UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE

MEXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES
CUAUTITLAN CAMPO-1

HERIDAS

LA PIEL

La piel es el mayor rgano del cuerpo, tiene la

caracterstica de ser elstica, spera, impermeable y
regenerativa. Proporciona una barrera mecnica muy eficaz
frente a una invasin parasitaria

FUNCIONES DE LA PIEL

Regula la temperatura corporal

Previene la deshidratacin
Proporciona una barrera mecnica, frente a los agentes
externos
Produce Vit. D
Participa en la respuesta inmunitaria
Proporciona contacto sensorial con el entorno

BARRERAS DE LA PIEL

Pocos microorganismos tienen la capacidad innata de

penetrar la piel
La continua descamacin de las clulas epiteliales
escamosas externas elimina los microorganismos que
consiguen adherirse
Una cierta sequedad de la piel permite un crecimiento
microbiano lento
Una acidez moderada inhibe el crecimiento de muchos
microorganismos
La microbiota normal de la piel acta antagnicamente
frente a muchos patgenos
El cebo liberado por las glndulas sebceas forma una
pelcula protectora sobre la superficie de la piel.

CAPAS DE LA PIEL
La piel presenta tres capas que son:

EPIDERMIS. Es la capa ms superficial de la piel.

DERMIS Est por debajo de la anterior; en ella se encuentran

las glndulas sudorparas y sebceas, as como la raz del pelo.

HIPODERMIS

Es la capa ms profunda de la piel y en ella se

encuentran los vasos sanguneos que nutren a toda la piel.

LA PIEL

LA EPIDERMIS

La epidermis es un epitelio escamoso, estratificado

y queratinizado que presenta las siguientes
subcapas:
Estrato corneo
Estrato lucido
Estrato granuloso
Estrato espinoso
Estrato germinativo

LA DERMIS
La dermis es una capa de tejido conectivo denso
subyacente vascular que contiene estructuras
especializadas como las glndulas cebceas y
sudoriparas, folculos pilosos derivados del
epitelio y los receptores sensoriales del Sistema
Nervioso

HIPODERMIS O TEJIDO
SUBCUTANEO
Esta conformado por tejido conectivo
laxo y cantidades variables de grasa,
une la dermis con la estructura
subyacente

Lesiones en la piel y en el
Sistema Muscular

La piel puede resultar lesionada por mltiples

causas dando lugar a varios tipos de lesin en
funcin de la fuerza agresora y la profundidad de
la lesin:
Heridas.
Contusiones.
Traumatismos.
Quemaduras y causticaciones.

HERIDAS
La herida es una ruptura de la
superficie externa o interna del
cuerpo que produce separacin
de tejidos y est causada por una
fuerza o agente lesionante
externo

Herida
Es toda prdida de continuidad en la piel,
secundaria a un traumatismo.

Como consecuencia de la agresin de este

tejido existe riesgo de infeccin y
posibilidad de lesiones en rganos o tejidos
adyacentes: msculos, nervios, vasos
sanguneos, etc.

Las heridas pueden ser graves

en funcin de una o varias de
estas caractersticas:

Las heridas pueden ser graves en funcin de

una o varias de estas caractersticas:
Profundidad.
Extensin.
Localizacin.
Suciedad evidente, cuerpos extraos o
signos de infeccin.

Toda herida es un foco de infeccin

en potencia, an aquellas que
parecen limpias tienen en su interior
grmenes de contaminacin que han
llegado ah desde la piel, la ropa o
por el agente traumatizante. Ante
grandes superficies traumatizadas,
la infeccin est presente en
accidentes de toda ndole, en
especial los producidos en la va
pblica.

INFECCION
Es
un
estado
de
enfermedad
provocado por agentes patgenos y/o
toxinas. Los signos ms usuales de la
infeccin :
Suelen ser la inflamacin y el estado
febril general que evidencia el
enfermo.
Toda infeccin requiere
tratamiento mdico.

inmediato

CLINICA

DE

LAS

HERIDAS

Determinar la localizacin, la extensin

de la herida, la presencia de edemas, el
dao de los tejidos subyacentes.
Las heridas que se han infectado
presentan secrecin purulenta, a veces
con
repercusin
general
(fiebre,
linfangitis, etc.).

CLASIFICACION DE LAS HERIDAS

ABIERTA: Es aquella cuyo labios se hallan separados

ARTICULAR: Es aquella herida que abre una articulacin

ASEPTICA: Es una herida que no est infectada con

microorganismos patgenos

ENSEDAL: Es una herida penetrante con abertura de

entrada y salida en un mismo lado

ENVENENADA: Herida complicada con la introduccin

de un veneno mineral, orgnico o ponzooso

LACERADA: Herida con desgarro de los tejidos

CLASIFICACION DE LAS HERIDAS

INCISA: Herida producida por un

instrumento cortante
LACERADA: Herida con desgarro de los
tejidos
PENETRANTE: Herida producida por un
instrumento punzante, que deja abierta una
cavidad del cuerpo o que atraviesa de parte
a parte.

Por arma de fuego: Herida por contusin producida por un

proyectil

POR ARRANCAMIENTO: Herida en la cual es separado por

traccin violenta un miembro o segmento del miembro

SEPTICA: Herida infectada con grmenes patgenos

SUBCUTANEA: Herida de una parte u rgano subcutneo en la

que solo existe una pequesima abertura en la piel por la que se
ha producido

TRAUMATICA: Herida penetrante del trax, por la que entra y sale

el aire

CLASIFICACION DE LAS HERIDAS

Las

heridas pueden ser clasificadas en tres

tipos fundamentales :

HERIDAS QUIRURGICAS
HERIDAS NO QUIRURGICAS
POR QUEMADURAS

HERIDAS QUIRURGICAS
Estas
heridas
son
infectadas
por
microorganismos introducidos al tejido durante
los procesos operatorios y cuyos orgenes son
la flora cutnea residente del paciente y los
microorganismos externos.
Algunos factores predisponentes de heridas
infectadas como la edad avanzada, los estados
de mala nutricin, focos de infeccin cercanos,
enfermedades del paciente como la diabetes
mellitus, deficiencia renal, etc.

Heridas Quirrgicas

Muchas heridas infectadas aparecen de 3 a 7 das

post-ciruga; algunos en forma temprana (24-48
horas)
son
comnmente
causados
por
Streptococcus del grupo A o especie de
Clostridium.
La infeccin causada por Staphylococcus aureus
generalmente de 4-6 das y de una semana o ms
para los grmenes Gram negativos.

HERIDAS NO QUIRURGICAS
Son comunes en infecciones nosocomiales
e incluyen: sitios de inyeccin, ulceras
cutneas, lceras de decbito, resultado de
enfermedades
oclusivas
venosas
o
arteriales.
En general los patgenos son similares a
las infecciones de heridas quirrgicas.

HERIDAS POR QUEMADURAS

El paciente quemado se encuentra dentro de los sujetos
comprometidos, que por su situacin son fcilmente
colonizados por organismos oportunistas, propios de su flora
o provenientes de otras fuentes.
Las bacterias de mayor incidencia en pacientes quemados
son:
Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Staphylococcus
epidermidis y Enterobacterias como E.coli, Enterobacter
agglomerans, Serratia liquefaciens, Proteus mirabilis, etc.

NATURALEZA DE LAS HERIDAS

Las heridas producidas por objetos contundentes se

caracterizan por presentar tejidos desvitalizados, edemas y
bordes irregulares
Las heridas producidas por objetos cortantes pueden ser
ms profundas y sangrar ms que la anterior, se caracteriza
por tener bordes rectos; puede llegar a vasos sanguneos,
tendones y nervios
Las heridas por abrasin son generalmente superficiales, se
caracterizan por internar la epidermis y a veces la dermis,
pueden contener cuerpos extraos que probablemente estn
contaminados

Las heridas por mordedura de animal o de

humano son de alto riesgo para contraer una
infeccin.

En toda herida relacionada con la mordedura reciente de un animal,

con mayor frecuencia perro, gato y en ocasiones roedores.

El riesgo de infecciones de piel y partes blandas est relacionado con

la flora bacteriana que coloniza la mucosa oral del animal.
Es importante averiguar datos tales como la pertenencia y el tipo de
animal, as como las circunstancias en que se produjo la mordedura.
Es un accidente relativamente frecuente en pediatra

LOS PROCEDIMIENTOS QUIRRGICOS SON

CLASIFICADOS EN CUATRO CATEGORAS:
INCISION
LIMPIA

incisin
no
traumtica carente de infeccin que no es
llevada a cabo en los sistemas respiratorio,
digestivo, gnito-urinario o farngeo.

Dichas incisiones son electivas, suturadas

y sin drenaje.

De ocurrir infeccin, ella se debe

principalmente
como
resultado
de
contaminacin en el aire o irregularidades
en la asepsia.

Su incidencia es menor del 5% y los

agentes patgenos son usualmente grampositivo (ej. Estafilococos).

INCISIONES LIMPIAS CONTAMINADAS

Procedimientos quirrgicos llevados a cabo en los
sistemas respiratorio, digestivo, o gnito-urinario sin
contaminacin aparente; o incisiones que requieren
drenaje.
Esta incisin limpia tiene un ndice de infeccin
anticipada de 8%-15%.
El origen principal de esta infeccin se encuentra en el
mismo paciente.
Infeccin activa no se encuentra presente previo a la
operacin, pero la misma implica una penetracin a
travs de reas del cuerpo normalmente colonizadas.
Los agentes patgenos son usualmente gram-positivo
(ej. poli-microbianas).


