Facultad de Ciencias de la Salud

Licenciatura en Medicina

II Semestre

2014

Manual de laboratorio
Biologa y gentica

Documentado, revisado y elaborado por:

Lic. Betzab Vargas de Castillo
Dra. Alejandra Mori Gmez
1

ndice

Prefacio

Normativo de laboratorio

Metodologa de trabajo en el laboratorio

Instrucciones para el Pre - Prctica

10

Instrucciones para el Post - Prctica

11

Gua para elaboracin de Portafolio de Biologa y Gentica II

12

Prcticas
Prctica No. 1: Codificacin de un segmento de ADN

15

Prctica No. 2: Obtencin del cido ribonucleico de muestras animales

20

y vegetales
Prctica No. 3: Mitosis

28

Prctica No. 4: Agentes que controlan el ciclo celular

33

Prctica No. 5: Cuerpos de Barr

37

Prctica No. 6: Meiosis

43

Prctica No. 7: Determinacin de grupo sanguneo

49

Prctica No. 8: Estudio genealgico de la gentica humana

55

Prctica No. 9: Interpretacin de cariotipo Humano

59

Prctica No. 10: Estudio gentico y morfolgico de Drosofila

66

melanogaster
Prctica No. 11: Cromosomas Politenicos de glndulas salivales de
Drosophila
Prctica No. 12: Suturas

70
73

2|P gi na

Prefacio
Las Prcticas de Biologa y gentica II, tienen como objetivo principal introducir
al alumno los conceptos y las tcnicas bsicas del laboratorio de Biologa
Celular. Para ello se ha diseado una serie de actividades prcticas con tcnicas
sencillas que permitirn que el alumno conceptualice y aplique los conocimientos
tericos.
Las prcticas estn organizadas en sesiones de hora y media aproximadamente
de duracin, a lo largo de una semana. Las prcticas, se realizarn en el
Laboratorio de Biologa (1 planta del TEC de la URL).
Cada sesin est estructurada en breves introducciones tericas de los
conceptos ms importantes y bsicos, necesarios para la mejor comprensin y
desarrollo de la parte experimental que se har a la continuacin. Dicha parte
experimental constar de actividades individuales y experimentos en grupos.
Asimismo, al final de cada sesin de este Manual de Prcticas, se podr
encontrar un cuestionario que ayudar a sedimentar los aspectos prcticos ms
relevantes de la sesin.
Para el buen aprovechamiento de las prcticas se recomienda leer previamente
la sesin correspondiente en el guin. Adems, se realizar un control de
asistencia del alumnado, es obligatorio para el ingreso a la prctica entregar la
pre-prctica y el diagrama de trabajo. As como tambin podrn realizarse
exmenes cortos en la mayora de las prcticas.

Olvido lo que escucho. Recuerdo lo que veo. Aprendo lo que hago

Proverbio Chino

Lic. Betzab Vargas G. de Castillo

3|P gi na

Normativo del laboratorio

CAPITULO I
Disposiciones Generales.
ARTCULO 1:
Este normativo es de observancia general y obligatoria para estudiantes,
tesistas, investigadores y toda persona autorizada que se encuentre dentro de las
instalaciones del laboratorio.
ARTCULO 2:
Alcance: Complejo de laboratorios TEC (Ciencias de la salud, Ingeniera,
Ambientales y Agrcolas, Criminalstica).
CAPITULO II
Normas Generales.
a) Los estudiantes debern acatar las normas de conducta siguientes:
ARTCULO 3:
No se permiten el ingreso de alimentos al laboratorio.
ARTCULO 4:
No se permite la manifestacin
afectiva en exceso entre los
compaeros de laboratorio que pongan en riesgo la seguridad.
ARTCULO 5:
Mantener celulares y localizadores personales apagados durante la
prctica del laboratorio.
ARTCULO 6:
No comer, beber o fumar dentro del laboratorio o reas aledaas.
ARTCULO 7:
Quedan estrictamente prohibido, los juegos, bromas, correr dentro del
laboratorio, as como darle otro uso al equipo y/o materiales que no sean el destinado
para las prcticas.
ARTCULO 8:
No se podr trabajar ni permanecer dentro de los laboratorios, si no se
encuentra el catedrtico o alguien responsable que lo sustituya.
b) Los estudiantes debern acatar las normas de seguridad siguientes:
ARTCULO 9:
Las puertas exteriores e interiores debern estar siempre libres de
obstculos, accesibles y en posibilidad de ser utilizadas ante cualquier eventualidad.
ARTCULO 10: Se deber Utilizar vestuario adecuado: zapatos cerrados bajos,
pantalones largos, cabello recogido, no usar ropa holgada, corbata, joyera grande, o
gorras.
ARTCULO 11: El equipo de proteccin personal es obligatorio para que una persona
pueda ingresar a realizar una prctica de laboratorio.
ARTCULO 12: Obligaciones del usuario: Los alumnos que trabajan en cada laboratorio
debern conocer las medidas de seguridad establecidas (ubicacin de extinguidor contra
incendio, ducha, lava-ojos, control maestro del gas, flipones, llave de agua).
c) Los estudiantes debern acatar las normas de ingreso a las instalaciones que se
detallan a continuacin:
ARTCULO 13: Todo usuario debe observar y respetar el horario asignado para los
laboratorios.
ARTCULO 14: El estudiante debe presentarse obligatoria y puntualmente a todas las
sesiones del laboratorio. Si el catedrtico lo considera podr permitir el ingreso del
estudiante 5 minutos despus de la hora de entrada.
ARTCULO 15: La persona deber estar en buena condicin de salud y no encontrarse
bajo efectos de cualquier medicamento, droga o bebida alcohlica que pueda disminuir su
capacidad de concentracin y que ponga en riesgo su salud.
ARTCULO 16: El estudiante deber llevar a la estacin de trabajo, nicamente los
accesorios necesarios para su prctica. Los bolsones, bolsas y otras pertenencias las
debern dejar en el rea asignada para este efecto.

4|P gi na

ARTCULO 17: se prohbe el ingreso de personas ajenas que no pertenezcan al

laboratorio y la salida temporal de los alumnos.
d) Los estudiantes debern acatar las normas de operacin de los laboratorios que se
detallan a continuacin:
ARTCULO 18: Las guas y/o manuales de cada laboratorio son de uso obligatorio de los
estudiantes para realizar el proceso de enseanza-aprendizaje de cada prctica
especfica. El estudiante debe leer las prcticas de laboratorio antes de ingresar a la
misma porque sern sujetos a evaluacin segn criterio del catedrtico.
ARTCULO 19: El usuario del Laboratorio es corresponsable conjuntamente con el
encargado del funcionamiento, limpieza, cuidado y conservacin del mismo.
ARTCULO 20:
En caso de algn desperfecto o problemas con el equipo, se deber
informar al encargado de laboratorio antes de la prctica, de lo contrario se le atribuir la
responsabilidad al alumno.
ARTCULO 21: Antes de operar cualquier equipo el alumno debe estar seguro que sabe
cual es el funcionamiento adecuado. En caso que no este seguro es su responsabilidad
preguntar al encargado.
ARTCULO 22: Antes de utilizar cualquier equipo debe llenar el formato de control en el
caso que sea aplicable.
ARTCULO 23: El usuario deber llenar una solicitud de prstamo y contar con la
aprobacin de coordinacin para utilizar material o equipo de laboratorio. De no devolver
el equipo y cristalera en las condiciones que se le entrego deber reponerlo.
ARTCULO 24: Se asignar a cada alumno una estacin de trabajo no pudiendo utilizar
otra posicin sin el permiso del catedrtico.
ARTCULO 25: El rea de trabajo y equipo asignado a cada estudiante o grupo de
estudiantes deber quedar perfectamente limpio y seco al terminar cada prctica.
ARTCULO 26: Antes de retirarse de laboratorio el estudiante deber lavarse las manos.
CAPITULO III
Accidentes
ARTCULO 27: De acuerdo al tipo de accidente, se deber proceder lo ms pronto
posible para brindar la atencin mdica al herido, bajo las instrucciones del catedrtico o
encargado.
a. Accidentes leves; sern todos aquellos que no representen un riesgo para la
vida de la persona y que podrn ser atendidos dentro de las instalaciones de la
URL, entre ellos puede mencionarse; cortaduras leves, quemaduras leves, etc.
Para estos casos se deber contactar con el Centro Landivariano de Salud
Integral Pedro Arrupe, S.J., extensiones 2621 2644, para su respectivo
chequeo.
b. Accidentes graves: sern todos aquellos en los que se encuentra en riesgo la
vida de la persona (infarto, derrame, heridas causadas por arma, etc.). Para
estos casos se debe avisar al Centro Landivariano de Salud Integral Pedro
Arrupe, S.J. para tener acceso al Servicio de Alerta Mdica (Telfono: 2332
9422)
ARTCULO 28: Toda persona que se encuentre dentro de las instalaciones de la
Universidad Rafael Landvar tendr cobertura de emergencias a travs de la empresa
Alerta Mdica
CAPITULO IV
Sanciones
ARTCULO 29: El incumplimiento del presente normativo llevara a que la persona sea
sancionada de la siguiente manera:
a. Primera Amonestacin: verbal. Segunda Amonestacin: representara la
expulsin de la presente prctica y una tercera vez se notificara a la facultad

5|P gi na

para sancionarlo en la clase respectiva. En todos los casos se enviar un

reporte escrito a la Unidad de Normas de Convivencia Estudiantil UNCE-.
b. El alumno que no posea el vestuario y equipo de proteccin adecuados para la
prctica de laboratorio no podr ingresar al mismo, con la perdida de los puntos
correspondientes a la prctica.
CAPITULO VI
Normas especficas para laboratorios que utilicen Reactivos.
ARTCULO 30: Las prcticas que requieren uso de sustancias txicas requieren una
preparacin previa del catedrtico y los estudiantes. Al iniciar la prctica debern conocer
la toxicidad de las sustancias, sus caractersticas y su manera de disposicin.
ARTCULO 31: Toda sustancia txica o inflamable debe almacenarse siempre en reas
especficas y perfectamente sealadas. El trabajo con sustancias txicas o voltiles
deber hacerse dentro de las campanas de extraccin localizadas en cada laboratorio.
Nunca debern tomarse frascos por la tapa o el asa lateral. Siempre debern tomarse con
ambas manos, una en la base y la otra en la parte media.
ARTCULO 32: Nunca pruebe ni huela las sustancias qumicas, a menos que el
procedimiento lo seale.
ARTCULO 33: La manipulacin de cidos concentrados debe realizarse dentro de la
campana de extraccin.
ARTCULO 34: Para medir volmenes de cidos o bases concentrados, use probetas o
buretas, nunca pipetas, ni pipeteadores mecnicos.
ARTCULO 35: Nunca mezcle sustancias desconocidas a menos que el procedimiento lo
indique.
ARTCULO 36: Cuando prepare soluciones de sustancias qumicas, no altere la tcnica
establecida para ello.
Una vez preparada la solucin, debe rotularla indicando
composicin, concentracin, fecha, nombre, y el nombre de la persona que la prepar.
ARTCULO 37: Antes de usar un reactivo qumico o una solucin lea cuidadosamente la
etiqueta para identificar el contenido, tome exactamente la cantidad necesaria y tape el
recipiente.
ARTCULO 38: Nunca devuelva sobrantes de sus mediciones a los frascos originales
para evitar contaminacin.
ARTCULO 39: Al dejar de usar los reactivos o soluciones, regrselos a su lugar de
almacenamiento, esto facilitar su trabajo experimental y el de sus compaeros.
ARTCULO 40: Tenga siempre su mesa de trabajo con el mnimo de riesgos potenciales.
En casos de ensuciarse la mesa lmpiela inmediatamente con una toalla hmeda.
ARTCULO 41: En caso de salpicadura de un cido o una base en la piel o en la bata,
enjuguelo inmediatamente, excepto en el caso de cido sulfrico, ya que deber
enjuagarse con una solucin de bicarbonato de sodio.
ARTCULO 42: Las sustancias voltiles, los desechos orgnicos y/o txicos requieren
tratamiento especial, y no se deben desechar en el lavatrastos. Nunca debe mezclar
desechos orgnicos con cidos y oxidantes. Los desechos qumicos, se deben poner en
botellas apropiadas y rotuladas. Deseche todas las sustancias siguiendo las indicaciones
del catedrtico o instructor, siempre habr un envase en la campana de extraccin que
indique el tipo de desechos que debe colocar en cada envase.
ARTCULO 43: Las sustancias no txicas, no inflamables y solubles en agua pueden
ponerse en el lavatrastos siempre usando cantidades grandes de agua para lavarlos del
sistema. Si hay alguna duda, pregunte a su auxiliar o instructor.
ARTCULO 44: Cuando se calientan soluciones o sustancias que desprenden gases
corrosivos o txicos, debe usarse la campana de extraccin. El calentamiento de tubos
de ensayo se efecta inclinando el tuvo 45 en direccin opuesta a usted y la que se
encuentren los compaeros de trabajo.
ARTCULO 45: Manipular con cuidado cualquier equipo de vidrio, termmetros,
cristalera, ya que puede poner en riesgo la seguridad del grupo o la propia.

6|P gi na

ARTCULO 46: Los procesos de evaporacin deben ser vigilados continuamente, ya que
un recipiente calentado despus de que se evapore el lquido que contiene puede rajarse
o explotar.
CAPITULO VII
Normas especficas para laboratorios biolgicos
ARTCULO 47: Todas las actividades que se realicen con animales en laboratorios
estarn bajo la responsabilidad del profesor e instructor del laboratorio.
Los restos de animales debern ser colocados en bolsas de plstico y no debern ser
desechados directamente en la basura.
ARTCULO 48: Cualquier derrame de muestras biolgicas o de cultivo de
microorganismos deber ser comunicado al catedrtico del laboratorio, quien supervisar
el proceso de descontaminacin del rea.
ARTCULO 49: Antes de desechar cultivos de microorganismos o muestras biolgicas,
deber procederse a su destruccin o in-activacin de acuerdo a instrucciones del
catedrtico o instructor.
ARTCULO 50: Queda prohibido desechar sustancias al drenaje o por cualquier otro
medio sin autorizacin del responsable del rea.

