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RESUMEN
blastospores production in two liquid culture media with limited nitrogen, with
6000 and 3993 (GHA), they went to fermentation in shake flasks in two
temperature of 26°C and rotation of 300RPM was eval uated its blastoesporas
phases. The blastoesporas production was high for the strain Bb2336 in the
cultivation phase so much for the casaminoacidos media, with values of 4.68 x
108 conidia/mL-1 and 1.28 x 109 conidia mL-1 respectively. The morphology
exists among the production of the four strains in the limited liquid media of
nitrogen.
TABLA DE CONTENIDO
Agradeciminetos……………………………………………………………………….2
Dedicatoria……………………………………………………………………………..3
Resumen……………………………………………………………………………….4
Abstract…………………………………………………………………………………5
Tabla de contenido……………………………………………………………………6
Lista de Graficas……………………………………………………………………….9
Lista de Figuras………………………………………………………………………10
Lista de Tablas……………………………………………………………………….11
1.- Introduccón………………………………………………………………………..12
Hipótesis………………………………………………………………………………14
Objetivo general………………………………………………………………………14
Objetivo particular……………………………………………………………………14
2.-Antecedentes………………………………………………………………………15
2.1- Limitantes del uso de agentes químicos para control de plagas …..…17
3.2.- Inoculo………………………………………………………………………32
3.3.2.- Casaminoacidos………………………..………………….…..……..35
3.7.- Viabilidad……………………………………………………………………xx
4.4.- Viabilidad…………………………………………………………………..
Bibliografía…………………………………………………………………………….54
LISTA DE GRAFICAS
precultivo.
cultivo.
base de LRM.
crecimiento de precultivo.
crecimiento de cultivo.
base de Casaminoacidos.
LISTA DE FIGURAS
fermentaciones.
centro de la imagen.
maíz (40x).
(40x).
Figura 8.- Población de conidias sumergidas de Beauveria bassiana en la fase
(40x).
base de líquido de remojo de maíz (LRM) para cada una de las cepas de
Beauveria bassiana.
Casaminoacidos.
Casaminoacidos.
incremento del costo del petróleo, el cual forma parte básica para el desarrollo
valor para el control de insectos plaga, lo cual desecha la duda de que los
infectan a los insectos plaga, no es siempre una limitante (Soper and Ward,
1981).
1981).
HIPOTESIS
OBJETIVO GENERAL
OBJETIVO PARTICULAR
blastoesporas.
benéfica, representa para los animales salvajes, domésticos, aves, peces y aún
para las malezas, vertebrados, arañas rojas, etc. Estás nuevas técnicas han
para vivir a expensa suya durante sus estadios larvarios, pues en su vida
daño directo o por transmisión de virus, son controlados por Encarsia Formosa
liberar 5.000 a 10.000 parasitoides por hectárea (Badii and Abreu, 2006).
menor talla que el depredador. Las larvas y adultos son móviles y pueden ser
caracterizan por su escasa toxicidad sobre otros organismos del ambiente, por
también por contacto en el caso de los hongos (Badii and Abreu, 2006).
en muchos agentes virales para combatir los insectos plaga, los hongos
para su uso como agentes de control (Maniania, 1991). Lo que hace muy
y ecología del hospedero. El rango fisiológico del hospedero puede ser definido
et al., 2002). Durante los últimos 20 años, los hongos que han sido objeto de
cual penetra al insecto mediante dos mecanismos uno físico y otro enzimático
(Samsinakova and Misikova, 1971; Sansinakova and Misikova, 1973; Pekrul
and Grula, 1979; Facchinci and Monteiro de Barros, 1991; El-Sayed et al.,
1989). Se han descrito formas del tipo apresorial que facilitan el proceso de
extracelulares, que les permite degradar la cutícula de los insectos, las más
(Aarnio and Agathos, 1989; El-Sayed et al., 1989; St Legar et al., 1989;
Soderhall, 1977).
embargo, se ve atacado por otro mecanismo de defensa por parte del insecto,
insecto antes de que éste haya sido enteramente colonizado por el hongo
superficie del cadáver (Figura 1); si no, el hongo puede permanecer en forma
utilizado para el control de una gran variedad de plagas para los cultivo
sumergidas a las 16 horas, y las conidias aéreas a las 24 horas (Thomas et al.,
1987).
rendimiento máximo de 4.3 x 108 conidia mL-1. En otro estudio similar Jackson
(Fragues, 2001).
estable por más de 12 meses almacenado a 25°C. Exis ten otros dos
al., 1998) pero hay barreras significativas que involucran la producción a gran
µL y se colocaron sobre placas petri con Agar papa dextrosa, (PDA, Sigma). La
gota fue esparcida por toda la placa utilizando una varilla de vidrio para
cinco placas por cada cepa. Posteriormente las placas se llevaron a incubación
3.2.- Inoculo
tubo de ensaye, esto para el caso del inoculo obtenido a partir de un sustrato
agrego 10ml de inoculo. Cabe mencionar que el todo el material fue esterilizado
B
3.3.- Medios de cultivo
modificado (Thomas et al., 1987), para un matraz con una cantidad final fue de
una mezcla de sales, las cuales fueron Nitrato de potasio (KNO3 10g/L),
de calcio (CaCl2.2 H2O 0.89g/L) y Sulfato ferroso (FeSO4.7 H2O 12mg/L), y 2ml
de cada uno de los metales, los cuales fueron Cloruro de cobalto (COCl2.6 H2O
H2O 1.4g/L).
