Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente

Biologa Ambiental

BIOLOGIA AMBIENTAL
PRACTICA DE LABORATORIO

PEDRO NEL PATIO PINILLA

Cdigo: 93238403
CLAUDIA PATRICIA DORIA CAPERA.
Cdigo: 1.013.655.299

Tutora:
BILMA ADELA FLORIDO CUELLAR
Magister.

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA (UNAD)

INGENIERA AMBIENTAL
CEAD IBAGUE
2015

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INTRODUCCIN

La invencin del microscopio establece el punto de partida para el descubrimiento de la

clula y el desarrollo cientfico de la teora celular. Hombres como Rober Hooke, Loren
Oken, Jacob Scheiden, Teodor Schwan y Rodol Virchow, establecieron los primeros
postulados que dan fundamento al basto conocimiento que la biologa ofrece para beneficio
de la humanidad.

En el siguiente informe se describe las actividades realizadas en el laboratorio de biologa

ambiental, sobre el proceso de manejo del microscopio ptico compuesto, estaremos dando
a conocer las estructuras externas e internas de los diferentes objetos y clulas observadas
en la prctica de laboratorio, presentando fotografas del resultado de la observacin.

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OBJETIVOS

GENERAL
Aprender a manejar el microscopio ptico de la mejor manera adecuada.
ESPECIFICOS
Conocer las partes que componen un microscopio ptico.
Realizar prcticas que permitan observar clulas vegetales.
Realizar prcticas que permitan observar clulas animales.

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MANEJO DEL MICROSCOPIO PTICO COMPUESTO

Procedimiento:
1. Recorte un cuadrado de 10 mm de lado de papel peridico, con letras impresas de
preferencia que contenga la letra e minscula, colquelo sobre la lmina y
deposite encima 2 a 3 gotas de agua y cbralo con una laminilla. (Al colocar el
montaje en el microscopio la lmina debe quedar de tal manera que cuando usted
vea a simple vista las letras, las pueda leer).
Tcnicas de enfoque

El enfoque es la operacin primordial en el manejo correcto del microscopio ptico

compuesto. En el enfoque se ajustan las distancias focales del sistema de lentes, objetivo,
ocular y objeto. El procedimiento enumerado a continuacin debe seguirse rigurosamente
cada vez que se va a usar el microscopio:

a. Encienda la luz del microscpico

b. Coloque el micro preparado sobre la platina sujetndolo con las pinzas, con los
botones de desplazamiento de la platina, centre el objeto sobre el eje central de la
platina coincidiendo con el eje ptimo del M.O.C.
c. Siempre con el Objetivo de Menor aumento 4X o 5X, acerque al mximo la
muestra al objetivo, manipulando el tornillo macromtrico.
d. Colocando los ojos abiertos en los oculares, aleje lentamente la platina del
objetivo, manipulando el tornillo Macromtrico, hasta que observe la formacin
de una imagen. Una vez enfocado el objeto, defina la imagen con el tornillo

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e.
f.

g.
h.

(botn) micromtrico. (Un cuarto de vuelta hacia delante y hacia atrs es

suficiente y lo recomendable). Si no logro la imagen repita la operacin desde el
item c.
Enfoque y defina la letra e impresa en el papel peridico con los objetivos de
4X o 5X y 10X o 20X. Realice un dibujo de los que observa.
Recorra los bordes de la letra elegida. Una mano maneja los botones de
accionamiento de la platina y la otra est sobre el micromtrico perfeccionando
cada vez y constantemente los poderes de definicin y penetracin.
Gire el revlver para pasar al objetivo de 40X y realice un dibujo de lo que
observa.
Dibujar lo observado en cada uno de los objetivos, en el espacio de esta gua
destinado para ello
5X

20X

40 X

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Descripcin de la observacin:
Se observ la letra e de un papel peridico, desde tres diferentes lentes, comenzando, por el
lente de color rojo (5X), con este lente empezamos a observar, algunos puntos en blanco
dentro de la letra, que sin la utilizacin del microscopio no es posible. Con el lente de 20X,
ya se puede ver los pixeles que conforman la letra y con el lente de 40X, se observa un
trazo de la letra en forma de ziz zaz, y nos damos cuenta que la unin de ellas con las que
dan la forma a la letra e.
2. Realice un montaje similar al anterior, pero esta vez con un cuadrado de 10 mm
de lado de papel milimetrado, la tinta con que se imprimi debe quedar hacia
arriba.

