GENTICA TERICA

(Aula 1)
O gene tem que se transcrever e depois traduzir-se.
As anomalias pesquisam-se pelas arvores genealgicas, pois se um casal tiver 2 ou mais
abortos espontneos no 1 trimestre de gravidez podem existir malformaes fetais a
nvel genotipico/fenotipico.
O papel da gentica o da preveno.
A 1 fase ser de sequenciar
A 2 fase de localizar.
A gentica importa-se com a relao que existe entre gene-produto-doena.
DNA mitocrondrial
Tem uma funo de parte energtica, todos os fenmenos activos gastam energia e
precisam de ATP, fornecidos pelas mitocondrias.
As mitocondrias existem no espermatozide na parte intermdia, que no penetra no
vulo, no h nenhuma mitocondria masculina numa transmisso do tipo mitocondrial,
ou seja, as doenas mitocondriais so transmitidas pelas mes sua descendncia.
Heteroplasmia
H uma diviso do citoplasma e quando este se divide as mitocondrias tambm se
dividem.
Esta heteroplasmia explica que h pessoas que no tem a doena mas a transmitem.
Meiose
Todas as clulas autossomicas, diploides (2n), os cromossomas esto aos pares, estes
cromossomas tem no mesmo locus genes idnticos, mas podem existir mutaes
silenciosas que podem no os tornar iguais.
Pode-se dar o caso dos 2 cromossomas terem a mesma origem ou se for 1 s e que se
desdobre, isto d origem a doenas extremamente graves, manifestando-se como uma
patologia.
As caractersticas hereditrias passam por aqui.
Mitose
As clulas multiplicam-se e depois morrem. Elas vivem para manter a possibilidade de
transmitir aos descendentes os caracteres hereditrios.
Crossing-over
Troca de material, isto que faz com que as pessoas no sejam iguais.
As mutaes esto na base das doenas.

Embrio
embrio s at as 12 semanas, a partir dessas 12 semanas passa a ser considerado feto.
Ate as 42 considerado uma criana-termo.
A.C.I.U. atraso de crescimento intra-uterino, esta criana nunca vai poder ser normal
nem se igualar a uma normal.
A 1 ecografia faz-se sempre antes das 12 semanas.
s 12 semanas as gnadas femininas comeam a desenvolverem-se, parando o ocito e
s por volta das 28 semanas recomea novamente a partir da puberdade.
No homem s comea a desenvolverem-se no perodo da puberdade.
Ciclo Celular
Cada clula tem um ciclo celular diferente, numa hora corresponde mitose, depois
vem o GAP.
G1 -- uma fase de crescimento
S -- fase de duplicao do DNA
G2 -- fase de correco de erros ou apenas de reparao dos erros na fase S
Ocorre depois novamente mitose.
GAP0 (zero) -- quando as clulas esto quietas ou em fase estacionria.
Bases qumicas da hereditariedade
No cone estava o poder de transmitir as caractersticas do vrus da folha do tabaco.
A radioactividade ficava ento dentro da bactria.
Mas marcando as protenas a radioactividade ficava do lado de fora das bactrias.
Adenina (base) + desoxiribose (nuclesido) => desoxiadenosina 5-fosfato (nucletido)
ADN -- Guanina e Timina
ARN -- Guanina e Uracilo
Timina e Adenina 2 pontes de hidrognio
Guanina e Citosina 3 pontes de hidrognio
cidos-Aminados
Ao fazer alteraes (como trocar um cido por um neutro) nestes, pode-se induzir uma
doena como a drepanocitose (anemia falciforme)

Na bactria Escherichia Coli no seu genoma no existem introns, os genes so todos

seguidos.
O cromossoma bacteriano est fixado na membrana interna da clula.
O ADN tem que se desenrolar para por exemplo uma enzima actuar dentro dele.
A cromatina e os cromossomas so 2 estados morfolgicos na mesma entidade:
- interface cromatina
- diviso celular cromossomas
(alm de serem a mesma coisa)
A cromatina contm o ADN, as Protenas e o ARN
Por sua vez as Protenas vo conter as Histonas e as protenas no histonas como as
enzimas.

* As Histonas servem de esqueleto para o enrolamento do ADN

As protenas variamcom o tipo de clula.
O tipo de protenas no histonas podem variar consoante o momento de clula e
tambm com o que est a acontecer.
As Histonas so iguais em todos os animais!!
A Histona mais ou menos como se fosse uma bola na qual o ADN se enrola, cada
cadeia de ADN passa duas voltas na mesma histona, e este conjunto de ADN com a
histona d-se o nome de Nucleossoma.
A cadeia de ADN tem uma largura de 100 Angstrongs.
Na estrutura nucleossmica h 2 sub-unidades:
- ncleo nucleossmico (octmero com 140 pares de bases)
(H2A); (H2B)2 ; (H3)2 ; (H4)2
- ligao internucleossmica (60 pares de bases)
(H1)
Modelos de organizao superior do ADN:
- solenoide 6 a 8 nucleossomas por espira
- superboles 10 a 12 nucleossomas por esfera
Enrolamento do ADNz levgero (para a esquerda)
Enrolamento do ADNb dextrgero (para a direita)
As Histonas 1 fazem o apertamento da cadeia de ADN s histonas!

(Aula 2)
Provenincia do ADN:
ADN nuclear: - de origem materna
- de origem paterna
ADN mitocondrial: - todo de origem materna
- no ocorre crossing-over
- no existem introns
- no tem aparelho de reparao
- no tem histonas
- no existe facilidade de ocorrer mutaes

Ocorre duplicao do ADN, depois a transcrio do ARN, e a traduo para protena.

As duas cadeias de ADN so complementares e anti-paralelas.
As zonas de duas ligaes de hidrognio, como no caso da timina e da adenina, so as
mais susceptveis de sofrerem alteraes do que as zonas que possuem trs ligaes de
hidrognio, como no caso da citosina e da guanina.

Diferenas de replicao a nvel dos procariotas e dos eucariotas:

nos eucariotas o ADN replicado em cromatina
a replicao mais rpida nos procariotas que nos eucariotas
nos eucariotas inicia-se ao nvel dos replicons ao contrario do que acontece
nos procariotas onde s existe um.
A replicao sempre bidireccional, e tanto pode ocorrer nas bactrias como nos seres
humanos.
Tipos de ADN-Polimerases:
Poli I enzima de reparao (actividade de exonuclease)
Poli II no se conhece o seu significado
Poli III a verdadeira polimerase
Telmeros do a capacidade de estabilidade aos cromosomas.

