Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
CENTRO DE TECNOLOGIA
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM CINCIA
E TECNOLOGIA DE ALIMENTOS
AVALIAO FSICO-QUMICA
DO LEO DE PEIXE
JOO PESSOA PB
2007
AVALIAO FSICO-QUMICA
DO LEO DE PEIXE
Dissertao apresentada ao Programa de PsGraduao em Cincia e Tecnologia de Alimentos
da Universidade Federal da Paraba para obteno
de ttulo de Mestre em Cincia e Tecnologia de
Alimentos. rea de pesquisa qumica e
bioqumica de alimentos.
Orientador:
Prof. Dr. Antnio Gouveia de Souza
JOO PESSOA PB
2007
A663a
Arajo, Kassandra de Lourdes Gadelha Veloso.
Avaliao fsico-qumica do leo de peixe. / Kassandra de Lourdes
Gadelha Veloso Arajo. Joo Pessoa, 2007.
79 p.
Orientador: Antonio Gouveia de Souza.
Dissertao (mestrado) - UFPB/CT
1.leos comestveis origem animal. 2. leo de peixe
avaliao oxidativa. 3. leo de peixe anlise trmica.
UFPB/BC.
CDU: 664.324.3(043)
AVALIAO FSICO-QUMICA
DO LEO DE PEIXE
KASSANDRA DE LOURDES GADELHA VELOSO ARAJO
BANCA EXAMINADORA
__________________________________________
Prof. Dr. Antnio Gouveia de Souza/UFPB
Orientador
__________________________________________
Profa. Dra. Marta Maria da Conceio/UFCG
Membro externo
________________________________________________
Profa. Dra. Marta Clia Dantas Silva/UFCG/CNPq/FAPESQ
Membro externo
DEDICATRIA
A meus avs Maria de Lourdes (in memorian) e Manoel Dionzio (in memorian)
exemplos de vida, e responsveis pela minha formao.
A Vernica, minha me, amiga, confidente, por est sempre ao meu lado me apoiando.
AGRADECIMENTOS
A Deus e Nossa Senhora da Penha, por me concederem mais esta vitria e me guiarem
sempre.
Ao Professor Dr. Antnio Gouveia de Souza, meu orientador, por quem tenho uma grande
admirao.
A Professora Dra. Marta Maria da Conceio, pela colaborao imprescindvel, pela presteza
e vontade de ajudar.
A Professora Dra. Marta Clia Dantas Silva, pelo auxlio valioso, ateno e principalmente
amizade.
Aos amigos que fazem a famlia LACOM, principalmente a Raul, Roberlcia, Manoel,
Anderson, Vasconcelos, Geuza, Gabriel, Lcia, Sara, Lcia, pela companhia, amizade, ajuda,
conhecimento.
RESUMO
ABSTRACT
Researches have been intensified focusing in the analysis of the nutritional composition of sea
products, as they are rich in polyunsaturated n-3 fatty acids which are good for the human
health. In Brazil, despite of the vast seashore, the production of fish oil is normally aimed to
animal feeding, the fabrication of paints and varnishes, or its usage as lubricants and
impermeable substances. This way, there is no control of the effective quality in the
production of national fish oil which leads to a raw material of low quality. Facing this
context, this study evaluated the quality of national fish oil through conventional and
instrumental physical-chemical analysis, as well as the evaluation of the thermal stability of
the oxidative process, using thermal techniques, such as: Termogravimetry (TG) and
Pressurized Differential Exploratory Calorimetry (PDSC). The obtained results showed that
the physical-chemical characteristics of crude fish oil attested a raw material of low quality.
The process of refinement of the oil was effective in the reduction of free fatty acids, however
inefficient in the reduction of peroxides. The analytical, spectroscopical and thermal
techniques attested that the fish oil under thermal stress deteriorated fast. The attendance of
the thermal effect by UV-Vis demonstrated to be a good recourse, because it indicates the
formation of conjugated dienes and trienes, which are oxidation products and can be
monitored. The PDSC curve of refined fish oil presented an Oxidative Induction Time (OIT)
of 36.42 minutes. The thermal-analytical techniques and the UV-Vis spectroscopy are
essential tools in the control of the quality of oils, being fast, sensitive and precise.
LISTA DE QUADROS
LISTA DE FIGURAS
LISTA DE TABELAS
LISTA DE ABREVIATURAS
TG termogravimetria
PDSC Calorimetria Exploratria Diferencial Pressurizada
CG Cromatografia
MS espectrometria de massas
Uv-vis Ultravioleta-visvel
FAO Food and Agricultures Organization
AOCS - American Oil Chemists Society
EPA Eicosapentaenico
DHA Docosapentaenico
n-3 mega-3
w-3 mega -3
n-6 mega-6
w-6 mega -6
n-9 mega-9
w-9 mega -9
PG Prostaglandina
LT Leucotrienos
TX Tromboxanos
VLDL Lipoprotena de Muita Baixa Densidade
HDL Lipoprotena de Alta Densidade
SUMRIO
1 INTRODUO....................................................................................................................15
2 OBJETIVOS.........................................................................................................................17
2.1 OBJETIVO GERAL...........................................................................................................17
2.2 OBJETIVOS ESPECFICOS..............................................................................................17
3 REVISO DA LITERATURA...........................................................................................18
3.1 LEOS EGORDURAS......................................................................................................18
3.2 LEO DE PEIXE...............................................................................................................22
3.3 OXIDAO DE LEOS...................................................................................................26
3.4 MTODOS DE ANLISE.................................................................................................29
3.4.1 ndice de iodo..................................................................................................................29
3.4.2 cidos graxos livres.......................................................................................................30
3.4.3 ndice de perxido..........................................................................................................31
3.4.4 ndice de anisidina.........................................................................................................31
3.4.5 Espectroscopia de varredura na faixa do espectro Uv-visvel...................................32
3.5 ANLISE TRMICA........................................................................................................33
3.5.1 Termogravimetria.............................................................................................................35
3.5.2 Termogravimetria Derivada.............................................................................................37
3.5.3 Anlise Trmica Diferencial............................................................................................37
3.5.4 Calorimetria exploratria Diferencial..............................................................................38
4 MATERIAL E MTODOS.................................................................................................40
4.1 LEO DE PEIXE...............................................................................................................40
4.2 REFINO DO LEO DE PEIXE.........................................................................................40
4.2.1 Degomagem.....................................................................................................................41
4.2.2 Neutralizao..................................................................................................................41
4.2.3 Lavagem..........................................................................................................................41
4.2.4 Secagem...........................................................................................................................41
4.2.5 Branqueamento..............................................................................................................41
4.2.6 Filtrao..........................................................................................................................41
4.3 TRATAMENTO CIDO DA ARGILA NATURAL........................................................42
4.4 DEGRADAO DO LEO DE PEIXE............................................................................42
4.5 ANLISES FSICO-QUMICAS.......................................................................................43
15
1 INTRODUO
16
17
2 OBJETIVOS
Realizar a avaliao fsico-qumica do leo de peixe, utilizando mtodos fsicoqumicos, espectroscpico, cromatogrfico e a anlise trmica atravs das tcnicas trmicas
termogravimetria (TG) e calorimetria exploratria diferencial (PDSC).
