1.Saber em que consiste a diviso celular, incluindo a cariocinese e a citocinese.

A diviso celular consiste em dois processos consecutivos: mitose e citocinese. A

mitose origina dois ncleos geneticamente idnticos, enquanto a citocinese separa o
citoplasma, colocando os ncleos-filhos em clulas separadas.
As clulas que se dividem activamente passam por uma sequncia definida de
acontecimentos, que se designa ciclo celular. O ciclo celular divide-se em interfase e
mitose.
A interfase, ou seja, a fase entre duas divises mitticas pode ser subdividida em trs
partes:

Fase G1 - a designao desta etapa deriva de gap = intervalo, e decorre

imediatamente aps a mitose. um perodo de intensa actividade bioqumica,
no qual a clula cresce em volume e o nmero de organitos aumenta. Para que
a clula passe para a fase seguinte do ciclo necessrio que atinja um ponto
crtico designado ponto de restrio, momento em que se do mudanas
internas;

Fase S - esta a fase de sntese de DNA. Cada cromossoma duplicado,

passando a ser formado por dois cromatdeos. Nesta etapa numerosas protenas
so igualmente sintetizadas;

Fase G2 - esta fase conduz directamente mitose e permite formar estruturas,

como as fibras do fuso acromtico.

Mitose
A mitose um processo contnuo considerando-se, quatro etapas: Prfase, Metfase,
Anfase e Telfase. No decorrer destas etapas, o material gentico sintetizado na fase
S do ciclo celular dividido igualmente por dois ncleos filhos.
A mitose iniciada apenas em presena de um factor promotor da mitose (MPF), que
provoca a condensao dos cromossomas. As variaes de concentrao de MPF
esto relacionadas com as variaes de uma outra protena conhecida por ciclina.
Aparentemente, quando a ciclina atinge uma certa concentrao no citoplasma, o
MPF activado. Durante a mitose a ciclina rapidamente destruda, aumentando
novamente durante o ciclo seguinte.
Um dos primeiros sinais do prximo incio da mitose o surgimento de uma faixa
relativamente densa de microtbulos logo abaixo da membrana citoplasmtica. Esta
faixa envolve o ncleo num plano que corresponder ao plano equatorial do fuso
acromtico mittico. Esta faixa desaparece aps a formao do fuso acromtico mas
corresponder ao local onde se forma a separao entre as duas clulas filhas.
As etapas da mitose, decorrem da seguinte forma:
Prfase - Durante esta etapa, a mais longa de todo o processo mittico, a cromatina
condensa-se gradualmente em cromossomas bem definidos. Durante este processo
visvel que cada cromossoma compostos por dois cromatdeos enrolados um no
outro, pois o DNA foi duplicado durante a fase S. No final da Prfase os cromatdeos
esto visveis lado a lado, unidos pelo centrmero, uma sequncia especfica de DNA
que ligar a molcula s fibras do fuso acromtico. A presena do centrmero divide
cada cromatdeo em dois braos. durante esta fase que surge em volta do ncleo a
chamada zona clara, que contm os microtbulos. Estes inicialmente esto orientados
ao acaso mas no fim da etapa esto alinhados paralelamente superfcie do ncleo,
ao longo do eixo do fuso acromtico. No final da etapa, o invlucro nuclear
desaparece;
Metfase - esta etapa inicia-se com a formao do fuso acromtico, que ocupa a rea
anteriormente ocupada pelo ncleo. As fibras do fuso so feixes de microtbulos e
vo-se ligar a complexos proteicos especializados - cinetcoros - desenvolvidos nos
centrmeros durante a Prfase. Estes microtbulos do cinetcoros estendem-se,
juntamente com os microtbulos polares, para os plos da clula. Atravs deles vai
ocorrer o alinhamento dos cromossomas no centro do fuso, formando a placa
equatorial. Nesta situao os cromatdeos esto em posio de se separarem. O
alinhamento das fibras do fuso acromtico ocorre a partir dos centros de organizao
dos microtbulos.
Anfase - esta etapa, muito breve, comea bruscamente, com a separao simultnea
de todos os cromatdeos pelos centrmeros. Cada cromatdeo toma agora para si a
designao de cromossoma. medida que os cinetcoros se deslocam em direco a
plos opostos os braos dos cromossomas so arrastados, sendo as pontas dos braos
mais longos as ltimas a serem separadas. Este movimento em direco aos plos
parece dever-se ao encurtamento dos microtbulos junto ao cinetcoro, como se este

