1.

Spectroscopia de absorbie molecular n ultraviolet i vizibil (fotometria) Absorbia molecular n ultraviolet i

vizibil
Absorbia unei cuante determin trecerea moleculei ntr-o stare excitat caracterizat de un nivel energetic crescut: M + h M*
Moleculele excitate (M*) au o stabilitate sczut, n medie 10-8 s, i revin la starea fundamental M prin emisie de energie
neradiant. M* M + energie neradiant
Gruprile funcionale care absorb radiaii din domeniul spectral se numesc cromofori.
2. Legea Lambert-Beer
Dac o radiaie strbate un sistem absorbant, o cuv de grosime d, o parte din intensitatea radiaiei incidente (I0) este absorbit
(Ia), iar cealalt parte va trece prin sistem fiind transmis (It) .
Legea Lamber-Beer este valabil numai pentru o radiaie monocromatic, n soluii diluate (<10-2mol/l). Creterea concentraiei
particulelor absorbante peste o anumit limit conduce la abateri de la legea de direct proporionalitate.
3. Aplicaiile spectroscopiei moleculare n ultraviolet i vizibil
Analiza calitativ se bazeaz pe dependena precis care exist ntre gruparea funcional sau molecul i lungimi de und
specifice la care speciile menionate absorb o radiaie electromagnetic. Parametrii monitorizai:
prezentarea unor maxime (peak-uri) i minime;
intensitatea reletiv a benzilor;
lungimile de und corespunztoare maximelor. Pentru analiza calitativ pot fi folosite cataloage cu spectre etalon.
Analiza cantitativ sau spectrometria
Principii
fiecare substan prezint o band de absorbie caracteristic, iar determinarea absorbiei se va face la lungime de und max care
corespunde absorbiei maxime .
absorbia variaz direct proporional cu concentraia substanei ntr-un anumit interval.
Procedeul curbei etalon: const n constituirea curbei de etalonare a dependenei absorbanei n funcie de concentraie.
Procedeul cu o soluie etalon = compararea absorbanei soluiei etalon cu absorbana probei de analizat;
Calculul concentraiei din relaia lui Beer: c = A/d
Aparatur : Pentru determinarea absorbanei se utilieaz aparate numite spectrofotometre.
4. Spectroscopia de absorbie atomic (AAS)
Este o metod de determinare a concentraiei unui element chimic, prin msurarea absorbanei unei radiaii luminoase
caracteristice, de ctre atomii elementului adui n stare gazoas.
Atomii absorb o cuant de lumin i trec n stare excitat: A + h A*

Absorbia radiaiei respect legea Beer: A = k N d unde, N numrul de atomi din unitatea de volum; d grosimea stratului de
substan. k constant de proporionalitate. n ASS se analizeaz Absorbana radiaiei, care este proporional cu concentraia.
Spectroscopia de absorbie atomic implic existena a trei etape: 1. atomizarea probei; 2. absorbia unei radiaii specifice de la o
surs de lumin construit din elementul ce urmeaz a fi analizat, de ctre atomii aflai n stare gazoas; 3. determinarea
absorbanei i calcularea concentraiei analitului.
Tehnici de atomizare n AAS
AAS cu flacr: proba este aspirat ntr-un arztor cu o flacr generat de un gaz combustibil (acetilen) i un gaz oxidant (aer).
AAS cu cuptor de grafit: folosete un tub de grafit in care se pipeteaz proba; tubul este nclzit la exteriror la temperaturi
ridicate.
Catodul este constituit din elementul ce urmeaz a fi analizat Anodul tungsten Exist i lampi multielement!
Avantajele utilizrii AAS
Permite determinarea a 68 de metale
Deceleaz metale aflate n concentrii de ppm
Precizia determinrilor n flacr este mai mic de 1%
Interferene sunt foarte mici i deja studiate
Proba se prepar foarte uor prin dizolvare n acid
Instrumentul este foarte usor de manipulat.
5. Spectroscopia de emisie atomic (AES) Absorbia de energie termic de ctre un atom, determin trecerea atomului din
starea fundamental (A) ntr-o stare excitat (A*). Aceast trecere se produce datorit tranziiilor electronice de pe straturi
cu energie joas pe straturi cu energie nalt. Atomii excitai revin la starea iniial prin emisia unei cuante de lumin h.
A + energie termic A* A + h
Principii:
atomii fiecrui element sunt caracterizai prin linii spectrale specifice;
intensitatea fiecrei linii spectrale depinde de concentraie, fiind direct proporional cu concentraia, i de temperatur.
Etape de realizare:
atomizarea probei i excitarea atomilor n vederea emisiei de radiaii;
separarea spectral a radiaiilor emise i determinarea intensitii lor;
compararea radiaiilor emise cu liniile caracteristiceale unor probe standard n care elementele corespunztoare se gsesc n
concentraii cunoscute.