HERIDAS
CONTAMINADAS

Heridas
traumticas abiertas, a las que se efectan operaciones
donde no es posible observar estrictas normas de
esterilidad, e incisiones frente a zonas donde est
presente inflamacin aguda (sin pus) en la que se
presenta un derramamiento del contenido de alguna
vscera. El ndice de infeccin flucta entre 15% y 30%

HERIDAS SUCIAS E INFECTADAS Incluyen

aquellas donde se encuentra pus o alguna vscera
perforada, as como las heridas traumticas de larga
de larga evolucin.
La definicin de esta clasificacin
sugiere que los organismos que provocaron la infeccin
post-operativa estaban presentes en el campo
quirrgico antes del procedimiento. Las posibilidades
de adquirirlas son mayores del 30% y pueden provocar
una bacteremia.

FORMAS Y PRESENTACION DE
HERIDAS
Infecciones de Heridas Exgenas : Son aquellas que

estn asociadas con traumatismos o ulceras por decbito,

mordeduras de animales o de humanos,, quemaduras o
cuerpos extraos en la piel o en las membranas de las
mucosas
Infecciones de Heridas Endgenas abscesos : Se
asocian con apendicitis, colecistitis, infecciones dentales,
osteomielitis, artritis spticas, sinusitis y muchas otras
infecciones internas. Muchas de estas infecciones son
hospitalarias, secundarias de procedimientos invasivos,
manipulaciones quirrgicas o colocacin de prtesis.

LAS QUEMADURAS
Son lesiones de los tejidos orgnicos producidos por
agentes calientes ya sean slidos, lquidos o gaseosos.
Tambin pueden ser producidos por hielo, agentes
qumicos custicos (cidos y bases fuertes), el paso de
una corriente elctrica o la exposicin a ciertas
radiaciones.

CLASIFICACION DE LAS
QUEMADURAS
Esta basada en principio en la profundidad de las mismas
y en la superficie afectada por lo que las quemaduras se
clasifican en:
Quemaduras de primer grado: Afectan slo de forma
leve y superficial a la capa ms externa de la piel (la
epidermis)
Quemaduras de segundo grado: Se afecta a la
epidermis en todo su grosor
Quemaduras de tercer grado: Se alcanza ya a la
dermis produciendo costras oscuras a consecuencia de la
necrosis del tejido

Quemaduras de cuarto grado: Se altera el tejido

situado inmediatamente por debajo del tegumento
. Quemaduras de quinto grado: Se afecta tambin al
msculo
.
Quemaduras de sexto grado: Este tipo de
quemadura es la ms grave y peligrosa ya que se
afecta el tejido seo

COLONIZACION
En ocasiones la flora normal puede
provocar alguna infeccin cuando las
defensas normales sufren un desequilibrio
inmunomoduladora, antimicrobiana, un
dispositivo invasivo, es as como algunos
pacientes
adquieren
infecciones
intrahospitalarias o nosocomiales.

Primeros Auxilios
En rasgos generales podemos hacer lo
siguiente:
1. Lavar la zona lesionada
2. Secar y colocar un antisptico (a
base de iodopovidona)
3. Cubrir con un apsito
4. Vendar
5. Controlar el sangrado.
6. De ser necesario concurrir al mdico

TOMA DE MUESTRA
- Recolectar muestras cutneas o vesiculares
- Aspirar el lquido o pus de la profundidad de la herida con
una aguja y jeringa estriles
- Descontaminar el sitio con jabn quirrgico y un antisptico
suave
- S se prev una demora en el procesamiento de ms de 30
minutos, la muestra debe transferirse a un envase anaerobio
- S es difcil de obtener material con aguja y jeringa, debe
usarse un hisopo y en ocasiones es necesario separar las
mrgenes cutneas adyacentes. El hisopo debe colocarse de
inmediato en un envase para transporte adecuado
(anaerobio) o inocularse directamente en medios de cultivo
para anaerobios segn las circunstancias

El material de un absceso no drenado

anteriormente debe de contener el o los
agentes etiolgicos de la enfermedad en
la
mayor
parte
de
los
casos.
En cambio una herida abierta, ulcera o
fstula se contamina a menudo con
microorganismos cutneos de la mucosa
o del medio ambiente.

DIAGRAMA DE TRABAJO
HERIDAS

DIAGNOSTICO DE LAS INFECCONES

BACTERIANAS EN HERIDAS

FLORA COMENSAL Y BACTERIAS

PATOGENAS EN MUESTRAS DE HERIDAS

FLORA BACTERIANA NORMAL DE

PIEL

Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus aures
Especies de micrococcus
Especies no patgenas de Neisseria
Estreptococos -hemolticos y no hemolticos
Difteroides
Especies de Propionibacterium
Especies de Peptoestreptococcus
Pequeas cantidades de otros m.o. (Especies de
Candida, Especies de Acinetobacter, etc.)

BACILOS GRAM(+) FORMADORES

DE ESPORAS

GENERO Bacillus
- Bacilos aerobios G (+), grandes (1x3 a 4 m)
- Forman cadenas largas
- Esporas centrales, subterminales o terminales
(segn la especie)
- m.o. saprofitos, la mayora no patgenos,
- Viven es suelo agua, aire y vegetacin
- Presentan hemolisis

GENERO clostridium
- Bacilos anaerobios obligados, gram (+) ,grandes.
- Motilidad (+), flagelo pertrico
-Espora ms ancha qu el gnero Bacillus
- Crecimiento en medio anaerobio, algunas especies
toleran el aire.
- Incapacidad de utilizar O2 como aceptor final de e- Carecen de citrocromo y cotocromooxidasa
- No pueden desdoblar el H2O2 debido a la ausencia
de catalaza y peroxidasa

Clostridium

PRICIPALES PATGENOS DE BACILOS

GRAM (+) FORMADORES DE ESPORAS

GENERO Bacillus
Bacillus cereus
- Se desarrollan en alimentos
- Produce una toxina o toxina emetica causando
envenenamiento alimentario.
- Causa importante de infecciones oculares ,
queratitis grave y endoftalmitis
- Se introducen al ojo por cuerpos extraos
relacionados con traumatismos

Bacillus anthracis
- Principal patgeno de este genero
- Causante del ntrax (principalmente en hervivoros, en
humanos se da en forma accidental).
- En humanos la infeccin generalmente se adquiere
por entrada de esporas a travs de piel lesionada
(ntrax cutneo) o inhalacin de esporas que
finalmente llegan a pulmn (ntrax respiratorio)
- Las esporas germinan en tejidos del sitio de entrada
- Se propagan va linftica a la sangre y se multiplican
libremente en sangre y tejidos

MECANISMO DE PATOGENICIDAD
Bacillus anthracis
- La protena del ntrax se constituye de 3 protenas:
- Ag protector (AP)
- Factor letal (FL)
- Factor edema (FE)
- AP se fija a receptores celulares del huesped
- Despues de la activacin proteoltica forma un canal de
membrana que media la entrada de FE y FL a la clula.
- FE es una adenilato ciclasa y junto con AP forma la
txina edema. FL + AP forman la txina letal(este es el
fctor mayor de virulencia.)
- Las toxinas estn codificadas en un plasmido

Bacillus

ANAEROBIOS

Bacterias que requieren tensiones bajas de O2 para crecer

La suceptibilidad a este gas vara segn la especie
a) Anaerobios estrictos: Mueren al poco tiempo de entrar en
contacto con el O2
b) Aerotolerantes: Viven hasta por das sin multiplicarse (la
mayora de las bacterias con significancia clnica pertenecen a
este grupo)
Anaerobios con significancia clnica se dividen en 5 grupos
Cocos G+
- Baclios G+ esporulados
- Bacilos G Cocos G- Baclios G+ no esporulados
Su presencia en reas muy aireadas se debe a la presencia de
micronichos protegidos del medio ambiente y por consumo de O2
que hacen las bacterias aerobias coexistentes

ANAEROBIOS

En piel se encuentran en el interior de folculos pilosos y de las

glndulas sebaceas (principalmente Propionibacterium acnes)
En vagina el principal m.o. Es Lactobacillusspp. Otros son:cocos
anaerobios, Bacteroides, Prevotella y Clostridium.
En tracto G.I., se encuentran fundamentalmente en I.G. (alcanzan
las 1011UFC/mL.) y constituyen 9899% del total de m.o. en este
tracto.
Principales m.o. Anaerobios presenten en tracto G.I.: Bacteroides,
Peptoestreptococos y Clostridium
En intestino, el papel fisiolgico que cumplen es:
Proteger de la colonizacin e infeccin por patgenos
Intervienen en la sntesis de vitamina K
Desconjugacin de cidos biliares
Produccin de compuestos nitrogenados
Alteracin de frmacos

ANAEROBIOS
PATOGENIA

En el desarrollo de infeciones por anaerobios intervienen factores

bacterianos y propios del huesped.
a) FACTORES BACTERIANOS
- Componenetes del m.o. Que condicionan la virulencia, tales
como cpsula fimbrias, protenas de pared, LPS, enzimas y
txinas
- Las toxinas determinan los cuadros clnicos especficos
producidos por clostridium (C. botulinum, C. perfringens, C.
tetani, C.difficile)
- Ejercen efecto sinrgico con agentes aerobios
- la flora asociada consume O2 y produce gas (lo cul reduce el
potencial redox y facilita el creciemiento de anaerobios)