Uma ADN- polimerase necessita para iniciar a sntese de uma nova cadeia de ADN de:
RNA-primer pequena sequncia de 10 a 60 nucletidos contendo um
radical activo (3- OH) terminal.
Nota: a sua sntese catalizada pelos RNA-primases (na E. coli
esta enzima o produto do DNA-G)
Template-DNA matriz de ADN que serve de modelo sntese de
novas cadeias.
A cadeia cresce sempre na direco 5-3
Fragmentos de Okasaki pequenos fragmentos de nucletido a partir dos quais se
inicia a replicao do ADN. Nos procariotas contam 1000 a 2000 nucletidos e nos
eucariotas 100 a 200.
Isto permite que a sntese se faa de modo descontinuo e sempre na direco de 5- 3.
Etapas da formao de novo ADN:
ADN-gyrase enzima que desenrola a cadeia
ADN-helicase mantm os dois ramos da cadeia da hlice separados.
Protenas de ligao cadeia single
ADN polimerase III com os RNA-primers vai completando a nova cadeia.
ADN poli I vai fechando os primers
ADN ligase
Ao ocorrer um erro, como a troca de A por G, a exonuclease polimerase vai corrigir
esse erro, funciona em 3-5.

DNA-polimerase
Procariotas:
Tipo I
Tipo II
Tipo III
Nota: a mesma macromolcula proteica tem actividade polimerase (5-> 3) e
exonuclease (3-> 5).
Eucariotas:
Tipo alfa
Tipo beta
Tipo gama
Tipo sigma

Classes de DNA
Procriotas: tem s uma classe
Eucariotas: tem 3 classes

ADN altamente repetitivo

ADN moderadamente repetitivo
ADN no repetitivo

ADN altamente repetitivo

15% do genoma
ADN-satelite -> menos 50% do total repetitivo
-> unidade de dezenas a algumas centenas de bases
-> 4 variedades
ADN-repetitivo intercalar -> CADN-composito
-> unidades nicas (1000 a 2000 pares de bases)
-> flanqueadas de uma ou mais unidades repetitivas por
vezes dispersas em doublets invertidos. Em geral com
300 pares de bases e existindo no genoma humano
haplide em n de +/- 300000.
-> comportam um site reconhecido pelo enzima Alu I, que
uma enzima de restrio.

ADN moderadamente repetitivo

gene codando o percursor 45s dos fragmentos 18s e 28s do ARN-r (existem +/- 400
cpias).
Existem em bactrias a nvel dos braos curtos dos cromossomas acrocentricos dos
grupos D e G, e do brao longo do cromossoma 1.
gene codando para as histonas
Dispostos em bactrias, repetidas +/- 400 vezes e situados no cromossoma 7.

ADN no repetitivo
A maioria dos genes existentes.

(Aula 3)
Na cadeia de ADN existem mensageiros que comeam a surgir/nascer (s visto em
microscopia electrnica)
As protenas no histonas vo-se ligar s histonas por fosforilao, sendo esse conjunto
libertado, ficando ento o ADN livre de histonas ocorrendo a sntese de RNA e ocorre a
transcrio.
A velocidade de alongamento das cadeias peptidicas de cerca de 20 ciclos por segundo
nos procariotas, ao passo que ela de 1 ciclo por segundo nos eucariotas.
A polimerase s se torna funcional quando lhe adicionado o factor sigma.
Sem se saber qual o sitio e a entrada no pode ocorrer a transcrio, a unidade sigma
que ir reconhecer essa entrada.
* Tipos de ARN polimerase:
- Poli A (I) -> transcreve os genes dos ribossomas
- Poli B (II) -> transcreve os genes do m-RNA
- Poli C (III) -> transcreve os genes dos t-RNA
O factor sigma quando libertado pode voltar a ser reciclado, ou seja, usado
novamente.

Existem dois factores na transcrio:

- factor de reconhecimento e iniciao que o sigma
- factor de terminao que o R
As caractersticas principais da transcrio so:
ser sequencial conforme a matriz
ser assimtrica uma s cadeia de ADN transcrita
ter o inicio num sitio particular o promotor

Existem duas cadeias: a sense e a non-sense (matriz).

Num eucariota o mensageiro no definitivo, tem que sofrer uma maturao.
Comea sempre por uma metionina, por acetilao, ela vai receber um cido guanilico
(mutilado no carbono-7, mas isto que lhe d estabilidade).
E antes de chegar ao fim vai receber as adeninas, adenilaao. Isto a maturao, est
relacionado com a cauda poli-adenilada.
O bocado a mais lido mas j no traduzido.
* faz com que se adquira estabilidade e passe para o citoplasma.
Caractersticas de um ARN mensageiro:
Eucariotas

Procariotas

Monocetenrio

sim

sim

Capacidade de ligao aos

ribossomas

sim

sim

Sintetizado de forma definitiva

no

Associa-se a protenas
especificas

sim

no

Estabilidade

horas

minutos

sim

no

Monocistrnico

sim

Nos eucariotas os genes no tem o mesmo promotor.

Nota: cistron unidade funcional comandada por um promotor e um operador.
No existe nenhuma relao directa entre o tamanho do ser vivo e o gene que est
presente numa levedura.
No Splicing a Regra de Chambom diz:
as duas primeiras bases dos introns (5) so GT ou GU.
as duas ltimas bases dos introns (3) so AG.
O corte faz-se sempre do lado do intron da extremidade 5.
No mARN tem que se retirar o intron, este retirado pela splicing-enzime.
A calcitonina (tiride) e o CGRP (hipotlamo) tm origem no mesmo gene, mas foram
produzidos em orgos diferentes, pois o splicing foi diferente.
(*ver esquema no caderno)
(Aula 4)
Ligao peptidica
Feita pela peptidilo transferase.
Translocao do pptido
Factores de alongamento:
EF-T, faz a fixao dum tARN especifico ao ponto A
EF-G, tARN do ponto A ao ponto P
20 aminocidos protenas
O X mensageiro vai-se destruindo
Eucariota => membrana nuclear
AMPc => fixao da polimerase
Os aa e o RNAm so reciclados

* as clulas humanas contm:

- cerca de 1x10^6 cpias de cada um dos tARN
- cerca de 5x10^6 cpias de cada um dos rRNA
So sintetizadas fora do ncleo, no citoplasma
Grande nmero de sistemas enzimticos pertence a este grupo de protenas
(polimerases)
Associam-se cromatina, mas so diferentes das histonas protenas no histonas
Existem alguns codes especiais:
- AUG, sinal de inicio da traduo
- UAA, UAG, UGA, sinais STOP ou de terminao da leitura
Origem das protenas mitocondriais:
- 54 nucleares (transmisso mendeliana)
- 13 mitocondriais (transmisso materna)
No h crossing-over no X mitocondrial
No h enzimas de reparao a nvel da mitocndria -> doena mitocondrial
Heteroplasma: a diviso do citoplasma desigual, as mitocondrias no esto repartidas
pela clula.
Enhancer: conjunto de bases para iniciao da transcrio
TATA box: tiamina e adenina
CAP site: iniciao
Codo ATG

O promotor constitudo por:

- TATA box ou sequencia de Hognes Goldberg (localiza o inicio da transcrio)
- Upstream element ou sequencia CAAT (determina a eficincia da
transcrio)
- Enhancer element (estimulador da expresso de alguns genes)
TATA => pontos de interaco de ARN polimerase nos promotores, um forte ponto
de fixao.
CAP => reconhecimento
O promotor no pode estar ocupado logo a polimerase desloca-se.

O cdigo gentico:
linear a ordem de sucesso dos codes determina a dos aa nas cadeias
proteicas.
universal idntico em todas as espcies conhecidas
degenerado para os 64 tipos diferentes de codes s existem 20 aa
pontuado existem codes que representam sinais de terminao (UAA,
UAG, UGA)
no ambguo a um determinado codo corresponde um s aa.
de interpretao extrnseca a transferncia da informao do ADN
protena indirecta

Nos procariotas
acumulao e destruio rpidas do mRNA da beta-galactosidase
policistrnicas

Ao adicionar indutor ao mRNA-especifico contendo a beta-galactosidase, esta sofre um

aumento e o indutor eliminado
No opero lactose e seus genes reguladores, o repressor fixado regio operadora,
mas a polimerase precisa de se fixar, ento surge uma molcula efectora que vai induzir
o co-repressor.
A lactose (indutor) vai-se ligar ao repressor, que modifica ou inibe, ou seja, que no
permite que este se ligue ao promotor e assim a polimerase consegue se ligar ao
promotor. O co-repressor liga-se ao repressor que inactivo na origem e que faz com
que este se ligue ao promotor, assim a polimerase no se liga ao promotor.

(Aula 5)
CAP catabolism activated protein
Controle pelo AMP-ciclico da transcrio:
Neste intervm a glucose, por inibio origina a adenilciclase, por estimulao a
fosfodiesterina.
A glutamina sintetase quando est activa no est adenilada, e quando est adenilada
no est activa.
Ao juntar indutor beta-galactosidase a quantidade desta vai aumentar, enquanto que as
enzimas de histidina a sua quantidade vai diminuir.
A protena C um inibidor, quando h arabidose no meio a protena C vai ter o efeito
contrrio, ou seja, vai estimular.
O araD, araA e araB vo ter um tipo de transcrio, enquanto o araI e a araC vo ter
dois tipos de promotores, o Pbad e o Pc.
A arabidose ao juntar-se araC vai alterar o sinal da araC de negativo para positivo.
= Regulao gentica =
As protenas no so todas produzidas nas mesmas quantidades.
Variaes de concentrao em algumas protenas de E.coli.
O teor celular duma protena especifica depende da necessidade que as clulas em dessa
mesma protena.
A mudana do teor dessa protena reflecte em geral uma mudana do numero de
molculas de mARN correspondente.
Os repressores actuam fixando-se sobre o ADN.
Os repressores de natureza proteica, controlam a sntese da maior parte dos mARN.
Os repressores podem controlar mais de uma protena.
A ausncia de um operador conduz a uma sntese constituiva (a clula nunca mais pra).
Controle positivo do opero lactose.
Os co-repressores e os indutores determinam o estado funcional dos repressores.
O catabolismo da glicose afecta o nvel do AMP-ciclico.
A activao da protena CAP por ligao ao AMPc.
Controle conjunto do funcionamento de certos promotores pela protena CAP e
repressores especficos.
A fixao dum repressor impede a fixao simultnea da ARN-polimerase.
O promotor lactose contm cerca de 80 pares de bases.
Modelo de iniciao de transcrio a nvel do opero LAC.
Controle positivo do opero HUT pela glutamina sintetase.
Uma protena pode exercer um controle quer positivo quer negativo.
O mARN bacteriano muitas vezes instvel sob o ponto de vista metablico.
A sntese de um repressor est habitualmente sob a dependncia dum promotor mas no
dum operador.

Inibio de actividade de certas enzimas pelo produto terminal (transformao alostrica

a estrutura da protena modificou-se mas no a nvel fsico ou qumico)
Operon triptofano
De 5 -- 3
A zona lder transcrita mas nunca traduzida.
H um codo de terminao.
- H uma zona lder que tem 2 codes triptofano (UGG).

Nos eucariotas
No genoma humano existem entre 50 mil e 100 mil genes:
o valor C = quantidade de ADN existente numa clula haploide (se esse ADN
fosse esticado teria um comprimento de mais ou menos 2 metros)
contm 3.300 Centimorgans (CM)
1 CM: 10^6 pb
1 Kb: 10^3 pb

(Aula 6)
Regulao
Cisteina grupo metilo
=> mais metilaao -> menos transcrio
Aceitadoras de grupos metilos
existem protenas que bloqueiam o grupo metilo (fazem a regulao)

genes sensores genes integradores gene receptor gene produtor

Gene sensor integra um sinal

seleccionar quais os produtos fundamentais para o

organismo atravs da regulao.

Gene sensor
Sinal que vai ser integrado
( protena/ RNAs )
Vai at aos integradores
S transcrito se o sinal fundamental para o organismo
um mecanismo selectivo

Mutaes
- genicas ou pontuais
- cromossomicas
- do genoma
Polimorfismo
Diz se que h uma mudana gentica quando os genes mudam duma forma allica a
outra.
* As mutaes podem ser:
- das clulas somticas => no se transmitem
- das clulas germinais => so relaes hereditrias

Mutao: processo pelo qual os genes mudam duma forma allica a outra
Ocorre ao acaso, em qualquer momento e em qualquer clula do
organismo
Mutao somtica: no se transmite descendncia
Mutao germinal: transmite descendncia
Reverso qualquer alterao que transforme um alelo mutado num alelo selvagem
Mutagneos agentes que provocam um aumento da taxa de mutaes, normalmente
baixa.

