I

INTRODUCCIN
El cultivo de tejidos vegetales o cultivo in vitro de tejidos
vegetales, es una tcnica de reproduccin en condiciones
totalmente aspticas, en la que a partir de un pequeo segmento
inicial de tejido es posible regenerar en poco tiempo miles o
millones de plantas genticamente iguales a la planta madre,
cuando a este tejido le es aplicado un estmulo por medio de
variables fsicas y qumicas controladas en un medio de cultivo. A
diferencia de las tcnicas tradicionales de cultivo, esta poderosa
herramienta permite la propagacin de grandes volmenes de
plantas en menor tiempo; as como el manejo de las mismas en
espacios reducidos. Por otro lado, la tcnica es de gran utilidad
en la

obtencin de plantas libres de patgenos; plantas

homocigotas, en la produccin de plantas en peligro de extincin,

en estudios de ingeniera gentica, etc. La planta ya desarrollada
en el cultivo in vitro necesita una primera aclimatacin en el
laboratorio;

en

el

invernadero

despus

una

segunda

aclimatacin en el campo. Los viveros grandes realizan ambas

operaciones; otros slo se encargan del primer paso.
1 OBJETIVOS
Reconocimiento del invernadero de la Facultad de Ciencias

Agracias
Observacin de los materiales empleados en el invernadero.

II

REVISIN LITERARIA
1 FASES DE LABORATORIO
1

Fase 0: PREPARACIN DE LA PLANTA MADRE

Castillo A. (2002) nos indica que para poder establecer el
cultivo en condiciones de asepsia, se deben obtener
explantes con un nivel nutricional y un grado de desarrollo
adecuado. Para obtener estos explantes es recomendable
mantener a las plantas madre, es decir la planta donadora
de yemas, durante un perodo de tiempo que puede oscilar
entre unas semanas o varios meses en un invernadero bajo
condiciones controladas. En ese ambiente se cultiva la
planta en condiciones sanitarias ptimas y con un control
de la nutricin y riego adecuados para permitir un
crecimiento vigoroso y libre de enfermedades.

FASE I: INICIACIN O DE ESTABLECIMIENTO

Caycho, P. (2013) nos indica que Una vez elegida la planta
madre, se extraern los fragmentos a partir de los cuales se
obtendrn los explantos. Los explantos pueden ser yemas,
trozos de hojas, porciones de races o semillas. Antes de
extraer los explantos se har una desinfeccin de los
fragmentos

de

planta

madre

para

eliminar

los

contaminantes externos. Los contaminantes ms comunes

son los hongos y las bacterias que habitan en forma natural
en el ambiente y que al ser cultivados sobre el medio de
cultivo permiten la proliferacin de sus colonias.

Esta fase se realiza en la cmara de flujo laminar, se deben

mantener las condiciones de asepsia.
Se realiza los cortes de los trozos de vegetal y se le agrega
alcohol de 96 grados se vierte, y luego se le coloca el
desinfectante por 15 minutos (hipoclorito de calcio y sodio)
diluida y luego se hace lavados con agua esterilizada (3
mnimo).
3

FASE II: MULTIPLICACIN DE LOS BROTES

Castillo A. (2002) nos indica que durante esta fase se espera
que los explantes que sobrevivieron la FASE 1 y 2 originen
brotes (de procedencia axilar o adventicia) con varias hojas.
En la base de cada hoja hay una yema que se desarrollar
luego de ser puesta en contacto con el medio de cultivo.
Peridicamente estos nuevos brotes se deben subcultivar en
un nuevo medio mediante divisiones y resiembras en tubos
de cultivo u otros recipientes adecuados. Estas operaciones
se realizan en la cmara de flujo laminar o en un lugar
aislado que nos permita mantener las condiciones de
asepsia. De esta forma aumenta el nmero de plantas en
cada repique o divisin de las plantas.
El nmero de plantas que se obtiene depender de la
especie vegetal y de las condiciones del medio de cultivo. El
nmero de plantas que se obtiene por la va de la micro
propagacin permite alcanzar incrementos exponenciales,
considerando

FASE III: ELECCIN DE UN MEDIO DE ENRAIZAMIENTO

DE LOS EXPLANTOS
Castillo A. (2002) nos indica para enraizar los explantes se
utilizan principalmente platines individuales de un tamao
aproximado de 2 centmetros. Los brotes obtenidos durante
la fase de multiplicacin se transfieren a un medio libre de
reguladores de crecimiento o que solo contenga hormonas
del tipo auxinas. Algunas especies de plantas no necesitan
pasar por esta etapa y emiten sus races en el mismo medio
de cultivo donde desarrollan yemas nuevas, por lo tanto el
proceso de multiplicacin y enraizamiento transcurren en
forma simultnea.