neutralizao e clarificao;
graxos livres, ndice de perxido, ndice de anisidina e viscosidade do leo de peixe aps
refino e degradao trmica;
Determinar a composio dos cidos graxos dos leos de peixe bruto, refinado
18
3 REVISO DE LITERATURA
19
leo de algodo
leo de Amendoim
leo de uva
leo de girassol
leo de groselha
Vegetais
Legumes
leo de soja
leo de noz
Linhaa
Vegetais
Legumes
Sardinha
Salmo
Atum
Cavala
Peixes brancos
20
Os efeitos benficos dos cidos graxos polinsaturados, na sade humana podem ser
obtidos atravs de uma alimentao equilibrada, que proporcione uma relao adequada de
cidos graxos polinsaturados n-6 e n-3. Segundo a FAO (1994) e o Institute of Medicine
(2002) a relao entre n-3 e n-6 de 5:1 a 10:1 considerada satisfatria.
Segundo uma pesquisa realizada pela FAO realizado no ano 1994 estima-se que as
dietas de certas comunidades ocidentais incluam propores mdias de n-6 e n -3, em torno
de 20:1 a 25:1, bastante diferentes do consumo de nossos antepassados e das recomendaes
atuais. Frente a isso, em vista da evoluo industrial, a emergncia por alimentos processados
e a hidrogenao dos leos vegetais reduziram ainda mais a concentrao de cidos n-3.
Os cidos graxos polinsaturados essenciais desempenham um importante papel no
organismo humano, participam do metabolismo e transporte de gorduras, da manuteno da
funo e integridade das membranas celulares, modulao dos receptores de hormnios e
funo imune, alm de serem precursores dos eicosanides (prostaglandinas, tromboxanos e
leucotrienos), um grupo de componentes semelhantes ao hormnio, que participam da
regulao da presso sangunea, freqncia cardaca, dilatao vascular, coagulao
sangunea, liplise, respostas imunolgicas e sistema nervoso central (MAHAN, 1994;
FRANCO, 1999).
Os cidos linolico e alfa-linolnico sofrem processos de dessaturao e alongamento
para formar os demais cidos graxos das famlias n-6 e n-3. So metabolizados pelos mesmos
sistemas de enzimas, estando sujeitos inibio do competidor. Os sistemas enzimticos tm
preferncia pelos cidos graxos n-3 e no existe nenhuma interconverso entre eles.
As sries de cidos graxos essenciais n-6 e n-3 competem entre si pela mesma enzima
para dessaturao a delta-6-dessaturase, assim como, seus principais derivados os cidos
araquidnico e eicosapentaenico (EPA) tambm apresentam concorrncia por um nico stio
para dessaturao, realizada pela enzima delta-5-dessaturase. Ambas as enzimas so chaves
metablicas clssicas e comuns para as duas vias metablicas e apresentam maior afinidade
pelos substratos mais altamente insaturados. Logo, devido essa natureza competitiva, cada
cido graxo pode interferir no metabolismo do outro, apresentando implicaes nutricionais
(WAITZBERG & BORGES, 2002).
O cido linolico (28:2 n-6) forma o gama-linolnico (18:3 n-6) que convertido em
cido araquidnico (20:4 n-6). Em outra via o cido alfa-linolnico (18:3 n-3) convertido, de
forma lenta em cido eicosapentaenico (EPA) e docosahexaenico (DHA), como mostrado
na Figura 3.1.
21
CIDOS GRAXOS
MEGA-3
CIDOS GRAXOS
MEGA-6
-Linolnico
(18:3n-3)
cido Linolico
(18:2n-6)
6-dessaturase
-Linolnico
(18:3n-6)
Estaridnico
(18:4n-3)
Alongase
Docosatetraenico
(20:4n-3)
Dihomo--linolnico
(18:3n-6)
5-dessaturase
Eicosapentaenoico
(20:5n-3)
Araquidnico
(20:4n-6)
Alongase
Docosapentaenoico
(22:5n-3)
Adrnico
(22:4n-6)
4-dessaturase
Docosahexaenico
(22:6n-3)
Docosapentaenoico
(22:5n-6)
Figura 3.1 Processos metablicos dos cidos graxos mega-3 e mega-6 (Fonte: Carvalho
et al, 2003).
22
23
Alimento
Cavala
Arenque
Salmo
Atum
Truta
Camaro
Lagosta
Bacalhau
Linguado
1.8 - 5.1
1.2 - 3.1
1.0 - 3.1
1.0 - 1.4
0.5 - 1.6
0.5 -1.6
0.2- 0.5
0.3 - 0.4
0.2 - 0.3
24
25
PGE2
PGE3
PGH2
PGH3
cicloxigenase
CIDO ARAQUIDNICO
20:4 MEGA-6
CIDO EICOSAPENTAENICO
(EPA) 20:5 MEGA-3
5-lipoxigenase
5-hidroxiperoxieicosatetraenico
LTA4
5-hidroxiperoxieicosapentaenico
LTA5
Figura 3.2 Sntese de eicosanides pelo cido araquidnico e pelo cido eicosapentaenico
(Fonte: Ward, 1995).
26
27
nutricional, funcionalidade e toxidez (ARAJO, 1999). Tais mudanas podem ter sua origem
durante a produo, processamento e armazenamento do leo, afetando sua aceitao pelo
consumidor, com conseqente prejuzo sua sade devido aos efeitos txicos causados pela
ingesto contnua e prolongada de produtos oxidados (BOBBIO & BOBBIO, 1992).
A estabilidade oxidativa depende do grau de insaturao dos cidos graxos presentes,
da leos que contenham altas propores de cidos graxos polinsaturados apresentarem
problemas de conservao, como o caso dos leos de peixes.
Os leos ricos em cidos graxos polinsaturados tm facilidade de sofrer deteriorao
oxidativa e formam facilmente sabores e odores desagradveis. A oxidao causada a partir
da reao do oxignio atmosfrico com os cidos graxos insaturados dos leos ou gorduras,
sendo acelerada pela presena de ons metlicos, luz, temperatura, radiao ionizante e outros
agentes oxidantes. A inibio da oxidao de extrema importncia no processamento de
leos marinhos (SHAHIDI, 1998).