1.Emisia n flacr
Principala aplicaie a emisiei n flacr este determinarea cantitativ a elementelor alcaline i alcalinopmntoase la
concentraii avnd limita inferioar la 0,1 g/ml.
2.Emisia n plasm
Plasm cuplat inductiv (the inductively coupled plasma ICP) (AES ICP)
Plasm n curent direct (the direct current plasma DCP) (AES DCP)
Plasm indus de microunde (the microwave induced plasma MIP) )AES-MIP).
Tehnica plasmei in curent direct.
Tehnica este utilizata pentru probe lichide si solide. Curentul de plasma este realizat de doi electrozi; In tehnica lichida proba este
plasata pe electrod. In tehnica solida proba este plasata intre electrozi.
6. Spectroscopia de mas (Mass spec sau MS)
Spectrometria de mas este o tehnic analitic utilizat pentru:
Cuantificarea materialelor cunoscute dintr-o prob;
Identificarea componeneilor necunoscui dintr-o prob;
Elucidarea structurii i proprietilor chimice ale diferitelor molecule.
Spectrometria de mas utilizeaz electroni de energie nalt pentru a rupe moleculele n fragmente.
Separarea si analiza fragmentelor ofer informaii referitoare la:
masa molecular
structura moleculelor dintr-o prob.
n MS sunt detectai numai cationii; radicalii nu sunt detectai.
Numrul de ioni deflexai n cmp magnetic este dependent de raportul m/Z. Majoritatea ionilor au sarcina +1, din acest motiv,
factorul determinanat este masa ionului.
Spectrul de mas este reprezentarea grafic a masei n funcie de abundena ionilor;
Abundena peak-urilor este exprimat n procente din peak-ul de baz (cel mai intens peak din spectru).
Peak-ul de baz nu este ntotdeauna un peak parental.
MS permite determinarea structurii substanelor
Principii:
- Curentul de electroni de energie nalt rupe molecula n fragmente, cel mai adese ntr-un cation i un radical.

- Ruperea legturilor se face n aa fel nct s se genereze cel mai stabil cation.
- Stabilitatea radicalului nu este important.
7. Refractometria
Ca i punctul de topire, indicele de refracie poate fi utilizat pentru a confirma identitatea unui compus, sau pentru a aprecia
puritatea prin compararea valorilor obinute cu valorile din literatura de specialitate.
Fenomenul de refracie are loc la trecerea unei raze de lumin dintr-un mediu omogen i transparent n alt mediu omogen i
transparent.
Aparatur. Aparatele utilizate pentru determinarea indicelui de refracie se numesc refractometre.
Refractometria este utilizat n controlul calitii alimentelor pentru:
determinarea coninutului n zahr, sare, grsimi al produselor alimentare;
depistarea produselor alimentare falsificate.
8. Polarimetria este o metod de analiz care se bazeaz pe msurarea unghiului de rotaie a planului luminii polarizate. La
trecerea luminii naturale printr-o prism Nicol are loc polarizarea luminii, vectorul E va oscila ntr-un singur plan.
n funcie de comportarea lor fa de lumina polarizat, substanele i soluiile pot fi mprite n dou categorii:
substane optic active rotesc planul luminii polarizate;
substane optic inactive nu rotesc planul luminii polarizate.
La trecerea luminii polarizate prin soluia unei substane optic active, planul de polarizare al razei imergente este rotit cu un anumit
unghi, numit unghiul de rotaie al planului de polarizare. Aparatur. Aparatul utilizat n polarimetrie se numete polarimetru.
Determinrile se efectueaz la 200C, cu lumina galben a sodiului corespunztoare liniei D din spectru i se utilizeaz relaia:
[]D20 = 100/(L c)
L grosimea stratului de substan; c concentraia procentual. Polarimetrele sunt utilizate pentru determinarea coninutului n
zahr al produselor alimentare.
9. Analiza poteniometric (poteniometria)
Oxidarea = cedare de electroni; substana care cedeaz electroni este numit reductor i se noteaz cu red.
O reacie de oxidare se scrie astfel:
p red1 m p e p ox1
Reducerea = acceptare de electroni; substana care accept electroni este numit oxidant i se noteaz cu ox.
Un proces de reducere se scrie n general astfel:
m ox2 + m p e m red2
Oxidarea i reducerea sunt procese care decurg simultan, alctuind un cuplu de reacii denumit reacie de oxido-reducere sau
reacie redox.
Expresia general a unei reacii de oxidoreducere este: p red1 + m ox2 p ox1 + m red2

