ENZIMAS

Las enzimas son protenas

Catalizan reacciones qumicas necesarias

para la sobrevivencia celular
Sin las enzimas los procesos biolgicos
seran tan lentos que las clulas no podran
existir.
Las enzimas pueden actuar dentro de la
clula , fuera de sta, y en el tubo de ensayo.

E + S ESEP E + P
E

La enzima disminuye la energa de

activacin
Sin enzima
Con enzima

La Ea de la hidrlisis de la urea
baja de 30 a 11 kcal/mol con la
accin de las enzimas, acelerando
la reaccin 1014

E+S

E+P
Tiempo de la reaccin

El aumento de temperatura
necesario para producir la reaccin
no catalizada seria de 529C

Enzima - Catalizador

Tanto la enzima como el catalizador

aceleran la velocidad de una reaccin
qumica.
Una enzima puede transformar 1000
molculas de sustrato/ segundo
Las enzimas tienen 3 propiedades que los
catalizadores NO tienen

Especificidad por el sustrato

Se inactivan por desnaturacin
Pueden ser reguladas

Las enzimas se unen a los reactivos

(sustratos) reduciendo la energa de
activacin

Cada enzima tiene una forma nica

con un sitio o centro activo en el que
se une al sustrato

Despus de la reaccin, enzimas y

productos se separan.

Las molculas enzimticas no han

cambiado despus de participar en la
reaccin

Las enzimas cumplen su papel cataltico gracias a:

Fijacin estereoqumicamente complementaria
del substrato
Transformacin cataltica del mismo
En ambas funciones participan:
Cadenas laterales de los aminocidos
Grupos o molculas no proteicas:
Grupos prostticos
Iones metlicos
Cofactores

Los siguientes hechos:

Especificidad de la reaccin enzimtica
Carcter heterogneo de la catlisis enzimtica

Nos llevan a postular la existencia de un Centro

Activo en la molcula de enzima, capaz de:
Fijar especficamente al substrato
Transformarlo catalticamente.

La unin del sustrato es muy

especfica

Modelos:

Encaje inducido
Llave cerradura.

Estado de transicin

Modelo de Llave y Cerradura (Emil Fischer)

Substrato y enzima se
acoplan
de
forma
estereospecfica,
de la misma manera que una
llave se ajusta a su
cerradura.

Modelo aceptado durante

mucho tiempo; hoy se
considera insuficiente al no
explicar algunos fenmenos
de la inhibicin enzimtica

Sustrato
Enzima

Complejo enzimasustrato

Modelo de Ajuste Inducido (Koshland)

Tanto la enzima como el

substrato sufren una
alteracin
en
su
estructura por el hecho
fsico de la unin.
Est mucho ms de
acuerdo con todos los
datos
experimentales
conocidos
hasta
el
momento.

Sustrato

Enzima

Complejo enzimasustrato

Una enzima puede unir dos sustratos

en su sitio activo

Clasificacin y
nomenclatura de enzimas

Nomenclatura

Nomenclatura histrica:

SUSTRATO + ACTIVIDAD + SUFIJO(asa)

(v.g. glucoquinasa)

SUSTRATO + SUFIJO(asa)
(v.g. ureasa)

DONADOR + ACEPTOR + ACTIVIDAD +

SUFIJO(asa)
(v.g. oxalacetilaminotransferasa)

Nomenclatura IUB (1972): 6 grupos segn la

reaccin catalizada. Cdigo numrico encabezado
por las letras EC( enzyme commission). Cuatro
nmeros separados por puntos

Clasificacin de enzimas por Grupos

EC 1.x Oxidorreductasas
EC 2.x Transferasas
EC 3.x Hidrolasas
EC 4.x Liasas
EC 5.x Isomerasas
EC 6.x Ligasas

1. OXIDORREDUCTASAS
Sin transferencia de hidrgenos

Con transferencia de hidrgenos

AH2 + B A + BH2

Regulan reacciones
REDOX
Existen dos tipos
esenciales:
Con transferencia
de hidrgenos
Sin transferencia
de hidrgenos

2. TRANSFERASAS

3. HIDROLASAS

Transfieren grupos
funcionales

Rotura de enlaces por

medio de agua

4. LIASAS

Rotura o formacin de
molculas sin
intervencin de agua.
Suele producirse
adicin a dobles
enlaces: C=C, C=O,
C=N

5. ISOMERASAS
Cambio de posicin de
grupos dentro de la
molcula

6. LIGASAS O SINTETASAS

Formacin de
enlaces con rotura
de ATP

Cintica Enzimtica

Cintica Enzimtica
La cintica enzimtica es el anlisis cuantitativo del efecto
de cada uno de los factores que intervienen en la actividad
enzimtica, que se evala a travs de la velocidad de la
reaccin catalizada.
Las variables ms importantes son:

Concentracin de enzima, sustratos y productos

(incluyendo inhibidores y/o activadores)
pH
Temperatura

Ella est basada en la medicin de la velocidad de reaccin. As en la reaccin:

Se tendr:

dp
ds
v

dt
dt

Concepto de velocidad inicial

[ ]

+d[P]
v = dt , t

s
t

Efecto de la concentracin del sustrato

Cintica de la reaccin enzimtica

La velocidad de una reaccin enzimtica aumenta de forma lineal hasta

alcanzar un mximo en el que se produce la saturacin de la enzima

Efecto de la concentracin de substrato

.
.
.
.
.