ANAEROBIOS
PATOGENIA
b) FACTORES DEL HUESPED
- Lesiones en las mucosas
- Alteracin de los sistemas defensivos
- Modificacin del equilibrio bacteriano aerobios
anaerobios, con prevalencia de estos ltimos

ANAEROBIOS
SITIOS DE INFECCION

SNC:
- Produce diversas lesiones(meningitis abscesos tromboflebitis de
venas cerebrales)
- Desarrollo por contigidad a partir de infecciones de senos
paranasales, odo medio y mastoides
- Por inoculacin directa en acto quirrgico
- Traumatismo abierto
- Diseminacin hematogena desde focos a distancia
ORODENTALES
TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR
PLEUROPULMONARES

ANAEROBIOS
SITIOS DE INFECCION

INTRAABDOMINALES
- Por perdida de la integridad del tracto G.I. (Carcinoma de coln,
apendicitis, obstruccin ciruga previa, etc.)
GINECOLOGICAS
endometritis posparto, sepsis posaborto infeccin ginecolgica
posoperatoria
BACTERIEMIA
Producto de la ruptura de barreras cutneo-mucosas
PIEL Y TEJIDOS BLANDOS
Agentes causales ms frecuentes: Bacteroides, Prevotella,
porphyromonas, Fusobacterium, cocos G+ y clostridios
OSTEOMIELITIS
- Frecuentemente producida por Actinomyces israelii
- Localizacin: huesos de cara y columna dorsolumbar en un alto
porcentaje de los casos

CLOSTRIDIOS

Bacilos G+
Anaerobios estrictos
esporulados
Muy resistentes al medio ambiente
forman parte de la flora intestinal del
humano y animales
Cuadro clnico mediado por exotoxinas
(neurotoxinas, histotoxinas, enterotoxinas)

GENERO Clostridium
METABOLISMO Y CLASIFICACION

REACCIONES BIOQUIMICAS
Las reacciones B.Q. y sus productos establecen la
base para la identificacin de las especies
La capacidad para fermentar ciertos azucares es til
para diferenciar a las especies
Muchos clostridios atacan al los CHOS, protenas o
cidos nucleicos
La mayora de los clostridios producen grandes
cantidades de gas por fermentacin butrica

Fermentacin butrica (principalmente CO2 y H2)

Otras Pruebas B.Q. de diferenciacin son:
- reacciones en leche
- licuefaccin de gelatina
- Produccin de indol.
La caracterstica de fermentacin tumultuosa de la
leche por especies tales como C. perfringens se
debe a la formacin de un cogulo que se rasga por
el gas acumulado
Ciertos
Clostridios son predominantemente
proteolticos y otros son sacarolticos

GENERO Clostridium
METABOLISMO Y CLASIFICACION
Los Ags somticos y flagelares no han proporcionan un
sistema prctico de identificacin de especies o para su
divisin en serotipos (Bergeys Manual of determinative
Bactereology, 8th edition) agrupa a los clostridius de la
siguiente manera:
I)
Esporas subterminales.
a) No hidrolizan gelatina Grupo 1 C. colinum

b) Hidrolizan gelatina Grupo 2

- C. sordellii
- C. botullinum
- C. perfringens
- C. haemolyticcum
- C. septicum
- C. difficile

- C. novyi
- C. chauvoei

II)
a)
b)

III)

Esporas terminales
No hidrolizan gelatina Grupo 3 (No esta relacionado
a enfermedades)
Hidrolizan gelatina Grupo 4 C. tetani
Especies con requerimientos especiales para crecer
Grupo 5
( ninguno asociado a enfermendades)

GENERO Clostridium
Por su patogenicidad se dividen en dos grupos:
1) Incluye a C. botulinum y C. tetani
Son no invasivos y colonizan a individuos
afectados en sitios muy especificos produciendo
enfermedades iguales en animales y humanos
2) Grupo Gas gangrena.
Se diseminan via portal produciendo infecciones
locales y manifestaciones sistmicas como la
enterotoxemias.

GENERO Clostridium
PATOGENICIDAD

La potencia de las txinas producidas y la habilidad

invasiva permite una divisin de los clostridiums
patgenos en los siguientes grupos:
Clostridios neurotrpicos (C. tetani, C. botulinum)

Clostridios histotxicos (C. chauvoei, C. septicum, C

novyi, C. haemoliticum, C. sordellii, C. perfringens tipo
A y C) incluye clostridios productores de gangrena
gaseosa.

Clostridios que producen enterotoxemias (C.

perfringes tipo A E)
Clostidios que producen enfermedades
entricas que pueden ser inducidas por
antibiticos (C. difficile y C spiroforme)

GENERO Clostridium
DIAGNOSTICO GENERAL

Muestras
- Heridas tejidos o cadveres de humanos y
animales de muerte reciente ( C. perfringens, C.
septicum invaden rpidamente el animal postmortem)
- Para aislamientos cortes de tejido afectado o
lquidos en contenedores libres de aire, sistemas
comerciales, medios de transporte de Cary-Blair

Microscopia Directa
Tincin de Gram
Tcnica de anticuerpos Flourecentes
Se usa antisuero marcado comercialmente en
partcular C. chauvoei, C septicum, C. novyi y C.
sordellii

GENERO Clostridium
Procedimiento General de aislamiento

Se recomienda AS fresco o prereducido para

aislamiento de clostridius debido a que una vez
almacenado absorbe gradualmente O2.
Una placa de AS y otra de AMC deben inocularse
aerbicamente ya que estas pueden detectar
patgenos aerbicos presentes e indicar el grado
de contaminacin por anaerobios facultativos.

 Medios lquidos y semislidos con bajo

potencial redox, como el Caldo cooked meat y el
tioglicolato se usan para mantener puros los
cultivos clostridios (su uso es limitado en cultivos
primarios).

Estos medios deben calentarse a ebullicin para

expeler el O2 absorbido y enfriarse rpidamente a
37 C.

GENERO Clostridium
REACCIONES BIOQUIMICAS

En AYH los clostidios con actividad lecitinasa

producen opalescencia alrededor de las colonias
por su accin enzimtica sobre la lecitina

Los que producen lipasas generan una capa

perlada que puede cubrir la colonia y algunas
veces todo el medio

Cl. perfringes- Nagler test positivo en agar yema de huevo

perdida de la actividad de la Lecitinasa en el lado derecho, con
antitoxina, comparado con el agar limpio en el lado izquierdo, sin
antitoxina

Una emulsin de lpidos y un indicador

llamado Spirit Blue se incorporan en un
medio slido complejo.

 C. perfringens inoculado en medio de leche

tornasol produce la reaccin stormy clot (reaccin
tormentosa).
La lactosa del medio es fermentada por C.
perfringens produciendo cido que cogula la
casena e inducen un cambio de color de azul a rosa
El cogulo cido es roto por la formacin de gas
Sistemas comerciales miniaturizados como API
20A, ATB 32aA (Biomeriux) se han desarrollado
para identificar a los clostridios

GENERO Clostridium
CLOSTRIDIOS NEUROTOXICOS
Clostridium tetani
Agente causal del tetanos
libera tetanospasmina (neurotoxina) en la misma herida
generalmente sucia
En la herida el bacilo germina y se multiplica
Posteriormente la toxina se disemina va intraaxonal
retrgrada hasta llegar a SNC, donde bloquea neuronas
inhibidoras, provocando el cuadro clnico tpico
Ttanos neonatal se debe a la contaminacin del cordn
umbilical
Periodo de incubacin aproximado de 2 semanas

GENERO Clostridium
CLOSTRIDIOS NEUROTOXICOS
Clostridium tetani

CARACTERISTICAS GENERALES
- Su endospora es circular y terminal (aspecto de palillo
de tambor), resistentes a temperatura.
PATOGENIA
Produce las siguientes exotxinas:
- Tetanolisina: no parece tener significado patognico
- Tetanopasmina (neurotxina codificada por plasmidos)
responsable de los cuadros clnicos del ttanos
- La tetanospasmina una vez unida a gangliosidos no
puede ser neutralizada por la antitxina.

Clostridium tetani

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO
- Se basa en signos clnicos caractersticos, no se
necesitan pruebas de laboratorio
- La demostracin e identificacin de la txina es
importante para el Dx.
MICROSCOPIA DIRECTA
- Frotis de material presentes de heridas (Tincin de
Gram)
- Se observan esporas caractersticas de palillos de
tambor de C. tetani, C. tetanomaspitum y C.
tetanoides tienen morfologa similar

AISLAMIENTO
- Exudado o tjido necrtico de heridas se calienta a
80C/20min
- Se inocula en placas de AS y AS duro (3% Agar)
- Un caldo de cooked meat o tioglicolato pueden
inocularse e incubar 2-3 dias
Subcultivo de AS e incubar a 37C/3-4 das en
atmsfera de CO2 y H2

IDENTIFICACION MORFOLOGICA COLONIAL

- C. tetani en AS es hemoltico y crece como enjambre
de abejas

REACCIONES BIOQUIMICAS
Gelatina (+)
No fermenta CHOS comunes

IDENTIFICACION DE LA TOXINA
- Demostracin de la txina presente en suero o en
filtrados de cooked meat o medio de tioglicolato.
Debe mostrarse en animales de laboratorio e
identificado por pruebas de neutralizacin y de
proteccin utilizando la antitoxinaespecifica.
- En la prueba de proteccin a animales se les aplica
la antitxina 2 hrs antes de inocular la txina
- Ratones control presentan sgnos tpicos de
espasmos tetnicos en el sitio de inoculacin.

