UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO CLINICO E HISTOPATOLOGICO

CTEDRA DE TCNICAS HISTOLGICAS

INFORME N 1

TTULO: CONTROL DE CALIDAD Y BIOSEGURIDAD EN

HISTOTECNOLOGA
TEMA: RECONOCIMIENTO DE UN LABORATORIO DE
ANATOMA PATOLGICA

NOMBRE: WILIAN CHAGUARO

DOCENTE: LIC. IVAN PEAFIEL
PERODO ACADMICO: OCTUBRE 2015- FEBRERO 2016

FECHA DE ENTREGA: 04 DE OCTUBRE DEL 2015

TEMA: RECONOCIMIENTO DE UN LABORATORIO DE ANATOMA

PATOLGICA
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Identificar el laboratorio de anatoma patolgica y las normas de bioseguridad que se
debe aplicar en este.
OBJETIVOS ESPECIFICOS

Realizar la identificacin del rea anatoma patolgica y como est distribuida

Observar e identificar los equipos, materiales e insumos necesarios en el rea de

un laboratorio de anatoma patolgica

Reconocer la clasificacin de los tipos de desechos que vamos a encontrar en el
rea de anatoma patolgica

INTRODUCCION.
El primer laboratorio hicimos el reconocimiento del rea de anatoma patolgica y la
identificacin de los distintos equipos y materiales para los cortes de tejidos,

fue

importante este reconocimiento, as como tambin se habl de normas de bioseguridad,

como las barreras que deben protegernos a nosotros ya que vamos a estar manipulando
contenidos peligrosos

y estos pueden causar algn accidente,

por otro lado la

identificacin de las clases de desechos que vamos a encontrar en dicha rea y es muy
importante tener muy en cuenta el orden la disciplina y ponerle empeo al trabajo que
vayamos a realizar en el rea de anatoma patolgica.

FUNDAMENTO TERICO O CONTENIDO CIENTFICO

En el rea de anatoma patolgica se realiza lo que son los cortes de tejidos ya sean
estos de una biopsia o una necropsia para su experimentacin, deben ser sometidos a un
proceso al cual se le debe dar una serie de tcnicas y de tratados para poder ser
observados en el microscopio
Para empezar con la tcnica histolgica se debe obtener una MUESTRA DEL TEJIDO
a estudiar y existen 2 formas:

Necropsia: Examen u obtencin de tejido de un organismo muerto.

Biopsia:(del griego bios = vida y oasis = visin) Examen u obtencin de tejido

de un organismo vivo. Puede ser inscisional, excisional, por sacabocado, por
puncin y absorcin, por raspado, por trepanacin. (1)

FIJACIN
Existen diferentes formas de fijar los tejidos dependiendo del tipo de fijador, de la
estructura a fijar y de lo queramos observar. Los mtodos de fijacin se pueden
clasificar en dos tipos: fsicos y qumicos.
Los fijadores fsicos se basan o bien en una congelacin muy rpida del tejido o bien en
la aplicacin de calor elevado. Se utilizan cuando los fijadores qumicos alteran las
estructuras que queremos observar, cuando necesitamos una fijacin muy rpida, o
cuando el tipo de tejido y la tcnica que usaremos lo requiera. La congelacin rpida es
un buen mtodo de preservacin de las caractersticas moleculares y es conveniente que
sea rpida puesto que as se impide la formacin de grandes cristales de hielo que nos
destrozaran la estructura del tejido. Existen variantes de esta tcnica como son la
criodesecacin o liofilizacin y la crio sustitucin. La criodesecacin parte de tejido
previamente congelado al que posteriormente se le sublima el hielo, es decir, el agua

pasa de estado slido a gaseoso sin pasar por estado lquido. Al eliminar el agua se
impide que se den reacciones qumicas, por lo que, adems de la fijacin, este mtodo
preserva el tejido en el tiempo. La crio sustitucin tambin parte de tejido congelado
pero en este caso se produce una sustitucin lenta del hielo por una solucin fijadora.
Con ello se posibilita una fijacin qumica sobre un material que no ha sufrido deterioro
puesto que est congelado. Los mtodos de fijacin por calor no son frecuentemente
usados, excepto para el estudio microorganismos.
Los mtodos qumicos utilizan soluciones acuosas compuestas por molculas fijadoras
que establecen puentes entre las molculas del tejido, mantenindolas en sus lugares
originales e impidiendo su degradacin. Hay dos mtodos bsicos de fijacin con
fijadores lquidos: inmersin y perfusin. En cualquier caso el fijador debe llegar a
todas las partes el tejido lo ms rpidamente posible. (2)