A oxidao dos leos acontece atravs da reao em cadeia de radicais livres em trs
etapas: iniciao, propagao e terminao. Sendo distinguveis pelos produtos formados e
por suas caractersticas organolpticas. O radical livre (R) uma espcie qumica que
apresenta um nmero mpar de eltrons, sendo, portanto, altamente reativo e instvel (Figura
3.3).
Iniciao:
R1H R1 + H
Propagao:
R1 + O2 R1OO
R1OO + R2H R2 + R1OOH
Terminao:
R1 + R2 R1-R2
R2 + R1OO R1OOR2
R1OO + R2OO R1OOR2 + O2
Figura 3.3 Esquema geral da autoxidao de cidos graxos poliinsaturados (Fonte: Melo e
Guerra, 2002).
Na fase inicial ou de induo formam-se os radicais livres, no havendo alteraes no
odor ou sabor do leo. Ocorre um baixo consumo de oxignio e baixa formao de perxido.
A formao do radical livre (R) se d pela supresso de um tomo de hidrognio do carbono
-metileno adjacente dupla ligao allico do cido graxo insaturado. A formao dos
primeiros radicais livres pode ser explicada pela ao da luz sobre o grupo allico, pela
28
presena de ctions de metais com Fe, Cu, Cr e pelo ataque do oxignio singleto (1O2)
diretamente a dupla ligao (BOBBIO & BOBBIO, 2001; PACHECO, 2005).
Na fase de propagao j possvel detectar a presena de odor e sabor de rano
caracterstico, que tende a aumentar rapidamente. H uma elevao no consumo de oxignio e
na quantidade de perxidos e de seus produtos de decomposio, esta fase tida como a
principal etapa do processo oxidativo (OZAWA & GONALVES, 2006).
Aps a formao suficiente de radicais livres, a reao em cadeia propagada pela
remoo de tomos de hidrognio localizados na posio dupla ligao e adio de
oxignio tripleto (3O2) nestas posies, levando a formao do radical peroxil (ROO), e este
novamente remove o hidrognio do carbono -metileno do cido graxo insaturado,
produzindo o hidroperxido (ROOH) e radicais (R). Em seguida os novos radicais livres
formados reagem com o oxignio e a seqncia de reaes repete-se. A reao do oxignio
com os radicais livres extremamente rpida, portanto, a vida til dos radicais livres muito
pequena e difcil de ser detectada. Os hidroperxidos formados so instveis decompondo-se
em aldedos, lcoois, cidos responsveis pelo odor caracterstico dos produtos ranosos
(SHAHIDI, 1998; COULTATE, 2004).
A fase de terminao caracteriza-se pela presena de cheiros e sabores de rano forte,
alteraes de cor, viscosidade e da composio do lipdeo, alm de baixo consumo de
oxignio e baixa concentrao de perxido. A quantidade de compostos qumicos altamente
reativos aumenta constantemente at que se inicia a interao entre as vrias espcies de
radicais livres, formando produtos estveis, que so espcies no radicais (RR, ROOR)
(MORETTO & FETT, 1998; BOBBIO & BOBBIO, 2001).
A rancidez hidroltica tambm um fenmeno oxidativo importante que ocorre em
leos e gorduras, tambm conhecida como rancidez lipoltica ou liplise. Esta resulta da
ao de determinadas enzimas, do uso de calor ou da ao de agentes qumicos, como cidos
e bases, sobre o enlace ster dos lipdios. Neste processo geralmente so liberados os cidos
graxos saturados de baixo peso molecular, os quais tm volatilidade suficiente para serem
perceptveis pelo seu cheiro, mesmo em pequenas quantidades quando livres (ARAJO,
1999).
A estabilidade oxidativa de um leo ou gordura definida como a resistncia da
amostra oxidao. Ela expressa pelo perodo de induo tempo entre o incio da medio
e o momento em que ocorre um aumento brusco na formao de produtos da oxidao.
Existem vrios mtodos para determinar a resistncia de um leo/gordura oxidao.
A determinao da estabilidade oxidativa de leos e gorduras deve ser feita de acordo com a
29
30
do grau de insaturao da amostra. Quanto maior for o ndice, maior ser a insaturao da
amostra. Mesmo este mtodo tendo algumas desvantagens, deve ser considerado como um
mtodo emprico cujo resultado final d uma idia aproximada da realidade. Ao se utilizar
iodo (halognio) para reagir especificamente com as ligaes duplas, esbarra-se em algumas
dificuldades: uma que o iodo sempre vai sofrer alguma interferncia da luz, reduzindo sua
participao na reao de halogenao. Outra que a adio devido a ligaes duplas
isoladas, ou conjugadas podem resultar em algumas ligaes duplas intactas sem a adio do
iodo resultando em valores menores do que o normal (JOSEPH-NATHAN, 1982).
O mtodo convencional usado para determinar o grau de insaturao de leos e
gorduras o ndice de iodo. Molculas contendo ligaes duplas carbono-carbono
(insaturadas) reagem com iodo, de modo que, quanto maior o nmero de insaturaes maior
o ndice de iodo e maior a probabilidade da ocorrncia de processos oxidativos na molcula
do cido graxo insaturado devido aos hidrognios allicos (hidrognios adjacentes ao carbono
da ligao dupla). A reao de adio do iodo s ligaes duplas carbono-carbono lenta (3060 minutos), devendo ser conduzida sem aquecimento e na ausncia de luz, para prevenir ou
minimizar as reaes indesejveis de substituio allica que ocorrem na presena de luz e
aquecimento - e assim, elevam o consumo de iodo no processo, conduzindo a resultados
errneos. O ndice de iodo no uma medida quantitativa, um nmero emprico que til
na definio do grau de insaturao, porm sujeito a erros. Nos mtodos de determinao do
ndice de iodo a soluo do iodo liberado pela adio de KI e amido, j titulada com soluo
de tiossulfato de sdio, deixada em repouso, freqentemente reverte a colorao anterior.
Estas dificuldades limitam a aplicao destas tcnicas.(MORETO & FETT, 1998; REDA,
2004).
31
acelerada por aquecimento e pela luz, e a rancidez quase sempre acompanhada pela
formao de cido graxo livre (MORETTO& FETT, 1998).
32
33
destes
mtodos
nos
mais
variados
setores
cientficos
tecnolgicos
(WENDLANDT, 1964).
Nos ltimos anos, o desenvolvimento dos mtodos termoanalticos ganhou grande
impulso, muito embora, os fundamentos tericos necessrios j se encontrassem solidamente
estabelecidos desde fins do sculo XIX. A instrumentao termoanaltica atingiu um
elevadssimo grau de satisfao e popularizou-se em funo de uma aplicao prtica
constante (WENDLANDT, 1986).
