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DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA
AREA DE MICROBIOLOGIA ORAL
INFORME DEL LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA
AUTOR
LUIS EDUARDO NIO VELANDIA
SANTA FE DE BOGOTA
COLOMBIA
2015
TABLA DE CONTENIDO
1. MARCO TEORICO
2. OBJETIVOS
2.1. 0BJETIVO GENERAL
2.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS
3. MEDIOS DE CULTIVO
3.1. INFORME DE LA PRACTICA
3.1.1. CULTIVO DE LA FLORA NORMAL
3.1.2. RESULTADOS
3.1.3. CONCLUSIONES
4. COLORACIONES
4.1. COLORACION DE GRAM DE LAS CEPAS CULTIVADAS
4.2. DESARROLLO
4.3. RESULTADOS
4.4. CULTIVO DE LA FLORA NORMAL
4.5. COCOS GRAM POSITIVO
4.5.1. CULTIVO DE PRUEBAS BIOQUIMICAS PARA IDENTIFICACION DE
MICROORGANISMOS DE LA FAMILIA ENTEROBACTERIACEAE
4.5.2. PROCEDIMIENTO
4.5.3. REPIQUE DE LA COLONIA SELECCIONADA DEL CULTIVO DE LA
FLOTA NORMAL
4.5.4. DESARROLLO DE LA PRUEBA DE CATALASA
4.5.5. CONCLUSIONES
5. MICROORGANISMOS GRAM NEGATIVOS
5.1. PRUEBA
BIOQUIMICA
PARA
LA
IDENTIFICACION
DE
MICROORGANISMOS DE LA FAMILIA ENTEROBACTERIACEAE
5.2. RESULTADOS
5.3. PRUEBA
DE
SUCEPTIBILIDAD
DE
ANTIBIOTICOS
DEL
MICROORGANISMO PROVENIENTE DEL CULTIVO DE LA FLORA
NORMAL
5.4. CONCLUSIONES
6. SUCEPTIBILIDAD MICROBIANA
6.1. TECNICA DE KIRBY BAUER
6.2. CONCLUSIONES
1. MARCO TERICO
2. OBJETIVOS
2.1.
OBJETIVO GENERAL
2.2.
OBJETIVOS ESPECIFICOS
3. MEDIOS DE CULTIVO
.
Imagen tomada de los medios de cultivo. Google, 2005
3.1.2 RESULTADOS
En la muestra de agar sangre se observaron colonias de color blanco
brillante, las colonias se formaron en crculos y no fueron uniformes, no presento
vellosidades pero si contextura porosa, pobl aproximadamente el 40% de la
superficie del agar.
Imagen tomada de las muestras del cultivo teidas con la tincin de gram, del laboratorio de histologa
de la universidad nacional sede Bogot
3.1.3 CONCLUSIONES
El medio de cultivo de agar sangre es un medio casi general para todas las
bacterias que hacen parte de la flora normal.
La bacteria de la flora normal mostr un mecanismo de poblacin rpida
pero no es uniforme.
Se entendi y se aprendi correctamente a realizar el frotis (dispersin) en
el cultivo de agar sangre.
Se conocieron diferentes clases de cultivos de agar y diferentes mtodos en
la incubacin de bacterias.
Se logr describir las caractersticas macroscpicas del crecimiento
bacteriano en cultivo de agar sangre.
4. COLORACIONES
4.2. DESARROLLO
Se tom la muestra de los tubos 1, 2, 3 y, la 4ta muestra estaba en una caja
de Petri, a la cual se le deba realizar un procedimiento anexo, es decir que con un
punzn o una asa esterilizada se toma parte de las colonias de la bacteria que se
encuentran en la caja de Petri tcnica de gastado, luego se emulsiona un portaobjeto y por ltimo se agrega la colonia que ya se haba tomado y se agrega al
porta objetos emulsionado. Despus de tomar una muestra de cada bacteria
(colonias de los tubos 1, 2, 3), se coloc a cada una en un porta-objeto
emulsionado, se dej secar y se fij pasndola 3 veces por el mechero muy
cuidadosamente para no daar la muestra.
Despus de haber fijado cada bacteria se llev acabo la tincin de gram y el
procedimiento que se realizo fue el siguiente:
1) Se agreg una gota de cristal violeta a la muestra (1 minuto).