Firma y Nombre del Alumno aceptando y cumpliendo con este reglamento:

Nombre completo: ___________________________________________

Firma: _______________________________________________________

7|P gi na

Metodologa de trabajo en el
laboratorio
El trabajo de laboratorio forma una parte importante de su zona final, por lo
tanto, los alumnos debern esforzarse tanto en la parte terica como en la
prctica del laboratorio para tener un buen resultado en esta clase. A manera de
facilitarle al estudiante la metodologa del laboratorio, a continuacin se enlista
los pasos a seguir para realizarlo de la manera correcta.
1. Antes del da de prctica
a. Es mandatorio que hayan ledo la gua de laboratorio
b. Hacer la Pre Prctica antes de la prctica y entregarlo el da de
laboratorio correspondiente.
c. El estudiante que no entregue la Pre Prctica no tendr derecho
a asistir al laboratorio, perdiendo los puntos totales de esa prctica.
2. Al iniciar el laboratorio
a. Todos los estudiantes deben ingresar al laboratorio con su bata y
siguiendo el reglamento de ingreso de Laboratorios de la
Universidad Rafael Landvar.
b. Se realizar un examen corto sobre la prctica que se har ese
da.
c. Las personas que lleguen tarde tendrn cero en este examen
corto.
d. Si se les solicitara material para trabajar ese da, debern
mostrarlo para poder ingresar a la prctica.
3. Durante el laboratorio
a. El alumno debe seguir las instrucciones del catedrtico en base al
manual.
b. El trabajo prctico del laboratorio muchas veces consiste en
ejercicios para ilustrar mejor conceptos estudiados en la clase
terica esa semana.
c. Si lo desea puede tener un cuaderno adicional de notas si desea o
tomarlas en hojas adicionales para insertarlas en el portafolio, que
le sirva de material de estudio.
d. Deber documentar los resultados obtenidos durante su prctica
de la mejor manera posible para poder realizar su Post - Prctica

8|P gi na

4. Al finalizar el laboratorio
a. Cada estudiante debe dejar su mesa de trabajo limpia y ordenada.
b. Cada estudiante deber devolver todos los materiales del
laboratorio que haya empleado, limpios y sin daos.
5. En casa
a. El estudiante deber tomar notas de los puntos principales de cada
laboratorio, basado en los objetivos de aprendizaje de cada
prctica.
b. Los estudiantes deben llevar un portafolio que incluye el manual de
laboratorio, los trabajos hechos durante el curso en el laboratorio.
i. Este portafolio debe de ser un cartapacio de 3 agujeros
donde podr aadir separadores para mantener ordenadas
las secciones dentro del mismo.

9|P gi na

Instrucciones para la Pre Practica.

La Pre Prctica no es ms que una pequea investigacin o trabajo escrito
asignado por el instructor de laboratorio para ampliar el conocimiento del alumno
antes de ingresar al laboratorio.
1. Cada idea o hecho escrito se cita haciendo referencia a el (los) autor (es)
original (es), para mantener los derechos de autor.
2. Los dibujos o diagramas solicitados se hacen a mano y con lpiz negro,
NO fotocopias. Para cada uno debe citarse la fuente que se utiliz como
referencia si no son originales de los alumnos dichos diagramas o
imgenes. Si est observando algo en el microscopio no dibuje el campo,
slo la muestra e indique la escala mediante una lnea.
3. Si se trabaja con especies el alumno deber recordar la nomenclatura
especifica (por ejemplo el suyo de cursivas en los gneros y especies).
4. Al final de cada Pre Prctica se escribe la literatura citada, que son
mnimo tres fuentes diferentes de informacin. De estas, un mximo de
dos pueden ser pginas de Internet que sean fuentes confiables.
5. No se puede citar sitios como Wikipedia.com o Monografias.com. no se
pueden citar bibliografas de enciclopedias como ENCARTA.
6. Debe incluir por lo menos una fuente primaria (donde reportan por
primera vez un conocimiento).
7. Favor leer la seccin sobre como citar la literatura que encuentran en la
seccin de la Biblioteca en el Portal de la Universidad Rafael Landvar.

10 | P g i n a

Instrucciones para el reporte de

laboratorio (Post Practica)
La Post - Prctica consiste en un sumario de los resultados de la prctica
realizada. En l se debe incluir un breve resumen de la prctica y los resultados
obtenidos con su debida discusin. No importa si los resultados fueron o no
correctos siempre y cuando la discusin y concusiones sean asertivas y
expliquen el error o falla que hubo.
1. Los reportes se realizan al terminar la prctica pueden iniciarse en el
laboratorio y terminarse en casa.
2. Todos los reportes de laboratorio deben incluirse en el portafolio de cada
estudiante.
3. Deben ser escritos en computadora con letra Arial 12, mrgenes 2.5,
prrafos justificados, espaciado cero e interlineado simple.
4. Ilustrarlo con las imgenes, fotografas tomadas dentro del laboratorio o
diagramas realizados de los resultados obtenidos.
5. Debe comprender los siguientes inciso:
a. Resumen: se trata de una breve resea de lo que trato la prctica
y lo que se hizo y como se hizo.
b. Resultados: en esta seccin el estudiante describe los resultados
que se obtuvo en la prctica de manera objetiva, sin discutirlos ya
que eso se har en la siguiente seccin.
c. Discusin de resultados: es aqu en donde el estudiante hace
una discusin acerca de todos los resultados obtenidos en la
prctica explicando los: porqu, como, cuando se dio dicho
resultado. Se puede apoyar en su discusin consultando
bibliografa cientfica.
d. Conclusiones: mnimo 3, deben ser justificadas con bibliografa
consultada y correctamente formuladas en forma de un prrafo
corto.
e. Bibliografa consultada.

11 | P g i n a

Gua para realizar el portafolio para

Biologa y Genetica II
El portafolio es una herramienta para facilitar el aprendizaje del estudiante. Cada
estudiante debe trabajarlo de manera individual, en un cartapacio de tres
agujeros debidamente identificado, utilizando separadores para cada seccin del
mismo. El orden del Portafolio es de suma importancia ya que facilita el
aprendizaje al estudiante y cultiva en l la disciplina de orden y pulcritud.
De no estar el Portafolio de la manera estrictamente solicitada y con la totalidad
de las prcticas realizadas, no se le otorgar al estudiante la nota completa del
mismo ni de su contenido. De este modo si el estudiante obtuvo un puntaje
excelente en todas las prcticas del laboratorio, pero el Portafolio no est como
se solicita o est incompleto, no obtendr la calificacin excelente en el
laboratorio, sino que se penalizara dependiendo de la gravedad de la falta.
El estudiante deber colocar en el Portafolio en la seccin de anexos, cualquier
elemento que le ayude a aprender o que considere pertinente, pero hay ciertos
elementos requeridos con los que debe cumplir, con el exacto orden que se
enlistan a continuacin:
1. Hoja de caratula: debe ser la primera hoja de su portafolio y estar
estructurada de la siguiente manera:
a. Esquina superior izquierda
i. Universidad Rafael Landvar
ii. Facultad:
iii. Licenciatura:
iv. Catedrtico de teora:
v. Catedrtico de prctica:
b. Al centro de la hoja
i. Portafolio de laboratorios
ii. Nombre del Curso
c. Esquina inferior derecha
i. Nombre completo del estudiante
ii. Carn:
iii. Seccin de teora:
iv. Seccin de prctica:

12 | P g i n a

2. Segunda parte: Normas del manual de laboratorio

a. Debern imprimir las normas e instructivo incluidos en el manual
del laboratorio y colocarlos en estas seccin para tenerlo siempre
presente si hubiera alguna duda.
3. Tercera parte: hoja de evaluacin
a. Colocar en esta seccin la hoja de evaluacin que su catedrtico
de proporcionar al inicio del ciclo. Esta hoja de evaluacin es
completada nicamente por el catedrtico al momento de revisar el
portafolio, para que el estudiante conozca el desglose de su nota
semanalmente
4. Cuarta parte: exmenes
a. Se deben incluir los exmenes cortos realizados durante las
prcticas. En el caso de tener preguntas errneas, el estudiante
deber corregirlas.
5. Quinta parte: Manual de laboratorio
a. El estudiante deber imprimir las prcticas de laboratorio y en
conjunto con las Pre y Post Prcticas construir su manual de
laboratorio, colocando las prcticas en el siguiente orden:
i. Pre Prctica que les devuelvan
ii. Prctica de laboratorio con su diagrama de flujo
iii. Post - Prctica
6. Sexta parte: Resmenes y crticas de artculos cientficos.
a. En esa parte se colocaran con su cita bibliogrfica artculos o
casos clnicos que hayan sido solicitados o entregaos por el
catedrtico para su discusin. Deber adjuntarle a cada documento
una crtica breve, consistente y asertiva.
7. Sptima parte: Resumen
a. Esta es la ltima seccin del portafolio, la cual se har al final del
curso en el cual de manera breve en no ms de 2 hojas deber
colocar la importancia y valor de este portafolio para el estudiante y
como le ayudo en su aprendizaje as como sugerencias para
mejorarlo.

13 | P g i n a

Practicas

14 | P g i n a

Practica 1
Codificacion de un segmento de ADN
Objetivos
I.

II.
III.

Comprender la estructura de la molcula de ADN y la traduccin de

secuencias de pares de bases por medio de un modelo dimensional o
tridimensional en papel.
Determinar el orden de las bases de una molcula de ADN que es
necesario para codificar un segmento de una molcula de protena
Comprender la traduccin de los cidos nucleicos por medio del
cdigo gentico.

Introduccin
Un genoma es el nmero total de cromosomas, o sea todo el DNA (cido
desoxirribonucleico) de un organismo, incluido sus genes, los cuales llevan la
informacin para la elaboracin de todas las protenas requeridas por el
organismo, y las que determinan el aspecto, el funcionamiento, el metabolismo,
la resistencia a infecciones y otras enfermedades, y tambin algunos de sus
procederes.
En otras palabras, es el cdigo que hace que seamos como somos. Un gen es la
unidad fsica, funcional y fundamental de la herencia. Es una secuencia de
nucletidos ordenada y ubicada en una posicin especial de un cromosoma. Un
gen contiene el cdigo especfico de un producto funcional. Cada 1,8 metros de
longitud de la cadena de ADN humano contiene ms de 3 billones de pares de
bases qumicas esas son las letras digitales en el cdigo de la vida.
El DNA es la molcula que contiene el cdigo de la informacin gentica. Es una
molcula con una doble hebra que se mantienen juntas por uniones entre pares
de bases de nucletidos. Los nucletidos contienen las bases Adenina(A),
guanina (G), citosina (C) y timina (T).
Cada vez que la clula se divide en clulas hijas, el genoma total se duplica, en
el caso del genoma humano esta duplicacin tiene lugar en el ncleo celular.
Durante la divisin, el DNA se desenrolla y rompe las uniones entre pares de
base permitiendo a las hebras separarse. Cada hebra dirige la sntesis de una
nueva hebra complementaria con nucletidos libres que coinciden con sus bases
complementarias de cada hebra separada.
Existe una forma estricta de unin de bases, as se forman pares de adenina timina (AT) y citosina - guanina (CG). Cada clula hija recibe una hebra vieja y
15 | P g i n a

una nueva. Cada molcula de DNA contiene muchos genes, la base fsica y
funcional de la herencia. Un gen es una secuencia especfica de nucletidos
base, los cuales llevan la informacin requerida para la construccin de
protenas que proveern de los componentes estructurales a las clulas y tejidos
como tambin a las enzimas para una esencial reaccin bioqumica. La
decodificacin de la cadena del ADN, descifrado por investigadores de 18
pases, participantes del Proyecto Genoma Humano, simultneamente a la
empresa privada Celera Genomics. Se determin, entre otras cosas, que el
cido desoxirribonucleico de los humanos es idntico en 99,08% de las
personas, que 97% de su ADN tiene funciones no conocidas y que slo 2% es
diferente a los de los chimpancs.

Pre prctica
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Qu son los cidos Nucleicos?

Explica cmo estn ordenados los nucletidos en la doble hlice del ADN
Describe las propiedades del cdigo gentico
Explica que significa un codn
Cul es la diferencia entre los codones de inicio y de parada (Stop)?
Buscar la secuencia de bases o aminocidos de una protena (por
ejemplo: hemoglobina, colgeno, insulina).esto lo puedes encontrar en
una base de datos: gene bank por Internet. Imprime una parte y anexala
en tu portafolio de laboratorio

16 | P g i n a

Prctica
Material por Equipo:
3 hojas de papel construccin o Fomi amarillo y verde
4 hojas de papel bond Fomi tamao oficio
1 cartulina blanca y o negra
Tijeras
Goma, Silicn
Palillos y /o alambre, lana
Marcador punto fino
Mucha creatividad
Nota: Es importante que el estudiante ya traiga las plantillas hechas por
ejemplo:
Cada figura (de igual tamao todo) servir para identificar los componentes del
ADN como son: Desoxirribosa, grupos fosfatos, Adeninas, Guaninas, citocinas y
Timinas. Cada equipo de estudiantes, primero deben armar cada nucletido y
con ellos ir formando una hebra, luego sus nucletidos complementarios hasta
completar la doble banda de ADN.
Procedimiento
Fase 1:
1.- Doble las dos hojas de papel amarillo en 16 rectngulos.
2.- Rotule las dos primeras hileras de cuadros de cada papel con G y C para
representar las bases guanina y citosina.
3.- Rotule las dos lneas de rectngulos de abajo con las letras A y T, para
representar a las bases adenina y timina.
4.- Recuerde que la disposicin de las bases (G, C, A, y T) en una molcula de
ADN codifica la secuencia de aminocidos que componen una protena en
partculas.
5.- Corte los rectngulos por los dobleces y en la parte central. El objetivo es que
los cortes sean como de rompecabezas.
Fase II:
1.- Doble las dos hojas de papel verde en 16 rectngulos.
2.- Rotule las dos primeras hileras de cuadros de cada papel con G y C para
representar las bases guanina y citosina.
3.- Rotule las dos lneas de rectngulos de abajo con las letras A y U, para
representar a las bases adenina y Uracilo.
Estas letras representaran al ARN.
4.- Corte los rectngulos en la forma indicada.

