer quaucune prolifration microbienne ou fongique
ne se soit installe. Remplacez la solution si elle est lgrement trouble aprs agitation.
Solutions de travail :
Utilisation
pH
Volume solution A
(en ml)
Volume solution B
(en ml)
Hmatologie
6,4
74,0
26,0
900
Hmatologie
6,6
64,0
36,0
900
Hmatologie et
leishmanioses
6,8
50,0
50,0
900
Paludisme
7,0
39,0
61,0
900
Paludisme
7,2
28,0
72,0
900
7,4
19,2
80,8
900
7,6
13,0
87,0
900
7,8
8,5
91,5
900
8,0
5,5
94,5
900
Trypanosomiases
Paludisme
Filarioses
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ATTENTION :
prcaution.
Solution mre de Fuchsine sature :
Fuchsine Basique.................................... 25 g
Ethanol 96 % (C2H6O)........................ 250 ml
Le contenu d'un flacon de 25 g de Fuchsine Basique (exemple Fluka 602) est introduit dans
une bouteille brune de 250 ml qui est ensuite remplie d'thanol 96 %. La bouteille est
vigoureusement agite trois reprises dans la mme journe. Laissez dposer. La solution
est prte l'emploi ds le lendemain. De meilleurs rsultats sont obtenus en utilisant de la no
fuchsine (exemple new fuchsin Merck 1.04041.0025), mais pour un prix beaucoup plus lev.
P.S. La Fuchsine Basique peut tre dissoute dans du Mthanol la place de l'Ethanol. Il ne
faut pas laver ou rincer les flacons contenant des solutions satures. Il faut seulement ajouter
de temps en temps un peu de colorant et un peu d'alcool. Tant qu'il reste un peu de poudre au
fond du flacon, on peut considrer que le surnageant est satur.
CONSERVATION : Quelques annes dans un flacon brun hermtiquement bouch.
Solution mre aqueuse de Phnol 5 % (v/v) :
Phnol Cristallis fondu (C6H6O)...... 50 ml
Eau Distille................................................... 950 ml
Leau doit tre de leau distille ou filtre. Leau de robinet contient souvent des mycobactries
saprophytes qui ne se distinguent pas microscopiquement des mycobactries pathognes !
Le Phnol Cristallis est normalement incolore. Il est prim, et ne doit pas tre utilis s'il est
de couleur rose violet.
La solution aqueuse de Phnol 5 % est prpare en ajoutant 50 ml de Phnol Cristallis
fondu 45 C (bain-marie ou soleil, ou flacon de 50 g de phnol [exemple : Fluka 77610]) 950
ml d'eau distille. Le cylindre qui sert mesurer le volume de Phnol doit tre prchauff dans
le bain-marie ou au soleil (sinon, le Phnol cristallisera immdiatement dans le cylindre).
CONSERVATION : Quelques mois dans un flacon hermtiquement bouch.
.
Solution de travail :
Solution sature de Fuchsine Basique, filtre............
Solution aqueuse de Phnol 5 %............................
100 ml
900 ml
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ATTENTION : L'Hydroxyde de Sodium est extrmement corrosif. Manipulez ce produit avec grande
prcaution.
Hydroxyde de Sodium en granules (NaOH)....................................................1 g
Eau Distille.................................................................................................100 ml
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Dissolvez l'Iodure de Potassium dans 30 ml d'eau distille. Ajoutez l'Iode en Cristaux (pralablement
pulvris dans un mortier). Mlangez jusqu' dissolution. Ajoutez le reste de l'Eau Distille (470 ml).
N.B. : Liode ne se dissout pas dans leau et peu dans liodure de potassium. La dissolution de liode
est dautant plus difficile quelle contient des impurets. Utilisez donc toujours de liode bi sublime.
Conservez en bouteille brune l'abri de la lumire.
CONSERVATION : non filtr : 3 mois dans un flacon en verre brun. Le Lugol doit avoir une coloration
brun rouge. S'il est jaune, il ne fonctionnera plus et doit tre jet. Filtrez avant emploi. Liode,
produit corrosif et nocif svapore facilement de cette solution.
(recherche de Trichines)
ATTENTION
Ne versez jamais d'Eau dans l'Acide Chlorhydrique. L'addition d'une faible quantit d'eau dans un
acide produit suffisamment de chaleur pour faire exploser la bouteille. Dans un flacon d'un litre, versez
1.000 ml d'eau distille. Ajoutez lentement 5 ml d'Acide Chlorhydrique en le laissant couler le long de la
paroi. Mlangez. Le contenu s'chauffera. Ajoutez la pepsine et le chlorure de sodium. Mlangez
jusqu dissolution.