Clostridium botulinum

Produce 7 neurotoxinas
Inhiben la liberacin de acetilcolina (Ach)
en la unin neuromuscular
Germina, se multiplica y libera sus toxinas
en alimentos mal conservados
Puede contaminar heridas, libera la toxina y
esta se disemina.

Clostridium butilinum

CARACTERISTICAS GENERALES
- Bacilo recto en pH a la neutralidad produce esporas ovales
y subterminales
- Esporas resistentes, pero se destruyen a 121C/15min
- Txinas se destruyen a 100C/20min
- Produce 8 diferentes tipos de neurotxinas A, B, C, C, D,
E, F, G.
- Los tipos A y B, ocasionalmente E son responsables de los
casos
- Se forma en pescados
- Las txinas son identicas en accin, pero diferentes en
potencia, distribucin y antgenicidad

PATOGENISIDAD
* BOTULISMO
- Intoxicacin causada por ingestin de la txina
preformada en alimentos
Toxina que se absorbe
en tracto G.I.

Trasportado va
sangunea a nervios
perifricos

Unin a clulas susceptibles

suprimiendo la conexin de
Ach a las funciones
mioneurales
Resultado:
Parlisis flcida y respiratoria.
Muerte causada por falta
circulatoria

* BOTULISMO INFANTIL (txico infeccin

introinstestinal) es rara
- Ocurre en lactantes de 3-20 semanas
- Se presenta cuando las esporas de clostridios
germinan en I.D., colonizan, producen la txina
(la flora no ha sido bien establecida)
* BOTULISMO EN HERIDAS
- Forma rara de la enfermedad
- Las esporas entran por heridas, germinan y se
forma la txina en este mismo sitio.
- Se disemina en el cuerpo causando severa
enfermadad neurolgico similar al botulismo.

TOXINA BOTULINICA
- Uno de los venenos ms potentes conocidos
- Protena de 150 Daltones (puede cristalizarse o
polvo blanco)
- Un microorganismo puede contener hasta 1.2 x
106 de DL para el ratn
- 0.25 Kg pueden matar a toda la poblacin del
planeta.

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO

Se basa en la historia, signos clnicos, demostracin

e identificacin de la txina en suero de animales
moribundos o recientemente muertos.
Deteccin y/o C. botulinum en alimentos
sospechosos.

DEMOSTRACION DE LA TOXINA
Suero o exudado seroso de
humano inoculado va IV
(0.3mL) o IP (0.5mL) a
ratones

Toxina presente

Provocando respiracin
abdominal

El animal adquiere apariencia

caracterstica de cintura de
abeja (en pocas horas)
Por parlisis de msculos
respiratorios

EXTRACCION DE LA TOXINA
Macerado del producto en
SSF toda la noche

Incubar a 37 C / 45 min

Inocular ratones IP

Centrifugado de la
suspensin

Mezclar que partes del

filtrado con J de solucin de
tripsina al 9%

Filtrado del sobrenadante con

filtro 0.45 mm

Como la toxina puede estar

como protxina

IDENTIFICACIN DE LA TOXINA
Para pruebas de
neutralizacin con
ratones

Utilizar inicialmente
antitoxinas polivalente

Seguido de
antitoxinas
monovalente
Identificacin de la toxina
y tipo de clostridium

AISLAMIENTO DE C. batilum DE ALIMENTOS

Maceracin de alimentos en
pequea cantidad de SSF
Calentar la suspensin 65-80C / 20 min
para destruir m.os contaminantes e
inducir la germinacin de esporas
Inocular la suspensin en AS e incubar
anaerobiosis a 35C / 5 das ( esporas
tipo E requieren Tx con lisozima para
provocar germinacin)

Colonias de AS generalmente son

hemolticos su apariencia va de
abombados con bordes rasgados,
hasta planas y rugosas
Inocular en caldo Coged meta para
determinar si fue producida la txina
Incubar 30 C / 5-10 das

Los filtrados se preparan y los

animales de laboratorio se utilizan
para demostracin e identificacin
de la txina

GENERO Clostridium
CLOSTRIDIOS NEUROTOXICOS

Clostridios que producen gangrena gaseosa

- Sus txina no son tan potentes como las de C.
tetani y C. botulinum
- Son invasivos
- Su sndrome puede ir desde una infeccin en
heridas hasta severa y fatal gangrena gaseosa
- Las infecciones pueden ser de origen exgeno y
endgeno

Infeccciones endgenas se presentan por C.

chauvoei

Infecciones endgenas se presentan por C. chauvoei

Infecciones exgenas

Las esporas
se introducen
por heridas

Germinan en este
sitio por el
material necrtico

Produccin de txinas
por las formas
vegetativas

DIAGNOSTICO DE
LABORATORIO
A)
-

Tcnica de anticuerpos flourescentes

Se adquieren comercialmente antisueros
marcados con fluorescena especficos para C.
chauvoei, C. perfirngens, C. septicum. C. novyi y
C. sordellii
Mtodo rpido para la identificacin de
Clostridios
Se aplica a frotis de tejidos afectados o mdula
sea fijados en acetona

b) Tincin de Gram de tjidos afectados

c) Apariencia y aislamiento de colonias
- Para aislamiento de m.o. exigentes como C.
chauvoei; utilizar AS de ovino con extracto de
hgado
- Para aislamiento de C. septicum, C. sordellii, C.
perfringes y C. novyi tipo A utilizar AS duro (3%
de agar)
- Inocular medios e incubar bajo condiciones
anaerobias estrictas (10% de CO2) a 37 C/2 4
das

D) Reaccin de Nagler de C. perfringes

- La antotxina A () se disemina en una placa de
AYH y se deja secar
- Cepa sospechosa de C. perfringes se estran en
forma cruzada en ambos lados de la placa
- Todos los tipos de C. perfirnges producen una ()
txina (lecitinasa)
- En la mitad de la placa que no tiene antitxina es
atacada produciendo opalescencia alrededor de la
estra
- La reaccin lecitinasa es neutrlizada en la otra
mitad de la placa por la antitxina, pero el
crecimiento de Clostridium no se ve afectado

e) Reaccin de CAMP de C. perfringes

- Streptococcus agalacteae produce un factor
difundible, mejora la hemlisis parcial de la txina

- La zona completa de hemlisis se observa

inmediatamente alrededor de la colonia y es causada
por la txina

Clostridium difficile
- Tiene requerimientos exigentes para su crecimento
- Se reconoce como cuasa de enfremedad diarreica
severa ulcerosa de I. G. (colitis pseudomembranosa)
(C. S. M)
- Asociado a tranbtornos intestinales vinculados a Tx
con antibiticos
- Los transtornos va desde estado de protador
asntomatica diarrea moderada a leve hasta C.S.M
fulminante y potencialmente letal

Principal causa de diarrea intrahospitalaria

actualmente
C. difficile se encuentra en la biota normal o es
adquirido del medio ambiente intrahospitalario
durante el Tx con antibiticos (estos son ambiente
hostil para el m.o y lo forza a estar en estado de
espora)
Los antibiticos tienen capacidad de suprimir la
flora normal
En algun momento la espora germina y la forma
vegetativa de C. difficile crecen en gran cantidad,
coloniza y produce toxinas
Cuando el nivel de toxina llega a un estado crtico
en IG comienza la diarrea

Clostridium perfringes

Se relaciona con la gangrena gaseosa (80%

de los casos) y cuadros enterotxicos
(toxiinfeccin
alimentaria,
enteritis
necrosante, colitis pseudomembranosa
posantibiticos)
la gangrena gaseosa se caracteriza por gran
destruccin muscular con dolor, edema,
crepitacin, necrosis y toxicidad sistmica

Clostridium perfringes

DIAGNOSTICO
a) Toma de muestra
- Debido a que la mezcla de anaerobios y flora saprofita lleva a
confusin en el Dx microbiolgico, se consideran muestras
inapropiadas las siguientes
Las procedentes de superficies mucosas, habitualmente
habitadas por este tipo de m.o. (frotis nasofarngeo, vaginal,
uretraly cervical; esputo, heces y orina)
- Es conveniente tomar el exudado de ulceras con una aguja y
jeringa del fondo de las mismas.
- La puncin-aspiracin es buena tcnica para obtener materail
pulmonar, pleural, peritoneal, osteoarticular y de abscesos
- Puncin suprapbica esta indicada en infecciones urinarias
- Puncin trastraqueal es infecciones del tracto respiratorio inferior

DIAGNOSTICO
b) Identificacin
- Tinciones de gram, naranja de acridina, fluorescencia
- Deteccin de Ags bacterianos
- Sondas de ADN
c) Aislamiento
- Incubacin de muestras en sistemas de anaerobiosis
d) Cultivo
- Medios selectivo y no selectivos

TIOGLICOLATO

Cl. perfringes- Nagler test positivo en agar yema de huevo

perdida de la actividad de la Lecitinasa en el lado derecho, con
antitoxina, comparado con el agar limpio en el lado izquierdo, sin
antitoxina

Una emulsin de lpidos y un indicador

llamado Spirit Blue se incorporan en un
medio slido complejo.

LECITINASA

Prueba de gelatinasa

GENERO
Pseudomonas

Pseudomonas

QUIN ES
PSEUDOMONAS?