Com a criao da Confederao Internacional de Anlise Trmica e Calorimetria
(ICTAC) e, tambm, o desenvolvimento dos equipamentos comerciais, respaldaram a Anlise
Trmica como um campo extremamente ativo, podendo ser aplicado em inmeras direes
(CONCEIO, 2004; ALBUQUERQUE,2006).
34
Para que uma tcnica trmica seja considerada termoanaltica necessrio que
satisfaa trs critrios (WENDLANDT, 1986): uma propriedade fsica deve ser medida; a
medida deve ser expressa como uma funo da temperatura; a medida deve ser feita sob um
programa de temperatura controlada.
A aplicabilidade da anlise trmica ocorre em diversas reas: alimentcia, catlise,
cermica, engenharia civil, farmacutica, inorgnica, petroqumica, polmeros, vidros e
outras. Apresenta como vantagens o uso de pequenas quantidades de amostra para os ensaios,
variedade de resultados em um nico grfico e no requer preparo prvio da amostra para o
ensaio a ser realizado (MOTH, 2002).
Quadro 3.3 Classificao das Tcnicas Termoanalticas.
Propriedade fsica
Tcnica(s) derivada(s)
Termogravimetria
Massa
Determinao isobrica de variao de massa
Deteco de gs desprendido
Anlise de gs desprendido
Anlise trmica por emanao
Anlise por produo trmica de partculas
Determinao da curva de aquecimento
Temperatura
Anlise trmica diferencial
Calorimetria exploratria diferencial
Entalpia
Termodilatometria
Dimenses
Medio termomecnica
Caractersticas mecnicas
Medio termomecnica dinmica
Termossonimetria
Caractersticas acsticas
Termoacustimetria
Termoptometria
Caractersticas pticas
Termoeletrometria
Caractersticas eltricas
termomagnetometria
Caractersticas magnticas
Fonte: Ionashiro & Giolito, 1980.
Abrev.
TG
EGD
EGD
DTA
DSC
35
36
amostra pode ser controlada, possibilitando trabalhar com atmosfera esttica ou dinmica
presso ambiente, sob presso ou a vcuo. Os gases utilizados podem ser inertes (nitrognio),
oxidantes (oxignio) ou corrosivos (BRADLEY, et al., 1971; WENDLANT, 1972).
Nos estudos termogravimtricos, de acordo com Shugar (1990) as principais
aplicaes so:
a) Decomposio e estabilidade trmica das substncias orgnicas e inorgnicas e
dos mais variados materiais, tais como: minerais, carvo, madeira, petrleo, polmeros,
alimentos, frmacos e outros;
b) Corroso de metais em atmosferas constitudas por diferentes gases e em faixas
muito amplas de temperatura;
c) Velocidade de destilao e evaporao de lquidos e de sublimao de slidos;
d) Desidratao, higroscopicidade, absoro, adsoro, dessoro, determinao do
teor de umidade, frao voltil e teor de cinzas de vrios materiais;
e) Cintica das reaes, inclusive de reaes no estado slido e tambm descoberta
de novos compostos qumicos;
f) Determinao da pureza e da estabilidade trmica de reagentes analticos,
inclusive padres primrios e secundrios;
g) Estudo sistemtico das propriedades trmicas dos precipitados, de acordo com os
processos de precipitao utilizados;
h) Desenvolvimento de processos analticos gravimtricos;
i) Curva de ignio dos meios de filtrao e da convenincia de se secar ou calcinar
um precipitado;
j) Determinao de um nico componente ou da composio de misturas com dois
ou trs componentes;
k) Caracterizao funcional de compostos orgnicos;
l) Definio da estequiometria;
m) Estabelecimento
da
composio
estabilidade
trmica
de
compostos
intermedirios;
n) Composio do resduo e decomposio trmica em vrias condies de
atmosfera e temperatura;
o) Sensibilidade do mecanismo e do registro.
37
Termogravimetria
Derivada
(DTG)
derivada
primeira
da
curva
38
Quando se aquece uma amostra, seu calor especfico tende a variar, com a mudana de
estado fsico ocorre uma alterao brusca, como tambm, processos do tipo fuso e
decomposio, nos quais h variaes de entalpia, como por exemplo: calor latente de fuso,
calor de reao e outros. Caso uma reao endotrmica acontea no interior da amostra, a
temperatura da amostra, comparada com a temperatura da referncia, produz uma diferena
de temperatura e, por analogia, uma diferena oposta de temperaturas aparece como efeitos
exotrmicos (MOTH e AZEVEDO, 2002).
Dessa forma, a tcnica pode ser utilizada na identificao qualitativa e quantitativa de
compostos orgnicos e inorgnicos, metais, minerais, graxas, leos, polmeros, madeiras e
outros. Essa tcnica tambm pode ser utilizada na rea farmacutica para determinar a
estabilidade trmica, oxidao e transio vtrea dos frmacos, alm da determinao da
pureza dos materiais biolgicos. As tcnicas DTA e a DSC esto sendo utilizadas na indstria,
especialmente na rea de polmeros, metalurgia, geologia e cermicas, tendo como principal
objetivo identificao de materiais e, tambm, a estabilidade trmica e oxidativa
(ALBUQUERQUE, 2006; DANTAS, 2006).
39
40
4 MATERIAL E MTODOS
Para realizao dos experimentos, foi utilizado leo bruto de pescados provenientes da
indstria Campestre S.A.. Este foi obtido atravs de prensagem a frio do corpo de peixes de
vrias espcies provenientes da regio Sul do Brasil e acondicionado em latas metlicas de 18
litros de capacidade.
NEUTRALIZAO
LAVAGEM
SECAGEM
BRANQUEAMENTO
FILTRAO
LEO CLARIFICADO
41
4.2.1 Degomagem: a degomagem do leo bruto foi realizada mediante a adio de 3,0% de
gua ao leo aquecido a 60 C e agitao durante 30 min., seguindo metodologia proposta por
Moreto & Fett (1998). Aps degomagem, a mistura foi resfriada e a frao oleosa foi separada
com auxlio de filtro centrfugo, com velocidade de 8000 rpm.
4.2.4 Secagem: o leo foi seco a temperatura de 60 C, com presso de vcuo por um tempo
de 20 minutos, sobagitao branda. Em seguida, o leo foi resfriado.
4.2.6 Filtrao: Para a operao de filtrao do leo branqueado, foi realizada uma pr-capa
em filtro atravs de uma suspenso de terra diatomcea (celite). A reteno das substncias
adsorventes foi obtida atravs de filtrao a vcuo para maior rapidez no processo.