FASE

IV:

ACLIMATACIN

DE

LOS

EXPLANTOS

ENRAIZADOS
Castillo A. (2002) nos indica que los explantes recin
enraizados son muy sensibles a los cambios ambientales, de
manera que el xito o el fracaso de todo el proceso dependen
de la aclimatacin. En esta etapa las plantas sufrirn
cambios de diferente tipo que permitirn la adaptacin de
las mismas a vivir en condiciones naturales. En el momento
en que se extraen los explantes o plantines enraizados de
los

frascos,

estn

poco

adaptados

crecer

en

un

invernculo, ya que estos explantes han enraizado y crecido

en ambientes con una humedad relativa muy elevada y
generalmente tienen estomas (estructuras responsables de
regular la transpiracin y prdida de agua en la planta) que
no son completamente funcionales frente a descensos de la

humedad relativa, y por lo tanto demasiado lentos para

evitar la desecacin del explante.
Por otra parte, crecer en ambientes tan hmedos tambin
suele implicar la falta de una cutcula con cera bien
desarrollada, que representa la barrera fsica para evitar la
perdida de agua a lo largo de toda la superficie de la planta.
2 SIEMBRA

DE

PLNTULAS

ACLIMATACIN

EN

sssINVERNADERO
CENTA, (2008) Senala que un previo a su siembra, el residuo
gelificante adherido a las races se lava con agua corriente y se
procede a su siembra en bolsas de polietileno con un sustrato
adecuado que permita su desarrollo por un lapso de dos
meses para su comercializacin.
3 SUSTRATO
Los mtodo ms utilizado para la desinfeccin del sustrato es
el de vapor de agua y solarizacin.
1

SOLARIZACIN
Rivero (2013) nos indica que la solarizacin del suelo se
lleva a cabo por lo general en los perodos ms clidos del
ao. El proceso incluye una adecuada preparacin del suelo
para el cultivo normal, o sea que el suelo debera ser regado
y labrado siempre que su estructura lo permita. Los
terrones grandes deben ser rotos y las piedras, malezas,
restos vegetales y cualquier objeto que pueda romper la
pelcula de cobertura deben ser removidos del terreno. La
superficie del suelo deber ser entonces afinada y muy bien
nivelada antes de cubrirla con la cobertura.

Las pelculas de plstico de las especificaciones deseadas se

colocan a mano o a mquina con los bordes firmemente
enterrados alrededor del rea tratada. El plstico se coloca
cubriendo en forma total o en fajas donde estarn en el
futuro los surcos. Si se utiliza maquinaria pesada para
colocar el plstico el suelo debe estar seco a fin de evitar su
compactacin. El riego adicional puede ser necesario cada
dos o tres semanas a fin de mantener el suelo hmedo
durante el perodo de solarizacin.
4 CONTROL FITOSANITARIO
Rivero (2013) nos seala que los mtodos para deteccin de
contaminantes no visibles que se utilizan son:
-Ensayo en planta indicadora
-Test inmunoenzimticos (ELISA)
-PCR
1

CONTROL VARIETAL
Rivero (2013) indica
desarrollarse

por

que

distintas

el

control

tcnicas

varietal
de

puede

marcadores

moleculares:
-RAPD: Random Amplified Polymorphic DNA.
-AFLP: Amplified Fragment Length Polymorphisms.
-SSR: Simple Sequence Repeats(microsatlites).
-SNP: Single Nucleotide Polymorphism.
-RFLP: Restriction Fragment Length Polymorphism.

