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GUA DE LABORATORIO
http://www.ecoduna.com/algen-und-co.html?lang=es
2015
1
PRACTICA No 1
EL MICROSCOPIO: PARTES Y MANEJO
INTRODUCCIN
El estudio de la vida en todas sus formas y tamaos, y en particular la clula,
necesariamente deben estar asociados al maravilloso invento de los lentes y los
microscopios, ya que estos permitieron al ampliar la imagen de lo observado
descubrirlos y posteriormente detallarlos, ya que no eran perceptibles al ojo humano.
El primer microscopio fue inventado por H y Jansen (1950). Mucho ha revolucionado
este primer y simple microscopio y an seguir el hombre con el uso de sus
conocimientos inventando ms instrumentos que le permitan ir ms all de los
predecible.
PARTES DEL MICROSCOPIO
OBJETIVOS:
1. Reconocer el microscopio como un sistema ptico y aprender a manejarlo,
entendiendo que este es una herramienta indispensable para el trabajo de la
Biologa
2. Conocer y manejar las propiedades del microscopio aplicndolas en
observaciones de objetos pequeos.
3. Determinar las medidas tiles.
MATERIALES:
Microscopios, Porta y cubre objetos, Caja de Petri, papel peridico, papel o revistas a
color, papel milimetrado, hilos de colores, telas de colores, tijeras y un gotero.
PROCEDIMIENTO:
INVESTIGACION PRELIMINAR.
Lleve al laboratorio un texto sobre el microscopio, del cual ya hayas hecho una lectura
previa. Elabore una lnea de tiempo sobre el microscopio
Utilizando el esquema del microscopio que se te entrega:
Ubica, describe y enuncia las funciones de las siguientes partes del subsistema ptico:
Lmpara, Diafragma, Condensador, platina para colocar la muestra a observar,
Objetivos y el Ocular.
Ubica, describe y enuncia las funciones de las siguientes partes del subsistema
mecnico: Diafragma, palanca del diafragma, tornillo macro mtrico, tornillo
micromtrico.
2. Describe en que consisten los siguientes poderes o propiedades del microscopio.:
Poder de Ampliacin, Poder de definicin, Poder de Penetracin y Poder de resolucin
3. Qu significa Campo visual o dimetro del campo del microscopio?
OCULAR
OBJETIVO
IMAGEN AMPLIADA
10X
3X
___________
10X
10 X
___________
10X
40 X
___________
10X
100X
___________
Mueve el carro hacia adelante, luego hacia atrs, hacia la derecha y hacia la
izquierda. Haca donde se mueve finalmente el carro en cada uno de los casos en
cuanto a lo observado. Qu cambios observaste. A qu se debe?
Qu tipo de imagen es la que se forma al observar en el microscopio. Apyate en
conceptos fsicos.
Te es posible observar toda la letra con el 3X y con el 10X? Ahora pase el objetivo a
40X que ocurri con la imagen. Comprala con los anteriores casos.
Prepara una placa seca con trozos de fotografa a color de una revista o de un
peridico.
Observa a 3x, 10X. Establezca la diferencia entre el color que observa a simple vista y
la intensidad de los colores que observa a travs del microscopio. Se observan las
mismas distancias y los puntos?
Con base al dimetro de campo obtenido anteriormente, cmo podra calcular la
distancia entre los puntos observados?
PODER DE PENETRACIN
El poder de penetracin del microscopio permite observar a un mismo tiempo en que
planos estn ubicados objetos diferentes que a simple vista se ven en un solo plano. El
microscopio con su tornillo micromtrico permite calcular las distancias entre los
objetos.
Tome una placa preparada, con tres hilos de colores distintos. Observa a simple vista.
D cuantos hilos se ve cada hebra? Obsrvala a travs del microscopio a 10X. Cmo
se observa cada hilo? Qu otras propiedades adems del poder de penetracin
intervienen en el proceso de observacin que estas haciendo.
Suba el tubo soporte del lente (moviendo el tornillo hacia su cuerpo), empiece a bajar
lentamente y el hilo que primero vea bien ntido est primero, siga bajando, qu hilo
est de segundo?, observe cuntas micras recorri para enfocar el segundo; enfoque el
tercer hilo, cuntas micras recorri esta vez?
En un grfico muestre las caractersticas bsicas de los sistemas pticos de un
microscopio ptico y uno electrnico.
De cada una de las observaciones realizadas anexar el grfico que lo representa
Qu recomendaciones debes tener en cuenta para el mantenimiento del microscopio?