CONSERVATION : Au moins un an dans un flacon brun hermtiquement bouch.
21.REACTIF DE PANDY
ATTENTION :
50 g
500 ml
Le Phnol Cristallis est normalement incolore. Il est prim, et ne doit plus tre utilis s'il est de couleur
rose violet. Il existe des conditionnements de 50 g [exemple : Fluka 77610], permettant dviter le
pessage.
Le ractif de Pandy est une solution sature de phnol. Mettez le Phnol dans un flacon brun de 1000
ml. Ajoutez leau distille. Agitez nergiquement. Laissez reposer 1 jour. Vrifiez quil reste bien du
Phnol non dissous. Si oui, filtrez et conservez le ractif dans un flacon brun. Si tout le Phnol est
dissous, ajoutez 10 g de Phnol et attendez encore 1 jour avant de filtrer le ractif.
CONSERVATION : Quelques annes dans un flacon brun hermtiquement bouch.
090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale
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ATTENTION :
Dans une ampoule dcanter, mlangez en agitant fortement 140 ml dther di-thylique avec 40 ml
deau distille. Attendez que les deux couches se sparent et deviennent transparentes. Eliminez la
couche infrieure (aqueuse) ainsi que quelques ml de la couche suprieure (ther-hydrate) afin de
rincer la tubulure. Versez le reste de lther-hydrate dans un Erlenmayer plac dans de la glace.
Ajoutez alors goutte goutte 100 ml dacide sulfurique concentr tout en agitant lErlenmayer.
CONSERVATION : 1 mois dans un flacon brun hermtiquement bouch. Nutilisez plus le ractif si
celui-ci comporte deux phases.
23.SAF (Sodium-acetate/Acetic acid/Formalin pour fixation des parasites dans les selles) :
ATTENTION :
Ne versez jamais d'Eau dans l'Acide Actique Glacial. L'addition d'une faible quantit d'eau dans
un acide produit suffisamment de chaleur pour faire exploser la bouteille.
Des pots pour chantillons de selles sont remplis de 10 ml de SAF. Le patient doit y mettre +/- 2.5 ml
de selles (le plus rapidement possible aprs mission, en mlangeant bien les selles et le SAF durant
au moins 20 secondes). Prvoyez sur le pot chantillon une tiquette de danger et une indication du
niveau de liquide final [selles + SAF].
CONSERVATION : Au moins 1 an dans un flacon brun hermtiquement bouch.
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ATTENTION :
ATTENTION
80 ml
80 ml
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Il est
aussi irritant pour les yeux. Manipulez ce produit avec prcaution, loin dune flamme, fentres ouvertes
(ou sous hotte chimique).
Eau distille.................................................................................... 96 ml
Acide actique glacial (CH3COOH)............................................................. 5 ml
Solution aqueuse de Bleu de mthylne 1% ................................................1 ml
Ne versez jamais d'Eau dans l'Acide Actique Glacial. L'addition d'une faible quantit d'eau dans
un acide produit suffisamment de chaleur pour faire exploser la bouteille.
CONSERVATION : Quelques mois au FRIGO en flacon brun. Eliminez tous les 3 mois.
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ANNEXES :
ANNEXE 1 : RELATION ENTRE LA VITESSE DE ROTATION DUNE CENTRIFUGEUSE ET LA FORCE CENTRIFUGE
Vitesse de rotation
de la centrifugeuse
(en rpm)
Rayon de la
centrifugeuse
r (en cm)
Force centrifuge
(en g)
Figure : Relation entre la force centrifuge (g) et le nombre de tours par minutes (rpm) en
fonction du rayon du rotor de la centrifugeuse (r). En reliant les deux valeurs r et g par une droite,
on obtient lintersection avec la ligne vitesse de rotation de la centrifugeuse la valeur en rpm
utiliser pour cette centrifugeuse et ce rotor. La formule de relation entre g et rpm est :
g = 0.00001118 x r x rpm. (N.B. : le rayon de la centrifugeuse est exprimer en cm)
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ANNEXE 3 : CARACTERISTIQUES IMPORTANTES POUR LE DIAGNOSTIC DES HELMINTHES PRARASITES (sauf filaires)
Organisme
Ancylostoma duodenale
Anisakis spp.
