CONGRESSO BRASILEIRO DE FISIOTERAPIA DERMATO FUNCIONAL

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MODALIDADE PSTER

EFEITO DO GERADOR DE ALTA FREQUNCIA NO CRESCIMENTO

BACTERIANO IN VITRO
Maria da Glria Karan Marquetti1; Joo Afonso Ruaro2, Andersom Ricardo Frz3
1

Faculdade Anglo-Americano (FAA).

Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN), Faculdade de Cincias da
Sade do Trairi (FACISA).
3
Universidade Estadual do Centro-Oeste (UNICENTRO).
2

RESUMO
Introduo: O gerador de alta frequncia um recurso que vem sendo utilizado na
fisioterapia como auxlio no tratamento de leses cutneas, por possuir efeito
cicatrizante, trmico, analgsico e anti-inflamatrio, os quais so importantes para o
tratamento de leses da pele. Apresenta tambm ao bactericida e antissptica,
sendo utilizado em leses dermatolgicas infectadas por bactrias e fungos.
Objetivo: Verificar o efeito bactericida do gerador de alta frequncia sobre a cultura
de Staphylococcus aureus.
Tipo de estudo: Estudo analtico experimental in vitro.
Mtodo: 36 placas de Petri foram inoculadas com S. aureus e divididas em 6
grupos: 4 tratados (G5-15, G5-10, G3-15 e G3-10) e 2 controles (GC3 e GC5). O G515 e o G5-10 foram tratados 5 vezes por semana durante 15 e 10 minutos
respectivamente; j o G3-15 e o G3-10 foram tratados 3 vezes por semana durante
15 e 10 minutos respectivamente. No tratamento foi utilizado o gerador de alta
frequncia na intensidade 10, tcnica de faiscamento com eletrodo standard. A
proliferao ou no de colnias de bactrias foram submetidas ao teste exato de
Fisher (p<0,05).
Resultados: Aps o 15 dia de tratamento foram realizadas repicagens para verificar
se houve crescimento de novas culturas, observando-se que apenas o G5-15
mostrou-se eficaz quando comparado ao GC5 (p=0,0039).
Concluso: O gerador de alta frequncia apresentou efeito bactericida em cultura
de S. aureus in vitro em uma frequncia semanal de 5 vezes por semana aplicado
por 15 minutos dirios.
Fontes de financiamento: No consta.
Descritores: Modalidades de fisioterapia; Oznio; Crescimento bacteriano;
Staphylococcus aureus.
INTRODUO
O gerador de alta frequncia um recurso que vem sendo utilizado na
fisioterapia como auxlio no tratamento de leses cutneas. Possui efeito
cicatrizante, trmico, analgsico e anti-inflamatrio, os quais so importantes para o
tratamento de leses da pele. Apresenta tambm ao bactericida e antissptica,
sendo utilizado em leses dermatolgicas infectadas por bactrias e fungos1,2,3.
O gerador produz correntes alternadas que podem trabalhar com frequncia
entre 100.000 e 200.000 Hz e intensidade na ordem de 100 mA. Alm disso, o
aparelho possui diferentes tipos de eletrodos de vidro, com gs ou ar rarefeito em
seu interior que determinam a fluorescncia. A funo do gs conduzir o fluxo da
corrente, enquanto a fluorescncia causada pela passagem da corrente que ioniza
as molculas do gs. Em decorrncia desse processo e da passagem de ondas

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eletromagnticas pelo ar h a formao de oznio (O3) na superfcie do eletrodo1,4,5.