BIBLIOGRAFIA
1991
MADIGAN, Michael. Brock Microbiologa de los Microorganismos Editorial Prentice
Hall. Espaa
PRACTICA No 2
OBSERVACION DE DIVERSOS TIPOS DE CLULAINTRODUCCION
La clula es la unidad morfolgica, fisiolgica y de origen de los seres vivos, a pesar de
su pequeez lo que hizo difcil su reconocimiento; sin embargo gracias al invento del
microscopio, el hombre pudo reconocerla y la valorar la importancia de su
funcionamiento para la vida tanto vegetal, animal y la del hombre.
OBJETIVOS
1. Reconocimiento de diversas formas de clulas, teniendo en cuenta los diversos
reinos de la naturaleza
2. Reconocer la clula de organismos unicelulares
3. Desarrollar habilidades y destrezas en el manejo del microscopio al montar placas
en fresco.
MATERIALES:
Microscopios, Porta y cubre objetos, Caja de Petri, papel seda, palillos agujas de
diseccin, cuchillas de afeitar (nuevas), lpiz de cera, esmalte, corcho solucin de
infusorios o agua de charca previamente preparada por los estudiantes.
Azul de metileno, gotero, colorante de Wright, gotero de lugol, lpiz de cera
Hojas de tallos de novios, elodea, cebolla blanca o morada, papa, ptalos de
flores, moho de pan o de frutas, hojas de caucho, baja lenguas.
PROCEDIMIENTO:
En primer lugar verifique que su microscopio est completo, funciona y est limpio.
En cada una de las observaciones es necesario hacer los grficos, determine el
aumento y tamao de la imagen
Tome un trozo de corcho, haga un corte muy fino (transversal) con la cuchilla de
afeitar, colquelo en la lmina o porta objeto con una gota de agua, cbrala con el
cubre y observe con el objetivo 3,2X Qu semejanza tiene su observacin con la hecha
por Robert Hooke en 1665. Haga la comparacin grficamente entre la teora y lo que
observo.
2. OBSERVACIN DE PROTISTOS.
DE UNA GOTA DE AGUA
Marque las lminas con nmeros para identificar las fuentes de cada muestra. Tome
una gota de agua de charca o de un infusorio, colquela en el porta objeto. Coloque el
cubre y proceda a hacer las observaciones comparando la riqueza de cada muestra.
Dibuje los organismos observados de cada muestra. De los microorganismos
observados, con su descripcin y nombre. (Algas, paramecios, etc.) Grafquelas e
identifquelas aportando el nombre de cada organismo.
3. OBSERVACION DE UN CATFILO DE CEBOLLA MONTAJE EN FRESCO
Tome un catafilo de cebolla, desprenda la membrana interna y mntela en el porta
objetos con una gota de agua. Observe.
Tome la misma muestra y tala con una gota de Lugol. Compare los dos montajes y
anote sus apreciaciones.
4. OBSERVACIN CLULAS VEGETALES
Tome una hoja de caucho, aplquele esmalte en el envs, djela secar y luego retire la
pelcula formada, haz un montaje siempre con agua y descubre las estructuras all
encontradas. Que nombre reciben, que forma y color tienen?
Haga varios cortes del tallo de novio transversal y otro longitudinal, escoger los
ms finos y montar la placa (colquelos en la caja de Petri con agua para que no
se sequen o deshidraten).
Monte una hoja de elodea, determine los cloroplastos con la interrupcin de la
luz.
Pele una papa y realice varios cortes finamente, tome uno de estos cortes y
mntelo en el porta objetos y luego agrguele una gota de lugol. Haga la
comparacin.
Tome un ptalo y realice el montaje correspondiente. Observe las estructuras
internas a que corresponden, que nombres reciben los pigmentos que all se
observan?
BIBLIOGRAFIA
Cooper, Goeffrey, Hauseman, Robert. La Clula. Marban. Madrid Espaa 2007
AVERS, Ch, Biologia Celular. Grupo Editorial Interamericano. Mxico. 1991
AUDESIRK, Teresa y Gerald BIOLOGIA. Unidad en la Diversidad. Prentice Hall
Hispanoamericana S-A. MEXICO.1996
PRACTICA No 3
PROPIEDADES DE LA MEMBRANA CELULAR
INTRODUCCIN:
La clula como entidad estructural, funcional y de origen de los seres vivos, es
indudablemente un sistema abierto, intercambiando materia y energa con el medio
que la rodea. Mantener la homestasis implica que la membrana celular o plasmtica
previamente se le ha agregado agua comn. Observe que ocurre con el cuero, a que se
debe ese cambio. Ahora invierta la concentracin de sal en el frasco grande. Compare
lo que ocurre ahora.
Cmo se experimenta la osmosis, en cul de los dos procesos, en qu sentido es ms
rpida la osmosis, que diferencia existe entre la osmosis y la difusin.
C. PRESIN OSMTICA
Tome un frasco de plstico pequeo, crtele el fondo y tpelo con papel celofn,
amrrelo con la liga, agregue tinta china y fjele en la boca un pitillo, ahora
introdzcalo en un beaker con agua. Observe.