Ascaris lumbricoides
Capillaria aerophila
Capillaria hepatica
Capillaria philippinensis
Clonorchis sinensis
Diphyllobothrium latum
Echinococcus granulosus
Enterobius vermicularis
Fasciola gigantica
Fasciola hepatica
Fasciolopsis buski
Hymenolepis diminuta
Necator americanus
Paragonimus spp.
Schistosoma haematobium
Schistosoma intercalatum
Schistosoma japonicum
Schistosoma mansoni
Schistosoma mekongi
Strongyloides stercoralis
Taenia saginata
Taenia solium
Toxocara canis
Trichinella spp.
Trichostrongylus spp.
Trichuris trichiura
Vampirolepis nana
5.000 - 22.000
sans objet
200.000
1 - 9 ans
2 - 3 semaines
1 - 4 semaines
30 - 45 jours
sans objet
+/- 3 semaines
12 - 15 semaines
4 - 10 semaines
12 - 20 semaines
+/- 20 jours
15 - 40 jours
2 - 3 mois
54 - 84 jours
50 - 60 jours
30 jours
25 - 60 jours
30 - 60 jours
2 - 3 semaines
10 - 12 semaines
5 - 12 semaines
1.000 - 4.000
35.000 - 100.000
sans objet
+/- 500
la plupart du temps strile (faible production ?)
25.000, (mais peu arrivent dans les selles)
+/- 16.000
3.000 - 6.000
20 - 300
150 - 400
1.500 - 3.500
100 - 300
1.500 - 3.500
jusqu' 2.000.000
sans objet
sans objet
30 - 90 jours (130 ?)
+/- 20 jours
3.000 - 20.000
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ANNEXE 5 : TABLEAU RECAPITULATIF DES KYSTES (OU DES OOCYSTES) DES PROTOZOAIRES INTESTINAUX
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Frottis et GE
Formol
Biopsie
Queue
Espace
cphalique
Caractristiques
Wuchereria
bancrofti
Brugia
malayi
Brugia
timori
Loa
loa
Mansonella
ozzardi
Mansonella
perstans
Mansonella
streptocerca
Onchocerca
volvulus
Oui
Oui
Oui
Oui
Non
Non
Non
Non
7,5 - 10 m
5 6 m
4,4 6,8 m
5 7 m
3 5 m
3 5 m
5 6 m
5 9 m
/
/
210 [180 240]
/
/
310 [280 320]
Effile
Sans noyaux
Effile
Avant dernier et
dernier noyaux trs
espacs
Effile
Avant dernier et
dernier noyaux
trs espacs
Effile
Noyaux jusqu
lextrmit
Pointue
Sans noyaux
Arrondie
Noyaux jusqu
lextrmit
Arrondie
Noyaux jusqu
lextrmit
crosse
dvque
Effile
Sans noyaux
Recourbe
Court : 1/1
Aussi long que
large
Long : 2/1
2 x plus long que
large
Court : 1/1
Aussi long que
large
Trs court
Trs court
Trs court
Long
Plus long que large,
souvent en forme de
raquette de tennis
Queue vide
4 noyaux en
file indienne
lextrmit
Noyaux
angulaires.
Dernier noyau
plus gros ou
plus fonc
8 noyaux en file
indienne
lextrmit
Queue pointue et
vide, souvent
recourbe. Noyaux
peu visibles, premier
et 2-3 derniers
noyaux ovodes et
souvent visibles
Corps Noyaux
Hernies
2 noyaux
2 noyaux
bien individualiss lextrmit caudale lextrmit caudale Range simple de
Gaine souvent
Gaine non
se terminant avant
noyaux jusqu
colore en rose au
colore au
lextrmit
lextrmit
Gaine non colore
Giemsa
Giemsa
Gaine non colore
au Giemsa
au Giemsa
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TYPE CELLULAIRE
GRANULOCYTES
TAILLE
m
NOYAU
FORME
COULEUR
CYTOPLASME
STRUCTURE
DE LA
CHROMATINE
EOSINOPHILES
BASOPHILES
Bleu
pourpre
fonc
12 15
2 5 lobes 8
12 15
Le plus
souvent 2
lobes (pincenez)
(parfois 3
lobes)
11 13
Lobes mal
spars
Bleu
(polymorphe) pourpre
peu visible
Bleu
pourpre
Rseau assez
pais et
grossier
Epaisse,
grossire
Epaisse,
grossire,
recouverte par
les granules
QUANTITE
COULEUR
+++
Rose ple
+++
Rose
+++
+++
Rose
Rose ple
GRANULATIONS
Trs fines
granulations,
Rose ou violace.
