Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
BIOQUMIC A
El ADN
bajo el efecto
del sol
Los mecanismos fotoqumicos que alteran el ADN
de las clulas cutneas durante la exposicin solar
aumentan el riesgo de cncer de piel
EN SNTESIS
bronceada se practica en Europa desde principios
del siglo . Hasta el siglo , la tez plida constitua una prueba de pertenencia a la aristocracia; las
clases obrera y campesina, que desempeaban su
actividad al aire libre, presentaban la tez bronceada. Ms tarde,
la revolucin industrial conllev la reclusin de los obreros en
las fbricas, lejos del sol, mientras que las clases sociales acomodadas redescubran el turismo de balneario. En 1936, con la
aparicin de las vacaciones pagadas, la piel bronceada se convirti en un fenmeno de moda.
Rayos ultravioleta C
2DmD`
solar
Rayos ultravioleta B
yyDm
Rayos ultravioleta A
yyDm
Rayos ultravioleta B
Dm
Rayos ultravioleta A
Dm
Ncleo
Fotoproducto
ADN
Unin entre
mUDy
Radicales libres
Esqueleto del ADN
Base
Clula cutnea
daada
En 2008, un estudio sociolgico de la Seguridad Social y del Instituto Nacional de la Salud y la Investigacin Mdica de Francia
demostraba que, si bien la mayora de la poblacin reconoca los
riesgos asociados a la exposicin solar, su comportamiento en
bWifbWoWideh[[`WXWjWbYh[[dY_W0c[deiZ[bWj[hY[hWfWhj[i[
protega y la mayora tomaba el sol durante las horas del da de
mayor irradiacin. No sorprende por tanto que, en Europa, el
nmero de casos de cncer de piel aumente entre un cinco y un
siete por ciento anual y que, en Francia, se diagnostiquen al ao
90.000 nuevos casos y fallezcan 1300 personas. Cmo provocan
cncer las radiaciones ultravioleta?
El ADN posee una estructura qumica compleja que le perc_j[h[fb_YWhi[[bc[dj[ojhWZkY_hi[[dfhej[dWi$;ij|\ehcWdo por bases nitrogenadas o nucleotdicas (adenina, citosina,
guanina y timina) unidas a un esqueleto de azcares y fosfatos. Y se compone de dos hebras enrolladas en forma de doble
hlice. Sin embargo, numerosos agentes qumicos o fsicos pueden daar las bases o el esqueleto. A veces, tales daos se traZkY[d[dckjWY_ed[i"[iZ[Y_h"[dceZ_YWY_ed[iZ[bW_d\ehcWcin gentica. Las clulas afectadas pueden empezar a multipli-
0y`DmyDDmD`mDmmyy`y
(en Wm2nm1)
y`yymyDU`Dmy%
(en M1`1)
La longitud de onda de la radiacin incidente determina la naturaleza de los daos causados en el ADN y, por tanto, las coni[Yk[dY_WiX_eb]_YWi$DejeZWibWiceZ_YWY_ed[iZ[b7:Dh[sultan perjudiciales y no todas son eliminadas por los sistemas
Y[bkbWh[iZ[h[fWhWY_dZ[b][decWYedbWc_icW[YWY_W$
Adems, el ADN presenta un mximo de absorcin en la regin de los rayos UVC (a 257 nanmetros), absorcin
100
104
que disminuye en los UVB y que se
vuelve an ms dbil en los UVA. Los
UVC son, pues, los ms absorbidos,
1
3
10
10
Wkdgk[jWcX_dbeic|ih[[`WZeifeh
la atmsfera hacia el espacio. Por el
contrario, los UVA son los menos ab2
10
102
sorbidos, pero los que mejor atraviesan
la atmsfera y, en consecuencia, los ms
abundantes. Ahora bien, al ser absor103
101
bidos por el ADN, los UVB desencadenan reacciones fotoqumicas entre las
4
bases. Por su parte, los UVA provocan
10
Ultravioleta C
Ultravioleta B
Ultravioleta A
10
la oxidacin del ADN por medio de me240
280
320
360
400
canismos indirectos.
Longitud de onda (en nanmetros)
En 2003, nuestros equipos del Comisariado de la Energa Atmica (CEA)
La doble hebra de ADN absorbe, sobre todo, los rayos ultravioleta C. Esta absorcin (azul) en Grenoble y del Instituto Curie dees menor en los ultravioleta B y muy dbil en los ultravioleta A. Sin embargo, la luz solar mostraron que, adems de daar el
que incide sobre la superficie de la Tierra, desprovista de ultravioleta C, contiene un 5 por ADN mediante mecanismos de oxidaciento de ultravioleta B y un 95 por ciento de ultravioleta A (blanco). Por tanto, aunque es- cin, los UVA provocaban alteraciones
tos ltimos sean absorbidos en menor medida por el ADN, desencadenan ciertas reaccio- semejantes a las de los UVB. Obtuvimos esos resultados en cultivos celulanes qumicas.