Celule electrochimice
Celule electroliticesub aciunea curentului electric extern se produc reacii chimice care nu au loc n mod spontan
Celulele electrochimice (pile electrice sau elemente galvanice) genereaz energie electric n urma unor reacii chimce care au
loc n mod spontan.
10. Electrozi de referin
Electrodul de referin reprezint o semicelul cu potenial cunoscut; celalt semicelul va indica concentraia analitului.
Prin convenie, electrodul de referin este anodul; astfel, cea mai simpl notaie pentru o celul poteniometric electrochimic
este:
Ecelul = EInd Eref + Ejl
Electrodul de referin ideal are potenialul stabil i deci, orice modificare pentru Ecelul este atribuit electrodului indicator, i
impicit, modificrii concentraiei analitului.
Electrodul standard de hidrogen (ESH)
-Este utilizat pentru satbilirea potenialului standard pentru alte semicelule;
-Cele dou semicelule se conecteaz printr-o punte de sare;
11. Electrozi indicatori
ntr-o celul electrochimic poteniometric, potenialul electrodului indicator este proporional cu concentraia analitului.
Exist dou tipuri de electrozi indicatori:
1.Electrozi metalici
2.Electrozi cu memebran ion selectiv
Electrozi metalici
1.Electrozi de specia I
Sunt formai dintr-un fir metalic aflat cufundat ntr-o soluie de electrolit care conine cationii si.
Ecuaia reaciei redox produs este:
Mn+ + ne M
Ecell = K- (0.059/n) log (1/[Mn+] ) = K +(0.059/n) log[Mn+]
K = o constant care include potenialul standard al cuplului redox Mn+/M
Aceti electrozi se limiteaz pentru determinarea ionilor de Ag, Bi, Cd, Cu, Hg, Pb, Sr, TI, and Zn.
Electrozii metalici nu pot fi utilizai n soluii acide deoarece se oxideaz foarte uor.
2.Electrozi de specia II
Electrodul metalic poate da un rspuns la concentraia unui anion dac anionul formeaz un precipitat sau un complex stabil.
De exemplu, argintul formeaz un electrod de specia a IIa pentru halogeni i anioni de halogen:
AgCl (s) Ag (s) + Cl

AgI (s) Ag (s) + I

Electrozii de specia II sunt construii dintr-un metal care vine n contact cu o sare a sa greu solubil, care la rndul su este n
contact cu o soluie cu anion comun cu sarea greu solubil.
12. Electrozi cu memebran ion selectiv (EMIS) EMIS, cum este electrodul de sticl pentru pH, conin o membran
care reacioneaz selectiv cu un singur ion:
Ref (prob) || [A] prob | Membran | [A] intern || Ref intern
Ecell = E Ref (intern) E Ref (sample) + E membrane + Ejl
Potenialul jonciunii lichidului (Ejl) i potenialul electrodului de referin sunt constante, astfel c orice modificare de potenial n
celul este atribuit potenialului de membran.
Curentul care traverseaz membrana apare datorit micrii fie a analitului fie a altui ion prezent n matricea memebranei.
EMIS este construit din:
-Memebran care particip selectiv la schimbul de ioni cu soluia de analizat, pe faa cu care vine n contact cu soluia:
A+soluie + M+membran A+memebran + M+soluie
Selectivitatea schimbului ionic depinde de compoziia i structura memebranei. Numai ionii cu un anumit volum i o anumit
sarcin electric pot participa la schimbul ionic. Schimbul ionic are loc i pe faa care vine n contact cu soluia de referin
intern. La echilibru exist o concentraie supeficial de ioni pe cele dou fee ale memebranei. O fa a memebranei va fi
ncrcat pozitiv iar o fa negativ. Potenialul memebranei (Em) depinde de concentraia ionilor care au participat la schimbul
ionic.
13. Electrodul cu membran de sticl
Memebrana de sticl este permeabil pentru ionii H+.
Construcie:
Balona de sticl n care se afl o soluie de referin intern de HCl 0,1M (pH = 0), saturat cu AgCl;
Electrod de referin intern Ag/AgCl, cufundat n soluia de HCl 0,1M;
In funcie de pH, ionii de hidrogen migreaz spre electrod sau n afara electrodului.
Determinarea pH-lui cu electrodul de stic
Electrodul de sticl i electrodul de referin se introduc n soluia de analizat, realiznd o celul poteniometric
Electrodul de sticl combinat Acest electrod conine ntr-un singur cilindru electrodul de referin i electrodul cu memebran de
sticl
Electrozi ion selectivi cu membran cristalin
Electrodul este bazat pe un cristal insolubil de Ag2S sau un amestec de Ag2S i o alt sare de argint sau o alt sulfur metalic
Electrozi ion selectivi cu membran lichid
Conine o memebran hidrofobic care conine un agent organic de complexare lichid, selectiv.
Se utilizeaz trei tipuri de lichide organice: schimbtori de cationi, schimbtori de anioni, i ionofori neutri.

