7/10/2015

CromatografaWikipedia,laenciclopedialibre

Cromatografa
DeWikipedia,laenciclopedialibre
La cromatografa es un mtodo fsico de separacin para la
caracterizacin de mezclas complejas, la cual tiene aplicacin en
todaslasramasdelaciencia.Esunconjuntodetcnicasbasadasen
el principio de retencin selectiva, cuyo objetivo es separar los
distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y
determinar las cantidades de dichos componentes. Diferencias
sutiles en el coeficiente de particin de los compuestos dan como
resultadounaretencindiferencialsobrelafaseestacionariay,por
tanto, una separacin efectiva en funcin de los tiempos de
retencindecadacomponentedelamezcla.

Cromatgrafodegases

La cromatografa puede cumplir dos funciones bsicas que no se

excluyenmutuamente:
Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos ms
purosyquepuedanserusadosposteriormente(etapafinalde
muchassntesis).
Medir la proporcin de los componentes de la mezcla
(finalidad analtica). En este caso, las cantidades de material
empleadassuelensermuypequeas.

ndice
1Historia
2 Clasificacin de los mtodos de separacin en
cromatografa
3Trminosempleadosencromatografa[3]
4Vasetambin
5Referencias
6Enlacesexternos

Colectorautomticodefraccionesy
demuestrasparalacromatografa

Historia
La cromatografa, como indica su nombre (proviene del griego chroma y graphos, que
significan respectivamente "color" y "escribir", literalmente 'escritura de color') , fue empleada
originalmenteconsustanciascoloreadas.
Yaen1850,Rungedescribilaformacindezonascoloreadascuandosedepositabangotasdesustancias
colorantes sobre papel secante, pero el desarrollo ms importante vino con los experimentos de Mijal
Tsweet1 (Mikhail Semenovich Tsweet, 18721919), que emple por primera vez en 1906 el trmino
"cromatografa". A comienzos del ao 1903, Mijail Tsweet, botnico ruso, logr separar un mezcla de
pigmentosdeplantas(clorofilas)enunacolumnadecarbonatodecalcio.Mstarde,en1910,cromatografi
https://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa

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un extracto de yema de huevo en una columna de inulina. Sus investigaciones, sin embargo, no fueron
utilizadasporotrosinvestigadoreshasta1931.Estademoraquizsedebialhechodequelostrabajosde
Tswettfueronpublicadosenrusoyenunarevistaquenotenaampliacirculacin.
Elrpidodesarrollodelacromatografacomoherramientaanalticasensiblenoocurrihasta1931,cuando
Kuhn, con Lederer y con Winterstein, emple la tcnica para el anlisis de pigmentos de plantas,
confirmandolosprimerostrabajosdeTswettysuprediccindequeelcarotenonoeraunasolasustancia,
sino una mezcla de varios homlogos estrechamente relacionados. Al mismo tiempo, el tamao de las
columnasempleadasfueaumentandoparapoderrecuperarloscomponentesseparados.Latcnica,porlo
tanto,noerasoloanalticasinopreparatoria.
Lacromatografaencolumnaporestostiempotenaaplicacioneslimitadas,dadoqueloscomponentesque
sepodanseparareraninvariablementelpidos.Pasaron10aosantesdequeMartinySyngedesarrollaran
unatcnicamediantelacualsepudieransepararcompuestosacuososohidroflicos.Estomarcunnuevo
inters en la tcnica y en 1944 Consden, Gordon y Martin lograron separar mezclas complejas de
aminocidosenpapelyfueronpremiadosconelPremioNobelporsustrabajos.Alpocotiempo,en1947,
enEstadosUnidosdeNorteAmrica,laComisindeEnergaAtmicadioaconocerinformacinsobreel
usodelacromatografadeintercambioinicoparalaseparacindeproductosdefisinnuclear.
EldesarrollomsrecienteenelcampodelacromatografasederivadelostrabajosdeStahl,quienen1956
present una tcnica prctica mediante la cual una capa delgada slice gel, celulosa o almina era
diseminada sobre una placa de vidrio. Esta tcnica, llamada cromatografa de capa fina, result en un
anlisismsrpidoymssensibleparaelexamendemezclascomplejasy,enmuchoscasos,hasustituidoa
otrosmtodossimilaresmsantiguosdecromatografaenpapel.
En1959,PorathyFlodinintrodujeronunanuevatcnicallamadacromatografadefiltracindegel.Estase
haconvertidoenunapoderosaynuevaherramientaparalaseparacindesustanciasdealtopesomolecular,
particularmente las protenas, y ha encontrado muchas aplicaciones en los campos de la bioqumica, la
medicina, la fisiologa y la biologa. La mayora de las tcnicas de filtracin en gel utilizan columnas y
recientementesehanhechotrabajosconunacombinacindefiltracinengelymaterialesdeintercambio
inico,lograndoquelasseparacionescomplejasseanextremadamenterpidasyeficientes.
LosprimerosequiposdecromatografadegasesaparecieronenelmercadoamediadosdelsigloXX.Asu
vez, la cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC High Performance Liquid Chromatography, en
ingls) comenz a desarrollarse en los aos 1960, aumentando su importancia en las dcadas siguientes,
hastaconvertirseenlatcnicacromatogrficamsempleada.Sinembargoestoseirmodificandoconel
pasodelosaos.