Medicin del campo del microscopio

Es importante conocer el tamao del campo que nos permite observar cada objetivo para
poder determinar qu objetivo podemos utilizar para visualizar la muestra de inters. El
procedimiento enumerado a continuacin nos permitir conocer esta importante
informacin:
a. Enfoque con el objetivo de 4X, como aprendi en el punto anterior, el montaje del
papel milimetrado.
b. Coloque el micropreparado sobre la platina sujetndolo con las pinzas, con los
botones de desplazamiento de la platina, centre el objeto sobre el eje central de la
platina coincidiendo con el eje ptimo del M.O.C.
c. Ubique una de las lneas verticales del papel sobre el borde izquierdo del campo.

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d.

Realice la medicin del dimetro del campo ptico de este objetivo de

acuerdo con las marcas del papel.

e. Repita los pasos del a hasta el d para los objetivos de 10X o 20X y de 40X.
f.

Dibujar lo observado en cada uno de los objetivos, en el espacio de esta gua

destinado para ello.
5X

20X

En 5X: se observan 8 mm

En 20X se observan 3 mm
40 X

En 40X observamos 2 mm
Poderes del microscopio ptico compuesto

Bsicamente los poderes del microscopio ptico compuesto son los de resolucin,
penetracin, ampliacin y definicin.

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El poder de resolucin es la propiedad definida por la distancia ms pequea que

separa dos objetos y en la que se pueden distinguir como elementos independientes.

El poder de penetracin o profundidad de foco es la propiedad del objetivo de permitir

observar varios planos del micropreparado con la misma posicin del foco.

El poder de ampliacin: corresponde a la capacidad de aumento del objeto observado.

El poder de definicin: es la capacidad del microscopio de formar imgenes con contornos

bien definidos.

Estos poderes se logran esencialmente con el tornillo micromtrico.

a. Haga un montaje seco de un trozo de 1 cm de lado de tela no coloque laminilla,

realice observaciones con los objetivos panormicos del menor al mayor 4X o 5X,
10X o 20X y 40X, destaque las profundidades del objeto con el micromtrico.
b. Haga un montaje seco de cristales de azcar y sal, no coloque laminilla obsrvelos a
diferentes aumentos y profundidades.
c. Dibujar lo observado en cada uno de los objetivos, en el espacio de esta gua
destinado para ello.

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TELA
5X

20X

40 X

Descripcin de la observacin:
Se observ un trozo de tela, color negra, se mir desde tres lentes, empezamos por el lente
color rojo, que corresponde a 5X, como podemos ver en la imagen se visualizan dos fibras,
que a sus vez estn integradas por micro fibrillas. En el lente de 20X, se puede observar que
esas micro fibrillas, estn compuestas por micro fibrillas ms delgadas. Y por ltimo en el
lente de 40X, la imagen se distorsiona.

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AZCAR
5X

20X

40x

Descripcin de la observacin:
En esta prctica se observ unos gramos de azcar, al igual que en los dems
procedimientos empezamos por el lente color rojo (5X), pudimos ver una imagen muy linda
muchas veces hemos mirado la azcar, pero tal vez nunca habamos podido ver los cristales
que la conforman, al aumentar o cambiar de lente la imagen se empieza a distorsionar. Fue
importante la aclaracin de la docente, donde nos refera que esos lentes son ms potentes y
se utilizan para aquellos organismos microscpicos.

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SAL
5X

20X

40X

Descripcin de la observacin:
Se observ solo algunos granos de sal, luego de analizar las imgenes tomadas
directamente del microscopio, creemos que tuvimos una falla en la sincronizacin de la
luz,(mucha luz.
Al momento de ver la sal, aumentada por medio de la ayuda del microscopio, pudimos
observar que son granos redondos e inmediatamente hicimos la comparacin con la azcar
y fsicamente son muy diferentes. Nos caus curiosidad el ver que a diario manipulamos
este elemento, pero que en realidad nunca hemos visto la forma real de la sal.