17 | P g i n a

Fase III:
1.- Recuerde que las protenas se componen de 20 a.a diferentes y las bases de
ADN se disponen en grupos de tripletes como GTA, TAC, AAA Dependiendo
la secuencia.
2.- Analice la siguiente tabla, la cual contiene una lista de 10 aminocidos con
respectivos codones (Tripletes).

Tripletes de ADN
CGA
TTG
GTC
GTA
AAT
TTC
AAA
AGA
TGA
CAA

Tabla 1.
Cdigo gentico.
Aminocidos
Alanita ( Ala)
Asparagina ( Asn)
Glutamina (Gln)
Histidina (His)
Leucina (Leu)
Lisina ( Lis)
Fenilalanina ( Fen)
Serina (Ser)
Treonina (Tre)
Valina (Val)

3.- Use la tabla del Cdigo gentico para ensamblar las tripletas de ADN que
pueden codificar para el segmento de protena.
4.- Use los rectngulos que corto de papel amarillo, para disponer el orden
correcto de las bases de la molcula de ADN de la protena.
5.- Determine los codones de la sucesin de bases de la molcula de ADN,
encuentre a que aminocido corresponde.
6.- Una vez ordenada su molcula pguela en las hojas de papel bond,
creativamente seale las uniones entre las bases.
Bibliografa

1.- Coopers. La Clula. Ed. Marbn. Mxico 2005

Post Prctica
1. Cul de los pasos de sta actividad representa la trascripcin?
2. Qu le pasara a la protena s el primer triplete de ADN fuera CCA en vez de
CGA?
3. Porque es importante el cdigo gentico?
4. Qu requisitos debe cumplir una molcula para ser considerada material
gentico?

18 | P g i n a

Anexo

El dogma central de Crick o dogma central de la Biologa. La informacin fluye

(con la excepcin de la transcripcin reversa) del ADN al ARN por va del
proceso llamado transcripcin, y luego a la protena por el proceso de
traduccin.
Transcripcin es el proceso de fabricacin ARN usando el ADN como
molde.
Traduccin es la construccin de una secuencia de aminocidos
(polipptido) con la informacin proporcionada por la molcula de ARN.
El esquema de este "dogma" ha sido encontrada repetidamente y se considera
una regla general (salvo en los retrovirus).

El cido RiboNucleico mensajero (ARNm) es el molde para la

construccin de la protena.
El cido RiboNucleico ribosmico (ARNr) se encuentra en el sitio donde
se construye la protena: el ribosoma.
El cido RiboNucleico de transferencia (ARNt) es el transportador que
coloca el aminocido apropiado en el sitio correspondiente.

El ARN tiene el azcar ribosa en vez de desoxirribosa. La base uracilo (U)

reemplaza a la timina (T) en el ARN. El ARN tiene una sola hebra, si bien el
ARNt puede formar una estructura de forma de trbol debido a la
complementariedad de sus pares de bases.

19 | P g i n a

Practica 2
Obtencion de Acido ribonucleico de
muestras vegetales y animales
OBJETIVOS
1. Utilizar tcnicas sencillas para extraer el ADN de un tejido animal o vegetal, y
por el aspecto que presenta, confirmar su estructura fibrilar.
2. A partir de la longitud enorme de las fibras tambin se confirma que en el
ncleo el ADN se encuentra replegado.
INTRODUCCION
Toda la informacin gentica de un organismo se encuentra en el ncleo de las
clulas eucariotas. Este ADN est arreglado en los cromosomas los cuales
estn formados por genes. Cada gen es una secuencia de ADN que codifica
para un producto que slo o en combinacin con otros productos tiene una
funcin en el organismo. Hay genes que codifican para una sola funcin por
ejemplo: poder o no poder enrollar la lengua, tener las orejas pegadas o
despegadas. Existen otros genes que codifican para otras caractersticas son
menos determinadas por ejemplo: ser alto o bajo (se puede ser mediano, medio
alto, muy alto), ser resistente a enfermedades (muy resistente, medianamente,
para algunas enfermedades si y para otras no). Dentro de las poblaciones
humanas, animales y vegetales existen algunas de ellas que tienden a dominar
sobre las otras: estas diferencias estn dadas por la condicin que tengan los
genes: ser dominantes o recesivos (que son dominados por el otro gen). De
esta forma, cada organismo puede tener varios genes dominantes o varios
recesivos y los va a transmitir a sus hijos segn con quin comparta sus genes.
Es como un juego de cartas. Un hombre de raza negra que tenga hijos con una
mujer muy blanca tendr hijos negros, porque el negro es dominante sobre el
blanco. Sin embargo, sus hijos tendrn la posibilidad de tener hijos blancos si
tienen hijos con mujeres blancas porque ya tienen una copia de la informacin
de la madre en sus genes. En esta prctica se extraer ADN (animal y vegetal).
Es importante diferenciar 2 Conceptos:

Extraccin: Sacar los componentes desde un compartimento celular, involucra:

- Lisis de las clulas que contienen el cido nucleico
- Inactivacin de nucleasas
- Clarificacin: separacin de los cidos nucleicos de los restos celulares
20 | P g i n a

Purificacin: Separacin de cidos nucleicos

- De protenas solubles
- De acodos nucleicos no deseados
- De lpidos, carbohidratos, sales y otros compuestos orgnicos
Las etapas bsicas del procedimiento general para la extraccin y purificacin
son:
1. Disgregacin o fragmentacin del tejido ( uso de materiales estriles y
guantes)
2. Lisis celular
3. Calificacin
4. Purificacin
Anlisis (de tipo cualitativo por electroforesis y cuantitativo por espectrofotometra
U.V)

Pre Prctica
1.
2.
3.
4.
5.

Qu es el germen de trigo, usos o beneficios?

Qu es el dodecil sulfato de sodio?
Realiza un diagrama de flujo de uno de los experimentos de extraccin.
Qu factores fsicos qumicos desnaturalizan el ADN?
Estudiar el proceso de extraccin, llevar los materiales al lab y buscar el sitio:
www.ehu.es/SGIker/es/adn/areas_aplicacion.php es un sitio muy interesante de
la universidad del pas Vasco, pon atencin a las imgenes.

21 | P g i n a

Prctica
Materiales
Licuadora
Contenedor plstico
Jabn lquido transparente *
Palillos de diente *
10 Beakers de 100 ml
5 coladores de plstico pequeos o tela para colar *
3 paquetitos de suavizador de carne*
Solucin de cloruro de sodio (sal en agua) al 2M (500 ml)
400 ml de etanol o isopropanol muy fro
60 tubos de ensayo y 1 gradilla por pareja
Hgado (de res) taza *
Espinaca fresca taza*
Cebolla fresca taza *
Levadura de cerveza taza*
2 cabezas de Ajo *
Germen de trigo crudo taza*
Filtros para cafetera*
5 Tomates *
Estuche de diseccin
Hojas en blanco*
Un diagrama de la duplicacin, transcripcin y traduccin de ADN
NOTA: El material que est marcado con * lo deben traer los alumno
Procedimiento 1
EXTRACCION DE ADN
1. Disuelva una cucharada de sal en 200 ml agua tibia (3 para espinacas).
2. Coloque el tejido que va a analizar en la licuadora, cubrindolo con
suficiente agua salada (aproximadamente 150ml).
3. Mezcle hasta que tenga una consistencia media. (NO DEBE LICUAR,
SOLO MEZCLAR, DEBE TENER PEDAZOS PEQUEOS DE SU
MUESTRA).
4. Transfiera la mezcla a un contenedor plstico.
5. Agregue jabn lquido y revuelva suavemente con un palillo de dientes.
Trate de no hacer muchas burbujas.
6. Filtre 50 ml de su mezcla en un vaso de precipitados de 100 ml.
7. Llene, con el filtrado, tres tubos de ensayo marcados, hasta la primera lnea
dibujada.
8. Con un palillo de dientes agregue una pizca de suavizador de carne y
revuelva suavemente.
9. Agregue alcohol hasta la segunda lnea del tubo de ensayo, deje reposar.
En esta parte usted ver que el ADN sube hacia el alcohol. Debe
22 | P g i n a

compararlo con el de sus compaeros. ANOTE LAS DIFERENCIAS

OBSERVADAS.
Procedimiento 2
1. Triturar medio higadito de pollo en un mortero. Aadir arena para que al
triturar se puedan romper las membranas de y queden los ncleos sueltos.
Figura 1

2. Aadir al triturado, 50 centmetros cbicos de agua. Remover hasta hacer

una especie de papilla o pur. Figura 2

FIGURA 1

FIGURA 2

3. Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que
hayan quedado por romper. FIGURA 3
4. Medir el volumen del filtrado con una probeta. FIGURA 4

23 | P g i n a

FIGURA 3

FIGURA 4

5. Aadir al filtrado un volumen igual de cloruro sdico 2M. Con esto

conseguimos producir el estallido de los ncleos para que queden libres las
fibras de cromatina. FIGURA 5
6. A continuacin se aade 1 centmetro cbico de SDS. (Nota: Si no se
dispone de este producto puede sustituirse por un detergente de vajillas,
tipo Mistol o similar. Yo uso mistol y me va bien). La accin de este
detergente es formar un complejo con las protenas y separarlas del ADN.
As nos quedar el ADN libre de las protenas que tiene
asociadas. FIGURA 6

FIGURA 5

FIGURA 6

24 | P g i n a

7. Aadir mediante una pipeta 50 ml de alcohol de 96:. Hay que hacerlo de

forma que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos
capas. En la interfase, precipita el ADN. FIGURA 7
8. Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma direccin. En la
fotografa nmero 9 se indica con mayor precisin las capas. Sobre la
varilla se van adhiriendo unas fibras blancas, visibles a simple vista, que
son el resultado de la agrupacin de muchas fibras de ADN. FIGURA 8

FIGURA 7

FIGURA 8

Esta prctica puede completarse con una

tincin especfica de ADN. Tenemos que tomar
una muestra de las fibras que se van
depositando sobre la varilla de vidrio y
depositarlas sobre un porta. Teir durante unos
minutos
con
un
colorante
bsico.
Observar al microscopio

25 | P g i n a

Procedimiento 3 - Extraccin del ADN de una cebolla

La extraccin de ADN requiere una serie de etapas bsicas. En primer lugar tienen
que romperse la pared celular y la membrana plasmtica para poder acceder al
ncleo de la clula. A continuacin debe romperse tambin la membrana nuclear
para dejar libre el ADN. Por ltimo hay que proteger el ADN de enzimas que
puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol.
Materiales

una cebolla grande fresca

detergente lavavajillas
sal
agua destilada
zumo de pia o papaya
alcohol de 96 muy fro
un vaso de los de agua
HIELO

PROCEDIMIENTO:

Corta la zona central de la cebolla en cuadrados

En un vaso de precipitados de agua agrega 3 cucharaditas de detergente lavavajillas y
una de sal y aade agua destilada hasta llenar el vaso.
Mezcla esta solucin con los trozos de cebolla
Licua el conjunto, con la batidora, a velocidad mxima durante 30 segundos
Filtra el lquido obtenido con un filtro de caf
Llena hasta la mitad aproximadamente un vaso de cristal alto con la disolucin filtrada
Aade 3 cucharaditas de caf de zumo de pia o papaya y mezcla bien
Aade un volumen de alcohol muy fro equivalente al del filtrado, cuidadosamente,
hacindolo resbalar por las paredes del vaso para que forme una capa sobre el
filtrado. Puedes utilizar la varilla de vidrio o una cucharilla para ayudarte.
Deja reposar durante 2 3 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las dos
capas. A continuacin introduce la varilla y extrae una maraa de fibras blancas de
ADN.

26 | P g i n a

Anexo

Mitosis en clulas de punta de raz de cebolla: a) Interfase b) profase temprana c)

profase tarda d) metafase e) anafase f) telofase

Post - Prctica
Adems de lo siempre solicitado en los Post - Prctica, deber ilustrar los
resultados observados comparndolo con la de los sus compaeros. Contestas las
siguientes preguntas:
1. Para qu se utiliza la sal?
2. Para qu se utiliza el jabn?
3. Para qu se utiliza el suavizador de carne?

27 | P g i n a

Practica 3
Division celular: mitosis del meristemo
de la raz de cebolla
Objetivos:

Preparacin de clulas para su observacin: Crecimiento, fijacin y tincin

Observacin e interpretacin de las distintas fases del proceso de divisin
clula.

Introduccin
El crecimiento en un organismo es cuidadosamente controlado regulando el ciclo
celular. En las plantas las races continan creciendo mientras buscan agua y
nutrientes. Estas regiones de crecimiento sirven para estudiar el ciclo celular
porque en cualquier momento se pueden encontrar clulas que estn sufriendo
mitosis. Aunque el corte de la raz de cebolla captura muchas clulas en diferentes
fases del ciclo celular, tenga presente que el ciclo celular es un proceso continuo

La mitosis, comprende 2 mecanismos: La cariocinesis, es decir, la divisin del

ncleo, que asegura el reparto equitativo del material hereditario y la citocinesis,
que reparte los orgnulos y componentes citoplasmticos a las clulas hijas,
separndolas e independizndolas. Normalmente, la cariocinesis y la citocinesis
son mecanismos sincronizados en ese orden, constituyendo juntos el proceso de
divisin celular, aunque no siempre se produce esa sincronizacin.

