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MEDIOS DE CULTIVO PCA

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

INTEGRANTES:
DAZ VILLEGAS JULIN ESTEBAN -1455715
LONDOO COLORADO CESAR AUGUSTO 1455743
PRADO DUCARA JOHN EDINSON - 1455957
VICTORIA PEREA HAROLD ANDRES 1456014
VILLEGAS GOMEZ JAIRO ANDRS -1455936

DOCENTE:
MABEL BEATRIZ ESQUIVIA

UNIVERSIDAD DEL VALLE


SEDE TULU
TECNOLOGA EN ALIMENTOS
07 DE SEPTIEMBRE DEL 2015

MARCO TERICO.
En la prctica cuando se manipulan microorganismos provenientes de
muestras ambientales se debe tener especial cuidado en no perder
microorganismos en las diferentes etapas de aislamiento, como tampoco
permitir la contaminacin.
Para efectuar el estudio de los microorganismos, se han diseado diversos
mtodos que permiten cultivarlos bajo condiciones artificiales, en los que es
posible cultivarlos bajo condiciones experimentales y manejar un solo tipo de
microorganismo. Una de las tcnicas ms usadas en el laboratorio de
microbiologa consiste en transferir una muestra microbiolgica de un ambiente
determinado a un medio de cultivo, lo que permite obtener cultivos microbianos.
Al efectuar este procedimiento, es necesario considerar que en el rea de
trabajo, existen muchos otros microorganismos; debido a esto, es necesario
tomar precauciones para impedir que stos penetren y contaminen los cultivos
en estudio. Por otra parte, para considerar no slo el aspecto nutricional, sino
tambin las condiciones ambientales de su hbitat natural, por lo que en el
medio de cultivo se debe ajustar el pH y concentracin de sales y durante la
incubacin condiciones tales como la temperatura, aireacin, la luminosidad.
La aplicacin de estos procedimientos ha permitido propagar los
microorganismos en cultivos mixtos, as como su aislamiento y la obtencin de
cultivos puros, facilitando de este modo, el estudio, caracterizacin, aplicacin y
control de los mismos. La forma de sembrarlos y cultivarlos depende del tipo de
microorganismo y propsito especfico del estudio.
Cultivar un microorganismo significa promover intencionalmente el desarrollo
de ste en medios de cultivo y condiciones de laboratorio controladas. La
poblacin de microorganismos desarrollada en un medio se denomina cultivo.
Cuando ste contiene una sola especie de microorganismo, se denomina
cultivo puro o axnico, cuando contiene ms de una especie de
microorganismos se denomina cultivo mixto.
Conceptos de inters.
Medios de cultivo.
Un cultivo microbiolgico, puede realizarse para diferentes fines, por ejemplo:
aislamiento e identificacin de una bacteria, pruebas de esterilidad de
diferentes productos, anlisis microbiolgico de aguas, alimentos ambientes
etc.
Estos pueden denominarse como sustratos sobre los cuales los
microorganismos encuentran los elementos nutricionales necesarios para

realizar su metabolismo en forma similar a como lo hacen cuando se


encuentran en la naturaleza.
En ellos las bacterias crecen y se reproducen dando como resultado la
formacin de colonias en los medios slidos y enturbiamiento, grumos, natas,
velos o produccin de gas en los lquidos.
Muestreo y cultivo de microorganismos.
En el caso del muestro de microorganismos, se debe tener en cuenta la fuente
de la cual se va a extraer, es decir si el medio en el que se encuentran
corresponde a un suelo, a una corriente de agua o a un alimento en especial,
esto con el fin de utilizar medios de cultivo similares al hbitat natural de la
bacteria para de esta forma garantizar su recuperacin, la cual se constituye
como el primer paso dentro de un muestreo convencional.
Posteriormente se pasa a analizar los tipos de microorganismos obtenidos,
esto se logra con tcnicas de aislamiento y seleccin.
En el aislamiento simplemente lo que se busca es obtener colonias separadas
con el fin de evaluar sus caractersticas macro y microscpicas y finalmente, si
Considera de inters proceder a su purificacin y crio conservacin. Lo anterior
puede realizarse mediante la siembra en medios especficos de las diluciones
seriadas del material que se cree, presenta los microorganismos buscados. El
nmero de diluciones depende de la carga microbiana, a mayor carga, mayor
ser el nmero de diluciones a efectuar.
En la seleccin, se hace lo mismo que en el aislamiento, la diferencia es que
se emplean medios de cultivo selectivos, los cuales permiten el crecimiento de
un tipo de microorganismos e inhiben el desarrollo de otros, lo que facilita la
separacin del mismo. Este procedimiento se efecta, cuando se conoce tanto
el microorganismo como su metabolismo como tal, dado que por lo regular la
selectividad de este tipo de medios radica en la presencia de antibiticos o
reactivos que suelen ser txicos, por lo que la eleccin del medio depende de
las caractersticas del agente microbiano con el que se desea trabajar.
Luego de aislado y /o seleccionado, la bacteria, moho o levadura, debe ser
purificado, se parte de la premisa que una colonia, es un conjunto de clulas
que provienen de una misma clula madre, por lo tanto debe garantizarse lo
anterior sometiendo a tal colonia a evaluaciones macroscpicas (uniformidad
en las caractersticas) y microscpicas (que la totalidad de las estructuras
observadas presenta la misma forma, apetencia tintorial y agrupacin). En caso
de que pueda realizarse la purificacin, se pretende aumentar la biomasa del
microorganismo, para lo que se hace crecer en un medio de enriquecimiento
que estimule su crecimiento y finalmente se pasa a crio conservacin, mediante
tcnicas como la del nitrgeno lquido conservacin en glicerol.