"comesse" o caminho ao longo das fibras. No final da Anfase dois conjuntos idnticos
de cromossomas encontram-se em cada plo;
Telfase - nesta etapa final da mitose, a separao dos dois conjuntos de
cromossomas finalizada pela formao da membrana nuclear, a partir de retculo
endoplasmtico rugoso. O fuso acromtico desaparece e os cromossomas relaxam
novamente, tornando-se indistintos. O nuclolo reconstitudo e cada ncleo entra na
interfase.
A citocinese um processo que se sobrepe mitose e corresponde diviso do
citoplasma. Na maioria das clulas decorre por invaginao da parede celular (se
presente) e pela constrio da membrana citoplasmtica. No entanto, em clulas
vegetais a separao ocorre atravs da formao do fragmoplasto. Esta estrutura
um sistema de fibras semelhantes s do fuso, formadas por microtbulos mas
organizados perpendicularmente ao eixo do fuso.
Diviso do ncleo (cariocinese)
Diviso do citoplasma (citocinese)

2. Distinguir a diviso celular e a replicao do DNA nos procariontes e nos

eucariontes
As clulas procariticas dividem-se por bipartio ou gemulao,
ocorre imediatamente a seguir replicao do ADN, enquanto as eucariticas seguem
um processo de diviso do ncleo, chamada mitose, seguida pela diviso
da membrana e do citoplasma chamado citocinese.

Replicao nos procariontes

Mecanismo de replicao do DNA

O DNA sintetizado na direco 5 - 3 e utiliza como molde uma cadeia de DNA

preexistente
A enzima helicase separa as duas cadeias de DNA, quebrando as ligaes de H
entre as bases azotadas
A enzima topoisomerase tambm actua neste processo, pois alivia a tenso de
toro provocada pelo desenrolar das cadeias atravs de cortes das ligaes
fosfodister
Quando as cadeias se abrem, forma-se uma bolha de replicao que vai
aumentando medida que as cadeias se separam e forma-se uma estrutura em
forma de Y (forquilha de replicao) em que os braos so as cadeias j
separadas e o tronco a dupla hlice que vai ser separada
Cada bolha tendo duas forquilhas, a partir de uma origem comum, avanam em
direces opostas (bidireccional). As forquilhas desaparecem quando se
separam os ltimos nucletidos do DNA

A sntese do DNA inicia-se a partir de vrias origens de replicao (estas origens

formam-se quando se separam as cadeias de DNA e so constitudas por
sequncias repetitivas que so reconhecidas por protenas)
As cadeias de DNA sendo antiparalelas criam dificuldade para a sntese de
novas cadeias porque medida que se separam, uma progride no sentido 5 - 3
e a outra no sentido 3 - 5 (replicao assimtrica)
A cadeia-filha que adopta como molde a cadeia progenitora que corre na
direco 3 - 5 construda ao crescer na direco 5 - 3, de forma contnua
atravs da agregao de nucleotdeos na extremidade 3, medida que avana
a forquilha de replicao (cadeia avanada)
A outra cadeia-filha cujo molde a cadeia progenitora que corre na direco 53 sintetizada na direco oposta ao avano da forquilha de replicao de
forma descontnua, o que implica que a nova cadeia seja construda em
pequenos segmentos fragmentos de Okazaki que se ligam entre si, medida
que so produzidos (cadeia atrasada)
A cadeia de DNA sintetizada de forma contnua comea a replicar-se a partir de
um primer (RNA iniciador). O RNA iniciador produzido pela enzima DNA
primase. O primer tem como funo permitir a ligao da DNA polimerase
cadeia inicial do DNA, para que esta continue a sntese da cadeia-filha na
direco 5-3, pois nenhuma DNA polimerase capaz de iniciar a sntese de
uma nova cadeia
A cadeia descontnua necessita de vrios primers, um para cada fragmento de
Okazaki. O processo de juno de dois fragmentos de Okazaki implica a
remoo do RNA iniciador por uma nuclease reparadora. Os dois fragmentos de
DNA so finalmente ligados um ao outro pela DNA ligase.
A replicao est concluda quando os replices (DNA que sintetizado a partir
de uma origem de replicao) se ligam entre si
Replicao das extremidades dos cromossomas: As extremidades 3 (ricas em
guanina) dos cromossomas so mais compridas do que as extremidades 5. A
extremidade 3est ligada a protenas que reconhecem as guaninas,
estabilizando as extremidades dos cromossomas e impedem a sua degradao.
A enzima telomerase adiciona extremidade 3 de cada cromossoma
sequncias repetitivas (sequncias telomricas).