Taxa mutacional
Exprime-se como o nmero de mutaes/locus/gmeta/gerao
Frequncia duma mutao
Probabilidade rara de um acontecimento mutacional ocorra numa clula/organismo
numa dada unidade de tempo

Pleiotrofia
Uma mutao pode afectar varias funes e dita mutao pleiotrpica (ex.:
mutao afectando uma zona de ADN que desempenha um papel na regulao da
expresso gentica promotor)
quando mais precoce a mutao, maior a rea da mutao (mais tecidos e mais
clulas afectadas)
Se uma mutao atingir as clulas germinais, pode transmiti-las descendncia.

(Aula 7)
Uma linhagem celular com uma mutao em M:
Quanto mais precoce, mais clulas e mais tecidos so afectados!

Mutao de um gene:
Espontnea: pode, no entanto, ser induzida experimentalmente.
Universal: tanto interessa ao reino animal, como ao vegetal.
Fortuita: aparece por acaso, por acidente, duma maneira imprevista.
Excepcional: define-se pela sua frequncia. (taxa de frequncia: numero de
mutaes sofridas por um dado gene para cada gmeta emitido)

* Quanto mais raro a doena, maior o risco de consanguinidade.

O rastreio est relacionado com a taxa de frequncia mas tambm com o tipo de doena.
Espontneas
Mutaes
Induzidas

Mutagnese espontnea:
- por radiaes csmicas
- pela radioactividade terrestre permanente
- pela radiao interna do corpo humano
Uma modificao rara na citosina vai permitir que esta se ligue a uma adenina (A-T e
C-G).
Uma modificao na guanina vai permitir que esta se ligue timina.
E antes da replicao do ADN vai ento surgir um gene com emparelhamento anormal
de G-T, que depois da replicao ir formar 2 genes, um mutante e outro selvagem
(sendo este o considerado normal).
Mecanismos de modificao do gene:
mutao gentica
recombinao
elementos genticos transponveis
re-arranjos cromossmicos

Modificao do genoma:
- por mutao
- por amplificao (se a polimerase ler uma vez e depois voltar a ler o
mesmo pedao, ento feita uma amplificao)
- por transposio (elementos ou bocados mudam de sitio, saem de um
sitio para outro, mas o bocado quando muda pode ficar a funcionar de outra forma pois
vai ter um comando diferente, modificando a expresso. Esta transposio vai estar
associada aos genes contidos).

Mecanismos moleculares:
escala nucletida:
- substituio (transio e transverso)
- inverso
- deleao
- insero
escala intra-cistrnica:
- crossing-over desigual
- erro de leitura

Na mesma famlia, entre purinas (guanina e adenina) ocorre transies, e entre

pirimidinas (timina e citosina) ocorre transverses, sendo estas mais frequentes que as
outras.

* Categorias de mutaes resultantes de alteraes na sequncia das bases da molcula

do ADN:
=> gene do tipo selvagem
=> troca de um par de bases
=> insero de um mesmo par de bases
=> deleao de um grupo de 6 pares de bases (2 cidos-Aminados)

MUTAO

mutao Faux.sens substituio a nvel do ADN duma s base, havendo

pois mudana de um s condo noutro especifico de aminocidos diferentes.
mutao Non-sens substituio a nvel do ADN, duma s base e
originando o aparecimento dum Codo stop.
mutao com decalage do quadro de leitura (Mutao Frameshift) se a
mutao comporta uma deleao ou uma insero (sem ser de 3 pares de bases ou um seu
mltiplo) origina uma decalage do quadro de leitura do gene. Todas as regies
codando em 3, a partir da mutao, so lidas e em geral encontram rapidamente um
codao-stop .
mutao de fim de leitura mutao Non-sens ou de decalage do quadro
de leitura. Param prematuramente a traduo do RNA-m.

Reverses
- verdadeiras
- por supresso intragnica
- por supresso intergnica

=> Mutao e Reverso <=

As mutaes ocorrem da forma selvagem para a forma mutante, enquanto as reverses
ocorrem da forma mutante para a forma selvagem (sendo neste caso uma reverso
verdadeira).

* Fentipo => expresso do gentipo mais os factores ambientais.

Nota: uma mutao supressora aquela que anula o efeito de outra mutao, o
indivduo normal fenotipicamente, alm de genotipicamente ter as duas mutaes.
Ocorre a mutao a e se a seguir ocorrer uma mutao b o individuo no vai ter
nenhuma manifestao fenotipica , pois a b vai anular o efeito da a, mas se ocorrer
uma diviso da cadeia, e as mutaes ficarem em cadeias separadas, ento a iro se
manifestar as duas a nvel fenotipico.

(Aula 8)
Tipos de mutaes e suas consequncias praticas:
- mutaes morfolgicas
- mutaes letais
- mutaes condicionadas
- mutaes auxotrficas
- mutaes de resistncia (a antibiticos)
Deteco de fentipos mutantes em trs tipos de mutaes:
Num tipo mutante com uma mutao condicional em temperatura elevada
ocorreu uma mutao, nos tipos selvagem com temperatura alta ou baixa no ocorreu
nada e tambm no mutante com temperatura baixa tambm no ocorreu nada, com uma
mutao auxotrofa sem suplemento no ocorre crescimento, enquanto nos tipos
selvagens com ou sem suplemento ocorre crescimento e tambm no mutante com
suplemento ocorre crescimento, numa mutao de resistncia no tipo selvagem com
agente (bacteriano) no ocorreu crescimento enquanto no tipo selvagem sem agente no
mutante com ou sem agente ocorreu crescimento.

Hemoglobinas
Numa hemoglobina A ocorre uma mutao para hemoglobina 5, passando no X a
existir em vez de GAG e CTC passa a GTG e CAC, o que aps a transcrio passa a
GAG e GUG e aps a transladao passa a glutamato e valina.
*Esta mutao no tem reparao possvel.
A hemoglobina fcil de isolar, aps centrifugao, ficava uma soluo de
hemoglobina, com uma electroforese, encontravam as diferentes hemoglobinas pelo seu
grau de migrao.
Quando mudava o pH dos cidos aminados condicionava a migrao.

