OBSERVAO DE CLULAS AO MICROSCPIO

1. Introduo
Em Biologia Celular so empregadas vrias tcnicas, escolhendo-se a mais
conveniente para cada objetivo especifico. Todo desenvolvimento depende da escolha
apropriada para cada material.
Neta pratica so utilizadas folha das plantas Elodea canadenses e Trandescncia.
A Tradescncia Angiospermae da Famlia Commelinaceae. Planta herbcea
rasteira de caule flexvel de cor prpura arroxeada, folhas abraando o caule, ovais
acuminadas na cor verde- purprea. As flores so cor rosa-claro nascendo na axila das
folhas terminais como mostra a figura abaixo.

Figura 1. Trandescncia.

A planta Elodea canadensis pertence famlia Hydrocharitaceae, uma planta

aqutica perene muito utilizada em aqurios. Preferem habitats aquticos com fundos
lamacentos, calcreos e ricos em nutrientes, mas adaptam-se facilmente a uma grande
diversidade de ambientes. Mesmo sem raiz, as partes desenraizadas mantm-se vivas
por longo tempo, podendo-se reproduzir assexuadamente.

Figura 2. Elodea canadensis

2. Objetivos
Esta pratica tem por objetivo conhecer o preparo de laminas a fresco de clulas
vegetal e animal e de laminas a fresco e fixadas de micro-organismos. Observar
vacolos, estmatos, cloroplastos e ncleo em clulas vegetais. Observar ncleos em

clulas da mucosa bucal e observar caractersticas morfolgicas em micro-organismos

representativos.

3. Procedimento experimental
Para realizao desta pratica, foram utilizados os seguintes materiais:
Microscpi

gua

destilada

Lupa

Estilete

Laminas

Cotonetes

Lamnulas

Ponteira de

Ala de

1,0 mL
Alfinetes de

platina

cabea

Folha de Elodea
canadenses
(planta aqutica)
Folhas de Tradescncia
Culturas puras de leveduras
e fungos filamentosos
Clulas da mucosa bucal

a) Observao de movimentos de grnulos no plasma (ciclose) e

estruturas celulares.
Nesta etapa foi feito um corte fino longitudinal em uma folha de Elodea e este,
colocado em uma lmina contendo uma gota de gua destilada. Esta lamnula foi
colocada no microscpio para observao dos movimentos, fluxo intracelular,
locomoo de grnulos e cloroplastos nas camadas perifricas.
b) Observao da pelcula (epiderme) do dorso da folha de Tradescncia.
Com um estilete, foi cortada uma pelcula fina do dorso da folha e colocada no
centro da lmina com uma gota de gua destilada e assim, observado ao microscpio
clulas guarda, ostolos, cloroplastos e estmatos.
c) Observao de clulas da mucosa bucal humana.
Utilizando um cotonete para raspagem da bochecha foram retiradas algumas
clulas da mucosa bucal e este material foi transferido para uma lmina. Uma gota de
azul de metileno foi

adicionado e coberto com uma lamnula. Esse sistema foi

observado ao microscpio.
d) Observao microscpica a fresco das culturas puras de bactrias,
leveduras e fungos filamentosos.
Uma gota de gua foi colocada em uma lmina e utilizando uma ala de
inoculao j estril (flambada e resfriada), foi retirada uma pequena poro de cultura e
espalhado sobre a gota de modo a obter uma suspenso uniforme e assim, coberto com
uma lamnula. Esta preparao foi observada ao microscpio utilizando primeiramente a

objetiva de menor aumento, at chegar objetiva 40 x. E apenas para observao de

bactrias foi utilizado tambm lente de aumento de 100 x utilizando leo de imerso.
A amostra de cultura foi retirada prximo chama para evitar contaminao para
leveduras, foi utilizado corante azul de metileno para evidenciar as diferenas entre as
clulas vivas e mortas. O corante azul de metileno foi adicionado e misturado.
Uma gota desta suspenso foi transferida para lamina, coberta com lamnula e
levada ao microscpio. E apenas para observao de bactrias foi utilizado tambm
lente de aumento de 100 x utilizando leo de imerso.
e) Observao microscpica de culturas puras de bactrias, leveduras e
fungos filamentosos com o uso de corante.
Nesta etapa foi realizada a colorao simples (uso de apenas um corante) para
auxiliar a observao dos micro-organismos. Aps o preparo da lmina, esta foi passada
varias vezes pela chama do bico de Bunsen. Posteriormente a fixao do esfregao, o
corante azul de metileno foi gotejado e aps reagir por 2 minutos, a lamnula foi lavada
com gua destilada e sob agitao para secagem. foi observada ao microscpio
utilizando primeiramente a objetiva de menor aumento, at chegar objetiva 40 x.