GENERO Pseudomonas

Patgenos oportunistas
La mayora de las infecciones las produce
Pseudomonas Aeruginosa (Principal patgeno
humano del grupo)
Afecta
especialmente
a
pacientes
inmunodeprimidos y hospitalizados
El genero Pseudomonas se distribuye ampliamente
en el suelo, agua plantas y animales
Es invasora y toxignica

GENERO Pseudomonas
TAXONOMIA

Hasta 1993 el gnero Pseudomonas se divida en 5

grupos
Actualmente algunas especies que se incluan en este
genero se clasifican como gneros diferentes. Entre
ellos:
- Xanthomonas
- P. cepacia
- P. mallei
- P. pseudomallei
Ahora agrupados en el gnero Burkholderia
La clasificacin de Pseudomonas se basa en la
homologa del RNAr/DNA y en caractersticas
comunes de cultivo

GENERO Pseudomonas
TAXONOMIA

GENERO Pseudomonas
CARACTERISTICAS GENERALES

Bacilos G- , arobios obligados, no fementadores, catalasa +,

oxidasa + (excepto B. mallei). Motilidad +, no producen esporas
Se encuentra como bacteria nica, en pares, ocasionalmente en
cadenas cortas
Casi todas las especies degradan glucosa por va oxidativa
Reducen NO3 a NO2, incluso a N2
Comn en ambientes hmedos de hospitales (se favorece su
crecimiento)
Pueden servir como reservorios:

- Nebulizadores
- Equipos de terapia respiratoria

- Soluciones de lavados
- Sistemas de hemodialisis

CARACTERISTICAS GENERALES

Bacilos G (-).
Se encuentra como bacteria
nica,
en
pares,
ocasionalmente en cadenas
cortas.
Aerobios obligados
No fermentadores.
Catalasa (+).
Oxidasa (+).
Motilidad (+).
No producen esporas.
Casi
todas las especies
degradan glucosa por va
oxidativa.
Reducen NO3 a NO2.
Cpsula mucoide de
exopolisacridos

GENERO Pseudomonas
CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS

Pseudomonas aeruginosa
Tincin de gram

MEDIOS PARA PSEUDOMONAS

Medio
King A

Microorganismos
El color verde indica presencia de piocianina. La adicin de
gotas de cloroformo cambia la coloracin a azul (tpico de
Pseudomona aureginosa).
King B
El color verde fluorescente indica presencia de pioverdina.
(diferencia Pseudomona flourences de Pseudomona
auroginosa)
Tubo de Agar Flo Observado bajo luz visible la produccin de pioverdina o
fluorescena se observan pigmentos amarillos y con luz UV
fluorescencia
Tubo de Agar Tech Produccin de piocianina, con observacin de pigmentacin
azul turquesa
No fluorece con luz UV

GENERO Pseudomonas
CULTIVO

Crecen fcilmente sobre muchos medios de cultivo

Son nutricionalmente muy verstiles (capaces de
utilizar numerosos compuestos como fuente de
carbono)
Produce olor dulce, semejante a jugo de uva
Algunas cepas son hemolticas
Forma colonias redondas, lisas, color verde
fluorescente, aunque puede producir mltiples tipos
de colonia y da la impresin de un cultivo de
especies bacterianas mixtas

GENERO Pseudomonas
CULTIVO

Produce diversos pigmentos

- Piocianina (azul-verdoso, no fluorescente), difunde en agar.
Solo P. aeruginosa la produce.
- Pioverdina (fluorescente), confiere color verdoso al agar
- Piorrubina (rojo - oscuro)
- Piomelanina (negro) Temperatura optima de crecimiento 30 37C, incluso hasta 42 C
Algunas especies pueden crecer a 4
El crecimiento a 42 C lo diferencia de otras especies de
Pseudomonas en el grupo fluorescente

Pseudomonas aeruginosa

Pigmento

Oxidacin de carbohidratos

fluorescencia

Oxidasa

GENERO Pseudomonas
CARACTERISTICAS DE
CULTIVOCULTIVO

Pseudomonas aeruginosa

GENERO Pseudomonas
FACTORES DE VIRULENCIA

Pilis (fimbrias)
- Se Extienden desde la superficie de la clula
- Promueve la adhesin sobre las clulas epiteliales del husped
Capsulas de polisacaridos (glucocalix o exopolisacarido
mucoide)
- Fija a las bacterias entre s y al medio ambiente
(protegindolas de los mecanismos defensivos del husped,
estimulando la formacin de complejos inmunes que daan el
pulmn)
- Son responsables de las colonias mucoides presentes en
cultivos de pacientes con fibrosis quistica.
LPS: Participan en la gnesis de la fiebre, es responsable del
shock sptico, coagulacin intravascular diseminada y sndrome
de insuficiencia respiratoria

GENERO Pseudomonas
FACTORES DE VIRULENCIA

Enzimas o toxinas extracelulares producidas por P.aeruginosa

- Elastasas, proteasa y colagenasa.- Favorece la destruccin
tisular y la invasin bacteriana
- Dos hemolisinas: Una fosfolipasa C termolabil y un
glucolpido termoestable
Exotoxina A y S
- Produce necrosis tisular, Participa en la diseminacin de la
infeccin
- Impide la sntesis de protenas por un mecanismo de accin
similar al de la toxina difterica, aunque la estructura de estas
dos toxinas es diferente
Fibrinolisina

Superproduccin del alginato

Alginato (exopolisacarido):

Variacin de fase.
Conversin de Alg + a Alg La mayora de los aislamientos de pacientes con CF son Alg +.
Los aislamientos ambientales son Alg - .

Regulacin.
Dos-componentes de genes reguladores.
Factor antisigma.

Papel del alginato

en la patogenia de P. aeruginosa .
Neutraliza radicales del oxgeno.
La alta viscosidad contribuye a la obstruccin de vas areas.
Correlacionado con exoproductos reducidos.

Mecanismo de adherencia - formacin de micro colonias.

El crecimiento del Biofilm - reduce susceptibilidad a

mecanismos bactericidas dependientes de anticuerpos.

Formacin de Biofilm

Fenotipo Mucoide
No mucoide

Mucoide

Patgenos Multirresistentes (PMR)

Multirresistencia.Resistencia a multiples antibiticos
Cuntos?, cules?, en qu microorganismo?
S. aureus resistente a la meticilina
Enterobacterias productoras de BLEE
Enterococo resistente a glucopptidos
A.baumannii resistente a carbapenemas

P. aeruginosa multirresistente Productora de carbapenemasa

FACTORES DE VIRULENCIA

GENERO Pseudomonas
PATOGENIA

P. aeruginosa es un patgeno oportunista

Solo es patgena cuando se introduce en regiones desprovistas
de defensas normales (alteracin en las defensas locales o
sistmicas del husped)
Mucosas y piel lesionada lesionadas por dao tisular directo,
empleo de catteres IV o urinarios, neutropenia como
consecuencia de quimioterapia contra el cncer, etc.
La infeccin se lleva a cabo en 3 fases:
- Coloniacin:Las bacterias se unen a mucosas o piel y las
colonizan (invasin local)
- Destruccin tisular
- Diseminacin: Provocan enfermedad sistmica

GENERO Pseudomonas
PATOGENIA

Estos procesos se favorecen por pilis,

enzimas y toxinas
P. Aeruginosa y otras Pseudomonas son
resistentes a muchos antimicrobianos

GENERO Pseudomonas
MECANISMOS DE RESISTENCIA
1. Inhibicin de antibiticos -lactamicos por lactamasas cromosomicas o plasmidicas
2. Mutacin del gen gyr A que altera la DNAgirasa, produce resistencia a quinolonas
3. Disminucin de la permeabilidad de la
membrana externa
}4. Enzimas modificadoras de aminoglucsidos
como las AAC (G)II que confiere resistencia
conjunta a gentamicinas, tobramicina y
netilmicina

GENERO Pseudomonas
DIAGNOSTICO

La identificacin casi siempre se basa en la morfologa colonial,

positividad a oxidasa, presencia de pigmantosolor carcterstico
y crecimiento a 42 C (Esto diferencia a P. Aeruginosa de P.
Fluorescens y P.putida quienes tambin producen pioverdina)
Muestras:Lesiones cutneas, pus, orina, sangre, LCR, esputo
Las muestras se siembran en AS y medios diferenciales
comunmente empleados para el crecimiento de bacilos entericos
G P. Aeruginosa crece fcilmente en la mayor parte4 de estos
medios, pero a veces ms lentamente que los entricos
No fermenta lactosa

IMPORTANCIA DE Pseudomonas aeruginosa

EN AMBIENTE HOSPITALARIO

Es importante por la alta frecuencia de aislamiento

y mltiples factores de patogenicidad y
multiresistencia a antimicrobianos comnmente
utilizados en clnicas.
Constituyen riesgo elevado para casi todo tipo de
pacientes, en partcular para aquellos que por su
edad, estados patolgicos tienen disminuidos sus
mecanismos de defensa
La frecuencia de infecciones nosocomiales vara
de un hospital a otro, oscila entre 3 y 4 por cada
100 pacientes

Frecuencias mas elevadas se ven en hospitales o

salas para nios.
Pseudomonas aeruginosa provoca el 10% de estas
infecciones
Septicmias producidas por este m.o. se observan
con mayor frecuencia en individuos quemados
70% de estos pacientes si no se tratan con
medicamentos locales se colonizan con
Pseudomonas aeruginosa u otras especies en no
mas de 3 semanas despus de la quemadura

INFECCION INTRAHOSPITALARIA
Procesos infecciosos adquiridos o desarrollados en
pacientes hospitalizados como consecuencia de
infecciones adquiridas en estas instituciones o
debido a procesos patalgicos o maniobras
teraputicas que favorecen la diseminacin del m.o.
previamente establecidos en el sujeto enfermo que
frecuentemente corresponden a la flora normal u
oportunista

Infecciones de P. aeruginosa.