Nota: O sistema reparador fundamental no nosso organismo.

Nas mitocondrias no h sistema reparador.

Reparao do X
Numa cadeia que contenha uma ligao covalente entre as timinas, alem de esta ligao
poder ocorrer em qualquer pirimidina, sendo mais frequente nas timinas.
Existem enzimas chamadas de fotolases, que vo buscar a sua energia luz visvel, essa
energia vai permitir fixar-se s timinas, rompendo a ligao covalente entre as timinas.
Isto no ocorre no homem, apenas nos fungos.
Fotorreactivaao: s existe em seres como os fungos.

Exciso nucletida
Consegue cortar ou tirar at cerca de 30 nucletidos, essas zonas muito alteradas,
sucedem em zonas carcinognicas, alteram grandes zonas de X.
Tambm altera nos ultravioletas (UVB), tem este comprimento de onda maior. Esta
situao (??) no pode ser corrigida pela exciso.
Quanto mais a clula se mltipla mais ela est susceptvel de ser mutada!
Reparossoma -> protenas que bloqueiam e fazem a exciso de bocados de X.

Os radicais livres podem alterar o X, pois quanto mais os tecidos se dividem mais
radicais libertam.
Mismatch
Numa X polimerase ocorre uma deformao no ponto onde ocorre a alterao da base,
surge ento uma enzima que no vai corrigir, mas vai na nova cadeia colocar a base
correcta, deixando o erro apenas na cadeia antiga.
As zonas de micro-satelites so muito variveis de indivduo para indivduo, cada
pessoa tem um padro prprio e diferente.
Nas cadeias de X temos as bases ligadas, o acido e os degraus, pode existir uma
ruptura nas cadeias e entre o acido fosfrico e as riboses vo-se ligar novamente, sendo
tambm este um sistema de reparao.
Por ultimo h o mecanismo de reparao de polimerases.

O gene p53 est situado no brao curto do cromossoma 17. Esta protena vai regular a
velocidade e como o processo celular se processa. Se se pode reparar ou no. Esta
protena p53 formada por 4 unidades.
Quando h uma leso, essa leso vai indicar que a actividade do gene aumenta, ou seja
transcreve mais.
Vai fazer com que a clula na fase G1 demora mais tempo, no passe logo para a fase S.
Se a leso estiver no gene 53, vai criar uma protena diferente da p53, ao entrar na fase
S , essa leso vai desdobrar (a fase S a duplicao do DNA) e ento a clula vai se
tornar uma clula tumoral.
Quando o p53 est activo o sistema da reparao pode fazer com que esta morra, ocorre
a apoptose.
O p53 um gene que comanda o ciclo celular.
Quando h uma leso ele passa de inactivo a activo.

Farmacogentica
Usada e definida por Vogel, um geneticista alemo
A mesma dose de medicamentos dada a 2 pessoas diferentes pode ter efeitos diferentes,
tais como a epilepsia.
Uma droga vai actuar num organismo, se o indivduo tiver uma mutao gentica que
leva a um efeito negativo.
A maneira de tratar o doente, deve de ser diferente.
*exemplos de situaes em que a sade dos indivduos posta em causa:
-> Acatalsia:
Esta a falta ou alterao da catalase, existe em dois tipos, o japons e o
suo, estes diferem na estrutura da protena ou no gene de regulao da protena, que
pode estar alterada. O tipo japons quando o gene da regulao est alterado, enquanto
o tipo suo quando a protena est alterada.
(Aula 9)
-> Hidrogenase alcolica:
Enquanto o organismo estiver com muito lcool para queimar, vai
ento queimando lcool.
Na Suia 20% da populao queima mais rpido o lcool, enquanto na
Inglaterra s 4% da populao que queima lcool.
As populaes do Alasca no diluem bem o lcool.
A mutao na desidrogenase alcolica, o alfa-ceto-aldeido que provoca a congesto
quando o indivduo ingere lcool.
A alfa-1-antitripcina ( uma anti-protease) a proteco das clulas normais pela
desidrogenase.
Ento qualquer processo que afecte a rvore respiratria, se a elastase no funcionar, o
alvolo no se contrai e o ar vai ficar retido
Pi M => individuo selvagem/normal
Pi Z => individuo no selvagem

A cirrose comea pela eritricia e depois passa para cirrose mesmo.

 dfice em glucose-6-fosfato-desidrogenase
Quem possui este dfice tem problemas em tolerar:
- aspirina
- quinaglinas (???)
-algumas drogas anti microbianas
Se um casal, a mulher grvida, tiver um dfice, deve-se fazer tambm ao marido; tanto
que na Sardenha fazem um doseamento pois algo muito frequente de ocorrer.
Se uma mulher condutora de hemofilia, casar com um homem hemoflico, se tiverem
uma filha, esta ser hemoflica, pois ter os dois X.
Nota: os doentes que possuem o dfice, se viverem em zonas onde h malria, no vo
contrair a doena da malria.
hipertermia-maligna: o oxido-nitroso, que um anestsico, antes de dar o anestsico
faz-se um relaxamento muscular para assim poder descontrair os msculos estriados, o
individuo vai ter uma paragem cardaca, antes de lhe ser dado o anestsico final, nem
sempre letal mas em caso da equipa medica no estar preparada pode ser.

A concentrao extra celular em clcio sempre superior concentrao intracelular.

Um impulso nervoso que permite uma abertura do canal de clcio, a acetilcolina
desencadeia a abertura dos canais e desencadeia a contraco muscular.
Rianodina => um alcalide, o receptor da rianodina est muito prximo do receptor da
hipertermia.
O gene para a rianodina est no cromossoma 19.

dfice da pseudocolisterase
- succinicolina
- suxiametonio
So duas substncias que se empregam como relaxantes musculares, fazem parte da pranestesia. Num indivduo que tenha um dfice, em vez da neutralizao dos relaxantes
vai perdurar o efeito destes, duram mais tempo. Pode ser letal para o paciente.
E1 => uma esterase, mas foi a primeira a ser descoberta dentro das que tem o efeito de
anular.
E1u => individuo selvagem ou normal

E1a => individuo atpico

A Dibucana, em contacto com soro, se houver uma aco inibidora considerado
normal com 80%, mas se for um heterozigoto inibe s 60%, se for um indivduo doente
homozigoto s de 20%.
H um alelo silencioso, o E1s, que uma forma grave.