28 | P g i n a

La divisin celular origina 2 clulas genticamente idnticas entre s e idnticas a

la clula que les dio origen, manteniendo el nmero cromosmico de la clula
parental preexistente. Para dividirse la clula, primeramente es necesario que se
duplique su material gentico contenido en el ncleo, para luego repartirlo en
partes iguales a las clulas hijas. Tambin tiene que aumentar su contenido
citoplasmtico para poderlo repartir entre las dos nuevas clulas. Sin embargo, la
divisin del citoplasma no es tan exacta o equitativa como la del ncleo.

Pre - Prctica
1. Define los siguientes conceptos: Mitosis, huso acromtico, centrmero
2. Realiza un cuadro que contenga los dibujos de las fases de la mitosis y sus
caractersticas ms importantes
3. Investiga que cmo puede afectar el proceso de la mitosis, las siguientes
sustancias: a) Colchicina b) Cafena c) Bromuro de Etidio
4. Para qu se usan las sustancias del punto anterior?
Bibliografa
Prcticas de Biologa. Ed. Fontalba, Barcelona 1980

www.biologia.arizona.edu/cel/
www.unavarra.es/genmic/

29 | P g i n a

Prctica
Materiales:

Mechero
Vaso de precipitados
Microscopio
Portas y cubres
Agujas enmangadas
Lanceta
Pinzas finas
Vidrio de reloj
Tijeras finas
Cuentagotas
Papel de filtro

Reactivos:

Etanol
Acido actico
Acido clorhdrico 1 N
Orcena actico

Fundamento: Para observar los cromosomas las fases de la mitosis se utilizarn

races de bulbos de cebolla (Allium) colocados a germinar en agua a temperatura
ambiente durante 3 das. Tiempo suficiente para que las races adquieran un buen
tamao y exista un buen equilibrio celular dinmico con relacin a un ciclo de
proliferacin celular.

30 | P g i n a

Procedimiento
Cualquiera de los 2 procedimientos es bueno, escoge uno
I. Preparacin:
1. Las raicillas de cebolla que se hallan en mezcla fijadora se hidrolizan en
HCl 1N durante 10 minutos a 60C. (Se calienta suave y cuidadosamente
en la parrilla o con una lmpara de alcohol)
2. Transcurridos los 10 minutos de la hidrlisis, se lavan las raicillas en agua
destilada y se colocan las raicillas sobre una gota de orcena actica o de
orcena lactopropinica para su tincin, durante 10 a 15 minutos.
3. A continuacin se realiza la preparacin. Primeramente, se toma una raicilla
y se coloca sobre un vidrio portaobjetos y se corta el pice radicular con un
bistur. Para realizar esta operacin se utiliza el estereoscopio o una lupa.
4. Este pice radicular se corta a su vez en 4 fragmentos, se hace un corte
longitudinal y otro transversal. Se separan los cuatro trozos y a continuacin
se aade una gota del colorante.
5. Seguidamente se coloca un cubreobjetos sobre el material que deseamos
observar. Con la ayuda de un bastoncillo de madera se golpea y extiende el
material.
6. A continuacin se presiona con el dedo pulgar y se retira el exceso de
colorante con un papel de filtro.
II. Preparacin de los meristemos radiculares para observar las distintas
fases de la mitosis
1. Con las tijeras finas cortar los cinco ltimos milmetros de la punta de las
races.
2. Fijacin de las races en solucin CARNOY (Etanol: cido Actico, 3:1)
3. De esta forma se pueden conservar las races durante meses.
En el momento de hacer las preparaciones para su observacin al microscopio:

4. Hidrlisis en cido clorhdrico 1 N durante 10 minutos

5. Detencin de la hidrlisis en etanol 96% ( una vez detenido el proceso se
puede mantener en alcohol durante algunas horas)
Montaje de las muestras para su observacin
6. Las puntas de raz (meristemo) se colocan en el porta con una gota de orceina
actica.

7. Se pone el cubre y se aplasta la preparacin con la ayuda de un palillo

romo
8. Tomando el vidrio de reloj por los bordes, se calienta suavemente a la llama
del mechero, evitando la ebullicin, hasta la emisin de vapores tenues,
para que se el tinte se fije bien al ADN
9. Se hace el squash definitivo (SIN QUE SE MUEVA EL CUBRE:
PONIENDO LA PREPARACIN ENTRE LOS DOBLECES DE LA
ALMOHADILLA Y PRESIONANDO SOBRE ELLA CON FUERZA!!!!).

31 | P g i n a

10. Se aade por capilaridad orceina para rellenar las zonas de la preparacin
que se han quedado secas. Si sobra orceina se retira con ayuda de un
papel secante.
11. Observar la preparacin en el microscopio y dibuja lo que veas indicando el
nmero de aumentos empleado.
Observacin
Se observa al microscopio empezando con el objetivo de menor aumento. No es
necesario utilizar el objetivo de inmersin. Se deben distinguir y dibujar, tal y como
se ven, todas las fases de la mitosis.

Post - Prctica
Adems de lo siempre solicitado en los Post - Prctica, deber ilustrar de la
siguiente manera los resultados observados: y dibujar una clula en interfase,
profase, metafase, anafase y telofase

Muestra biolgica:
Ocular y objetivo:
Anlisis y discusin microscpica:

32 | P g i n a

Practica 4
Agentes que controlan el ciclo celular
Objetivo

Ejecutar adecuadamente la tcnica de laboratorio de la germinacin de

tejido en crecimiento.
Diferenciar los procesos mitticos cuando se adicionan durante la
replicacin agentes que interfieren en el proceso normal del ciclo celular.

Introduccin
La mitosis es prcticamente un proceso universal y se realiza prcticamente igual
en todos los seres vivos. Sin embargo, bien por fallos en la clula o bien de forma
artificial por administracin de drogas, quimioterapia, xenobiticos, podemos
observar determinadas alteraciones en el ciclo celular. La alteracin natural ms
comn es la endorreduplicacin, que consiste en varios perodos de sntesis de
ADN sin divisin celular. Dentro de las alteraciones artificiales por administracin
de drogas, vamos a estudiar tres de ellas que son las ms utilizadas en
Citogentica.
C-mitosis
Se produce por la administracin de la droga
Colchicina. Esta sustancia inhibe la formacin del
huso acromtico, al llegar a metafase los
cromosomas estn muy condensados y con los
cromatidios separados y en forma de "X" ya que
las cromtidas han perdido la cohexividad entre
ellas y slo aparecen unidas por la regin del
centrmero.
Los
cromosomas
aparecen
perfectmente individualizados y se puede apreciar
perfectamente su forma, y nmero. Esta droga se
utiliza para resaltar la forma cromosmica y para
facilitar el contar el nmero cromosmico de una
clula.
Bi-mitosis
Se produce por la administracin de cafena a tejidos vegetales. La cafena inhibe
la formacin del fragmoplasto o tabique de separacin celular, no se produce la
citocinesis y los dos ncleos permencen separados pero dentro del mismo
citoplasma. En la siguiente divisin los dos ncleos entran de nuevo en mitosis y
podemos ver Bi profases, bimetafases, bianafases y bi telofases. Esta droga se
33 | P g i n a

utiliza para estudiar controles del ciclo celular y para determinaciones de la

duracin del ciclo. En una segunda ronda de divisin bajo los efectos de la cafena
observaramos la mitosis en clulas polinucleadas.

Biprofase

Bimetafase

Bianafase

Bitelofase

Clulas Polinucleadas
Profase

Metafase

Anafase

Telofase

Mitosis multipolares
Se produce mediante drogas tales como la carbetamida, que producen husos
multipolares, los cromosomas no emigran a dos polos opuestos, sino a varios, 3 o
4, producindose clulas con distinto nmero de cromosomas.

34 | P g i n a

Pre - Prctica
El estudiante deber investigar los siguientes incisos con ayuda de bibliografa
cientfica y redactar sus respuestas en forma de prrafo. Recuerda citar la
bibliografa consultada al final.
1. Naturaleza qumica y usos de los siguientes compuestos
o Cafena
o Colchicina
o Bromuro de etidio
o Derivados mercuriales de uso mdico.
2. Por qu se usa la colchicina en citogentica?
3. Importancia de la ciclina B en el ciclo celular
4. Revisar un caso clnico donde un paciente haya tenido una sobredosis con
cafena y o Colchicina, presenta una explicacin.
5. Realiza tu diagrama de Flujo

35 | P g i n a

Prctica
Materiales
Previo al laboratorio, se preparan las races en crecimiento de un bulbo de cebolla,
se cortan algunas de estas y se fijan en solucin cida, se procede a teir las
raicillas y se colocan en portaobjetos para observar y analizar las diferentes fases
de la mitosis. Se tratan 24 horas antes con colchicina, cafena e hidroxiurea y se
procede a realizar la fijacin y la tincin para la observacin de estructuras.
Procedimiento
Las Races se trataron con 48 horas deexposicin a los farmacos y se procesaran
de con el proceso de tincin a la prctica de mitosis.
1.
2.
3.
4.

Fijar e hidrolizar las races muestra por 10 minutos.

Enjuagar co agua destilada
Teir con 3 gotas de orceina A y 3 gotas de Orcena B por 10 minutos
Preparar las races teidas en un portaobjetos, agrgar una gota de agua
destilada, cubrir con el cubreobjetos y presionar
5. Observar a 4X, 10X y 40X, anota tus resultados. ( 100X con aceite de
inmersin).

Post - Prctica
Adems de lo siempre solicitado en los Post - Prctica, deber ilustrar de la
siguiente manera los resultados observados:

Muestra biolgica:
Ocular y objetivo:
Anlisis y discusin microscpica:

36 | P g i n a

Practica 5
CUERPOS DE BARR
Objetivos
Conocer el proceso de diferenciacin sexual.
Observar la evidencia citolgica del cromosoma X inactivo.
Analizar el proceso de inactivacin del cromosoma X.
Introduccin

En 1923, Painter demostr ciotolgicamente la existencia de los cromosomas X y

Y en el humano. En 1949, Barr y Bertram descubrieron masas de cromatina
sexual (cuerpos de Barr) en clulas en interfase femeninas y no en masculinas. A
esta observacin sigui el desarrollo de una tcnica sencilla que permita detectar
cuerpos de Barr en clulas de mucosa oral. Como resultado de su aplicacin se
reconoci que las clulas femeninas eran cromatina positiva mientras que las
masculinas eran cromatina negativa, pero que existan excepciones: las
pacientes con sndrome de Turner no tenan cuerpos de Barr y los pacientes con
sndrome de Klinefelter si los presentaban. El anlisis citogentico de estos
pacientes explic la discrepancia aparente al demostrarse que el sndrome de
Turner tena un complemento cromosmico 45,X y el de Klinefelter 47,XXY. Estos
hallazgos tambin demostraron que en presencia de un cromosoma Y,
independientemente del nmero de cromosomas X, el embrin humano se
desarrolla como macho, mientras que en ausencia del Y se desarrolla como
hembra.
El siguiente paso en el entendimiento de los cromosomas sexuales humanos fue
la explicacin de la cromatina sexual en trminos de la inactivacin del
cromosoma X. La hiptesis de Lyon establece que en las clulas somticas de
mujeres normales, y no en las de hombres normales, un cromosoma X es
inactivado al azar para compensar la dosis gnica en ambos sexos. El cuerpo de
Barr representa al cromosoma X inactivo de replicacin tarda. En pacientes con
cromosomas X supernumerarios, todos los cromosomas en exceso de uno son
inactivados y forman cuerpos de Barr (por ejemplo un paciente Klinefelter 47,XXY
tiene 1 cuerpo de Barr y una mujer 47,XXX tiene 2 cuerpos de Barr).
La diferenciacin sexual es un proceso dinmico sujeto a un programa secuencial,
ordenado e interrelacionado que se lleva a cabo en varias etapas consecutivas: el
establecimiento del sexo cromosmico durante la fertilizacin, la etapa
pregonadal, el desarrollo del sexo gnada, y la definicin de los genitales internos
y externos, que condicionan el sexo fenotpo.

37 | P g i n a

Los individuos con reversin sexual (varones XX, mujeres XY y hermafroditas

verdaderos XX) aparentemente rompen la regla de que el cromosoma Y controla
la diferenciacin testicular. En el caso de los varones XX, se ha demostrado que el
80% presenta secuencias derivadas del cromosoma Y translocadas al cromosoma
X por una recombinacin ilegtima durante la meiosis paterna.
El anlisis molecular de los diferentes fragmentos del cromosoma Y presentes en
estos pacientes permiti definir que la regin terminal del brazo corto era esencial
en la diferenciacin testicular y postular la existencia de un gen cuya presencia o
ausencia determina el destino de la gnada bipotencial en testculo u ovario. En el
ser humano este gen se denomin TDF. (por sus siglas en ingls testis
determining factor). En 1987, Page y cols. clonaron una regin de 140 kb en Yp
presente en un varn XX y ausente en una mujer XY dentro de la cual identificaron
un gen que llamaron ZFY. (zinc-finger protein) y que propusieron como TDF. Sin
embargo, en los aos subsecuentes se acumularon una serie de observaciones
que excluyeron a ZFY. como TDF. La nueva bsqueda de TDF. se limit a una
regin de 35 kb, presente entre el lmite de la regin pseudoautosmica y el punto
de ruptura en varones XX, ZFY. negativos, resultando en la clonacin del gen
SRY. (sex-determining regin, Y-chromosome) por Sinclair y cols. en 1990. Las
evidencias posteriores apoyan a SRY. como TDF.

Pre Prctica
1. Defina:
a. Eucromatina
b. Heterocromatina
c. Heterocromatina constitutiva
d. Heterocromatina facultativa
2. Investigue sobre Inactivacin del cromosoma X
3. Brevemente defina que es un cuerpo de Barr

38 | P g i n a

Prctica
Material biolgico

Clulas de descamacin de la mucosa oral.