O O3 estimula a produo de citocinas, ativa os linfcitos T, melhora a
oxigenao e o metabolismo celular atravs da vasodilatao e produz um aumento
da resposta enzimtica antioxidativa, contribuindo, assim, de forma efetiva no
tratamento de leses cutneas causadas por diferentes microrganismos1,6,7.
As bactrias so os organismos mais sensveis ao O3, o que garante a sua
eficcia bactericida. Ele atua primeiramente sobre a membrana bacteriana e causa a
perda da atividade enzimtica celular normal, a partir da ocorre uma mudana na
permeabilidade da clula que leva a morte da bactria. Este processo ocorre
associado lise celular4.
O Staphylococcus aureus (S. aureus) uma bactria do grupo dos cocos
gram-positivos, encontrada em pessoas saudveis, principalmente na pele e nas
fossas nasais. Porm, pode causar infeco em leses cutneas, alm de causar
infeces graves como pneumonia, meningite, endocardite, septicemia e at mesmo
infeces sistmicas, podendo levar a morte. O S. aureus responsvel por 30%
das infeces hospitalares e piognicas8,9, e as infeces causadas por esta
bactria apresentam alto ndice de morbidade e mortalidade tanto em casos
hospitalares como domiciliares. um microorganismo bastante resistente, que
possui a caracterstica de polimorfismo, o que dificulta o controle da infeco e faz
com que os antibiticos antes utilizados para combat-la hoje no sejam to
eficazes, dificultando o seu tratamento10.
O aumento da resistncia das bactrias s drogas antibiticas gera a
necessidade de desenvolver novos meios bacteriostticos e bactericidas que
colaborem com a teraputica de indivduos infectados. No entanto, h poucos
trabalhos que forneam dados prticos sobre o efeito bactericida da alta frequncia.
Assim, o objetivo desse trabalho foi verificar se o gerador de alta frequncia possui
efeito bactericida em culturas de S. aureus.
MTODOS
Esta pesquisa, realizada no Laboratrio de Microbiologia da Faculdade AngloAmericano (Foz do Iguau, Paran), caracteriza-se como um estudo analtico
experimental in vitro, com uso do gerador de alta frequncia em cultura de S. aureus.
Inicialmente foi preparado Agar Manitol como meio de cultura, utilizando-se
111 g para 1000 mL de gua deionizada estril. Os contedos foram levados
autoclave at atingir 121C. Ento a autoclave foi regulada em temperatura mdia,
por 15 minutos.
Aps ser retirado da autoclave, o Agar, em estado lquido, foi distribudo em
36 placas de Petri, estreis e descartveis, de 5 cm de dimetro. Essa distribuio
ocorreu dentro de uma capela com luz ultravioleta para evitar contaminao. Depois
de esfriar e atingir a forma slida, as placas foram fechadas e colocadas em estufa
por 24 horas, para se avaliar a esterilidade da placa.
Posteriormente, foi inoculada a bactria S. aureus dentro da capela
devidamente esterilizada. A inoculao foi realizada na forma estriada central,
utilizando uma ala de 1 microlitro descartvel estril.
As placas de Petri permaneceram armazenadas na estufa a 35C, simulando
a temperatura da pele, em um recipiente com gaze e gua deionizada para manter o
ambiente mido. Aps 48 horas da inoculao as placas foram fotografadas e foi
iniciado o tratamento proposto.
As 36 placas de Petri inoculadas com S. aureus foram divididas em 6 grupos:
Quatro grupos foram tratados (G5-15, G5-10, G3-15 e G3-10). O G5-15 e o

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G5-10 foram tratados 5 vezes por semana durante 15 e 10 minutos respectivamente,

enquanto o G3-15 e o G3-10, 3 vezes por semana durante 15 e 10 minutos
respectivamente. Todos os grupos tratados receberam 15 intervenes do uso do
aparelho de alta frequncia.
Dois grupos foram utilizados como controle (GC5 e GC3), no recebendo
qualquer interveno. O GC5 foi utilizado para acompanhar os grupos tratados 5
vezes na semana, enquanto o GC3 para os tratados 3 vezes na semana.
Para o procedimento de interveno proposto, foi utilizado o aparelho gerador
de alta frequncia modelo Plus, fabricado pela empresa Tone Derm, com o eletrodo
standard, com gs neon em seu interior. Aplicou-se a tcnica de faiscamento, na
qual o eletrodo posicionado a milmetros de distncia da placa, causando a
formao de fascas, com intensidade 10, a qual representa uma tenso de 100%
para formao de O32.
Aps a 15 aplicao do procedimento experimental foram realizadas
repicagens em novas placas estreis, repetindo os procedimentos de esterilizao.
Estas repicagens tiveram a finalidade de verificar a proliferao das bactrias, e
assim observar o efeito do aparelho sobre as culturas. Aps 48 horas estas novas
placas foram observadas e fotografadas para verificar a ocorrncia de proliferao
das bactrias.
Para a anlise foi considerado a proliferao ou no de colnias de bactrias.
Os dados foram agrupados aos pares e submetidos ao teste exato de Fisher do
programa GraphPad InStat. Considerou-se o nvel de significncia de 5% (p<0,05).
RESULTADOS
A tabela 1 apresenta o nmero de placas que tiveram e que no tiveram
proliferao de S. aureus de acordo com a frequncia semanal e tempo da
interveno, alm dos resultados dos grupos controle.
Tabela 1 Crescimento bacteriano por frequncia semanal e tempo de interveno
10 minutos
15 minutos
3x/semana 5x/semana Controle 3x/semana 5x/semana Controle
Nmero de
placas
2
4
6
3
0
6
com proliferao
Nmero de
placas
4
2
0
3
6
0
sem proliferao
Quando comparados pares de grupos observou-se diferena significativa do
uso do gerador de alta frequncia em S. aureus apenas na relao entre o G5-15
com seu grupo controle (GC5). Nas demais comparaes nenhuma frequncia
semanal ou tempo de exposio mostrou-se significativa (Tabela 2).
Tabela 2: Diferena na proliferao de S.
aureus entre pares de grupos
Grupos

