-Allende Lpez Nancy Alejandra

Cochabamba Grupo:47
29/Oct/2015

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Equilibrio y cintica

Por:

-Fuentes Nuez Alfredo

-Olvera Gonzlez EstefaniaE

OBJETIVO
INTRODUCCIN AL TEMA
Espectrofotometra.
La espectrofotometra se refiere a los mtodos, cuantitativos, de anlisis qumico
que utilizan la luz para medir la concentracin de las sustancias qumicas. Se
conocen como mtodos espectrofotomtricos y segn sea la radiacin utilizada
como espectrofotometra de absorcin visible (colorimetra), ultravioleta, infrarroja.
La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en las
investigaciones biolgicas.
El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin
absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida
de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.
Todas las sustancias pueden absorber energa radiante, aun el vidrio que
parece ser completamente transparente absorbe longitud de ondas que
pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la regin del
infrarrojo.
La absorcin de las radiaciones ultravioleta, visibles e infrarrojas depende
de la estructura de las molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica.
Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida; la
energa radiante no puede producir ningn efecto sin ser absorbida.
El color de las sustancias se debe a que stas absorben ciertas longitudes
de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos
aquellas longitudes de onda no absorbida.
Espectrofotmetro
Un espectrofotmetro es un instrumento que tiene la capacidad de manejar un haz
de Radiacin Electromagntica (REM), comnmente denominado Luz,
separndolo en facilitar la identificacin, calificacin y cuantificacin de su energa.
Su eficiencia, resolucin sensibilidad y rango espectral, dependern de las
variables de diseo y de la seleccin de los componentes pticos que lo
conforman.

FENMENOS DE INTERACCIN ENTRE LUZ Y MATERIA

Fenmeno de absorcin
Cuando una partcula que se encuentra en estado de reposo o estado
fundamental interacciona con un haz de luz, absorbe energa y se transforma en
una partcula en estado excitado. La molcula absorbe la energa de la onda y
aumenta su energa, y ese aumento de energa es igual a la energa de la
Radiacin Electromagntica absorbida (E = han). La partcula en estado excitado
tiende a volver de forma espontnea a su estado de reposo desprendiendo la
energa absorbida en forma de calor.
Espectro de Absorcin. Cada especie absorbente, que recibe el nombre
de cromgeno, tiene un determinado espectro de absorcin. El espectro de
absorcin es un grfico donde se representa en ordenadas la Absorbancia y en
abscisas la longitud de onda. La medida de la cantidad de luz absorbida por una
solucin es el fundamento de la espectrofotometra de absorcin.
Por eso es importante trabajar a la longitud de onda a la que la sustancia
estudiada absorbe la mayor cantidad de luz (a mayor cantidad de luz, mayor
cantidad de sustancia).
Fenmeno de emisin
Algunos compuestos, tras ser excitados por la luz, vuelven al estado fundamental
produciendo la emisin de energa radiante. En este caso, lo que se mide es la
energa emitida y, en este fenmeno se basa la fotometra de llama o la
fluorescencia.
Ley de Bourger-Lambert-Beer
Bourguer, Lambert y Beer, a travs de sus observaciones establecieron relaciones
de la variacin de la intensidad de luz transmitida por una muestra con el espesor
de ella o con la concentracin de la sustancia, para materiales translcidos. Estas
relaciones se conocen como la ley de Bourguer-Lambert-Beer o ley general de la
espectrofotometra que permite hallar la concentracin de una especie qumica a
partir de la medida de la intensidad de luz absorbida por la muestra.
Esta ley se puede expresar en trminos de potencia de luz o de intensidad de luz,
asumiendo luz monocromtica, como:
It / I0 = 10-bc

Donde It es la intensidad de luz transmitida por la muestra, I0 la intensidad de luz

