Clculos para ADNS e outros mtodos

espectrofotomtricos

1 Utilizar o clculo matemtico

[ ]calculada
K=
Abs
K= inclinao da reta
Abs= Absorbncia
[ ] real= Concentrao

__

[ ]real = K xAbs
[ ]calculada= concentrao de acares nos
diferentes tubos

__
K = mdia dos Ks

Construir uma curva padro

Tubo V (mL) Abs

[ ] cal

Kmedio [ ] real

Para o clculo da amostra

[]

acares

K x Abs x100
Te

Te= concentrao da amostra proveniente das

diluies

Construo da tabela da amostra

Tubo

V
Abs
Abs
Kmedio Teamostra
%redutores %sacarose
(mL) padro amostra

Te= tomada de ensaio

% sacarose= (% c/hidrlise % s/hidrlise)x0,95
% redutores= % s/hidrlise
% totais= sacarose + s/hidrlise

%totais

2-Mtodo Papel Milimetrado

Para clculo da reta:

2.1- Para fazer o grfico, verificamos quantos

centmetros teramos que fazer, de 10 cm, ou de 20
cm

Cada quadro um centmetro

Cada quadro
um milmetro

2.2- Verificar os valores mnimos e mximos da

concentrao calculada e Absorbncia da curva padro

Exemplo

Tubos (mg)
Eixo X
0,25
0,47
0,91
1,2

Eixo X Concentrao

Abs
Eixo Y
0,126
0,241
0,470
0,567

Eixo Y Absorbncia

Valor mnimo em mg = 0,0 Valor mnimo abs. = 0,0

Valor mximo =1,2 ou 1,3 Valor Mximo= 0,6
para dar uma margem

2.3- CONSTRUINDO O GRFICO

Clculo do eixo x (concentrao)=
Construiremos uma reta de 10cm

10
x=
= 7,69
1,3
Concentrao em cm
0,25 x 7,69 = 1,19
0,47 x 7,69 = 3,61
0,91 x 7,69 = 6,99
1,20 x 7,69 = 9,23

Cada
valor
achado
ser
transportado em cm ao papel
milimetrado no eixo X que
representar os valores em mg de
cada tubo.

Clculo de eixo Y (Absorbncia)

10
Y=
= 16,66
0,6
Abs. em cm
0,126 x 16,66 = 2,09
0,241 x 16,66 = 4,01
0,470 x 16,66 = 7,83
0,567 x 16,66 = 9,44

Cada
valor
achado
ser
transportado em cm ao papel
milimetrado no eixo Y que
representar os valores
de
absorbncia de cada tubo.

Abs. em cm eixo Y
0,126 x 16,66 = 2,09
0,241 x 16,66 = 4,01
0,470 x 16,66 = 7,83
0,567 x 16,66 = 9,44

Concentrao em cm eixo x
0,25 x 7,69 = 1,19
0,47 x 7,69 = 3,61
0,91 x 7,69 = 6,99
1,20 x 7,69 = 9,23

6,88

2.4- COMO USAR A RETA NO CLCULO DA

CONCENTRAO DA AMOSTRA
Tubo V (mL) Abs
padro
1
2
3
4

0,126
0,241
0,470
0,567

Abs
[ ] amostra
amostra
0,185
0,322
0,436
0,630

Dos valores no quadro se escolhe o melhor ponto, neste caso

o tubo 3 tendo como Abs. 0,436, este valor se resolve:

Eixo Y:

Y = 16,66 x 0,436 = 7,26 cm.

Os 7,26 cm so transportados na reta no papel milimetrado no
eixo Y e traa-se uma linha horizontal imaginria at tocar na
reta, a partir da, projeta-se linha na vertical at encontrar o eixo
x. Contam-se os centmetros e o valor encontrado de 6,88cm.

Para converter este valor em concentrao

(Eixo X):

[ ]=

6,88
7,69

= 0,89 mg

Ento:
O tubo 3 da amostra tem 0,89 mg. A partir deste
resultado, utilizam-se as diluies da amostra para
encontrar a concentrao em %.

x
y
T
R
Z
F

100 ml
2ml

50ml

0,3 ml
0,5 ml
0,8 ml
1 ml

Eixo X
Valor encontrado da amostra
em cm ______
Concentrao _______
Centmetros ________

0,89 mg9

Mtodo do Origem

1 Enter

2 Enter

1 Enter

2 Enter

[24/03/2008 17:31 "/Graph1" (2454549)]

Linear Regression for Data1_B:
Y=A+B*X
Parameter
Value Error
-----------------------------------------------------------A
178,5
42,99012
B
77,7
7,84889
------------------------------------------------------------

Y a b* X

Absorbncia

Y a
X
b

Concentra
o
amostra

Como utilizar a frmula:

Calculando a tomada de ensaio segundo o
grfico o ponto escolhido o tubo 3 (0,8 ml)
e supondo que Z= 0,54mg de amostra (te)

x
y
T
R
Z
F

100 ml
2ml

50ml

0,3 ml
0,5 ml
0,8 ml
1 ml

Com o ponto escolhido (ex: tubo 3, y= abs= 0,240)

substitumos na frmula, pois j temos os valores de a
e b.

Y a
X
b
X = 0,32 mg de acares redutores aps o clculo com
o tubo escolhido ( tubo 3) (fictcio)

0,54mg amostra ------- 0,32 mg redutores

100 mg amostra -------

0, 32 x100
X
0, 54
X = 59,26%