Microscopio compuesto

Objetivos de un microscopio moderno.

Un microscopio compuesto tiene ms de
una lente objetiva. Los microscopios compuestos sirven
especialmente para examinar objetos transparentes, o
cortados en lminas tan finas que se transparentan. Se
emplea para aumentar o ampliar las imgenes de objetos y
organismos no visibles a simple vista. El microscopio ptico
comn est conformado por tres sistemas:

El sistema mecnico est constituido por una palanca

que sirve para sostener, elevar y detener los
instrumentos a observar.

El sistema de iluminacin comprende un conjunto de

instrumentos, dispuestos de tal manera que producen las
ranuras de luz.

El sistema ptico comprende las partes del

microscopio que permiten un aumento de los objetos que
se pretenden observar mediante filtros llamados "de
antigel subsecuente".
ndice
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1 Parte mecnica del microscopio

2 Sistema ptico

3 Sistema de iluminacin

4 Trayectoria del rayo de luz a travs del microscopio

5 Campo del microscopio

6 Tipos de microscopios
6.1 El microscopio electrnico

6.1.1 Invencin del microscopio electrnico

6.1.2 Funcionamiento del microscopio
electrnico

6.1.3 Tipos de microscopios electrnicos

6.1.4 Microscopio electrnico de barrido

6.2 Microscopio quirrgico

7 Medicin a travs del microscopio

8 Mantenimiento del microscopio

9 Conclusiones

10 Vase tambin

Parte mecnica del microscopio[editar]

Esquema de un micoscopio ptico.

La parte mecnica del microscopio comprende el pie o la
base, el tubo, el revlver, el asa, la platina, el carro y el
tornillo micromtrico. Estos elementos sostienen la parte
ptica y de iluminacin; adems, permiten los
desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.

El pie y soporte: contiene la base sobre la que se

apoya el microscopio y tiene por lo general forma de Y o
bien es rectangular.

La columna o brazo: llamada tambin asa, es una

pieza en forma de C, unida a la base por su parte inferior
mediante unabisagra, permitiendo la inclinacin del tubo
para mejorar la captacin de luz cuando se utilizan
los espejos. Sostiene el tubo en su porcin superior y por
el extremo inferior se adapta al pie.

El can : tiene forma cilndrica. El can se

encuentra en la parte superior de la columna, enfoca el
objeto mediante un sistema de cremalleras, las cuales
permiten que el tubo se mueva mediante los tornillos.

El tornillo macromtrico o macroscpico: girando

este tornillo, asciende o desciende el tubo del
microscopio, deslizndose en sentido vertical gracias a
un mecanismo de cremallera. Estos movimientos largos
permiten el enfoque rpido de la preparacin.

El tornillo micromtrico o microscpico: mediante

el ajuste fino con movimiento casi imperceptible que
produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el
enfoque exacto y ntido de la preparacin. Lleva
acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001
mm, que se utiliza para precisar sus movimientos y
puede medir el espesor de los objetos.

La platina: es una pieza metlica plana en la que se

coloca el objeto que se va a observar. Presenta un
orificio, en el eje ptico del tubo, que permite el paso de
los rayos luminosos a la preparacin. La platina puede
ser fija, en cuyo caso permanece inmvil; en otros casos
puede ser giratoria; es decir, mediante tornillos laterales
puede centrarse o producir movimientos circulares.

Las pinzas: son dos piezas metlicas que sirven para

sujetar el objeto. Se encuentran en la platina.

El revlver: es una pieza giratoria provista de orificios

en los que se enroscan los objetivos. Al girar el revlver,
los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en
posicin de trabajo, lo que se nota por el ruido de un
pin que lo fija.

Sistema ptico[editar]
Es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes
mediante el conjunto de lentes que lo componen. Est
formado por el ocular y los objetivos. El objetivo proyecta
una imagen de la muestra que el ocular luego ampla.

El ocular: se encuentra situado en la parte superior

del tubo. Su nombre se debe a la cercana de la pieza
con el ojo del observador. Tiene como funcin aumentar
la imagen formada por el objetivo. Los oculares son

intercambiables y sus poderes de aumento van desde 5X

hasta 20X. Existen oculares especiales de potencias
mayores a 20X y otros que poseen
una escala micromtrica; estos ltimos tienen la finalidad
de medir el tamao del objeto observado.