Por qu se eleva en el interior del pitillo la columna de disolucin de tinta china?
En qu consiste la presin osmtica, como se comporta este fenmeno en la clula de
un organismo de agua dulce o salada.
D. SOLUCIONES HIPERTNICAS E HIPOTNICAS.
1. En un vidrio de reloj, agregue una pequea cantidad de sal, con la ayuda de un
gotero agregue una gota de agua y describe la reaccin.
De acuerdo a lo observado, que tipo de solucin se ha presentado? Porque?
2 En un beaker, agregue 50 ml de agua e introduzca un trozo de pan. Observe la
reaccin y determine qu tipo de solucin se ha presentado.
3. Tome una zanahoria y perfrela en el centro, en el introduzca azcar
hasta
colmarlo e introdzcalo en un recipiente con agua sin que la tape. Dejarlo por el
tiempo que dure el laboratorio. AL finalizar observe lo sucedido. Qu fenmeno
ocurri.
Imagnese, que una clula vegetal o animal se encuentra en un medio hipotnico e
hipertnico. Qu sucedera. Grafcalo.
En qu consiste la PLAMOLSIS, en qu casos se puede presentar, qu puede causarlo?
BIBLIOGRAFIA
Marban. Madrid
PRACTICA No. 4
IDENTIFICACIN Y DIFERENCIACIN DE LAS CELULAS SANGUINEAS HUMANAS
INTRODUCCIN
Los seres humanos, al igual que los animales, estamos dotados de clulas,
especializadas en funciones a travs de tejidos como el nervioso, muscular, y
sanguneo.
El tejido sanguneo est constituido por el plasma y las clulas o glbulos rojos,
blancos y plaquetas, los cuales son elaborados por la mdula roja de los huesos, cada
uno de ellos con funciones especficas.
A nivel reproductor los espermatozoides son las clulas encargadas de fecundar el
ovulo, garantizando la perpetuacin de la especie.
OBJETIVOS:
1. Obtener un frotis sanguneo
2. Identificar las diferentes clulas sanguneas y de tejidos
MATERIALES Y REACTIVOS
-
PROCEDIMIENTO:
A: CLULAS SANGUNEAS
1. Frotis sanguneo:
a. Preparar lmina, libre de grasa
b. Seleccionar un compaero donante, limpiar yema del dedo del corazn,
pinchar con lanceta
c. Dejar caer una gota de sangre en un extremo de la lmina, con otro
lmina, colocarlo sobre la gota en un ngulo entre 30 y 40, con esta
lmina hacer una extensin con un movimiento rpido y seco hasta el
otro extremo, hasta lograr una capa fina , sin presencia de grumos
Con
PRACTICA No.5
MITOSIS EN CLULAS DE CEBOLLA Y OBSERVACION DE LOS TUBOS
SMINIFEROS EN GRILLINTRODUCCIN
El ciclo celular de una clula eucariota comprende fases como la Interfase, Mitosis y
Citocinesis, cada una de ellas cumple funciones definidas de importancia para la vida
de la clula. El tejido sanguneo est constituido por el plasma y las clulas o glbulos
rojos, blancos y plaquetas, los cuales son elaborados por la mdula roja de los huesos,
cada uno de ellos con funciones especficas.
Las clulas germinales o reproductoras son originadas a travs de la meiosis, los cuales
presentan la mitad de los cromosomas de las clulas madres, por lo cual son
denominadas haploides (n)
OBJETIVOS:
1. Reconocer las fases de la mitosis en races de cebolla y compararlas con
placas preparadas
2. Preparar placa de tejido del testculo (tubo seminfero) del grillo
3. Reconocer las etapas de la espermatognesis en un tubo seminfero
MATERIALES Y REACTIVOS
Microscopio
Portaobjetos
Cubreobjetos
Lanceta estril
Cubeta de tincin
Aguja enmangada
Mechero
Vidrio de reloj
Orcena
Palillos
Grillo macho
Cebolla (races en mitosis)
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PROCEDIMIENTO
PARTE A:
1. Llenar un vaso de precipitados con agua y colocar un bulbo de cebolla sujeto
con dos o tres palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el
agua. Al cabo de 3-4 das aparecern numerosas raicillas en crecimiento de
unos 3 o 4 cm de longitud.
2. Cortar con las tijeras unos 2-3 mm del extremo de las raicillas y depositarlo en
un vidrio de reloj en el que se han vertido 2-3 ml de orcena.
3. Calentar suavemente el vidrio de reloj a la llama del mechero durante unos 8
minutos, evitando la ebullicin, hasta la emisin de vapores tenues.
4. Con las pinzas tomar uno de los pices o extremos de las raicillas y colocarla
sobre un portaobjetos, aadir una gota de orcena y dejar actuar durante 1
minuto.