INCLUSIN:
Las parafinas son mezclas de hidrocarburos saturados de cadena que oscilan entre 22 y
28 tomos de carbono. El punto de fusin depende del nmero de tomos de carbono y
se encuentra entre 46 y 60 ºC. Las mezclas de parafinas comerciales tienen un
punto de fusin entre 54 y 56C. La parafina para en castracin se presenta como
pequeas lentejas de unos 5 mm de dimetro. El tamao y la textura facilitan su manejo.
Aunque la parafina ms comercial est libre de impurezas, algunos trabajadores
prefieren filtrarla. Para hacer esto, poner un embudo grande con un papel de filtro en el
horno de parafina y que el embudo desemboque en un gran vaso. Poner la parafina en el
embudo. Como la parafina funde ser filtrado mientras pasa a travs del papel de filtro
hasta el recipiente.
Algunas mezclas de parafinas comerciales y sus propiedades
Nombre mezcla Temperatura
parafina

fusin

de Grosor mnima
de la seccin

Notas

TissuePrep
(Fisher)

55-57C

4m

Parafina

56-57C

2m

ms

polmeros sintticos

TissuePrep
TissuePrep 2

purificada

original

ms

aditivos que permiten hacer

secciones ms finas

Paraplast

56C

4m

Paraplast Plus

56C

2m

Paraplast X-tra

50-54C

2m

Parafina

purificada

ms

polmeros plsticos

Contiene DMSO

Parafina ms polmeros de
bajo peso molecular

La tcnica de inclusin en parafina es una perfusin de la misma en los tejidos para

crear un medio homogneo, que permita la realizacin de los cortes de menor grosor
con gran facilidad y una precisin mayor que cuando los mismos se realizan por
congelacin. Como toda tcnica, presenta ventajas e inconvenientes; sobre todo es en la
modalidad de inclusin donde se pueden discutir ciertos procesos que son vlidos en
histologa animal pero que al aplicarlos a los tejidos vegetales pueden originar
alteraciones a veces profundas, en las estructuras anatmicas e histolgicas; el primer
problema que nos encontramos al incluir en parafina un tejido es la apolaridad de la
misma; para poder incluir el tejido se han descrito varios mtodos de deshidratacin,
pero en general se sigue, como en histologa animal, la deshidratacin por alcohol
etlico en graduaciones crecientes hasta llegar a alcohol absoluto.
La parafina y el alcohol etlico absoluto tampoco son miscibles, por lo que hay que
sustituir ste por un lquido apolar miscible con aquellas. Hay varios lquidos apolares
como el benceno, cloroformo, xileno, etc., que se han descrito en todas la tcnicas
histolgicas, pero que deben usarse con muchas reservas, por las grandes retracciones y