O mecanismo de replicao, embora comum a todos os organismos, sejam eles

eucariontes ou procariontes, apresenta grandes diferenas no processo. Nos
procariontes, a replicao inicia-se num nico ponto da cadeia polinucleotdica e
prossegue at terminar, porque nestes organismos apenas existe uma molcula de
DNA e o seu comprimento muito menor que o do DNA eucarionte.
Nas clulas eucariontes a replicao do DNA ocorre, em simultneo, em mltiplos
locais especficos da cromatina (origens de replicao, so sequncias ricas em A-T),
catalisada pelas polimerases do DNA. A molcula de DNA, comea a desenrolar por
aco das enzimas topoisomerases e das helicases, e a desnaturar ao nvel das
origens de replicao. Para as polimerases do DNA iniciarem a condensao dos
nucletidos necessria a sntese de um pequeno fragmento de RNA (primer)
catalisada por uma polimerase do RNA especfica, a primase.
A polimerizao das novas cadeias de DNA ocorre de forma bidireccional, a partir de
cada origem de replicao, formando-se a forquilha de que se deslocam em direces
opostas. Em cada brao da forquilha de replicao a polimerizao ocorre no sentido
5 3, na cadeia lder de forma contnua e na cadeia atrasada de forma descontnua,
com a formao de fragmentos, os fragmentos de Okazaki, a partir de iniciadores
de RNA. Posteriormente, os segmentos de iniciadores de RNA so removidos e uma
polimerase do DNA sintetiza em seguida DNA que preenche as regies inicialmente
ocupadas pelos iniciadores. A continuidade das cadeias recm sintetizadas
assegurada por uma ligase do DNA que catalisa a formao de ligaes fosfodister
entre os vrios fragmentos.

3. Saber em que consiste o centrmero e o cinetcoro dos cromossomas de

eucariontes, e qual o seu papel na diviso celular.

Centrmeros - regio especializada do cromossoma que assegura a distribuio

correcta dos cromossomas duplicados durante a mitose, onde se ligam os
microtbulos do fuso acromtico e garantem que os cromatdeos esto unidos.Os
centrmeros so compostos por sequencias repetitivas e outras no repetitivas, nos
seres humanos composto por DNA satlites e protenas associadas.
Cinetcoro zona especializada no cromossoma capaz de formar o centrmero; uma
placa proteica

4. Saber distinguir as diferentes etapas do ciclo celular

5.

Explicar
porque
motivo a

replicao orientada no sentido (5->3)

As polimerases do DNA atuam adicionando um nucleotdeo por vez na extremidade 3
-OH livre de uma cadeia polinucleotdica em formao, que se encontre emparelhada
com a cadeia molde. Por isso dizemos que a sntese de DNA ocorre no sentido 5-> 3
.
Ocorre no sentido 5 => 3 e entendemos o porqu de ocorrer nesse sentido, visto o
alto indce de mutao que poderia ocorrer caso fosse no sentido contrrio.
6. Distino entre cadeia atrasada e cadeia avanada.
Cadeia atrasada: cadeia que cresce descontinuamente na direco oposta do
movimento da forquilha de replicao.
Cadeia lder : cadeia que cresce continuamente do seu terminal 5 para 3. A direco
da sntese a mesma do movimento da forquilha de replicao.