Material de laboratorio

baja lenguas estril

Portaobjetos.
Cubreobjetos

Reactivos
Solucin de aceto-orcena al 2%.
Aceite de inmersin.
Procedimiento

1. Enjuagarse la boca repetidas veces con agua y raspar la mucosa interna de la

mejilla con una baja lenguas. Eliminar el primer raspado con un algodn y repetir
la operacin.
2. Hacer un frotis del segundo raspado sobre un portaobjetos. Aadir una o dos
gotas de la solucin de aceto-orcena. Colocar un cubreobjetos. Eliminar el exceso
de colorante.
3. Observar a seco dbil hasta encontrar un campo en donde se localicen clulas.
Observar despus a inmersin para identificar el corpsculo de Barr el cual se
aprecia como una mancha obscura adherida a la membrana nuclear y que no
desaparece al mover el tornillo micromtrico del microscopio.
NOTA: EN MUJERES NORMALES EL NMERO PROMEDIO DE CLULAS EN
FROTIS BUCALES CON CUERPO DE BARR ES DE 18-60 % .

Las frmulas utilizadas para determinar el nmero de cuerpos de Barr se calcula as:
(N 1).
En donde N es el nmero de cromosomas X

Ejemplo: 46, XY

N1

11=0

Es decir para un hombre de condicin cromosmica sexual normal, no debe observarse

ningn cuerpo de Barr (es decir 0)

39 | P g i n a

Diagrama de flujo

40 | P g i n a

Post Prctica
1. Determine el nmero de cuerpos de Barr para los siguientes casos
45, XO
47, XXY
48, XXXY
49, XXXXY
2. Por qu la clula utiliza el mecanismo de inactivacin del cromosoma X?
3. Qu presupone para la herencia la inactivacin del cromosoma X?
4. Cundo sucede la inactivacin temprana del cromosoma X?

BIBLIOGRAFA

- Gustafson ML, Donahoe PK. (1994). Male sex determination: current concepts of
male sexual differentiation. Annu Rev Med; 45: 505-524.
- Grumbach MM, Conte FA. (1992). Disorders of sex differentiation. In Williams
Textbook of Endocrinology. J.D. Wilson and D.W. Foster, eds. Saunders.
Philadelphia. 853-951 pp.
- Lpez-Lpez M, Cervantes-Peredo A, Kofman-Alfaro S. (1996). Avances en el
conocimiento del proceso gentico en la diferenciacin sexual del humano. Rev
Inv. Clin; 48: 129-137.
- Schafer AJ (1995). Sex determination and its pathology in man. Advances in
Genetics; 33: 275-329.
- Thompson MW, McInnes RR, Willard HF. (1991).Genetics in Medicine. 5th ed.
W.B. Saunders Company. USA. 500 p.

41 | P g i n a

ANEXO
Frotis bucal
Definicin:
Es un examen indoloro en el cual se extraen clulas de la lengua con el fin de
evaluar la presencia de cuerpos de Barr (un tipo de masa que se observa en los
cromosomas sexuales femeninos normales).
Nombres alternativos:
Prueba de cromatina sexual
Forma en que se realiza el examen:
Se recogen clulas mediante un raspado de la lengua con una esptula. Esta
muestra se coloca en una lmina y se enva al laboratorio para su evaluacin.
Preparacin para el examen: No se necesita preparacin alguna para este
examen

Lo que se siente durante el examen: El paciente siente una sensacin de

raspado cuando se recogen las clulas de la lengua
.
Razones por las que se realiza el examen:
En el pasado, este examen se utilizaba para indicar:
Desarrollo sexual anormal
Genitales ambiguos
Amenorrea
Sospecha de anomalas cromosmicas
Hoy en da, si el mdico sospecha que puede existir alguna de estas anomalas,
es muy probable que solicite realizar un anlisis de cromosomas completo
(denominado cariotipo), en lugar de un frotis bucal. El frotis bucal se utiliza
principalmente en las olimpadas y otros eventos deportivos cuando las
autoridades sospechan que un hombre intenta competir como mujer.
Valores normales:
El resultado normal para una mujer es un indicio de la presencia de los cuerpos de
Barr, lo que confirma su gnero femenino.
Significado de los resultados anormales:
Si no aparecen cuerpos de Barr, el sujeto examinado es un hombre.
Cules Son Los Riesgos:
No hay riesgos asociados con un frotis bucal.

42 | P g i n a

Practica 6
Meiosis
Objetivos:
1.
Obtener y preparar clulas en meiosis para su estudio
2.
Identificar las diferentes etapas de la meiosis (Observacin e
interpretacin al microscopio)
3.
Comprender la importancia de la gametogenesis
4.
Comparar la anatoma interna del ratn con la de los seres humanos.
Introduccin
De la superficie de muchas clulas se proyectan diminutas estructuras mviles
importantes para el movimiento celular. Cuando la clula posee uno o apenas
unos cuntos de stos apndices y cuando son largos en proporcin al tamao
celular se llaman flagelos. Si la clula tienen muchos apndices cortos se les llama
cilios. Ambos tipos de prolongaciones sirve para que la clula se mueva en un
ambiente lquido o para el desplazamiento le lquidos o partculas a lo largo de la
superficie celular.

La estructura de los cilios y flagelos se compone de microtubulos, dinena (utilizan

ATP). En animales y en algunas plantas, los flagelos sirven como cola de los
espermatozoides, en tanto que los cilios son comunes en las superficies de clulas
animales que revisten conductos internos del cuerpo como las vas respiratorias.
Los espermatozoides son clulas germinales masculinas y contienen flagelos para
su motilidad y propulsin. Cada espermatozoide maduro consiste en cabeza,
cuello o proporcin media y flagelo. La cabeza consta del ncleo y un casquete o
acrosoma, que se diferencia a partir del complejo de Golgi El acrosoma ayuda al
espermatozoide a penetrar en el vulo y las mitocondrias del cuello del
espermatozoide proporcionan energa para el movimiento del flagelo. El
mecanismo de movimiento de cilios y flagelos est basado en la ultraestructura de
los microtbulos que conforman su axonema. El examen del lquido seminal forma
parte de los estudios de esterilidad.
43 | P g i n a

Valores normales:
Al semen se le analiza el volumen, nmero y estructura de los espermatozoides,
movimiento de los espermatozoides, as como consistencia, acidez y contenido de
azcar del lquido. Los valores pueden variar de un laboratorio a otro.
A continuacin se enumeran los valores normales ms comunes:
El volumen normal vara de 1.5 a 5.0 milmetros por eyaculacin. El conteo
de espermatozoides vara de 20 a 150 millones por eyaculacin. Por lo
menos el 60% de los espermatozoides deben tener una forma normal y
mostrar un movimiento normal hacia adelante (motilidad).
Significado de los resultados anormales:
Si el conteo de espermatozoides es muy bajo o muy alto, existe la posibilidad de
ser menos frtil. El porcentaje de espermatozoides normales tiene un efecto en la
infertilidad. La acidez del semen y la presencia de leucocitos (sugiriendo una
infeccin) pueden ejercer influencia en la fertilidad. El uso de muchas
drogas y medicamentos de prescripcin, al igual que el alcohol y el tabaco,
tambin pueden afectar la fertilidad.

Pre - Prctica
Es indispensable que el alumno repase previamente las secuencias de las fases y
estructuras meiticas as como su terminologa. Responder los siguientes incisos:
1. Realizar un esquema con donde con imgenes identifique las fases y
estructuras de la meiosis
2. Qu implicaciones ticas deben de tomarse en cuenta al trabajar con
animales de laboratorio?

44 | P g i n a

Prctica
Material y Equipo:
Material Biolgico: Ratones machos en edad adulta
2 tubos cnicos de centrifuga de 15 ml o 2 tubos de 13x100 mm
2 pipetas pasteur con bulbo
2 pipetas graduadas de 5 ml
1 caja de petri
2 hojas de bistur
Guantes de ciruga ( el alumno los debe llevar al Lab)
2 vasos de precipitados de 100 ml
Equipo de diseccin
Portaobjetos
Reactivos:
Solucin hipotnica de citrato de sodio al 1% a 37 C ( Incubar)
Solucin fijadora de Metanol absoluto-cido actico glacial 3:1
Colorante de Giemsa
Aceite de inmersin
Procedimiento:
1. Sacrificar al ratn desnucndolo. Abrir la cavidad abdominal y extraer los
testculos.
2. Recibir los testculos en una caja de petri con 5 ml de solucin hipotnica
de citrato de sodio al 1% a 37C.
3. Con ayuda del bistur cortar el tejido en fragmentos tan pequeos como sea
posible, eliminando antes pelo, grasa, o cualquier otra adherencia.
4. Pasar a un tubo de centrifuga con ayuda de una pipeta Pasteur las clulas
en suspensin e incubar a 37 C durante 30 minutos.
5. Centrifugar a 2500 r.p.m durante 5 min. Y eliminar el sobrenadante.
6. Re suspender el botn celular y aadir 5 ml de fijador gota a gota y
agitando en el vortex, dejar reposar a temperatura ambiente durante 30
min.
7. Centrifugar a 2500 r.p.m durante 5 min, y lavar por lo menos 2 veces ms
con fijador.
8. Decantar y re suspender en un volumen pequeo ( aproximadamente 0.5 a
1.0 ml)

45 | P g i n a

9. Dejar caer de 2 a 3 gotas de sta suspensin en un portaobjetos

desengrasado. Dejar secar al aire.
10. Teir con colorante de giemsa durante 5 minutos. Lavar y Observar al
microscopio, primero con objetivo 10X, 40X y luego con el objetivo a
inmersin

Post Prctica
Adems de lo usual, identifica de la siguiente manera tus resultados.

Muestra biolgica:
Ocular y objetivo:
Anlisis y discusin microscpica:

Responde a las siguientes preguntas

1. Diga cules son los componentes del Citoesqueleto?
2. Defina el concepto y la funcin de la dinena y la cinesina
3. Dibuje los componentes estructurales de un flagelo:

46 | P g i n a

Diagrama de Flujo

Bibiografia:
1.- Solomon E P. Biologa. 5 Ed. Mc Graw-Hill Interamericana, 2001
2.-Manual de Diagnstico clnico y de Laboratorio. Krupp M. A. 8 Ed. Manual
Moderno, Mxico 1989.
Alberts B Bray D, Lewis J. 1993. Molecular Biology of the cell. 3th Ed. Garland.
New York 791-838

47 | P g i n a

ANEXO
Composicin del Semen
1 - Caractersticas
Viscosidad relativa al agua 6.45
Densidad 1.020 a 1.040

2 Composicin Qumica
Protenas 1.58 a 1.80 mg/100 ml
Aminocidos 31-56 mEq/litro

Aspecto Blanco opalescente

pH 8.1 - 8.4
volumen eyaculado 2.5 - 5.0 ml
Autolicuefaccin a 20C 10 - 30 min.

Morfologa 80 - 100% normales

Cloruros 230-280 mEq/100 ml

Glucosa 380-610 mg/100 ml
Fsforo inorgnico 40-50 mg/100 ml
Fsforo total (cido soluble)
95
mg/100 ml
Fsforo - espermina - 13 - 30 mg/100
ml
Colesterol 80 mg/100 ml

Motilidad en la 1 hora 75 - 100 %

Motilidad despus de 6 horas 25 - 40 %

cido lctico 36 - 51 mg/100 ml

CO2 41 a 60 vol. por 100 ml

Motilidad despus de 24 horas............

10 %
Fosfatasa cida...Kind & King....1000.02500.0 uKA/ml
cido ctrico Chamben. mod...310.0620.0 mg/100 ml
Fructosa Roe.Mod 180.0-400.0 mg/100
ml

Fosfatasa cida 540 a 4000 U.K.A.

Espermatozoides 80 - 150 millones/ml

Peso seco 20.0-23.0 g/100 g

Fosfatasa alcalina 0.1 1 U. KingArmstrong

Hialuronidasa 100 U. por 100 ml

3 Elementos Figurados
Espermatozoides:
Recuento
global
media:
100.000.000/ml
Formas anormales menos de 20%
Motilidad (Weisman 1941):
Inmviles menos de 15%
Ligeramente mviles..menos de
15%
Motilidad moderada como mn.
75%
Movimiento normal...como mn.
75%
Kaufman:
61%
se
mantienen
mviles
despus de 12hs.
46 % se mantienen mviles
despus de 12 hs.
28%
se
mantienen
mviles
despus de 12 hs.

Adems
contiene:
fosforilcolina
ergotina, c. ascrbico, espermina,
cido ctrico, fibrinolisina.
El sistema Tampn o Buffer es
constituido por fosfato/bicarbonato.

cidos grasos combin 5.0-15.0% de la

materia seca
cidos grasos libres 5.0-13.0% de la
materia seca
cidos orgnicos totales...14.0-18.0%
" "
"
Amonaco 0 - 4.5
Lpidos neutros 1.0 - 5.0% de la materia
seca
Lpidos totales....10.0 - 25.0% de la mat.
seca y 5 g/24h
Nitrgeno total 1.0 - 2.0 g/24 h
Tripsina ++ a++++
Urobilingeno 40.0-200.0 mg/24h (30.0280.0 U Ebdich/24 h)

48 | P g i n a

Practica 7
Determinacion de grupos sanguneos
Objetivos:
- Interpretar reacciones de aglutinacin
- Determinar los grupos ABO y Rh (D)
INTRODUCCIN
La determinacin del grupo sanguneo es una prctica habitual e imprescindible
para la transfusin de componente hemticos. La razn est en que el sistema
inmune de algunos individuos rechaza los hemates de otros. Esta reaccin
inmunolgica est mediada por anticuerpos y es fcilmente visualizable in vitro
mediante reacciones de aglutinacin. Se conocen ms de 20 grupos de antgenos
eritrocitarios codificados en otros tantos loci gnicos, para los cuales existen
mltiples variantes allicas. El resultado son ms de 200 antgenos eritrocitarios
identificables.
Estos antgenos varan en su inmunogenicidad.
Los ms
importantes a efectos transfusionales son los antgenos del sistema H / ABO y los
del sistema Rhesus (Rh).
Sistemas H y ABO
Los eptopos responsables son carbohidratos que aparecen en glicoesfingolpidos
de membrana y tambin en glucoprotenas. El gen H codifica la enzima fucosil
transferasa, que adiciona fucosa a una cadena oligosacardica precursora. Los
tres ltimos azcares de la cadena se denominan antgeno H (Figura 1). En un
locus aparte est el sistema ABO, con tres alelos. El alelo A codifica una
transferasa que une N-acetil galactosamina a la cadena H, mientras que el alelo B
codifica una transferasa que une una galactosa. El alelo O no produce transferasa
y por tanto no modifica la sustancia H. El azcar unido al carbono 3 de la
galactosa determina la actividad antignica. La galactosa no acepta azcar en el
carbono 3 a no ser que haya fucosa unida al carbono 2.