deformaciones que producen en los tejidos vegetales, alteraciones que no son

homogneas, puesto que cada uno de los distintos tejidos de una muestra al cortar,
reaccionan de forma muy distinta a la retraccin debido al distinto grosor y naturaleza
de la pared celular. Nosotros sustituimos el benceno, xileno, etc., por acetato de
isoamilo o bien biristato de isopropilo; ms frecuentemente el primero. Si la
deshidratacin se ha realizado correctamente, la pieza a incluir se hundir en el acetato.
Si flotase sobre el mismo, hay que esperar 15 minutos y si sigue flotando es que la
deshidratacin no se ha realizado correctamente, debiendo ser introducida la muestra de
nuevo en alcohol absoluto.
Despus de tres baos de acetato de isoamilo, la muestra puede ser incluida en parafina,
Histotec, Paraplast, etc. Este proceso es quiz el que merezca mayor atencin junto con
el anteriormente explicado. Los manuales de tcnicas y los distintos trabajos sobre
histologa vegetal nos dan tiempos muy dilatados de inclusin: mnimo de 6 horas. Los
tejidos vegetales tienen una naturaleza muy distinta a la de los animales, pero las
tcnicas de inclusin que se describen en los distintos manuales han sido aplicadas a
partir de las experiencias sobre tejidos animales; en algn caso, esta experiencia es til y
sirve para el proceso de inclusin de vegetales, pero en la mayora de los casos no lo es,
y cada muestra vegetal hay que darle un tratamiento muy distinto dependiendo de los
tejidos que presente y de la disposicin de los mismos. No se puede tratar de igual
manera una muestra que contenga grandes parnquimas o grandes conductos aerferos.
Por tanto, lo ms importante antes de realizar una inclusin es conocer la naturaleza y la
organizacin de la muestra a incluir, o por lo menos presuponerla. Los cortes realizados
con el micrtomo de congelacin nos pueden dar la pauta a seguir en el caso que se
desconozca la organizacin de un vegetal determinado.
El calor es uno de los enemigos ms importantes de los tejidos vegetales. La presencia
de pared celular y la distinta naturaleza que sta puede presentar es la causa de que el
calor, los fijadores, los compuestos hidratantes y deshidratantes, el xileno, el benceno,
etc., produzcan en las paredes celulares reacciones muy importantes y no constantes,
que pueden distorsionar en gran manera la estructura anatmica de un vegetal. Ante los
mismos agentes, en una reaccin, no todos los tejidos responden igual: las
deformaciones dependen entre otras cosas del grosor de la pared celular, naturaleza de
la misma, disposicin de los diferentes tejidos, tiempo de actuacin de los distintos

agentes, etc. Por tanto, si las deformaciones son variables, las interpretaciones que se
dan son, con frecuencia, errneas.
Por tanto, para incluir una muestra vegetal en parafina, o bien en sucedneos de la
misma (Paraplast, Histotec, etc.), es necesario calcular los tiempos mnimos, que pueden
oscilar desde 35 minutos a varias horas. Por ejemplo, para incluir una hoja que presenta
unos parnquimas con paredes tenues y grandes meatos que permiten un fcil paso de la
parafina, tendramos los siguientes pasos y tiempos:
1.- Alcohol etlico 96-------------1/2 hora
2.- Alcohol etlico 96-------------1/2 hora
3.- Alcohol etlico absoluto--------1/2 hora
4.- Alcohol etlico absoluto--------1/2 hora
5.- Alcohol etlico absoluto--------1/2 hora
6.- Acetato de isoamilo------------1/2 hora
7.- Acetato de isoamilo------------1/2 hora
8.- Acetato de isoamilo------------1/2 hora
9.- Parafina a 56-58C------------3/4 hora
10.- Confeccin del bloque

Los tiempos de deshidratacin pueden ser ms o menos constantes para todos los
tejidos, pero varan mucho los tiempos de parafinacin. Un tallo macizo, con mucho
tejido esqueltico (esclernquima), o de proteccin (peridermis), pueden necesitar varias
horas. La prctica nos ir diciendo cuales son los tiempos ms idneos para los rganos
o partes del rgano que estemos utilizando.

Lo ms importante es comprender que no existen dos muestras vegetales o tejidos

iguales y por ello, cada una se comportar de distinta forma. Con experiencia se calcula
fcilmente los tiempos que necesitan los distintos tejidos.
Para la confeccin de bloques utilizando parafina se realiza de la misma forma que en
histologa animal: existen pinzas (Leukart) y recipientes especiales para realizar los
bloques, pero lo ms barato es confeccionar recipientes, de papel satinado o de
aluminio, ms o menos cbico o en formas de paraleleppedo, dependiendo de las
caractersticas de la muestra incluir. Lo ms importante en la confeccin de bloques es
la orientacin que se da a la muestra, porque de ello va a depender que el corte sea
bueno o malo.
Existen diferentes alternativas de infiltracin en parafina y es interesante destacarlas en
este punto
Mtodo con solvente intermedio parafina/TBA
Los pasos intermedios entre la deshidratacin con EtOH la infiltracin en parafina
deben incluir un solvente en parafina, puesto que los tejidos estarn fijados
eventualmente en parafina. Ter-Butanol (TBA) o n-butanol son buenos solventes
intermedios para la tcnica adicional de parafina. El TBA se prefiere saber el n-butil
alcohol porque tiene menor efecto de aplastamiento de los tejidos. El isopropanol se usa
en la tcnica de microondas. El TBA debe preservar la suavidad de algunos tejidos, al
contrario que el xileno o el EtOH, que tienden a endurecer los tejidos. Muchos
microscopistas de plantas consideran que las series de EtOH/TBA son el mejor mtodo
disponible. El problema est en que el TBA es difcil de utilizar, ya que el TBA 100% es
un slido a temperatura ambiente. Mantener el contenedor en la parte superior del horno
de parafina a 42C para mantener el TBA lquido.
Deshidratar los tejidos con EtOH al 50% usando gradacin en series de EtOH. Cuando
uses series de TBA en la tcnica que no usa microondas permitir un tiempo de entre 1-4
horas por paso durante la infiltracin.
*Si se usaron FAA o FPA como fijadores, los tejidos estarn listos como mximo con
EtOH al 50%. Desde este punto usar la serie de EtOH.