4. Resultados e discusso
a) Observao das clulas presentes nas folhas da planta Elodea canadenses
Foi possvel observar a presena dos cloroplastos na objetiva 4 x. Os cloroplastos
so organelas responsveis pela fotossntese e possui estruturas semelhantes a tijolos
verdes empilhados Na objetiva 10 x foi possvel obter uma melhor nitidez dessas
organelas. J na objetiva 40 X pode-se observar a ciclose (Figura 1). A ciclose um
movimento do hialoplasma que forma uma corrente que carrega as organelas e distribui
substncias no citoplasma. No caso da Elodea os cloroplastos so arrastados para um
local de maior intensidade luminosa da clula. A ciclose pode ser observada no
citoplasma de muitas clulas vegetais.

Figura 3. Estrutura da folha de Elodea observada ao microscpio evidenciando a ciclose.

b) Observao de clulas da pelcula do dorso da folha de Tradescncia

A epiderme da folha de Tradescncia (Figura 2) revestida por uma cutcula que a
protege da perda de gua a parte de baixo apresenta uma estrutura responsvel por
realizar as trocas gasosas com o ambiente, conhecida como estmato.

Figura 4. Estrutura da folha de tradescncia observada ao microscpio.

A figura 3 mostra a estrutura dos estmatos. Estmatos so anexos da epiderme

constitudos por duas clulas denominadas de clulas-guarda que so ricas em clorofila
e esto inseridas na epiderme junto com inmeras outras clulas conhecidas como
clulas acessrias, que no possuem clorofila.

Figura 5. Representao esquemtica de um estmato.

O orifcio formado pelo curvamento das clulas-guarda dos estmatos

conhecido como ostolo e por essa abertura que ocorrem as trocas gasosas entre os
gases presentes na atmosfera e aqueles contidos no interior da planta.
c) Observao de clulas da mucosa bucal humana
O corante bsico azul de metileno foi utilizado para auxiliar na visualizao das clulas,
corando o citoplasma em azul claro e o ncleo da clula em azul escuro. possvel
visualizar nitidamente somente o citoplasma (2) e o ncleo (1), entretanto nota-se que
membrana citoplasmtica (3) est delimitando o citoplasma.

Figura 6. Clulas da mucosa bucal humana observado ao microscpio.

d) Observao a fresco de cultura pura de leveduras e fungos.

Foram observadas leveduras unicelulares, no filamentosas e com geometria
esfrica ou oval. Pode-se visualizar tambm a diviso desigual dessas clulas, processo
denominado por brotamento (Figura 5).

Figura 7. Reproduo de clulas das leveduras por brotamento.

No brotamento, a clula parental forma uma protuberncia (broto) na sua

superfcie externa. medida que o broto se alonga, o ncleo da clula parental se
divide, e um dos ncleos migra para o broto. O material da parede celular ento
sintetizado entre o broto e a clula parental, e o broto acaba se separando.
Comparando os diferentes tipos de clulas, nota-se que as clulas vegetais e
leveduras por possurem parede celular apresentam uma estrutura mais organizada do
que a clula animal. A parede celular forma uma rede que circunda e protege toda a
clula proporcionando forma e rigidez.

e) Observao microscpica de culturas puras de bactrias, leveduras e

fungos filamentosos com o uso de corante.
A cultura de leveduras foi submetida ao calor da chama do bico de Bunsen
causando a morte de algumas clulas e estas foram coradas pelo azul de metileno que
adentra estas clulas, como mostra a figura 8.

Figura 8. Figura esquemtica vista ao microscpio de cultura de leveduras mortas e vivas.

5. Referncias Bibliogrficas
http://www.cienciasnatureza.com/2012/10/quais-as-diferencas-entre-celulas.html
http://ramonlamar.blogspot.com.br/2011/11/biologia-no-templo-8-num-domingopela.html
Alcntara, F.; Cunha, M.A. Microbiologia: Prticas laboratoriais. 2. Ed.Aveiro.
Universidade de Aveiro, 2011. 297 p.
Lacaz-Ruiz, R. Manual Pratico de microbiologia Basica. Edusp: So Paulo, 2000. 144p.
Neder, RN. Microbiologia: Manual do Laboratrio, Editora Nobel, So Paulo, 2000.
144 p.
Ribeiro, M.C; Soares, M. M. S. R. Microbiologia pratica: Roteiro e Manual. Editora
Atheneu: so Paulo, 2000. 112 p.