POUR LA SCIENCE
R E AC C I O N E S F O T O Q U M I C A S
res y, en 2006, en colaboracin con el Instituto de Inl[ij_]WY_dF_[hh[<WXh["beiYedhcWcei[dbWf_[b
humana.
Para comprender por qu las radiaciones ultravioleta causan mutaciones, los fotoqumicos estudian
el modo en que la absorcin de un fotn daa el ADN.
La absorcin de la radiacin ultravioleta por el ADN desencadena una serie
Las bases de la molcula absorben los fotones ultrade mecanismos que preceden a la aparicin de daos o fotoproductos. Para
l_eb[jW"beiYkWb[iceZ_YWdbW[ijhkYjkhW[b[Yjhd_caracterizar estas etapas intermedias, que permiten comprender la formaYWZ[bei|jeceibWYed]khWY_dZ[bei[b[Yjhed[i
cin de las lesiones, se utiliza la espectroscopa con resolucin temporal.
alrededor del ncleo). Como consecuencia, el ADN
Durante un perodo de tiempo muy corto se excita el ADN por medio
adquiere un estado excitado, con una energa supede un lser ultravioleta (a). Una parte de la energa absorbida por el ADN
rior a la de su estado habitual. Sus constituyentes
se disipa en el entorno en forma de calor (b). Otra parte es transferida a las
pueden entonces reaccionar entre s.
bases, que pasan de un estado excitado a otro. Una pequea fraccin de
Mientras que los primeros trabajos realizados
xx%x`Dlxxx`xxb), mientras que otra fraccin,
durante los aos sesenta se centraron en las bases
todava ms pequea, sufre una serie de reacciones qumicas que dan lugar
del ADN aisladas, hoy se estudian los estados excia fotoproductos (c).
tados de la doble hebra de ADN. Tales avances han
Por tanto, durante perodos de tiempo muy breves, que pueden durar
sido posibles gracias, por un lado, a la potencia de
entre unos cien femtosegundos y algunos nanosegundos, se pueden deteclos ordenadores para realizar clculos complejos y,
tar seales cuyas propiedades dependen de las especies qumicas generapor otro, a la espectroscopa con resolucin tempolDDDxD"Dlxx``lxx`x`Dral, una tcnica que proporciona informacin sociona informacin sobre la energa de los distintos estados excitados y sobre
bre la vida media de las especies qumicas intermesu vida media. Incluso es posible calcular el tiempo que dura la presencia
dias que se forman antes de la aparicin de un fotode algunas especies intermedias que no emiten fotones.
producto.
Se ha determinado as que el tiempo que separa la absorcin de un fotn
En primer lugar, hemos examinado el modo en
de la aparicin de un fotoproducto depende de la estructura qumica de
que una doble hlice de ADN absorbe los rayos UVA.
este ltimo.
Hemos desarrollado en el laboratorio un modelo de
ADN formado por 20 pares de bases adenina-timina:
Energa
%yyDmy`Dm
la molcula resultante presenta una absorcin dbil,
pero relevante, de los UVA. Sin embargo, una mezcla de esas bases aisladas no absorbe tales longitua
b
c
des de onda. Los resultados demuestran que, al contrario de lo que se pensaba, las reacciones fotoqumicas del ADN no solo son provocadas por los
ultravioleta C y B, sino tambin por los A.
2DmD`
Gracias a la espectroscopa con resolucin temultravioleta
poral, hemos demostrado despus que los estados
2yD``
excitados originados por la absorcin de los UVA
`D
Z_[h[dZ[beigk[][d[hWdbeiKL8obeiKL90i[
trata de estados de transferencia de carga. En esa
Calor y`y`D
Yed]khWY_d[b[Yjhd_YW"Y_[hjWiXWi[ifh[i[djWd
carga positiva y otras negativa, de manera que pueden reaccionar entre s.