G5-15 X GC5

0,0022*

G5-10 X GC5

0,4545

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G3-15 X GC3

0,1818

G3-10 X GC3

0,0606

G5-15 X G5-10

0,0606

G3-15 X G3-10

1,0000

G5-15 X G3-15

0,1818

G5-10 X G3-10

0,5671

significativo

DISCUSSO
Sabe-se que durante o uso do gerador de alta frequncia existe a formao
de O3 na superfcie de seu eletrodo1,4,5. O O3 tem sido utilizado para uma ampla
gama de tratamentos, como por exemplo em disfunes da coluna11, na preveno
de complicaes ps-operatrias12,13, estimular o reaparo tecidual13,14, ou ainda
como coadjuvante no tratamento de enfisema pulmonar15, sempre obtendo
respostas positivas.
H tambm que se relatar que o O3 pode ter efeitos nocivos, pois ainda no
h tratamentos totalmente padronizados nem avaliados toxicologicamente16. Alm
disso, tambm no h consenso sobre a forma de aplicao do O3, pois observa-se
desde a aplicao direta do gs (ozonoterapia)14, uso de gua ozonizada7 ou a
associao do O3 com leos (leo ozonizado)14.
Outrossim, o que tem sido observado como seu maior espectro de ao o
seu efeito bactericida e/ou fungicida, como revelaram os estudos de Biaoszewski et
al.17 e Polydorou et al.18, inclusive associado ao oxignio hiperbrico19. Entretanto,
este efeito ainda pobremente ilustrado, principalmente quando uso do O3
atribudo ao uso do gerador de alta frequncia, principal objetivo da presente
pesquisa.
Nas pesquisas com seres humanos, o uso do gerador de alta frequncia
apresentou resultados satisfatrios em lceras de presso5. Tambm foi observada
atividade fungicida como tratamento complementar aos frmacos convencionais
para tratamento das onicomicoses20 e para tratamento de verruga ungueal4. Para
verruga ungueal foi aplicado um protocolo de 3 intervenes dirias, de 15 minutos
cada, durante 3 meses4, enquanto para as onicomicoses o tratamento foi por 12
meses, mas sem descrio do protocolo20.
J nas pesquisas com modelos animais, o estudo com o gerador de alta
frequncia demonstrou ser efetivo na reparao de feridas cutneas em modelos
experimentais em ratos, quando aplicado com uma intensidade de 80%, por 120
segundos, durante 7 dias21. Com o uso direto do O3, um estudo experimental com
coelhos demonstrou seu efeito bactericida, reduzindo a reao inflamatria pela
reduo da carga bacteriana da endoftalmite causada por S. epidermidis aps
aplicao intravtrea de soluo salina ozonizada22.
Outro estudo que demonstrou o efeito bactericida do O3 descreveu o uso
deste gs como agente para desinfeco de gua, o qual agiu sobre bactrias,
fungos e vrus, alm de ter reduzido totalmente a proliferao de S. aureus7, o que
est de acordo parcial com os resultados do presente estudo.
Alm deste, em um modelo experimental in vitro, para avaliar o efeito de
gases sobre o crescimento bacteriano, o O3 demonstrou-se superior para inibir este
crescimento quando comparado a outros gases23.

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J o seu efeito fungicida in vitro pode ser observado em cultura de Candida

tropicalis, as quais foram submetidas a uma exposio da alta frequncia com a
tcnica de faiscamento, utilizando o mesmo modelo do equipamento gerador da
presente pesquisa, mas com intensidade 8. Os autores observaram uma inibio no
crescimento em 90% das placas, quando expostas 5 minutos por dia1. Entretanto,
estes resultados no permitem a comparao com a presente pesquisa, pois os
microrganismos utilizados foram distintos.
Na literatura os resultados sobre o uso do gerador de alta frequncia e do
oznio limitam-se aos estudos in vitro ou com modelos experimentais ou estudos de
caso. Entretanto, pode-se observar que, quando se trata de estudos in vitro estes
resultados aparecem em poucas, e at mesmo em uma nica interveno1,22,23.
Enquanto em seres humanos, principalmente nas leses fngicas, so necessrios
meses de aplicao4,20.
Na presente pesquisa o nico grupo que apresentou resultado bactericida
significativo foi o grupo G5-15. Tal fato pode ser justificado por este ser o grupo que
recebeu a interveno com menor intervalo entre as abordagens associada ao maior
tempo dirio de aplicao. Porm, outro fator observado posteriormente, no nico
trabalho que aplicou o gerador de alta frequncia in vitro1, foi o uso de uma folha de
papel alumnio abaixo da placa de Petri durante a aplicao do gerador de alta
frequncia. Segundo os autores1 o uso do papel alumnio melhora a condutibilidade,
j que o vidro no um bom condutor eltrico, assemelhando-se, assim, a pele.
CONCLUSES
O aparelho de alta frequncia apresentou efeito bactericida em cultura de S.
aureus in vitro aps 15 intervenes, em uma frequncia semanal de 5 aplicaes,
com tempo de exposio diria de 15 minutos.
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