TIPEO LUNES 21 EN LA MAANA

E. coli: 4288 protenas, de regulacin, estructura, metabolismo, procesos del ADN y otros
de funcin desconocida. En la E coli es sencillo ya que es una bacteria sencilla ubicar una
de estas protenas.
Pero si se intenta purificar una protena por ejemplo un pedazo de hgado, de pncreas, de
corteza cerebral es ms complicado ya que cada protena se presenta en muy baja cantidad
y son relativamente inestables.
Hay una serie de mtodos para purificar una protena, los mtodos disponibles a usar son:
de estos mtodos hay que elegir muy bien cuales ocupar ya que debemos mantener sus
cualidades biolgicas, ya que si pierde su integridad de la cadena se pierde su secuencia.
Por eso se van a seguir pasos para lograr la purificacin de la enzima y mientras ms pasos
ocupen una enzima ms pura voy a conseguir.
Etapas: 4 pasos (no todos los esquemas van a tener 4 pasos)
Primero preparacin, extraccin y clarificacin: toma de muestra, como yo obtengo desde
la fuente de la protena y la logro poner en una solucin (purificacin de protenas
solubles), esta etapa tiene 2 o 3 pasos. Se obtiene el extracto crudo que es la protena que
busco junto al resto de las protenas del tejido o bacteria, ahora para separar lo soluble de lo
insoluble debemos usar la filtracin por tamao que separa las que son de un determinado
tamao de otras mas pequeas y luego recurrimos a filtraciones mas especificas que separa
las protenas de forma mas fina y selectiva.
A mayor numero de casos mayor pureza pero tambin va a pasar que voy a perder cantidad
de mi muestra ya que cada paso tiene un rendimiento lo que implica que voy a perder parte
de mi muestra con cada paso.
Es importante la velocidad con que yo ejecuto cada paso ya que debo hacerlo rapido ya que
la muestra se descompone, al perderse la integridad de la clula las proteasas se liberan y
empiezan a actuar de forma rpida
Capacidad, es cuanto se puede procesar en ese tiempo, es importante tener mayor cantidad
al inicio de este proceso de purificacin ya que se va disminuyendo la cantidad de muestra
y al final se queda con una menor cantidad de la inicial.
Recuperacin, es con cuanto de lo que yo inicio obtengo luego de los pasos, en algunos
pasos voy a perder parte de las molculas y lo que yo obtenga de ese paso es la
recuperacin
Resolucin, como con una pantalla una con mejor resolucin me va a mostrar mejor detalle
de lo que quiero ver, distinguir dos puntos que estn cercanos como dos puntos y no como
uno. En protenas es distinguir mi protena de otras protenas.

Estas 4 caractersticas van a tener diferente nivel de importancia dependiendo del paso que
se utilice.
Por ejemplo en la un proceso de 3 pasos, uno de captura, purificacin y purificacin fina.
-En la captura al inicio la capacidad y la velocidad son ms importantes ya que poseo todas
las proteasas.
-En la segunda etapa depende algo de la capacidad pero si depender de la resolucin ya
que tiene que haber algo que distinga mi protena de la otra
-Y en la ltima se necesitan tcnicas que distingan mi protena de la otra.