Patgeno oportunista humano

Pacientes con fibrosis quistica

Pacientes Immunocomprometidos

( Cncer, trasplante de rganos, SIDA)

Pacientes quemados
Heridas severas
UTI
Dermatitis
Infecciones de tejido blando
Bacteriemia
Pulmona
Infecciones intrahospitalarias.

Implantes de catter (biofilm)

P.Aeruginosa Infecciones

Keratitis

Fibrosis qustica

Superproduccin del alginato

Alginato (exopolisacarido):

Variacin de fase.
Conversin de Alg + a Alg La mayora de los aislamientos de pacientes con CF son Alg +.
Los aislamientos ambientales son Alg - .

Regulacin.
Dos-componentes de genes reguladores.
Factor antisigma.

Papel del alginato

en la patogenia de P. aeruginosa .
Neutraliza radicales del oxgeno.
La alta viscosidad contribuye a la obstruccin de vas areas.
Correlacionado con exoproductos reducidos.

Mecanismo de adherencia - formacin de micro colonias.

El crecimiento del Biofilm - reduce susceptibilidad a

mecanismos bactericidas dependientes de anticuerpos.

Formacin de Biofilm

Fenotipo Mucoide
No mucoide

Mucoide

P.Aeruginosa Infecciones

Quemaduras

Hemodilisis

P.Aeruginosa Infecciones

rea de terapia intensiva

P. Aeruginosa infecciones

Salas de terapia intensiva

cuneros

Quirfano

Por qu causa diversas

infecciones?

Flexibilidad alimenticia

Utilizado a menudo en estudios de bioremediacin.

Resistencia a los antibiticos

Impermeable (porina).
Resistencia adquirida (mutacin o transferencia).

Factores virulencia
Exotoxina S y A, proteasas, hemolisinas, pigmentos y
alginato.

Estudios de bioremediacin
Pseudomonas putida es un microorganismo de la
putrefaccin y que puede resistir los efectos nocivos de
solventes orgnicos.
P. putida mt-2 (pWWO) es capaz de descontaminar de
sustancias orgnicas como el tolueno, uno de los
componentes de la gasolina.
Se puede utilizar para realizar bioremediacin, en la
purificacin del suelo y del agua subterrnea
transformando muchas sustancias orgnicas txicas a
inofensivas.

AISLAMIENTO E IDENTIFICCIN
a)

Medios y condiciones de crecimiento

- Es nutricionalmente poco exigente.
- Crece en medio basal inorgnico, suplementado
con un solo compuesto orgnico como acetato o
glucosa
- No es fermentativa
- Otros aceptores de electrones adems de O2,
como el NO3 permiten el crecimiento anaerobio
- Crecen facilmente de 20 - 42 C

Caracteristicas que permiten identificar a

Pseudomonas aeruginosas:
- Crecimiento en Agar citrato dexosicolato

Colonias grisaseas, lactosa (-), pigmento verde que difunde en

el medio indicando produccin de piocianinas
- Crecimiento en AMC
Colonias grisaseas, lactosa (-)
- Agar pseudosel
Recupera fcilmente al m.o., se recomienda como medio
selectivo, contien cetrimida (detergente) que inhibe bacterias
Gram (-), favorece produccin de piocianinas (color azul
verdoso)

- Medio NFL (Prueba de fluorescencia - desnitrificacin)

Determina la reduccin de NO3 a N2, Produccin de
fluorescencia.
- Agar Tech
Promueve la aparicin de color verde debido a las piocianinas
- Medio de D4 de Kado y Heskett
El dodecil sulfato de Sodio elimina contaminantes que alteran
componentes de la superficie celular sus desventajas son que
crecen otras bacterias G(-), no se observa flourecencia

PELIGRO DEL USO INDISCRIMINADO DE

ANTIMICROBIANOS
1)

2)

3)
4)
5)

Sensibilizacin diseminada de la poblacin, con aparicin de

hipersensibilidad, anafilaxia, erupciones, fiebre, trastornos
sanguneos, hepatitis colesttica.
Cambios en la flora normal del cuerpo con enfermedad resultante
por sper infeccin de heridas al crecimiento excesivo de
organismo resistentes al medicamento
Enmascaramiento de infecciones graves sin erradicarlas
Toxicidad directa del medicamento particularmente con el uso
prolongado de ciertos antibiticos
Desarrollo de resistencia medicamentosa en poblaciones
microbianas por eliminacin de m.o. sensibles a medicamentos y
sustitucin por m.o. resistentes a los mismos

MEDIO Mc CONKEY

TINCION ZIEL NEELSEN

BAAR
(BACILOS ACIDO ALCOHOL RESISTENTES)

POSITIVA

NEGATIVA

TINCIONES

Streptococcus spp

Streptococcus pneumonie

ESTREPTOCOCOS
Son cocos Gram (+) de 1 - 1.5
micrmetros de dimetro, anaerobios
facultativos que se disponen en pares
y en cadenas. Son catalasa y oxidasa
negativas y fermentan glucosa con la
produccin consiguiente de cidos.
Muchas especies de este gnero son
saprfitos para el hombre, otros son
oportunistas y algunos son patgenos

CLASIFICACION

Los estreptococos se pueden diferenciar

segn:
El tipo de hemlisis
Las caractersticas antignicas
La determinacin del grupo antignico al
que pertenecen a travs de reacciones
serolgicas especficas (aglutinacin
pasiva, precipitacin, inmunofluorescencia)

TIPOS DE HEMOLISIS

GAMMA
HEMOLITICOS.Son
los
estreptococos no hemolticos
ALFA HEMOLITICOS.- Son los estreptococos
tipo viridans que producen hemlisis parcial en
torno a la colonia (decoloracin parda verdosa)
BETA HEMOLISIS.- Son llamados estreptococos
hemolticos que destruyen totalemnte los
eritrocitos produciendo halos de transparencia

HEMOLISIS
GAMMA

ALFA

BETTA

FACTORES DE VIRULENCIA

Antigeno de pared Celular del grupo A.- Es un

polisacrido (L- ramnosa y N-acetil-D-glucosamina) unido
al pptidoglican. Induce la fiebre, provoca necrosis
drmica y cardiaca, lisis y resistencia a mecanismos
inespecficos
Acido hialurnico.- Forma la cpsula
Hialuronidasa.- Es una enzima responsable de hidrolizar
el cido hialurnico del tejido conjuntivo
Proteina M.- Es una potena que est conectada a la
membrana de la bacteria. Es sensible a los cidos, al calor
y a la tripsina. Provee a la bacteria resistencia a la
fogocitosis. Se conocen 80 serotipos y su tipificacin se
realiza con la tcnica de Lancefield
Estreptolisisna O.- Es una protena lbil al oxgeno, es
antignica, se inhibe frente al colesterol y es txica para los
leucocitos y monocitos. Responsable de la beta-hemlisis.
Es til para el Dx de infecciones faringeas y poco til para
infecciones ctaneas.

Exotoxina Estreptoccica Pirgena.- Es la

responsable de la escarlatina. Se conocen los tipos
A, B y C.
La A y C provienen de bacterifagos
El tipo B es de origen cromosmico.
Desoxirribonucleasas.Es una enzima que
despolimeriza al ADN, son antignicas y se
conocen los tipos A, B, C y D.
Estreptoquinasas.- Su mecanismo de accin es
activar el plasmingeno a plasmina (rotura de
cogulos). Presenta propiedades antignicas. Al
igual que la estreptolisina S se utiliza en hospitales
en procesos trombo gnicos.

Estreptococos del Grupo A

Debido a la gran cantidad de factores de virulencia que presentan,
producen procesos infecciosos en el hombre que pueden ser o no de
carcter supurativo.
Producen infecciones en piel y en mucosas (faringoamigdalitis,
sinusitis), infecciones en vsceras o infecciones generalizadas.
Con frecuencia hay complicaciones no supuradas, como fiebre
reumtica o glomrulo nefritis.
La fiebre reumtica aparece de forma tarda pueden generar
mecanismos inmunolgicos (SLO), donde se originan daos
progresivos en tejido conectivo de articulaciones y corazn

Estreptococos del Grupo B

Es saprofito para el hombre, se localiza en rinofaringe,
aparato urogenital e intestinal. Se asocia a las infecciones
oportunistas.
Su hemlisis es variable aunque en su mayora son Beta
hemolticos.
La prueba de hipurato de sodio diferencia del resto.
Presenta en superficie un carbohidrato C. Originan
meningitis e infecciones pulmonares en neonatos as, como
infecciones en el tracto respiratorio, mucosas y piel

Estreptococos del Grupo C

Por las propiedades que presentan es la ms prxima

al grupo A y corresponden a S. Beta-hemolticos.
Es muy sensible a gentes externos.
Aparece como saprofito de la rinofaringe y en
ocasiones puede actuar como patgeno.