que incide sobre la muestra y que proviene de la fuente, el coeficiente de
absortividad molar en unidades de M -1cm-1, b es la longitud de la trayectoria del
haz de luz a travs de la muestra o el espesor de la celda en centmetros o lo que
se conoce como paso ptico.
La relacin It / I0 se conoce como transmitancia, T, y es la medida primaria que se
realiza en los instrumentos para medir la absorcin de luz por parte de una
muestra. Si la relacin se expresa en forma porcentual, entonces se llama
porcentaje de transmitancia:
% T = 100.It / I0
La luz absorbida sera I0 - It es decir la diferencia entre la intensidad de la luz
incidente y la intensidad transmitida despus de pasar a travs de la muestra. A
veces se expresa en forma porcentual en funcin de la transmitancia medida
como:
Porcentaje de absorcin = (Tblanco - Tmuestra.) x 100 o absortancia.
Cuando se toma el logaritmo decimal negativo de la relacin It / I0 , entonces:
-log It / I0 = - log T o igual que log I0 /It == logI0 - logIt
Relacin que representa la cantidad de luz absorbida por la muestra.
La relacin -log It / I0 = - log T recibe el nombre de Absorbancia y se designa por A.
La ley de Bourguer-Lambert-Beer se puede entonces escribir de las siguientes
formas:
It / I0 = 10-bc, - log T = e b C, -log T = A = e b C
Siendo C la concentracin del soluto en moles / litro de solucin, e una constante
denominada coeficiente de absortividad molar cuyas unidades son: cm -1 litro / mol
y b en cm, se llega, entonces, a que la absorbancia es adimensional...
El coeficiente de absortividad molar e es funcin de la longitud de onda, del ndice
de refraccin de la solucin y es caracterstico de cada sistema soluto-solvente. Es
una propiedad intensiva, que no depende de la concentracin de la sustancia y
representa la absorcin de luz por parte de un mol de soluto para una longitud de
onda dada.

Si no se conoce el peso molecular de la sustancia la ley de Beer se puede

expresar como
A = a b C, donde a se denomina coeficiente de absortividad y sus unidades
dependen de las unidades de concentracin utilizadas, que pueden estar en g/L o
g/100mL.
El registro de la variacin del coeficiente de absortividad molar , o de la
absorbancia A, o de la transmitancia T, en funcin de la longitud de onda da origen
a lo que se denomina " espectro " o curva espectral de una sustancia qumica e
indica las caractersticas de absorcin de dicha sustancia con relacin a la
longitud de onda. En muchas ocasiones la curva espectral se presenta como
Absorbancia vs longitud de onda y el espectro se denomina espectro de
absorcin, o en funcin de la transmitancia, denominndose el espectro, espectro
de transmisin.
De igual forma cuando se registra la emisin de radiacin en funcin de la longitud
de onda, los espectros se denominan como espectros de emisin, o espectros de
fluorescencia.

MATERIAL, EQUIPO Y REACTVOS

Material

1 Espectrofotmetro.

2 celdas espectrofotomtricas.

4 tubos de precipitados de 50 mL.

6 tubos de ensayo (15 mL).

2 buretas.

2 soportes universales con pinzas para bureta.

Pipeta graduada

Agua destilada.

Solucin de Lugol (I2-KI 0.002M 0.2M)

Reactivos
Disolucin de Lugol: es una disolucin de yodo molecular I2 y yoduro
potsico KI en agua destilada. Se emplea frecuentemente
como desinfectante y antisptico, para la desinfeccin de agua en
emergencias y como un reactivo para la prueba del yodo en anlisis
mdicos y de laboratorio. Consiste en 20 gramos de yodo metlico y 40
gramos de yoduro potsico, disueltos en 1 litro de agua destilada. El
yoduro potsico facilita la disolucin del yodo diatmico, debido a la

formacin de iones triyoduro I3- de acuerdo a la reaccin:

(ac)
I

I 2(s) + I (ac)

Daos a la salud (azul): 2.

Moderadamente peligroso.
Puede ocasionar una lesin
temporal
o
menor.
Moderadamente
irritante,
reversible dentro de 7 das.
Inflamabilidad (rojo): 0. Material que no se quema.
Reactividad (amarillo): 1. Sustancias que por s mismas
son estables normalmente, pero que pueden
convertirse en inestables a ciertas temperaturas y
presiones.
Sin riesgos especfico.
Agua: El agua pura es un lquido inspido (no tiene sabor), incoloro (no
tiene color) e inodoro (no tiene olor). El agua es conocida como el
disolvente universal. El agua es igualmente el constituyente mayor de
los seres vivos, estando incorporada a sus tejidos y rganos.
Daos a la salud (azul): 0. Sin riesgo. Materiales que bajo su exposicin
en condiciones de incendio no ofrecen otro peligro que
el de material combustible ordinario.

Inflamabilidad (rojo): 0. Material que no se

quema.

Reactividad (amarillo): 0. Estable. Material

que es normalmente estable an en condiciones de incendio.

Riesgos especiales: Sin riesgos especiales.