Qu sucede con la energa de la radiacin absor%yyDm
bida por el ADN? Una parte importante se disipa en
mDyD
forma de calor en el entorno del ADN. Otra se reparm`
te entre las bases, que pasan de un estado excitado
a otro. En el laboratorio, hemos demostrado que esa
transferencia de energa comienza menos de 100 femtosegun- la absorcin de un fotn de radiacin UVC y la formacin de un
dos (100 u 1015 segundos) despus de la absorcin. Una dimi- fotoproducto depende en gran medida de la estructura qumica
nuta fraccin del ADN excitado emite entonces una radiacin de este ltimo. Los dmeros de timina (fotoproductos formados
Z[keh[iY[dY_W$OejhW\hWYY_dWdc|if[gk[W[nf[h_c[d- por la unin de dos timinas) del tipo del ciclobutano aparecen
en menos de un picosegundo (1012 segundos), mientras que los
ta reacciones qumicas.
fotoproductos del tipo (6-4) (denominacin que procede de la
posicin de los tomos que reaccionan en la molcula), lo hacen
FUSIN DE BASES
En la actualidad, visualizar en tiempo real la aparicin de un en cuatro milisegundos, ya que en la reaccin interviene un profotoproducto en una doble hlice de ADN sigue constituyendo ducto intermedio.
Entre 1960 y 1990, se estudi la estructura de los fotoproun reto. La probabilidad de que el ADN reaccione es muy pequea. Sin embargo, se estn realizando progresos mediante el es- ductos derivados de esos estados excitados. La mayor parte de
tudio de una hebra sencilla formada solo por timinas, que pre- los experimentos se llevaron a cabo con fragmentos cortos de
senta una reactividad muy superior a la de una doble hlice. ADN, fciles de obtener en gran cantidad, que fueron expuesTambin hemos aprendido que el tiempo que transcurre entre tos a fuertes dosis de rayos UVB. Tambin se demostr que solo
El ADN excitado
y sus fotoproductos
%mDDm
A pesar de que los rayos UVA son absorbidos por el ADN en menor grado que los UVB, tambin pueden provocar daos en la
molcula, e incluso mutaciones. Hace unos treinta aos se pro-
Timina
$D`
Agua
2y`D`my%
7D`
3ymy%DyDm
3yDD`myDyUDmy%
puso una explicacin para ello, la fotosensibilizacin, que supone la intervencin de mecanismos indirectos.
En ese proceso los fotones no son absorbidos por el ADN,
sino por otros constituyentes celulares, como vitaminas o cofactores enzimticos. Al interaccionar con un fotn, la molcula
fotosensibilizadora pasa a un estado excitado; esta puede
reaccionar con molculas adyacentes y desencadenar procesos
de oxidacin, fenmeno conocido como estrs oxidativo. En las
reacciones de oxidacin intervienen derivados deletreos del
oxgeno. La molcula excitada suele transferir su energa al oxgeno molecular (O2) que, a su vez, adquiere un estado excitado
denominado oxgeno singlete. Este reacciona fcilmente con
compuestos ricos en electrones. Se ha observado que, en el ADN,
el oxgeno singlete afecta sobre todo a la guanina. Y en 2004,
demostramos que la reaccin del oxgeno singlete con el ADN
daba lugar a 8-oxo-7,8-dihidroguanina (8-xoGua).
Un segundo mecanismo de fotosensibilizacin se produce por
la accin de los radicales libres, en especial del radical hidroxilo, que posee la capacidad de oxidar las cuatro bases y rompe la
cadena de ADN al degradar los azcares. Una ltima va, menos
frecuente, consiste en la oxidacin directa del ADN, que tiene
lugar cuando la molcula fotosensibilizadora le arranca un electrn; una vez ms, ello afecta sobre todo a la guanina.
:[dk[le"bWijYd_YWiYhecWje]h|YWioX_egkc_YWif[h#
miten visualizar los daos del ADN en las clulas expuestas a
EFECTOS EN LA PIEL
Con 90.000 nuevos casos cada ao en Francia, los tumores de piel son los ms frecuentes. Representan una tercera parte de todos
los casos de cncer y el doble de los de
mama. Los rayos solares seran responsables de la mayora de los casos. Tal asocia`xlxDxDUxDx
los tumores se localizaban en las regiones
del cuerpo ms expuestas al sol. Por otro
lado, los datos epidemiolgicos demuestran
un aumento de la frecuencia de este cncer
con la irradiacin recibida por los individuos,
especialmente aquellos que trabajan al aire
libre. Esta tendencia resulta inquietante:
desde hace 30 aos se ha producido un
ascenso del nmero de casos de cncer de
piel en los pases industrializados. Ello se
debe al aumento de la exposicin al sol con
xx`xD
De hecho, tras estos datos se esconden
numerosas patologas. Los tumores cutneos surgen a partir de las clulas de la capa
superior de la piel, la epidermis, sobre las
que incide la mayora de la radiacin. Los
queratinocitos representan el 90 por ciento
de las clulas epidrmicas. Sintetizan la queDDjDxDUDxUxx
agua que protege e impermeabiliza la piel.