Los objetivos: se disponen en una pieza giratoria

denominada revlver y producen el aumento de las
imgenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se
hallan cerca de la preparacin que se examina. Los
objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos:
objetivos secos y objetivos de inmersin.

Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de

colocar sustancia alguna entre ellos y la preparacin.
En la cara externa llevan una serie de ndices que
indican el aumento que producen, la abertura
numrica y otros datos. As, por ejemplo, si un
objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17,
significa que el objetivo es planacromtico, su
aumento 40 y su apertura numrica 0,65, calculada
para una longitud de tubo de 160 mm. El nmero de
objetivos vara con el tipo de microscopio y el uso a
que se destina. Los aumentos de los objetivos secos
ms frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X
y 60X.

El objetivo de inmersin est compuesto por

un complicado sistema de lentes. Para observar a
travs de este objetivo es necesario colocar una gota
de aceite de cedro entre el objetivo y la preparacin,
de manera que la lente frontal entre en contacto con
el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son
de 100X y se distingue por uno o dos crculos o anillos
de color negro que rodea su extremo inferior.

Sistema de iluminacin[editar]
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o
artificial de tal manera que ilumine la preparacin u objeto
que se va a observar en el microscopio de la manera
adecuada. Comprende los siguientes elementos:

Fuente de iluminacin: se trata clsicamente de una

lmpara incandescente de tungsteno sobrevoltada; en
versiones ms modernas con leds. Por delante de ella se
sita un condensador (una lente convergente) e,
idealmente, un diafragma de campo, que permite
controlar el dimetro de la parte de la preparacin que
queda iluminada, para evitar que exceda el campo de
observacin produciendo luces parsitas.

El espejo: necesario si la fuente de iluminacin no

est construida dentro del microscopio y ya alineada con
el sistema ptico, como suele ocurrir en los microscopios
modernos. Suele tener dos caras: una cncava y otra
plana. Goza de movimientos en todas las direcciones. La
cara cncava se emplea de preferencia con iluminacin
artificial, y la plana, para natural (luz solar). Los modelos
ms modernos no poseen espejos sino una lmpara que
cumple la misma funcin que el espejo.

Condensador: est formado por un sistema de

lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos luminosos
sobre el plano de la preparacin, formando un cono de
luz con el mismo ngulo que el del campo del objetivo. El
condensador se sita debajo de la platina y su lente
superior es generalmente planoconvexa, quedando la
cara superior plana en contacto con la preparacin
cuando se usan objetivos de gran abertura (los de mayor
ampliacin); existen condensadores de inmersin, que
piden que se llene con aceite el espacio entre esa lente
superior y la preparacin. La abertura numrica mxima
del condensador debe ser al menos igual que la del
objetivo empleado, o no se lograr aprovechar todo su
poder separador. El condensador puede deslizarse
verticalmente sobre un sistema de cremallera mediante
un tornillo, bajndose para su uso con objetivos de poca
potencia.

Diafragma: el condensador est provisto de un

diafragma-iris, que regula su abertura para ajustarla a la
del objetivo. Puede emplearse, de manera irregular, para
aumentar el contraste, lo que se hace cerrndolo ms de

lo que conviene si se quiere aprovechar la resolucin del

sistema ptico.
Trayectoria del rayo de luz a travs del
microscopio[editar]
El haz luminoso procedente de la lmpara pasa
directamente a travs del diafragma al condensador.
Gracias al sistema de lentes que posee el condensador, la
luz es concentrada sobre la preparacin a observar. El haz
de luz penetra en el objetivo y sigue por el tubo hasta llegar
al ocular, donde es captado por el ojo del observador.
Propiedades del microscopio

Poder separador. Tambin llamado a veces poder de

resolucin, es una cualidad del microscopio, y se define
como la distancia mnima entre dos puntos prximos que
pueden verse separados. El ojo normal no puede ver
separados dos puntos cuando su distancia es menor a
una dcima de milmetro. En el microscopio viene
limitado por la longitud de onda de la radiacin
empleada; en el microscopio ptico, el poder separador
mximo conseguido es de 0,2 dcimas de micrmetro (la
mitad de la longitud de onda de la luz azul), y en el
microscopio electrnico, el poder separador llega hasta
10 .