Estreptococos del Grupo D

Son estreptococos alfa y gamma hemolticos, que
resisten muy bien a los agentes externos e incluso a los
antibiticos.
Se dividen en entero cocos (S. faecalis y S. faecium
entre otros, son saprofitos del intestino del hombre.
Los no entero cocos (S. bovis y S. equinus), afectan a
vacas y caballos

Streptococcus pneumoniae
(neumococo)
Este tipo de estreptococo constituye un grupo aparte.
Aunque tambin son Gram (+) se distribuyen como
diplococos.
Son muy sensibles a los agentes externos , necesitan medios
muy especficos para su cultivo.
Se encuentra como saprofito en la flora normal del aparto
respiratorio, aunque se relacionan con neumonas, afecciones
inflamatorias y meningitis.
Su accin patgena est relacionada con un polisacrido
capsular especfico que facilita la invasin. Contiene protena
M y sustancia C

Streptococcus spp

FUENTES DE INFECCION
ESTREPTOCOCICA

La fuente de infeccin causada por esta bacteria suele

ser endgena (vas respiratorias, fisuras y otras
heridas infectadas).
Tambin pueden proceder de instrumentos o paos
contaminados.
Hay portadores de estreptococos en heces, faringe y
lesiones cutneas.

FUENTES DE INFECCION
ESTREPTOCOCICA
Los estreptococos del grupo A son causantes de
infecciones en tejidos blandos, se propagan por
tracto directo de una zona lesionada.
El hinchamiento y la higiene deficiente facilitan su
diseminacin. Causan piodermia e imptigo.
En la prctica quirrgica se encuentra casi siempre
en infecciones mixtas de heridas o septicemias
intraperitoneales.

Las infecciones por estreptococos del grupo A siguen una

evolucin muy rpida en la que se produce celulitis
difusa, linfangitis y linfadenitis.
No suelen formar abscesos, pero pueden producir necrosis,
gangrena o esfacelacin local.
En ocasiones aparecen con cmulos de pus o material
necrtico s los lmites de la herida se gangrenan,
resultando imprescindible su apertura y desbridamiento.
Las infecciones producidas por enterococos son menos
invasivas que las producidas por Streptococcus del grupo
A, las cuales se asocian con bacterias Gram (-)
intestinales.

HIDRLISIS DE ESCULINA

POSITIVA

NEGATIVA

HIDRLISIS DE HIPURATO

NEGATIVA

POSITIVA

PRUEBA DE OPTOQUINA
Streptococcus Grupo D

INFECCIONES MIXTAS O SINERGICAS

Hay infecciones que complican las intervenciones
quirrgicas y los traumatismos que son producidos
por
una
flora
bacteriana
mixta
de
microorganismos aerobios, anaerobios que a
menudo aparecen como consecuencia de alguna
lesin o perforacin de los aparatos
gastrointestinal, respiratorio o genitourinario.
Estos agentes pueden actuar sinergicamente
manifestndose en celulitis, abscesos, trombosis,
necrosis, gangrenas y crepitaciones.

BACILOS GRAM (-)

Muchos
microorganismos
como
Klebsiella
pneumoniae y E. Coli presentan una cpsula de
polisacrido (Ag K).
A travs de la cpsula externa penetra una estructura
llamada flagelo portadora del Ag H. Estructuras
superficiales llamadas fimbrias que sobresalen de la
cpsula o de la pared celular externa facilitan la
adherencia a mucosas.

Los antgenos de la pared celular

denominados antgenos somticos o
antgenos O, adems de los
polisacridos y las endotxinas, son
importantes en la Patagonia de estos
gneros.

La frecuencia de infecciones Gram (-) est

relacionada con el aumento de las
intervenciones quirrgicas en pacientes
debilitados con enfermedades crnicas. En
las infecciones post-quirrgicas producidas
por E. coli, Enterobacter, spp, Klebsiella
spp, Proteus o Pseudomonas
suelen
encontrarse
tambin
Estreptococos
anaerobios facultativos y Bacteroides
fragilis , dichas infecciones son producidas
por el contenido intestinal. Su periodo de
incubacin va de 7 a 14 das siendo el
dolor y los edemas menos evidentes en las
infecciones causadas por Staphylococcus.

ENTEROBACTERIAS
Son bacterias que se encuentran en el tracto
digestivo, sus caractersticas principales
son:
Bacilos o cobacilos Gram (-)
Son aerobios y anaerobios facultativos
Miden de 1 a 4 micrmetros de longitud
Son de motilidad variable
Son oxidasas negativas
Fermentan glucosa
Producen gran cantidad de fermentos
como, gelatinasas, descarboxilasas,
ureasas,galactocidasas, desaminasas, etc.

ANTIGENOS ASOCIADOS

Antgeno somtico.- Es una endotxina,

formada por una parte proteca que es la
responsable del poder antignico y una
parte lpidica inactiva bioquimicamente.
Antgeno
capsular K.- Presentan
propiedades antifagocitarias.
Antgeno flagelar H.- Caracterstico de
las cepas mviles. Es de origen proteico y
es el responsable de la accin patgena de
la bacteria.

CRECIMIENTOS
Cuando se cultivan en medios selectivos estas
bacterias presenta un crecimiento similar en
agar sangre y suelen manifestndose en forma
de colonias grises relucientes y grandes que
pueden ser o no hemolticas. Llegan a ser de
color blanco grisceo, translcidas y levemente
convexas, algunas grandes y mucoides.

MEDIOS DE CULTIVO
Los medios bsicos de cultivo bsicos
para su identificacin son Agar Sangre,
Agar Mc Conkey y XLD.

La fermentacin de la lactosa es de gran

importancia en la identificacin bacteriolgica
de los Gram (-), de esta manera las bacterias
lactosa positivas son ms suceptibles a los
agentes antimicrobianos, mientras los que no
fermentan la lactosa o lo hacen lentamente en
ocasiones presentan mayor resistencia a
terapia antimicrobiana.

INFECCIONES POR ENTEROBACTERIAS

Escherichia coli
Es un bacilo aerobio facultativo ms abundante en
tracto gastrointestinal, puede ser responsable de
procesos dirreicos, y puede causar a partir de un
foco de infeccin primaria que pudiera prolongarse
hasta causar una bacteremia

Escherichia coli

Escherichia coli

Klebsiella
Dentro de este gnero se reconocen tres especies: K.
Pneumonie, K. Ozaenae, K. Rhinoscleromatis y K.
Oxytoca. Este gnero produce con frecuencia
colonias mucoides grandes.
K. Pneumoniae es la cuasa de hasta el 10% de las
infecciones adquiridas en el hospital (vas urinarias,
respiratorias y heridas).

ENTEROBACTER
El gnero Enterobacter comprende varias especies.
E. aerogenes, E. cloacae y E. agglomerans. Por s
solas no ocasionan infeccin primaria en ningn
caso, pero se aislan en combinacin con E. coli y
Klebsiella de infecciones como drenaje de heridas
en pacientes hospitalizados

E. aerogenes

EMB

Mc Conkey

Proteus
Se le asiganan dos especies: P. mirabilis, no
fermentadora de indol. Su principal caracterstica es el
fenmeno de Swarm (crecimiento confluente) de
color gris azulado, que complica el aislamiento de
otros microorganismos presentes en cultivos. Se le ha
considerado responsable de infecciones en heridas y
de pulmn.
La presencia de numerosos flagelos les confiere una
movilidad importante en la infecciones ascendentes

Providencia

Este gnero consta de tres especies: P.

alcalifaciens, P. rettgeri y P. stuertii, se identifican
con relativa facilidad. P. stuartii es considerada
causante de infecciones hospitalarias complicadas
del aparato urinario y en unidades de quemados.

INFECCIONES DE TEJIDO SUBCUTNEO

CON O SIN AFECCIN EN LA PIEL
Absceso cutneo y subcutneo
Pie ftido y diabtico

Heridas por mordeduras

Celulitis anaerobias, absceso gaseosa y

celulitis clostridiana
Infeccin de heridas por quemaduras

MEDIOS DIFERENCIALES PARA

ENTEROBACTERIAS
Medio
Mc Conkey

EMB

Microorganismos
- Lac (+), colonias rojas
E. coli, Klebsiella y Enterobacter
- Lac (+), fermentadoras lentas colonias rojas
Citrobacter, Providencia, Serratia y Hafnia
- Lac (-), colonias transparentes
Proteus, Salmonella, Shigella, Edwadsiella
- Fermentan Lactosa, colonias negras verdosas con brillo metlico
E. coli
- Producen colonias prpuras entre 24-48 hrs.
Klebsiella, Enterobacter, Serratia y Hafnia
- No fermentan Lactosa, colonias transparentes
Proteus, Salmonella y Shigella
- Fermentan sacarosa, colonias transparentes
Yersinia enterocolitica

MEDIOS ALTAMENTE SELECTIVOS

Medio
SS

Agar Hektoen Enterico

XLD (Agar Xilosa
Lisina Desoxicolato)

Microorganismos
Fermentadores de Lactosa, colonias rojas
Salmonella arizonae
No fermentadores de Lactosa, colonias incoloras con centro negro
Salmonella
Colonias no fermentadoras de Lactosa sin centro negros
Shigella
Fermentadores de Lactosa, colonias naranjas brillantes a rosado salmn
E. coli
Colonias azul verdosas con centros negros
Salmonella
Colonia verdosas y palidez hacia la periferia
Shigella
Colonias pequeas, transparentes y brillantes (acuosas)
Proteus
Colonias amarillas brillantes, Xilosa (+)
E. coli y Klepsiella
Colonias rojas con centros negros, Lisina (+)
Salmonella y Citrobacter
No utiliza ninguno de estos CHOS son colonias transparentes
Shigella, Providencia y Proteus

