PRACTICA 1: OBSERVACION EN FRESCO Y

COLORACION
OBSERVACION DE CULTIVO EN FRESCO
OBJETIVOS:
Poder reconocer y observar estructuras microbianas con el uso del
microscopio.con diferentes tipos de preparaciones como en fresco, y
apreciar el uso de la microbiologa con diferentes microorganismos
METODOLOGIA:
1) Se esteriliza el porta objeto con el mechero
2) Se agrega dos gotas de melaza en el porta objeto
3) Se esparce en la superficie de la lamina
4) Se agrega el cultivo a la muestra
5) Se coloca el cubre objeto
6) Se observa en el microscopio
RESULTADOS
Fig. numero 01: vista microscpica
del preparado en fresco de la
bacteria BACILLUS NICHELIFORMIS

Material biolgico: Bacillus licheniformis

Tipo de preparado: En freco
Observaciones: Bacillus
Objetivo: 40x
Aumento: 400 aumento

OBSERVACION DE CULTIVO EN SECO

OBJETIVOS:
Poder observar en la muestra, su forma , color, tamao por
medio del microscopio.

METODOLOGIA:
Se esteriliza el porta objeto con el mechero
Se agrega dos gotas de melaza en el porta objeto
Se agrega el cultivo a la muestra

 Se pas por el mechero para secar la muestra

RESULTADOS:
Muestra : Cultivo
Preparacion: En seco
Aumento : 400x

COLORACION GRAM O COMPUESTA

OBJETIVOS:
Aprender a identificar la morfologa bacteriana y tipo de tincin
gran positivao gran negativas
METODOLOGIA:
Esterilizar el portaobjeto
Esterilizar el gancho
Sacar dos gotas de melaza y agregar en el porta objeto
Volver a esterilizar el gancho para sacar el cultivo
Secamos la muestra
Colocar dos gotas de violeta de cristal en la muestra dejndolo
colorear por dos minutos , quitar el exceso
7) Colocar el lugol dejndolo reposar 2 minutos, quitar el exceso
8) Lavar las lminas con alcohol de acetona hasta llegar a
decolorar
9) Por ltimo echar zafranina dejndolo colorear 2 minutos
10)
Finalmente lavar con agua y dejar secar
11)
Llevar al microscopio
RESULTADOS:

1)
2)
3)
4)
5)
6)

Figura 02: Observacion de la bacteria BACILLUS

LICHENIFORMIS en coloracin compuesta
Muestra: Cultivo o suspensin bacteriana
Preparacin: En fresco
Aumento: 400x

COLORACION SIMPLE

 OBJETIVOS:
Aprender la tcnica de preparacin , y de coloracin en el estudio
microscpico de cultivos bacterianos
METODOLOGIA:
1) Esterilizar el portaobjeto
2) Esterilizar el gancho
3) Sacar dos gotas de melaza y agregar en el porta objeto
4) Volver a esterilizar el gancho para sacar el cultivo
5) Secamos la muestra
6) Colocar dos gotas de azul de metileno dejndolo colorear por un
minuto
7) Se lava con agua
8) Se lleva al microscopio
RESULTADOS:

Figura 03: Observacin microscpica de la bacteria BACILLUS

LICHENIFOMIS en coloracin simple

Muestra: Cultivo o suspensin bacteriana

Preparacion : En fresco
Aumento: 400x

PRACTICA 2: MEDIOS DE
CULTIVO
DILUSIONES
OBJETIVOS:
Es generar colonias aisladas
mediante una dilucin, en un medio de cultivo
METODOLOGIA:
1) Preparar 250 ml de solucin salina fisiolgica al 0,85%
2) Agregar 4,5 ml de solucin salina fisiolgica a cada frasco:

102 y 103 .

101 ,

3) Agregar una muestra de microbio utilizando el asa bactereolgica

aadiendo dicha muestra al frasco de

101 solucin salina

fisiolgica.
4) Transportar una parte de la muestra (0,5ml) de la dilusin del
frasco de

101

proceso para el frasco de

5) Del frasco de

102 ) realizando ste mismo

a otro frasco (

101

10

extraer 0.1ml y colocar una gota en la

muestra de agar MacK Conkey

6) Esterilizar el asa triangular, pasar por la superficie de la placa Petri
para su enfriamiento
7) Esparcir la gota de la dilusin por todo el cultivo
8) Esterilizar el asa triangular
9) Se realiz en mismo procedimiento con el frasco de

102

10)
Para finalizar se cubrieron las placas.
RESULTADOS:

Figua01: Diluciones con solucin salinica

PRACTICA 3: OBSERVACION DE CULTIVOS

RESULTADOS:
ESPECIE

CARACTERSTICAS

BACTERIANA

Mostaza

Mediano

Ondulado

ASPECT
O
Cremoso

BACILUS SP

Crema

Grande

Ondulado

Cremoso

Plano

BACILUS SP

Crema

Pequeo

Ondulado

Cremoso

Plano

VIBRIO
PARAEMOLITUC
US

Verde

Pequeo

Ondulado

Brillante

Convexo

E. COLI

COLOR

TAMAO

BORDE

ELEVACI
N
Convexo

PRACTICA 4: INHIBICION DE LAS BACTERIAS

EFECTO DE LOS DESINFECTANTES Y
ANTIMICROBIANOS SOBRE EL CRECIMIENTO
BACTERIANO
OBJETIVOS:
Saber si el microorganis puede ser resistente
RESULTADOS:
p
BACTERIAS

INIBICION POR DESINFECTANTES

RESISTENTES

INTERMEDIOS

BACILUS SP
ECHARICHIA COLI

SENSIBLE
X

VIDRIO
PARAEMOLITUCOS

PRACTICA 5: METABOLISMO BACTERIANO

Prueba 01: Hidrolisis de almidn
OBJETIVOS:
Ver si las bacterias son capaces de llegar a utilizar el almidn como
nutriente
Saber que bacterias producen amilasa
Metodologia:

Sembramos un cultivo en una placa Petri, en donde la especie

bacteriana ser BACILLUS, y lo sembramos en un medio de AGAR
ALMIDN (AA).
Este medio de cultivo se coloc a una temperatura de 37C por 24
horas.
Luego aadimos una cantidad suficiente de solucin yodada de lugol
al medio de cultivo sin tener contacto el BACILLUS directamente, es
decir la solucin debe ser aadida al contorno de la especie
bacteriana.
Luego esperamos unos segundos para ver cmo acta la solucin
yodada en este medio de cultivo.
Finalmente apuntamos lo observado.

RESULTADOS:

Figura 01: resultado de la prueba de hidrolisis de almidon

Identificacin de gran (+) y gran (-)

Muestra que hay almidn por la coloracin azul alrededor de
la placa petri

Prueba 02: Diferenciacin de pseudomas

METODOLOGIA:

Tenemos 2 tubos de ensayo, en donde cada uno es una muestra

diferente, las cuales, estuvieron en AGAR DESOXICOLATO.
Observamos cmo reaccionan cada una de ellas.

 Finalmente apuntamos la reaccin tanto del tubo de ensayo donde

haba presencia de SALMONELLA y en el otro tubo de ensayo donde
haba presencia de ESCHERICHIA COLI.

FIGURA 02 : Identificacin de Pseudomonas en el tubo amarillento.

Prueba 03: SIEMBRA EN

PUNTURA

METODOLOGIA:

Para esta prueba trabajamos con dos tipos de muestras diferentes.

Una de ellas es SALMONELLA y la otra es ESCHERICHIA COLI.
Estas muestras fueron colocadas en un medio de cultivo de AGAR
TRIPLE AZUCAR HIERRO (TSI).
Con un asa bacteriolgica (en punta) coger una cantidad significativa
del medio de cultivo.
Introducir la punta hasta el fondo del tubo.
Luego se retira el asa, se estra el pico con un movimiento en forma
de zigzag, de un lado al otro
Incubar a una temperatura de 35-37C por 24 horas
Luego esperamos a ver los cambios que ocurrieron en las dos
muestras
RESULTADOS:

FIGURA 03: Observacion de bacterias reductoras (E. coli)

PRUEBA N04: OBTENCIN DE DIXIDO DE

CARBONO (CALDO GLUCOSADO)

Objetivos:
Determinar crecimiento de hongos y levaduras

METODOLOGIA:

Colocamos glucosa en un tubo de ensayo.

Luego colocamos la campana de Durham dentro del tubo de ensayo

para la obtencin del Dixido De Carbono

Luego observar si hay presencia de Dixido De Carbono en el tubo de
ensayo.

RESULTADOS:

FIGURA 04: Observacion de gas en los tubos

PRUEBA 05: CALDO

PECTONADO
METODOLOGIA:

Poner en un tubo de ensayo el caldo de

peptona
Luego poner el papel acetato de plomo, para incubar la muestra

por 37 centgrados por 24 horas.

Luego revisar si se ha manchado el papel de color negro.

RESULTADOS:
FIGURA 05: Turbidez en las soluciones del tubo