Poder de definicin. Se refiere a la nitidez de las

imgenes obtenidas, sobre todo respecto a sus
contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la
correccin de las aberraciones de las lentes utilizadas.

Ampliacin del microscopio. En trminos generales se

define como la relacin entre el dimetro aparente de la
imagen y el dimetro o longitud del objeto. Esto quiere
decir que si el microscopio aumenta 100 dimetros un
objeto, la imagen que estamos viendo es 100 veces
mayor linealmente que el tamao real del objeto (la
superficie de la imagen ser 1002, es decir 10.000 veces
mayor). Para calcular el aumento que est
proporcionando un microscopio, basta multiplicar los

aumentos respectivos debidos al objetivo y el ocular

empleados. Por ejemplo, si estamos utilizando un
objetivo de 45X y un ocular de 10X, la ampliacin con
que estamos viendo la muestra ser: 45X x 10X = 450X,
lo cual quiere decir que la imagen del objeto est
ampliada 450 veces, tambin expresado como 450
dimetros.
Campo del microscopio[editar]

Paramecium aurelia. Microscopio ptico. El mejor conocido

de los ciliados. Las burbujas que se ven son vacuolas. Todo
el cuerpo est cubierto de cilios, que se ven borrosos
debido a sus rpidos movimientos.
Se denomina campo del microscopio al crculo visible que
se observa a travs del microscopio. Tambin podemos
definirlo como la porcin del plano visible observado a
travs del microscopio.
Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere
decir que el campo es inversamente proporcional al
aumento del microscopio. Para medir el dimetro del campo
del microscopio con cualquiera de los objetivos se utiliza el
micrmetro, al que se har referencia en el siguiente punto.
Tipos de microscopios[editar]
Existen diversas clases de microscopios, segn la
naturaleza de los sistemas de luz, y otros accesorios
utilizados para obtener las imgenes.

El microscopio compuesto u ptico utiliza lentes para

ampliar las imgenes de los objetos observados. El
aumento obtenido con estos microscopios es reducido,
debido a la longitud de onda de la luz visible que impone
limitaciones. El microscopio ptico puede ser monocular, y
consta de un solo tubo. La observacin en estos casos se
hace con un solo ojo. Es binocular cuando posee dos tubos.
La observacin se hace con los dos ojos. Esto presenta
ventajas tales como mejor percepcin de la imagen, ms
cmoda la observacin y se perciben con mayor nitidez los
detalles.
El Microscopio invertido el sistema ptico de este tipo de
microscopio est en posicin al revs comparado con un
microscopio ptico convencional. La fuente de luz y el
condensador estn dispuestos sobre la plataforma
apuntando hacia abajo; y los objetivos y la torrecilla estn
debajo de la plataforma apuntando hacia arriba. Las nicas
partes que estn en una disposicin normal son el tubo
binocular o trinocular, as mismo la muestra que es
colocada sobre la plataforma o platina mecnica. Presenta
la ventaja de poder observar cultivos enteros o grandes
muestras bajo estados ms naturales y con menores
condiciones de estres.
El Microscopio estereoscpico: es un tipo de microscopio
hace posible la visin tridimensional de los objetos. Consta
de dos tubos oculares y dos objetivos pares para cada
aumento. Este microscopio ofrece ventajas para
observaciones que requieren pequeos aumentos. El
ptimo de visin estereoscpica se encuentra entre 2 y 40X
o aumento total del microscopio.
Microscopio de campo oscuro. Este microscopio est
provisto de un condensador paraboloide, que hace que los
rayos luminosos no penetren directamente en el objetivo,
sino que iluminan oblicuamente la preparacin. Los objetos
aparecen como puntos luminosos sobre un fondo oscuro.