Cromossomopatias
Se numa trissonomia 21 ocorrer uma translocaao robertsoniana e apenas surgir
(por iluso ptica) 2 cromossomas, pois 2 esto ligados acrocentricamente ento o
caritipo vai ser de 46 e no de 47.
Monossomia do X => sndrome de Turner

(Aula 10)
(continuao das cromossomopatias)
Sndrome de Turner:
Algum atraso mental, falta de menstruao, estas raparigas podem sofrer
pequenas perdas e ou interrupes da menstruao, tem tambm menos plos pbicos e
axilares e tem tambm um desenvolvimento anormal dos seios.
Se for detectada precocemente ser possvel actuar mais rpido e permitir que a
rapariga seja submetida a tratamento de modo a que os caracteres secundrios se
desenvolvam quase normalmente.
Nesta sndrome h por vezes uma abduo do antebrao no lado radial.
Pode ocorrer edemas no dorso dos ps e das mos, chamado de edema a frio, ou
sinal de Gauder. Ao surgirem estes sinais no beb deve de ser feito um caritipo e caso
se detecte um sndrome de Turner, ento o tratamento pode ser efectuado mais
precocemente, ou seja, antes da falta de surgimento da menstruao.

As trs principais trissonomias so a 21, a 13 e a 18.

Uma grande parte das trissonomias so abortos espontneos, e tambm precoces, sendo
que se forem muito precoces no se chega a notar que era uma gravidez.
Trissonomia 13:
caracterizada por as crianas nascerem dentro do tempo normal ou at pstermo mas em que as crianas tem um peso abaixo do normal. Possuem as mos
cerradas, sendo que este aspecto visvel desde feto logo na ecografia das 22 semanas,
podendo a ser detectada a T. 13.
Tem lbio purino bilateral e fenda palatina.
Tem as fendas palpebrais pequenas, blefarofimosis.
O dedo grande do p encontra-se em dorsi-flexo dando a sensao visual de que
mais curto.
Tem prega palmar nica (alem de no ser caracterstica exclusiva de
trissonomias).
Tem micro-cefalia.
Tem uma insero baixa dos pavilhes auriculares, com a cabea direita.
Tem polidactilia (dedos extranumerarios), dada pela expressividade, neste caso
associada ao sndrome.
Tem uma falha de cabelos na parte superior do couro cabeludo.
Este tipo de trissonomia por norma tem uma morte muito precoce, pode ser por
volta dos 18 meses, morrendo sempre muito cedo.

Trissonomia 18:
Caracteriza-se pelo aspecto de ter pouco tecido conjuntivo, de baixo peso, as
mos cerradas.
Possuem as ancas bastantes estreitas, com pernas e braos normalmente
cruzados.
Tem o dedo grande do p em dorsi-flexo, parecendo mais curto.
Tem um occipital saliente, e um comprimento na medida occipito-frontal
muito maior do que a parietal.
Tem o quinto dedo cruzado sobre o quarto dedo da mo. A mo cerrada quase
que como impossvel de abrir.
Tem o calcanhar demasiado saliente (esta caracterstica bastante tpica da T.
18).

Sndrome de Bri du Chaut:

Ocorre no cromossoma 5, onde no existe brao curto.
As cordas vocais alteradas levam a que se produza um choro semelhante a um
miar de gato.
H uma sutura metpica muito marcada (sutura no frontal). A evoluo quando
em adulto no se nota ou poder ser quase imperceptvel.

 Sndrome de Klinefelter:
Tem 2 X e um Y, sendo XXY.
So indivduos com um certo atraso mental.
Tem um crescimento anormal de seios, ginecomastia, este normalmente o
primeiro sinal para pedir um caritipo. Esta ginecomastia pode ser submetida a uma
cirurgia de correco, mas se no for administrada testosterona esta anomalia pode
surgir novamente.
So indivduos estreis, e com uma certa atrofia testicular.

Sndrome de XYY:
Conhecido anteriormente como o cromossoma assassino.
So indivduos com alguma dificuldade de relacionamentos, e um ligeiro atraso
mental.
Tem alguma agressividade em excesso.
So pessoas por norma psicologicamente instveis.
Alem de serem crianas aparentemente normais, e fisionomicamente tambm
normais, sendo apenas bastante irrequietos e tambm destabilizadores.
So indivduos estreis.

XX ou XY :
A tpica hermafrodita, mulher com varias caractersticas masculinas, tais como
por exemplo os pulsos serem mais largos.
Sndrome do X frgil:
Indivduos que sofrem de um atraso mental muito acentuado.
Foi estudado uma situao de grande prevalncia nas ilhas dos Aores, devendo
se apenas a uma tendncia para a consanguinidade.
Nos indivduos do sexo masculino, na fase da puberdade existe uma grande
alterao a nvel dos testculos, alem de serem estreis e impotentes.
Numa mulher com a sndrome do X frgil no h um atraso mental to
demarcado como nos homens, pois tem a presena de um outro X, o que poder
compensar aquilo que pode estar em falta do outro.
As portadoras da sndrome de X frgil ao conduzirem esta sndrome
descendncia, podem ou no o transmitir, depende do X que transmitido ao filho.

(Aula 11)
Controle gentico da resposta imune
* cada vez mais ns humanos estamos mais em contacto com os antigenios.
No comea s quando nascemos, mas sim logo no perodo fetal.
Existem clulas como os necrfagos que vo colaborar.
Orgos que participam na defesa: gnglios linfticos, bao, timo, medula ssea.
Os gnglios linfticos tem que estar em zonas importantes para a entrada dos antignios.
Os grupos de gnglios que barram inicialmente so da zona axilar, inguinal,
orofaringe, mesentrico.
Ao se expor um ratinho a um antignio e tambm ao mesmo tempo a uma radiao, no
vai existir resposta.
A resposta imunitria vai estar ligada aos linfocitos circulantes.
Os plasmcitos so os que segregam.
=> numa 1 fase os anticorpos ficam agarrados membrana, s numa 2 fase que se
soltam.
H receptores especficos de antignio que se encontram agarrados membrana.
Factores de complemento.
No homem esto no cromossoma 6.
IgA secretoras -> 1 barreira de defesa presente no intestino.