OBJETIVOS.

Mostrar al alumno las diferentes tcnicas de manipulacin de


microorganismos, para lo cual se partir de un pool de tres
microorganismos (E. coli, Saccharomices. c y Bacillus sp).

Sembrar en medio PCA la suspensin con el contenido de los tres


microorganismos ( E. coli, Saccharomices. c y Bacillus sp.).

Observar y describir las caractersticas morfolgicas de las colonias.

METODOLOGA
Se esterilizo el lugar
de trabajo y se realiz
una limpieza
individual.
Una vez esterilizado el
medio PCA se verti
poco a poco en como
caja Petri dejando
esparcir bien.

Con el medio PCA en las


cajas Petri se coloc cada
una alrededor del mechero
para que se solidificara el
medio PCA.

Se prepar el medio PCA,


mezclando en el Erlenmeyer
de medio PCA 2.82 g y 120
ml de agua del acueducto.

Se llev el medio PCA


a la autoclave durante
40 minutos en total.

Cuando se solidifico el medio


PCA se aislaron las muestras
con papel vinipel y se
dejaron incubar durante 48
horas a temperatura
ambiente.
Transcurridas las 48
horas se analizaron las
cajas Petri una por una.

RESULTADOS

En la mayoria de las cajas se observaron microorganismos en forma de


puntos y manchas de color amarillo probablemente estas sean colonias de
la bacteria staphylococcus aureus. Por otra parte y en una menor cantidad
se pueden apreciar hongos como mohos y levaduras.

1. Esta caja muestra un


spreader
de color
blanco con
5. levaduras
y moho
una colonia que se destaca de
3. 2
staphylococcus aureus
levaduras

2. En esta se destaca una especie de


moho de color negro y algunas
levaduras de color beige adems de
algunas colonias de staphylococcus
aureus
4.6.
Spreader
En esta de
se aprecia muy bien el
staphylococcus
aureus
spreader de staphylococcus
con
dos mohos y una
aureus
levadura

Caja Petri
1
2
3
4
5
6

Carga microbiana
Spreader
<30
<30
spreader
<30
spreader

Conteo
>6500x1
15 aprox.
2 aprox.
>6500x1
7 aprox.
>6500x1

Caja escogida
No
No
No
No
No
No

No se escogi ninguno de los medios de cultivo ya que por lo que en ellos no


se cultivo nada no deberan haber colonias.

CONCLUCIONES

Los medios PCA son altamente nutritivos para los microorganismos, por
eso se debe tener mucho ms cuidado a la hora de cultivar.

Un lugar de trabajo limpio y estril no es suficiente para evitar


contaminar los medios de cultivos tambin se tiene que tener en cuenta
otros factores.

Se utiliza agua de acueducto para crear los medios de cultivo por su


contenido de trasas de metal que ayudaran a la hora de incubacin de
los microorganismos.
CAUSAS DE ERROR

Al momento de la preparacin de la muestra no se tomaron bien las


precauciones y por lo tanto se obtuvo una gran variedad de ufc.

En algn momento de la practico algn compaero pudo habrsele


quedado el tapa bocas o la cofia.

WEBGRAFIA.

http://perso.wanadoo.es/sergioram1/medios_de_cultivo.htm
https://books.google.com.co/books?
id=Nxb3iETuwpIC&pg=PA168&lpg=PA168&dq=medios+de+cultivos+de+mi
croorganismos&source=bl&ots=z90lqN5YqA&sig=O9vyz8GWf31XFowq2I4p_iDi6o&hl=es-419&sa=X&ved=0CCsQ6AEwAzgKahUKEwjm9O4-4DIAhWMth4KHZIxCrw#v=onepage&q=medios%20de%20cultivos
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