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2. LA CLULA
Procedimiento:
Observacin de las clulas vegetales (Cebolla)
a. Tome un trozo pequeo de epidermis de cebolla, de 1 cm de lado aprox. Y colquelo
sobre una lmina portaobjetos.
b. Cubra el trozo de epidermis de cebolla con 2 a 3 gotas de azul de metileno. Luego retire
cuidadosamente el colorante con agua.
c. Realice un montaje hmedo de la muestra teida.
d. Enfoque y realice la observacin a menor aumento 4X o 5X.
e. Enfoque luego a aumento 10X o 20X y luego 40X de manera que se vean con claridad
las clulas.
f. Dibuje lo que observa en todos los aumentos

5X

20X

40 X

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Observacin de clulas Animales (Epitelio bucal)

En el revestimiento interno de la mejilla existen unas clulas escamosas o planas que
forman el epitelio. Su funcin es la mantener la humedad y dar proteccin a la cavidad oral.
Utilizamos estas clulas porque son fcilmente removibles.
a. Realice un montaje hmedo de sus propias clulas escamosas: colocando una gota de
azul de metileno en el centro de la lmina.
b. Con el extremo delgado de un palillo raspe suavemente el interior de su mejilla, de
abajo para arriba.
c. Ponga el producto del raspado en la gota de azul de metileno y esparza suavemente,
luego cubra la muestra con una laminilla o lmina cubreobjetos.
d. Dibuje lo que observa en todos los aumentos y resalte la presencia de la membrana
celular, ncleo, membrana nuclear, nuclolo y citoplasma.
5X
20X

40 X

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Observacin de microorganismos (procariotas y eucariotas)

En los cuerpos de agua dulce tales como estanques, humedales, lagos y lagunas habitan un
sin nmero de formas vivientes unicelulares, que van desde bacterias, hongos, protistos
hasta algas microscpicas. Descubra como en una gota de agua de un ecosistema acutico
habitan diversas formas de vida.
a.
b.
c.
d.

Coloque con una pipeta una muestra de agua de acuario o laguna

Cbrala con una laminilla
Observe en todos los aumentos diferenciando todos los organismos que encuentre.
Dibuje lo observado distinguiendo cada uno de los organismos.

5X

20X

40 X

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I. METABOLISMO CELULAR
Procedimiento:
Productos de la Fotosntesis
La elodea es una planta multicelular acutica, que habita en los estanques de agua y es
utilizada en los acuarios como planta ornamental, su hoja es de forma lanceolada.
a. Tomar una ramita de Elodea sp. colocarla en el interior del vaso de precipitado y
cubrirla con agua
b. Introducir el embudo invertido en el vaso de precipitado, de manera que la Elodea
sp. quede en su interior.
c. Colocar un tubo de ensayo lleno de agua invertido cubriendo el pico del embudo.
d. Realizar una marca donde se encuentra el nivel del agua en el tubo de ensayo al
inicio con un marcador indeleble
e. Encender la lmpara cerca al montaje y dejarlo 45 minutos, realizar observaciones
permanentes del montaje durante este tiempo.
f. Al finalizar los 45 minutos observar, dibujar y anotar todo lo que sucedi en el
montaje.
Nota: esta prctica no se realiz.

Observacin de Cloroplastos
a. Cortar una hoja de Elodea sp. desde la base.
b. Colocarla extendida sobre una gota de agua en la lmina portaobjetos.
c. Cubrirla con la lmina cubreobjetos teniendo cuidado de que no se forme burbujas
en el montaje.
d. Observarla al microscopio con el objetivo de 4X o 5X. Dibujar y describir
detalladamente la observacin.
e. Observarla al microscopio con el objetivo de 10X o 20X. Dibujar y describir
detalladamente la observacin.
f. Observarla al microscopio con el objetivo de 40X Dibujar y describir
detalladamente la observacin.

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5X

20X

40X

Descripcin de la observacin:
La observacin de la hoja de Elodea, es una de las imgenes ms fascinantes que pudimos
ver en esta prctica y es donde uno se da cuenta de la importancia de una herramienta como
lo es el microscopio.
En las imgenes pudimos ver especficamente dos cosa, la primera tiene que ver con la
pared celular y su respetiva organizacin para formar el tejido de la hoja, de igual manera
se poda ver de una forma muy clara los cloroplastos que era el objetivo principal de la
observacin de esta hoja, los cloroplastos se podan visualizar como un puntico en cada
clula, lo reconocimos gracias a la asesora de la docente.
Producto de la Respiracin
a. Servir en el vaso de precipitado, aproximadamente un tercio del volumen de la
solucin de cal 0.5%.
b. Introducir el pitillo.
c. Soplar y producir burbujas durante 3 a 5 minutos.
d. Observar qu sucede y describirlo detalladamente.
Nota: esta prctica no se realiz.