 Componentes do sistema imune:

- B linfcitos
- T linfcitos
- Macrofagos
B linfcitos:
- regulam a resposta humoral imune
- sintetizam anticorpos que:
Ou so excretados
Ou ficam ligados membrana
Macrofagos:
- fagocitam os complexos antigenio-anticorpo

Resposta imune generalidades IA

Imunoglobulinas = molculas anticorpos
Cada molcula anticorpo composta de 2 tipos de cadeias polipeptidicas:
- cadeias pesadas
- cadeias leves
Existem a nvel dos vertebrados 2 tipos de cadeias leves:
- Kapa
- Lambda
Todas as molculas de Ac (anticorpos) comportam uma ou outra cadeia leve
(Kapa ou Lambda) mas estes 2 tipos excluem-se, ou seja, no existem na mesma
molcula.
* excluso allica: s um alelo se manifesta, o outro fica silencioso.

 Resposta imune generalidades IB

Existem a nvel das cadeias pesadas 5 tipos diferentes:
- mu
- delta
- gama
- psilon
- alfa
* o tipo de cadeia pesada num dado anticorpo define a classe de imunoglobulina (Ig) a
que o anticorpo pertence.
Existem 5 tipos diferentes de classe:
- cadeia gama -> Ig G
- cadeia alfa -> Ig A
- cadeia mu -> Ig M
- cadeia delta -> Ig D
- cadeia psilon -> Ig E

Resposta imune generalidades IC

Cada cadeia pesada ou leve formada por uma parte constante e outra
varivel.
* a existncia duma molcula proteica duma parte varivel e doutra
constante uma importante caracterstica funcional.
So as regies variveis tanto a nvel das cadeias pesadas como leves que se
enrolam no espao-estrutura tridimensional para constiturem os sites ou domnios de
ligao Ag-Ac.
Qualquer modificao da sequncia dos aa da regio varivel alterara a
estrutura qumica do site de ligao e consequentemente a afinidade do Ac vis-a-vis o
Ag.
A regio constante tanto das cadeias leves como das pesadas idntica a outra
regio constante das outras cadeias do mesmo tipo.
A regio constante das cadeias pesadas determina a funo imunolgica a
desempenhar pelo Ac.

 Base gentica da diversidade dos Anti-corpos

* foram propostas 3 hipteses para explicar a diversidade dos anti-corpos:
1 hiptese Germinal Germ line
Existiriam tantas linhas germinais genes quantos os anticorpos. Estava de acordo
com o que inicialmente se conhecia acerca da sntese proteica mas no com a
quantidade de ADN existente.
2 hiptese da mutao somtica
Existiria uma ou algumas linhas germinais para cada classe major de anticorpos, e a
diversidade seria originada pela alta frequncia de mutaes. Na realidade no se
conhece nenhum precedente de to alta frequncia de mutaes, somente em certos
tipos de clulas ou certos genes.
3 hiptese do mini-gene
Vrios pequenos segmentos de alguns genes estariam na base duma multido de
possveis combinaes.

** A ltima hiptese explica grande parte da diversidade observada. Contudo as

mutaes somticas contribuem igualmente para essa mesma diversidade.
** Finalmente sabe-se que um segmento (a regio constante) de cada anticorpo
especificada por um gene ou segmento de gene presente no genoma somente em poucas
cpias.
** As 3 hipteses sero todas correctas em certos aspectos.

 Nmero de genes embrionrios codando para a regio varivel das cadeias leves
humanas:
- cerca de 150 genes para a regio V
- cerca de 5 genes para a regio J
** Assim o nmero possvel de combinaes ser de 750, que se deve multiplicar por
10 (nmero provvel de recombinaes somticas) o que eleva o valor final a 7,5x10^3.
-> Em resumo o organismo poder produzir cerca de 18 bilies de anticorpos
diferentes (2,4x10^6 x 7,5x10^3).
Se a estes mecanismos juntarmos as consequncias das mutaes somticas
pontuais, este valor ser ainda muito maior.

Nmero de genes embrionrios codando para a regio varivel das cadeias pesadas
no homem:
- cerca de 80 genes para a regio V
- cerca de 6 genes activos para a regio J
- cerca de 50 famlias de genes D
** Assim o nmero possvel de combinaes ser da ordem de
80x6x50=2,4x10^3. Este valor ser multiplicado por 100, o que dar 2,4x10^6 cadeias
pesadas.

Diferentes na estrutura do gene embrionrio humano codando para uma cadeia leve
kappa ou lambda:
- numa cadeia kappa existem cerca de 150 sequncias codando para a regio
varivel (V) e 5 sequncias para a juno (J), mas uma s sequncia para a regio
constante.

 Linfcito Pr B:
IgD e IgM -- membrana, provm de uma cadeia Mu, pesada.
Depois passa a linfcito B mas no fundo um plasmcito.
As IgM da membrana passam a IgM circulantes.
As IgA quando so secretoras, so 2 e fazem parte da barreira imunitria.
H uma comutao onde se produz as IgG (gamma) e as IgE (verdadeira alergia).
H um sinal e a partir da essa clula vai ser percursora de um determinado tipo de
anticorpos.

(Aula 12)
Antignios (continuao)
Explicao dos esquemas mostrados na aula
#1
No sistema circulatrio dos mamferos existem 2 tipos de resposta imune, a celular e a
humoral.
Na resposta imune humoral existe os linfcitos B, ocorre a secreo de anticorpos,
depois h uma aglutinao, sendo os anticorpos aglutinados e fagocitados pelo
macrofago.
Na resposta imune celular existe os linfcitos T, com receptores de antignio de clulas
T e de antignio de histocompatibilidade, que ficando com os anticorpos ligados a esses
receptores vo posteriormente provocar a lise da clula infecciosa ou vrus.
#2
-> Diviso celular
Aps a ordem de inicio de mitose da fase G1, surge uma protena 34 fosforilada (pp34),
mas que se encontra em estado inactivo. Vai ocorrer a sntese de G1-Ciclina, a pp34 vai
ficar agarrada a esta G1-Ciclina, dando como que uma ordem para ocorrer a passagem
fase S, na fase S a pp34 vai ficar ento activa, mas como se d depois a degradao da
G1-Ciclina, entramos na fase G2 onde a pp34 est novamente inactiva, aqui ocorre a
sntese da M-Ciclina que vai ter a pp34 inactiva agarrada, surge depois o factor de
inicio de mitose, ocorre a degradao da M-Ciclina e inicia-se depois um novo ciclo.