42
A capacidade adsortiva da argila natural foi aumentada atravs da ativao com cido
sulfrico. Preparou-se uma suspenso de 10% (p/v) de argila em soluo de cido sulfrico 4
mol.L-1. A ativao foi realizada por agitao da suspenso a 90 C por 210 min. Aps a
ativao, o slido foi lavado com gua destilada e centrifugado at ficar livre de ons SO42- e
posto para secar a 60 C por 24 horas.
43
Foi aplicada a metodologia de Hbl de acordo com o descrito pelo Instituto Adolfo
Lutz (1985). Foram pesados 0,25 g das amostras e transferidas com auxlio de 10ml de
clorofrmio para um erlenmeyer de boca esmerilhada. Adicionou-se 20 mL de soluo de
iodo (mistura de volumes iguais de soluo alcolica de iodo 5% e soluo alcolica de
cloreto mercrico 6%) e deixou em repouso por 30 minutos ao abrigo da luz, agitando-se
ocasionalmente. Aps este tempo foi adicionado 10mL de soluo de iodeto de potssio 15%
e 100ml de gua. Titulo-se o excesso de iodo com soluo de tiossulfato de sdio 0,1 N,
usando o amido a 0,5% como indicador, at o desaparecimento da colorao azul. O teste em
branco ficou em repouso por 2 horas e seguiu a mesma metodologia das amostras.
Clculo:
Em que:
V = diferena entre os nmeros de mL de soluo de tiossulfato de sdio 0,1N gastos nas
titulaes;
f = fator de correo da soluo de tiossulfato de sdio 0,1 N;
P = peso da amostra em gramas;
1,27 = centiequivalente do iodo.
44
Em seguida, aqueceu-se a soluo at ebulio e titulou-se com soluo aquosa de NaOH 0,1
N, at colorao rsea persistente por 15 segundos.
Clculo:
% de cidos graxos livres = Vx N x 28,2
P
Em que:
V = nmero de mL de soluo de hidrxido de sdio a 0,1 N gasto na titulao;
N= normalidade real da soluo de hidrxido de sdio;
P = nmero de gramas da amostra;
28,2 = deciequivalente-grama do cido olico.
Clculo:
45
Clculo:
O valor totox ou valor total da oxidao dado pela correlao do ndice de perxido
com o ndice de anisidina, de acordo com a equao:
Clculo:
Valor Totox = 2(IP) + (IpA)
Em que:
IP = ndice de perxido;
IpA = ndice de anisidina.
46
47
48
atmosfera de oxignio com fluxo de 100 mL.min-1 e presso de 500 psi. Os valores do OIT
foram determinados pela diferena do tempo onset e do tempo inicial (tempo em que a
amostra atingir a temperatura de isoterma).
A obteno dos steres metlicos dos leos de peixe foi realizada de acordo com a
metodologia proposta por Hartman & Lago (1973). O mtodo consiste em pesar 0,2 g da
amostra de leo de peixe em um balo de boca esmerilhada de 250 mL, adicionar 3 mLs de
hidrxido de potssio (KOH) metanlico a 0,5 N (como agente hidrolizante). Aquecer at
ebulio e deixar em refluxo por 4 minutos. Posteriormente, adiciona-se 7mL de soluo de
esterificao (soluo de cloreto de amnia e cido sulfrico em metanol) mantendo a mistura
em refluxo por mais 4minutos. Em seguida, transfere-se para um funil de separao
adicionando-se 12,5 mL de ter etlico e 25 mL de gua destilada, agitando-se lentamente
para separao das fases. A frao lipdica purificada trs vezes com 25 mL de gua
49
destilada, decantando e descartando a fase aquosa. No final, a fase orgnica dever ser filtrada
com sulfato de sdio anidro para reter o excesso de gua.
50
base nos valores da rea total dos picos identificados, sendo estes correspondentes a 100%,
pde-se quantificar a porcentagem de cidos graxos em funo da rea relativa de cada pico.
51
5 RESULTADOS E DISCUSSO
cidos Graxos
Livres (%)
1,4
1,2
1,29
1
0,8
0,6
0,4
0,07
0,2
0
leo Bruto
leo refinado
Amostras
52
A Figura 5.2 demonstra que aps o processo de refino do leo de peixe o valor do
ndice de iodo foi elevado. Os cidos graxos livres foram removidos durante o processo de
refino, bem como outras impurezas presentes no leo, concentrando assim o percentual de
cidos graxos insaturados que fazem parte da composio do leo. Os leos de peixe bruto e
refinado apresentaram um ndice de iodo menor do que o encontrado na literatura, Barlow &
Yong (1996) reportam valores de 155 mgI2/100g, sugerindo um nmero menor de cidos
n d ice d e io d o
(m g I2/100g )
140
135
139,79
130
125
120
115
119,23
110
105
leo Bruto
leo refinado
Amostras
53
ndice de P erxido
m eq/K g
60
50
53,28
40
35,38
30
20
10
0
leo Bruto
leo refinado
Amostras
30
25
25,3
20
15
10
12,57
5
0
leo Bruto
leo refinado
Amostras
54
Valor de Totox
120
119,11
100
96,07
80
60
40
20
0
leo Bruto
leo refinado
Amostras
Viscosidade mPa.s
amostra.
60
59
58
57
56
55
54
53
52
51
50
57,64
57,19
leo Bruto
leo refinado
Amostras
55
1,29 0,12
119,23 0,10
53,28 0,12
12,57 0,30
119,11 0,23
57,64 0,09
0,07 0,01
139,79 0,17
35,38 0,16
25,3 0,00
96,07 0,32
57,19 0,15
56
2,5
leo bruto
leo refinado
Absorbncia (u.a)
2,0
1,5
1,0
0,5
0,0
150
200
250
300
350
400
450
500
57
58
Tabela 5.2 Principais cidos graxos presentes no leo de peixe bruto e refinado.
cidos Graxos
Palmtico 16:0
esterico 18:0
araqudico 20:0
behenico 22:0
lignocrico 24:0
Total de saturados
Palmitoleico 16:1n-7
Olico 18;1n-9
docosenico 22:1 n-9
eicosenoico 20:1 n-9
Total de monoinsaturados
Linolico 18:2n-6
alfa-linolnico 18:3 n-3
eicosapentaenoico 20:5 n-3
docosahexaenoico 22:6 n-3
Total de polinsaturados
leo bruto
leo neutralizado
16,44%
5,42%
0,51%
0,66%
0,26%
23,29%
0,89%
30,92%
0,32%
0,50%
32,63%
41,14%
0,98%
0,50%
1,46%
44,08%
13,43%
4,65%
0,40%
0,50%
0,17%
19,15%
0,57%
29,93%
0,16%
0,30%
30,96%
47,91%
0,73%
0,29%
0,96%
49,89%
(a )
-1
10 C .m in
-1
15 C .m in
-1
20 C .m in
80
60
40
20
0
10 0
2 00
30 0
4 00
50 0
6 00
70 0
T e m p e ra tu ra (C )
59
100
(b)
80
10 C.min
-1
15 C.min
-1
20 C.min
-1
60
40
20
0
100
200
300
400
500
600
700
Temperatura (C)
60
60
1,0
0,8
0,6
40
0,4
20
0,2
0
0,0
100
200
300
400
500
600
700
2,5
TG
DTG
80
2,0
1,5
60
1,0
40
0,5
20
0,0
-0,5
DTG
1,2
Nitrognio
100
TG
80
3,0
1,4
Ar Sinttico
100
-1,0
100
Temperatura (C)
(A)
200
300
400
500
600
700
Temperatura (C)
(B)
Figura 5.10 Curvas TG/DTG do leo de peixe refinado em atmosfera ar sinttico (A) e
nitrognio (B).