* Si los tejidos han sido deshidratados con EtOH 100%, comienza la serie en el paso 4 y
contina la deshidratacin.

Paso EtOH 95%

EtOH
100%

Aceite
Agua

TBA

de

Nota

parafina

50

40

10

50

30

20

50

15

35

50

50

25

75

0.1% Safranina O, o

25

75

Azul de timol en el

100

paso

100

durante 1-2 horas.

67

33

5.

Incubar

Proceder con la infiltracin en parafina/TBA

Infiltracin en parafina/TBA
1. Quitar 1/3 del volumen, y reemplazar con un volumen igual de parafina fundida.
Intenta formar un "capuchn" de parafina en lo alto del TBA, destapar el vial, e
introducir en el horno de parafina (58C). El TBA se evaporar lentamente, por eso
asegurarse de aadir suficiente parafina para cubrir los tejidos cuando esto suceda.
2. A intervalos de 4-12 horas, quitar 1/2 del volumen (en el contenedor de parafina para
desechar) y volver a llevar al volumen con parafina lquida.
3. Repetir dos veces.
4. Eliminar toda la mezcla de parafina/TBA y aadir parafina lquida pura.
5. Volver a realizar tres veces a intervalos de 1-4 horas (overnight para el ltimo paso).
6. Cuando no detectes residuos de TBA proceder con la en castracin.

Mtodo con parafina/xileno

Un solvente intermedio alternativo puede ser el xileno, Histo-Clear, cloroformo,

benceno o tricloroetileno. El solvente utilizado histricamente en microtcnicas de
plantas es el xileno, pero muchas investigaciones han adoptado el Histo-Clear (o
equivalentes) con un sustituto. Histo-Clear actualmente es considerado no txico y
puede ser dispensado fcilmente. Usar Histo-Clear slo si completas los pasos de
deshidratacin e infiltracin en un periodo relativamente corto de tiempo (Histo-Clear
puede ser sustituido por xileno, pero asegrate de transverir los tejidos a travs de las
soluciones dentro de un periodo de una semana. Una mayor cantidad de tiempo a altas
temperaturas destilar Histoclear en una masa viscosa que atrapar los tejidos,
volvindolos no tiles). Debido a las dificultades potenciales usando Histo-Clear, el
mtodo de infiltracin descrito aqu usa xileno, aunque puede ser sustituido por HistoClear. Los tiempos en este programa asumen muestras de tejidos pequeas (1-2 mm).
Comenzar esta serie despus de completar los pasos de deshidratacin del tejido.
Paso EtOH:xileno Tiempo
1

3:1

1h

1:1

1h

1:3

1h

xileno

1h

xileno

1h

proceder con la infiltracin en

parafina/xileno

Infiltracin en parafina/xileno
1. Aadir virutas de parafina (alrededor de 1 viruta / mm de xileno) al vial del tejido,
tapar y poner a temperatura ambiente. Repetir despus de 4 h hasta overnight o hasta
que se disuelva la viruta.
2. Transferir el vial tapado a 42C y aadir 2 3 virutas de parafina cada hora o dos
horas. Cuando no se disuelvan ms virutas, el xileno se ha saturado de parafina (a esa
temperatura) y puedes proceder con el paso 3.
3. Quitar 1/3 del volumen, y reemplazar con un volumen igual de parafina fundida.
Quitar la tapa del vial y poner a 58C como mnimo durante 4 horas. Es mejor, sin
embargo, continuar con el paso 4 mejor que dejar overnight.

