RESULTADOS

Se observo bacterias de muestras de abono lquido orgnico, biofowling y agua

estancada.

Utilizndose la tcnica de tincin simple se observo bacterias muertas, levadura y

se distingui sus asociaciones.

DISCUSIONES
Las bacterias son microorganismos unicelulares que se reproducen por fisin binaria. La
mayora son de vida libre, a excepcin de algunas que son de vida intracelular obligada,
como Chlamydias y Rickettsias. Tienen los mecanismos productores de energa y el
material gentico necesarios para su desarrollo y crecimiento. Las bacterias integran el
reino procariota (pro de primitivo y cariota de ncleo). (Prez & Mota, 2006).
Hay tcnicas que permiten observar los microorganismos en vivo. Segn Granados y
Villaverde (1996) stas son: Examen en fresco, que incluye examen en fresco entre
portaobjetos y cubreobjetos y examen en fresco sobre gota pendiente en porta excavado;
y tincin vital.
En la prctica de laboratorio se realiz un primer ejercicio en examen en fresco entre
portaobjetos y cubreobjetos.
Esta consiste en suspender el microorganismo objeto de estudio en agua destilada o
cualquier otro medio lquido transparente colocndolo en un portaobjetos a fin de poder
posteriormente, mediante microscopa, visualizar su morfologa, disposicin y motilidad.
(Granados y Villaverde, 1996).

Adems, Granados y Villaverde (1996) agrega que en esta tcnica se extender la

muestra en el portaobjetos con el fin de homogeneizar la mezcla colocando con cuidado
sobre la suspensin un cubreobjetos formando inicialmente un ngulo de 45 evitando
que se formen burbujas de aire (en nuestra muestra de agua estancada se formaron
pequeas burbujas de aire) al caer el cubreobjetos sobre la suspensin.. Luego se
sellaran con parafina (vaselina) los bordes de los cubreobjetos para disminuir la
evaporacin y evitar corrientes en la preparacin.
En la microscopa ptica se toma en cuenta el factor contraste, porque sin un contraste
adecuado es difcil diferenciar una estructura del fondo que la rodea.
Es as que se usan coloraciones para incrementar el contraste entre el espcimen y el
fondo que lo rodea, pero desafortunadamente las coloraciones dificultan la observacin de
los microorganismos vivos. (Atlas, 1990).
En la mayor parte de las tcnicas de coloracin se pone una suspensin de
microorganismos en un portaobjetos y se deja secar. A la preparacin as obtenida se le
pasar rpidamente sobre una flama para que el calor fije las clulas que se encuentran
all, esto es, las clulas se fijan al portaobjetos de tal manera que no pueden ser
arrastradas al lavar la preparacin. Ms adelante, se agrega colorante, se deja actuar por
algn tiempo, se enjuaga para quitar el exceso de colorante y se observa. (Atlas, 1990).
El segundo ejercicio realizado en la prctica de laboratorio fue de observacin de
bacterias por la tcnica de tincin simple.
En un procedimiento de coloracin simple, se usa un solo reactivo colorante que no
intenta producir reacciones de coloracin diferenciales para los distintos tipos de
microorganismos o estructuras. Las tcnicas de coloracin simple para microorganismos
son de utilidad cuando el colorante es fijado por las clulas y as los microorganismos
aparecen de color oscuro o coloreados sobre un fondo luminoso o claro, y son negativas
cuando los microorganismos no fijan el colorante, en cuyo caso el fondo es el que se tie
y los microorganismos aparecen brillantes sobre el fondo oscuro.
Estas dos tcnicas dependen del hecho de que las bacterias y otros microorganismos
poseen carga negativa asociada a la capa externa de la clula, principalmente debido a
los grupos PO43- de la membrana celular. (Atlas, 1990).
En los procedimientos de coloracin positiva un colorante cido (catinico), que tiene
cromforo (porcin colorida de la molcula de colorante) cargado positivamente, es
atrado hacia la cubierta externa de la clula cargada negativamente. Colorantes como el
azul de metileno (que fue el colorante utilizado en el ejercicio de laboratorio) tienen una

porcin de la molcula de color azul, que es atrada a la superficie de la clula, dando

como resultado una tincin positiva del microorganismo. (Atlas, 1990).
CONCLUSIONES
-

En la observacin de bacterias en forma directa; para las muestras del abono

lquido orgnico, biofowling y agua estancada se observaron colonias de bacterias
de diferentes formas desplazndose. Se distinguan formas de cocos y bacilos,
pero no claramente.