5. Colocar el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raz. Con el mango de una
aguja enmangada dar unos golpecitos sobre el cubre sin romperlo de modo que
la raz quede extendida.
6. Sobre la preparacin colocar unas tiras de papel de filtro, 5 o 6. Poner el dedo
pulgar sobre el papel de filtro en la zona del cubreobjetos y hacer una suave
presin, evitando que el cubre resbale. Si la preparacin est bien asentada no
hay peligro de rotura por mucha presin que se realice.
7. Observar al microscopio.
PARTE B: Preparacin. Haga una descerebracin como lo indica la profesora.
1. Abrir con una cuchilla el abdomen, dejar al descubierto unas bolsitas
blancas amarillenta y brillantes rodeadas de grasa, la cual ocupa todo o casi
toda la cavidad abdominal.
2. Colocar los testculos en una lmina y extenderlos con una solucin salina
3. Colocarlos en el mechero suavemente
4. Colorearlos con orcena, dejar secar y lavar el exceso de colorante.
5. Observar al microscopio, con menor aumento y luego con el 100X y el aceite
de inmersin. Localice el pice del tubo seminfero y reconozca todas las
zonas ayudndose del grfico anexo.
6. Dibuje lo observado y comprelo con el del grfico
OBSERVACIN MICROSCPICA
Iniciar con los objetivos de menor aumento hasta lograr observacin con el objetivo de
100X y con aceite de inmersin. Con la presin sobre el porta de la preparacin se
logra una extensin y difusin de las clulas del meristemo de la cebolla.
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BIBLIOGRAFIA
Cooper, Goeffrey, Hauseman, Robert. La Clula. Marban. Madrid Espaa 2007
AVERS,Ch, Biologia Celular. Grupo Editorial Interamericano. Mxico. 1991
AUDESIRK, Teresa y Gerald.BIOLOGIA. Unidad en la Diversidad. Prentice Hall
Hispanoamericana S-A. MEXICO.1996
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PRATICA N 6
DETERMINACIN DE LA TASA FOTOSINTTICA DE UNA PLANTA
ACUTICA (ELODEA)
OBJETIVOS
Observar el efecto de diferentes factores ambientales (intensidad luminosa,
concentracin de CO2, temperatura) sobre la tasa fotosinttica.
Interpretar y comparar, por medio de graficas el efecto de los factores estudiados y
los principios de un montaje experimental con diversos tratamientos.
MATERIALES Y EQUIPO:
Frasco grande de vidrio o probeta 1000 ml, embudo de vidrio, tubo de ensayo
mediano o grande, lmpara de 100 watts, ramita de planta acutica (Elodea densa),
agua sin cloro (dejar destapada dos das), solucin de cido actico 5%, solucin de
bicarbonato de sodio 10%, termmetro, vinagre comercial. Papel indicador de pH,
Regla y reloj.
Preparacin de cido actico 5%:
agua destilada. Agite y disuelva.
Al graficar la cantidad de gas producido I/d se obtiene una lnea recta hasta cuando I
esta limitando la reaccin. Si hay incremento de fotosntesis a mayores intensidades,
posiblemente otro factor, como la concentracin de CO 2
o la Temperatura esta
limitando el proceso.
PROCEDIMIENTO
Corte una ramita de la planta de elodea unos 10 cm de longitud, en la base de la
planta realice un corte en el tallo y agregue unas pocas gotas lentamente la solucin
de cido actico (vinagre comercial) para activar la reaccin. Coloque la ramita en el
interior de un tubo de ensayo invertido (o bien en un embudo de vidrio ) y colquela
dentro del frasco de precipitados ( beaker ) vidrio que contenga la solucin de
bicarbonato de sodio 10%.
Cuadro 1.
Promedio de produccin de burbujas para Elodea densa bajo diferentes
intensidades de luz
CUESTIONARIO
Existen diferencias en la tasa de produccin de oxgeno que indiquen
diferencias en la tasa fotosinttica?
Cmo se podra medir la tasa de fotosntesis sin utilizar la produccin de
oxgeno?
Cmo se relaciona la distancia a la que se encuentra la fuente luminosa de
la planta, con la intensidad de la luz?
Durante la fotosntesis ocurre el proceso de respiracin?
En qu unidades se puede expresar la intensidad de luz?
Cmo se transforma la luz?
BIBLIOGRAFIA
Cooper, Goeffrey, Hauseman, Robert. La Clula. Marban. Madrid Espaa 2007
AVERS,Ch, Biologa Celular. Grupo Editorial Interamericano. Mxico. 1991
AUDESIRK, Teresa y Gerald. BIOLOGIA. Unidad en la Diversidad.
Prentice Hall
Hispanoamericana S-A. MEXICO.1996