Clasificacindelosmtodosdeseparacinencromatografa
Lasdistintastcnicascromatogrficas2sepuedendividirsegncmoestdispuestalafaseestacionaria:
Cromatografa plana. La fase estacionaria se sita sobre una placa plana o sobre un papel. Las
principalestcnicasson:
Cromatografaenpapel
Cromatografaencapafina
Cromatografa en columna. La fase estacionaria se sita dentro de una columna. Segn el fluido
empleadocomofasemvilsedistinguen:
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Cromatografadelquidos
Cromatografadegases
Cromatografadefluidossupercrticos
La cromatografa de gases se aplica a numerosos compuestos orgnicos. En el caso de compuestos no
voltiles,serecurreaprocesosdenominadosde"derivatizacin",afindeconvertirlosenotroscompuestos
quesevolatilicenenlascondicionesdeanlisis.
Dentrodelacromatografalquida,destacalacromatografalquidadealtaresolucin(HPLC, del ingls
High Performance Liquid Chromatography), que es la tcnica cromatogrfica ms empleada en la
actualidad,normalmenteensumodalidaddefasereversa,enlaquelafaseestacionariatienecarcterno
polar, y la fase mvil posee carcter polar (generalmente agua o mezclas con elevada proporcin de la
misma o de otros disolvente polares, como por ejemplo, metanol). El nombre de "reversa" viene dado
porquetradicionalmentelafaseestacionariaestabacompuestadesliceoalmina,decarcterpolar,ypor
tantolafasemvileraundisolventeorgnicopocopolar.Unaserieeluotrpicaesunrangodesustancias
de diferentes polaridades que actan como fase mvil y que permiten observar un mejor desplazamiento
sobreunafaseestacionaria.

Separacindeclorofilasmediante
cromatografaenpapel

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Tipos

Fase
mvil

Faseestacionaria

Cromatografa
Lquido
enpapel

Papeldecelulosa.

Cromatografa
Lquido
encapafina

Geldesliceoalmina.

Cromatografa
degases

Gas

Columnascapilaresdeslicefundida,conrecubrimientosinternosdevariostipos
desiloxanosenlazados,columnasempaquetadascontierrasdiatomeashechasde
tubosdevidrioometal.

Cromatografa
lquida
Lquido
enfase
(polar)
reversa

Rellenodesiloxanodeoctiloosiloxanodeoctadecilo.

Cromatografa
Lquido
lquida
(menos
enfase
polar)
normal

Rellenodeslice,alminaounsoportealqueseunenqumicamentegrupos
polares(ciano,amino,etc).

Cromatografa
lquida
Lquido
de
(polar)
intercambio
inico

Resinasdeintercambioinico.

Cromatografa
lquida
Lquido Rellenodepequeaspartculasdesliceopolmerosconreddeporosuniforme.
deexclusin
Cromatografa
lquida
Lquido
deadsorcin

Partculasfinamentedivididasdesliceodealmina.

Cromatografa
de
Lquido
fluidos
supercrticos

Columnasabiertasdeslicefundidaconrecubrimientosinternosdevariostipos
desiloxanosenlazadosydeenlacescruzados.

Trminosempleadosencromatografa3
Analitoeslasubstanciaquesevaaseparardurantelacromatografa.
Fasemvileslafasequesemueveenunadireccindefinida.Puedeserunlquido(cromatografade
lquidosoCEC).ungas(cromatografadegases)ounfluidosupercrtico(cromatografadefluidos
supercrticos).Lamuestraqueestsiendoseparada/analizada(formadadeanalito/syeldisolvente)
se inyecta en la fase mvil que se mueve a travs de la columna. En el caso de la cromatografa
lquida de alta resolucin, HPLC, la fase mvil es un disolvente nopolar como el hexano (fase
normal)obienalgndisolventepolar(cromatografadefasereversa).
Faseestacionariaeslasustanciaqueestfijaenunaposicindurantelacromatografa.Unejemplo
eslacapadegeldesliceenlacromatografaencapafina.
Cromatografa analtica se emplea para determinar la existencia y posiblemente tambin la
concentracindeunanalitoenunamuestra.
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Faseenlazadaesunafaseestacionariaqueseunedeformacovalentealaspartculasdesoporteoa
lasparedesinternasdelacoluma.
Cromatograma es el resultado grfico de la cromatografa. En el caso de separacin ptima, los
diferentes picos o manchas del cromatograma se corresponden a los componentes de la mezcla
separada.