GENERO Staphylococcus
CARACTERISTICAS GENERALES

Algunos son miembros de la flora normal de la piel y mucosas de los

humanos
Otros causan supuracin, formacin de abscesos, varas infecciones y
septicemia mortal
Los estafilococos patgenos casi siempre causan hemolisis,
coagulacin de plasma y varias enzimas y toxinas extracelulares
causan
Los tres generos de imporancia clnica son:
- Staphylococcus aureus (coagulasa +)
- Staphylococcus epidermidis
- Staphylococcus saprophyticus
Los estafilococos coagulasa negativos son normales en la flora humana
a veces causan infeccin, casi siempre asociada con dispositivos y
aparatos implantados

75% de las infecciones causadas por

staphylococcus coagulasa (-) se deben a S.
epidermidis
Son menos comunes las infecciones causadas por
S. logdunensis, S. hominis y otras especies
S. saprophyticus es causa comun de infecciones de
aparato urinario en mujeres jovenes

Bacteremia causada por

Staphyloccoccus aureus

Staphylococcus
epidermidis

Staphylococcus
epidermidis

Staphylococcus epidermidis

MORFOLOGIA E IDENTIFICACIN

Clulas esfricas G(+) dispuestas en racimos de

uvas irregulares
En lquidos de cultivo se observan cocos nicos,
en parejas tetradas y cadenas.
Los cocos jvenes son fuertemente G(+), despus
de envejecer muchas clulas se hacen G(-)
Motilidad (-)
No forman esporas
Producen pigmento que varian desde el color
blanco hasta el amarillo intenso

Staphylococcus
Prueba

S. aureus

S. epidermidis

S. saprophyticus

Gram y Morfologa

Coco G(+)

Agrupados en racimos

Catalasa

OF

Coagulasa

Sensibilidad a
novobiocina

NA

Ureasa

NA

Nitratos

NA

Manitol

Hemlisis

Staphylococcus aureus
Tincin

Staphylococcus aureus

CULTIVO

Crecen fcilmente en casi todos los medios bacteriolgicos

en condiciones aerobias o microaeroflicas
Crecen con mayor rpidez a 37 C
Sobre medios slidos las colonias son redondas, lisas
prominentes y brillantes
S. aureus puede producir hemlisis de grado variable
forma colonias grises o amarillo dorado intenso
S. epidermidis en aislamiento primario, las colonias son
color gris o blanco, muchas colonias desarrollan pigmento
despus de incubacin prolongada
Peptoestreptococcus son anaerobios y morfologcamente
muy parecidos al Staphylococcus

Hemlisis
Staphylococcus aureus

HEMOLIS
Staphylococcus aureus

COAGULASA

NEGATIVA

POSITIVA

CARACTERISTICAS DE CRECIMIENTO

Producen catalasa (esto los diferencia de los

Streptococcus)
Fermentan lentamente muchos CHOS
Producen cido lctico pero no gas
Actividad proteoltica vara de una cepa a otra
Son resistentes a la desecacin al calor (resisten
50C durante 30 min) y al NaCl 9%
Pueden inhibirse con hexaclorofeno al 3%
muestran susceptibilidad variable a muchos
antibiticos

ESTRUCTURA ANTIGENICA

Contienen polisacridos y protenas antignicas

El PG suministra el hexoesqueleto rgido de la
pared celular. Induce la produccin de IL-I
(pirogeno endgeno) y de Ac opsonicos en
monocitos
Puede atraer qumicamente a Leucocitos PMN
Posee actividad parecida a endotxina y activa al
complemento
Protena G. Componente de la pared celular de
muchas cepas de S. aureus, se une a la porcin Fc
de las Ig G excepto Ig G3

Algunas cepas de S. aureus poseen cpsulas que

inhiben fagocitocis por los leucocitos PMN
S. aureus posee coagulasa en la superficie de la
pared celular .
La coagulasa se une de manera no enzimtica al
fibringeno y produce la agregacin bacteriana

TOXINAS Y ENZIMAS
A)
B)
C)
D)
E)

Catalasa: convierte el H2O2 en H2O y O2

diferencia Staphylococcus de Streptococcus
Coagulasa: protena similar a la enzima que
coagula el plasma
Otras enzimas: hialuronidasa staphylocinasa.
Exotxinas: causan lisis en eritrocitos y daan
plaquetas
Leucocidina: mata leucocitos

D) Txina exfoliativa: txina de S. aureus, produce

descamacin generalizada en el Sindrome de
piel escaldada.
E) Txina del Sindrome del choque txico: se
asocia con fiebre, choque y afeccion de
multiples sistemas, incluyendo errupcin
descamativa de la piel
F) Enterotxinas: 50% de las cepas de S. aureus
producen seis txinas solubles A-F. Son
superantigenos que se unen al MHCII
estimulando las clulas T

La resistencia puede clasificarse en los siguientes

tipos:
1) Produccin de lactamasa (bajo control de un
plsmido)
2) Resistencia a nafcilina (independiente de la
producin de lactamasa)
3) Fracaso del tratamiento con vancomicina (por
un incremento de la sntesis de la parede celular y
alteraciones de sta)
4) Plamidos
5)Tolerancia
(el
farmaco
inhibe
los
Staphylococcus pero no los mata)

PATOGENIA

Estafilococos en partcular es epidermidis son

parte de la flora normal de la piel humana y de
aparatos respiratorios y G.I
La capacidad patgena de S. aureus es un efecto
combinado de factores extracelulares y txinas
aunado a las propiedades invasoras de las cepas
S. aureus produce coagulacin y tiende a causar
hemlisis
S. epidermidis (no patgeno y no invasor) son
coagulasa negativos y tienden a ser no hemolticos
Pocas veces producen supuracin pero pueden
infectar protesis ortopdicas o cardiovasculares

DIAGNOSTICO
a)

b)
c)

Muestras: pues, sangre, aspirado trqueal, L.C.R

Frotis: observacin de estrcuturas tpicas, no es
posible distinguir m.o saprofitos de patgenos
Cultivo: muestras sembradas a 37 C
De AS producen colonias tpicas en 18 hrs.
No puede presentar hemlisis y produccin de
pigmento hasta das despus
S.aureus es Mol (+) en ASM
Muestras contaminadas con flora mixta se
cultivan en medios con 7.5% de NaCl

D) Prueba de catalasa:
E) Prueba de la coagulasa
F) Pbas. De suscepitibildad
G) Pbas serolgicas

GRACIAS .

ESTRUCTURA DE UNA ESPORA

Bacillus anthracis

Bacillus antrhacis

La gangrena de Fournier es un proceso infeccioso agudo y

necrotizante que afecta a la piel de los genitales. Produce una
necrosis de la piel y del tejido celular subcutneo fcilmente
reconocible a la inspeccin externa y obliga a un desbridamiento
quirrgico amplio de la zona afecta para poder limitar la
progresin del proceso.

Ttanos

Ttanos

Ttanos

Ttanos

Ttanos en animales

Botulismo

Botulismo

Botulismo

El consumo de alimentos procesados y envasados sin las

normas mnimas de higiene, propicia la reproduccin
bacteriana y toxina botulnica.

COLITIS PSEUDOMEMBRANOSA: Mucosa cubierta por

numerosas placas blanco amarillentas que miden algunos
milmetros de dimetro.

COLITIS PSEUDOMEMBRANOSA: Corte a muy bajo aumento

de intestino grueso. A la derecha se observa una placa solevantada,
con dilatacin de las criptas, necrosis y pseudomembrana en el
tercio superior de la mucosa. Edema inflamatorio de la submucosa
subyacente.

Quemaduras

Quemadura grave

Quemaduras

De qu viven los quemados?

En un estudio de 1995 sobre tibias fracturadas, el tiempo promedio que

los fumadores tardaron en recuperarse alcanz nada menos que 276
das, casi el doble de los 146 das que requirieron personas de igual
edad pero que no fumaban. Otro estudio se concentr en tobillos
quebrados y encontr que los fumadores tenan cuatro veces ms
posibilidades que quienes no fumaban de que sus huesos no sanaran
adecuadamente. El mensaje es claro: quiebre con el vicio, antes de que
ste lo quiebre a usted.

Herida quirrgica

Ciruga esttica

Clostridium
anaerobic Gram positive rods,
spore formers
most strict anaerobes, some
aerotolerant
some appear Gram negative
spores do not appear in all species
130 species identified
organisms in soil, sewage, GI tract

disease production usually

associated with:
spore production
rapid growth in absence of oxygen
numerous toxins

Clostridia
C. perfringens: tissue infections,
enteritis
C. tetani: tetanus
C. botulinum: botulism
C. difficile: antibiotic-associated
pseudomembranous colitis
some other Clostridia: deep
tissue infections

Clostridium perfringens: most

commonly found Clostridium in
clinical specimens
large rectangular morphology of
organism, spore production rarely
seen (in vivo and in vitro)
nonmotile, but spreading colony
on agar, hemolytic
production of one or more lethal
toxins (, , , ) divides organisms
into 5 groups (A-E), type A is most
common in US
other enzymes and virulence
factors (table 37-3)

Clostridium perfringens:
toxin: most important, produced
by all C. perfringens, lecithinase
that lyses most types of cells
toxin: causes intestinal necrosis
(enteritis necroticans or pigbel)
toxin: protoxin that must be
cleaved by trypsin to be active,
increases permeability of the
gastrointestinal wall
toxin: necrotic activity and
increases vascular permeability