III

MATERIALES Y MTODOS
La presente prctica se realiz en el Invernadero de la Facultad de
Ciencias Agrarias-UNASAM- Shancayan Produccin de Semillas
Pre-Bsica
1 MATERIALES
Cmara fotogrfica
Apuntes
2 METODOLOGA
La prctica se realiz el 2 de octubre del presente ao las
cuales se llev acabo de la siguiente manera:
1

PRESENTACIN
La Ingeniera Pilar

Caycho

encargada

del

curso

de

Biotecnologa Agrcola, redacto una pequea introduccin

en la consistencia y estructura de un invernadero, as como
tambin la presentacin del encargado del invernadero Sr.
Glicerio. Despus se inici con el recorrido viendo que dicho
lugar se encontraba distribuido:
Antes de ingresar al invernadero tuvimos q pisar cal para
poder desinfectar los zapatos.
1 rea de oficina
Lugar de recepcin de las personas visitantes y atencin
al pblico.
2 rea de invernadero
La facultad se encuentra distribuida por tres ambientes:
A invernadero 1; B invernadero 2;
De las cuales el invernadero 1 se encontraba con
diferentes cultivos entre ellas unas cuantas plantas de

papa y fresas, por cama ingresa 1000 plantas, en un solo

invernadero estaran ingresando 4000 plantas.
El invernadero 2 entran 12 mil plantas in vitro con la
desventaja que la temperatura es demasiado en horas
punta, disminuyendo la temperatura con agua por el
tiempo

de

uso

este

invernadero

ya

se

encuentra

deteriorado los pisos.

2

SUSTRATO
El sustrato que utilizan para la instalacin de las semillas o
plantones es de turba y tierra agrcola.

MATERIALES
Las camas almacigueras

se

encuentran

distribuidas

lateralmente con una distancia de 1 metro de ancho y 20

metros de largo. Se encuentran construidos por ladrillos
desinfectados.
Tambin se observ que existen materiales como marcos de
palos

para

realizar

el

tinglado

para

semillas

recin

sembradas y un termmetro.
Cada alumno procedi a sembrar los tubrculos y los
brotes.
4

CONTROL DE PLAGAS
Dentro del invernadero se encontraron trampas de color
amarillo para el control de moscas y trips.

5
IV

CONTROL DE ENFERMEDADES
Utilizar cal a la entrada para desinfectarse los zapatos.
CONCLUSIN Y RECOMENDACIONES

La seleccin de plantas madres se deben obtener explantos

con un nivel nutricional y un grado de desarrollo adecuado.

En la aclimatacin, las plantas sufrirn cambios de
diferente tipo que permitirn la adaptacin de las mismas a

vivir en condiciones naturales.

El sustrato es importante debido que influye en el
porcentaje de enraizamiento y en la calidad del sistema

radicular.
Debido a que el sustrato es pobre se realiza programas de

fertilizacin.
Se recomienda en el caso de papa los tubrculos se
siembran en macetas para hacer el chequeo de virus antes

de usarlas como plantas madres.

Se recomienda Antes de comenzar la fase de aclimatacin
de plntulas se deben desinfectar todos los implementos
(tijeras, hoja de bistur) que se utilicen El invernadero debe

cumplir
Para el control de enfermedades una de las mejores
medidas es que al momento de ingresar al invernadero

pasar por un proceso de desinfeccin como los zapatos.

No se debe tocar las plantas del invernadero, inconsciente
mente agarre las plantas pudiendo haber transmitido
patgenos.

BIBLIOGRAFA

Castillo, A. (2002). Propagacin de plantas por cultivo in vitro:Una

biotecnologa que nos acompaa hace mucho tiempo.

Caycho, P. (2013). Planificacin de un Laboratorio de Cultivo de

tejidos e invernadero. Ancash, Peru.

CENTA. (2008). CULTIVO IN VITRO DE PLATANO . Laboratorio de

Biotecnologa. EL SALVADOR.

Rivero, M. (2013). Cultivode tejidosvegetalesII. Buenos Aires.

http://www.fbmc.fcen.uba.ar/materias/agbt/teoricos/2011_3%2
0Cultivo%20de%20Tejidos%20II.pdf

http://www.sabelotodo.org/agricultura/generalidades/considera
ciones_plagas.html

VI

ANEXOS
INVERNADERO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS
(DISTRIBUCIN DE INVERNADEROS)

REA DE OFICINA

REA DE INVERNADERO

CAMAS DE PROPAGACION

Infraestructura deteriorada