14. Cromatografia
Cromatografia este o metod de analiz care se bazeaz pe separarea n zone spaiale distincte a componenilor unui amestec, la
trecerea amestecului printr-un mediu prin care componenii se deplaseaz cu viteze diferite.
n cromatografie exist dou faze nemiscibile:
Faza staionar = materialul prin care circul proba i care asigur separarea;
Faza mobil (eluentul) = amestecul lichid sau gazul care transport proba prin faza staionar.
Clasificarea metodelor cromatografice
1. Dup starea de agregare a celor dou faze: faza stationara si faza mobile.
2. Dup mecanismul de separare metodele cromatografice pot fi clasificate astfel:
cromatografie de adsorbie;
cromatografie de partiie;
cromatografie de schimb ionic;
cromatografie de excludere molecular;
cromatografie de afinitate.
Cromatografia de adsorbie - se bazeaz pe adsorbia difereniat a componenilor unui amestec pe un suport adsorbant solid
(faza staionar).
Cromatografia de partiie - se bazeaz pe coeficienii de partiie diferii ai componentelor unui amestec n dou faze nemiscibile
sau parial miscibile.
Cromatografia de schimb ionic - utilizeaz o rin schimbtoare de ioni (faza staionar solid) care conine grupri ionizabile
legate covalent.
Rinile schimbtoare de ioni (schimbtorii de ioni) sunt substane care au proprietatea de a schimba un ion propriu cu un alt ion
din mediul lichid cu care aceste substane se gsesc n contact.
Clasificare:
1. cationii (schimbtori de cationi)
2.anionii (schimbtori de anioni).
Cromatografia de excludere molecular , numit i gel-filtrare, utilizeaz ca faz staionar anumite substane polimerice
(dextran, poliacrilamid) care n contact cu apa sau cu soluii saline se mbiba formnd geluri de diferite poroziti.

Sub aciunea fazei mobile (eluentul) moleculele cu dimensiuni mai mari dect cele ale porilor vor fi excluse de structura gelului i
se vor deplasa concomitent cu eluentul. Moleculele cu dimensiuni mici vor penetra gelul ptrunznd n lichidul din interiorul
porilor gelului i astfel eluia lor prin coloan va fi ncetinit. n acest mod, eluia componenilor se va face n ordinea
descrescnd a masei moleculare
Cromatografia de afinitate - reprezint o tehnic de separare a proteinelor, acizilor nucleici, celulelor, pe baza proprietilor lor
de legare specific, prin fore necovalente, de molecule complementare numite ligand.
15. Electroforeza = metod fizico-chimic de analiz bazat pe procesul migrrii particulelor coloidale ncrcate electric, ntrun mediu solid sau lichid, sub aciunea unui cmp electric extern.
Bazele fizice ale electroforezei
La introducerea unei particule coloidale n cmp electric particula coloidal se va deplasa spre electrodul de semn contrar cu o
for electrostatic F direct proporional cu sarcina sa (e) i cu intensitatea curentului electric (E).
Acestei fore de deplasare i se opune o for de frecare intern (F) proporional cu viteza particulei (v), vscozitatea mediului ()
i raza particulei (r):
F = 6 r v
Egalnd cele dou fore se obine:
eE = 6 r v
=>viteza de migrare a particulei n cmp electric:
v = eE / 6 r
Analiza calitativ
Numrul spoturilor obinute n urma separrii electroforetice i poziia lor confer informaii referitoare la numrul i tipul
componenilor din proba de analizat.
Analiza cantitativ
Analiza cantitativ a electroforegramei se bazeaz pe principiul legii Lambert Beer.
Se utilizeaz un aparat numit densitometru care cuantific grafic poziia i concentraia componenilor separai sub forma unor
curbe gaussiene.
Gelurile se plaseaz n aparat i apoi acestea se deplaseaz lent de-a lungul unui fascicul luminos. Semnalul obinut de un detector
fotoelectric este nregistrat sub forma unor curbe gaussiene. Numrul peak-urilor nregistrate corespunde cu numrul
componenilor separai, iar aria fiecrui peak este proporional cu concentraia.