Microscopio de contraste de fases. Se basa en las

modificaciones de la trayectoria de los rayos de luz, los
cuales producen contrastes notables en la preparacin.
Microscopio de fluorescencia. La fluorescencia es la
propiedad que tienen algunas sustancias de emitir luz
propia cuando inciden sobre ellas radiaciones energticas.
El tratamiento del material biolgico con flurocromos facilita
la observacin al microscopio.
El microscopio electrnico[editar]
Artculo principal: Microscopio electrnico
Invencin del microscopio electrnico[editar]
En 1932, Bruche y Johnsson construyen el primer
microscopio electrnico a base de lentes electrostticas.
Ese mismo ao Knoll y Ruska dan a conocer los primeros
resultados obtenidos con un microscopio electrnico
Siemens, construido con lentes magnticas. As nace el
microscopio electrnico. Para 1936 ya se ha perfeccionado
y se fabrican microscopios electrnicos que superan en
resolucin al microscopio ptico.
Estos logros no slo representan un avance en el campo de
la electrnica, sino tambin en el campo de la Biologa,
pues son muchas las estructuras biolgicas que se han
descubierto y que revelan detalles inusitados, al
observarlas al microscopio electrnico.
Funcionamiento del microscopio electrnico[editar]
El microscopio electrnico utiliza un flujo de electrones en
lugar de luz. Consta fundamentalmente de un tubo de rayos
catdicos, en el cual debe mantenerse el vacio. El ctodo
est constituido por un filamento de tungsteno, que al
calentarse elctricamente emite los electrones, los cuales
son atrados hacia el nodo por una diferencia de potencial
de 50.000 a 100.000 voltios. La lente del condensador
enfoca este haz y lo dirige hacia el objeto que se observa,
cuya preparacin exige tcnicas especiales. Los electrones

chocan contra la preparacin, sobre la cual se desvan de

manera desigual.
Se acostumbra a utilizar el trmino microoscopicos para las
fotografas tomadas a travs del microscopio ptico y
micrografa o electromicrografa para las que se toman en
el microscopio electrnico.
Los aumentos mximos conseguidos en el microscopio
electrnico son del orden de 2.000.000X mediante el
acoplamiento al microscopio electrnico de un amplificador
de imagen y una cmara de televisin. En resumen, el
microscopio electrnico consta esencialmente de:

Un filamento de tungsteno (ctodo) que emite

electrones.

Condensador o lente electromagntica, que concentra

el haz de electrones.

Objetivo o lente electromagntica, que ampla el cono

de proyeccin del haz de luz.

Ocular o lente electromagntica, que aumenta la

imagen.

Proyector o lente proyectora, que ampla la imagen.

Pantalla fluorescente, que recoge la imagen para

hacerla visible al ojo humano.
Tipos de microscopios electrnicos[editar]
Existen varios tipos de microscopios electrnicos, que cada
da se perfeccionan ms.
El microscopio electrnico de transmisin que utiliza un haz
de electrones acelerados por un alto voltaje (cien mil
voltios). Este haz ilumina una seccin muy fina de la
muestra, sean tejidos, clulas u otro material.
El microscopio electrnico de barrido se utiliza para el
estudio de la morfologa y la topografa de los elementos.

Estos instrumentos utilizan voltajes cercanos a los 20.000

voltios. Las lentes magnticas utilizan un haz muy fino de
electrones para penetrar repetidamente la muestra, y se
produce una imagen ampliada de la superficie observada
en la pantalla de un monitor. El microscopio electrnico
mixto tiene propiedades comunes con el de transmisin y
con el de barrido y resulta muy til para ciertas
investigaciones. Hay otros microscopios analticos que
detectan seales caractersticas de los elementos que
constituyen la muestra.
Con estos poderosos instrumentos, que utilizan el flujo de
electrones y las radiaciones electromagnticas as como la
aplicacin de tcnicas histoqumicas y bioqumicas, adems
del empleo de marcadores radiactivos, se han logrado
grandes avances en la biologa celular.
Microscopio electrnico de barrido[editar]
Artculo principal: Microscopio electrnico de barrido
El microscopio electrnico de barrido est situado a la
izquierda del operador, y las imgenes computarizadas de
la muestra se ven en la pantalla de la derecha. Aunque un
microscopio electrnico de transmisin puede resolver
objetos ms pequeos que uno de barrido, este ltimo
genera imgenes ms tiles para conocer la estructura
tridimensional de objetos minsculos.
Microscopio quirrgico[editar]
El empleo de microscopios quirrgicos ha permitido que los
cirujanos lleven a cabo intervenciones que parecan
imposibles, como la reimplantacin de un miembro y la
ciruga de los ojos y odos. Estos microscopios son en
especial tiles cuando es necesario realinear para unir o
reparar fibras nerviosas y vasos sanguneos individuales. Se
usa para operaciones de dificulta