En la observacin de bacterias utilizndose la tcnica de tincin simple se observo

cocos (en forma aislada, diplococos, estreptocos) y bacilos (aislados, diplobacilos
y estreptobacilos). Tambin se observaron levaduras aisladas y en conjunto. Todas
las especies estaban quietas y de un color azul violeta. Se distinguan claramente.

CUESTIONARIO
1. Cules son las asociaciones ms frecuentes en bacterias?
Segn Burdon y Williams (1971) entre los cocos, y tambin con menor frecuencia
entre bacilos y espirilos, las clulas que crecen rpidamente tienden a ordenarse
en gurpos caractersticas. El aspecto de cada agrupamiento segn se observa en
el microscopio, es una importante ayuda para reconocer las especies.
Tenemos:
-

Diplococos: Cocos en parejas. Generalmente los lados adyacentes de los

organismos apareados son achatados.

Estreptococos: Cocos en cadena.

Estafilococos: Cocos en masas irregulares que semejan racimos de uvas. Se

dividen en ms de un plano del espacio y permanecen fuertemente adheridos,
formando masas irregulares.

Ttradas: Cocos en grupos de cuatro. Estos cocos se dividen en dos planos que
forman ngulo recto entre s.

Sarcinas: Cocos en bloques cbicos.

Grupos de bacilos y espirilos: El crecimiento caracterstico de algunas especies de

bacilos es por parejas (diplobacilos). Otros pueden formar largas cadenas
(estreptobacilos). Algunos muestran una disposicin muy sorprendente de clulas
paralelas; otros crecen en una masa entretejida y enmaraada. Los espirilos no se
agrupan en ninguna forma caracterstica, sino que crecen en forma de cadenas
largas y ondulantes. A veces el espirilo no logra encadenarse y aparece el
filamento como una forma de ovillo retorcido.

2. En qu rango de tamao se definen las bacterias?

Segn Granados y Villaverde (1996), el tamao de las bacterias se mide en m
(0.000001 m) y oscila entre 0.2 y 2 m.
El tamao de las bacterias oscila entre las 0.5 y 3 m, pudiendo llegar en algunos
tipos a 10 m. Solo son visibles entonces, al microscopio ptico o microscopio
electrnico. Para observarlas con el microscopio ptico se usa el objetivo de
inmersin (100X), sumergiendo esta lente en una gota de aceite (aceite de
inmersin) en el preparado a observar. A modo comparativo, una clula eucariota
mide ms de 5 m, mientras que un reo virus mide menos de 0.1 m. (Prez &
Mota, 2006).
BIBLIOGRAFA
ATLAS, R. 1990. Microbiologa. Fundamentos y aplicaciones. Compaa
Editorial Continental, S.A de C.V. Mxico D.F, Mxico. Pp 55-62.
BURDON, W & WILLIAMS, R. 1971. Microbiologa. Primera edicin en
espaol. Publicaciones Cultural. Mxico D.F, Mxico. Pp 131-135.
GRANADOS, R & VILLAVERDE, C. 1996. Microbiologa. Bacteriologa.
Caractersticas y clasificacin bacteriana. Virologa. Caractersticas y
tcnicas bioqumicas. Editorial Paraninfo. Madrid, Espaa. Pp 9-10, 216220
PREZ, M & MOTA, M. 2006. Temas de Bacteriologa y Virologa mdica.
Captulo 2: Morfologa y estructura bacteriana. Segunda edicin corregida.
Universidad de la Repblica. Facultad de Medicina. Departamento de
Bacteriologa y Virologa. Instituto de Higiene. Montevideo, Uruguay. Pp 2326.