.
.
[s]

Una cintica hiperblica implica un proceso saturante:

Hay un nmero limitado de sitios en la enzima

para fijar substrato; una vez que estn ocupados
todos, por mucho que aumente la concentracin
de substrato, la velocidad permanecer constante.

E+S

k+1
k-1

ES

k+2

E+P

Baja
concentracin
de sustrato

ALTA
concentracin
de sustrato
SATURACION

Hiptesis de Michaelis - Menten

E+S

k+1

ES

k+2

E+P

k-1
- La primera parte del mecanismo,

k+1

E+S

ES

v=

Vmax * s
Km + s

k-1
Tiene lugar mucho ms rpidamente que la segunda:

ES

k+2

E+P

Velocidad de la reaccin (v)

Vmax

Relacin entre Km y Vmax

Michaelis y Menten

Vmax/2

Km

Concentracin de Sustrato [S]

La Km es la concentracin de sustrato
donde se obtiene la mitad de la Vmax

Velocidad de la reaccin (v)

Vmax

Vmax/2

Km

Concentracin de Sustrato [S]

A mayor Km, menor es la afinidad de la enzima por el sustrato

A menor Km, mayor es la afinidad de la enzima por el sustrato

Representacin directa

Vmax

100

80

60

v
40

Vmx s
Km s

20

s
0
0

20

Km

40

60

80

100

Efecto de la concentracin de la
enzima

Cuando se varia la concentracin de la

enzima para una misma cantidad de
sustrato, la velocidad de reaccin es
directamente proporcional a la
concentracin de la enzima.

Efecto de la Conc. de enzima

Vel.
100

50

10

20

30

40

50

60

[E]

Efecto del pH
Todas
las enzimas presentan un pH ptimo de
actividad. El pH puede afectar de varias maneras:
El centro activo puede contener aminocidos con
grupos ionizados que pueden variar con el pH.

El sustrato puede verse afectado por las variaciones

del pH.

Algunas enzimas presentan variaciones peculiares. La

pepsina del estmago, presenta un ptimo a pH=2, y
la fosfatasa alcalina del intestino un pH= 12

Efecto del pH en la ENZIMA

Cada enzima tiene un pH ptimo para su actividad

El pH afecta las interacciones inicas

Enzima

pH ptimo

Pepsina

1.5

Tripsina

7.7

Catalasa

7.6

Arginasa

9.7

Fumarasa

7.8

Ribonucleasa

7.8

Efecto de la temperatura

Influye en la actividad. El punto ptimo

representa el mximo de actividad.
A temperaturas bajas, las enzimas se
hallan "muy rgidas" y cuando se supera un
valor considerable la actividad cae
bruscamente porque, como protena, la
enzima se desnaturaliza.

En el efecto de la temperatura hay dos componentes:

1. Aceleracin de la reaccin segn
la ecuacin de Arrhenius
k = A exp (-Ea/RT)
2. Desnaturalizacin trmica de la
protena

Efecto de la temperatura en la ENZIMA

Aumento de la
velocidad

15

Desnaturacin
por calor

40

75

Temperatura

Cada enzima tiene una temperatura ptima.

ORGANISMOS TERMFILOS

Son organismos que viven a altas t y realizan

sus reacciones enzimticas a estas altas t
Ejemplos son los que viven en las aguas
termales
Es tema de investigacin el aislamiento de las
enzimas de estos organismos para desarrollar
procesos industriales en condiciones ms
extremas

Enzima

Temp. pt.
(oC)

Mamferos

37

Bacterias y algas

aprox.

100

Bacterias rticas

aprox.

Bacterias en muestra de hielo antigua

Efecto de los activadores:

Algunas enzimas requieren la presencia de una
molcula no proteica para la catlisis: son las protenas
CONJUGADAS u HOLOENZIMAS
APOENZIMA: parte proteica
COFACTOR: parte no
proteica
Segn la complejidad de la
porcin no proteica:
In
Coenzima
Grupo prosttico

Coenzimas

Las coenzimas son pequeas molculas

orgnicas, que se unen a la enzima.
Las coenzimas colaboran en la reaccin
enzimtica recibiendo transitoriamente
algn grupo qumico: H+ , OH, CH3 .
La enzima sin la coenzima recibe el nombre
de APOENZIMA

Algunas enzimas requieren metales para

mejorar su actividad