Figura 1.

49 | P g i n a

Es importante destacar que estos genes son codominantes. Los individuos que
expresan los alelos A y B tendrn oligosacridos con los dos tipos de
modificaciones. As, se distinguen 4 grupos: A, B, AB y O. La importancia
transfusional de estos antgenos radica en que los individuos de un grupo
sintetizan anticuerpos frente a los oligosacridos que no estn en sus hemates
(Tabla 1). Estos anticuerpos, que se denominan isoaglutininas y que suelen ser
IgM, aparecen en grandes cantidades en circulacin sin necesidad de exposicin
previa a sangre de otros grupos. La razn parece estar en la reactividad cruzada
de sustancias presentes en bacterias de la flora intestinal.

Grupo sanguneo

Genotipo

A
B
AB
O

AA, AO
BB, BO
AB
OO

Tabla 1
Antgenos
eritrocitarios
A
B
AyB
H

Anticuerpos
sricos
Anti-B
Anti-A
Anti-A, Anti-B

Pre - Prctica
El estudiante deber investigar los conceptos nuevos de los grupos sanguneos en
los humanos y algo de historia sobre este tema. Se recomienda leer la REVISION
GRUPOS SANGUINEOS ABO y Rh: http://www.bvs.hn/RMH/pdf/1983/pdf/Vol513-1983-6.pdf
Con la informacin recabada deber contestar:
1. Qu son los grupos sanguneos?
2. Describe la diferencia y la definicin de ANTICUERPO y ANTIGENO en
trminos de grupos sanguneos.
3. Qu importancia tiene la tipificacin de grupos sanguneos?
4. Cmo se hace un rbol genealgico? Y elaborar un rbol genealgico de
los grupos sanguneos en su Familia.
5. A qu se le conoce como donador universal y receptor universal? Y
porque se designan de esta manera?

50 | P g i n a

Prctica
Materiales
Sangre Total (Puncin en dedo)
Alcohol y algodn
Lancetas
Suero Anti A, Suero Anti B y Suero Anti D
Portaobjetos
Aplicadores de Madera
Nota: Cada muestra de sangre es potencialmente infecciosa, sea precavido.

Procedimiento
1. Prepare un portaobjetos y rotula con las iniciales del alumno.
2. Se limpia un dedo con un algodn humedecido en alcohol y se pincha con la
lanceta.
3. Sobre un portaobjetos se depositan tres gotas de aproximadamente 0.5 cm
de dimetro (25-50 l) bien separadas.
4. Sobre cada gota de sangre del porta se pipetean 25 l de antisuero (1 gota).
a. El orden DEBE ser: anti-A, anti-B, anti-D.
b. El gotero no debe tocar la sangre, ni salpicar las muestras, se podra
contaminar y dar falsos positivos como resultado.
5. Mezclar con una punta del aplicador de madera durante unos segundos
6. Determinar la aglutinacin e interpretar el resultado. Puede visualizarse a
simple vista o utilizar un microscopio en caso de reaccin muy dbil.

51 | P g i n a

Post - Prctica
Para realizar el Post - Prctica de esta prctica deber, adems de lo usual
(presentacin de resultados, discusin de resultados, conclusiones, etc.),
contestar los siguientes enunciados:
1. Anotar los resultados obtenidos en una tabla como la siguiente, en donde
demuestre las reacciones que ocurrieron con la muestra de sangre
empleada:

1. Cul es su grupo sanguneo y Rh?

2. En esta prueba qu actu como antgeno? Y, Qu actu como
anticuerpo?
3. Obtener el porcentaje grupal para cada grupo sanguneo en tu grupo de
laboratorio
a. A
b. B
c. AB
d. O
e. Rh positivo
f. Rh negativo
4. Investigar que es la eritroblastosis fetal
5. Si conoce el grupo sanguneo y Rh de los miembros de su familia A
quines le puede donar sangre y de quienes de ellos puedes recibirlos
miembros?

52 | P g i n a

ANEXO
Los grupos sanguneos (alelos mltiples)
Ley de Hardy-Weinberg
El material utilizado sern los resultados obtenidos en la prctica 7

G.H. Hardy y W. Weinberg definieron los principios bsicos de la herencia

polignica y demostraron que en poblaciones en equilibrio las frecuencias (p y q)
de los diferentes alelos de un gen (A y a respectivamente) permanecen
constantes generacin tras generacin, siempre y cuando no se produzcan
fenmenos de mutacin, seleccin, deriva gentica, migracin o deriva meitica.
En el caso de dos alelos (A y a) si p es igual a la frecuencia del alelo A, y q la
frecuencia del alelo a; entonces:
p+q=1
(O lo que es lo mismo en porcentajes: el % p + el % q = 100%)
En poblaciones donde la fecundacin ocurre de forma aleatoria, las frecuencias
para los distintos genotipos sern:

(vulo) p (A)
(vulo) q (a)

(espermatozoide)
p (A)
p2 (AA)
qp (aA)

(espermatozoide)
q (a)
pq (Aa)
q2 (aa)

Es decir, que la distribucin de los genotipos de la generacin ser:

p2 + q2 + 2pq = 1
Esta frmula tambin se puede usar para calcular las frecuencias de los alelos A o
a en la poblacin. En el caso de los grupos sanguneos AB0 existen 3 alelos del
locus de la isoaglutinina (I). En este sistema A y B son codominantes, y ambos son
dominantes respectos a 0. Este sistema tiene seis combinaciones genotpicas
posibles: AA, A0, BB, B0, AB, 00.
Los individuos homocigticos AA y heterocigticos A0 son fenotpicamente
iguales, lo mismo que los individuos BB y B0. Esto dar lugar a 4 combinaciones
fenotpicas conocidas como A, B, AB y 0. La Ley de Hardy-Weinberg tambin se
puede emplear en este caso para los tres alelos:
p (A) + q (B) + r (0)
=1
53 | P g i n a

y las combinaciones genotpicas pueden calcularse por la siguiente ecuacin:

p2 (AA) + q2 (BB) + 2pq (AB) + 2qr (B0) + 2pr (A0) + r2
(00) = 1

La ley de Hardy-Weinberg se cumplir slo en poblaciones que se encuentren

en equilibrio. Uno de los requisitos para que esto ocurra es que el tamao de la
poblacin sea suficientemente grande. Nosotros vamos a considerar al grupo
de prcticas como una poblacin, y partiendo de los datos fenotpicos que
hemos recogido para el grupo sanguneo AB0, calcularemos las frecuencias
allicas suponiendo equilibrio Hardy-Weinberg. Sin embargo, lo ms probable
es que el grupo de prcticas no represente una poblacin en equilibrio, dado su
limitado tamao. Tras calcular las frecuencias allicas, estimaremos las
frecuencias genotpicas y fenotpicas esperadas y cotejaremos esos datos con
los obtenidos. Si no concuerdan, se puede deducir que la poblacin grupo de
prcticas no est en equilibrio Hardy-Weinberg. Se comparar esta situacin
con otros datos provenientes de poblaciones de mayor tamao que s estn en
equilibrio.
Recogida de datos del grupo de prcticas (fenotipos sanguneos)
fenotipo
sanguneo

antgenos
presentes
en
eritrocitos

Anticuerpos
presentados
en la sangre

genotipos
posibles

n de
% del total del
estudiantes del grupo prcticas
tipo

frecuencia fenotpica
que representa

A
B
AB
O
Preguntas de la prctica:
1.- Calcular las frecuencias de los alelos A (p), B (q) y 0 (r) empleando la Ley de
Hardy-Weinberg.
2.- Calcular las frecuencias genotpicas y fenotpicas esperadas, y compararlas
con los datos obtenidos.
3.- Discutir si la poblacin est o no en equilibrio H-W, y por qu.

54 | P g i n a

Practica 8
Estudio genealogico en genetica humana
Objetivos
1. Que el alumno aprenda a confeccionar y esquematizar rboles
genealgicos.
2. Determinar el genotipo de los individuos que lo componen
3. Conocer la transmisin de algunos caracteres sencillos y de fcil
observacin.
4. Comprender el estudio de la variabilidad Humana a partir de la observacin,
medicin y comparacin de caracteres individuales.
Introduccin
El hombre presenta ciertas caractersticas especiales que lo califican como un
material difcil para el estudio gentico. De hecho, estas caractersticas son:
1. Hay una gran diversidad gentica de individuos, y tambin la estructura
gentica de las poblaciones humanas vara continuamente debido a las
migraciones, la mezcla de razas, etc.
2. Por motivos ticos y morales no se prctican cruzamientos
experimentales, de los que por otra parte no se obtendra gran
informacin, ya que:
de cada parto suele nacer un solo individuo
las gestaciones son largas
entre una generacin y la siguiente transcurre mucho tiempo
el tamao de las familias es pequeo.
En cambio, otros organismos que se utilizan frecuentemente en la investigacin
gentica presentan caractersticas mucho ms ventajosas. Por ejemplo en los
ratones, ocurre una generacin cada dos meses y los descendientes de cada
pareja pueden contarse por decenas. En Drosophila, la generacin dura 20 das y
se cuentan los descendientes por centenares.
As, en estos organismos y otros de caractersticas similares, los cruzamientos
experimentales constituyen uno de los mejores mtodos para el conocimiento de
los caracteres hereditarios. Por lo tanto, la gentica humana tiene que recurrir para
su desarrollo a mtodos indirectos tales como el uso de pedigrs o rboles
genealgicos, anlisis de poblaciones, etc. A pesar de todas estas dificultades,
desde principios de siglo y mediante el uso de tcnicas genealgicas, se ha ido
acumulando el conocimiento de nuevos caracteres determinados genticamente y
de los genes que los controlan, hasta llegar a varios millares. Posteriormente, las
tcnicas citogenticas y moleculares han permitido identificar nuevos genes y
determinar su localizacin cromosmica.
55 | P g i n a

Pre - Prctica
1. Revisar sobre los conceptos y qu caracteres son importantes en la
herencia polignica.
2. Para la Prctica "Estudio genealgico en Gentica Humana", es necesario
previamente que cada alumno recoja datos de una serie de caracteres
entre los miembros de su familia (cuantos ms, mejor). Si no puede
contactar con varios miembros de su familia, puede recoger los de alguna
otra familia allegada. Se enumeran a continuacin dichos caracteres para
darle tiempo a la recogida de datos:
Descripcin de los caracteres
1) Disposicin del lbulo de la oreja. Lbulo separado de la mejilla o pegado
lateralmente a la mejilla.
2) Lnea frontal del pelo. Puede ser continua o tener un saliente frontal en el centro
denominado "pico de viuda". Obviamente las personas calvas no se pueden
contabilizar.
3) Capacidad de enrollar la lengua. Ser o no capaces de enrollar la lengua en
forma de U fuera de la boca.
4) Pigmentacin del iris. Ojos azules frente a ojos ms oscuros, sean stos
verdes o marrones. Lo que se compara es la ausencia total o no de pigmentacin
en la superficie del ojo. En ausencia de sta, se observa la lmina interna azul del
iris, y los ojos sern totalmente azules. La presencia de pigmento en las capas
superiores del iris enmascara en mayor o menor grado el color azul del fondo.
Otros genes determinan el color exacto y su intensidad para ojos verdes,
marrones, etc., pero en esto no nos fijaremos.
5) Hiperextensibilidad del dedo pulgar. Capacidad o incapacidad de doblar hacia
atrs la ltima falange del pulgar en un ngulo de casi 90 respecto a la anterior
("dedo del autoestopista"). Esta capacidad puede manifestarse slo en una de las
manos, y la expresividad del rasgo es variable.
6) Dedo meique doblado. El meique puede estar recto, o bien con la ltima
falange doblada hacia el dedo anular. Se colocan ambas manos relajadas sobre
una mesa y se observa si los dedos estn paralelos o si los meiques se doblan
hacia dentro.
7) Longitud relativa del dedo ndice. Dedo ndice ms o menos largo que el anular.
Se realiza la observacin como en el caso anterior. Se trata de un carcter de
expresin influenciada por el sexo.

56 | P g i n a

8) Hoyuelos faciales a ambos lados de la boca. Presencia o ausencia de hoyuelos

en las mejillas.
9) Presencia de pelo en las segundas falanges de los dedos. Aunque slo haya
algo de pelo en alguna de las diez falanges, se considera como fenotipo positivo.
10) Dedo gordo del pie corto. El dedo gordo del pie puede ser ms corto o ms
largo que el ndice adyacente.

Prctica
La prctica consiste, en el reconocimiento de las variaciones fenotpicas para
cada uno de los caracteres que se describen a continuacin, de donde el alumno
deducir su genotipo en cada caso. Los datos se tomarn en una hoja como la
que se indica al final de esta prctica. Se usar una hoja de datos para cada
persona.
Tambin se medirn caracteres de Herencia Poli gnica:
1. Estatura y Peso
2. ndice ceflico
3. Dinamometra ( Fuerza manual de presin o de traccin)
4. Forma de cruzar las manos y piernas
5. Lateralidad (diestro/zurdo)
6. Presin sangunea
7. Color de piel-color de cabello
8. Coeficiente intelectual
9. Miopa / astigmatismo
10. CARACTERES DE HERENCIA MENDELIANA: Sistema ABO
Material
Algodn
Lancetas
Alcohol
Aplicadores de madera
Cinta mtrica
Pinzas para fortalecer las manos
** El material biolgico de esta prctica sern los propios alumnos y sus
familiares para la observacin de algunos caracteres genticos. Con sus
datos se elaborarn las genealogas.