7. Entender o papel dos vrios componentes envolvidos na replicao: helicase,

topoisomerases, primases, DNA polimerases, protenas SSB, ligase, PCNA
Helicase - uma enzima que promove a abertura da hlice de DNA, separando-o em
duas fitas simples para que possa sofrer replicao. A helicase quebra as ligaes de
hidrognio entre as bases azotadas de ambas as cadeias de DNA.
Topoisomerases - so enzimas que resolvem os problemas topolgicos das clulas,
associando-se ao DNA durante a replicao, transcrio, recombinao e
remodelagem da cromatina, pela introduo de uma quebra temporria em ambas as
fitas (Topoisomerase 2) ou numa nica fita (Topoisomerase 1) da hlice dupla do DNA,
tanto em eucariontes quanto em procariontes.
Primase : a primase faz parte de um agregado de protenas chamado primossoma.
Esta enzima sintetiza pequenos primers que vo fornecer o terminal 3 OH necessrio
para a DNA polimerase iniciar a sntese da cadeia atrasada. Este primer de RNA ser
mais tarde removido pela DNA polimerase I.
DNA polimerase : enzima que catalisa a formao de cadeias de DNA usando as
cadeias separadas como molde. Actuam no terminal 3 da cadeia molde e s replicam
na direco 5-3. Esta enzima pode tambm corrigir erros de replicao. Se foi
introduzido um nucletido errado, a DNA polimerase reconhece-o e retorna a esse
ponto hidrolisando o nucletido errado a partir da extremidade 3.
Protenas (SSB) : so protenas que se ligam s cadeias molde separadas pela DNA
Helicase, impedindo que estas se voltem a ligar, mantendo a estabilidade da forquilha
de replicao.
DNA ligase : a enzima que une os fragmentos de Okasaki para completar a cadeia
atrasada.
Helicase: Rompe as pontes de Hidrognio para abrir as fitas e permitir que a
DNA polimerase aja.
Topoisomerase: Auxilia a helicase aliviando a presso dentro da forquilha de
replicao.
DNA Polimerase: participa da formao, reviso e correo da ligao
fosfodiester, acrescentando os nucleotdeos.
Ligase: Une os fragmentos de Okasaki aps a retirada dos primers.
Primases: Responsvel pela formao dos Primers (iniciadores).
Fita lder: copiada de forma contnua sempre no sentido 5-3.
Fita atrasada: copiada e forma descontnua. Gera os fragmentos de Okasaki
que so unidos depois pela ligase.
Primers: Pequena sequncia de RNA que se liga origem de replicao
iniciando a replicao. Os primers so construdos pela primase.

8. Entender porque motivo a sntese de DNA recorre a um primer, ou fragmento

iniciador, de RNA ou DNA.
Para a actuao das DNA polimerases necessria a sntese de um pequeno
fragmento de RNA (designado por iniciador, primer) catalisada por uma RNA
polimerase especfica (primase, uma subunidade da DNA polimerase a).

9. Conhecer o significado dos seguintes termos: forquilha de replicao, origem de

replicao, replico, ORI, fragmentos de Okasaki, cadeias atrasada e adiantada,
telomerase.
Forquilhas de replicao-as terminaes, onde as fitas de DNA so separadas e
replicadas.
Origens de replicao-so regies especficas na
sequncia nucleotdica de molculas de DNA, nas quais determinadas protenas se
ligam para abrir a dupla hlice deste cido nuclico, permitindo o incio
da biossntese de novas molculas de DNA.
Replico uma parte do DNA, ou seja, uma regio do DNA que se duplica como uma
unidade individual.

10. Reconhecer ainda o problema da replicao dos telmeros em cromossomas

lineares, e a forma como as clulas eucariontes resolvem esse problema.

Os telmeros so estruturas constitudas por fileiras repetitivas de

protenas e DNA no codificante que formam as extremidades dos cromossomas. Sua
principal funo manter a estabilidade estrutural do cromossoma. Os telmeros
esto presentes principalmente em clulas eucariticas, visto que o DNA das clulas
procariticas forma cadeias circulares, logo no tem locais de terminao.
Cada vez que a clula se divide, os telmeros so ligeiramente encurtados. Como
estes no se regeneram, chega a um ponto em que no permitem mais a correcta
replicao dos cromossomas e a clula perde completa ou parcialmente a sua
capacidade de diviso. O encurtamento dos telmeros tambm pode eliminar
certos genes que so indispensveis sobrevivncia da clula. Como o processo de
renovao celular no tolera a morte das clulas antes da diviso correcta das
mesmas, o organismo tende a morrer num curto prazo de tempo no momento em que
seus telmeros se esgotam.