De acordo com as curvas TG/DTG do leo de peixe refinado (Figura 5.10 e Tabela 5.3)
pode-se observar que na atmosfera oxidante (ar) o perfil termogravimtrico apresentou quatro
etapas de decomposio, sendo a primeira etapa de decomposio em 187,98 C com perda de
massa de 27,93%, a segunda com Temperatura onset 355,74 C com uma perda de massa de
53,30%, a terceira temperatura de decomposio em 442,2 C com perda de massa de 12,43%
e a ltima etapa com Temperatura onset de 476,70 C e perda de massa de 6,345%, que
podem ser atribudas volatilizao e/ou decomposio dos triacilglicerdeos. Na atmosfera
inerte (nitrognio) apenas uma etapa foi observada, com temperatura de decomposio em
222,42 C com aproximadamente 100% de perda de massa. Pelo comportamento observado
nas curvas TG, provavelmente em atmosfera oxidante o processo de decomposio ocorre por
combusto e em atmosfera inerte por pirlise. Observou-se ainda que o perfil
termogravimtrico do leo de peixe refinado em atmosfera oxidante apresentou temperatura
inicial de decomposio menor (187,98 C) do que em atmosfera inerte (222,42 C),
sugerindo favorecimento do processo de decomposio.
61
Tabela 5.3 Dados termogravimtricos das amostras de leo de peixe refinado em atmosfera
oxidante (ar sinttico) e inerte (nitrognio)
Amostra
Etapa
TINICIAL (oC)
TFINAL (oC)
massa (%)
leo de peixe
refinado
(atmosfera ar)
1
2
3
4
187,98
355,74
442,27
476,70
355,74
442,27
476,70
561,46
27,93
53,30
12,43
6,34
leo de peixe
refinado
(atmosfera de N2)
222,42
483,76
100,00
62
graxos se comportam de maneira diferente atmosfera oxidante, sendo preciso anlises das
temperaturas de decomposio dos cidos graxos puros em atmosfera de ar para entender a
ordem de decomposio dos mesmos.
A curva PDSC dinmica, mostrada na Figura 5.11, foi realizada para a visualizao da
melhor temperatura a ser utilizada no ensaio isotrmico.
PDSC (W/g)
80
60
40
20
100
200
300
400
500
Temperatura (C)
Figura 5.11 Curva PDSC dinmica do leo de peixe refinado durante armazenamento
prolongado.
63
OIT = 36,42 m in
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
Figura 5.12 Curva PDSC do leo de peixe refinado durante armazenamento prolongado.
O leo de peixe refinado apresentou um tempo de induo oxidativa de 36,42 min
temperatura de 100 C. Ainda so escassos os estudos do tempo de induo oxidativa
utilizando o PDSC, principalmente de leos de origem animal. de absoluta importncia o
conhecimento do OIT para que se possam predizer as melhores condies de tempo e
temperatura a serem utilizados no processamento do leo.
Atualmente os mtodos mais utilizados para medir a estabilidade oxidativa de leos
so o mtodo do oxignio ativo (AOM) e o mtodo do Rancimat. No AOM, a amostra
aquecida a 100 C, e a oxidao medida atravs da anlise do ndice de perxido em
intervalos regulares at que seja alcanado um ndice de perxido de 100 mEq/Kg. Para
amostras que formam perxidos instveis, ndice de perxidos iguais a 100mEQ/Kg nunca
podem ser alcanados, e tais medidas no tem nenhum significado. O mtodo Rancimat a
temperatura de 100 C correlaciona-se bem com a estabilidade do leo medida por
desenvolvimento de perxido a 20 C. Outro mtodo oficial para medir o perodo de induo
oxidativa o OSI (ndice de estabilidade de leo). Valores de OSI geralmente correspondem
bem com valores de AOM se o ndice de perxido for 200mEQ/Kg ou maior. Porm estas
tcnicas prolongam o tempo de experimento, e so associadas com erros se houverem
pequenas mudanas dentro da taxa de fluxo de ar oxidante, alm da inabilidade para mostrar
pequenas mudanas na matriz do leo.
A estabilidade medida pelo PDSC requer uma quantidade menor de amostra alm de
reduzir bastante o tempo de anlise em relao aos mtodos convencionais que podem levar
at dias para serem medida. um mtodo bastante reprodutvel e verstil tornando-se uma
64
ao leo.
0,35
0,32
0,3
0,25
0,2
0,17
0,15
0,1
0,05
0,07
0
Refinado
Degradado a
190C
Degradado a
360C
Amostras
ndice de Iodo
mgI2/100g
65
140
120
100
80
60
40
20
0
139,79
120,19
84,13
Refinado
Degradado a Degradado a
190C
360C
Amostras
Outro efeito importante observado nas anlises fsico-qumicas foi a reduo dos
teores de perxidos. Podendo ser explicada pela natureza dos perxidos formados, os quais
so muito instveis, reativos e se degradam facilmente, formando produtos mais estveis
como dmeros, trmeros e polmeros (Figura 5.15) caracterstico da fase de terminao do
ndice de Perxido
meq/Kg
processo oxidativo.
40
35
30
25
20
15
10
5
0
35,38
9,85
3,92
Refinado
Degradado a
190C
Degradado a
360C
Amostras
66
ndice de Anisidina
30
25
25,3
20
21,1
17,89
15
10
5
0
Refinado
Degradado a
190C
Degradado a
360C
Amostras
Vicosidade mPa.s
80
70
60
50
40
30
20
10
0
75,75
57,19
Refinado
57,97
Degradado a
190C
Degradado a
360C
Amostras
Na Tabela 5.4 so expostos os valores das anlises fsico qumicas dos leos refinado,
degradado a 190 C e degradado a 360 C. Os valores de cido graxos livres encontrados
foram respectivamente 0,07; 0,17 e 0,32% (no leo refinado, degradado a 190 C e a 360 C).