57 | P g i n a

Post - Prctica
Adems de lo usual (presentacin de resultados, discusin de resultados,
conclusiones, etc.), deber llenar la siguiente tabla de manera correcta:
TABLA DE RESULTADOS
Nombre: __________________________________________________________
Gnero: F/M
ndice Ceflico: _______________
Antecedentes de enfermedades: _______________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
Alergias: __________________________
Fobias: ______________________
Grupo sanguneo: __________________
Presin sangunea: ____________
Carcter
Pico de viuda
Lbulo de la oreja
Enrosca la lengua U
Pulgar ponero
Pelo digital
Pigmentacin del iris
Dedo meique doblado
Longitud relativa del dedo ndice
Hoyuelos faciales
Dedo gordo del pie corto
Pecas y/o lunares
Lateralidad
Zurdo, diestro , ambidiestro
Pie plano
Nariz
Aletas (anchas/ angostas)
Puente ( Convexo/ derecho)
calvicie
Hipertricosis
Color de cabello
Color de piel
Dinamometra

Dominante

Recesivo

H. materna

H. paterna

Inteligencia / aptitudes
Gusto por la historia y literatura
Deletrear
verbal
Aritmtica
Ciencias
Msica y pintura

58 | P g i n a

Practica 9
Interpretacion de cariotipos
Objetivo
Analizar e interpretar diferentes Cariotipos Humanos
Introduccin
Los cromosomas son las estructuras en que se organiza la cromatina nuclear y
que tienen una expresin dinmica en las distintas fases del ciclo celular. En la
mitosis estas estructuras comienzan un proceso de compactacin que alcanza su
mximo nivel en la metafase. Los cromosomas se tien fcilmente cuando estn
condensados y pueden ser individualizados con el microscopio ptico. Cada
cromosoma contiene una molcula de ADN lineal asociado a distintas protenas y
el contenido de genes es variable aunque est en relacin con su tamao. Por
eso, cualquier alteracin en el nmero o la estructura de los cromosomas puede
ser causa de enfermedades. Para la deteccin de estas alteraciones se
desarrollaron numerosas tcnicas y todas ellas requieren de un observador
entrenado que las interprete. La citogentica es la rama de la biologa que se
encarga del estudio de los cromosomas y sus anomalas.
Los humanos tenemos un nmero total de 46 cromosomas y este nmero vara
segn las especies. Los 46 cromosomas estn constituidos por 23 pares de
homlogos y cada miembro del par proviene de un progenitor. El cariotipo es la
constitucin cromosmica de un individuo y es un estudio de rutina en gentica
mdica. Los cariotipos se pueden informar presentando todos los pares
cromosmicos ordenados de acuerdo a su tamao, que en un principio eran
recortados de la fotografa de una metafase, y ahora se pueden hacer con
analizadores automticos. De los 23 pares, el par de cromosomas sexuales se
seala por separado para indicar el sexo del individuo. Para citar el cariotipo de un
individuo se indica primero el nmero total de cromosomas y seguidamente los
componentes del par sexual precedido de una coma. As, el cariotipo normal de un
varn se escribe 46,XY y el de una mujer 46,XX. Las anomalas cromosmicas
son una causa ms importante de abortos espontneos, retardo mental y
malformaciones.
Pre Prctica
1. Qu caractersticas permiten diferenciar cada grupo de cromosomas?
2. Explica los mecanismos cromosmicos que producen anomalas en el
cariotipo humano: a)Translocacin, b) No disyuncin, c) Trisoma, d)
Triploidia y e) Inversin
3. Investiga las Aportaciones Interesantes de la citogentica

59 | P g i n a

Practica
Instrucciones: Con Ayuda de la Web: Proyecto biolgico de la universidad de
Arizona (Actividad de Cariotipos) se resolvern los acasos clnicos y se irn
completando los datos del siguiente Cuadro:
Caso/ Paciente

Notacin

Diagnstico

Anormalidad

En la pantalla se presentarn los cromosomas desordenados sobre la plantilla

donde hay que ordenar el cariograma. Pinchando con el ratn y arrastrndolos, se
irn colocando sobre la casilla correspondiente. Habr que ordenarlos por parejas
segn su tamao, la posicin del centrmero y las bandas, teniendo en cuenta las
siguientes reglas:
pinchando en align all, todos los cromosomas se colocarn en posicin
vertical, facilitando su ordenacin.
el brazo largo de cada cromosoma se sita hacia abajo. Para dar la vuelta a
un cromosoma, pinchar dos veces sobre el mismo.
los autosomas se disponen en orden decreciente de tamaos mientras que
los cromosomas sexuales deben ir por separado.
hay en total 5 cariotipos distintos (5 muestras o samples). Se recomienda
empezar por la primera y hacer como mnimo las muestras 1, 2 y 3.
60 | P g i n a

Siguiendo estas instrucciones generales, proceder de la siguiente manera:

Contar los cromosomas y apuntar el nmero.
Buscar y colocar los cromosomas ms pequeos y acrocntricos que
corresponden al grupo G y, cuando est presente, al cromosoma Y que
ser el ms largo de los anteriores. En total sern 5 si es XY o 4 si es
XX.
Buscar otros 6 cromosomas acrocntricos pero ms grandes que los
anteriores y que constituyen el grupo D. Colocarlos emparejados.
Buscar los 4 cromosomas ms pequeos que nos quedan, que son
metacntricos. Colocarlos en el grupo F.
Buscar los cromosomas del grupo E que son 6, algo mayores que los F.
Dos de las parejas, la 17 y 18, son submetacntricos y la 16
metacntricos.
Buscar los 6 cromosomas del grupo A. Son los mayores. Los pares 1 y 3
son metacntricos (el 1 mayor que el 3) y el 2 submetacntrico.
Buscar los 4 cromosomas del grupo B que son los submetacntricos de
mayor tamao.
Buscar los 14 cromosomas del grupo C. Encontraremos ms de 14
cromosomas, ya que el cromosoma X es idntico a los que constituyen
el par 12. Para diferenciarlo hay que recurrir al estudio de las bandas lo
mismo que, en general, para numerar las parejas dentro de cada grupo.
En el caso de que haya ms de 46 cromosomas, buscar a qu grupo pertenece el
sobrante, colocarlo all y sealar el sndrome a que da lugar esta anomala. En
caso de que el nmero de cromosomas sea inferior a 46 sealar el cromosoma
que falta as como el sndrome a que da lugar esta anomala.
Si el nmero de cromosomas es de 46, estudiar cada cromosoma para comprobar
si hay algn tipo de alteracin estructural (deleciones, translocaciones...).
Cuando hayamos terminado, pinchando en Verify el programa nos indicar si los
cromosomas estn colocados correctamente. Sobre los que no aparezca la marca
roja, es que estn mal colocados. A veces simplemente hay que colocar bien el
cromosoma dentro de su casilla, si no no se detecta.
Por ltimo, hay que hacer el diagnstico del cariotipo obtenido. Pinchando en
diagnosis saldrn varias opciones; se elegir la que se estime oportuna, y el
programa nos dir si hemos acertado. Si el diagnstico no es correcto, vuelve a
observar el cariograma detenidamente. Si lo es, puedes pasar a la siguiente
muestra.

61 | P g i n a

Post Prctica
Adems de lo usual (presentacin de resultados, discusin de resultados,
conclusiones, etc.), deber:
1. esquematizar los cariotipos de los siguientes casos clnicos:
a) Varn de 3 aos de edad con Sndrome de Down por trisoma 21 libre
b) Un feto masculino nacido muerto con trisoma 13
c) Una nia recin nacida con trisoma 18 en mosaico, con una lnea
normal.
d) Un feto femenino malformado con triplioda.
e) Una nia con sndrome de Turner con monosoma del X en lnea pura.
2. Qu caractersticas permiten diferenciar, en general, unos cromosomas de
otros?
3. Qu clulas del organismo llevan el cariotipo diploide completo?
4. Qu mecanismos cromosmicos producen anomalas del cariotipo
humano?
5. Se manifiestan siempre las alteraciones cromosmicas en el fenotipo del
individuo que las transmite? Explica tu respuesta.
Bibliografa
http://www.fmed.uba.ar/depto/histo1a/genetica/adm/sg2.pdf
ANEXOS
El cariotipo es el complemento cromosmico particular de un individuo y viene
definido por el nmero y morfologa de los cromosomas en la metafase mittica.
En la especie humana la dotacin cromosmica es de 2n = 46 (22 pares de
autosomas y un par de cromosomas sexuales).
Utilizando tcnicas de tincin estndar los cromosomas aparecen uniformemente
teidos en metafase y se clasifican en 7 grupos de la A a la G atendiendo a su
longitud relativa y a la posicin del centrmero que define su morfologa. Los
autosomas se numeran del 1 al 22 ordenados por tamaos decrecientes y por la
posicin del centrmero.
Los cromosomas sexuales X e Y constituyen un par aparte, independientemente
del resto (por su tamao, el cromosoma X se incluira en el grupo C, y el Y, en el
grupo G). De esta forma el cariotipo humano queda constituido as:
Grupo
A

Pares cromosmicos
1, 2 y 3

4y5

C
D
E

6, 7, 8, 9, 10, 11 y 12
13, 14 y 15
16, 17 y 18

Caractersticas
Cr. muy grandes casi metacntricos (1 y 3
metacntricos, pero 2 submetacntrico)
Cr. grandes y submetacntricos, con
dos brazos muy diferentes en tamao
Cr. medianos submetacntricos
Cr. medianos acrocntricos con satlites
Cr. pequeos, metacntrico el 16 y
62 | P g i n a

F
G

submetacntricos 17, 18
Cr. pequeos y metacntricos
Cr. pequeos y acrocntricos, con
satlites.
El cr. X es parecido al 6. El Y, al grupo
G, pero sin satlites.

19 y 20
21 y 22

X, Y

(Todos los cromosomas autosmicos estn ordenados en orden decreciente de

tamao, excepto el cromosoma 21 que ahora se sabe que es ms pequeo que el
22). Sin embargo, atendiendo solamente a estos parmetros no es posible
identificar inequvocamente cada par de cromosomas. Para ello es necesario
utilizar diferentes tcnicas de bandeo cromosmico. Los distintos patrones de
bandas que se consiguen son constantes y especficos de cada tcnica y
determinan la distribucin de regiones cromosmicas que se revelan positiva o
negativamente segn el mtodo utilizado.
Clasificacin de los cromosomas

A
1

B
4

C
6

10

11

12

D
13

14

E
16

15

17

18
Crs.

19

20

21

22
X

F clnica
Citogentica

sexuales

G
63 | P g i n a

En 1956, Tijo y Levan determinaran el complemento cromosmico diploide del

hombre (2n = 46). En 1959 Lejeune describi la primera cromosomopata o
enfermedad originada por una alteracin cromosmica, el sndrome de Down
producido por una trisoma del cromosoma 21. Desde entonces, la Citogentica
Humana ha ido desarrollndose como una ciencia mdica.
Hay dos tipos fundamentales de cromosomopatas:
- Variaciones cromosmicas estructurales: afectan a la estructura del
cromosoma en cuanto a la ordenacin lineal de los genes. Aqu se incluyen
deleciones, duplicaciones, inversiones y translocaciones.
- Variaciones cromosmicas numricas: afectan al nmero de cromosomas.
Incluyen las poliploidas (triploida: 3n; tetraploida: 4n) y los diversos tipos de
aneuploida (trisomas: 2n+1; monosomas: 2n-1).
Por otra parte, las anomalas cromosmicas pueden afectar a los autosomas o a
los cromosomas sexuales. Las alteraciones cromosmicas ms frecuentes en
humanos son:
Anomalas autosmicas:
Sndrome de Down, por trisoma del cromosoma 21, translocacin 21/21 o
translocacin 14/21.
Sndrome de Patau, por trisoma del par 13.
Sndrome de Edwards, por trisoma del par 18.
Sndrome Cri du Chat, por delecin parcial del brazo corto del cromosoma 5
(5p).
Sndrome de DiGeorge, por delecin parcial del brazo largo del cromosoma
22 (22q11).
Cromosoma Filadelfia, formado por una translocacin entre los
cromosomas 9 y 22.
Anomalas de los cromosomas sexuales:
Sndrome de Klinefelter, por una constitucin XXY, XXXY, XXXXY.
Sndrome XYY, cromosoma Y extra en varones.
Sndrome de Turner, constitucin X0.
Sndrome XXX, cromosoma X extra en mujeres.
Actualmente se ha llegado a profundizar bastante en el conocimiento del cariotipo
humano y se sabe que es relativamente frecuente la aparicin de anomalas
cromosmicas. Por ejemplo, cerca de un 25% de los abortos ocurridos antes de la
octava semana de gestacin tienen cariotipos anormales y un 0,5% de los recin
nacidos presentan aneuploidas.
Estas alteraciones no slo pueden producir anomalas en el propio individuo
portador sino que, por tratarse de anomalas genticas, pueden transmitirse a la
64 | P g i n a

descendencia en el caso de que afecten a las clulas germinales. La deteccin

anticipada de anomalas cromosmicas permite dictaminar las posibilidades de
que la descendencia de una pareja portadora de una de ellas pueda presentarla o
no. Para ello es preciso conocer el cariotipo de cada progenitor, lo que permite
emitir un diagnstico de su posible descendencia, con lo que el individuo ser
consciente de sus posibilidades.
El estudio del cariotipo tiene tambin su aplicacin en el diagnstico prenatal. Es
posible determinar la constitucin cromosmica del feto antes de su nacimiento
pudiendo as observarse si presenta alguna anomala cromosmica detectable.
Hoy en da, el diagnstico prenatal se practica a posteriori del inicio de la
gestacin y los resultados positivos suelen plantear conflictos ticos y
emocionales. Si bien, en muchos casos este tipo de diagnstico es el nico
posible, como cuando la anomala cromosmica se produce en las clulas
germinales de uno de los progenitores.