* Cuando viertas parafina sobre xileno a 42C (o temperatura ambiente) la parafina

solidificar. Intenta formar un capuchn de parafina sobre la parte alta del xileno de
manera que no se estropeen los tejidos que estn en la parte baja del vial. Esta tcnica
disminuye la posibilidad de dao en los tejidos por temperatura.
4. Despus que la parafina funda (unas 4h) quitar la mitad del lquido y reemplazar con
un volumen igual de parafina fundida. Los tejidos deben ser mantenidos ahora overnight
a 58C, aunque contina si es posible.
5. Rehacer el paso 4 dos veces ms, entonces vaca toda la mezcla de parafina/xileno y
aade parafina lquida pura. Rehazlo dos veces ms a intervalos de 4 horas (overnight
para el ltimo paso).
6. Cuando no detectes residuos de xileno procede con la en castracin.

En castracin en parafina
Las muestras de tejidos estn encastradas en bloques de parafina (o PEG) usando
contenedores disponibles en plstico o porcelana, discos de aluminio, o en "botes
hechos con papel". Cuando uses estos mtodos, extiende una fina capa de aceite de
parafina en la superficie antes de vaciar la parafina lquida para permitir que se
desmonte ms fcilmente el bloque de parafina.
La en castracin de tejidos imbibidos con parafina se realiza ms fcilmente sobre una
plataforma de en castracin. Esta es una superficie simple de aluminio, que tiene una de
sus superficies calentadas y no la otra. Cuando est caliente, el lado calentado mantiene
la parafina lquida permitiendo que el tejido pueda ser orientado.
Cuando el bloque de parafina ha solidificado, pon cuidadosamente el bloque entre 4Ctemperatura ambiente. La parafina actual no necesita ser enfriada en un bao de hielo.
La solidificacin rpida da como resultado la formacin de cristales ms pequeos de
parafina y permite lograr unos cortes ms uniformes. (3)

Corte:

El taco ahora se puede cortar en secciones lo suficientemente delgadas como para

permitir el paso de la luz. La mayor parte de los preparados para microscopia ptica
tienen un grosor entre 3 a 10 micrmetros. Para estos cortes se utiliza un aparato
llamado MICROTOMO. Cuando deseamos estudiar grasas o lpidos que se extraen en
el proceso de aclaramiento o enzimas que quedan inactivadas por el calentamiento de la
inclusin, nos auxiliamos con la Tcnica de Congelacin de Tejidos. Un tejido
congelado, es los suficientemente duro para ser cortado.
Se sumerge la muestra de tejido en Nitrgeno lquido para tener una congelacin rpida.
Luego se corta con un aparato especial denominado

MICROTOMO

DE

CONGELACIN, existe un aparato ms elaborado y eficiente para los cortes de

congelacin llamado CRIOSTATO. La ventaja de esta tcnica es que los cortes que se
obtienen son muy rpidos, se puede utilizar en el diagnstico de material patolgico,
tomado en intervenciones quirrgicas y el resultado se obtiene en el transcurso de una
operacin. (4)
Tincin:
La tincin es necesaria, ya que los tejidos animales son en su gran mayora incoloros,
excepto aquellos que poseen algn tipo de pigmento como la sangre o la melanina de la
epidermis, por lo cual es necesario teirlos para observar sus caractersticas
morfolgicas. Las tinciones generales estn basadas en el uso de colorantes, sustancias
mediante las cuales se consigue colorear a los tejidos. Los colorantes son normalmente
hidrosolubles y se caracterizan por unirse a ciertas molculas presentes en los tejidos
debido a afinidades qumicas. Existen otras tcnicas de tincin como la histoqumica,
lectinas, inmunocitoqumica, hibridacin. (5)

Observacin:
El ltimo paso de todo proceso histolgico es la observacin del resultado producido
por la tcnica realizada, para lo cual se utilizan los microscopios que son equipos que
permiten aumentar la imagen de las muestras para observar estructuras tisulares tan
pequeas como son las clulas o sus compartimentos. (5)