#3
Existe um estmulo; que pode por exemplo ser: factores de crescimento, hormonas,
toxinas ou alteraes de temperatura. Este estimulo vai ento incidir sobre um receptor
(como por exemplo uma protena inserida numa camada bi-lipidica de uma membrana
celular), mas que vai ento passar do receptor para um regulador e depois para uma
enzima, esta faz com que o ATP passe a cAMP ( considerado o 2 sinal) e ento d
origem a uma resposta, que pode ser de movimento, de diviso celular (como o
esquema da mitose), de secreo ou de alterao metablica.

Nenhuma das 3 teorias (cadeias leves e pesadas) resolvia a situao!

Vai ento existir uma decalage, que vai permitir que a resposta final da imunoglobulina
se multiplique.
H regies constantes e h tambm regies variveis.
Variao muito grande, inserem-se assim na membrana.
H um sistema que est situado no cromossoma 6, de major compatibilidade.
Genes polimorfos, cada gene tem uma variabilidade no seu locus de cerca de 10 a 50
alelos.
A compatibilidade feita entre o locus e o seu gene.

O sistema de histocompatibilidade as protenas.

A ordem das classes vai ser II, III e I.
Classe I:
- um grupo que est muito ligado s protenas, histocompatibilidade, problema
dos transplantes.
- So aquelas protenas que nos permitem que o organismo reconhea o que
seu e o que estranho.
*para evitar a possibilidade de rejeio ao efectuar um transplante so dadas drogas s
pessoas.
Classe II:
- Esto ligados aos motivos antignicos que esto na parede dos linfcitos B e
tambm nos macrofagos.
Classe III:
- Protenas do complemento

C2 e C4 => cascata do complemento

21 hidroxilase -> se h um dfice, aparece uma doena chamada de hiperplasia
congnita das supre-renais, h uma teraputica para esta doena, deve de ser feita antes
de estar definido o sexo do feto.
Citokinas TNFA -> factor necrsito tumoral
Linfokinas TNFB

Oncongenes
Factores de crescimento.
Compreender os sinais para a clula ser normal, os sinais so os factores de
crescimento. Os oncongenes entram as clulas.
Os oncongenes so como um acelerador e os genes supressores so como um travo!
H 4 tipos de factores de crescimento: classes I, II, III, IV.
* I => EGF, factor de crescimento epidrmico.
Hormona de crescimento.
Heritropoetina
Factor de crescimento derivado das plaquetas.
*II => receptores hormonais.
(tanto I como II esto superfcie da clula na membrana)
*III => SRC
Ras
(so transdutores e esto no citoplasma da clula)
*IV => factores de transcrio
(esto a nvel dos cromossomas, dentro do ncleo das clulas)
Myc-p53
Myb-RB (gene supressor)

(Aula 13)
ADN do vrus do sarcoma de Rous gene SRC enzima de restrio insere-se o
gene do vrus no genoma do fago introduzindo-se na cpsula deste h multiplicao
daqui passam para um plasmideo este inserido numa bactria isolamento do
gene insero na clula animal clula transformada produo de protenas
O produto do oncogene ento uma protena pp60v-src. uma protena quinase, que
est na base da transformao da clula normal em tumoral. Fixa-se pela extremidade
NH2 ao interior da membrana da clula. A protena oncognica fosforila a tirosina.

1. Vrus do sarcoma de Rous do tipo selvagem ARN transcriptase inversa ADN

viral (gene v-src tirado do vrus)
2.Vrus do sarcoma de Rous mutanteARN
1+2 ADN+ARN (hibridao) h emparelhamento (RNA-DNA dmeros), excepto
uma parte do DNA (gene v-src) usa-se a cromatografia para distinguir estas duas
partes
Posteriormente, pegaram no gene v-src e juntaramno a ADN so de pintos. Houve
emparelhamento. Chegou-se concluso que o gene viral era ento de origem celular.
Quando h produo em excesso das protenasquinases, que induzido o desquelibrio
na clula, e o seu ciclo celular ento afectado.
Quando o vrus sem oncogene emparelha com o gene celularv-src, desaparecem os
intres porque no conseguem emparelhar, e vo estar os exes no genoma do vrus do
sarcoma de Rous.
Possiblidades para a alterao de genes, para viral:
1. clula normal + oncogene viral clula transformada
2. clula normalisolamento do oncogene celular adiciona-se o promotor
viralreinsero na clula normalclula transformada
3. clula normal sofre aco de um agente mutagnico ou cancergeno (raios
UV, produtos qumicos, vrus no oncognicos, etc) expresso
alteradaclula transformada
Experincia: fibroblastos cancergenos do rato isolamento do DNA adiciona-se
fosfato de clcio junta-se este ADN ao ADN normal introduz-se no rato e d
origem a um tumor
Por mais ciclos que se faa (passagens sucessivas), o problema est sempre no ADN
transformado inicial.
Os genes supressores do cancro, funcionam de uma forma autossmica recessiva
(ateno que isto uma comparao bastante forada). Assim, a perda de heterozigotia,

isto , a perda dos dois alelos ou da sua funo, provoca as alteraes no ciclo celular.
Assim, no plano celular, os genes supressores funcionam de uma forma recessiva.
Retinoblastoma- possui duas formas. Uma forma hereditria, com 1 cromossoma 13
normal e outro anormal (maior probabilidade de originar um tumor), e uma forma
espordica, em que os dois cromossomas 13 esto normais.
Tumor de Wilms e retinoblastoma, resultam de uma microdeleco (diagnstico pelo
FISH) ou deleco no cromossoma 13.
Quando as clulas cancergenas fazem parte do prprio endotlio, acaba por entrar na
corrente, levando assim metastizao. Os tumores benignos esto mais organizados
(capsulados) que os malignos, sendo estes ltimos que metastizam.
S. Prader-Willi e S. Angelman, acontecem por microdeleco no cromossoma15,
dissomia uniparental ou ainda alteraes ao nvel do inprinting.
Dissomia mono ou uniparental- receber 2 cromossomas homlogos ou iguais, do lado
paterno ou materno, e no um de cada. A dissomia pode ser uma isodissomia (de 1 dos
cromossomas apenas) ou heterodissomia (dos 2 cromossomas).
Alteraes ao nvel do inprinting, provocam alteraes principalmente ao nvel da
metilao.