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CUESTIONARIO ANLISIS DE RESULTADOS

I.

MANEJO DEL MICROSCOPIO PTICO COMPUESTO

1. Cmo se observan las imgenes en el microscopio ptico compuesto? Por
qu?

RTA: las imgenes vistas a travs del microscopio se pueden observar de una forma mucho
ms a fondo, para nosotros es como la radiografa de los objetos, que a la simple vista
humana no se puede ver. Mediante el microscopio podemos ver las imgenes desde lo ms
profundo de su estructura, se puede ver cmo est conformada.

Por qu? Esto se debe principalmente a los lentes de aumento que maneja el microscopio,
los cuales nos permite que se den algunas caractersticas o propiedades entre ellas tenemos:
Poder separador. Tambin llamado a veces poder de resolucin, es una cualidad del
microscopio, y se define como la distancia mnima entre dos puntos prximos que pueden
verse separados. El ojo normal no puede ver separados dos puntos cuando su distancia es
menor a una dcima de milmetro. En el microscopio viene limitado por la longitud de
onda de la radiacin empleada; en el microscopio ptico, el poder separador mximo
conseguido es de 0,2 dcimas de micrmetro (la mitad de la longitud de onda de la luz
azul), y en el microscopio electrnico, el poder separador llega hasta 10 .
Poder de definicin. Se refiere a la nitidez de las imgenes obtenidas, sobre todo respecto
a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la correccin de las
aberraciones de las lentes utilizadas.
Ampliacin del microscopio. En trminos generales se define como la relacin entre el
dimetro aparente de la imagen y el dimetro o longitud del objeto. Esto quiere decir que si
el microscopio aumenta 100 dimetros un objeto, la imagen que estamos viendo es 100
veces mayor linealmente que el tamao real del objeto (la superficie de la imagen ser
1002, es decir 10.000 veces mayor). Para calcular el aumento que est proporcionando un

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microscopio, basta multiplicar los aumentos respectivos debidos al objetivo y el ocular

empleados. Por ejemplo, si estamos utilizando un objetivo de 45X y un ocular de 10X, la
ampliacin con que estamos viendo la muestra ser: 45X x 10X = 450X, lo cual quiere
decir que la imagen del objeto est ampliada 450 veces, tambin expresado como 450
dimetros.

2. Indique los poderes del microscopio que identifico en los montajes de la tela, la
sal y el azcar. Explique brevemente cmo los identific.

En la tela: en este montaje se identific 3 poderes que se prestaron para observar el

pedacito de tela los cuales fueron el de resolucin, nos permiti visualizar mejor las fibras
como objetos independientes de las otras fibrillas; el de penetracin, que nos permiti ver
ms de cerca estas fibrillas; y el de ampliacin, que visualiz las micro fibrillas que
componen las fibras de la tela.

En la azcar: de igual forma en este montaje seco se reconoci el uso de los 3 poderes que
en el punto anterior como la resolucin, en donde pudimos ver que cada partcula era
independiente de las dems; el de penetracin, se poda mirar ms a fondo de cada una de
las partculas; y el de ampliacin que nos ampli la imagen de estas partculas para su
mejor visualizacin.
En la sal: sucede exactamente lo mismo que en los puntos anteriores, se identific los 3
poderes los cuales son: el de resolucin, el de penetracin y el de ampliacin
Nota: no se identific el poder de definicin ya que cada vez que acercbamos la imagen
con los objetivos de mayor capacidad se vean cada vez ms distorsionada la imagen debido
a que estos objetivos son diseados para ver objetos ms pequeos o microscpicos, como
bacterias. Etc.

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ll. LA CLULA

1. Indique los organelos que identific en las clulas vegetales. Por qu pudo
observar esos y no otros? (Revisar qu componentes o molculas de la clula
tie el azul de metileno).

RTA: En la observacin con el microscopio, pudimos identificar la pared celular y los

cloroplastos de la Elodea ps segn las imgenes tomadas con la cmara, son los mismos
organelos que se tien con el azul de metileno, siendo ms fcil de ver con los objetivos
de menor alcance.

2. Indique los organelos que identific en las clulas animales. Por qu pudo
observar esos y no otros? (Revisar qu componentes o molculas de la clula
tie el azul de metileno).