O controlo do ciclo celular. Ciclinas e enzimas cinases: papel na regulao do ciclo.

11. Papel das ciclinas e cinases

12. Reconhecer a existncia de diferentes checkpoints ou pontos de controlo no

ciclo, e o que controlam

13. Dever conhecer o significado dos seguintes termos: S, G1, G2, G0, M, MPF,
ciclina,
cinase, fosfatase.
G1 - (Sntese proteica), primeiro intervalo
S (sntese de DNA)
G2 (segundo intervalo) (Duplicao dos centrolos)
G0 (Repouso)
M (mitose)
MPF complexo formado por uma CDK (cinase dependente das ciclinas) e por uma
ciclina que intervm na mitose e na meiose.
Cinase um tipo de enzima que transfere grupos fosfatos de molculas doadoras de
alta energia para molculas-alvo especficas.
Fosfatase, faz exatamente a reao inversa das cinases, ela remove um grupo fosfato,
ou seja, faz a desfosforilao
Expresso gnica em eucariontes e procariontes. Diferenas. Transcrio e traduo.
Transcrio: Complexo RNA polimerase; Promotores e factores de transcrio;
Maturao do mRNA em eucariontes. Traduo: Cdigo gentico. Ribossomas e tRNA.
Noo de aminocido e tipos de aminocidos. Estrutura tridimensional das protenas,
estrutura primria, secundria, terciria e quaternria das protenas.

14. Porque motivo as protenas so a nica espcie qumica codificada pelos genes?
Os genes so unidades hereditrias constituintes de DNA e que possuem as
informaes para a sntese de protenas.
15. Porque motivo a sequncia de aminocidos codificados vo trazer caractersticas
to diferentes s diferentes protenas?

Deve-se ao facto de o cdigo gentico ser redundante, isto , codes diferentes

codificam o mesmo aminocido.
16. A relao entre o cdigo gentico e a estrutura primria das protenas
O Cdigo Gentico a relao entre a sequncia de bases do DNA e a sequncia
correspondente de aminocidos, ou seja, a cada tripleto de nucletidos de DNA
corresponde um aminocido especfico. Assim, no cdigo gentico que est toda a
informao para determinar a sequncia de aminocidos a ser codificada atravs do
encadeamento de nucletidos, constituindo assim a estrutura primria das protenas.

17. Que tipos de aminocidos existem, e o que os distingue

Aminocidos essenciais/indispensveis - aqueles que o nosso organismo
no consegue sintetizar, logo a nica forma de obteno so atravs da
ingesto de determinados alimentos;
Aminocidos no essenciais/dispensveis - so aqueles que o nosso
organismo consegue sintetizar.
18. Como se processa a transcrio, tanto nos procariontes como nos eucariontes,
reconhecendo as suas diferenas
A cadeia de DNA separada atravs de uma enzima que promove a quebra das
pontes de hidrognio. Quando as hlices esto separadas, uma enzima chamada RNA
polimerase une-se a uma das extremidades da fita, pois apenas uma fita copiada, e
segue pela cadeia, formando os pares: A-U e C-G. Essa extremidade especfica e
possui uma sequncia chamada de promotor. A polimerase do RNA segue pela
extenso da cadeia, transcrevendo o DNA em RNA at encontrar a sequncia de
terminalizao, que contm bases especficas que determinam o fim da transcrio.
Ao trmino do processo, a molcula de RNA se desprende e as fitas de DNA voltam a
se unir.
A transcrio em eucariontes bem mais complexa que em procariontes. Nos
eucariontes a transcrio ocorre no ncleo. J nos procariontes ocorre no espao
espalhado. Outra diferena que o transcrito primrio de mRNA dos eucariontes, ao
contrrio dos procariontes, amplamente processado. O RNA nascente sofre uma
srie de alteraes: aquisio de revestimento na sua extremidade 5, cauda poli-A na
extremidade 3 e remoo exata de intres (splicing) para a formao de mRNAs
maduros com mensagens contnuas.

19. Saber o que so promotores e factores de transcrio.

Os promotores so os stios que a RNA polimerase reconhece para estabelecer a

ligao com o DNA, mas para que essa enzima identifique a regio promotora
necessrio que um fator de transcrio (ou alguns, dependendo do gene) esteja
ligado aos elementos da regio promotora.
Os fatores de transcrio so protenas que contm pelo menos dois
domnios funcionais: um de ligao com o DNA e outro de ligao com a RNA
polimerase. Essas protenas controlam, quando, onde e como os gene sero
transcritos, sendo a base para o controle da expresso gnica.