(parfois absentes)
Trs fines
granulations,
Rose ou rose violet
Grosses granulations
de calibre uniforme,
Jaune orange,
Grains accols.
Grosses granulations
de calibre variable,
Bleu trs fonc,
Grains bien spars,
peu nombreuses.
Dviation gauche de la formule dArneth : Les neutrophiles segments constituent la majorit des neutrophiles dans la formule leucocytaire normale. Une augmentation des non segments au-dessus de 16 % signifie une dviation
gauche (vers les formes plus jeunes). Cela se retrouve dans les processus inflammatoires, mais aussi dans des conditions de stress,
8
Dviation droite de la formule dArneth : Contrairement la dviation gauche o les noyaux segments sont rares voire absents, la dviation droite prsente des neutrophiles hyper-segments, cest--dire cinq segments ou
davantage. Une hyper-segmentation est caractristique des anmies mgaloblastiques. A leur dbut, celles-ci rvlent sur 100 granulocytes plus dun neutrophile 6 segments, plus de 3 5 segments ou plus de 25 4 segments.
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(suite)
TYPE CELLULAIRE
AGRANULOCYTES
TAILLE
m
NOYAU
FORME
COULEUR
CYTOPLASME
STRUCTURE
DE LA
CHROMATINE
Bleu violet
clair
Fine, rseau
ressemblant
une lintrieur
dun ponge
QUANTITE
(-) ou +
++
+++
Contient
gnralement
des vacuoles.
COULEUR
GRANULATIONS
Bleu ciel
(parfois
presque
invisible)
Bleu ciel
Absentes ou
quelques
granules
azurophiles
(rose violet)
Gris ou gris
bleu
Trs fines
granulation
(poussire),
azurophiles
(rose violet)
MONOCYTES
15 25
ERYTHROCYTES
6,7 7,7
Disque
biconcave,
rose
Aucunes
TROMBOCYTES
1,5 2 (5)
Lgrement
bleu
Rougetres
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ABREVIATIONS
C
Ac
Ag
CAA
CATT
CCA
CDC
cf.
cm
DEC
EDTA
E.I.A.
EITB
ELISA
(En)
ES
ES-Ag
(Es)
Ex.
(F)
FL
g
g
GB
GE
GR
HAP
Hb
Ht
ID
Ig
IF
IFAT
IFI
IHA
KIVI
LCR
LDH
LMC
LMO
LMV
mf.
MIF
ml
mm
MST
OMS
OPG
PCR
PK
PU
PV
QBC
RDC
rpm
SAF
SNC
sp.
spp.
TES
THA
l
m
VIH
Degr Celsius
Anticorps
Antigne
Circulating Anodic Antigen
Card Agglutination Test for Trypanosomiasis
Circulating Cathodic Antigen
Centers for Disease Control and Prevention
Confer
Centimtre
Diethylcarbamazine Citrate
EthyleneDiamine Tetra-acetic Acid (anticoagulant)
Enzyme ImmunoAssays
Enzyme-linked ImmunoelectroTransfer Blot
Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay
Anglais
Excretor/Secretor
Excretor/Secretor antigen
Espagnol
Exemple
Franais
Filariose lymphatique
Force centrifuge
Gramme
Globules Blancs
Goutte Epaisse
Globules Rouges
HmAgglutination Passive
Hmoglobine
Hmatocrite
Immuno Diffusion
Immunoglobuline
Immuno Fluorescent
Immuno Fluorescent Antibody Test
Immuno-Fluorescence Indirecte
Indirect HmAgglutination
Kit for In Vitro Isolation (Trypanosoma cruzi)
Liquide Cphalo-Rachidien
Lactate DsHydrognase
Larva Migrans Cutane
Larva migrans Oculaire
Larva Migrans Viscrale
Microfilaire
Merthiolate Iode Formol
Millilitre
Millimtre
Maladie Sexuellement Transmissible
Organisation Mondiale de la Sant
ufs par gramme de selles
Polumerase Chain Reaction
Pyruvate Kinase.
Prlvement Urtral
Prlvement Vaginal
Quantitative Buffy Coat
Raction de Dviation du Complment
Revolutions per minute
Sodium acetate Acetic acid Formalin (fixateur)
Systme Nerveux Central
Espce : (en faisant rfrence au parasite dont on parle)
Espces : (en faisant rfrence toutes les espces du genre)
Toxocara Excretory-Secretory antigens
Trypanosomiase Humaine Africaine
Micro
Microlitre
Micromtre
Virus de lImmunodficience Humaine
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