PROCEDIMIENTO

1. Calibrar la lectura del espectrofotmetro (blanco). Usando como blanco

agua destilada

2. Preparar 10 mL de una disolucin I2KI 2x10-4 M, y verterla a un 75%de la

capacidad de una, e iniciar la lectura de la absorbancia .

3. Realizar la lectura de la absorbancia cada 10 nm en un intervalo de 350-500

nm

4. Seleccionar el intervalo de valores en los que la absorbancia tiende a tener

un comportamiento constante.

PROCEDIMIENTO. CALIBRACIN DEL ESPECTROFOTMETRO

1. Una vez encendido el
espectrofotmetro con alrededor
de 15 min de anticipacin
seleccionar la longitud de onda
deseada a trabajar con ayuda de

El volumen
de la celda
6
no debe estar nunca
lleno, sino un poco por
arriba de la mitad

2. Introducir la celda con el blanco

en el porta celda, y esperar a que
el valor de la absorbancia sea
igual a cero.

3. Realizar la lectura de la
absorbancia de la solucin
propuesta a una longitud de onda
baja.

4. Utilizar como blanco agua destilada.

5. Repetir el procedimiento hasta que la absorbancia permanezca casi

constante.

PROCEDIMIENTO. CURVA PATRN

Procedimiento.
Calibracin
del espectrofotmetro
1. Preparar
soluciones
de distinta concentracin a partir de la
solucin de referencia I2-KI

2. Seleccionar la longitud de onda adecuada para hacer las lecturas

de la absorbancia

3. Cada vez que se realice la lectura de la absorbancia, es importante

introducir el blanco con anterioridad; para que de este modo la
lectura de la absorbancia en la solucin sea correcta.

4. Registrar los datos obtenidos y elaborar el grfico absorbancia vs

concentracin

Blanco
siendo
colocado en
el porta

Espectrofotmet
ro

TABLAS DE DATOS EXPERIMENTALES

Tabla 1. Absorbancia de la solucin de I 2 a diferente longitud de onda
E l( Abs
ve n orba
nt m ncia
o )
1 3 1.47
3
6
0

Aparato:
Espectrofotm
etro

Soluciones
diluidas

2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17

3
4
0
3
5
0
3
6
0
3
7
0
3
8
0
3
9
0
4
0
0
4
1
0
4
2
0
4
3
0
4
4
0
4
5
0
4
6
0
4
7
0
4
8
0
4

1.90
9
2.18
1
2.05
9
1.61
6
1.15
7
0.79
0.51
9
0.44
3
0.24
9
0.19
1
0.14
6
0.10
5
0.07
1
0.04
6
0.03
0.01

18

9
0
5
0
0

7
0.00
8

Absorbancia vs Longitud de onda.

2.5

1.5

f(x) = - 0.01x + 6.25

R = 0.81

Absorbancia
1

0.5

0
320

340

360

380

400

420

440

460

(nm)

Tabla 2. Absorvancia a diferentes concentraciones molares

Mezcla
I2 (0.002M)/
H2O /
I2 mol/L
Abs
(mL)
(mL)
1
5
0
0.002
0.969
2
4
1
0.0016
0.787
3
3
2
0.0012
0.59
4
2
3
0.0008
0.385
5
1
4
0.0004
0.175
6
0
5
0
0

10

480

500

520

Curva Patrn
1.2
1
f(x) = 491.86x - 0.01
R = 1

0.8

absorvancia

0.6
0.4
0.2
0

[I2]/(mol/L)

RESULTADOS
EJEMPLO DE CLCULO
Concentracin de I2 M
C1 V 1=C 2 V 2
C1 =0.002 M
V 1=4 mL
V 2=5 mL
C2 =

C 1 V 1 ( 0.002 M ) ( 4 mL )
=
=1.6 x 103 M
V2
( 5 mL)
C2 =1.6 x 103 M

Coeficiente de extincin
A partir del grafico Curva patrn Es posible obtener el coeficiente de extincin
dado que se elabor una regresin lineal, de la cual:

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A=bc

Y del grfico:

Por lo que:
A ( 491.86 ) c

b=m=491.86
1

m 491.86 M
= =
=491.86 M 1 cm1
b
1 cm

ANLISIS DE RESULTADOS
1.
CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFA
http://materias.fi.uba.ar/6305/download/Espectrofotometria.pdf
http://www.bioquimica.dogsleep.net/Laboratorio/Plummer/Chp04.pdf
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2001184/lecciones/Cap05/05_04_01
.htm
Consulta: 26/10/2015 a las 20hrs.

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