20. Como se d e em que consiste a maturao de mRNA nos eucariontes.

O processo de maturao que sofre o mRNA dos eucariontes caracteriza-se pela
remoo de sequncias nucleotdicas no codificveis (intres) da molcula de RNA
transcrita a partir do DNA, ficando apenas constitudo por exes.

21. Como se d a traduo, que componentes esto envolvidos, qual o seu papel, e
como reconhecido o incio e o fim da traduo.

A traduo ocorre em trs etapas (iniciao, alongamento e terminao), nas quais a

informao presente no mRNA e organizada em codes, reconhecida pelos
anticodes presentes nos tRNAs que transportam os resduos de aminocidos. Cada
codo do mRNA e o respectivo aminocido so incapazes de se reconhecer
mutuamente, sendo necessrio um adaptador que possibilite esse reconhecimento.
Esta funo de adaptador ento executada por molculas de tRNA que servem de
ponte entre os aminocidos e o mRNA, de forma a ser permitida a traduo da
informao codificada no mRNA, em protena nos ribossomas.

O processo de sntese proteica iniciado em geral pelo codo AUG (codo de

iniciao).
A traduo iniciada com a formao de um complexo de iniciao ao nvel do codo
de iniciao (AUG), que consiste na cadeia de mRNA, num tRNA com o anticodo
complementar (UAC) e carregado com o primeiro aminocido, ligados numa sequncia
de reconhecimento especfica do mRNA.

Aps a formao do complexo de iniciao d-se a ligao da subunidade ribossomal

a este complexo e iniciada a etapa de alongamento da cadeia peptdica. Nesta
altura os factores de incio desligam-se e o ribossoma est pronto a receber o
segundo tRNA e a formar a primeira ligao peptidica catalizada.
As duas subunidades do ribossoma contm 3 locais adjacentes para a associao s
molculas de tRNA. No decorrer do processo, as molculas de tRNA ligam-se numa
primeira fase ao local A, sendo depois deslocadas para o local P e finalmente para o
local E.

A elongao tem incio quando o anticodo encontra o local A, complementar do

codo do mRNA existente nesta posio. Este processo dependente de GTP e de
determinados factores de elongao. Simultaneamente, o primeiro t-RNA deslocado
para o local P ficando o peptidil-tRNA na posio A. Seguidamente, o ribossoma
desloca-se uma distncia equivalente a um tripleto, em relao ao mRNA, o que
expe o codo seguinte e permite a aceitao de um novo aminoacil-tRNA no local A.
A terminao da sntese da cadeia peptdica ocorre quando, ao nvel do local A, surge
um dos codes de terminao (UAA, UAG e UGA). Para cada um dos referidos 3
codos no existe correspondncia para nenhum dos aminocidos e a sntese proteica
bloqueada.

22. Conhecer os seguintes termos.

Ligao peptdica - ligao de vrios aminocidos
TATA box- principal promotor dos eucariontes e encontra-se na extremidade 5; onde
se inicia a transcrio; so bases de timina e adenina
TBP- factor de transcrio que se liga especificamente a uma sequncia de DNA
Sequncias de consenso - sequncia formada apenas por timinas e adeninas
Factores de transcrio - protenas onde a RNA polimerase se liga para iniciar a
transcrio
Spliceosoma- estruturas constitudas por protenas e RNA capaz de partir o DNA em
pedaos
Intres- sequncias nucleotdicas no codificveis (regio UTR)
Exes- sequncias nucleotdicas codificveis
Subunidades ribossomais - estruturas utilizadas na sntese proteica
Cadeia sense- cadeia de DNA que no utilizada como molde
Cadeia anti-sense- cadeia de DNA utilizada como molde para a produo de mRNA
Codo- sequncia de 3 nucletidos de mRNA que codifica um aminocido especfico
Anticodo- sequncia de 3 nucletidos de tRNA complementar ao codo
ORF/quadro de leitura - sequncia de nucletidos de uma molcula de DNA que
tem potencial para codificar uma protena.