RTA: Se observ la membrana celular, ncleo, membrana nuclear y citoplasma los

mismos organelos que se tien con el azul e metileno y los ms visibles sin necesidad
de usar los objetivos de mayor aumento.

lll. METABOLISMO CELULAR

1. Qu tipo de sustancias espera

encontrar en el tubo de ensayo del montaje

productos de la fotosntesis al final del experimento? Por qu?

RTA: no se hizo la prctica.

2. Dnde se ubican los cloroplastos en las clulas vegetales? Por qu?

Al microscopio ptico pueden ser observados, en fresco y sin teir, y aparecen

generalmente como unos orgnulos discoidales en los que, ocasionalmente, se distinguen

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en su interior unos cuerpos densos o grana. Se encuentran localizados en el citoplasma.

No tienen un lugar fijo, aunque frecuentemente se encuentran entre la pared vacuolar y la
membrana plasmtica. Estn sometidos a movimientos de ciclosis debido a las corrientes
citoplasmticas, pero tambin pueden presentar movimientos activos de tipo ameboide o
contrctil relacionados con la iluminacin.

3. Por qu cambia la solucin de cal? Y Qu organelo de nuestras clulas

interviene en la formacin de ese precipitado?

RTA: no se hizo la prctica.

PREGUNTA INTEGRADORA:

Si lo llaman para la evaluacin y propuesta de un plan de manejo de un humedal que est

siendo contaminado por el vertimiento de aguas residuales de una planta procesadora de
grasas y aceites. Cules de los conceptos (tipos de organismos y procesos metablicos)
trabajados en esta prctica consideran que usted debe tener en cuenta como ingeniero
ambiental, para proponer una solucin para la recuperacin y mantenimiento de este
sistema y por qu?
RTA: Lo primero que tengo que se hacer es un diagnostico o evaluacin del impacto
ambiental que ha ocurrido en el agua, Para conocer el estado de las aguas del humedal es
necesario recoger una serie de muestras que reflejaran la calidad del agua tras el respectivo
anlisis de los parmetros fsico-qumicos. Con el fin de garantizar homogeneidad y
continuidad en los anlisis en todo el cuerpo de agua, Para el muestreo se analizara los
siguientes parmetros:
Temperatura agua y ambiente, humedad relativa, transparencia agua, pH, turbidez (cualitativo),
color (cualitativo), olor (cualitativo).En laboratorio: color (cuantitativo), turbidez (cuantitativo),
conductividad, oxgeno disuelto ,DQO, DBO5, slidos, acidez, alcalinidad, dureza, nitratos, hierro, fosfatos,
cloruros y nitritos.

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Una vez determinado el grado de contaminacin, recomendaramos el cierre de la fuente que est generando
la contaminacin en este caso la procesadora de aceites y grasas. Seguidamente hara un plan de
contingencia para absorber el material superficial y por ultimo planteara un manejo de fitorecuperacin y
fitoremediacin y de esta manera tratar de descontaminar el humedal.

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CONCLUSIONES

Una vez terminada la prctica de biologa ambiental podemos concluir:

Como futuros ingenieros ambientales, es de suma importancia conocer el manejo
adecuado del microscopio.
En nuestra labor profesional, muy posiblemente tendremos que hacer estudios de
evaluacin, donde el manejo del microscopio ser fundamental para este tipo de
actividades.
La importancia de algunos tips aprendidos en la prctica, como por ejemplo, la
utilizacin del azul de metileno para identificar mejor algunas estructuras, son
herramientas que permitirn un mejor desempeo de nosotros a nivel profesional.
Realizar diferentes observaciones, con diferentes elementos, genero mejor habilidad
en nosotros como estudiantes.

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BIBLIOGRAFIA

Biologa. LOS CLOROPLASTOS. Organelos (2013) consultado el 17 septiembre 2015.

Disponible en: www.infobiologia.net/p/cloroplastos.htm
Claves. FITORREMEDIACIN Y FITORECUPERACION. (2010) consultado el
septiembre 2015. Disponible en: http://digital.csic.es/bitstream/10261/16683/1/eco.pdf

17

Gua. LABORATORIO. Componente practico. (2015) consultado el 17 septiembre 2015.

Disponible en: http://campus02.unad.edu.co/ecapma01/course/view.php?id=529
Video. MICROSCOPIO. Virtual (2012) consultado el 17 septiembre 2015. Disponible en:
https://www.udel.edu/biology/ketcham/microscope/