O ndice de iodo foi estimado em 139,79; 120,19 e 84,13 %. Os valores do ndice de anisidina
e viscosidade determinados foram 25,30; 17,89 e 21,10 para a anisidina e 57,19; 57,97 e
75,75 Cp para a viscosidade seguindo a mesma ordem.
67
Tabela 5.4 Anlise fsico-qumica dos leos de peixe refinado e degradado termicamente.
leo refinado
Anlises
fsico-qumicas
leo degradado
190 C
leo degradado
360 C
0,17 0,04
120,19 0,62
9,85 0,04
17,89 0,06
57,97 0,16
0,32 0,02
84,13 0,61
3,92 0,01
21,10 0,00
75,75 0,26
Absorbncia (ua)
leo refinado
leo degradado 190C
leo degradado 360C
150
200
250
300
350
400
450
500
Figura 5.18 - Espectros de absoro no UV/Vis dos leos de peixe refinado e degradado.
68
Todos os espectros mostram forte absoro em 230 nm, devido s ligaes duplas
carbono-carbono presentes nos cidos graxos insaturados e que contribuem para o alto grau de
insaturao dos leos. Estas observaes esto de acordo com relatos da literatura para
espectros de ultravioleta de compostos insaturados (OWEN et al., 2003).
Os espectros mostram um pronunciado efeito batocrmico inerente a progressiva
termo-oxidao dos leos estudados, processo que leva a formao de perxidos e de
ismeros trans conjugados, o que necessariamente aumenta a intensidade e posio da banda
de absoro para comprimentos de onda maiores (o efeito batocrmico). Estas observaes
so compatveis com as alteraes estruturais que ocorrem nos cidos graxos insaturados
livres ou esterificados em triacilgliceris durante o processo termooxidativo, devido s
reaes de isomerizao, com a conseqente formao de sistemas conjugados: reaes de
epoxidao e peroxidao. Sendo possvel monitorar a qualidade dos leos por meio dos
espectros de UV-vis (REDA, 2004).
69
Tabela 5.5 Principais cidos graxos presentes no leo de peixe bruto e refinado
cidos Graxos
Palmtico 16:0
esterico 18:0
araqudico 20:0
behenico 22:0
lignocrico 24:0
Total de saturados
Palmitoleico 16:1n-7
Olico 18;1n-9
docosenico 22:1 n-9
eicosenoico 20:1 n-9
Total de monoinsaturados
Linolico 18:2n-6
alfa-linolnico 18:3 n-3
eicosapentaenoico 20:5 n-3
docosahexaenoico 22:6 n-3
Total de polinsaturados
leo neutralizado
leo degradado
190 C
leo degradado
360 C
13,43%
4,65%
0,40%
0,50%
0,17%
19,15%
0,57%
29,93%
0,16%
0,30%
30,96%
47,91%
0,73%
0,29%
0,96%
49,89%
12,88%
4,59%
0,45%
0,36%
0,10%
18,38%
0,54%
29,73%
0,17%
0,29%
30,73%
48,95%
0,78%
0,25%
0,91%
51,38%
13,42%
5,36%
0,42%
0,51%
0,13%
19,84%
0,51%
30,59%
0,19%
0,30%
31,59%
45,93%
0,90%
0,00%
0,87%
48,57%
70
6 CONCLUSES
A curva PDSC mostrou que o tempo de induo oxidativa (OIT) do leo de peixe
refinado a 100 C e presso de atmosfera de 500 psi foi de 36,42 minutos;
71
72
REFERNCIAS
ADOLFO LUTZ; Mtodos qumicos e fsicos para anlise de alimentos. 3a ed., So Paulo,
1985.
A.O.C.S; American Oil Chemists Society: Official and Tentative Methods. Chicago, vol.
1: 1985, 3ed.
ARCHER, S. L.; GREEN, D. C.; M. DYER, A. R., LIU, K. Association of dietary fish and n3 fatty acid intake with hemostatic factorsin the coronary atery and vascular risk development
in young adults (CARDIA) study. Arteriosclerosis Thromosis Biology, 1998, v. 18, p. 1119
1123.
BACCAN, N.; ANDRADE, J.C.; GODINHO, O.E.S. et al. Qumica analtica qualitativa
elementar. Campinas, Unicamp, 1985.
BANG, H. O.; DYERBERG, J. Plasma lipids and lipoproteins in Greenlandic west coast
Eskimos. Acta med Scand, 1976, v.69, p. 200.
73
BARLOW, S.M.; YOUNG, V. World Fish Oils: an Update. Internacional Fishmeal and
Oils Manufacturers Association, 1996, p.33-37.
BEILIN, L. J. Dietary fats, fish and blood pressure. Ann NY Acad. Sci., 1993, v.35, p.683.
BERSET, C.; CUVELIER, M. E.; Mthodes d` evaluation du degr d` oxydation des lipides
et de mesure du pouvoir antioxidant. Science des Aliments,1996, v.16, p. 219-245
BIMBO, A. P. The emerging marine oil industry. Journal of the American Oil Chemists'
Society, 1987, vol. 64, n. 5, p.706-715
BORQUEZ, R.; KOLLER, W.D.; WOLF, W.; WALTR, E.L. A rapid method to determine
the oxidation kinetics of n-3 fatty acids in fish oil. Lebensm.-Wiss. u.-Technol, 1997, v. 30,
n 5, p. 502-507
BRONDY, J. Fishery by Products tecnology. The AVI Publishing Company, INC. 1965
74
CHANTACHUM, S., BENJAKUL, S., SRIWIRAT, N. Separation and quality of fish oil
from precooked and non-precooked tuna heads. Food Chemistry, 2000, v.69, p.289-294
CHAPMAN, K. W.; REGENSTEIN, J. M. Use of fish oil in food products p, 151-160. In:
SHAHIDI, F.;JONES, Y.; KITTS, D. D. (Eds.) Seafood safety, processing and
biotecnology.Westport, Conveticut, 1997.
CUKIER, C.; WAITZBERG, Dan L. Atividade biolgica e uso clnico do leo de peixe. Arq.
Gastroenterol,1996,v. 33, n. 3, p. 173-177
75
FAO Food and Agricultures Organization. Fisheries Departament. The state of Word
Fisheries an Aquaculture 2000 (SOFIA). Reme: FAO, 2000. Disponvel em: <
http://www.fao.org/DOCREP/003/X8002E/X8002E00> Acesso em 20 fev.2006.