EnelejeXserepresentaeltiempoderetencin,yenelejeYunaseal(obtenida,porejemplo,a
partir de un espectrofotmetro, un espectrmetro de masas o cualquier otro de los diversos
detectores)correspondientealarespuestacreadaporlosdiferentesanalitosexistentesenlamuestra.
En el caso de un sistema ptimo, la seal es proporcional a la concentracin del analito especfico
separado.
Cromatgrafoeselequipoquepermiteunaseparacinsofisticada.Porejemplo,uncromatgrafode
gasesouncromatgrafodelquidos.
Cromatografaeselmtodofsicodeseparacinenelcualloscomponentesquesevanasepararse
distribuyenentredosfases,unadelascualesesestacionaria(faseestacionaria)mientraslaotra(la
fasemvil)semueveenunadireccindefinida.
Eluyenteeslafasemvilqueatraviesalacolumna.
Serieeluotrpicaesunalistadedisolventesclasificadossegnsupoderdedilucin.
Faseinmovilizadaesunafaseestacionariaqueestinmovilizadasobrepartculasdesoporte,oenla
paredinteriordeltubocontenedorocolumna.
Cromatografapreparativaseusaparapurificar
suficiente cantidad de sustancia para un uso
posterior,msqueparaanlisis.
Tiempoderetencineseltiempocaracterstico
que tarda un analito particular en pasar a travs
delsistema(desdelacolumnadeentradahastael
detector) bajo las condiciones fijadas. Vase
tambin:ndicederetencindeKovats
Muestraeslamateriaquevaaseranalizadaen
la cromatografa. Puede consistir en un simple
componente o una mezcla de varios. Cuando la
mezclaestratadaenelcursodelanlisis,lafaseo
fases que contienen los analitos de inters es
llamadaigualmentemuestra mientras el resto de
sustancias cuya separacin no resulta de inters
esllamadaresiduo.
Soluto es cada uno de los componentes de la
muestraquevaaserseparado.
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Cromatogramacorrespondienteaunacromatografa
lquidaenfasereversaparacompuestosfenlicos

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Disolvente es toda sustancia capaz de solubilizar a otra,y especialmente la fase mvil lquida en
cromatografadelquidos.
CapacidaddecargaEslacantidadmximademuestraquepuedeserseparadaenunasolacarga.
CapacidaddefraccionamientoEselnmeromximodecomponentesquepuedenserseparadosen
unasolaoperacin.
SelectividadEslacapacidaddepoderdiscriminarydistinguirentredoscomponentes.

Vasetambin
WikimediaCommonsalbergacontenidomultimediasobreCromatografa.
Procesodeseparacin
Serieeluotrpica
Cromatografadegases
Cromatografacuantitativaencapadelgada
Cromatografadeinmunoafinidad

Referencias
1. Lacromatografa.(http://books.google.es/books?id=XH2HzSlJPywC&pg=PA159)Fundamentosdetecnologade
productosfitoteraputicos.NikolaiSharapin.EditorrialConvenioAndrsBello,2000.ISBN:9586980014.Pg.
159190.l
2. Tcnicas de bioqumica y biologa molecular. (http://books.google.es/books?id=iW0yHGmEJwC&pg=PA179)
JorgeDavidRoriguezMiranda.EditorialRevert,1991.ISBN:8429118195.Cap.8:Cromatografa.Pg.179
3. Glosario de los trminos ms usados en cromatografa. (http://books.google.es/books?
id=efw9ydz9weYC&pg=PA15) Introduccin a la Cromatagrafa. Stella Torres de Young. Ediciones de la Univ.
NacionaldeColombia.ISBN:9581701192.Pg.15

Enlacesexternos
Cromatografa.(http://www.ugr.es/~quiored/lab/oper_bas/crom.htm)UniversidaddeGranada.
http://www.ulpgc.es/hege/almacen/download/39/39360/separaciones_por_cromatografia_1.pdf
Separacionesporcromatografa.]UniversidaddeLasPalmasdeGranCanaria.
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Cromatografa Procesosdeseparacin Tcnicasyherramientasbiolgicas
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