65 | P g i n a

Practica 10
Estudio gentico y morfolgico de Drosofila
melanogaster
Objetivos:
Valorar el uso de la Drosophila Melanogaster como modelo biolgico en la
investigacin en Gentica.
Entender los principios de la transmisin de los caracteres hereditarios y
comprobar las leyes de Mendel.
Determinar las caractersticas morfolgicas externas de la Drosophila
Melanogaster adulta.
Comparar las diferencias anatmicas entre hembras y machos de esta
especie.
Identificar las diferentes etapas del ciclo vital de D. Melanogaster.
Introduccin
Drosophila melanogaster (literalmente "amante del roco de vientre negro"),
tambin
llamada mosca
del
vinagre o mosca
de
la
fruta,
es
una especie de dptero braqucero de la familia Drosophilidae. Recibe su nombre
debido a que se alimenta de frutas en proceso de fermentacin tales
como manzanas, bananas, uvas, etc.
Es una especie utilizada frecuentemente en experimentacin gentica, dado que
posee un reducido nmero de cromosomas (4 pares), breve ciclo de vida (15-21
das) y aproximadamente el 61% de los genes de enfermedades humanas que se
conocen tienen una contrapartida identificable en el genoma de las moscas de la
fruta, y el 50% de las secuencias protenicas de la mosca tiene anlogos en los
mamferos. Para propsitos de investigacin, fcilmente pueden reemplazar a los
humanos. Se reproducen rpidamente, de modo que se pueden estudiar muchas
generaciones en un corto espacio de tiempo, y ya se conoce el mapa completo de
su genoma. Fue adoptada como animal de experimentacin gentica por Thomas
Morgan a principios del siglo XX. Sus 165 Mb de genoma (1 Mb = 1 milln de
pares de bases) fueron publicados en marzo de 2000 gracias al consorcio pblico
y la compaa Celera Genomics. Alberga alrededor de 13.600 genes.
Similitud con humanos
Cerca del 75% de genes humanos vinculados con enfermedades, tienen su
homlogo en el genoma de la mosca de la fruta, y el 50% de las secuencias de
protenas de la mosca tiene su homlogo en mamferos. Existe una Base de Datos
en lnea, llamada Homophila est disponible para estudios de enfermedades
genticas humanas homlogas en moscas y viceversa. Drosophila sigue siendo
usado extensamente como modelo gentico para diversas enfermedades
humanas
incluyendo
a
desrdenes
66 | P g i n a

neurodegenerativos Parkinson, Huntington, ataxia espino-cerebelosa y Alzheimer.

Esta mosca tambin se usa en estudios de mecanismos del envejecimiento y
estrs oxidativo, sistema inmunitario, diabetes, cncer, abuso de drogas.
Estudios realizados durante esta ltima dcada en organismos simples como
Drosophila han aportado importantes avances al campo.
Recientemente, el Dr. Joaquin Culi nuestro ha descubierto que las clulas de los
discos imaginales y los folculos del ovario de Drosophila requieren los genes
lipophorin receptor 1 (lpr1) y lpr2, pertenecientes a la familia de los LDLR, para la
adquisicin de lpidos neutros a partir de las lipoprotenas circulantes, que en
insectos llamamos lipoforinas, y que se encargan de distribuir y transportar lpidos
entre los distintos tejidos.
Por qu se usa Drosophila en investigacin?
Es fcil de manipular y su coste de mantenimiento es bajo.
Su ciclo biolgico est muy bien definido, y su tiempo de generacin es
corto, de unos 10 das.
Adems es un modelo eucariota, de alta complejidad, pero con slo 4
cromosomas y con estadios germinales equiparables a los de mamferos.
Su metabolismo tambin es parecido a mamferos.
Hay infinidad de mutantes descritos con multitud de manifestaciones
fenotpicas.
En el aspecto ms puramente gentico tambin presenta varias ventajas:
su genoma est muy estudiado, se pueden obtener fcilmente los
cromosomas politcnicos, que se ven fcilmente al microscopio y
permiten un estudio detallado a nivel citogentico.

Pre Prctica
1. Describe la elaboracin del medio de cultivo para la proliferacin de la
Drosophila melanogaster.
2. Esquematice las diferentes fases del ciclo de vida de Drosophila
melanogaster.
3. Investiga que efecto tiene la temperatura sobre la reproduccin y el desarrollo de
Drosophila melanogaster

67 | P g i n a

Practica
Materiales
Estereomicroscopio
Microcopio
Bistur
Portaobjetos
Cubreobjetos
Larvas de Drosofila
1. Esquematiza las diferencias observadas entre machos y hembras, toma 10
moscas y analzalas utilizando sus caractersticas fenotpicas
2. En los machos trata de buscar el peine sexual. Dibuja y explica tus
resultados:

3. Elige 4 larvas de tercer estadio y compara sus rganos

68 | P g i n a

4. En el cromosoma gigante que observaras en la laminilla preparada

identifica, los Puff y el cromocentro e investiga sus funciones. Deben de
verse como en la siguiente imagen.

Post Prctica
1. Qu es un modelo biolgico? Y por qu se considera a Drosophila como
un buen modelo de investigacin?
2. Menciona 3 organismos y sus ventajas para realizar experimentos en
gentica y el entendimiento de procesos patolgicos en Humanos, investiga
un poco:
3. Investiga que son los genes homeicos y / los genes HOX y elabora un
mapa conceptual de lo ms significativo.
Bibliografa:
1. Adams MD, Celniker SE, Holt RA, et al (2000). The genome sequence
of Drosophila melanogaster. Science 287 (5461): pp. 218595.
2. Bier lab (2008). Homophila: Human disease to Drosophila disease
database. University of California, San Diego.
3. Callejo A, Culi J, Guerrero I (2008).Patched, the receptor of Hedgehog, is a
lipoprotein receptor.Proc Natl Acad Sci U S A 105(3):912-7.
4. Soukup SF, Culi J, Gubb D. (2009) Uptake of the necrotic serpin in
Drosophila melanogaster via the lipophorin receptor-1. PLoS Genet.
5(6):e1000532.
5. Parra-Peralbo E, Culi J.(2011). Drosophila lipophorin receptors mediate the
uptake of neutral lipids in oocytes and imaginal disc cells by an endocytosisindependent mechanism. PLoS Genet. 7(2):e1001297.

69 | P g i n a

Practica 11
Cromosomas Politenicos de glandulas
salivales de Drosophila
Objetivos

Valorar el uso de la Drosophila Melanogaster como modelo biolgico en la

investigacin en Gentica.
Determinar las caractersticas morfolgicas de la Drosophila Melanogaster
adulta.

Introduccin
El estado larvario de ste insecto se caracteriza por tener en las clulas de las
glndulas salivales cromosomas politenicos multistriados y gigantes. Estos
cromosomas se forman a travs de un proceso de endomitosis. En el cual las
hebras de los cromosomas repetidamente se replican pero sin separarse las hijas
del ncleo. Es evidente la formacin de bandas que son ricas en DNA, las que se
pueden observar mediante tcnicas citolgicas.

Pre Prctica
1. Cul es el significado de estos trminos? Ejemplifique con cada uno:
a. Aberraciones
b. Traslocaciones
c. Inversin cromosmica

70 | P g i n a

Practica
Material

Estereomicroscopio
Microcopio
Bistur
Portaobjetos
Cubreobjetos
Larvas de Drosofila
Tincin de Aceto-orcena
Solucin salina fisiolgica
Lampara de Alcohol
Palillos
Hojas de rasurar

Procedimiento
Extraer por diseccin las glndulas salivales de la larva
1.-Colocar una larva en una gota de solucin fisiolgica sobre un cubreobjeto.
2.- Observar en el estereomicroscopio para localizar los rganos internos
3.-Observe detenidamente la larva en el estereoscopio utilizando la luz blanca y el
contraste para identificar los rganos internos.
4.-Usando un apropiado enfoque (de 15 a 25X ) trate de hacer la diseccin para
obtener las glndulas salivales.
Las 2 glndulas salivales son transparentes estn localizadas en la parte anterior.
Las clulas tienen una caracterstica con apariencia granular
5.- Tincin: transferir las glndulas libres de grasa al portaobjeto y adicionar una
gota de aceto-orcena, cubrir con el cubreobjeto.
6.- Tomar el portaobjeto de la preparacin y calentar cuidadosamente con la
lmpara de alcohol, sin sobrecalentar, porque se pueden destruir las glndulas.
7. Cubrir con el cubreobjetos y presionar suavemente con una toalla y si es
necesario con el borrador de un lpiz. En este momento se aplastan las
glndulas y hay ruptura de la membrana nuclear, liberando as a los cromosomas
para poder observarlos.

71 | P g i n a

8.- Haga sus observaciones en el microscopio y dibuje detalladamente.

Post Prctica
1. Realice sus observaciones microscpicas y el anlisis de las estructuras
celulares
2. Pudo Ud. Detectar el patrn de bandeo?
3. Puede ver un nucleolo?
4. Puede ver un cromocentro?
Bibliografa
Demerec, M. 1950. Biologa de Drosofila. New York: Jhon Willey & Sons.

72 | P g i n a

Practica 12
SUTURAS
Objetivos

Que los estudiantes de medicina obtengan una introduccin a las tcnicas

de suturas as como conocimiento de los tipos de hilos y agujas que
existen.
Aprender a manejar adecuadamente el instrumental quirrgico y a
seleccionar el tipo de sutura.
Ejercitar y desarrollar habilidades en visin y motricidad fina en el proceso
de sutura.

Fundamento:
Los avances de la investigacin biomdica en general se basan en la
experimentacin en modelos animales lo que ha permitido comprobar la eficacia
de los frmacos, la comprobacin de nuevas tcnicas quirrgicas, los trasplantes
de rganos, sin descuidar el manejo adecuado de animales y la tica en la
experimentacin y la formacin mdica. La ciruga, adems de ciencia, es un arte
que requiere de la destreza y agilidad de las manos; para lograrlo, adems de
cierto grado de condiciones de motricidad naturales, el entrenamiento y la prctica
son indispensables para la obtencin de los mejores resultados en el paciente.
Las heridas en atencin primaria (AP) requieren un tratamiento especfico como es
la sutura. De este modo, se protege la herida de agresiones externas, se
aproximan los bordes haciendo la reepitelizacin ms sencilla y mejorando el
aspecto esttico de la cicatriz (Pera C, 2004).

Pre prctica
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Que aportes hicieron Jonh Hunter y Alexis Carrel en el rea mdica?

Clasificacin de las suturas en ciruga
Tipos de suturas
Tipos de agujas
Tipos de hilos
Ver el video del anexo.

73 | P g i n a

Practica
Materiales

Estuche de diseccin
Agujas de suturas
Carne de cerdo o un corazn de cerdo (cada alumno debe de traer su
pedazo.
Guantes
Esponja

Procedimiento
Empezar a practicar con la esponja agarrndola con la pinza con la mano
izquierda y con la mano derecha las tijeras que sostienen la aguja de sutura.
Introducir la aguja en un borde de la esponja y halar dejando unos 5cm de hilo al
final, soltar la aguja y con las pinzas agarrar el hilo restante y hacer un nudo doble
y halar al lado contrario volver a tomar el hilo con las pinzas y hacer un nudo
simple bien apretado.
Seguir haciendo nudos simples hasta que el hilo se termine o hasta que la herida
est completamente cerrada.
Repetir este procedimiento en la piel de cerdo.
NOTA: solamente el nudo inicial y el final es doble y debe de ser bien apretado
para que la sutura tenga tencin.

74 | P g i n a

ANEXO
Material necesario
Porta-agujas: Se usa para tomar y sostener agujas quirrgicas curvas. El
tamao del porta agujas debe ir de acuerdo con el tamao de la aguja.
Generalmente, las ramas son rectas, pero pueden ser curvas o en ngulo y
los mangos pueden ser largos para facilitar la insercin de la aguja en
ciruga de pelvis o de trax.

Pinza de Diseccin con dientes:

Pinza de diseccin tipo Adson para sutura de heridas pequeas

Pinzas de hemostasia: Tipo mosquito

Pinza de hemostasia tipo mosquito curvo

75 | P g i n a

Hilos de suturas: Las agujas quirrgicas pueden ser curvas y rectas,

desechables o reutilizables.
Existen numerosos tipos de sutura. La eleccin del material a utilizar en un
tejido se basa en: las caractersticas individuales del material, ubicacin,
tipo de sutura, edad, estado de la paciente, experiencia y preferencia del
cirujano. Todos los materiales deben cumplir ciertos parmetros tales como
tamao, resistencia a la tensin, esterilidad, envasado, tinturas e integridad
de la unin aguja y material de sutura.
o Tamao del material de sutura: A mayor dimetro de la hebra de
sutura, mayor es la numeracin asignada. Se comienza con el 4 5,
que es el material de sutura ms grueso disponible, disminuyendo
hasta llegar al 0. A medida que mltiplos del 0 siguen indicando el
tamao, el material de sutura comienza a ser ms pequeo en su
dimetro. El ms pequeo disponible es 11/0 que es tan fino que
flota en el aire. Las suturas ms finas se utilizan en microciruga y las
ms pesadas para aproximar tejido seo.

Tijeras:

Tipos de tijeras utilizadas en las suturas de heridas, tijeras rectas para cortar hilos
y curvas para cortar tejido
Lneas de Langers
Las lneas de distribucin de tensin en la piel. Es importante que siempre que se
pueda colocar los puntos en perpendicular a estas lneas, de forma que la cicatriz
soporte la menor tensin posible (y as lo mas esttica posible).

76 | P g i n a

Como Suturar (Poner Puntos #1)

http://www.youtube.com/watch?v=qF_T6HthO2k
http://www.fisterra.com/ayuda-en-consulta/tecnicas-atencion-primaria/tecnicassutura/

Post Prctica
1. Practicar, practicar y practicar en casa

77 | P g i n a