ESTUDIE LAS CARACTERTICAS DEL DISEO DE SU MICROTOMO Y

APRENDA A UTILIZARLAS
Los micrtomos con retraccin estn diseados para que la muestras se retire de la
cuchilla en la carrera ascendente. Es importante saber si su micrtomo tiene esta
prestacin.
La posicin retrada es una caracterstica de diseo que proporciona distintas
ventajas durante el corte y prolonga la vida de la cuchilla
Al usas un micrtomo de retraccin, el alineamiento de la cara del bloque al
borde de la cuchilla deber ser efectuad con el bloque en la carrera
descendente ( en la posicin avanza- no retrada)
Si un bloque est alineado cerca del borde de la cuchilla mientras el brazo de
la muestras est en la posicin retrada mas el grosor de la seccin
seleccionada. Esto provocara que se cortara un trozo grueso que podra
daar tanto la muestras como la cuchilla
Los micrtomos tambin pueden ser manuales, semimotorizados o
completamente motorizados.
Los equipos motorizados reducen los movimientos repetitivos que pueden
contribuir a desarrollar enfermedades msculos- esqueltico.
CLASIFICACION DE RESIDUOS
Bolsas negras: residuos de tipo no infeccioso o riesgoso
Bolsas rojas: residuos patognicos
Desechos especiales
Corto punzantes
Se requiere que el personal ponga los desechos en el lugar que corresponde y las
bolsas de basura deben ser cambiadas a diario por el personal de aseo
MUESTRA: Instrumentos y equipos

MATERIALES, EQUIPOS

Macroscpica
Equipos o estacin de inclusin de tejidos en parafina
Plancha fra (5C)
Micrtomo
Bao de flotacin
Estufa de histopatologa
Batera de tincin

PROCEIMIENTO
1. El estudiante recibir informacin sobre el rea, distribucin y elementos que
deben integrar el laboratorio de anatoma patolgica
2. El estudiante observara, conocer y pondr en prctica los protocolos de
generacin y eliminacin de desechos

TCNICA
*El estudiante describir en su informe las reas, cada equipo que conforma la misma,
protocolos utilizados en la presente practica en lo que se refiere al reconocimiento del
rea de anatoma patolgica.
ANEXOS

En esta imagen podemos observar la

adecuada forma de ponernos las barreras que
nos protegern de un accidente

En esta imagen tenemos

lo que es la clasificacin
de los desechos

En esta imagen se
observa la maquina de
inclusin de parafina

En esta imagen se
observa el micrtomo
para el corte de tejidos

CONCLUCIONES.
Se identific cada rea que existe en el rea de anatoma patolgica y que as tengamos
ideas claras de ubicaciones para poder realizar los diferentes tipos de procesamientos
de tejidos.
Una vez que se presente las respectivas indicaciones sobre la distribucin del rea de
anatoma patolgica tambin es necesario recalcar en que parte se ubican los equipos y
los materiales que vamos a ocupar en esta rea as como tambin las distintas clases de
desechos es decir la clasificacin de estos, y, las normas de bioseguridad que debemos
aplicar en esta rea para as no ocasionar algn accidente

RECOMENDACIONES

Se recomienda el uso de las barreras protectoras para el personal que este en el rea de
anatoma patolgica.
Se recomienda la aplicacin de las normas de bioseguridad, para no ocasionar
accidentes
Tambin se recomienda al encargado del grupo del laboratorio encender unas 5 horas
antes de la prctica el equipo de inclusin de parafina

SITIOS WEB.
1. yusse. monografias. [En lnea] [Citado el: 02 de 11 de 02//11/15.]
http://www.monografias.com/trabajos11/intecnic/intecnic.shtml.
2. atlas de histologia . [En lnea] [Citado el: 02 de 11 de 02/11/2015.]
http://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/2-metodos-fijacion.php.
3. [En lnea] [Citado el: 02 de 11 de 02/11/2015.]
http://www.euita.upv.es/varios/biologia/tecnicas_de_histologia_vegetal/Docu
mentos/Inclusion_p.htm.
4. mongrafias. [En lnea] [Citado el: 02 de 11 de 2015.]
http://www.monografias.com/trabajos11/intecnic/intecnic2.shtml#seccionoc
a.
5. wikibooks. [En lnea] [Citado el: 02 de 11 de 2015.]
https://es.wikibooks.org/wiki/Histolog%C3%ADa/Preparaci
%C3%B3n_de_cortes_histol%C3%B3gicos.