La cafena es un compuesto alcaloide (del grupo de las xantinas).

El primer paso para la identificacin y valoracin de los alcaloides purnicos derivados de la xantina, es el aislamiento y
ulterior purificacin para separarlo de otros componentes de los productos que los contienen.
La cafena es de carcter bsico y, por lo tanto, el primer paso para su aislamiento, es tomar el medio en que se encuentra,
bsico (con amonaco u xido de magnesio), para romper sus combinaciones con cidos (clorognico o tnico) y proceder a
su extraccin mediante un disolvente orgnico no miscible con el agua. El medio bsico favorece, en las soluciones acuosas,
la participacin con los disolventes orgnicos, particularmente con el cloroformo en el que son solubles.
La purificacin ulterior del alcaloide purnico se conduce generalmente, a travs de un tratamiento cido que insolubiliza
impurezas acompaantes en la primera extraccin, de la sal correspondiente a la base que se forma y es muy soluble en
agua. Se aplican distintas tcnicas de extraccin y la purificacin para llegar a la base pura y luego determinar su temperatura
de fusin, o el tenor tenor en nitrgeno, o su absorcin en el ultravioleta.
Otros mtodos modernos aplican la cromatografa para distinguir las bases entre s.
Identificacin y valoracin: Como mtodo qumico clsico transcribo el de Power_Chesnut que conduce a la pesada de la
base activa anhidra y el de Bailey y Andrew que completa aqul con una determinacin de nitrgeno por el mtodo Kjeldahl y
calcula la cafena real.
Mtodo Power-Chesnut: se propuso para valorar cafena en t.
Sus pasos son los siguientes:
1) Extraccin con etanol: se extraen 10 g de la muestra finamente pulverizada y humedecida con etanol en un sohxlet, con
alcohol caliente, durante ocho horas,
2) Tratamiento con MgO: se suspenden 10 g de MgO pesado en 100 mL de agua, en una cpsula de porcelana, y se le
agrega la suspensin al extracto alcohlico, ayudando con una pequea cantidad de agua caliente. Se evapora lentamente
sobre bao de Mara, removiendo hasta que este seco. Se trata con agua caliente, y la masa se pasa a un filtro y se lava con
agua caliente hasta recoger unos 250 mL en un vaso de filtro;
3) Hidrlisis cida: se agrega al filtrado 20 mL de cido sulfrico (dil. 1:9), se calienta y se deja hervir durante 30 minutos (as
se hidrolizan las saponinas y otros componentes); se enfra, se filtra sobre papel doble y se lava con cido sulfrico al 0,5%;
4) Extraccin con cloroformo: el filtrado cido es agitado con porciones de 25 mL de cloroformo seis veces sucesivas;
5) Tratamiento alcalino: a los extractos clorofrmicos reunidos en una ampolla de decantacin, se agregan 5 mL de KOH al
1% y se agita para remover el color; se pasa a travs de un papel a un frasco de Erlenmeyer;
6) Evaporacin: se eliminan cloroformo por destilacin y el residuo se pesa, con ayuda de cloroformo a un cristalizador tarado
y se deja evaporar espontneamente; se seca durante 30 minutos sobre bao Mara, y se pesa la cafena anhidrida as
obtenida.
Mtodo de Bailey y Andrew: Se omite la extraccin con etanol del mtodo anterior, y se trata la muestra pulverizada con MgO
y agua caliente durante dos horas, y se filtra. El filtrado es hidrolizado mediante cido sulfrico al 10% y luego se extrae con
cloroformo y se trata con lcali al 1%. El extracto clorofrmico es luego evaporado, y en el residuo pesado se determina
nitrgeno por Kjeldahl. El dato multiplicado por el factor 3,464 da el contenido real de cafena.
Cromatografa de las purinas: El mtodo cromatogrfico de Munier y Macheboeuf permite separar entre s las tres bases
purnicas activas, la xantina y la trigonelina, e identificarlas por sus distintos Rf. Se parte de la solucin purificada extraida del
producto, y se hace sobre papel, por particin, usando como disolvente de desarrollo butanol normal cido saturado con agua
o butanol amoniacal acuosos el revelado se logra con cloro, apareciendo muchas fluorescente. Los Rf correspondientes,
segn el disolvente de desarrollo empleado son:
Rf para butanol cido (butanol n. 9 y HCl 1, saturado con agua).
Cafena, 0,65
Teofilina, 0,49
Teobromina, 0,38
Xantina, 0,13
Trigonelina, 0,21
Rf para butanol bsico (butanol 100, amonaco 2 y agua 16).
Cafena, 0,75
Teofilina, 0,36
Teobromina, 0,25
Xantina, Trigonelina, 0,10
Aplicacin de la espectrofotometra en el ultravioleta: Tanto la cafena como la teobromina presentan una fuerte absorcin en
el ultravioleta a 273 milimu.
Para la cafena, la absorbancia a 273 milimu es (solucin que contiene 1 mg de cafena por litro, a travs de un espesor de 1
cm) de 0,0480, y para la teobromina en iguales condiciones es de 0,0569.