Tales clulas se ven alteradas en la mayor
parte de los tumores, como en los carcino-
D`Dy`yD
Melanoma
Menos frecuentes, los carcinomas espinocelulares (que se desarrollan en los queratinocitos de la capa espinosa, localizada
por debajo de la capa basal de la epidermis)
revisten mayor gravedad, ya que a veces originan metstasis. En los melanocitos, las
clulas epidrmicas que sintetizan la melanina y contribuyen al bronceado de la piel,
se origina un tipo de cncer ms infrecuente
pero muy grave: el melanoma. Estos tumores producen numerosas metstasis en el
organismo, incluso durante las primeras etapas de su desarrollo.
Adems, hoy en da no existe ningn tratamiento eficaz contra los melanomas y
la mortalidad causada por ellos es elevada.
Sin embargo, en junio de 2011, el equipo
de Corinne Bertolotto, del Instituto Nacional de la Salud y de la Investigacin Mdica (INSERM) de Niza, demostr por qu los
melanomas suelen ser tan resistentes a la
xDDxlx`xUx
medicamentos. Estas molculas atacan determinadas formas mutadas de las protenas
responsables del crecimiento incontrolado
de las clulas en los melanomas. Solo surtiran efecto en los pacientes que portan las
mutaciones pero, en la mitad de los casos,
dan lugar a una disminucin importante y
rpida del nmero de clulas tumorales.
T C N I CA S A NA L T I CA S
en todos los tipos celulares. Adems, al contrario de lo que sucede con los UVB, la piel protege poco contra la formacin de
dmeros asociada a los UVA, ya que la melanina absorbe menos
estos rayos.
El ADN de las clulas expuestas a rayos UVA presenta por
tanto una fotoqumica singular: la absorcin de esos fotones
por el cido nucleico, aunque dbil, genera numerosos fotoproductos. La distinta naturaleza de los daos causados por los
UVA y los UVB se debera as a la diferencia entre los estados
excitados iniciales del ADN.
LAS CREMAS SOLARES
Los resultados expuestos poseen una especial relevancia. Aungk[bW\ehcWY_dZ[Zc[heifehbeiKL7h[ikbj[c[dei[Y_[dte que la derivada de los UVB, la predominancia de los primeros en la luz solar que nos alcanza hace pensar que una fraccin
nada despreciable de los fotoproductos mutagnicos proviene
de esa regin del espectro. Los datos subrayan tambin las propiedades genotxicas de los UVA, que pueden originar mutaciones e incluso cncer.
El riesgo cancergeno de los UVA y su importante contribucin al envejecimiento cutneo han llevado a los legisladores a
imponer en las cremas solares que se comercializan una fotoproteccin contra esa regin del espectro solar. La comprensin
del poder cancergeno de los UVA ha dado lugar a otro cambio:
el Centro Internacional de Investigaciones sobre el Cncer ha
incluido en la lista de agentes cancergenos los equipos de bronY[WZeWhj_Y_WbYedKL7$;b?dij_jkjeDWY_edWbZ[b9|dY[h[d
<hWdY_Wh[jec[iWYbWi_YWY_dofkXb_Y[d(&'&kd_d\ehc[
sobre esa cuestin.
Los trabajos realizados en los ltimos treinta aos han arrojado una nueva luz sobre el papel de los daos del ADN en la
aparicin del cncer de piel. Los resultados han permitido comprender mejor la reaccin de las clulas ante los rayos ultravioleta y perfeccionar las estrategias de proteccin contra este agente mutagnico presente en la radiacin solar.
Sin embargo, an quedan abiertas numerosas cuestiones relacionadas con la formacin de tales lesiones. As, los fotoproductos funcionaran como sensores que desencadenaran el
bronceado y conferiran mayor proteccin a la piel (aunque todava no se sabe cmo). Su presencia tambin estara relacionada con la modulacin de las defensas inmunitarias y con la
aparicin de las quemaduras solares. Tras la primera descripcin de los dmeros de timina, hace ya medio siglo, los daos
causados en el ADN por las radiaciones ultravioleta todava meh[Y[dbWWj[dY_dZ[Y_[djYeiZ[jeZWibWiZ_iY_fb_dWi$
Pour la Science
PA R A S A B E R M S
3yyymDymmDDy`yD%myyymUy`yDD
D`Dym%yDyy J.-L. Ravanat et al. en Biological Chemistry, vol. 385,
pgs. 17-20, 2004.
`UDymymyDyymD%yyD
yym7<DmD S. Mouret et al. en Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, vol. 103, pgs. 13.765-13.770, 2006.
7<m`ym``UDymymy%iDmy``y`Dy`D
nism? S. Mouret et al. en Organic & Biomolecular Chemistry, vol. 8, pgs. 1706-1711, 2010.
DyDyD`yy`yyDmD``UDymyDm`ym
DU7<DmDU% A. Banyasz et al. en Journal of the American Chemical
Society, vol. 133, pgs. 5163-5165, 2011.