FAO Food and Agricultures. Organization. Lipds in early development in fats and oil in
human nutrition. 1994, n57, p. 49-55
FARIA, A. A.; LELES, M. I. G.; IONASHIRO, M., et al. Estudo da Estabilidade Trmica de
leos e Gorduras Vegetais por TG/DTG e DTA. Ecltica Qumica,2002, v. 27, p. 111-119
FERNANDES, V. J.; Curso de Anlise Trmica (TG, DSC, DTA e TMA), UFRN, Natal,
1995.
HARTMAN, L.; LAGO, R. C.; Rapid preparation of fatty acid methyl ester from lipids, Lab
Pract, London, 1973, P. 475-476.
HEARN, T.J.; SGOUTAS, S.A.; HEARN, J.A.; SGOUTAS, D.S. Polyunsaturated fatty acids
and fat in fish flesh for selecting species for health benefits. Jornal Food Science, 1987, v.
52, p. 1209-1211
HEINE, R. J. Dietary fish oil and insulin action in humans. Ann NY Acad. Sci., 1993, v.110,
p.683.
76
KROMAN, N.; GREN, A. epidemiological studies in the Upernavik District, Greenland. Acta
of the Medicine Scandinavica,1980, v. 208, p. 401-406
LANDS, W.E.M. Fish in human health. Orlando- Florida, Academic Press, 1986
MACHADO, M.C.N., SOUZA, A.G., NUNES, L.M., PINHEIRO, C.D. & MACHADO, J.C.
Termochim Acta ,1999, v. 328, p.201.
77
MOURA, K.R.M.; SILVA, F.C.; BRANDO, K.S.R.; SOUZA, A.G.; CONCEIO, M.M.
Estabilidade Trmica de sebo bovino e do biodiesel metlico e caracterizao fsico-qumica.
Revista biodiesel. Fev.2007.
MORAIS, M.M.; PINTO, L. A. A.; ORTIZ, S.C.A.; CREXI, V.T.; SILVA, R.L., SILVA, J.
D. Estudo do processo de refino do leo de pescados. Revista do Instituto Adolfo Lutz,
2001, v.60, n.1, p.23-33
NESTEL, P. fish oil and cardiovascular disease: lipds and arterial function. American
Journal Clinical Nutrition, 2000, v. 71 (Suppl.), p. 228s-231s
OWEN, R.W.; GIACOSA, A.; HULL, W.E., et al. The antioxidant / anticancer potencial of
phenolic compounds isolated from olive oil, European Journal ofCancer, 2000, v.36, p.
1235 1247
78
ROVELLINI, P.; CORTESI, N.; FEDELI, E. Ossidazione dei lipid. La Revista Italiana
Delle Sostanze Grasse, 1997, v. 74, n.5, p. 181-189.
SANDER, A.B.T. Polyunsaturated fatty acids in food chain in Europe. American Journal
Clinical Nutrition, 200, v.71 (suppl.), p. 176 s- 178 s.
SCHACKY, C. V. n-3 Fatty acids and the prevention of coronary atherosclerosis. American
Journal Clinical Nutrion,2000, v.71 (Suppl.), p. 2245-2275.
79
SHAHIDI, F. Stability of fats and oil. In: Latin American Congress and Exhibit on fats and
oils processings, 6, Campinas, 1995. Proceedings. Campinas: Sociedade Brasileira de leos e
Gorduras, 1995. p.47-54.
SHARMA, B. K.; STIPANOVIC, A.J. Development of a new oxidation stability test method
for lubrification oils using high-pressure differential scanning calorimetry. Acta
termochimica, 2003, v. 402, p.1-18.
SHUGAR, G.J. The Chemists Ready Handbook. Mcgraw-Hill Inc. USA, 1990.
SIGUEL, E. A new relationship between total high densidade lipoprotein cholesterol and
polyunsaturaded fatty acids. Lipids,1996, v. 31, p. s51-s56, (Suppl.)
SILVA. M. C. D., Obteno e avaliao trmica do corante natural bixina a partir das
sementes de urucum (Bixa orellana L.) , Joo Pessoa, Programa de Ps- Graduao em
Qumica, UFPB, Tese de Doutorado, 2005.
SIMOPOULOS, A. Omega-3 fatty acids in hearth and disease. Nutrition and aging, 1990,
v.1, p. 129-156
SIMOPOULOS, A. P. Omega-3 fatty acids in health and disease and in growth and
development. American Journal Clinical Nutrition,1991, v.54, p. 438-463
80
SIRIWARDHANA, N.; LEE, K.W.; KIM, S.H.; HA,J. H.; PARK,G. T.; JEON, Y. J. Lipid
peroxidation inhibitory effects of Hizikia fusiformis methanolic extract on fish oil and linoleic
acid. Food Science and Technology International,2004, v. 10, n. 2, p.65-72
SUREZ-MAHECHA, H., FRANCISCO, A., BEIRO, L. H., BLOCK, J. M., SACCOL, A.;
PARDO-CARRASCO, S. Importncia de cidos graxos polinsaturados presentes em peixes
de cultivo e de ambiente natural para a nutrio humana. Boletim do Instituto de Pesca,
2002, v.28, n.1, p. 1002-110.
SZEKELY, G.; NEBULONI, M. & ZERILLI, L. F.; Thermochimica Acta, 1992, v.196,
p.511
WEAVER, B.J.; HOLOB, B.J. Health effects and metabolism of dietary eicosapentaenoic
acid. Progress in Food and Nutrion Science,1998, v.12, p. 111-150
WENDLANDT, W. Termal Methods of Analysis. John Wiley & Sons (1964) pp. 2-4. In:
IONASHIRO, M. Anlise trmica. Instituto de qumica de Araraquara Departamento de
qumica Analtica UNESP.
WENDLANDT, W. W.; Thermal Analysis, Third Edition, Jonh Wiley & Sons, New York,
1986.
YAMADA ,T.; STRONG , J. P.; ISHII, T.; UENO, T.; KOYAMA, M.; WAGAYAMA, H.;
SHIMIZU, A.; SAKAI, T.; MALCOM, G.T.; GUZMAN, M. A. Atherosclerosis and -3 fatty
acids in the populations of a fishing village and a farming village in Japan. Atherosclerosis,
2000, vol.153, n.2, p.469-481
81
ANEXOS
82
ANEXO I
1,0
Bruto
0,8
Intesidade Relativa
0,6
0,4
0,2
0,0
0
10
15
20
25
30
35
40
45
40
45
1,0
0,8
Refinado
0,6
0,4
0,2
0,0
0
10
15
20
25
30
35
83
ANEXO II
R efinado
0,6
0,4
Intensidade Relativa
0,2
0,0
1,0
0,8
D egradado 190 C
0,6
0,4
0,2
0,0
1,0
0,8
D egradado 360 C
0,6
0,4
0,2
0,0
0
10
15
20
25
30
35
40
45