Jackson et al., 2000), para un matraz con una solución total de 100ml., estuvo
de los metales, los cuales son Cloruro de cobalto (CoCl2.6 H2O 3.39g/L),
1.4g/L).
inoculo se obtuvo a partir de placas petri, las cuales fueron raspadas para
esporas/ml, de los cuales solo se coloco 10ml de inoculo a cada matraz con
90ml de medio basal. Todas las fermentaciones se hicieron por triplicado por
compuesto a 40x.
3.5.- Fase de crecimiento de cultivo
de precultivo, a partir del cual se tomo una muestra para ajustar en un matraz
vertió 10ml de inoculo a cada matraz de agitación con 90ml de medio basal.
Todas las fermentaciones se hicieron por triplicado por cada cepa de Beauveria
cepa y medio.
entre una conidia típica y una blastoespora. Este procedimiento se llevo acabo
que con un filtro Watman No. 1, esto para contener la mayor cantidad de
cada una de las muestras, esto mediante la formula de, %HR= peso inicial –
peso final/ peso inicial por 100, el formulado se llevo a una humedad relativa
fermentaciones para cada una de las cepas de Beauveria bassiana, todos los
entre las cepas en las fases de crecimiento de precultivo (f= 1.59 y P= 0.205) y
109
108
107
BbGHA Bb2336 Bb6000 Bb2880
Cepas
Figura1.- Rendimiento en la producción de blastoesporas de
Beauveria bassiana en el medio a base de LRM en la fase
de crecimiento de precultivo.
1010
Produccion de blastoesporas (Desvest ±)
109
108
107
BbGHA Bb2336 Bb6000 Bb2880
Cepas
Grafica 2.- Rendimiento en la producción de blastoesporas de
Beauveria bassiana en el medio a base de LRM en la fase
de crecimiento de cultivo.
Tabla 1.- Comparación de medias en la producción de blastoesporas de
Beauveria bassiana en las fases de crecimiento en el medio a base de líquido
de remojo de maíz (LRM).
Producción (blastoesporas/ml)
8 8
Bb2336 2.93 x 10 ± 0.28 A 4.68 x 10 ± 0.46 A
8 8
Bb6000 4.38 x 10 ± 0.31 A 2.23 x 10 ± 0.5 A
Nota: Los valores en las columnas seguidos de la misma letra no difieren significativamente
según el estudio estadístico de ANOVA de un solo factor con un intervalo de confianza de P=
0.05 (95%).
Las unidades de las medias están dadas por blastoesporas/ml.
* Desviación estándar (±).
En la comparación de la producción de blastoesporas de las diferentes
de LRM se observó una diferencia significativa por parte de la cepa Bb6000 (f=
2.23 x 108 esporas/ml, mientras que las cepas GHA, Bb2336 y Bb2880 se
8 8 8 8
Precultivo 2.24 x 10 ± 0.17 A 2.93 x 10 ± 0.28 A 4.38 x 10 ± 0.21 B 2.90 x 10 ± 0.21 A
Cultivo 2.76 x 108 ± 0.16 A 4.68 x 108 ± 0.46 A 2.23 x 108 ± 0.5 A 2.54 x 108 ± 0.11 A
Cultivo
109
108
107
A A 6 36 00 00 80 80
GH GH 2 33 23 60 60 28 28
Bb Bb Bb B b B b B b
Cepas
Grafica 3.- Comparación de la producción de blastoesporas de
las diferentes cepas de Beauveria bassiana en las fases de
crecimiento en el medio a base de LRM.
4.2.- Producción en el medio líquido a base de Casaminoacidos
entre las cepas en las fases de crecimiento de precultivo (f= 0.64 y P= 0.595) y
109
108
107
BbGHA Bb2336 Bb6000 Bb2880
Cepas
Grafica 4.- Rendimiento en la producción de blastoesporas de
Beauveria bassiana en el medio a base de Casaminoacidos
en la fase de crecimiento de precultivo.
1010
Produccion de blastoesporas (Desvest ±)
109
108
107
BbGHA Bb2336 Bb6000 Bb2880
Cepas
Producción (blastoesporas/ml)
8 8
GHA 2.62 x 10 ± 0.15 A 3.54 x 10 ± 0.26 A
8 8
Bb6000 2.80 x 10 ± 0.23 A 7.03 x 10 ± 0.77 A
8 8
Bb2880 3.35 x 10 ± 0.16 A 8.78 x 10 ± 0.1 A
aumento a 1.28 x 109 blastoesporas/ml, mientras que las cepas GHA, Bb6000 y
Cepas
8 8 8 8
Precultivo 2.62 x 10 ± 0.15 A 3.48 x 10 ± 0.15 A 2.80 x 10 ± 0.23 A 3.35 x 10 ± 0.16
8 9 8 8
Cultivo 3.54 x 10 ± 0.26 A 1.28 x 10 ± 1.4 B 7.03 x 10 ± 0.77 A 8.78 x 10 ± 0.1 A
Cultivo
109
108
107
A A 36 36 0 0 00 80 80
GH GH b23 b 23 60 60 28 28
B B Bb Bb Bb Bb
Cepas
Grafica 6.- Comparación de la producción de blastoesporas de
las diferentes cepas de Beauveria bassiana en las fases de
crecimiento en el medio a base de Casaminoacidos.
4.3.- Morfología de la espora en las fases de crecimiento
Fases de crecimiento
Precultivo Cultivo
Cepas
GHA 82% 85%
Bb2336 75% 77%
Bb6000 69% 63%
Bb2880 74% 73%
Nota: Las muestras tienen un porcentaje de humedad menor al 10%
5. – DISCUSIONES
blastoesporas/ml.
cepa Bb2336 con 4.68 x 106 blastoesporas/ml (f= 2.32 y P= 0.089), cabe
lactosa la población de esporas era del tipo de conidia, mientras que con la
de maíz.
Casaminoacidos.
Casaminoacidos.
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