2) Se lav con agua la muestra.
3) Se agreg una gota de lugol a la muestra (1 minuto).
4) Se lav con agua la muestra.
5) Se agreg una gota de alcohol cetnico para descolonizar la muestra
(10 segundos).
6) Se agreg una gota de safranina para volver a teir la muestra.
(30 segundos).
7) Por ltimo se volvi a lavar con agua para dejar limpia la muestra.
4.3. RESULTADOS
CEPA/ TUBO
1
4 MUESTRA DE
LA
CAJA
DE
PETRI
CARACTERSTICAS
MORFOLOGIA
BACILOS
AFINIDAD
TINTORIAL
GRAM-
COCOS
GRAM+
BACILOS
GRAM+
COCOS
GRAM-
RESULTADOS
ZONA SEMBRADA
Frotis de odo externo
CARACTERISTICAS
MICROSCOPICAS
CIRCULOS UNIDOS EN
SUS
EXTREMOS
FORMANDO CADENAS
LARGAS Y ALGUNAS
CORTAS.
MORFOLOGIA
cocos
AFINIDAD
TINTORIAL
gram +
4.5. CONCLUSIONES
Manitol
LIA
Urea Christensen
Citrato Siminons
TSI
4.5.2. PROCEDIMIENTO
4.5.3. RESULTADOS
CULTIVO
MEDIO
CONTEXTURA
DE LA MUESTRA
CONTEXTURA
DE LA
MUESTRA
DESPUES DE
LA
INCUBACION
EXPRESO O NO
EXPRESO
BACTERIAS
MANITOL
naranja claro
naranja claro
no expreso
bacterias
LIA
rojo claro
gris cremoso
si expreso
bacteria
UREA
CHRISTENSEN
rosado claro
Naranja
oscuro
si expreso
bacteria
CITRATO
SIMMONS
azul oscuro
verde oliva
si expreso
bacteria
TSI
negro
blanco
cremoso
si expreso
bacteria
4.5.3.
EXPLICACION
este organismo no es
capaz de fermentar
carbohidratos que
fueron incorporados a
su medio
Este microorganismo
si puede producir
descarboxilacion de
la lisina y produccin
de H2S
Este microorganismo
si es capaz de
hidrolizar urea
Este microorganismo
es capaz de utilizar
citratos como fuente
de carbono.
Este microorganismo
mostro que si es
capaz de sintetizar
gas y cidos a partir
de carbohidratos que
no han sido
incorporados al
medio. (Glucosa,
sacarosa y lactosa).
Resultado:
Cultivo de la flora normal
Catalasa
4.5.5. CONCLUSIONES
PRUEBA
BIOQUMICA
PARA
LA
IDENTIFICACIN
MICROORGANISMOS DE LA FAMILIA ENTEROBACTERIACEAE
DE
5.2. RESULTADOS
GENERO SERRATIA
GENERO ENTEROBACTER-HAFNIA
GENERO PROTEUS
GENERO PROVIDENCIA MORGANELLA
GENERO PROTEUS
GENERO PROTEUS
GENERO PROTEUS
GENERO ENTEROBACTER-HAFNIA
5.3.
PRUEBA
DE
SUCEPTIBILIDAD
DE
ANTIBIOTICOS
DEL
MICROORGANISMO PROVENIENTE DEL CULTIVO DE LA FLORA
NORMAL
ERITROMICINA ( E15 )
CEFALEXINA (FOX30)
OXACILINA ( O1)
5.4. CONCLUSIONES
6. SUSCEPTIBILIDAD ANTIMICROBIANA
6.1 Tcnicas de Kirby Bauer
Este mtodo consiste en tomar una muestra de colonias bacterianas y
mezclarlas en solucin salina estril, luego con un hisopo tomar parte de la
muestra y frotarla sobre la caja de Petri con agar sangre, y al pasar
aproximadamente 10 minutos colocar los discos de papel filtro que tienen
concentracin de los antibiticos en su interior.
ERITROMICINA ( E15 )
CEFALEXINA (FOX30)
OXACILINA ( O1)
6.2. RESULTADOS
En la prueba de Kirby Bauer que se realiz al cultivo (cultivo de la flora normal), no
presento halos es posible que se deba a las siguientes teoras:
6.2. CONCLUSIONES